Rilevazione delle cellule tumorali nei prodotti di leucapheresi da pazienti affetti da cancro al seno utilizzando il metodo di macchia immunocitochimica
riassunto
Yung Sheng Lin
Dott. medico
Rilevazione delle cellule tumorali nei prodotti di leucapheresi da parte di pazienti affetti da cancro al seno
Utilizzando un metodo di macchiatura immunocitochimica
Geboren am 06, 03, 1965 a Taipei, Taiwan
Reifeprüfung am 01, 09, 1983 a Taipei, Taiwan
Studiengang der Fachrichtung Medizin vom WS 1983 bis WS 1988, WS 1990 bis SS 1995 Physikum am 01, 09, 1988 an der Universität Taichung, Dipartimento di Tecnologia Medica, Klinisches Studium in Tongji medisinischer Universität (1990-1994) Praktisches Jahr in 1994-1995 Staatsexamen am 01, 07, 1995 an der Universität Tongji Promotionsfach: Innere Medizin Doktorvater: Prof. Dr. med. R. Haas Abbiamo utilizzato una combinazione di quattro anticorpi monoclonali (BM7, BM8 contro MUC1, 5D3 agista CK8, 18, 19 e HEA125 contro l'antigene epiteliale umano) in un esame immunoclimico sensibile per identificare le cellule tumorali del seno negli esperimenti PB.
nei campioni clinici, la percentuale di pazienti con prodotti LP positivi per le cellule tumorali in questo studio è stata del 14,3% (6/42) nel gruppo di trattamento adjuvante, del 18,2% (2/11), nel gruppo di trattamento neoadjuvante e del 20,1% (9/43) nel gruppo di pazienti con malattia metastatica.
Abbiamo analizzato la relazione tra il numero di raccolte di PBPC e la contaminazione delle cellule tumorali. Attraverso l'analisi statistica, un gran numero di prodotti per la leucapheresi eseguiti e testati è stato significativamente correlato alla probabilità di trovare un LP tumorale positivo (P<0,05). Il numero sommario di leucapheresi dipende dalla resa di cellule CD34 per leucapheresi Per supportare un ciclo di terapia ad alta dose, 2,5 x 10 cellule CD34 / kg di peso corporeo sono necessari per garantire una rapida ricostituzione ematologica. I nostri protocolli includono 2-3 cicli di terapia ad alta dose, almeno 5-7.5 x 10 cellule / kg di peso corporeo devono essere raccolte. D'altra parte, l'eterogeneità nella popolazione dei pazienti e il pretrattamento della chemioterapia possono causare differenze nella capacità di mobilitazione.
Il numero delle cellule tumorali nei prodotti LP può essere quantificato utilizzando preparati di citospina. Il numero delle cellule tumorali variava da 0,25 a 5 cellule per 10 cellule per prodotti LP. Solo nei pazienti con concentrazioni di cellule tumorali di malattia metastatica superiori a 1,25 cellule/10 cellule potevano essere rilevate. Nei pazienti con malattia di stadio II / III, il numero delle cellule tumorali variava da 0,25 a 1,25 cellule per 1x10 cellule. Di conseguenza, la concentrazione media delle cellule tumorali era maggiore nei campioni dei pazienti con malattia metastatica (mediano = 0,96) rispetto ai campioni dei pazienti nei gruppi di trattamento adjuvante e neoadjuvante (mediano = 0,5 e 0,75).
In questo studio, l'efficacia dell'Isolex 300 SA utilizzata per la selezione del propenitor emopoietico CD34+ e delle cellule staminali da autografici derivati dal sangue di pazienti con cancro al seno ad alto rischio. L'Isolex 300 è risultato efficace nel ridurre la quantità di cellule tumorali contaminanti. Prima della selezione, cinque prodotti LP contenevano cellule maligne in una concentrazione compresa tra una e due cellule positive per 1x10 MNC. Tutti i prodotti ottenuti erano liberi di cellule tumorali. Poiché la procedura di selezione porta a una riduzione media del numero di cellule mononucleari e poiché la purezza media della frazione è stata >90%, si può ottenere una purificazione efficace di circa 3 cellule.
Abbiamo concluso che una correttamente eseguita e controllata colorazione immunocitochimica di PB
Le citospine sono un metodo sensibile e semplice per rilevare e quantificare le cellule tumorali del seno in PBPC per l'autotrasplantazione. Isolex 300 SA per la selezione del propenitore emopoietico CD34+ e delle cellule staminali da autografici derivati dal sangue ha portato alla riduzione delle cellule tumorali in PBPC. Questa tecnica è uno strumento potente ed efficiente per la selezione del propenitore emopoietico CD34+ e delle cellule staminali di pazienti con cancro al seno ad alto rischio.