Diagnóstico molecular genético de defectos de la enzima de la esteroide 21-hidroxilase en pacientes con síndrome adrenogenital
El Sr. H. Scharer
Dr. médico Diagnosis molecular de defectos de la enzima de la esteroide 21-hidroxylase en pacientes con síndrome adrenogénico Nacido el 22 de mayo de 1963 en Niederbühl/Rastatt Prueba de madurez el 18 de mayo de 1982 en Rastatt Curso de la Facultad de Medicina de SS 1989 a SS 1996 Física el 20 de septiembre de 1991 en la Universidad Libre de Berlín Estudios Clínicos en Berlín y Heidelberg El año práctico en Bad-Mergentheim y Nueva York, EE.UU. Exámenes estatales el 4 de noviembre de 1996 en la Universidad de Heidelberg Curso de doctorado: Farmacología
La 21-hidroxilase es codificada por el gen CYP21B en el cromosoma 6. El objetivo de este trabajo fue el desarrollo de un esquema de diagnóstico molecular genético para detectar defectos en el gen CYP21B. El esquema debería permitir la creación S de un gran grupo de pacientes y ser aplicable en el diagnóstico prenatal y perinatal. Después de la amplificación específica del gen CYP21B mediante la reacción de la cadena de polímeros (PCR), las tres mutaciones más frecuentes (delecciones, mutación de sitio splice en la mutación de Intron-2, Ile172Asn en el ADN-4) fueron detectadas a través de polímeros de exformación individual (SSCP) o heteroduplexos. Los resultados obtenidos con la agencia AGG se llevaron a cabo en paralelo a la secuencia completa del gen CYP21B a través de una simple analítica clínica de pacientes con cáncer de mama y cáncer de sal, y se seleccionaron para el análisis clínico de pacientes con cáncer de mama y cáncer de 8 años de edad.
Todos los resultados obtenidos por la prueba de eliminación mediante PCR o SSCP
En los 26 pacientes examinados, los resultados de la investigación fueron muy positivos y fueron confirmados por secuenciación directa de ADN.
Se han detectado 6 deleciones, 12 mutaciones de intrón 2 y 7 mutaciones de Ile172Asn.
En un paciente, el análisis de secuencia encontró otra mutación rara.
El concepto de investigación aplicado ha dado lugar a un elevado índice de
Sensibilidad (> 90%) y especificidad (100%) en la detección de mutaciones en el gen CYP21B
El esquema de diagnóstico permite registrar rápidamente (2-3 días) con poco esfuerzo las tres mutaciones más comunes que conducen al síndrome de pérdida de sal en AGS y, por lo tanto, también es adecuado para el diagnóstico perinatal. Para aumentar la sensibilidad, se pueden incluir otras mutaciones en el esquema de diagnóstico. Debido a la relativamente poca longitud del gen CYP21B, una secuenciación completa de ADN también es posible en un corto período de tiempo.
La secuenciación directa de ADN puede producir mutaciones raras o desconocidas en el
El fenómeno de la amplificación preferida, que ocurrió en el caso del polimorfismo de la secuencia C en la posición de la mutación del sitio de la splice en el intrón-2, puede conducir a la pérdida de un alelo en la PCR primaria.