Exonstruktur des DAZ/SPGY-Gens in Yg11 und Identifizierung seines Vorfahrenhomologen SPGYLA auf Chromosom 3

Zhi-Hong Shan

Dr. Med

Exon

Struktur

des DAZ/SPGY-Gens in Yq11 und Identifizierung seines Vorfahren

Homologe SPGYLA auf Chromosom 3

Geboren am 2. Mai 1962 in Teng Chong, Provinz Yunnan, P. R. China Staatsprüfung zur Universitätswahl während des 7. bis 10. Juli 1980 in Teng Chong, Provinz Yunnan, P. R. China M.D. Student im Kunming Medical College von 1980 bis 1985, Kunming, Provinz Yunnan, P. R. China; Abschluss: Bachelor of Science in Medicine M.D. Student (Forschungserfahrung) in der Abteilung Obstetrik und Gynäkologie von 1985 bis 1988, Kunming Medical College, Kunming, Provinz Yunnan, P. R. China; Abschluss: Master of Science in Medicine Assistant in der Abteilung Obstetrik und Gynäkologie von 1988 bis 1991, Kunming Medical College, Kunming, Provinz Yunnan, P. R. China Dozent in der AZ der Obstetrik und Gynäkologie Sie haben von 1992 bis 1994 in der Provinz Yunming (Forschungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahrungserfahr

Dies wurde durch die Analyse der DAZ/SPGY Exon-Intron-Struktur und die Identifizierung seines Vorfahren-Gens SPGYLA auf dem kurzen Arm des Chromosoms 3 erreicht.

PCR mit spezifischen Primern aus dem N-Terminalteil der Y-verknüpften DAZ- und CT340-Sequenzen (autosomal DAZ-Kandidatenkopie) identifizierte fünf Gruppen von cDNA-Klonen aus dem cDNA-Pool, die durch Kreuzhybridisierung zu SPGY1 isoliert wurden. Die erste Gruppe bestand aus abgeschnittenen cDNA-Klonen, die dem N-Terminal fehlten, die zweite Gruppe bestand aus DAZ-homologen cDNA-Klonen, die nur einen Teil der N-Terminal-Sequenzregion enthielten; die dritte und vierte Gruppe bestand aus CT340-homologen cDNA-Klonen, die durch verschiedene Teile der N-Terminal-Sequenzregion gekennzeichnet wurden; die fünfte Gruppe wurde durch einen cDNA-Klon (CT351) vertreten, der eine größere N-Terminalregion enthielt, wie sie von DAZSPZ bekannt ist. Die vollständige Sequenzanalyse von CT351 zeigt, dass DAZ- und SPYZ-Klonen in derselben genetischen Struktur gehören, die eine ausgezeichnete Hologische Hologische Hologenkonstruktion von DAZ/DAZ-Kromosomen ist, die folglich eine starke HQ / DAZ-Kromosome XYZ-Kronographie war.

Eine auf PCR basierende Kloning-Sequenzierungsstrategie wurde als effizienter Weg für die Bestimmung der DAZ/SPGY Exon/Intron-Struktur und die Identifizierung seiner Grenzsequenzen festgestellt, die für die Exon-spezifische Mutationsanalyse in SSCP-Experimenten (Single-Strand-Conformation-P-Olymorphismus) unerläßlich sind. Es gibt 10 DAZ/SPGY Exonen unterschiedlicher Länge (Exon 1: 270 bp; Exon 2: 147 bp; Exon 3: 92 bp; Exon 4: 52 bp; Exon 5: 64 bp; Exon 6: 140 bp; Exon 7: n x 72 bp; Exon 8: 35 bp; Exon 9: 99 bp; Exon 10: 917 bp) unterbrochen durch 9 Intron (Intron 1: kb; Intron 2: 300 bp; 7-8 bp 3: 600 bp; Intron 4: 500 bp; 5: 500 bp; 6: 89 bp; Intron 7: 8 kb; Intron: 4,8 kb; Intron: 4,8 kb; Intron: 4,8 kb; Intron: 7,8 kb; Intron: 4,8 kb; Intron: 4,8 kb: 4,8 kb; Intron: 7,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 4,8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 9, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8, 8 kb: 8 kb: 9, 8 kb: 9, 8 kb: 9, 8 kb: 9, 8 kb: 8 kb: 9, 8 kb: 9 kb: 9, 8 kb: 9 kb: 9, 8 kb: 9 kb: 9, 8 kb: 9 kb: 9, 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 - 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9, 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 kb: 9 /

Die autosomale DAZ/SPGY Kopie wurde durch Sequenzanalyse des CT340 identifiziert.

CT355 ist die einzige Volllänge-Sequenz (2921 bp), die einen vollständigen offenen Lesrahmen enthält, der ein RNA-Bindungsprotein mit 289 Aminosäuren kodiert. CT355 wurde durch FISH-Experimente auf den kurzen Arm des Chromosoms 3 gemappt und als SPGYLA (SPGY ike-utosomal) bezeichnet.

Am faszinierendsten erscheint das Ergebnis, dass die SPGYLA-Codierungssequenz mit dem homologen Mausgenen Dazla homologer ist als mit dem homologen menschlichen Y-Chromosom-DAZ/SPGY-Gen. SPGYLA enthält wie das Mausgenen Dazla nur eine 72 bp Exon-7-Einheit. Darüber hinaus enthält SPGYLA eine 130 bp-Sequenzregion (CTA-Box), die in Dazla vorhanden ist, aber nicht in DAZ/SPGY. Die SPGYLA-Sequenzstruktur wurde auch in der Drosophila-Gen-Bulle gefunden. Diese deuten darauf hin, dass SPGYLA stark erhalten ist, und deuten darauf hin, dass SPGYLA bei der menschlichen Spermatogenese eine ähnliche Funktion hat wie die von Dazla bei der Maus-Spermatogenese oder die von Drosophlia-Spermatogenese bei der Maus-Spermatogenese.

Zoo-Flächen-Experimente

Durch die Verwendung genomischer DNA-Proben verschiedener Säugetiere wurde gezeigt, dass die

Das DAZ/SPGY-Genenlocus auf dem menschlichen Y-Chromosom hat sich möglicherweise erstmals während der Primatenentwicklung von seiner Vorfahren-autosomalen SPGYLA-Genomposition umgestellt. Der Zeitbereich dieses Translokationsereignisses wurde vor etwa 35-50 Millionen Jahren geschätzt, nach der Divergenz der Platyrrhini (Neue Welt-Affen) und vor der Divergenz der Catarrhini (Alte Welt-Affen). Daher kann man spekulieren, dass das DAZ/SPGY-Gen eine primatenspezifische Spermatogenesefunktion hat, die sich von der SPGYLA unterscheidet, aber höchstwahrscheinlich mit ihm interagiert.

Die ersten 35 Nukleotide dieses Exons sind homolog zu Exon 8 des DAZ/SPGY-Gens. Folglich ist SPGYLA-Exon 8 16 Nukleotiden länger als Exon 8 des DAZ/SPGY. Die homologen 16 Nukleotidstrecke wurde in der 5-Region von Intron 8 im DAZ/SPGY-Gen identifiziert, was bedeutet, dass die Evolution zum Menschen ein DAZ/SPGY-spezifisches 5-End-Splicing-Signal (CTA GTA) in der ursprünglichen Exon 8-Sequenz erzeugt hat.

Die übrigen 114 bp der CTA-Box wurden als einzigartiges Exon von SPGYLA (Exon 9) identifiziert. Das DAZ/SPGY-Exon 9 wird daher SPGYLA-Exon 10 und das DAZ/SPGY-Exon 10 stellt SPGYLA-Exon 11 dar. SSCP-Experimente wurden durchgeführt, um nach Punktmutationen in Exonen 1, 2 und 4 des DAZ/SPGY bei 70 Patienten und in Exon 9 des SPGYLA-Gens bei 150 Patienten zu suchen.