La structure des exons du gène DAZ/SPGY dans Yg11 et l'identification de son homologue ancêtre SPGYLA sur le chromosome 3

Zhi-Hong Shan

Le docteur Médecin

Exon

la structure

du gène DAZ/SPGY dans Yq11 et de l'identification de son ancêtre

homologue SPGYLA sur le chromosome 3

Né le 2 mai 1962 à Teng Chong, province du Yunnan, P. R. Chine Examen d'État pour la sélection universitaire au cours du 7-10 juillet 1980 à Teng Chong, province du Yunnan, P. R. Chine M.D. Étudiant au Kunming Medical College de 1980 à 1985, Kunming, province du Yunnan, P. R. Chine; Diplôme: Baccalauréat en médecine M.D. Étudiant (expérience de recherche) au Département d'obstétrique et de gynécologie de 1985 à 1988, Kunming Medical College, Kunming, province du Yunnan, P. R. Chine; Diplôme: Maîtrise en médecine Assistant au Département d'obstétrique et de gynécologie de 1988 à 1991, Kunming, province du Yunnan, P. R. China Professeur en obstétrique et de gynécologie d'A.Z.

L'objectif a été atteint en analysant la structure exon-intron de DAZ/SPGY et en identifiant son gène ancêtre SPGYLA sur le bras court du chromosome 3.

Le PCR avec des primers spécifiques de la partie N-terminale des séquences DAZ et CT340 liées à Y (copie candidate autosomique de DAZ) a identifié cinq groupes de clones de cDNA du bassin cDNA isolé par croisement hybridique à SPGY1. Le premier groupe comprenait des cDNA tronqués dépourvus du N-terminale, le deuxième groupe était caractérisé par des clones de cDNA homologues DAZ contenant seulement une partie de la région de la séquence N-terminale; le troisième et le quatrième groupe comprenaient des clones de cDNA homologues CT340 caractérisés par différentes parties de la région de la séquence N-terminale; le cinquième groupe était représenté par un clone cDNA (CT351) contenant une région N-terminale plus grande connue de DAZSP. L'analyse complète de la séquence de clones CT351 fournit des preuves que les gènes DAGY et SPYZ appartiennent à la même structure génétique avec une structure génétique de l'homologue conçue comme notre génétique conçue par un support génétique de l'homologue CY/DAGY, ainsi qu'une forte copie du génétique CY/DAGY.

Une stratégie de séquençage de clonage basée sur PCR s'est avérée être un moyen efficace pour la détermination de la structure exon/intron DAZ/SPGY et l'identification de ses séquences limites essentielles à l'analyse de mutations spécifiques des exons dans les expériences SSCP. Il y a 10 exons DAZ/SPGY de longueur différente (exon 1: 270 bp; exon 2: 147 bp; exon 3: 92 bp; exon 4: 52 bp; exon 5: 64 bp; exon 6: 140 bp; exon 7: n x 72 bp; exon 8: 35 bp; exon 9: 99 bp; exon 10: 917 bp) interrompu par 9 introns (intron 1: 1 kb; intron 2: 300 bp; 7-8 intron 3: 600 bp; intron 4: 500 bp; 5: 500 bp; 6: 89 bp; intron 6: 8 kb; intron n' intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 7,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb; intron: 4,8 kb: 4,8 kb; intron: 4,8 kb: 4,8 kb; intron: 4,8 kb: 7, 8 kb: 4, 8 kb; intron: 4, 8 kb: 4, 8 kb: 8, 8 kb: 4, 8 kb; intron: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 9, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb; intron: 8, 8 kb: 9, 8 kb: 9, 8 kb: 9, 8 kb: 9 kb; intron: 9 kb; intron: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb; intron: 9 kb: 9 kb: 9 kb; intron: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb; intron: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb; intron: 9 kb:

La copie autosomique DAZ/SPGY a été identifiée par analyse de séquence du CT340.

CT355 est la seule séquence de longueur complète (2921 bp) contenant un cadre de lecture ouvert complet qui encode une protéine de liaison RNA avec 289 acides aminés. CT355 a été mappé au bras court du chromosome 3 par des expériences FISH et a été désigné comme SPGYLA (SPGY ike-utosomal). La localisation chromosomique a été confirmée par PCR avec CT355 primers spécifiques sur des échantillons génomiques d'ADN d'un panneau hybride de cellules hamster-humaines contenant différents ensembles de chromosomes humains. Comme DAZ/SPGY, SPGYLA a été trouvé pour être exprimé spécifiquement dans les testicules humains.

Le résultat le plus intriguant semble être que la séquence de codage de SPGYLA soit plus homologue à celle du gène homologue de la souris Dazla que à celle du gène homologue humain Y chromosome DAZ/SPGY. SPGYLA, comme le gène de la souris Dazla, ne contient qu'une seule unité d'exon 7 de 72 bp. De plus, SPGYLA contient une région de séquence de 130 bp (boîte CTA) présente à Dazla mais pas à DAZ/SPGY. La structure de séquence de SPGYLA a également été trouvée dans la boule du gène Drosophila. Ceux-ci indiquent que SPGYLA est hautement conservé, et suggèrent que SPGYLA a une fonction dans la spermatogénèse humaine similaire à celle de Dazla dans la spermatogénèse de souris ou celle de la spermatogénèse de la boule de Drosophlia.

Expériences sur les taches dans les zoos

l'utilisation d'échantillons d'ADN génomique de différents mammifères a indiqué que le

L'emplacement du gène DAZ/SPGY sur le chromosome Y humain a peut-être d'abord été transloqué à partir de sa position génomique autosomique SPGYLA pendant l'évolution des primates. La durée de cet événement de translocation a été estimée à environ 35 à 50 millions d'années, après la divergence des platyrrhini (mones du Nouveau Monde) et avant la divergence des catarrhini (mones du Vieux Monde).

L'analyse génomique initiale de l'unité de séquence de boîte CTA dans SPGYLA a révélé qu'elle contient la 3′ extrémité de l'exon 8 de SPGYLA (16 bp). Les 35 premiers nucléotides de cet exon sont homologues à l'exon 8 du gène DAZ/SPGY. Par conséquent, l'exon 8 de SPGYLA est de 16 nucléotides plus long que l'exon 8 de DAZ/SPGY.

L'exon 9 du DAZ/SPGY devient donc l'exon 10 du SPGYLA et l'exon 10 du DAZ/SPGY représente l'exon 11 du SPGYLA. Des expériences SSCP ont été réalisées pour rechercher des mutations de points dans les exons 1, 2 et 4 du DAZ/SPGY chez 70 patients et dans l'exon 9 du gène SPGYLA chez 150 patients. Ces cas ont été sélectionnés pour un karyotype normal et l'absence de microdélétions dans le Yq11. La stérilité de ces hommes (azoospermie ou oligozoospermie) ne pouvait être expliquée par aucun outil de diagnostic clinique sévère (stérilité idiopathique).