Nachweis von Resttumorzellen in Patienten mit Multiple Myelom durch allelespezifische Polymerase-Kette-Reaktion
Christoph Georg Wolfgang Sucker
Dr. med. Nachweis von Resttumorzellen bei Patienten mit Multiple Myeloma durch allelspezifische Polymerase-Kette-Reaktion geboren am 27.02.1970 in Darmstadt. Reifeprüfung am 18.05.1989 in Darmstadt Studiengang der Fakultät Medizin vom WS 1989/90 bis zum WS 1996/97 Physik am 31.08.1992 an der Universität Heidelberg Klinische Studie an der Universität Heidelberg Praktisches Jahr in Heilbronn Staatsexamen am 28.04.1997 an der Universität Heidelberg Promotion: Doktor in der Inneren Medizin: Privatdoz. Dr. med. H. Goldschmidt Die Multiple Myeloma ist eine klonale B-Zellkrankheit.
Die hochdosierte Chemotherapie mit oder ohne Vollkörperstrahlung stellt eine
Eine neue, vielversprechende Therapieoption aufgrund der Myeloablativen
Die Wirkung der Therapie ist eine nachfolgende Transplantation von
Stammzellen sind notwendig. Mehrere Studien belegen, dass
Überlebensvorteil für Patienten mit hochdosierten Therapien.
Hämatopötische Rekonstitution und geringere Gehalt an malignen Zellen
entscheidende Vorteile der peripheren Blut-Stammzelltransplantation
Die Erreichung einer vollständigen Remission nach herkömmlichen Kriterien durch die Hochdosistherapie erfordert neue molekularbiologische Methoden zur sensiblen und spezifischen Erkennung von malignen Zellen. Zu diesem Zweck sollten im Rahmen dieser Arbeit allelespezifische Oligonukleotide als Komplementaritätsbestimmungsregion 3 (CDR3-Region) der Tumorklone entworfen und zur Erkennung von malignen Zellen verwendet werden.
Die CDR3-Region auf Chromosom 14 kodiert für die hypervariablen Regionen
Immunlobulin-Schwerketten, die zur Antigenspezifität der
Durch komplexe Rekombinationsprozesse im Laufe der
Die CDR3-Region hat eine Zellentwicklungsequenz, die für jede
Der Zellklon ist einzigartig.
Sie kann durch die Verwendung von Konsens-Primären durch
Polymerase-Chain-Reaktion (PCR) verstärkt (CDR3-PCR) und anschließend
Da identische CDR3-Sequenzen bei normalen B-Lymphozyten nur mit einer Häufigkeit von 1 : 20000 auftreten, fanden nur die CDR3-Regionen der malignen Klone mehr als doppelt so hoch. Im Vergleich zu CDR3-PCR allein zeichnet sich die C-Sample-Analyse dadurch aus, dass die Monoklonität direkt anhand der DNA-Sequenz nachweisbar ist.
Nach der Identifizierung der CDR3-Regionen der malignen Klone in der C-Muster
Alle untersuchten DNA-Samples aus peripherem Blut und Knochenmark waren PCR-positiv, außerdem konnten ASO-Primer in neun von zehn untersuchten Leukapherese-Produkten eine Kontamination mit Tumorzellen nachweisen. Alle CD34-Fraktionen von hematopötischen Prorogenzellen mit Reinheiten zwischen 96,9 und 99,1% waren bei der PCR-Positivität der PCR-Leapherzellen positiv.
Das ASO-PCR ist eine Erkennung von malignen Zellen mit hoher Sensibilität und
Dies ist besonders wichtig bei Patienten, die sich
Sie sind nach konventionellen Kriterien in völliger Remission.
Es ist möglich, minimale Resterkrankheiten (MRD) zu überwachen.
Das PCR-Negativitätskriterium kann eine molekulare biologische Remission verursachen.
Die Krankheit wird in der Regel durch die Krankheit definiert und zur Überwachung der Krankheit eingesetzt.
Die Wirksamkeit künftiger Therapien kann dadurch gemessen werden, inwieweit
Sie sind in der Lage, PCR-Negativität von peripherem Blut und Knochenmark
Das Ziel ist die hochdosisierte Therapie mit peripheren Blut-Stammzellen.
Obwohl die Bedeutung von reinfusierten Tumorzellen in Autotransplantaten für eine erneute Krankheitsprogression derzeit nicht bekannt ist, werden verschiedene Methoden zur Tumorzellreduktion erprobt. Nach den Ergebnissen dieser Arbeit ist die Gewinnung eines PCR-negativen peripheren Blut-Stammzelltransplantats durch CD34-Anreicherung möglich.