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Relationship between respiration and Electron Transfer System (ETS) in zooplankton

Abstract

Respiration of zooplanktonic organisms is an significant fraction of the global carbon cycle. However, it estimation in order to obtain the data required in oceanography is still a problem. In this work, we studied respiration rates in laboratory and field experiments. Laboratory experiments using Daphnia spp. showed a significant decrease of respiration rates during starvation. In addition, we measured the gut fluorescence and enzymatic activity (electron transfer system, ETS). The former did not show the expected decrease probably due to the volume of the incubators. The relationship between respiration and ETS presented the classical variability ranging between 0.5 and 1 as observed in previous works. Copepod respiration rates were measured during RAPROCAN 1504 cruise around the Canary Islands.

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Relationship between respiration and Electron Transfer System (ETS) in zooplankton

Author: López López, Amelia Iguanira
Year: 2016
Source: https://accedacris.ulpgc.es/jspui/bitstream/10553/16841/4/0720036_00000_0000%20%281%29.pdf
Rela ionship be ween Respi a ion and
Elec on T ans e Sys em (ETS) in
zooplank on
Rela ionship be ween Respi a ion and
Elec on T anspo Sys em (ETS) in
zooplank on
Alumna
Amelia Iguani a López López
Cu so 2014/2015
Tu o
San iago He nández León
T abajo de Fin de G ado pa a ob ene el í ulo de
G aduada en Ciencias del Ma
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
1
Facul ad de Ciencias del Ma
T abajo de Fin de Tí ulo
G ado en Ciencias del Ma
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS)
in zooplank on
Es e abajo se p esen a po la alumna Amelia Iguani a López López pa a la
ob ención del í ulo de G aduada en Ciencias del Ma po la Uni e sidad de Las Palmas
de G an Cana ia, y es di igido po el D D. San iago He nández León del Ins i u o de
Oceanog a ía y Cambio Global (IOCAG).
Uni e sidad de Las Palmas de G an Cana ia
En Las Palmas a 30 de No iemb e de 2015
La alumna
Fdo.: Amelia Iguani a López López
El Di ec o
Fdo.:
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
2
Index
Abs ac
3
In oduc ion
4
Ma e ial and Me hods
5
Resul s
7
Discussion
8
Conclusions
10
Acknowledgmen s
10
Re e ences
11
Pe sonal assessmen s
22
Tables Index
I: A e age o alues o espi a ion, ETS, R/ETS, and GF.
14
II: Expe imen al condi ions, including da e, densi y o ood, empe a u e o
acclima ion and incuba ion.
15
III: The espi a ion a es ob ained by o he au ho s and ou ange o espi a ion
a es es ima ed in his s udy o compa ison.
16
IV: A e age alues o espi a ion a es and GF o expe imen s pe o med wi h
copepods.
17
Figu es Index
1: Time-cou se o gu luo escence (ng pigmen s·ind-1) and s anda d e o o he
di e en expe imen s.
18
2: Time-cou se o espi a ion a es (µlO2·ind-1·h-1) and ETS ac i i y (µlO2·ind-1·h-1)
o each expe imen .
19
3: Time-cou se o he espi a ion/ETS a io and s anda d e o o he di e en
expe imen s.
20
4: Oxygen consump ion and gu luo escence o copepods in he 100-200 µm (A
and C) and 500-1000 µm (B and D) size ac ions
21
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
3
Abs ac
Respi a ion o zooplank onic o ganisms is an signi ican ac ion o he global ca bon
cycle. Howe e , i es ima ion in o de o ob ain he da a equi ed in oceanog aphy is
s ill a p oblem. In his wo k, we s udied espi a ion a es in labo a o y and ield
expe imen s. Labo a o y expe imen s using Daphnia spp. showed a signi ican dec ease
o espi a ion a es du ing s a a ion. In addi ion, we measu ed he gu luo escence and
enzyma ic ac i i y (elec on ans e sys em, ETS). The o me did no show he
expec ed dec ease p obably due o he olume o he incuba o s. The ela ionship
be ween espi a ion and ETS p esen ed he classical a iabili y anging be ween 0.5 and
1 as obse ed in p e ious wo ks. Copepod espi a ion a es we e measu ed du ing
RAPROCAN 1504 c uise a ound he Cana y Islands. These o ganisms showed a high
a iabili y in oxygen consump ion du ing incuba ion. Ou s udy sugges s ha du a ion
expe imen s o calib a e enzyme ac i i ies o ob ain physiological a es should be
conside ed. We sugges he use o expe imen s co e ing he me abolic scope o
o ganisms unde s udy. Taking his in o conside a ion, ou alues o he ela ionship
be ween espi a ion and ETS ac i i y is close o a alue o 1. Lowe a ios could
unde es ima e espi a ion in he ocean.
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
4
In oduc ion
The ocean plays an impo an ole in he global ca bon cycle. A mosphe ic ca bon
dioxide en e s in o he na u al cycle o oceans and emains he e o a a iable pe iod o
ime. The pho osyn he ic o ganisms s a he biological pump cap u ing he ca bon
dioxide and p oducing o ganic ma e and oxygen. This mechanism anspo ca bon
dioxide om he ocean su ace o he deep laye s. He e o ophic o ganisms, o
consume s, ake he o ganic ma e om o he o ganisms and use i as uel o hei
me abolism. These o ganisms espi e he me abolized ca bon and e u n ca bon dioxide
o he en i onmen .
Unde s anding he mechanisms linked o espi a ion in he ocean a e a undamen al s ep
o s udy he ca bon lux h ough he di e en communi ies. The e o e, he knowledge o
oxygen consump ion is essen ial o he s udy o he in ol ed p ocesses in p oduc ion
and ene gy ans e in he ocean due o he di e en componen s o ma ine ecosys ems.
The me hods used o es ima e espi a ion in he e o ophic o ganisms, specially in
zooplank onic o ganisms, a e based on he measu emen o oxygen consump ion. The
balance me hod (Omo i and Ikeda, 1984) is no mally used and consis in he incuba ion
o zooplank onic o ganisms in glass bo les illed wi h il e ed seawa e o se e al
hou s. Du ing incuba ion, dissol ed oxygen in expe imen al bo les (wi h o ganisms)
dec eases espec o con ol bo les (wi hou o ganisms). The di e ence be ween bo h is
he o ganisms espi a ion. This echnique needs an in ensi e wo k on boa d
oceanog aphic essels and consume ime, limi ing he numbe o es ima ions. Because
o his, Cu l and Sandbe g (1961) and Packa d (1969) p oposed he measu emen o he
enzyma ic ac i i ies esponsible o cellula espi a ion as an index o be used in
oceanog aphy.
The measu emen o he elec on ans e sys em ac i i y (ETS) was de eloped by
Packa d (1975) and i is also ou inely used in oceanog aphy. The ETS is he las
enzyma ic complex which akes pa in he p oduc ion o ATP and uses he oxygen as
he las elec on accep o . Howe e , he ela ionship be ween espi a ion and ETS
p esen s an impo an a iabili y. He nández-León and Gómez (1996) obse ed ha he

Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
5
ela ionship be ween espi a ion and ETS ac i i y p esen ed he classic a iabili y
be ween 0.5 and 1 ela ed o he p e ious eeding his o y. These au ho s also ound ha
du ing he win e bloom ( ela i ely high p ima y p oduc ion) he R/ETS a io was
a ound 1, while ou o he bloom, in a mo e oligo ophic si ua ion, he alues we e nea
0.5. Besides, his a iabili y could also be explained because o he me hology used o
assess espi a ion a es using he classical balance me hod and he enzyma ic esponse a
di e en ime in e als. Long o sho incuba ions could modi y his a io as ETS
ac i i y is mo e conse a i e han espi a ion.
In he p esen wo k, we s udied espi a ion in he cladoce an Daphnia spp. and
copepods, i s ela ionship wi h he gu luo escence (GF) and he enzyma ic ac i i y o
he ETS. The main goal was o s udy he a iabili y in espi a ion a e and he enzyme
ac i i y in expe imen s o sho du a ion (8 hou s). Speci ically, we ocused in he
ela ionship be ween high espi a ion a es du ing he i s hou s o incuba ion and i s
enzyma ic esponse.
Ma e ial and me hods
Labo a o y expe imen s
The cladoce ans used o expe imen s we e incuba ed o 12 hou s in a beake o 2
li e s a a empe a u e o 17.8ºC ± 0.1 in sa u a ion o ood wi h he algae
Ankis odesmus. I s densi y was coun ed wi h a Thoma de ice in an in e ed
mic oscope, aking an aliquo o 10 µl o he same cul u e (Table I). A e he eeding
pe iod, 15 o ganisms we e ozen in liquid ni ogen in o de o ob ain he ime ze o in
each expe imen o enzyme ac i i y.
To measu e espi a ion, he o ganisms p e iously incuba ed in ood sa u a ion we e
incuba ed in il e ed wa e (0.2 µm) in ials o 5 ml equipped wi h op odes. Incuba ions
we e ca ied ou in iplica e o each incuba ion ime, in he da k, and a 18ºC. The
incuba ion las ed o app oxima ely 8 hou s. A di e en in e als, samples we e ozen
in liquid ni ogen o la e analysis o ETS and gu luo escence (GF). To ob ain he
alues o espi a ion we designed an applica ion using he s a is ical so wa e R. The
alues o he i s hal an hou we e disca ded as i is he ime equi ed o s abiliza ion
o oxygen inside he incuba o s. Then, he slopes o expe imen and con ol bo les we e
sub ac ed in o de o ob ain espi a ion e e y 0.5 h.
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
6
ETS analyses we e ca ied ou ollowing he me hod p oposed by Packa d (1971).
The homogena e was cen i uged a 4000 pm and 0ºC du ing 10 minu es. An aliquo o
he homogena e was used o he incuba ion a 18ºC, in da kness, in he p esence o
NADH, NADPH, succina e (SS) and INT as an a i icial elec on accep o . A e 20
minu es, he incuba ion was s opped by a quench solu ion. The ETS ac i i y was
es ima ed spec opho ome ically a 490 nm wi h a u bidi y base-line o 750 nm.
Biomass o each size ac ion was de e mined as p o ein con en using he me hod
o Low y e al. (1951) o he me hod o Pe e son (1983) o samples wi h e y low
p o ein con en and using bo ine se um albumine (BSA) as s anda ds.
Fo he measu emen o luo escence, we used he me hod p oposed by Nemo o
(1968) and Mack and Boh e (1976). An aliquo o he homogena e used o ETS
measu emen was in oduced in a es ube wi h 10 ml o 90% ace one and kep a -20ºC
du ing 24 hou s. Pigmen s we e measu ed using a Tu ne Design luo ome e ,
p e iously calib a ed wi h pu e chlo ophyll (Yen sch and Menzel, 1963), be o e and
a e acidi ica ion wi h 10% HCl. Pigmen s we e calcula ed using he equa ions gi en
by S ickland and Pa son (1972) sligh ly modi ied o:
Chlo ophyll a = k· (F0-Fa) · Indi idual-1
Pheopigmen s = k· (R· Fa-F0) · Indi idual-1
whe e k is he ins umen calib a ion cons an , F0 and Fa a e he luo escence eadings
be o e and a e acidi ica ion and R is he acidi ica ion coe icien . The o e all
concen a ion o pigmen s e e s o chlo ophyll a and pheopigmen s exp essed as ng
pigmen s·ind-1.
Field expe imen s
Copepods we e collec ed in six oceanog aphic s a ions on boa d he esea ch essel
“Ángeles Al a iño” a ound he Cana y Islands om 6 h o 16 h Ap il, 2015. Cap u e o
o ganisms was ca ied ou using a double WP-2 ne equipped wi h a 100 µm mesh ne ,
om 200 m dep h o he su ace a abou 40 m·minu e-1. Th ee expe imen s we e ca ied
ou wi h o ganisms o sizes be ween 100 and 200 µm and h ee o he wi h copepods
be ween 500 and 1000 µm. The o ganisms we e picked up wi h a Pas eu pipe e and
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
7
we e incuba ed o iplica e in he da k a 18ºC o a o al o 4 hou s on seawa e
il e ed h ough 0.2 µm.
To measu e espi a ion, was used a p ecision pola og aphic oxygen elec ode (VWR
DO210). Once expe imen s we e comple ed he di e ence be ween he oxygen con en
in he con ol and expe imen al bo les was measu ed in o de o ob ain he espi a ion
a e. These da a we e s anda dized o he p o ein weigh o incuba ed o ganisms.
Simila o he expe imen s ca ied ou in he labo a o y we g aphed he esul s using he
s a is ical p og am STATISTICA 7.
Resul s
Labo a o y expe imen s
Pigmen con en in he di e en expe imen s dec eased du ing incuba ion (Fig. 1).
Howe e , his dec ease was weak and a iable (see Fig. 1b and d), and, in gene al, we
did no obse e a clea dec ease as expec ed (Fig. 1 ).
By opposi e, espi a ion a es showed a signi ican dec ease du ing he i s ou
hou s o he expe imen . The ini ial oxygen consump ion anged be ween 0.9 and 1.4
µlO2·ind-1·h-1 dec easing in all expe imen s eaching alues o 0.27±0.01, µlO2·ind-1·h-1
a e 3-4 h (Table II, Fig. 2). The e o e, he ini ial espi a ion was be ween 3 and 5 imes
he s anda d a es ob ained a e ou hou s.
The elec on ans e sys em ac i i y (ETS) did no show high alues a he beginning
o he expe imen s as obse ed o espi a ion (Fig. 2). This ac i i y showed alues in
he ange 0.2-0.5 µl·O2·ind-1·h-1, being he a e age in he o de o 0.36±0.04 (see Table
II)
As expec ed om espi a ion alues, he a io R/ETS showed a clea decline om he
beginning o incuba ion s abilizing a e he i s ou hou s (Fig. 3). The alues o he
a io dec eased o an a e age alue o 0.29±0.05 (see able II) a e he i s ou hou s
o incuba ion.
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
8
Field expe imen s
Small o ganisms (100-200 µm) showed ela i ely high alues o gu pigmen con en
(mean alue o 197.2±106.2 ng pigmen s/mg p o ein, able III, Fig. 4a), while la ge
copepods (500-1000 µm) showed lowe a e age alues (93.9±38.1 ng pigmen s/mg o
p o ein, able III, Fig. 4b). Small o ganisms showed a high a iabili y in he gu con en
du ing incuba ion. Howe e , he 500-1000 µm o ganisms showed an unexpec ed
inc ease. (Fig. 4).
Respi a ion in bo h size classes showed a dec easing espi a ion du ing incuba ion as
expec ed. A e age alues o he 100-200 µm ac ion was 0.58±0.28 µlO2·mg
p o ein·h-1 ( able III, Fig. 4C), while o he la ge animals (500-1000 µm) was lowe as
also expec ed (0.31±0.06 µlO2·mg p o ein·h-1, able III, Fig. 4d).
Discussion
Respi a ion a es in ou expe imen s wi h cladoce ans dec eased du ing incuba ion
simila o o he s udies (Ni al e al., 1974; Mayzaud, 1976; Skjoldal e al., 1984; Blažka
e al., 1982; Abou, 1984; Ikeda, 1977; Tsuda, 1994; Tho , 2003). In he ield
expe imen s, copepods did no show his p onounced dec ease p obably due o he ac
ha hey we e no p e iously acclima ed in ood sa u a ion. The esul s in cladoce ans is
in ag eemen wi h au ho s who a gue ha he dec ease in me abolic a es a e he s a
o incuba ion is due o ood sho age a he han s ess p oduced by he handling o
o ganisms (Ikeda, 1977; Ikeda and Skjoldal 1980).
Ou a e age espi a ion o all expe imen s wi h Daphnia o e 8 hou s (0.32 ± 0.39
µlO2·ind-1·h-1) ma ched he alues ound by Valenciano (2010). In he expe imen s,
s anda d me abolic a e was eached a e 3.5 hou s (mean alue 0-3.5 h: 0.41 ± 0.07
µlO2·ind-1·h-1). In ou s udy, his a e age alue was qui e simila (0.40 ± 0.10 µlO2·ind-
1·h-1). A e ou hou s un il he end o he expe imen s, espi a ion a e was 0.27 ± 0.01
µlO2·ind-1·h-1 ( able I), while Valenciano (2010) ob ained a a e o 0.29 ± 0.11
µlO2·ind-1·h-1. Fo copepods, we obse ed a high a iabili y in he espi a ion a es o
he six expe imen s (a e age o al alue o 0.44 ± 0.23 µlO2·mg p o ein-1·h-1).
Valenciano (2010) also ound a dec ease in espi a ion a es du ing one hou , al hough
he numbe o expe imen s pe o med by his au ho was qui e sho .
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
15
Table II. Expe imen al condi ions, including da e, densi y o ood (cell/ml), empe a u e o
acclima ion and incuba ion.
To al Resp
To al ETS
To al R/ETS
To al GF
Exp
Da e
ª
cells/ml
ª inc.
0-8 h
0-8 h
0-8 h
0-8 h
1
19/03/15
17.9
1.5·106
18
0.26 ± 0.35
0.31 ± 0.09
0.71 ± 0.71
120.61 ± 45.99
2
20/03/15
17.9
1.5·106
18
0.38 ± 0.46
0.33 ± 0.12
0.95 ± 1.22
131.54 ± 47.08
3
23/03/15
17.8
1.5·106
18
0.31 ± 0.36
0.34 ± 0.13
1.26 ± 2.17
5.97 ± 6.58
4
24/03/15
17.8
5·105
18
0.35 ± 0.44
0.37 ± 0.09
0.87 ± 1.17
254.54 ± 98.43
5
25/03/15
17.9
5·105
18
0.28 ± 0.34
0.41 ± 0.10
0.58 ± 0.72
104.41 ± 32.36
TOTAL EXPERIMENTS
0.32 ± 0.39
0.35 ± 0.04
0.87 ± 0.26
123.41 ± 88.63

Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
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Table III. Compa ison o espi a ion a es (µlO2·ind-1·h-1) ob ained by di e en au ho s in ela ion
o esul s ob ained in his s udy.
Re e ences
O ganisms
Respi a ion
a es
Uni s
Tempe a u e
Acclima ion
ime
Ikeda (1976)
Sub opical
copepods
0.46-2.12
µlO2 ind-1 h-1
22ºC
36 hou s
Ikeda (1977b)
Aca ia onsa
0.089-0.181
µlO2 ind-1 h-1
22ºC
None
Schmoke and
He nández-León
(2003)
Cladoce an (D.
Magna)
0.5-4
µlO2 ind-1 h-1
19ºC
24 hou s
Li e al. (2004)
Zooplank on
0.64-0.84
µlO2 ind-1 h-1
18-27ºC
None
P esen s udy
D. magna
0.2-1.3
µlO2 ind-1 h-1
17-18ºC
12 hou s
Copepods
0.27-0.78
µlO2 mg
p o ein h-1
17-18ºC
None
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
17
Table IV. A e age alues o espi a ion a es (µlO2·ind-1·h-1) and gu luo escence (ng
pigmen s·ind-1) o expe imen s pe o med wi h copepods
COPEPODS EXPERIMENTS
Respi a ion
GF
0-3 h
0-3 h
100 µm
1
0.69 ± 0.94
303.22 ± 386.74
2
0.26 ± 0.29
197.45 ± 105.29
3
0.78 ± 0.39
90.87 ± 109.99
TOTAL 100 µm
0.58 ± 0.28
197.18 ± 106.18
500 µm
4
0.27 ± 0.32
115.16 ± 150.94
5
0.38 ± 0.32
49.85 ± 61.26
6
0.27 ± 0.25
116.59 ± 108.91
TOTAL 500 µm
0.31 ± 0.06
93.87 ± 38.13
TOTAL EXPERIMENTS
0.44 ± 0.23
145.5 ± 91.1
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
18
Figu e 1. Time-cou se o gu luo escence (ng pigmen s·ind-1) and s anda d e o o he
di e en expe imen s. Figu e 1A co esponds o expe imen 1, B o expe imen 4, C o he
numbe 2, D o 5, E o 3, and F o 6.
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
19
Figu e 2. . Time-cou se o espi a ion a es (µlO2·ind-1·h-1) and ETS ac i i y (µlO2·ind-1·h-1) o
each expe imen . Figu e 2A co esponds o expe imen 1, B o expe imen 4, C o he numbe
2, D o 5, E o 3, and F o 6. Ve ical lines a e s anda d e o
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
20
Figu e 3. Time-cou se o he espi a ion/ETS a io and s anda d e o o he di e en
expe imen s. Figu e 3A co esponds o expe imen 1, B o expe imen 4, C o he numbe 2, D
o 5, E o 3, and F o 6.

Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
21
Figu e 4. Oxygen consump ion and gu luo escence o copepods in he 100-200 µm (A and C)
and 500-1000 µm (B and D) size ac ions
Rela ionship be ween Respi a ion and Elec on T ans e Sys em (ETS) in zooplank on
22
VALORACIÓN PERSONAL (PERSONAL ASSESSMENTS)
 Desc ipción de allada de las ac i idades desa olladas du an e la ealización
del TFT
Pa a pode aba ca sob e es e pun o, es necesa io des aca que el TFT se ealizó con
odos los da os que se ob u ie on de las dis in as p ác icas ealizadas an o en el
labo a o io como a bo do del buque oceanog á ico, BIO Ángeles Al a iño. Es os da os
ue on a ados de al o ma que son los esul ados de los que en es e es udio hablamos.
Po an o, se a a de un es udio expe imen al en el que hemos unido la ealización de
las p ác icas con el T abajo de in de í ulo.
Du an e la ealización del TFT, se ealiza on búsquedas de a ículos cien í icos, los
cuales ue on leídos pa a pode encon a co elación con nues o es udio y pa a sabe
qué di e encia apo aban nues os expe imen os a los ya ealizados an e io men e.
Además, como ya se ha mencionado an e io men e, se es udia on casos de espi ación
an o en el labo a o io como en el ba co.
Comenzando con los expe imen os que se ealiza on en el labo a o io, es impo an e
señala que e a necesa io deja a los o ganismos en sa u ación de alimen o, du an e un
pe iodo de 12 ho as, has a el día siguien e que e a cuando se ealizaban las medidas del
consumo de oxígeno. Además, mien as los indi iduos pe manecían incubados, se
ealizaba el con aje del núme o de células po milili o que se le suminis aba. Una ez
acabados los expe imen os, se limpiaba odo el ma e ial y se o denaba el luga de
abajo.
Pa a inaliza , hablamos de los ensayos ealizados a bo do del ba co. En es os
ensayos medíamos el consumo de oxígeno con un oxíme o di e en e, pues o que és e
nos daba medidas pun uales. El núme o de bo ellas donde se incubaban e a meno a las
de los es udios en labo a o io, pe o de un olumen más g ande (250 ml). Además, los
o ganismos e an ecién omados de su medio na u al y pasados a las bo ellas de
incubación, po an o, no conocemos con segu idad si enían de es a en sa u aciones de
alimen o o no. Aunque es e da o pod íamos conoce lo debido a las condiciones
oceanog á icas, ya que las pescas pa a es os es udios ue on lanzadas en á eas más
oligo ó icas, lejanas al a lo amien o.
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 Fo mación ecibida (cu sos, p og amas in o má icos, e c.)
En es e apa ado podemos des aca que si bien p e iamen e se enía conocimien o de
cómo abaja en un labo a o io en cuan o a o den, pulc i ud y es imen a, u e allos
que poco a poco ui co igiendo. Así mismo, en cuan o a cómo a a algunos da os, se
p opo cionó ambién bas an e in o mación nue a. En cuan o al abajo en el labo a o io,
an es de ealiza cualquie ipo de análisis, se me explicaba con de alle cómo
uncionaban los ins umen os que se iban a u iliza en cada momen o.
Además, en el caso de la u ilización del oxíme o con el que ob u e los alo es de
espi ación pa a las Daphnia spp., se me acili ó un disco du o desde el que pude
desca ga me el so wa e del p og ama que necesi aba dicho ins umen o.
Po o a pa e, los da os que p opo cionaba el oxíme o señalado an e io men e,
ue on a ados con el p og ama Excel, con el que ya había abajado. Sin emba go,
an es de ob ene ningún da o de mis expe imen os, mi u o me p opo cionó o os da os
con los que u e que maneja en el p og ama es adís ico R. Es o me ayudó a
amilia iza me con es a he amien a que más adelan e u iliza ía con mis p opios da os.
Cabe des aca la o mación que ecibí con o os p og amas es adís icos, como el
STATISTICA, con el cual ob u e los g á icos ep esen ados en el abajo.
 Ni el de in eg ación e implicación den o del depa amen o y elaciones con el
pe sonal.
La in eg ación en el depa amen o se puede conside a o almen e sa is ac o ia,
pues o que desde el p incipio los écnicos del labo a o io se mos a on a en os an e
cualquie duda que se me pudie a ocu i en cuan o a la u ilización de ma e ial, al
la ado o simplemen e a la colocación del mismo en el labo a o io. Además de ayuda me
al aslado de ma e iales desde los labo a o ios de la Facul ad has a los labo a o ios de
Talia e, conc e amen e al IOCAG (Ins i u o de Oceanog a ía y Cambio Global).
Además, ob u e el apoyo del equipo de in es igación que abaja den o de es a
ins i ución como p o eso es, es udian es de doc o ado, pe sonal de abajo del ins i u o
en gene al, desde el se icio de limpieza po suminis a me las lla es pa a accede a los
labo a o ios has a el se icio de segu idad po ab i me las pue as del pa king y deja me
accede los días que no se abajaba en el ins i u o pe o que yo enía que i pa a pode
ealiza los expe imen os.
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Conside o que he es ado o almen e implicada en odas las a eas que he hecho a lo
la go del es udio, ya que se me ha explicado cómo hace las y si bien en muchas
ocasiones he allado, a las siguien es lo he co egido y eso me ha hecho gana
conocimien o. En cuan o a las elaciones con el pe sonal puedo deci que he ap endido
de odos y cada uno de los que me han ayudado de una o ma u o a en cada momen o.
 Aspec os posi i os y nega i os más signi ica i os elacionados con el desa ollo
del TFT
En es e apa ado se debe se más obje i o si cabe, ya que, es una o ma de mejo a y
así ayuda a los u u os es udian es de TFT.
En p ime luga , sob e los aspec os nega i os du an e el desa ollo del T abajo de Fin de
Tí ulo, al igual que se expuso en la memo ia de p ác icas ex e nas, podemos deci que lo
más des acado de es e pun o es el hecho de acudi du an e días no lec i os has a los
labo a o ios de la acul ad o de Talia e, pa a da comienzo al expe imen o. Sin
emba go, de es e asgo nega i o he concluido en muchas cosas posi i as.
En cuan o al ap endizaje posi i o du an e el desa ollo de es e abajo, cabe des aca
sin ninguna duda que el hecho de ealiza un abajo expe imen al con iene muchos
aspec os posi i os, pues o que además de gana en conocimien o, he ap endido a se
pacien e, ya que pa a llega a ob ene unos buenos esul ados, ealicé muchos ensayos
an e io es.
 Valo ación pe sonal del ap endizaje conseguido a lo la go del TFT.
Como alo ación pe sonal puedo deci con ce eza que la ealización del T abajo de
Fin de Tí ulo, jun o con las demás asigna u as de la ca e a, me ha hecho c ece como
pe sona. No sólo me he en iquecido académicamen e después de an a búsqueda de
bibliog a ía, lec u as, p ác icas, abajos, e c, sino que además en lo pe sonal me ha
hecho c ece mucho, implan ando un poco en mí una g an i ud de la que ca ecía, la
paciencia.
Pa a mí el TFT no sólo ha sido una asigna u a más de la ca e a, ha sido una e apa de
mi ida, en donde he i ido momen os buenos y momen os malos. Pues o que lo he
pasado mal cuando las cosas que he hecho no me han salido bien, en la que he