VARIACIÓN DEL PERFIL POLIFENÓLICO DE
DIATOMEAS Phaeodac ylum ico nu um
CULTIVADAS EN AGUA DE MAR
ENRIQUECIDA EN COBRE (II)
A oa López, Milag os Rico, A idane González,
Magdalena San ana, Melcho González y No ma Pé ez.
Depa amen o de Química, Uni e sidad de Las Palmas de G an
Cana ia, Campus de Ta i a, 35017 Las Palmas de G an Cana ia,
Cana y Islands, Spain.
e-mail: [email p o ec ed]
TABLA DE CONTENIDOS
• In oducción
• Técnicas
• Cul i o
• SPE- HPLC
• DPPH
• Resul ados y discusión
• C ecimien o
• Concen ación de poli enoles
• Conclusiones
INTRODUCCIÓN
-Phaeodac ylum ico nu um-
Pe enecenalaclasedia omeas,quesonalgas
unicelula es p esen es en abundancia en el i oplanc on.
Las dia omeas se ca ac e izan po posee una pa ed
celula imp egnada en sílice.
Phaeodac ylum ico nu um es la única especie que
compone el géne o Phaeodac ylum.Seencuen aen
dis in as zonas cos e as al ededo del mundo, con
g andes a iaciones de salinidad.
Debido a que ue de las p ime as dia omeas en la que se
desc ibió la secuencia genómica comple a ha sido
some ida a mul i ud de ensayos.
INTRODUCCIÓN
-Phaeodac ylum ico nu um-
P. T ico nu um puede exis i en di e en es mo ologías.
Las condiciones ambien ales in luyen en los cambios en
la mo ología y el amaño de es as algas (Ma ino e al.,
2007). Se pueden p oduci esos cambios en condiciones
de al as concen aciones de cob e (Ma kina y Aizdaiche ,
2006 ).
* (1) De Ma ino e al., (2007) Jou nal o Phycology. 43:992-1009. (2) Ma kina e al., (2006) Russian Jou nal o Plan
Physiology. 53-3: 343-347.
TRIRRADIADA FUSIFORME OVALADA

INTRODUCCIÓN
-COBRE-
El cob e es un me al que apa ece en bajas
concen aciones en el océano y que in e iene en
algunos p ocesos biológicos.
La con aminación po pa e del homb e de ie as de
cul i o y de los ecosis emas acuá icos, hace que se
inc emen e en el medio la can idad de es e me al.
Es e exceso en la concen ación de cob e p oduce una
disminución del c ecimien o de mic oalgas, llegando a
inhibi lo. (F anklin e al., 2002)
* (1) F anklin e al. (2002) En i onmen al Toxicology and Chemis y. 21/11: 2412-2422.
INTRODUCCIÓN
-COBRE-
Cuando los o ganismos se encuen an en esas
condiciones de oxicidad po ele adas concen aciones
de me ales desa ollan mecanismos de de ensa en e a
es a oxicidad.
**(1) Jung e al (2003) Plan and Soil 252:301-312. (2) Ko acik and Klejdus (2008) Plan Cell Rep., 27, 605–615. (3)
Quideau e al. (2011) Angewand e Chemie. 50/3: 586-621.
A ni el ex acelula Libe ación de poli enoles (Jung
e al., 2003)
A ni el de pa ed celula Poli enoles asociados
(Ko acik e al., 2008; Jung e al., 2003).
A ni el in acelula Inhibición de adicales lib es y
quelacion de me ales (Quideau e al., 2011).
INTRODUCCIÓN
-POLIFENOLES-
POLIFENOLES SIMPLES FENILPROPANOIDES
FENOL ÁCIDO GÁLICO ÁCIDO CINAMICO ÁCIDO SINAPICO
FLAVONOIDES
FLAVONAS FLAVONOLES FLAVANOLES
OH
COOH
OH
OHHO
COOH
COOH
OH
OMeMeO
O
O
O
O
OH
O
OH
INTRODUCCIÓN
-POLIFENOLES-
Los o ganismos p oducen es os compues os en espues a a
los dis in os ipos de es és que su en. La p incipal
ca ac e ís ica de es os compues os es su capacidad
an ioxidan e.*
–INHIBEN RADICALES Y ESPECIES REACTIVAS DEL OXÍGENO
(ERO).*
–AGENTES QUELANTES DE IONES DE METALES PESADOS.**
*(1)Ri e o e al.(2001) Plan Science 160: 315-321.(2) T eu e D (2006) En i onmen al Chemis y Le e s.4/3:147-157
**(1) Ben es e al. (2011) Molecules. 16/2:1749-1760.. (2) Neudö e e al. (2006) J. Ag ic. Food Chem. 54:1898-1905
T ans e encia de hid ogeno:
RADICAL· + POLIFENOL-H → RADICAL-H + POLIFENOL·
T ans e encia de elec ones:
RADICAL·++ POLIFENOL → RADICAL + POLIFENOL·+
Me al++ POLIFENOL → [POLIFENOL-Me al ]
MÉTODOS
PRECONCENTRACIÓN
P epa amos la mues a (0.1g/5mL HCl)
Columna SPE C omabond Easy
Eluciones sucesi as 2mL (2%NaOH)
Concen a has a 0.5 mL

MÉTODOS
PRECONCENTRACIÓN
2.5L Agua de ma con exudados
3 Columnas SPE C omabond Easy
Eluciones en me anol
Concen a has a 0.5 mL
MÉTODOS
ANÁLISIS
MÉTODOS
ANÁLISIS
60μL MUESTRA
COLUMNA HPLC C18
ISOCRÁTICO: MeOH / H2O (1% Ac. Fó mico)
DETECTOR UV – DIODO DE ARRAY
MÉTODOS
-DPPH-
Capacidad del an ioxidan e pa a neu aliza el adical
DPPH.
1 mL de la disolución de DPPH 0.1 mM + 0.2 mL del
ex ac o de alga.
Se calcula el po cen aje de inhibición.
(1- Absex /AbsDPPH)×100
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
-CRECIMIENTO-
La densidad inicial de P.T ico nu um 1·104células·mL-1
Exis e una elación en e [Cu] y el descenso en el núme o
de células. El pa áme o de inhibición del c ecimien o en
biomasa, EC50,se alcanza a una concen ación de
35ug/mL (Mo eno-Ga ido e al., 2000)
3 Cul i os
-0 ug / L Cob e (Blanco)
-20 ug / L Cob e
-50 ug / L Cob e
* Mo eno-Ga ido e al.(2000) Eco oxicology and En i onmen al Sa e y. 47:112-116.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN
-CRECIMIENTO-
52%
78%
100%
0
50
100
Blanco Cob e 20 Cob e 50
% C ecimien o
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
-CRECIMIENTO-
471%
52%
78%
100%
0
100
200
300
400
500
Blanco Cob e 20 Cob e 50 Hie o 50
% C ecimien o
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
-CONCENTRACIÓN DE POLIFENOLES-
BLANCO [Cu]
20μg L-1
[Cu]
50μg L-1
[Fe]
50μg L-1
Gen ísico* 21.3 ± 0.7 27 ± 1 42 ± 2 11.5 ± 0.8
Mi ice ina* 17.9 ± 0.2 38 ± 3 43 ± 2 66 ± 3
Sinápico* 72 ± 1.1 71.7 ± 3.1 136.9 ± 10.7 60 ± 4
Que ci ina* 74.7 ± 1.2 81.7 ± 1.4 148.8 ± 3.7 70 ± 2
Kaemp e ol* 61.6 ± 2.5 75.5 ± 2.44 121.6 ± 1.5 64 ± 2
Apigenina* 63.0 ± 0.8 77.9 ± 1.8 128.8 ± 1.9 61 ± 2
* (μg·celulas-1)·10 10 FILTROS
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
-CONCENTRACIÓN DE POLIFENOLES-
(μg·celulas-1)·10 10
0
20
40
60
80
100
120
140
160
SINAPICO
QUERCITRINA
KAEMPFEROL
APIGENINA
AC. GENTISICO
MIRICETINA
Blanco [Cu]=20ug [Cu]=50ug [Fe]=50ug
FILTROS
VARIACIÓN DEL PERFIL POLIFENÓLICO DE
DIATOMEAS Phaeodac ylum ico nu um
CULTIVADAS EN AGUA DE MAR
ENRIQUECIDA EN COBRE (II)
A oa López, Milag os Rico, A idane González,
Magdalena San ana, Melcho González y No ma Pé ez.
Depa amen o de Química, Uni e sidad de Las Palmas de G an
Cana ia, Campus de Ta i a, 35017 Las Palmas de G an Cana ia,
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