Jesús Sánchez Fuen es.
Ma cado es de bienes a
elacionados con el hamb e
c ónica en e ne os lac an es.
Facul ad de Ve e ina ia
G ado en Ve e ina ia
Año 2024
Modalidad del T abajo: Expe imen al
T abajo de
Fin de G ado
2
LICENCIA
Excep o donde se haga cons a explíci amen e, es a ob a pe enece a Jesús Sánchez Fuen es y es á
bajo una licencia de “C ea i e Commons Reconocimien o 4.0 In e nacional”.
3
Resumen.
Es e abajo u o como obje i o compa a las concen aciones de lep ina y gh elina de
e ne os neona os que han sido sepa ados de sus mad es de dos mane as di e en es. Pa a ello, se
mues ea on 8 ganade ías di ididas en dos g upos. Cua o de ellas ealizaban un manejo de
sepa ación mad e-c ía de mane a emp ana (an es de las 24 ho as) y las o as cua o ealizaban
un manejo de sepa ación mad e-c ía de mane a a día (después de 24 ho as). En cada g upo de
explo aciones se ecogie on mues as sanguíneas de 28 e ne os, ealizando un o al de es
mues eos. La oma de mues as se ealizó an es de la sepa ación (en el caso del sis ema de
sepa ación a día), a los dos y a los sie e días as el p ime mues eo. En el sis ema de sepa ación
emp ana se ecogie on las mues as de sang e siguiendo un diseño equi alen e en días pos pa o
al g upo de sepa ación a día. Las mues as se analiza on median e es s ELISA come ciales
especí icos pa a lep ina y gh elina bo ina, siguiendo las ins ucciones de los ab ican es. Los
esul ados ob enidos indican un aumen o es adís icamen e signi ica i o de las concen aciones de
lep ina y gh elina en aquellos e ne os que ue on manejados median e el sis ema de sepa ación
emp ana, con espec o a aquellos que se encon aban bajo el sis ema de sepa ación a día. Po
o o lado, en ambos sis emas de manejo las concen aciones de lep ina y gh elina se man u ie on
es ables a lo la go de los es mues eos. La meno ecuencia de alimen ación y el consumo de
una meno can idad de alimen o en los e ne os sepa ados inmedia amen e de sus mad es, en
compa ación con los que son sepa ados de mane a a día, se co esponde ía con el aumen o de
las concen aciones de gh elina. Asimismo, las mayo es concen aciones de lep ina en e ne os
sepa ados de mane a emp ana de su mad e pod ían es a p o ocadas po el mayo es és du an e
la sepa ación emp ana, que gene a ía una ele ación del co isol, epe cu iendo en mayo es
concen aciones de lep ina. Po an o, los alo es de lep ina y gh elina obse ados en es e es udio
pa ecen se indicado es de un p oblema de bienes a elacionado con el hamb e p olongada en
aquellos e ne os lac an es sepa ados de sus mad es de mane a emp ana.
Palab as cla e: lep ina, gh elina, sepa ación emp ana, sepa ación a día, e ne os neona os y
bienes a animal.
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Resumo.
Es e aballo i o como obxec i o compa a as concen acións de lep ina e g elina de
en ei os neona os que o on sepa ados das súas nais de dúas manei as di e en es. Pa a iso,
mos exá onse 8 ganda ías di ididas en dous g upos. Ca o delas ealizaban un manexo de
sepa ación nai-c ía de manei a empe á (an es das 24 ho as) e as ou as ca o ealizaban un
manexo de sepa ación nai-c ía de manei a a día (despois de 24 ho as). En cada g upo de
explo acións ecollé onse mos as sanguíneas de 28 en ei os, ealizando un o al de es
mos exos. A oma de mos as ealizouse an es da sepa ación (no caso do sis ema de sepa ación
a día), aos dous e aos se e días as o p imei o mos eo. No sis ema de sepa ación empe á
ecollé onse as mos as de sangue seguindo un deseño equi alen e en días pos pa o ao g upo de
sepa ación a día. As mos as analizá onse median e es s ELISA come ciais especí icos pa a
lep ina e g elina bo ina, seguindo as ins ucións dos ab ican es. Os esul ados ob idos indican
un aumen o es a is icamen e signi ica i o das concen acións de lep ina e g elina naqueles
en ei os que o on manexados median e o sis ema de sepa ación empe á, con espec o a aqueles
que se a opaban baixo o sis ema de sepa ación a día. Po ou a banda, en ambos sis emas de
manexo as concen acións de lep ina e g elina man i é onse es ables ao longo dos es mos exos.
A meno ecuencia de alimen ación e o consumo dunha meno can idade de alimen o nos
en ei os sepa ados inmedia amen e das súas nais, en compa ación cos que son sepa ados de
manei a a día, co esponde íase co aumen o das concen acións de g elina. Así mesmo, as
maio es concen acións de lep ina en en ei os sepa ados de manei a empe á da súa nai pode ían
es a p o ocadas polo maio es és du an e a sepa ación empe á, que xe a ía unha ele ación do
co isol, epe cu indo en maio es concen acións de lep ina. Polo an o, os alo es de lep ina e
g elina obse ados nes e es udo pa ecen se indicado es dun p oblema de benes a elacionado
coa ame p olongada naqueles bece os lac an es sepa ados das súas nais de manei a empe á.
Palab as cha e: lep ina, gh elina, sepa ación empe á, sepa ación a día, en ei os neona os e
benes a animal.
5
Abs ac .
The aim o his s udy was o compa e he lep in and gh elin concen a ions o neona al
cal es ha ha e been sepa a ed om hei mo he s in wo di e en ways. Fo his pu pose, 8
he ds di ided in o wo g oups we e sampled. Fou o hem pe o med ea ly mo he -cal
sepa a ion managemen (be o e 24 hou s) and he o he ou pe o med la e mo he -cal
sepa a ion managemen (a e 24 hou s). In each g oup o a ms, blood samples we e collec ed
om 28 cal es, o a o al o h ee samples. Sampling was done be o e sepa a ion (in he case o
he la e sepa a ion sys em), a wo and se en days a e he i s sampling. In he ea ly sepa a ion
sys em, blood samples we e collec ed ollowing a design equi alen in days pos pa um o he
la e sepa a ion g oup. Samples we e analysed by comme cial ELISA es s speci ic o bo ine
lep in and gh elin, ollowing he manu ac u e s' ins uc ions. The esul s ob ained indica e a
s a is ically signi ican inc ease in lep in and gh elin concen a ions in cal es managed unde he
ea ly sepa a ion sys em, compa ed o hose managed unde he la e sepa a ion sys em. On he
o he hand, in bo h managemen sys ems, lep in and gh elin concen a ions emained s able
h oughou he h ee samples. The lowe eeding equency and lowe eed in ake in cal es
sepa a ed immedia ely om hei mo he s, compa ed o cal es sepa a ed la e, would co espond
o inc eased gh elin concen a ions. Likewise, he highe lep in concen a ions in cal es sepa a ed
ea ly om hei mo he s could be caused by he highe s ess du ing ea ly sepa a ion, which
would gene a e an ele a ion o co isol, esul ing in highe lep in concen a ions. The e o e, he
lep in and gh elin alues obse ed in his s udy seem o be indica i e o a wel a e p oblem ela ed
o p olonged s a a ion in ea ly sepa a ed nu sing cal es.
Key wo ds: lep in, gh elin, ea ly sepa a ion, la e clea ance, neona al cal es and animal wel a e.
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Índice
1. In oducción. 8
1.1. Ca ac e ización del sec o bo ino de leche en Galicia. 8
1.2. Sis ema de sepa ación mad e-c ía en las g anjas de bo ino
leche o. 9
1.2.1. Tipos de sis emas. 9
1.2.2. E ec os del sis ema de sepa ación mad e-c ía sob e la
salud del e ne o. 10
1.2.2.1. Dia eas y pa ógenos en é icos. 10
1.2.2.2. P oblemas espi a o ios. 12
1.2.2.3. Inmunidad. 12
1.2.2.4. Mo alidad. 13
1.2.3. E ec os del sis ema de sepa ación mad e-c ía sob e la
salud de la mad e. 14
1.2.4. E ec os del sis ema de sepa ación mad e-c ía sob e el
compo amien o y el bienes a . 14
1.2.5. E ec os del sis ema de sepa ación mad e-c ía sob e la
p oducción. 16
1.2.5.1. C ecimien o de los e ne os. 16
1.2.5.2. Rendimien o leche o. 16
1.3. Sis ema de alimen ación en e ne os lac an es. 17
1.4. Indicado es de hamb e en ganado bo ino. 18
1.4.1. Lep ina. 19
1.4.2. Gh elina. 20
2. Obje i o. 22
3. Ma e ial y mé odos. 23
3.1. Á ea de es udio y animales mues eados. 23
3.2. Análisis se ológicos. 24
3.3. Análisis es adís icos. 24
4. Resul ados. 25
5. Discusión. 29
6. Conclusiones. 32
7. Bibliog a ía. 33
7
Ab e ia u as
Minis e io de Ag icul u a Pesca y Alimen ación: MAPA
Agencia Eu opea de Segu idad Alimen a ia: EFSA
Inmunoglobulinas: Ig
Mycobac e ium a ium subsp. Pa a ube culosis: MAP
Real Dec e o: RD
Milimol: mmol
Li o: L
Kilog amo: Kg
Sis ema Ne ioso Cen al: SNC
Kilo Dal on: KD
Ho mona de c ecimien o: GH
Re oluciones po minu o: pm
Enzimoinmunoanálisis de adso ción: ELISA
Nanog amos: ng
Milili o: ml
Valo de signi icación: p
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1. In oducción.
1.1. Ca ac e ización del sec o bo ino de leche en Galicia.
El sec o bo ino de leche es el p incipal agen e económico del mundo u al de Galicia.
Según las úl imas es adís icas, en es a egión hay censadas más de 330.000 hemb as mayo es de
24 meses de la especie bo ina dedicadas a la p oducción lác ea (40% del o al del país), y más de
110.000 no illas de en e 8 y 24 meses (41% del o al del país), siendo un 96% de aza F isona
(Minis e io de Ag icul u a, Pesca y Alimen ación [MAPA], 2020, 2023).
Figu a 1: P opo ción del censo medio de acas mayo es de 24 meses en cada comunidad
au ónoma desde 2018 a 2022 (MAPA, 2023).
Con espec o al núme o de animales po explo ación, oda ía encon amos casi 4.800
explo aciones po debajo de los 65 animales y sólo unas 120 explo aciones con más de 300
animales (MAPA, 2020). Po o o lado, la media de acas po ganade ía, en Galicia hay 50 acas
mayo es de 24 meses po explo ación, un da o in e io a la media del país (69 acas/explo ación),
con un endimien o leche o de 9.986 kg/ aca, lige amen e supe io al de la media española (9.179
kg/ aca) (MAPA, 2023).
9
1.2. Sis ema de sepa ación mad e-c ía en las g anjas de bo ino
leche o.
1.2.1. Tipos de sis emas.
El sis ema con encional de manejo de los e ne os de ap i ud lác ea, consis e en la
sepa ación del e ne o y su mad e en el momen o del nacimien o (sepa ación emp ana). En es e
sis ema, el alimen o se les adminis a a los animales de mane a a i icial, ya sea de o ma manual
po pa e del ganade o, deposi ando los lac o emplazan es en cubos con e inas o en bibe ones, o
median e un disposi i o au omá ico, en el que se egula el núme o de omas y la can idad de leche
consumida po cada e ne o. Con es e sis ema se puede con ola mejo an o la calidad como la
can idad de alimen o que eciben los e ne os, además de pode ap o echa la o alidad de la leche
p oducida po la mad e pa a su en a, y e i a el es ablecimien o del ínculo ma e no- ilial, que
pos e io men e es más di ícil de ompe (Whalin e al., 2021).
El alojamien o de los e ne os en el sis ema con encional puede se indi idual o po
g upos. Es e ipo de sis ema iene consecuencias nega i as elacionadas con el bienes a , po la
incapacidad de ealiza conduc as explo a o ias, disminución del e lejo de succión, as o nos
espi a o ios y gas oin es inales, es és, disminución de las conduc as de juego (especialmen e en
los alojamien os indi iduales) y aumen o del hamb e p olongada (EFSA, 2023).
Po o o lado, el o o sis ema de sepa ación mad e-c ía consis e en man ene al e ne o
con su mad e du an e al menos 24 ho as (sepa ación a día), pe mi iéndole alimen a se
di ec amen e de la mad e con la ecuencia y du ación que lo ha ían en un en o no na u al, y
pudiendo es ablece un mayo ínculo mad e-c ía. En es e sis ema, ecomendado po la EFSA en
su úl imo in o me (EFSA, 2023), el e ne o es ablece un ue e ínculo con su mad e du an e la
p ime a semana de ida. Es e ínculo i á disminuyendo du an e las siguien es semanas pa a
es ablece nue as elaciones con e ne os de simila edad. Además, el mayo iempo de lamido
con ibuye a seca al e ne o, es imula el ape i o ma e no y po encia el e ec o de los opioides
sec e ados en pos -pa o po la mad e, mi igando el dolo (EFSA, 2023).
En condiciones na u ales los e ne os suelen mama en e 4 y 9 eces al día (F öbe g &
Lid o s, 2009; Johnsen e al., 2016). Con o me a pasando el iempo, el núme o de eces que el
e ne o mama a disminuyendo, a la ez que aumen a el iempo de succión. Cuando se p oduce
una sepa ación emp ana de la mad e y el e ne o, el manejo debe ía asemeja se lo máximo posible
a las condiciones na u ales pa a no al e a la exp esión de su compo amien o.
16
A con inuación, en la Tabla 2 se expone, a modo de esumen, los e ec os de es os dos
mé odos de manejo sob e el compo amien o y bienes a .
Tabla 2: E ec os sob e el compo amien o y bienes a de los di e en es sis emas de manejo
sepa ación mad e-c ía.
Sepa ación emp ana
Sepa ación a día
Neo obia alimen a ia
Aumen o
Disminución
Succión no nu i i a
Aumen o
Disminución
Ac i idad y con ac o con los
humanos.
Meno ac i idad y mejo
con ac o con los humanos.
Mayo ac i idad y peo
con ac o con los humanos.
Vocalizaciones agudas y
blanco isible de los ojos.
Aumen o de las ocalizaciones
y del blanco isible de los
ojos.
Disminución de las
ocalizaciones y del blanco
isible de los ojos.
Es és
Aumen o.
Disminución
1.2.5. E ec os del sis ema de sepa ación mad e-c ía sob e la p oducción.
C ecimien o de los e ne os.
Con espec o al c ecimien o, los e ne os en el sis ema de sepa ación a día c ecen más
du an e la lac ancia po la mayo inges a de leche, pe o, ienen un índice de c ecimien o
meno que los e ne os de sepa ación emp ana en las semanas pos e io es al des e e. Es o es
debido a que los e ne os del sis ema de sepa ación emp ana es án más acos umb ados al
consumo de alimen os sólidos que los e ne os del sis ema de sepa ación a día, en el cual solo
han inge ido la leche ma e na y, po lo an o, necesi an un iempo de adap ación a la alimen ación
sólida (Ma ge ison e al., 2002; F öbe g e al., 2011).
Rendimien o leche o.
La p oducción lác ea de las acas en los dis in os sis emas de des e e no a ía de mane a
signi ica i a. Los es udios ealizados has a la echa no encuen an un e ec o nega i o del con ac o
aca- e ne o en la p oducción de leche a la go plazo, ya que sólo se pod ía conside a una meno
p oducción de leche, si la di e encia en e las acas que es án jun o a sus c ías y las que es án
sepa adas, excede la leche consumida po pa e del e ne o. Además, hay que conside a los cos es
adicionales que supone la comp a de sus i u os lác eos pa a la lac ancia a i icial (Meaghe e al.,
2019).
17
1.3. Sis emas de alimen ación en e ne os lac an es.
En la alimen ación de los e ne os, se han obse ado múl iples di e encias en la
p esen ación, can idad y o mulación. En es e pun o abo da emos los dis in os mé odos de
alimen ación, así como la legislación que lo egula.
En p ime o luga , los sus i u os lác eos pueden suminis a se a los e ne os en dis in as
p esen aciones, siendo las p incipales en cubos o en e inas. Sob e es os dos ipos de
p esen aciones, Jensen & Budde (2006) ealiza on un es udio en el que comp oba on que en la
alimen ación a a és de e inas se educe la incidencia de succiones no nu i i as, ya que los
e ne os a dan más en inge i la leche en compa ación con los e ne os alimen ados median e
cubos. Del mismo modo, los e ne os alimen ados median e cubos lamen con más ecuencia los
acceso ios de las ins alaciones o a o os e ne os, aumen ando el aseo social, en compa ación con
los alimen ados median e e inas.
Con espec o a la compe encia, és a ue mayo en los luga es donde se alojaba a los
e ne os en g upo, en compa ación con los e ne os alojados indi idualmen e o po pa ejas,
gene ando una mayo asa de inges ión en los g upos nume osos (Babu e al., 2004). Es o se
de e minó po la ecuencia de cambio de e ina o de cubo, que se eía más acen uada cuando la
alimen ación es aba es ingida, po lo que se sugie e que cuando se u ilice una alimen ación
es ic i a, es a ambién sea selec i a, pa a que odos los e ne os engan acceso a la misma
can idad de alimen o (Jensen & Budde, 2006).
En cuan o a la can idad de alimen o apo ada, Khan e al. (2011) y Palczynski e al. (2020)
indican que, al nace , el e ne o debe ecibi una can idad de leche equi alen e al 20% de su peso,
di ido al menos en dos omas dia ias. Es a ecomendación ha ido aumen ando en los úl imos años,
pe o po aho a, oda ía hay di e encias signi ica i as en cuan o a la can idad de alimen o
consumido y a la ganancia de peso an es del des e e, con espec o a los e ne os alimen ados ad
libi um (Jaspe & Wea y, 2002).
Una al e na i a pa a equipa a esa di e encia en la can idad de leche inge ida en e un
sis ema y o o se ía aumen a el iempo que pasa el e ne o con su mad e. Asheim e al. (2016)
compa a on es os dos sis emas y concluye on que una lac ancia p olongada del e ne o jun o con
la mad e pod ía se en able pa a las explo aciones, además de aumen a la ganancia de peso de
los e ne os y mejo a el bienes a y la salud an o de las acas como de las c ías.
18
Con espec o a la alimen ación de los e ne os, la legislación igen e es la Di ec i a del
Consejo 2008/119/CE, del 18 de diciemb e de 2008 a ni el eu opeo, y el Real Dec e o 1047/1994,
del 20 de mayo a ni el nacional. Es a legislación lo que indica es que odos los e ne os debe án
ecibi una alimen ación adecuada a sus necesidades, incluyendo una can idad su icien e de hie o
y una can idad mínima de ib a di idida en al menos dos omas dia ias, a pa i de las dos semanas
de edad (MAPA, 1994; Consejo de la Unión Eu opea, 2009).
Las de iciencias de hie o en la ación es án elacionadas con una meno concen ación de
hemoglobina. La concen ación mínima de hemoglobina que indica la legislación ac ual pa a los
e ne os es de 4.5 mmol/L, muy po debajo del ango isiológico (5.64–7.11 mmol/L). Es o es así,
po que, concen aciones de hemoglobina po debajo de las ma cadas po la legislación es án
asociadas a una inmunidad de icien e, mayo p e alencia de dia eas, en e medades espi a o ias y
meno es ganancias de peso (EFSA, 2023). En cuan o a la can idad de ib a apo ada en la ación, la
EFSA ecomienda inclui 1kg/día de ma e ia seca pa a comple a el iempo de umia adecuado, que
se es ima en el 30% del iempo dia io (EFSA, 2023).
Po úl imo, en el RD 1047/1994 se especi ica que no se debe á a a a los e ne os, excep o
aquellos que se encuen en alojados en g upo, y solamen e du an e el momen o de la lac ancia o la
oma del lac o emplazan e, siemp e y cuando es e pe iodo no sea supe io a una ho a. Es as a adu as
es a án diseñadas pa a e i a odo ipo de he idas y es angulaciones (MAPA., 1994).
1.4. Indicado es de hamb e en ganado bo ino.
La egulación de la alimen ación en mamí e os es á basada en la in e acción en e a ios
indicado es. Es o incluyen ma cado es de saciedad que pueden se a co o y la go plazo, y
ma cado es de hamb e. Los ma cado es de saciedad a co o plazo in o man al sis ema ne ioso
cen al (SNC) sob e la can idad inge ida en la úl ima comida; el umen y el in es ino delgado
poseen ecep o es que esponden a la p esencia de alimen o. Es a in o mación llega al SNC que
inhibi á la inges a. También hay ecep o es que esponde a la dis ensión, po lo que los alimen os
más ib osos, que gene an más dis ensión, lle an a mayo saciedad. Los ma cado es de saciedad
a la go plazo in o man al SNC sob e la can idad de ejido adiposo en el cue po del animal. Así,
los adipoci os p oducen lep ina, an o más cuan o mayo amaño es el amaño de es os. La
gh elina, po el con a io, es p oducida undamen almen e po células epi eliales del ac o
diges i o, as el ayuno, ac uando como ma cado de hamb e (Engel & Je lhag, 2014).
19
1.4.1. Lep ina.
En 1994 se encon ó una ho mona sec e ada po el ejido adiposo denominada lep ina
(Cla ijo e al., 2018). La lep ina es una ho mona de 146 aminoácidos, o mada a pa i de un
p ecu so de 167 aminoácidos cuyo peso molecula es de 16 KD (San Miguel e al., 2006, Figu a
2). Los ecep o es de es a ho mona se encuen an dis ibuidos po odo el o ganismo. Los que
ienen mayo longi ud (OB-Rb) es án en mayo p opo ción en el hipo álamo y se enca gan de
ansmi i la in o mación al SNC, mien as que los de meno longi ud (OB-Ra, OB-Rc, OB-Rd,
OB-Re y OB-R ) los encon amos en el iñón, pulmón o ce eb o, y son los enca gados del
anspo e de la lep ina (San Miguel e al., 2006).
La p incipal unción de la lep ina es la de indicado de adiposidad e indicado de saciedad
pues o que p incipalmen e es á sec e ada po el ejido adiposo blanco. Aunque ambién o os
ó ganos son capaces de sec e a una pequeña p opo ción de es a ho mona, como la placen a, la
mucosa gás ica, el músculo esquelé ico o el ejido mama io (Ahima & Flie , 2000, Cammiso o
e al., 2005). Po es e mo i o, la can idad de lep ina que encon amos en el o ganismo es
di ec amen e p opo cional a la can idad de ejido adiposo del cue po, la cual es mayo en los
depósi os subcu áneos que en los isce ales.
O a unción secunda ia de la lep ina es la de egula los mecanismos neu oendoc inos
esponsables de la pa ición de la ene gía, po lo que cuando la can idad de lep ina disminuye, po
la disminución de las ese as g asas, se p omue e la conse ación de ene gía pa a las ac i idades
i ales, p escindiendo de o as como la ep oducción (Block e al., 2003).
20
Po o o lado, la lep ina p oducida po las células de la mucosa gás ica, jun o al jugo
gás ico hacen que disminuya la sec eción de pepsina y de ácido gás ico (B zozowski e al.,
1999), inc emen a los ni eles del anspo ado de oligopép idos Pep-T1 e inhibe el anspo e de
glucosa a ni el del in es ino delgado (Duc oc e al., 2005), además de inhibi el ape i o y el
me abolismo a ni el hipo alámico (Hakansson e al., 1998).
1.4.2. Gh elina.
La gh elina ue descubie a en 1999 al pu i ica la del es ómago de una a a. En el caso de
los umian es se a a de un pép ido de 27 aminoácidos con un és e n-oc anoilo en la egión N-
e minal lo que le pe mi e es imula la sec eción de soma o opina (Thida Myin e al., 2008,
Magdaleno, 2013, Figu a 3). La gh elina se di ide en dos iso o mas: la gh elina des-acil,
elacionada con la disminución de la inges a de alimen os, la mo ilización de las ese as g asas,
el balance ene gé ico nega i o y el aciamien o gás ico, y la gh elina acilada, des acando en la
sec eción de la ho mona de c ecimien o (GH) (Thida Myin e al., 2006).
La gh elina se p oduce p incipalmen e en las células endoc inas inmuno eac i as X/A
localizadas en la capa mucosa del abomaso, es ás células es án asociadas con los capila es
sanguíneos que pe mi en la dis ibución de la gh elina (Ande son e al., 2005).
Las p incipales unciones de la gh elina se basan en aumen a la can idad de alimen o
inge ido, inc emen ando la mo ilidad gás ica, la sec eción de ácido gás ico y eniendo un papel
impo an e en el aumen o de las ese as de ácidos g asos (Miu a e al., 2004). Además, se
descub ió el papel de la gh elina en el in e cambio de in o mación en e el es ómago y la glándula
pi ui a ia, pa icipando en la sec eción de GH (Dieguez & Casanue a, 2000).
21
La gh elina ha sido de ec ada en una impo an e egión del con ol del ape i o como es el
núcleo a cua o hipo alámico. Es as neu onas que con ienen gh elina en ían ib as e e en es a las
neu onas que con ienen el neu opép ido Y, es imulando la libe ación de es e pép ido o exigénico,
y ex endiéndose po el núcleo pa a en icula , el á ea la e al hipo alámica y el onco ence álico,
que son las á eas donde se egula la inges a de comida y las unciones gas oin es inales (Inui,
1999; Hosoda e al., 2006)
El e ec o de la gh elina a ni el endoc ino se demos ó median e un expe imen o en el que
inyec aban gh elina de o ma in a enosa en a as (Da e e al., 2000). Es e expe imen o concluyó
que as la adminis ación de gh elina la libe ación de co isol, p olac ina, la ho mona
ad enoco icó opa y la ho mona de c ecimien o p o agoniza on un ascenso signi ica i o,
obse ándose ambién e ec os anabólicos como el aumen o del ape i o y de la adiposidad.
La egulación de la gh elina depende del balance ene gé ico, inc emen ándose los ni eles
plasmá icos cuando hay una p i ación de alimen os y disminuyendo as la comida, pe o no es á
cla o los ac o es que in e ienen especí icamen e en la sec eción o inhibición de la gh elina
(Hosoda e al., 2006).
Uno de los elemen os que se pensaban que ac i a ía la sec eción de gh elina e a la
dis ensión gás ica, pe o cuando el es ómago se dila a po la inges ión de agua, los ni eles de
gh elina no aumen an (Hosoda e al., 2006), po lo que el aumen o o disminución de los ni eles
de gh elina no es a ían egulados po la dis ensión del es ómago si no po el alo nu i i o del
alimen o inge ido.
Desde el descub imien o de las ho monas gh elina y lep ina se han ealizado múl iples
abajos sob e su uncionalidad y u ilidad de es as ho monas an o en a as como en humanos,
pe o en e ne os la in o mación de la que disponemos no es an ex ensa.
Po ello, en es e es udio in es igamos el compo amien o de las ho monas lep ina (señal
de saciedad) y gh elina (señal de hamb e) en e ne os neona os de ap i ud lác ea en dos sis emas
de sepa ación mad e-c ía con un acceso a la alimen ación en los p ime os días de ida di e en e:
es ingida en e ne os de sepa ación emp ana, y a demanda en e ne os de sepa ación a día. Es o
puede a ec a a sus necesidades alimen icias, y po an o a su desa ollo y bienes a .
22
2. Obje i o.
El obje i o de es e abajo consis e en de e mina y compa a las concen aciones
plasmá icas de lep ina y gh elina en e ne os Hols ein neona os a lo la go de es mues eos, en
dos sis emas de manejo de sepa ación mad e-c ía di e en es: sepa ación emp ana (sepa ando a la
mad e y al e ne o inmedia amen e as el pa o) y sepa ación a día (man eniendo a la aca y al
e ne o al menos 24 ho as pos -pa
23
3. Ma e ial y mé odos.
3.1. Á ea de es udio y animales mues eados.
Es e abajo ue ealizado en la comunidad au ónoma de Galicia (España), comunidad
que cuen a con el 55% de las explo aciones de p oducción leche a de odo el país. Es o se aduce
en 7.200 explo aciones ac i as ap oximadamen e (MAPA, 2020), apo ando el 40% de la
p oducción lác ea y casi 5.200 oneladas anuales (MAPA, 2023).
El es udio se lle ó a cabo en 8 ganade ías de aza Hols ein in eg adas en Con ol leche o
o icial. Cua o de las ganade ías ealizaban un sis ema de sepa ación emp ana y las o as cua o
ganade ías ealizaban un sis ema de sepa ación a día. En cada uno de los dis in os g upos de
ganade ías se analiza on 28 e ne os, en los cuales se ealiza on es omas de mues as de sang e
(Figu a 4). En el g upo de explo aciones con sepa ación a día, la p ime a oma de mues as se
ecogió an es de ealiza se la sepa ación, la segunda oma de mues as ue dos días después de la
sepa ación y la e ce a oma de mues as se ealizó a los 7 días de la sepa ación. En el g upo de
explo aciones con el sis ema de sepa ación emp ana, se oma on mues as de sang e de los
e ne os con un diseño de días as el nacimien o equi alen e al g upo de explo aciones con
sepa ación a día. En es e g upo, en odos los mues eos los e ne os ya se encon aban sepa ados
de sus mad es.
Figu a 4. Diseño del expe imen o.
24
La sang e ue ecogida median e enopunción de la ena yugula en ubos Vacu aine sin
an icoagulan e. Después se man u ie on a empe a u a ambien e du an e dos ho as y se
cen i uga on du an e 3 minu os a 4.000 pm. Una ez ob enido el sue o, és e se congeló has a la
ealización de los análisis de labo a o io.
3.2. Análisis se ológicos.
Las mues as de sue o ue on analizadas median e es ELISA come ciales siguiendo las
ecomendaciones del ab ican e.
Pa a de e mina la concen ación de lep ina se u ilizó el Bo ine Lep(Lep in) ELISA Ki
de la casa come cial FineTes . El ki de de ección de lep ina se basa en el ensayo
inmunoabso ben e ligado a enzimas ipo sándwich, median e un an icue po an i-Lep ina y un
an icue po an i-Lep ina bio inilado que se u iliza como el an icue po de de ección.
El es u ilizado pa a analiza la concen ación de gh elina ue el Enzyme-linked
Immunoso ben Assay Ki Fo Gh elin (GHRL) de la casa come cial Cloud-Clone Co p. El ki de
de ección de gh elina consis e en el empleo de la écnica de inmunoensayo compe i i o de
inhibición enzimá ica, en e la gh elina bio inilada y la gh elina no bio inilada con el an icue po
especí ico pa a la gh elina.
Una ez ob enidos los alo es de densidad óp ica (a 450nm), se calculó la concen ación
de lep ina y gh elina, a pa i de es os alo es, empleando un modelo logís ico de 4 pa áme os.
3.3. Análisis es adís ico.
Las p uebas es adís icas se ealiza on u ilizando SPSS 15.0. Pa a e alua la e olución de
las concen aciones de lep ina y gh elina a lo la go de los es mues eos en los dos ipos de g anjas
se u ilizó el es de F iedman. En cambio, pa a compa a las concen aciones ob enidas de lep ina
y gh elina en e los dos ipos de g anjas, du an e cada uno de los es mues eos, se u ilizó el es
U de Mann-Whi ney. P e iamen e a cada compa ación en e g upos se ealizó la p ueba de
homogeneidad de a ianzas.
25
4. Resul ados.
Las mues as analizadas en los dos g upos de explo aciones du an e los es mues eos
e elan que las concen aciones de lep ina y gh elina en el sis ema de sepa ación emp ana son
signi ica i amen e supe io es a la encon adas en el sis ema de sepa ación a día (Tablas 3 y 4).
Po o o lado, las concen aciones de lep ina y gh elina no a ia on signi ica i amen e a
lo la go de los es mues eos, man eniéndose en alo es semejan es a lo la go del iempo
(G á icas 1 y 2).
La G á ica 1 mues a la concen ación de lep ina, ep esen ada en una g á ica de medias,
en los dos g upos de es udio a lo la go de los 3 mues eos. En ella se obse a la di e encia de
concen aciones, y como son mayo es en el sis ema de manejo de sepa ación emp ana.
G á ica 1: Concen ación media de lep ina du an e los es mues eos en las dos ipologías de
g anjas.
En la Tabla 3 se p esen an los da os de la concen ación de lep ina, medida en ng/ml, en
los es mues eos. Asimismo, se mues an la media, la des iación ípica, y el in e alo de
con ianza (95%). Además, se mues an los esul ados ob enidos de U de Mann-Whi ney y los
alo es de signi icación, ob enidos al compa a las concen aciones de gh elina y lep ina en e las
dos ipologías de g anjas, pa a cada uno de los es mues eos. En ellos podemos comp oba que,
las di e encias signi ica i as de las concen aciones ob enidas se encuen an po debajo del 0,05.
32
6. Conclusiones.
Las conclusiones ob enidas al e mina es e es udio se ían las siguien es:
En las ganade ías de p oducción lác ea, la sepa ación emp ana de e ne os neona os
de sus mad es gene a concen aciones signi ica i amen e más al as de lep ina y
gh elina en compa ación con la sepa ación a día.
La di e encia de concen aciones pod ía a ibui se a ac o es como di e encias en el
co isol basal y la ecuencia de alimen ación. Los e ne os alimen ados
a i icialmen e end ían pe iodos más la gos de ayuno (meno ecuencia de omas)
en compa ación con los e ne os amaman ados po sus mad es, que end ían una
alimen ación más ecuen e y consumi ían más leche. Po o o lado, los e ne os de
sepa ación emp ana end ían ni eles más ele ados de co isol po el es és gene ado
al sepa a se de sus mad es y po la in e acción con un nue o ambien e.
33
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