TESIS DE DOCTORADO
CARACTERIZACIÓN MOLECULAR Y
POTENCIAL ZOONÓTICO DE AISLADOS DE
CRYPTOSPORIDIUM
EN RUMIANTES
DOMÉSTICOS Y SU RELACIÓN CON LA
EDAD
Es he Na a o González
ESCUELA DE DOCTORADO INTERNACIONAL
PROGRAMA DE DOCTORADO EN MEDICINA Y SANIDAD VETERINARIA
LUGO
2017
DECLARACIÓN
DEL AUTOR DE LA TESIS
Ca ac e ización molecula y po encial zoonó ico de aislados de
C yp ospo idium
en umian es domés icos y su elación con la edad
D./Dña.
Es he Na a o González
P esen omi esis,siguiendoelp ocedimien oadecuadoalReglamen o,ydecla oque:
1) La esisaba calos esul adosdelaelabo acióndemi abajo.
2) Ensucaso,enla esissehace e e enciaalascolabo acionesque u oes e abajo.
3) La esisesla e siónde ini i ap esen adapa asude ensaycoincideconla e siónen iadaen
o ma oelec ónico.
4) Con i moquela esisnoincu eenningún ipodeplagiodeo osau o esnide abajos
p esen adospo mípa alaob encióndeo os í ulos.
En Lugo, 1 de diciemb e de 2017
Fdo. Es he Na a o González
AUTORIZACIÓN
DEL
DIRECTOR
/
TUTOR DE LA
TESIS
Ca ac e ización molecula y po encial zoonó ico de aislados de
C yp ospo idium
en umian es domés icos y su elación con la edad
D. Pablo Díaz Fe nández
Dña.
Pa ocinio Mo ondo Pelayo
D. Pablo Díez Baños
INFORMA/N:
Que la p esen e esis, co esponde con el abajo ealizado po Dña. Es he Na a o González, bajo
nues a di ección, y a
u o izamos
su
p esen ación
, conside ando
que eúne l os
equisi os
exigidos en el R
eglamen o
de Es udios de
Doc o ado de la USC,
y
que
como di ec o es de
és a
no incu e en las causas de
abs ención es ablecidas
en Ley 40/2015.
En Lugo, 1 de diciemb e de 2017
Fdo. Pablo Díaz
Fdo. Pa ocinio Mo ondo
Fdo. Pablo Díez
FINANCIACIÓN:
Es e abajo se ha ealizado g acias a la concesión de los
siguien es p oyec os de in es igación:
Consejo Nacional de Becas de China (CSC). Con oca o ia de
Becas del Gobie no Chino 2016-2107. “P og ama de Es ancia de
In es igación (Senio Schola P og am)”. Con enio Bila e al del
Minis e io de Educación de España con el Minis e io de Educación de
la República Popula China (01/03/2017- 31/07/2017).
Dia eas neona ales en umian es: nue as es a egias basadas
en a ances molecula es y en el análisis in eg ado de
en e opa ógenos ecuen es y eme gen es” (AGL2016-76034-P).
Minis e io de Economía y Compe i i idad. In es igado esponsable:
Mª Pa ocinio Mo ondo Pelayo.
Consolidación e Es u u ación. Redes GI-1702 RUMIGAL.
Rede de es udo mul idisciplina dos uminan es en Galicia.
Conselle ía de Cul u a, Educación e O denación Uni e si a ia (2017-
2019). In es igado esponsable: Pablo Díez Baños.
Ayuda pa a Consolidación y Es uc u ación de Unidades de
In es igación Compe i i as del Sis ema Uni e si a io de Galicia.
G upos de Re e encia Compe i i a (GR2015/003). Conselle ía de
Cul u a, Educación e O denación Uni e si a ia (2015-2018).
In es igado esponsable: Pablo Díez Baños.
PUBLICACIONES:
Pa e de los esul ados ob enidos en el desa ollo de es a Tesis
han dado luga a las siguien es publicaciones:
A.- A ículos de in es igación:
DÍAZ, P.; SOILÁN, M.; NAVARRO, E.; PÉREZ, A.; CABANELAS,
E.; PRIETO, A.; DÍAZ, J.M.; LÓPEZ, C.; PANADERO, R.;
FERNÁNDEZ, G.; MORRONDO, P.; DÍEZ-BAÑOS P. (2014).
C ip ospo idiosis en umian es. Re is a Técnica Ganade a:
Ganade ía, 94: 44-48.
DÍAZ, P.; QUÍLEZ, J.; PRIETO, A.; NAVARRO, E.; PÉREZ-CREO,
A.; FERNÁNDEZ, G.; PANADERO, R.; LÓPEZ, C.M.; DÍEZ-
BAÑOS, P.; MORRONDO P. (2015). C yp ospo idium species
and sub ype analysis in dia hoeic p e-weaned lambs and goa
kids om no h-wes e n Spain. Pa asi ology Resea ch, 114 (11):
4099-4105.
CABANELAS, E., DÍAZ, P., NAVARRO, E., PÉREZ-CREO, A.,
PRIETO, A., DÍAZ-CAO, J. M., PANADERO, R., LÓPEZ, C.,
FERNÁNDEZ, G., DIEZ-BAÑOS, P., MORRONDO, P. (2015).
Dia eas de e iología pa asi a ia en e ne os. P oducción Animal,
289: 40-45.
DÍAZ, P.; GÓMEZ-COUSO, H.; NAVARRO, E.; PÉREZ-CREO, A.;
REMESAR, S.; PRIETO, A.; LÓPEZ, C.M.; PANADERO, R.;
ARES-MAZAS, E.; MORRONDO P.; DÍEZ-BAÑOS, P. (2017).
De ección de Gia dia y C yp ospo idium en co zos aba idos en
Galicia. Bole ín de la Asociación del Co zo Español, 15: 135-
140.
B. A ículos de di ulgación:
GARCÍA MENIÑO, I.; DÍAZ, P.; GÓMEZ, V.; NAVARRO, E.;
PÉREZ, A.; CABANELAS, E.; PRIETO, A.; DÍAZ, J.M.;
SOILÁN, M.; LÓPEZ, C.; PANADERO, R.; FERNÁNDEZ, G.;
MORRONDO, P.; DÍEZ-BAÑOS, P.; MORA, A. (2014).
Dia eas neona ais en xa os: si uación en Galicia. Re is a de la
Asociación de F isona Gallega (AFRIGA), 113: 86-92.
CABANELAS, E., DÍAZ, P., PÉREZ-CREO, A., NAVARRO, E.,
PRIETO, A., DÍAZ-CAO, J. M., LÓPEZ, C., PANADERO, R.,
FERNÁNDEZ, G., MORRONDO, P., DIEZ-BAÑOS, P. (2016).
Es a exias de con ol das p incipais pa asi oses do gando acún.
Re is a de la Asociación de F isona Gallega (AFRIGA), 123: 2-
7.
C. Con ibuciones a cong esos:
MORRONDO PELAYO, P.; NAVARRO, E.; DÍAZ, P.; PRIETO, A.;
PÉREZ, A.; LÓPEZ, C.M.; FERNÁNDEZ, G.; DÍEZ-BAÑOS. P.
(2014). Iden i ica ion o species o C yp ospo idium in pos -
weaned cal es and adul ca le om NW Spain. Join ISP BAVP
EVPC Con e ence. Dublin, I eland. 12-13 June 2014.
DÍAZ, P.; NAVARRO, E.; PRIETO, A.; PÉREZ, A.; PANADERO,
R.; LÓPEZ, C.M.; FERNÁNDEZ, G.; DÍEZ-BAÑOS, P.;
MORRONDO P. (2015). In ec ions by C yp ospo idium spp. in
pos -weaned and adul small uminan s. XXII In e na ional
Cong ess o Medi e anean Fede a ion o Heal h and
P oduc ion o Ruminan s. Sassa i, I aly. 17-20 June 2015.
y po hace me sen i que, si amaba algo, se ía capaz de log a lo con
pe se e ancia y es ue zo.
A And é, a mi alma compañe a, a esa pe sona que iene un
doc o ado en que e me y en apoya me en las decisiones que omo.
Sabes que sin u ayuda odo es o nunca hubiese sido posible. G acias
po se el g an homb e que camina a mi lado.
Índice
1 ANTECEDENTES DEL TEMA........................................................................ 3
1.1. BIOLOGÍA DE C yp ospo idium .............................................................. 3
1.1.1. Taxonomía ...................................................................................... 3
1.1.2. Ciclo biológico ................................................................................ 7
1.1.3. Fuen es de con agio y o mas de ansmisión .................................. 10
1.2. EPIDEMIOLOGÍA Y PATOGENIA DE C yp ospo idium EN RUMIANTES
DOMÉSTICOS ........................................................................................ 13
1.3. DIAGNÓSTICO DE LA INFECCIÓN POR C yp ospo idium ........................ 18
1.3.1. Técnicas mic oscópicas ................................................................. 18
1.3.2. Técnicas inmunológicas ................................................................. 24
1.3.3. Técnicas molecula es ..................................................................... 27
1.3.3.1. Análisis geno ípico........................................................... 28
1.3.3.2. Análisis sub ípico ............................................................. 30
1.4. INFECCIONES POR C yp ospo idium EN RUMIANTES DOMÉSTICOS ........ 32
1.4.1. En ganado acuno ......................................................................... 32
1.4.1.1. Especies desc i as. ........................................................... 34
1.4.1.2. Relación en e la edad de los animales y las especies
iden i icadas ................................................................... 39
1.4.1.3. Sub ipos de C. pa um en ganado acuno ......................... 46
1.4.2. En ganado o ino ............................................................................ 54
1.4.2.1. Especies desc i as ............................................................ 55
1.4.2.2. Relación en e la edad de los animales y las especies
iden i icadas ................................................................... 61
1.4.3. En ganado cap ino ......................................................................... 64
1.4.3.1. Especies desc i as ............................................................ 65
1.4.3.2. Relación en e la edad de los animales y las especies
iden i icadas ................................................................... 68
1.4.4. Sub ipos de C. pa um y C. ubiqui um en pequeños umian es ....... 70
1.5. REPERCUSIONES ZOONÓSICAS EN HUMANOS ......................................... 74
2 OBJETIVOS .................................................................................................... 81
3 MATERIAL Y MÉTODOS ............................................................................ 85
3.1. CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LA ZONA Y DE LOS ANIMALES ......... 87
3.2. OBTENCIÓN Y ANÁLISIS DE LAS MUESTRAS ........................................... 90
3.2.1. Concen ación de ooquis es de C yp ospo idium y ex acción de
ADN ............................................................................................ 91
3.2.2. Análisis geno ípico ........................................................................ 92
3.2.3. Análisis sub ípico .......................................................................... 93
3.3. ANÁLISIS ESTADÍSTICO ......................................................................... 96
4 RESULTADOS Y DISCUSIÓN ...................................................................... 97
4.1. EN GANADO VACUNO............................................................................. 99
4.1.1. P e alencia de in ección ................................................................ 99
4.1.2. Análisis geno ípico: especies de C yp ospo idium ........................ 105
4.1.3. Relación en e las especies de C yp ospo idium y la edad de los
animales .................................................................................... 116
4.1.4. Análisis sub ípico ........................................................................ 122
4.2. En ganado o ino y cap ino ................................................................ 126
4.2.1. P e alencia de in ección .............................................................. 126
4.2.2. Análisis geno ípico: especies de C yp ospo idium ........................ 132
4.2.3. Especies de C yp ospo idium al conside a la edad de los
animales .................................................................................... 142
4.2.4. Análisis sub ípico ........................................................................ 147
5 CONCLUSIONS/CONCLUSIONES ............................................................ 161
6 SUMMARY/RESUMEN ............................................................................... 169
7 BIBLIOGRAFÍA ........................................................................................... 181
An eceden es del ema
3
1. An eceden es del ema
C yp ospo idium spp. es una causa ecuen e de p ocesos
dia eicos en pe sonas y animales de odo el mundo y, especialmen e,
en indi iduos jó enes o inmunocomp ome idos, pa a los cuales
oda ía no se dispone de un a amien o a macológico e icaz (Bouzid
e al., 2013). Además, es e p o ozoo pa ási o ambién puede a ec a a
indi iduos apa en emen e sanos (Bouzid e al., 2013; Ga cía Meniño,
2013; Valde ey, 2017).
1.1. BIOLOGÍA DE C yp ospo idium
1.1.1. Taxonomía
Una de las á eas de in es igación más con usas y que más cambios
ha expe imen ado en los úl imos años es la ca ac e ización
axonómica de las especies de C yp ospo idium. Desde el pun o de
is a clásico, C yp ospo idium spp. se si úa den o del Phylum
Apicomplexa, que ambién incluye a o os pa ógenos de impo ancia
médica y e e ina ia, como Eime ia o Isospo a. El géne o
C yp ospo idium se incluye en la Clase Spo ozoasida, Subclase
Coccidiasina, O den Eucoccidio ida, Subo den Eime io ina, Familia
C yp ospo idiidae, que únicamen e con iene es e géne o (S é e y
Va ga, 2000). Todas las especies conocidas de C yp ospo idium son
monoxenas y poseen ca ac e ís icas p opias que las di e encian de
o os coccidios: (i) ooquis es sin espo ocis os y con cua o
espo ozoí os; (ii) o mación de ooquis es de pa ed ina que pe mi en la
au oin ección y (iii) p esencia de una acuola pa asi ó o a en la célula
hospedado a de localización in acelula , pe o ex aci oplasmá ica
(Wa d y Wang, 2001). Sin emba go, y debido a las simili udes
mic oscópicas, molecula es, genómicas y bioquímicas exis en es en e
C yp ospo idium y las g ega inas, algunos in es igado es sugi ie on
que las especies de es e p o ozoo pod ían ep esen a un “eslabón
4
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
pe dido” en e es as úl imas, que son más p imi i as, y los coccidios.
En es e sen ido, Ca alie -Smi h (2014), as e isa de enidamen e la
axonomía de las g ega inas, concluyó que algunas eug ega inas y
odas las neog ega inas es án es echamen e elacionadas con
C yp ospo idium, incluyéndolas en una nue a subclase, la
O hog ega inia; además, p opuso inclui el géne o C yp ospo idium
den o de la subclase C yp og ega ia, que ag upa a pa ási os
epicelula es de e eb ados que poseen un o gánulo alimen ado
simila al de las g ega inas, pe o que ca ece de apicoplas o.
Recien emen e, Ryan e al. (2016b) con i ma on de ini i amen e que
C yp ospo idium es una g ega ina.
El géne o C yp ospo idium incluye a a ias especies que in ec an
a nume osos e eb ados, incluyendo mamí e os, a es, peces y
ep iles. La c ip ospo idiosis humana es una in ección ela i amen e
común, con asas de se op e alencia que oscilan en e el 20-35% en
Reino Unido (Milla e al., 2002) y EE.UU. (Chappell y Okhuysen,
2002). La c ip ospo idiosis se conside ó una en e medad
an opozoonó ica du an e algún iempo, que implicaba p incipalmen e
a humanos y umian es, con C. pa um y C. hominis como los únicos
esponsables de la in ección. A pesa de que es as especies causan el
90% de los casos (Cacciò, 2005), ambién se han desc i o in ecciones
po C. elis, C. mu is, C. meleag idis, C. canis, C. suis, C. ande soni,
C. ubiqui um, C. cuniculus o el geno ipo mono de C yp ospo idium
(Xiao, 2010). C. meleag idis se conside a un pa ási o eme gen e y se
ha desc i o an o en indi iduos inmunocompe en es como
inmunosup imidos (Cacciò, 2005; Chalme s e al., 2009b). Debido a
que la in ensidad de las mani es aciones clínicas, la pa ogenicidad, el
g ado de exc eción de ooquis es, la implicación en b o es híd icos y la
incidencia a ía en e las dis in as especies del p o ozoo (Xiao y Feng,
2008), es impo an e una co ec a iden i icación de es as especies pa a
conoce el iesgo que implica pa a la salud pública, así como la
dinámica de ansmisión de las especies de C yp ospo idium p esen es
en animales (que pueden ac ua como ese o io) y en el medio
ambien e.
De modo simila a o os p o ozoos, la clasi icación de las especies
de C yp ospo idium esul a complicada ya que sus ooquis es son
An eceden es del ema
5
indis inguibles desde el pun o de is a mo ológico (Plu ze y Ka anis,
2009; Xiao, 2010; Chalme s y Ka ze , 2013). Con obje o de mejo a la
iden i icación especí ica se han desa ollado a ias écnicas de
biología molecula , y sus esul ados se han complemen ado con la
in o mación ob enida median e es udios mo ológicos,
his opa ológicos y/o de ansmisión c uzada –que pe mi en conoce la
especi icidad de hospedado . El empleo conjun o de es os mé odos,
han pe mi ido a anza y es anda iza la axonomía de es e géne o,
con ibuyendo a la alidación de di e sas especies (Cama, 2006; Xiao,
2010). Sin emba go, oda ía exis en nume osos geno ipos que no se
han podido es ablece como especies pues, a pesa de di e i de o as
po su mo ología y composición gené ica, no se dispone de los da os
p ecisos sob e sus ca ac e ís icas biológicas (Xiao e al., 2002a). En
es e sen ido, se ha suge ido que el núme o de geno ipos puede iplica
el núme o de especies. En la Tabla 1.1., se indican las 32 especies
conside adas álidas has a la echa, habiéndose econocido
ap oximadamen e unos 70 geno ipos (Xiao, 2010). Es a axonomía, en
ocasiones basada en aspec os no bien conocidos, ha supues o uno de
los mayo es obs áculos pa a comp ende adecuadamen e la
epidemiología de las in ecciones po C yp ospo idium en pe sonas y
animales (Cacciò, 2005; Sulaiman e al., 2000). Po ello, el mayo
conocimien o de sus elaciones ilogené icas ha pe mi ido a anza en
cues iones impo an es como son el po encial zoonó ico de cada
especie, su dis ibución y ansmisión en e los animales domés icos,
sil es es y el homb e. Además, su inclusión den o de las g ega inas
pe mi ió demos a su capacidad de desa ollo ex acelula y, con ello,
su impo ancia como pa ógeno ambien al (Jex e al., 2008b; Beck e
al., 2009; Thompson y Ash, 2016).
A pesa de odos los a ances e ec uados, oda ía se necesi an
nue os es udios que pe mi an da mayo solidez a la axonomía de
C yp ospo idium, lo que sin duda implica á una mejo comp ensión de
su es uc u a poblacional y de su papel en la Salud Pública (Tibay enc
y Ayala, 2014; Šlape a, 2009).
6
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Tabla 1.1. Especies de C yp ospo idium acep adas ac ualmen e como álidas y
su hospedado ipo
Especies
Hospedado /es p incipal/es
Re e encia
C. ande soni
Bo ino
Lindsay e al., 2000
C. a ium
Pája os
Holobo á e al., 2016
C. baileyi
Gallina
Cu en e al., 1986
C. bo is
Bo ino
Faye e al., 2005
C. canis
Pe o
Faye e al., 2001
C. cuniculus
Conejo, Humano
Robinson e al., 2010
C. e inacei
E izos
K ác e al., 2014
C. aye i
Cangu o ojo, o os
ma supiales
Ryan e al., 2008
C. elis
Ga os
Iseki e al., 1979
C. agile
An ibios
Ji ku e al., 2008
C. galli
A es
Ryan e al., 2003
C. hominis
homb e
Mo gan-Ryan e al., 2002
C. huwi
Poecilia e icula a
Ryan e al., 2015
C. mac opodum
Cangu o gigan e y g is
Powe y Ryan, 2008
C. meleag idis
Pa o, homb e
Sla in, 1955
C. molna i
Do ada, Lubina
Al a ez-Pelli e o y Si ja-
Bobadilla, 2002
C. mu is
Ra ón
Tyzze , 1907
C. pa um
Mamí e os
Tyzze , 1912
C. p oli e ans
Ra a opo de Á ica O ien al
K ác e al., 2016
C. yanae
Bo ino
Faye e al., 2008
C. ubeyi
Ma mo as
Li e al., 2015
C. sau ophilum
Laga o
Koudela y Moud i, 1998
C. scoph halmi
Peces
Al a ez-Pelli e o e al., 2004
C. sc o a um
Ce do
K ác e al., 2013
C. se pen is
Se pien es
Le ine, 1980
C. suis
Ce do
Ryan e al., 2004
C. yzze i
Ra ón
Ren e al., 2012
C. ubiqui um
Mamí e os
Faye e al., 2010
C. ia o um
Homb e
Elwin e al., 2012b
C. a anii
Va anus p asinus
Pa lasek e al., 1995
C. w ai i
Cobaya, conejo de indias
Ve e ling e al., 1971
C. xiaoi
O ino
Faye y San ín, 2009
An eceden es del ema
7
1.1.2. Ciclo biológico
El ciclo biológico de C yp ospo idium spp., así como los
di e en es es adios de desa ollo, es semejan e al de o os coccidios
pe enecien es al subo den Eime io ina. Es de ipo monoxeno, y odas
las ases de mul iplicación, an o sexuales como asexuales, ienen
luga en el mismo hospedado (Smi h y Rose, 1998).
El ciclo se inicia con la eliminación de ooquis es espo ulados con
las heces o sec eciones espi a o ias del hospedado in ec ado; és e es
el único es adio que se puede encon a en la ase exógena (Fig. 1.1).
Los ooquis es p esen an una ue e pa ed que pe mi e man ene la
iabilidad de los 4 espo ozoí os in e nos en condiciones ad e sas,
cons i uyendo la uen e pa a nue as in ecciones. Un hospedado
ecep i o se in ec a undamen almen e median e la inges ión de
ooquis es p esen es en el agua, alimen os o en ómi es, aunque
ambién se han desc i o in ecciones po inhalación de los mismos. A
con inuación, comienza la ase endógena donde, as la exposición a
enzimas panc eá icas y/o sales bilia es del in es ino delgado, se libe an
los 4 espo ozoí os. En condiciones expe imen ales se ha comp obado
que los ooquis es pueden enquis a se en soluciones acuosas empladas
como las que se pueden encon a en la conjun i a del ojo, ac o
espi a o io, nódulos lin á icos, es ículos, o a ios y agina (Faye e
al., 1990; Fle a e al., 1995).T as la libe ación de los cua o
espo ozoí os, se p oduce la adhesión de és os a la supe icie de las
células epi eliales del ac o gas oin es inal, aunque algunas especies
pueden halla se en el ac o espi a o io. Es a adhesión de los
espo ozoí os a la supe icie pe mi e que pene en, in adiendo la célula
hospedado a y o mando den o de ella una acuola pa asi ó o a, pe o
que se á ex aci oplasmá ica. Se p oduce así una di e enciación de los
espo ozoí os en o ozoí os uninucleados, en un p oceso conocido
como me ogonia o esquizogonia, que se ca ac e iza po a ias
di isiones nuclea es asexuales que lo con ie en en un me on e ipo I
inmadu o (célula con 6 u 8 me ozoí os). Es e, después de madu a , da
luga a ocho me ozoí os de p ime a gene ación (Cu en , 1999; S é e
y Va ga, 2000; Smi h e al., 2007; Faye , 2008; Xiao, 2010). Cada uno
de es os me ozoí os, después de su libe ación al lumen in es inal,
in ade o a célula epi elial y en ella puede segui dos caminos: (i)
14
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Además de C yp ospo idium spp., en las dia eas neona ales de los
umian es in e ienen o os agen es in ecciosos an o í icos
( o a i us, co ona i us, o o i us, no o i us, nebo i us, e c.) como
bac e ianos (Esche ichia coli, Salmonella spp., Clos idium spp.,
Campylobac e spp., e c.) pues o que son p ocesos complejos debido a
su e iología mul i ac o ial (de la Fuen e e al., 1998; de G aa e al.,
1999; Olson e al., 2004); no obs an e, ac ualmen e es e pa ási o se
conside a una de las p incipales causas de dia ea neona al en e ne os,
co de os y cab i os (de G aa e al., 1999; Lundbo g e al., 2005; Díaz
e al., 2014; Ga cía-Meniño e al., 2015).
La p incipal acción pa ógena de la mayo ía de las especies del
géne o C yp ospo idium es consecuencia de su mul iplicación ac i a
en las células epi eliales del inal del yeyuno y del íleon, que p o oca
una ápida y nume osa des ucción de las mismas, lo que se aduce en
a o ia, usión y educción de la longi ud de las ellosidades
in es inales, quedando la supe icie de abso ción muy disminuida
(Faye , 2008). En espues a a la pé dida de en e oci os, en las c ip as
in es inales se gene an nue as células, pe o con escasa capacidad
enzimá ica y de abso ción. Es os cambios p o ocan una de iciencia en
el p oceso de abso ción y diges ión de nu ien es que inaliza con la
apa ición de dia ea, que a ía desde mode ada has a aguda y que
conlle a deshid a ación (Ande son, 1981; Faye y Unga , 1986; Díaz
e al., 2014; Ce ad e al., 2017). En e los signos que ambién se
asocian a la in ección po el p o ozoo se incluyen ano exia, dolo
abdominal, apa ía, dep esión y pé dida de peso (Casey, 1991; De
G aa e al., 1999; Le ay e al., 2001), aunque ambién se han desc i o
casos de in ección asin omá ica (Ande son, 1989; Onge h y S ibbs,
1989; McCluskey e al., 1995). Los casos más g a es se ca ac e izan
po una pé dida excesi a de líquidos y elec oli os que p oduce una
acidosis me abólica, que puede esul a a al en algunas ci cuns ancias
(De G aa e al., 1999). La en e medad du a ap oximadamen e en e 3
y 12 días y se ca ac e iza po la eliminación de nume osos ooquis es
(Casemo e e al., 1997).
La c ip ospo idiosis p oduce no ables pé didas económicas en las
explo aciones. Además de las pé didas di ec as, elacionadas con la
mo alidad de los animales, se p oducen o as pé didas indi ec as
An eceden es del ema
15
como e aso en el c ecimien o y debilidad de los animales que
supe an la en e medad, a las que hay que añadi el cos e de los
a amien os y a ención e e ina ia (Díaz e al., 2014; Ga cía-Meniño
e al., 2015).
Todos los mic oo ganismos asociados con la apa ición de dia ea
en umian es neona os se pueden encon a ambién en animales
sanos. Que el animal mues e sin oma ología clínica depende de
di e en es ci cuns ancias (Figu a 1.3.), como la p esencia de ac o es
in ínsecos del animal muy elacionados con su es ado inmuni a io
(edad, el es ado nu icional, e c.) y o os ac o es ligados a las
condiciones medioambien ales y de manejo de las explo aciones
(Mo in e al., 1976; Moon e al., 1978; Ac es e al., 1979; Rados i s y
Ac es, 1983; Wal ne -Toews e al., 1986a-d).
Figu a 1.3. P incipales ac o es que in luyen en las dia eas neona ales en
umian es neona os
La con aminación del medio cons i uye uno de los ac o es más
impo an es que inc emen an la ecuencia de in ección en los
umian es (Díaz e al., 2014). En es e sen ido es necesa io ene en
cuen a que los animales in ec ados eliminan un ele ado núme o de
ooquis es con las heces, y que és os son muy esis en es a ac o es
ambien ales (Díaz e al., 2014). Así, los e ne os in ec ados pueden
llega a elimina has a 10 millones de ooquis es po g amo de heces
16
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
du an e la ase aguda de la en e medad, cons i uyendo la p incipal
uen e de con agio en las explo aciones ganade as, ci cuns ancia que
unida a la baja dosis in ec an e (10-100 ooquis es), acili a la di usión
y pe pe uación de la en e medad (Ve ga a y Quílez, 2004; Díaz e al.,
2014). La ex ema esis encia de los ooquis es a las condiciones
ad e sas del ambien e es o o ac o de g an in e és en la
epidemiología. Los ooquis es son capaces de man ene se in ec an es
en el ambien e du an e 2-6 meses a 4ºC, y has a es meses a
empe a u as de 25-30ºC, seis meses a 20º C o sie e meses a 15ºC
(Ande son, 1985; Faye e al., 1998); sin emba go, son muy sensibles
a desecación, a la congelación (-18ºC du an e 24 ho as) y a al as
empe a u as, como 70ºC (5 segundos) (Fujino e al., 2002; Ve ga a y
Quílez, 2004; Ga cía-Sánchez e al., 2014). Además, los ooquis es
esis en bien la desin ección química y no se inac i an con la mayo ía
de los desin ec an es de uso domés ico e indus ial, como clo o,
yodó o os al 4 %, clo u o de benzalconio al 10 % o c esoles al 5 %
(Xiao e al., 2004). Po el con a io, se ha comp obado que la
o malina al 10%, así como los compues os a base de pe óxido o
hid óxido de amonio al 5%, empleados du an e 18-24 ho as, eliminan
o educen de mane a no able la capacidad in ec an e de los ooquis es
(Quílez e al., 2005; Faye e al., 2008; Díaz e al., 2014; Ga cía-
Sánchez e al., 2014). Recien emen e se ha obse ado que el
a amien o de agua con ozono o con luz ul a iole a puede inac i a
los ooquis es del pa ási o, aunque no se pe mi e su uso a g an escala
(Fon án-Sainz, 2011; Gómez-Couso e al., 2012).
Po odo ello, se ha comp obado que la p esencia de
C yp ospo idium spp. es á di ec amen e elacionada con una higiene
de icien e de las ins alaciones y con un manejo inco ec o de los
animales. En es e sen ido, a ios es udios han señalado que los suelos
áciles de limpia (cemen o o empa illado), el uso dia io de
desin ec an es adecuados en las ins alaciones, el man enimien o de la
zona de pa ide a con enien emen e limpio y el empleo de cubículos
indi iduales pa a los ecién nacidos, suponen un meno iesgo de
c ip ospo idiosis (Cas o-He mida e al., 2002a; Ve ga a y Quílez,
2004; Díaz e al., 2010c; Ga cía-Meniño e al., 2014). El amaño del
ebaño ambién condiciona mucho la p esen ación de la in ección,
An eceden es del ema
17
exis iendo mayo ecuencia en los más g andes, p obablemen e po la
mayo densidad de animales, mayo ca ga de pa ógenos y meno
posibilidad de ealiza aciado sani a io, aunque dependiendo del
manejo, es a si uación puede empeo a en g anjas pequeñas (Díaz e
al., 2014). Además, un ele ado núme o de nacimien os en un co o
pe iodo de iempo a o ece el hacinamien o y un aumen o de la
p esión de in ección (Ve ga a y Quílez, 2004; Díaz e al., 2014;
Ga cía-Meniño e al., 2014).
Po o a pa e, odos aquellos ac o es que eduzcan la esis encia
del animal a la in ección a o ece án la apa ición de c ip ospo idiosis.
Los animales ecién nacidos son los más ecep i os a la in ección po
C yp ospo idium spp., posiblemen e debido a que su sis ema
inmuni a io es oda ía inmadu o (O ega-Mo a y W igh , 1994; San ín
e al., 2004; Maddox-Hy el e al., 2006; Roy e al., 2006; S a key e
al., 2006). Se ha comp obado que los an icue pos calos ales, aunque
no p o egen comple amen e en e a la in ección en umian es
neona os, educen la g a edad de los signos clínicos e inc emen an la
esis encia de los animales a o os pa ógenos en é icos (Faye e al.,
2008). Así, se ha obse ado mayo mo bilidad y cuad os más g a es
cuando la oma de calos o es insu icien e, inco ec a o de mala
calidad; es a si uación es muy ecuen e en e ne os p oceden es de
no illas de p ime pa o, pues suelen p oduci meno can idad de
calos o y de baja calidad, po lo que sus e ne os end án más
posibilidades de adqui i la in ección y p esen a la consiguien e
dia ea (Kelly y Cou s, 2000; Díaz e al., 2014; Ga cía-Meniño e al.,
2014; A senopoulos e al., 2017; Cos a e al., 2017; Gelsinge y
Hein ichs, 2017; No o e al., 2017). Además, odas aquellas
condiciones y si uaciones es esan es, como son una alimen ación
inadecuada, el hacinamien o o el man enimien o de los animales en
ins alaciones poco en iladas y húmedas, ambién aumen an
no ablemen e el iesgo de padece la en e medad (Díaz e al., 2014).
Po úl imo, en la apa ición de la dia ea hay ac o es que es án
elacionados con los en e opa ógenos. Así, es impo an e señala que
algunas cepas de es os mic oo ganismos poseen una mayo i ulencia
y causan p ocesos más g a es. Además, las in ecciones múl iples son
18
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
muy ecuen es y es án asociadas, gene almen e, a p ocesos más
g a es (Ga cía-Meniño e al., 2014, 2015).
1.3. DIAGNÓSTICO DE LA INFECCIÓN POR C yp ospo idium
Se han desc i o una g an a iedad de mé odos pa a la de ección de
C yp ospo idium spp., en e los que se incluyen écnicas
mic oscópicas, inmunológicas y molecula es. Las écnicas
mic oscópicas se u ilizan pa a iden i ica al pa ási o an o en ejidos
como en heces, y des acan po su bajo cos e, aunque se debe elegi
cuidadosamen e el mé odo de inción y isualización (Checkley e al.,
2015). Las écnicas inmunológicas y molecula es son complejas y
suponen un mayo cos e, aunque o ecen mejo es alo es de
sensibilidad y especi icidad (Siddons e al., 1992; Mo gan e al.,
1998). Sin emba go, el diagnós ico de C yp ospo idium spp. con inúa
p esen ando nume osos desa íos. El uso de di e en es mé odos de
diagnós ico y la aplicación de de e minadas écnicas de ipi icación
pueden di icul a y/o imposibili a las compa aciones di ec as en e
ensayos clínicos, e e ina ios y medioambien ales, o en e dis in as
egiones y países (Chalme s y Ka ze , 2013).
1.3.1. Técnicas mic oscópicas
Has a p incipios de la década de los 80, el diagnós ico e iológico
de la c ip ospo idiosis se basaba en el es udio de co es his ológicos de
mues as de ejido in es inal, que se ob enían median e biopsia o
nec opsia, con obje o de localiza los es adios endógenos del pa ási o
en el bo de apical de los en e oci os. En la ac ualidad, la mic oscopía
óp ica y/o elec ónica son ú iles en el es udio de los aspec os
his opa ológicos y cambios de la es uc u a celula asociados a la
in ección; sin emba go, no se emplean en el diagnós ico u ina io de la
en e medad debido a su ca ác e in asi o, al cos e humano y ma e ial,
y a su escasa sensibilidad.
En cualquie caso, las mues as isula es que se examinen deben
ija se, an p on o como sea posible, pa a e i a la au olisis de las
células epi eliales. Al examina mic oscópicamen e co es de in es ino
eñidos con hema oxilina/eosina, las ases e olu i as del pa ási o
An eceden es del ema
19
apa ecen como pequeños cue pos basó ilos es é icos (de 2 a 5 μm) en
el bo de apical de la mucosa (Lamps, 2009), aunque po su amaño
pueden pasa inad e idas. Sin emba go, pa a obse a las
ca ac e ís icas ul aes uc u ales y su localización den o de la acuola
pa asi ó o a es necesa io ecu i al mic oscopio elec ónico
(O’Donoghue, 1995).
La de ección de C yp ospo idium spp. en los labo a o ios de
pa ología clínica se basa p incipalmen e en la iden i icación
mic oscópica de ooquis es median e inciones y/o an icue pos
luo escen es (Chalme s y Ka ze , 2013). La mic oscopía p esen a una
se ie de en ajas e incon enien es a ene en cuen a. En e sus en ajas
cabe des aca el bajo cos e de los eac i os y su sencillez, mien as que
en e sus incon enien es se encuen a los bajos alo es de
especi icidad y sensibilidad de la mayo ía de es os mé odos
(Casemo e, 1991), así como la necesidad de emplea mano de ob a
cuali icada pa a iden i ica co ec amen e el pa ási o y no con undi lo
con los a e ac os que apa ecen en las mues as de heces (Ke elhun e
al., 2003). Además, o a impo an e limi ación en el diagnós ico de
es e pa ási o es que, al exis i especies cuyos ooquis es son
mo ológicamen e idén icos, como C. pa um y C. hominis, nunca se
puede alcanza la iden i icación especí ica.
Se han desc i o un g an núme o de écnicas pa a la iden i icación
de ooquis es de es e p o ozoo en las heces, con alo es de sensibilidad
muy di e sos, en e las que se encuen an la inción con ca bol ucsina
o inción nega i a de Heine (Heine, 1982), la inción de Ziehl-Neelsen
modi icada (Hen iksen y Pohlenz e al., 1981), la inción de Kinyoun
(Ma y Soa e, 1983), con sa anina-azul de me ileno (Baxby e al.,
1984), con e de malaqui a (Ellio e al., 1999), la
inmuno luo escencia di ec a (Bialek e al., 2002), la inción de
hema oxilina- eosina y la inción con au amina.
Las écnicas más comúnmen e u ilizadas son:
- Tinción de Heine: desc i a po Heine en el año 1982, se basa en el
uso de ucsina básica enicada, que iñe los de i us ecales,
des acando los ooquis es e ingen es no colo eados (Figu a 1.4.).
En e sus en ajas des acan su apidez, sencillez y bajo cos e, po
20
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
lo que se conside a un buen mé odo pa a ealiza un c ibado
inicial (Villaco a, 1989; Ga cía-Meniño, 2013); además, iene
una buena conco dancia con o as écnicas más sensibles. Ga cía-
Meniño (2013) e i icó que, en heces p oceden es de e ne os con
dia ea, los esul ados ob enidos con la écnica de Heine
mos aban una buena conco dancia con los obse ados con la
inción de au amina (κ= 0,707) y ELISA di ec o (κ= 0,705). Po
el con a io, en mues as de animales sin dia ea, la conco dancia
e a mode ada.
Figu a 1.4. Tinción de Heine
En e los incon enien es de es a écnica cabe des aca que las
p epa aciones eñidas con es a inción no son pe manen es y
deben examina se du an e los p ime os 15 minu os as su
ealización, ya que pos e io men e los ooquis es son más di íciles
de iden i ica (Po e s y Van Esb oeck, 2010). Además, los
ooquis es, po su amaño y o ma, pueden con undi se con
le adu as u o os a e ac os p esen es en la ma e ia ecal; en es e
sen ido, y debido a las escasas di e encias mo ológicas de los
An eceden es del ema
21
ooquis es de C yp ospo idium spp. (Fall e al., 2003; Checkley e
al., 2015), se necesi an écnicas de inción di e encial, como las
usadas pa a eñi o ganismos ácido-alcohol esis en es, debido a
que la pa ed de los ooquis es del pa ási o esis e la decolo ación
con alcohol-ácido. Exis en o as écnicas simila es que pueden
emplea se en la de ección de ooquis es de C yp ospo idium spp.,
como la inción nega i a con e de malaqui a, en la cual és os se
obse an como es uc u as b illan es, en uel as po un ondo
e de (Ellio e al., 1999).
- Tinción Ziehl-Neelsen: es una inción pe manen e que pe mi e
de ec a ooquis es del p o ozoo, que se obse an de un colo ojo
b illan e sob e un ondo e de-azulado (Figu a 1.5.).
Figu a 1.5. Tinción Ziehl-Neelsen
Es e mé odo ue modi icado pos e io men e pe mi iendo
ealiza lo en ío, con i iéndose en el más u ilizado pa a la
inción de ooquis es en mues as de heces (Casemo e, 1991), po
lo que se conside ó como el “gold-s anda d”. Es a écnica
p esen a una se ie de incon enien es a ene en cuen a, (i) su la go
22
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
iempo de ejecución, unos 30-45 minu os (M ambo e al., 1992;
Cha ie e al., 2002); (ii) la apa ición de alsos posi i os, ya que
algunas le adu as y es os ecales pueden adqui i una colo ación
ojo pálido, pudiendo da luga a con usión. La di e enciación de
los ooquis es de C yp ospo idium spp. con espec o a o os
obje os es é icos de amaño simila puede conlle a cie a
di icul ad pa a una pe sona poco en enada, sob e odo en
mues as que p esen an un educido núme o de ooquis es (Smi h,
2008); (iii) apa ición de alsos nega i os, debido a que cuando se
sob epasa el iempo óp imo de decolo ación, los ooquis es pueden
apa ece poco eñidos. Po es e mo i o, algunos au o es
ecomiendan u iliza inciones que inco po en sa anina, ales
como la écnica de Kös e modi icada (sa anina y po asa/ e de
malaqui a) o la de Baxby (sa anina/azul de me ileno) que iñe los
ooquis es de un osa ana anjado (Villaco a, 1989).
- Tinción de Kinyoun: se u iliza pa a o ganismos ácido-alcohol
esis en es, po lo que median e es a écnica se consigue una
excelen e isualización de los es adios e olu i os de
C yp ospo idium en heces y/o ejidos. Los ooquis es p esen an
una colo ación osácea y oja, que des aca sob e un ondo e de
(Ma y Soa e, 1983; La ime e al., 1988). La inción de Kinyoun
es muy simila a la de Ziehl-Neelsen, di e enciándose en que: (i)
el ácido usado pa a decolo a es más débil; (ii) no se decolo a con
alcohol. Aunque ambas inciones ienen la misma sensibilidad,
especi icidad y con as e, la de Kinyoun equie e menos iempo y
su ejecución es más sencilla (Velazco, 1995).
- Visualización mic oscópica en con as e de ase: es a écnica de
cen i ugación- lo ación en solución de saca osa de Shea he se
u iliza pa a la de ección de ooquis es de C yp ospo idium spp. a
pa i de mues as ecales po p esen a un bajo cos e (Cu en ,
1990). Las mues as deben examina se ápidamen e, ya que si los
ooquis es se exponen a soluciones de al a densidad du an e un
iempo p olongado pueden dis o siona se o ompe se, ob eniendo
esul ados e óneos. Pa a la isualización de los ooquis es, puede
u iliza se un mic oscopio óp ico de campo cla o o de con as e de
An eceden es del ema
23
ase (Xiao y Feng, 2008). Con con as e de ase, los ooquis es se
isualizan como cue pos b illan es con eniendo g ánulos neg os;
en el mic oscopio de campo cla o, apa ecen anslúcidos, muchas
eces como es uc u as le emen e osáceas, con eniendo g ánulos
en su in e io . La di e enciación con espec o a le adu as es ácil,
debido a que no an a p esen a esa colo ación osácea ípica de
C yp ospo idium spp. ni se obse an g ánulos in e io es (Cu en ,
1999; S é e y Va ga, 2000).
- Tinción con au amina: con es a écnica se aumen a la
sensibilidad, debido a la cap ación de un luo oc omo po pa e de
los ooquis es de C yp ospo idium spp.; pa a ello se u iliza una
solución enólica de au amina, que iñe an o la pa ed ex e na del
ooquis e como las es uc u as in e nas (Figu a 1.6).
Figu a 1.6. Ooquis es de C yp ospo idium spp. eñidos con au amina
Exis en a ias a ian es, usando además de la au amina,
odamina (Ga cía e al., 1987), ucsina básica enicada (Casemo e
e al., 1985a), na anja de ac idina (Ga cía e al., 1983), mep acina
(Ungu eanu y Don u, 1992) o pe mangana o po ásico (Fleck y
Moody, 1988). Es una écnica ela i amen e ácil, ápida y ba a a,
30
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
1.3.3.2. Análisis sub ípico
El empleo de loci al amen e polimó icos, que pe mi en ob ene
una mayo disc iminación, ha esul ado de especial in e és en el
es udio de la a iación in aespecí ica de algunas especies de
C yp ospo idium, undamen almen e C. pa um y C. hominis,
conduciendo a un no able p og eso del conocimien o de la
epidemiología del p o ozoo. En e es os genes cabe des aca el que
codi ica pa a la glicop o eína de 60 kDa (GP60, an iguamen e
denominado gp40), así como a ias egiones mic osa éli e y
minisa éli e y espaciado es in e nos ansc i os (ITS-2) del ARN
(Gasse e al., 2003; Xiao 2010; Xiao e al., 2001b).
Ac ualmen e, la mayo ía de los es udios de sub ipado se basan en
el es udio de la secuencia del gen de la GP60, ya que es el ma cado
indi idual más polimó ico iden i icado has a el momen o en el
genoma de C yp ospo idium spp. (Robinson y Chalme s, 2012). Sin
emba go, los cebado es desc i os has a el momen o sólo pe mi en
ampli ica de e minadas especies, como C. hominis, C. pa um, C.
meleag idis, C. aye i, C. cuniculus, C. w ai i, C. yzze i, C.
ubiqui um o C. e inacei (Xiao, 2010; Soilán, 2014). El análisis del gen
de la GP60 pe mi e clasi ica los di e en es sub ipos de C. pa um y
C. hominis den o de amilias alélicas; es o es debido que es e gen
posee una secuencia mic osa éli e que codi ica pa a la se ina
cons i uida po un núme o a iable de epe iciones en ándem de los
inucleó idos TCA/TCG/TCT en el ex emo 5´, así como di e encias
en las egiones no epe i i as del gen (Xiao, 2010). Así, en la
ac ualidad se han iden i icado 14 amilias alélicas de C. pa um en
humanos y animales (IIa-IIo), que se basan en los polimo ismos de
un sólo nucleó ido (SNPs) y en la secuencia mic osa éli e. Algunos
sub ipos, especialmen e el IIc, sólo se han de ec ado en humanos. Po
el con a io, o os como el IId, y en pa icula el IIa, se han señalado
como los más comunes en los animales; la mayo ía de los sub ipos
pe enecien es a las amilias IIa y IId se han iden i icado ambién en
humanos, po lo que p esen an po encial zoonó ico (Xiao, 2010; Wang
e al., 2014). Además, cada amilia de sub ipos GP60 es á asociada
con cie as ca ac e ís icas biológicas del pa ási o, lo que pe mi e
elaciona las con las p esen aciones clínicas (Soilán, 2014).
An eceden es del ema
31
Aquellos es udios de sub ipado que equie en una mayo pode
disc imina o io se basan en el es udio de egiones con mayo
a iabilidad como mic osa éli es y/o minisa éli es, que pe mi en
iden i ica aislados indi iduales o líneas clonales (Cacciò e al., 2005).
Los mic osa éli es (MS) y minisa éli es (MN) se pueden halla en el
genoma de odos los se es euca io as y son secuencias de ADN que
consis en en la epe ición en ándem de 1-5 o 10-100 pa es de bases,
espec i amen e. Es os MS y MN p esen an polimo ismos de amaño
( a iaciones en el núme o de epe iciones en ándem - VNTR), que
son consecuencia de e o es que suceden du an e la eplicación del
ADN, lo que se aduce en la ganancia o pé dida de unidades de
epe ición (Feng e al., 2000; Al es e al., 2003; Mallon e al., 2003a,
b; Tan i e di y Widme , 2006; Tan i e di e al., 2006). En
consecuencia, los alelos pa a los loci MS y MN suelen p esen a
polimo ismos de amaño. Además, los MS y MN ambién pueden
p esen a SNPs, además de las a iaciones en el núme o de
epe iciones en ándem (Sulaiman e al., 2001; Peng e al., 2003; Ga ei
e al., 2006, 2007).
Los es udios basados en el análisis conjun o de a ios locus
(análisis mul ilocus) se u ilizan cada ez con más ecuencia en el
ipado de aislados de C yp ospo idium spp. de animales y humanos,
pe mi iendo de e mina su es uc u a poblacional. Es os análisis se
pueden basa en la a iación de longi ud de las secuencias
mic osa éli e y minisa éli e, lo que se conoce como ipi icación
mul ilocus (MLT) (Feng e al., 2000;Tan i e di e al., 2006; Al es e
al., 2003; Mallon e al., 2003a, b; Tan i e di y Widme , 2006;
Ngouanesa anh e al., 2006; Díaz e al., 2012), o en la a iación de la
he e ogeneidad gené ica de la secuencia, que se denomina ipi icación
mul ilocus de secuencias (MLST), que además pe mi e de ec a los
SNPs (Glabe man e al., 2001; Sulaiman e al., 2001; Ga ei e al.,
2007).
En de ini i a, los es de diagnós ico ienen cada cual sus
limi aciones an o en cos e, impo ancia clínica y alo ación o
e aluación de coin ecciones con o os pa ógenos. Po es e mo i o, es
necesa io desa olla nue as es a egias pa a mejo a la in e p e ación
de los esul ados en las in ecciones mix as, la ele ancia del sub ipado
32
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
de especies y la igilancia de los es udios, y así mejo a la de ección e
in e p e ación de los esul ados (Ryan e al., 2016).
1.4. INFECCIONES POR C yp ospo idium spp. EN RUMIANTES
DOMÉSTICOS
C yp ospo idium spp. es un pa ási o muy común en los umian es
en odo el mundo, pe o las asas de p e alencia obse adas a ían
ampliamen e de unas especies de umian es a o as, de las condiciones
de manejo y de o a se ie de ac o es, en e los que des acan la edad
del hospedado , su es ado inmuni a io, así como de la
especie/geno ipo del pa ási o y su i ulencia, que iene de e minada
gené icamen e.
1.4.1. En ganado acuno
El p ime es udio sob e c ip ospo idiosis bo ina se publicó en
1971, cuando se iden i icó es e p o ozoo en una no illa de 8 meses
con dia ea c ónica (Pancie a e al., 1971). En un p incipio
C yp ospo idium spp. se conside ó un agen e opo unis a; su papel
como en e opa ógeno p ima io en las dia eas neona ales del acuno
se descub ió cuando Tzipo i e al. (1980) a ibuye on po p ime a ez
un b o e de dia ea neona al a la in ección exclusi a po es e p o ozoo.
Pos e io men e, y median e in ecciones expe imen ales, se demos ó
que C yp ospo idium spp. es capaz de causa dia ea clínica en
e ne os (Tzipo i e al., 1983; Heine e al., 1984). Desde en onces se
ha desc i o su in e ención en p ocesos gas oen é icos en los bo inos
de la mayo ía de los países del mundo (Faye y Xiao, 2007).
Debido a que el ganado acuno es la especie animal donde la
c ip ospo idiosis iene una mayo impo ancia (San ín e al., 2008), en
es os animales se han lle ado a cabo nume osos es udios ans e sales
que demues an que es e p o ozoo es muy p e alen e en bó idos,
independien emen e de su ap i ud (leche a o cá nica); así, se han
señalado alo es de p e alencia indi idual muy a iables que oscilan
en e el 0% y el 100%, aunque la mayo ía mues an po cen ajes del 3-
75% (San ín e al., 2008; Feng y Xiao, 2011; Im e y Dă ăbuş, 2011).
Es as di e encias an e iden es son el esul ado del empleo de a ias
An eceden es del ema
33
écnicas de diagnós ico con di e en e sensibilidad (San ín e al., 2008),
aunque ambién se ha comp obado que o os ac o es, como el sis ema
de manejo, la época del año, las condiciones ambien ales, la edad de
los animales, la densidad de ejempla es en la g anja, la limpieza de las
ins alaciones o el diseño del es udio, in luyen en el po cen aje de
animales in ec ados en un ebaño (Ga be e al., 1994; A will e al.,
1999; Mohammed e al., 1999; Cas o-He mida e al., 2002a;
Maddox-Hy el e al., 2006; T o z-Williams e al., 2007; Na a o-i-
Ma ínez e al., 2011; Ca mena e al., 2012; Abeywa dena e al.,
2013a). Sin emba go, cabe des aca que los es udios donde se analiza
una única mues a po animal suelen subes ima la p e alencia eal,
pues la eliminación es, en muchos casos, in e mi en e (Robe son e
al., 2014). En es e sen ido, los esul ados de a ios es udios
longi udinales ealizados en ebaños posi i os a C yp ospo idium spp.,
mues an que odos los e ne os eliminan ooquis es en algún momen o
du an e sus p ime os meses de ida (O’Handley e al., 1999; Cas o-
He mida e al., 2002b; San ín e al., 2008).
En ganado acuno explo ado en España ue on Jus e e al. (1987)
los que desc ibie on el p ime caso de c ip ospo idiosis. En nues o
país, las in es igaciones ealizadas has a el momen o mues an que
es e p o ozoo es á implicado ecuen emen e en la apa ición de b o es
de dia ea neona al en g anjas de bo ino (Tabla 1.2), con p e alencias
que a ían en e el 35,7% y el 76%.
Tabla 1.2. P e alencias de in ección po C yp ospo idium spp. en e ne os
lac an es con dia ea neona al en España
Zona
P e alencia
Au o es
Galicia
52,5%
Cas o-He mida e al., 2002a
49%
Díaz e al., 2010a
76%
Ga cía-Meniño, 2013
70%
Ga cía-Meniño e al., 2014
No e de España
57,8%
Quílez e al., 2008a
Cas illa-León
35,7%
Ma ín-Gómez e al., 1995a
Cen o de España
52,3%
De la Fuen e e al., 1998
A agón
64,7%
Quílez e al., 1996a
Además, los es udios que analizan la p esencia de
C yp ospo idium spp. en bo inos asin omá icos en España señalan
po cen ajes de in ección del 22,7- 44% en e ne os (Cas o-He mida e
34
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
al., 2002a; Ga cía-Meniño e al., 2013) y del 8,4%-14,2% en adul os
(Cas o-He mida e al., 2006b, 2007; Ca dona e al., 2015).
1.4.1.1. Especies desc i as
Nume osos es udios demues an que el ganado acuno puede
es a a ec ado po un ele ado núme o de especies y geno ipos de
C yp ospo idium, aunque C. ande soni, C. bo is, C. pa um y C.
yanae son las más ecuen es y con una dis ibución geog á ica más
amplia (Tabla 1.3).
No obs an e, ambién se ha iden i icado la p esencia, an o de
o ma na u al como expe imen al, de o as especies y/o geno ipos en
los bo inos (Tabla 1.3.), aunque la in o mación ob enida has a el
momen o sugie e que es as in ecciones son espo ádicas y de escasa
impo ancia clínica (Bo nay- Llina es e al., 1999; Smi h e al., 2005;
Geu den e al., 2006; Faye e al., 2006; Langkjae e al., 2007; Feng
e al., 2007; Khan e al., 2010; Xiao, 2010). De hecho, se necesi an
nue os es udios que pe mi an de e mina si es as especies a ec an
e dade amen e al ganado acuno o si únicamen e son anseún es
in es inales (Robe son e al., 2014).
De odas las especies que a ec an al ganado bo ino, C. pa um
pa ece se la especie más cosmopoli a, debido a que se ha iden i icado
en un mayo núme o de países (Xiao, 2010; Ryan e al., 2014;). Los
ooquis es de C. pa um son indis inguibles mo ológicamen e de los
de o as especies de C yp ospo idium, po lo que es necesa io ecu i
a écnicas de biología molecula pa a iden i ica las di e sas especies;
po ello, los p ime os es udios molecula es u iliza on los é minos C.
pa um geno ipo bo ino, geno ipo II y geno ipo B pa a dis ingui es a
especie de C. hominis. C. pa um p esen a un amplio ango de
hospedado es e eb ados, p incipalmen e mamí e os, en e los que se
encuen an los umian es domés icos y las pe sonas, po lo que iene
un indudable in e és zoonó ico (Casemo e e al., 1997; Sischo e al.,
2000; Cas o-He mida e al., 2002b; Joachim e al., 2003; Xiao y
Ryan, 2008; Faye , 2010; Díaz e al., 2014). De hecho se conside a,
jun o a C. hominis, una de las especies más comunes en b o es de
c ip ospo idiosis humana, an o en pe sonas inmunodep imidas como
An eceden es del ema
35
inmunocompe en es (Ve ga a y Quílez, 2004; Xiao y Feng, 2008;
Chalme s y Ka ze , 2013; Šlape a, 2013).
Tabla 1.3. Especies y geno ipos de C yp ospo idium iden i icados en ganado
acuno
Especies
Dis ibución
Re e encias
C.pa um
Mundial
Al Mawly e al.,2015; Cul e al., 2014; Helmy e
al., 2013; Mei eles e al., 2011; Smi h e al.,
2010; San ín y T ou , 2008
C.bo is
Mundial
Abeywa dena e al., 2013; Budu-Amoako e al.,
2012a, b; Folle e al., 2011; Maikai e al.,
2011; Wang e al., 2011b; Sil e las e al.,
2010b, 2009b; Faye e al., 2006
C. yanae
Mundial
Mah ouz e al, 2014; Budu-Amoako e al.,
2012a, b; Mei eles e al., 2011; Wang e al.,
2011b; San ín e al., 2008; Halim e al., 2008;
Plu ze y Ka anis, 2007
C. ande soni
Mundial
Mah ouz e al, 2014; Cas o-He mida e al.,
2011; Wang e al., 2011b; Rals on e al., 2010;
San ín y T ou , 2008
C. suis
Bélgica, EE. UU,
Dinama ca,
S i Lanka, Zambia,
Madagasca
Bodage e al., 2015; Abeywa dena e al., 2014;
Faye e al., 2006; Geu den e al., 2006; Xiao y
Cama.,2006; Enema k e al., 2003
C. hominis
Escocia, China,
Co ea, Kenia, India,
Nue a Zelanda,
Malawi
Abeywa dena e al., 2012; Chen y Huang, 2012;
Kangé he e al., 2012; Roy e al., 2010; Banda
e al., 2009; Feng e al., 2007b; Pa k e al.,
2006; Smi h e al., 2005
C. sc o a um
Dinama ca
Langkjæ e al., 2007
C. se pen is
I án, China
Chen y Huang, 2012; Azami e al., 2007
C. elis
Polonia, España
Ca dona e al., 2015; Bo nay-Llina es e al.,
1999
C. canis
EE. UU
Faye e al., 2001
C. meleag idis
China, Po ugal
Zhang e al., 2013; Mendoca e al., 2007
C. w ai i
I án
Azami e al., 2007; Ch isp e al., 1992
C. baileyi
I án
Azami e al., 2007
C. ubiqui um
F ancia, I alia,
Suecia, China
Bjö kman e al., 2015; Ma e al., 2014; Di
Piazza e al., 2013; Folle e al., 2011
C. yzze i
China
Chen y Huang, 2012
C. suis-like
Dinama ca, India,
China, Taiwán,
Bélgica, Aus alia,
Reino Unido
Ma e al., 2015; Abeywa dena e al., 2013 a, b;
Robinson e al., 2011; Khan e al., 2010;
Geu den e al, 2007; Langkjæ e al., 2007;
Wa anabe e al, 2005
C. pa um-like
Nue a Zelanda,
Kenia, EE. UU,
Canadá
Sh es ha e al., 2014; Kang'e he e al., 2012; Lu
e al., 2008; Zhang e al., 2007; S a key e al.,
2006; Yang e al., 2004; Hei man e al., 2002
C. xiaoi
Jo dania, I landa,
China, Taiwán
Hijjawi e al., 2016; Mi hashemi e al., 2016;
Ma e al., 2014; Wa anabe e al., 2005
36
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Además, C. pa um se conside a la especie más pa ógena en
umian es domés icos, pues es la p incipal esponsable de la apa ición
de impo an es b o es de dia ea neona al (San ín e al., 2004; Faye e
al., 2006; San ín y T ou , 2008; Ame e al., 2013, Díaz e al., 2014).
Po ello, es la especie p edominan e en aquellos es udios de casos
clínicos (Quílez e al., 2008a; Díaz e al., 2010a; Im e e al., 2011),
aunque ambién se ha iden i icado como la especie más ecuen e o
incluso la única p esen e en acuno con o sin dia ea (Lea mon h e
al., 2003; San ín e al., 2004; Cas o-He mida e al., 2006a,b, 2007,
2011; T o z-Williams e al., 2006; Faye e al., 2007; Ka anis, 2007;
B ook e al, 2009; Du an i e al., 2009; Ame e al., 2010; Mau ya e
al., 2013; Smi h e al, 2014; Wells e al., 2015;dos San os Toledo e
al., 2017).
Los ooquis es de C. bo is (Xiao e al., 2002b; San ín e al., 2004;
Faye e al, 2005) son mo ológicamen e indis inguibles de los de C.
pa um; po ello, Faye e al. (2005) enomb ó es a especie as
ca ac e iza la molecula men e pa a los genes de la SSU RNA, la
Hsp70 y la ac ina. C. bo is iene un ango de hospedado es limi ado,
siendo una especie bien adap ada al ganado acuno y menos pa ógena
que C. pa um, ya que su in ección suele cu sa de o ma asin omá ica
(Feng e al., 2007a; Sil e lås e al., 2010 a, b); sin emba go, se han
hallado casos de animales dia eicos que eliminaban ooquis es de es a
especie (Lee e al., 2016). C. bo is es una especie cosmopoli a, pues
se ha iden i icado en ganado acuno de odo el mundo (Xiao e al.,
2002b, 2006, 2007, Geu den e al., 2006, Langkjæ e al., 2007,
Coklin e al., 2007, Feng e al., 2007a; Siwila e al., 2007, Thomaz e
al., 2007, Thompson e al., 2007, Fel us e al., 2008). Además,
di e sas in es igaciones han esal ado la impo ancia de es a especie
en el ganado bo ino, al econoce la como la especie p edominan e en
países como Aus alia (Abeywa dena e al., 2013a), China (Zhang e
al., 2015), Dinama ca (Langkjae e al., 2007), F ancia (Rieux e al.,
2013), India (Feng e al., 2007a; Khan e al., 2010), Japón (Mu akoshi
e al., 2012), Nige ia (Maikai e al., 2011; Ayinmode e al., 2010),
República Checa (Ond ácko á e al., 2009), Suecia (Sil e lås e al.,
2010b) y EE.UU. (San ín e al., 2004, 2008; Faye e al., 2006, 2007).
Po el con a io, los casos de in ecciones po C. bo is en se es
An eceden es del ema
37
humanos son espo ádicos y se han de ec ado en países como Aus alia
(Ng e al., 2012), Egip o (Helmy e al., 2013) o la India (Khan e al.,
2010).
C. yanae se nomb ó en un p incipio como geno ipo “dee -like”
debido a que su secuencia 18S RNA e a muy simila a un geno ipo
hallado en cie os, a pesa de que nunca se de ec ó en es os
hospedado es (Xiao e al., 2002a). Basándose en es udios gené icos,
así como en la mo ología y en su o ma de ansmisión, se le
conside ó una nue a especie (Faye e al., 2008). Según San ín e al.
(2008) y Sil e lås e al. (2010 a, b), el hospedado p ima io de C.
yanae es el ganado bo ino, aunque ambién se ha hallado en yaks
(Ma e al., 2014; Mi e al., 2014; Qi e al., 2015 a; Li e al., 2016),
co zos (Ga cía-P esedo e al., 2013), cie os de cola blanca (San ín y
Faye , 2015), zo os (S u dee e al., 1999; Zhou e al., 2004; Hammes
e al., 2007; Nagano e al., 2007; Beck e al., 2011a; Ra aszo á e al.,
2012), cebúes y bú alos (Abeywa dena e al., 2012; Feng e al., 2012;
Ame e al., 2013; Bha e al., 2013; Inpankaew e al., 2014; Aquino
e al., 2015; Ma e al., 2015; Ib ahim e al., 2016; Swain, 2016;
Hingole e al., 2017). Ac ualmen e se conside a poco p e alen e en
ganado acuno; de hecho, solo en un es udio se ha iden i icado como
la especie p edominan e (Nguyen e al., 2012). Sin emba go, p esen a
una amplia dis ibución geog á ica, pues se ha iden i icado en los
cinco con inen es (San ín e al, 2004, 2008; Faye e al., 2006; Plu ze
y Ka anis, 2007; Halim e al., 2008; Folle e al., 2011; Mei eles e al.,
2011; Wang e al., 2011b; Budu- Amoako e al., 2012a, b;
Abeywa dena e al., 2013a; Mah ouz e al, 2014). Los bo inos
in ec ados con es a especie no p esen an, po lo gene al, signos
clínicos compa ibles con c ip ospo idiosis (Faye , 2010); además, no
es zoonó ica, po lo que ca ece de in e és en salud pública (Šlape a,
2013).
En los umian es, C. ande soni se desc ibió o iginalmen e como
C. mu is geno ipo A o C. mu is geno ipo bo ino basándose en el
amaño de su ooquis es, ya que mo ológicamen e son simila es a los
de es a especie (Šlape a, 2013). Pos e io men e, median e écnicas
molecula es se comp obó que p esen a una secuencia única del gen
SSU RNA (Mo gan e al., 2000). A di e encia de C. mu is, es a
38
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
especie posee un es echo ango de hospedado es, undamen almen e
bo inos, aunque ambién se ha iden i icado en o os umian es como
o ejas, cab as y camellos (Guyo e al., 2001; Enema k e al., 2002;
Koyama e al, 2005; Ma subayashi e al., 2005; Faye e al., 2006;
K ac e al., 2006; Leoni e al., 2006; Robinson e al., 2006; Mo se e
al., 2007; Wald on e al., 2011; Wang e al., 2011b; Agholi e al.,
2013; Liu e al., 2014; Jiang e al., 2014). En el ganado acuno, es a
especie mues a una dis ibución mundial, aunque es especialmen e
ecuen e en China, donde nume osos es udios la han iden i icado
como la especie p edominan e (Liu e al., 2009; Wang e al., 2011b;
Zhao e al., 2013, 2014; Ma e al., 2015; Qi e al. e al., 2015b);
ambién ue la especie más ecuen emen e iden i icada en o os países
como Canadá (Dixon e al., 2011) y la India (Paul e al., 2009).
Mues a una localización abomasal, y gene almen e su p esencia no
es á asociada a la apa ición de signos clínicos (K áč y V í o ec, 2003),
aunque se han señalado algunos casos de animales in ec ados con es a
especie que p esen aban dia ea (K áč e al., 2011). Además, es a
especie no se conside a zoonó ica (San ín e al., 2004; Šlape a, 2013),
aunque se ha iden i icado espo ádicamen e en pe sonas en F ancia
(Guyo e al., 2001), la India (Hussain e al., 2017), Malawi (Mo se e
al., 2007) y el Reino Unido (Leoni e al., 2006).
A pesa de que las cua o especies de C yp ospo idium más
ecuen es en el ganado acuno p esen an una dis ibución mundial,
los esul ados molecula es ob enidos has a el momen o sugie en que
su impo ancia a ía al conside a la zona geog á ica, exis iendo
no ables di e encias egionales (Wang e al., 2011b). Así, en Eu opa,
C. pa um es la especie más ecuen e en los bo inos (Díaz e al.,
2010a; Smi h e al., 2010; Göh ing e al., 2014), mien as que C. bo is
es la especie p edominan e en países como China, Aus alia, India y
EE. UU, así como en algunos países eu opeos (San ín e al., 2004,
2008; Khan e al., 2010; Sil e las e al., 2010b; Wang e al., 2011b;
Abeywa dena e al., 2013; Rieux e al., 2013; Zhang e al., 2015). Po
o o lado, C. yanae a pesa de su amplia dis ibución geog á ica, sólo
se ha encon ado como la especie p edominan e en un es udio
ealizado en Vie nam (Nguyen e al., 2012). Asimismo, C. ande soni
es especialmen e ecuen e en algunos países de Asia y Amé ica,
An eceden es del ema
39
como China, B asil y Canadá (Zhou e al., 2007; Liu e al., 2009; Se á
e al., 2010; Dixon e al., 2011; Sil a e al., 2014).
1.4.1.2. Relación en e la edad de los animales y las especies
iden i icadas
Respec o a la posible elación en e la edad de los animales y los
po cen ajes de in ección po C yp ospo idium spp., la mayo ía de los
es udios coinciden en que la p e alencia es á in e samen e
elacionada con la edad, de modo que los animales más jó enes
p esen an los po cen ajes de in ección más ele ados (San ín e al.,
2004; San ín y T ou , 2008; Kesha a z e al., 2009; Khan e al., 2010;
Maikai e al., 2011; Muhid e al., 2011; Robe son e al., 2014). Así,
en ganado acuno de EE.UU., San ín e al. (2008), obse a on que el
45,8% de los animales de 1-8 semanas de edad e an posi i os,
mien as que únicamen e el 18,5% de los de 3-12 meses de edad y el
2,2% de los 12-24 meses de edad eliminaban ooquis es del p o ozoo.
En la India, Khan e al. (2010) ap ecia on una p e alencia
signi ica i amen e supe io en e ne os neona os (20%) que en adul os
(4,4%). En el mismo sen ido, Gong e al. (2017) en China, ap ecia on
los po cen ajes de in ección más ele ados en e ne os neona os
(19,5%) mien as que los más educidos se halla on en los adul os
(4,9%), siendo es as di e encias signi ica i as. En Galicia, Cas o-
He mida e al. (2006a) obse a on un pa ón simila , pues la
p e alencia ue signi ica i amen e más ele ada en los meno es de un
mes (58,5%), descendiendo has a el 7,9% en los animales adul os.
Todos es os da os con i man que los e ne os neona os son los más
ecep i os a la in ección po C yp ospo idium spp., y po ello los
animales de 1 a 3 semanas de edad mues an los po cen ajes de
in ección más ele ados (O ega-Mo a y W igh , 1994; Quílez e al.,
1996a; De la Fuen e e al., 1999; Causapé e al., 2002; Cas o-
He mida e al., 2002b, 2006a; San ín e al., 2004; Maddox-Hy el e
al., 2006; Roy e al., 2006; S a key e al., 2006; Soilán, 2014). De
hecho, los e ne os que adquie en la in ección poco después de nace
suelen mos a los p ime os signos clínicos en e los 3 y 5 días de
edad, siendo especialmen e ecuen es en e los 8 y los 12 días
(Cas o-He mida e al., 2002b; Soilán, 2014). La ecep i idad
46
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
1.4.1.3. Sub ipos de C. pa um en ganado acuno
Ac ualmen e, las écnicas molecula es di igidas al gen de la
glicop o eína de 60 kDa (GP60) han inc emen ado no ablemen e la
capacidad de iden i ica y di e encia los geno ipos y sub ipos
zoonó icos de C yp ospo idium (S ong e al., 2000; Jex y Gasse ,
2010; Rieux e al., 2013a). Es as écnicas pueden emplea se pa a
in es iga la dis ibución de las a ian es de de e minadas especies de
C yp ospo idium en animales y en humanos en di e en es egiones
geog á icas (Robe son e al., 2014). Debido a que C. pa um es la
especie zoonó ica iden i icada con mayo ecuencia en el ganado
acuno, los análisis subgeno ípicos se han cen ado en el es udio de
es a especie. En base a los da os p opo cionados po es as écnicas, se
han iden i icado más de 80 sub ipos di e en es de C. pa um
pe enecien es a cua o amilias alélicas (IIa, IId, IIj y IIl) (Tabla 1.4.).
De odas ellas, la amilia alélica IIa de C. pa um pa ece se la más
ecuen e y ampliamen e dis ibuida en el ganado acuno (Jex y
Gasse , 2010), con más de 60 sub ipos di e en es (Tabla 1.4.); sin
emba go, es in e esan e des aca que en el ganado acuno de China se
ha obse ado que es a amilia alélica no es la más común (Wang e
al., 2014). Aunque pa a iden i ica el sub ipo GP60 se emplea
undamen almen e la secuenciación, es e mé odo sólo pe mi e de ec a
el alelo más ecuen e en la mues a, impidiendo la e aluación de
cualquie di e sidad alélica y, consecuen emen e, la p esencia de
in ecciones mix as (G inbe g e al., 2013; Quinones-Ma eu e al.,
2014); sin emba go, di e sos au o es sí han señalado la p esencia de
a ios sub ipos en una misma g anja, y empleando o a me odología,
ambién los han hallado en un mismo animal (Thompson e al., 2007;
Xiao e al., 2007; Quílez e al., 2008a).
Muchos de los sub ipos pe enecien es a la amilia IIa de ec ados
en el ganado acuno ienen po encial zoonó ico, pudiendo a ec a
ambién a los se es humanos; de hecho, en a ios es udios se han
aislado los mismos sub ipos de C. pa um en mues as de bo inos y
pe sonas p oceden es de la misma egión (Al es e al., 2006a;
Geu den e al., 2007; Ng e al., 2008; Wielinga e al., 2008; Xiao y
Faye , 2008; Budu-Amoako e al., 2012b; Rahmouni e al., 2014;
Taylan-Ozkan e al., 2016).
An eceden es del ema
47
Tabla 1.4. Sub ipos de C. pa um iden i icados en mues as de ganado
bo ino
Sub ipo
Luga
Re e encia
IIaA10G1R1
Eslo enia
Kaupke e al., 2015
IIaA11G2R1
España
Soilán, 2014
IIaA13R1
Eslo enia
Soba y Loga , 2008
IIaA13G1R1
España, Suecia,
Díaz e al., 2010a; Sil e las e al., 2013; Soilán, 2014
IIaA13G1R2
Suecia
Sil e las e al., 2013
IIaA13G2R1
A gelia, Bélgica,
Canadá, España,
Holanda,
Tu quía
T o z-Williams e al., 2006; Geu den e al., 2007;
Wielinga e al., 2008; Soilán, 2014; Taylan-Ozkan e
al., 2016; Benhouda e al., 2017
IIaA14R1
Suecia
Sil e las e al., 2013
IIaA14G2R1
Alemania,
Bélgica, B asil,
China
Geu den e al., 2007; B oglia e al., 2008; Mi e al.,
2013; Heckle e al., 2015
IIaA14G1R1
China, Polonia
Mi e al., 2013; Kaupke e al., 2015
IIaA14G1R1b
Egip o, Suecia,
Ame e al., 2013; Sil e las e al., 2013
IIaA14G1R1 1b
Egip o
Ame e al., 2013
IIaA14G2R2
B asil
do Cou o e al., 2014
IIaA15G2R1
Mundial
T o z-Williams e al., 2006; O’B ien e al., 2008;
Quílez e al., 2008a; Wielinga e al., 2008; Díaz e
al., 2010a, 2012; Budu-Amoako e al., 2012a; Mi e
al., 2013; Sil a e al., 2013; Rahmouni e al., 2014;
Smi h e al., 2014; Soilán, 2014; Ai a e al., 2015;
Ichikawa-Seki e al., 2015; Ramo e al., 2015;
Daniso a e al., 2016; Mu akoshi e al., 2016; Ma su a
e al., 2017
IIaA15G2R2
EE. UU,
Ingla e a y
Gales,
República Checa
Xiao e al., 2007; K ac e al., 2011; Smi h e al., 2014
IIaA15G1R1
B asil, China,
Egip o
Ame e al., 2013; Helmy e al., 2013; Sil a e al.,
2013; Mah ouz e al., 2014; Feng e al., 2017
IIaA15G4R1
Chile
Me cado e al., 2015
IIaA16G1R1
Mundial
T o z-Williams e al., 2006; Misic y Abe, 2007; Plu ze
y Ka anis, 2007; B oglia e al., 2008; Soba y Loga ,
2008 Wielinga e al., 2008; Ond ácko á e al., 2009;
Sil e lås, e al., 2010b, 2013; Im e e al., 2011, 2013;
K ác e al., 2011; Insulande e al., 2013; del Coco e
al., 2014; Lassen e al., 2014; Soilán, 2014; Bjö kman
e al., 2015; Viei a e al., 2015
IIaA16G1R1b
Belg ado,
Polonia, Suecia,
Se bia y
Mon eneg o
Misic y Abe, 2007; Sil e las e al., 2013; Kaupke e
al., 2015
IIaA16G2R1
Bélgica,
Canadá, China,
España,
Po ugal
Al es e al., 2006a; T o z-Williams e al., 2006;
Geu den e al.,2007; Quílez e al., 2008a; Budu-
Amoako e al., 2012a; Mi e al., 2013; Soilán, 2014
48
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Tabla 1.4. (con inuación)
Sub ipo
Luga
Re e encia
IIaA16G3R1
Aus alia, Canadá,
China, Co ea, EE. UU,
España, Ingla e a,
I landa del No e, I án,
Nue a Zelanda, Polonia
T o z-Williams e al., 2006; Xiao e al., 2007;
Quílez e al., 2008a; Nolan e al., 2009; Díaz e
al., 2010a, 2012; Xiao, 2010; Nazemalhosseini-
Moja ad e al., 2011; Budu- Amoako e al.,
2012a; Mi e al., 2013; Sh es ha e al., 2014;
Soilán, 2014; Kaupke e al., 2015; Lee e al.,
2016
IIaA16G3R2
B asil
do Cou o e al., 2014
IIaA16G4R1
Chile
Me cado e al., 2015
IIaA16R1
Eslo enia
Soba y Loga , 2008
IIaA16G1
Túnez
Rahmouni e al., 2014
IIaA16GR1
A gen ina, Jo dania,
Rumania, Suecia,
Sil e las e al., 2010b, 2013; Im e e al.,2013;
Insulande e al., 2013; del Coco e al., 2014;
Kin oss e al., 2015; Hijjawi e al., 2016
IIaA17G1R1
A gen ina, Holanda,
Ingla e a y Gales,
Polonia, Suecia,
Wielinga e al., 2008; Tomazic e al., 2013;
Sil e las e al., 2013; Smi h e al., 2014;
Kaupke e al., 2015
IIaA17G1R1c
Suecia
Sil e las e al., 2013
IIaA17R1
Suecia
Sil e las e al., 2013
IIaA17G1R2
Ingla e a y Gales
Smi h e al., 2014
IIaA17G2R1
Alemania, Aus alia,
B asil, Canadá, EE. UU,
Eslo aquia, España,
Ingla e a, I landa del
No e, I alia, Malasia,
Polonia
T o z-Williams e al., 2006; Thompson e al.,
2007; Xiao e al., 2007; B oglia e al., 2008;
Quílez e al., 2008a; Du an i e al.,2009; Nolan
e al., 2009; Muhid e al., 2011; Smi h e al.,
2014; Kaupke e al., 2015; Daniso a e al.,
2016; dos San os Toledo e al., 2017
IIaA17G4R1
Chile
Me cado e al., 2015
IIaA18G1R1
A gen ina, Belg ado,
B asil, F ancia, Holanda,
Hung ía, Ingla e a,
Republica Checa, Se bia
y Mon eneg o, Suecia
Fel us e al., 2006; Misic y Abe, 2007; Plu ze y
Ka anis, 2007; Wielinga e al., 2008; B ook e
al., 2009; Sil e las e al., 2010b, 2013; K ac e
al., 2011; del Coco e al., 2012, 2014; Tomazic
e al., 2013; do Cou o e al., 2014; Rieux e
al.,2014
IIaA18G2R1
Alemania, F ancia,
Eslo aquia, Hung ía,
Suecia,
Plu ze y Ka anis, 2007; B oglia e al., 2008;
Sil e las e al.,2013; Rieux e al., 2014;
Daniso a e al., 2016
IIaA18G2R1a
Aus alia
Nolan e al., 2009
IIaA18G2R1b
Aus alia
Nolan e al., 2009
IIaA18G1R1c
Polonia, Suecia
Sil e las e al., 2013; Kaupke e al., 2015
IIaA18G1R1d
Suecia
Sil e las e al., 2013
IIaA18G2R2
B asil
do Cou o e al., 2014
IIaA18G3R1
Aus alia, Canadá,
Co ea, España, Gales,
Ingla e a, I landa del
No e
T o z-Williams e al., 2006; Thompson e al.,
2007, 2008; O’B ien e al., 2008; Quílez e al.,
2008a; Ng e al., 2012; Abeywa dena e al.,
2013; Soilán, 2014; Lee e al., 2016; Zahedi e
al., 2016a
IIaA18G4R1
Aus alia
Nolan e al., 2009
IIa18A3R1
Malasia
Muhid e al., 2011
An eceden es del ema
49
Tabla 1.4. (con inuación)
Sub ipo
Luga
Re e encia
IIaA19G1R1
A gen ina, I landa del
No e, Polonia
Thompson e al., 2007; Xiao e al., 2007;
Wielinga e al.,2008; Ng e al., 2012; del Coco
e al., 2014; do Cou o e al., 2014; Kaupke e
al., 2015
IIaA19G2R1
Aus alia, B asil,
F ancia, Holanda,
Ingla e a, Jo dania,
No e Amé ica,
Xiao e al., 2007; Wielinga e al., 2008; B ook e
al., 2009; Ng e al., 2012; Rieux e al., 2013a;
do Cou o e al., 2014; Hijjawi e al., 2016
IIaA19G2R2
B asil
do Cou o e al., 2014
IIaA19G3R1
España
Quílez e al., 2008a
IIaA19G3R1a
Aus alia
Nolan e al., 2009;
IIaA19G3R1b
Aus alia
Nolan e al., 2009
IIaA19G4R1
Nue a Zelanda
Sh es ha e al., 2014
IIaA20G1R1
A gen ina, Belg ado,
Se bia y Mon eneg o,
Suecia
Misic y Abe, 2007; Sil e las e al., 2013; Tomazic
e al., 2013; del Coco e al., 2014
IIaA20G2R1
Aus alia, B asil
Nolan e al., 2009; do Cou o e al., 2014
IIaA20G2R2
B asil
do Cou o e al., 2014
IIaA20G3R1
Aus alia, Ingla e a
Nolan e al., 2009; Smi h e al., 2014
IIaA20G4R1
Aus alia
Nolan e al., 2009
IIaA21G0R1
Alemania
B oglia e al., 2008
IIaA21G1R1
A gen ina, Suecia
Del Coco e al., 2012, 2014; Tomazic e al.,
2013; Sil e las e al., 2013
IIaA21G1R1b
Suecia
Sil e las e al., 2013
IIaA21G3R1
Aus alia
Nolan e al., 2009
IIaA22G1R1
Alemania, A gen ina,
República Checa, Suecia
B oglia e al., 2008; K ac e al., 2011; Tomazic
e al., 2013; Sil e las e al., 2013; del Coco e
al., 2014
IIaA23G1R1
A gen ina
del Coco e al., 2012, 2014; Tomazic e al.,
2013
IIaA23G3R1
Aus alia
Nolan e al., 2009;
IIdA14G1
China
Qi e al., 2015;
IIdA15G1
China, España, Holanda,
I án, Malasia, Tu quía
Quílez e al., 2008a; Wielinga e al., 2008; L e
al., 2009; Nazemalhosseini-Moja ad e al., 2011;
Muhid e al., 2011; A slan y Ekinci, 2012; Zhang
e al., 2015; Li e al., 2016
IIdA16G1
Holanda, Túnez
Wielinga e al. 2008; Rahmouni e al., 2014
IIdA17G1
China, España, Po ugal,
Quílez e al., 2008a; Sil e las e al., 2013a; Li e
al., 2016
IIdA17G1d
Suecia
Sil e las e al., 2013
IIdA18G1
China, Holanda,
Tu quía, Sudán
Wielinga e al., 2008; Qi e al., 2015; Taylan-
Ozkan e al., 2016; Taha e al., 2017
IIdA18G1b
Belg ado, Se bia y
Mon eneg o
Misic y Abe, 2007
IIdA19G1
China, Hung ía Suecia,
Sudán
Plu ze y Ka anis, 2007; Wang e al., 2011a, b,
2013; Sil e las e al., 2013; Zhao e al., 2014; Li
e al., 2016; Feng e al., 2017; Taha e al., 2017
50
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Tabla 1.4. (con inuación)
Sub ipo
Luga
Re e encia
IIdA20G1
Egip o
Ame e al., 2010,2013; Helmy e al., 2013; Mah ouz
e al., 2014; Ib ahim e al., 2016; Feng e al., 2017
IIdA20G1b
Egip o, Tu quía
Ame e al., 2013; Taylan-Ozkan e al., 2016
IIdA20G1e
Suecia
Sil e las e al., 2013
IIdA21G1a
Rumania
Viei a e al., 2015
IIdA22G1
Alemania, Bélgica,
Rumania, Suecia,
Geu den e al., 2007; B oglia e al., 2008; Sil e las
e al., 2013; Viei a e al., 2015
IIdA22G1b
Polonia
Kaupke e al., 2015
IIdA22G1c
Suecia
Sil e las e al., 2013
IIdA23G1
España, Polonia,
Suecia
Quílez e al., 2008a; Sil e las e al., 2013a; Kaupke
e al., 2015
IIdA24G1c
Suecia
Sil e las e al., 2013a; Kaupke e al., 2015
IIdA25G1
Rumania
Viei a e al., 2015;
IIdA26G1b
Suecia
Sil e las e al., 2013a
IIdA27G1
Rumania, Suecia,
Bjö kman e al., 2015; Viei a e al., 2015
IIjA16R2
Belg ado, Se bia y
Mon eneg o
Misic y Abe, 2007
IIjA17R2
Belg ado, Se bia y
Mon eneg o
Misic y Abe, 2007
IIlA16R2
Eslo enia, Se bia y
Mon eneg o
Misic y Abe, 2007; Soba y Loga , 2008
IIlA17R2
Se bia y Mon eneg o
Misic y Abe, 2007
IIlA18R2
Eslo enia
Soba y Loga , 2008
IIlA19R3
Polonia
Kaupke e al., 2015
IIlA24R2
Li uania
Wielinga e al., 2008
El sub ipo IIaA15G2R1 de C. pa um se conside a el más
p e alen e en e ne os de odos los con inen es, especialmen e en
naciones indus ializadas (T o z-Williams e al., 2006; O'B ien e al.,
2008; Quílez e al., 2008a; San ín e al., 2008; Díaz e al., 2010a,
2012; Sil a e al., 2013; Rahmouni e al., 2014; Smi h e al., 2014;
Soilán, 2014; Zhang e al., 2015; Ib ahim e al., 2016; Ramo e al.,
2016; Ma su a e al., 2017); debido a que ambién es uno de los más
ecuen es en los se es humanos, se conside a el p incipal esponsable
de la c ip ospo idiosis zoonó ica (Fel us e al., 2006; Thompson e al.,
2007; Wielinga e al., 2008; Xiao y Ryan, 2008; Díaz e al., 2010a;
Xiao, 2010; Sil a e al., 2013). Sin emba go, es e sub ipo no se ha
iden i icado como el p edominan e en odos los países, pues en
di e sas egiones del Reino Unido (Ingla e a, I landa del No e), así
como en Aus alia y Nue a Zelanda, el IIaA18G3R1 ue el más
común (Thompson e al., 2008; Ng e al., 2012; Abeywa dena e al.,
An eceden es del ema
51
2013b; Al Mawly e al., 2015; Zahedi e al., 2016a). Es udios
ecien es e elan que en Nue a Zelanda p edomina el sub ipo
IIaA19G4R1 (Al Mawly e al., 2015; Sh es ha e al., 2014). Po el
con a io, en ganado acuno de A gen ina no se ha de ec ado el
sub ipo IIaA15G2R1, siendo especialmen e ecuen es el
IIaA20G1R1, el IIaA21G1R1 y el IIaA22G1R1 (Del Coco e al.,
2012, 2014). O o sub ipo muy común en bo inos es el IIaA16G1R1,
siendo ecuen e en el con inen e eu opeo, especialmen e en los países
del cen o de Eu opa (Tabla 1.4), aunque ambién se ha iden i icado en
algunos países ame icanos como A gen ina (del Coco e al., 2014),
B asil (dos San os Toledo e al., 2017), EE.UU. (Xiao e al., 2007) y
Canadá (T o z-Williams e al., 2006), así como en Aus alia (Nolan e
al., 2009) e I án (Nazemalhosseini-Moja ad e al., 2011),
La amilia Ild es la segunda más impo an e en ganado acuno,
an o po su amplia dis ibución (se ha de ec ado en bo inos de odos
los con inen es, excep o en Amé ica) y ecuencia, como po su
a iabilidad gené ica, ya que has a el momen o se han iden i icado al
menos 20 sub ipos di e en es (Tabla 1.4). Además, la IId se incluye
en e las amilias zoonó icas de C. pa um más impo an es, siendo
jun o a la IIa, las p incipales esponsables de la c ip ospo idiosis
zoonó ica (Quílez e al., 2008b; Ame e al., 2010; Cui e al., 2014;
Bjö kman e al., 2015; Viei a e al., 2015; Ib ahim e al., 2016). Así,
los sub ipos p edominan es de es a amilia sub ípica son el IIdA15G1
y el IIdA18G1, que ambién se han de ec ado en pe sonas en Asia
(India, I án, Jo dania, Kuwai y Malasia), Eu opa (Holanda, Reino
Unido) y Oceanía (Aus alia) (Tabla 1.4). De igual modo, se han
iden i icado sub ipos de la amilia IIl en e ne os de Eslo enia,
Li uania, Polonia y Se bia y Mon eneg o, aunque es ingidos a un
pequeño núme o de aislados (Misic y Abe, 2007; Soba y Loga , 2008;
Wielinga e al., 2008; Kaupke e al., 2015). La amilia IIj únicamen e
se ha iden i icado en Belg ado, Se bia y Mon eneg o (Misic y Abe,
2007). Sin emba go, la amilia IIc es an oponó ica, y has a aho a solo
se ha encon ado en se es humanos, es ando ausen e en el ganado
acuno (Al es e al., 2003, 2006; Xiao e al., 2004b; Xiao y Ryan,
2004; Thompson e al., 2007; Ryan e al., 2014).
También es in e esan e des aca que la mayo ía de los sub ipos
52
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
GP60 desc i os en el ganado acuno sólo p esen an una copia de la
secuencia ACATCA (R1), aunque ocasionalmen e se han iden i icado
algunos sub ipos con dos copias de es a secuencia (R2) en Suecia y el
Reino Unido (Ingla e a y Gales), así como en No eamé ica y B asil
(Fel us e al., 2006; T o z-Williams e al., 2006; Xiao e al., 2007;
Sil e las e al., 2013; do Cou o e al., 2014; Smi h e al., 2014).
En el ganado bo ino en España, se han iden i icado
p incipalmen e 2 amilias alélicas, la IIa y la IId; la he e ogeneidad de
los aislados de C. pa um pa a es e locus en España se puede
conside a mode ada pues se han de ec ado ap oximadamen e unos 10
sub ipos, siendo los más ecuen es el IIaA15G1R1, IIaA16G3R1 y
IIaA13G1R1 (Quílez e al., 2008a; Soilán, 2014). En o as á eas
geog á icas, como A gen ina, Bélgica, EE.UU. o Rumanía, se
iden i ica on en e 5 y 7 sub ipos en el ganado bo ino (Xiao e al.,
2007; Geu den e al., 2008; Im e e al., 2013; Del Coco e al., 2014),
mien as que en o os es udios ealizados en Eu opa, se desc ibie on
un mayo núme o de sub ipos GP60, alcanzando los 18 (Thompson e
al., 2007; Wielinga e al., 2008). Los esul ados ob enidos en España
has a el momen o e elan que los e ne os meno es de 1 mes con
dia ea deben conside a se un impo an e ese o io zoonó ico (Quílez
e al. 2008a; Soilán, 2014). Así, Quílez e al. (2008a) ealiza on un
es udio sob e la ca ac e ización subgeno ípica (GP60) de aislados de
C yp ospo idium spp. p oceden es de e ne os meno es de 21 días del
no e de España, obse ando la p esencia de dos amilias alélicas (IIa
y IId), siendo el sub ipo más ecuen e el IIaA15G2R1 (75,7%) y, en
meno p opo ción, se iden i ica on IIaA16G3R1 (10,0%),
IIaA16G2R1 (2,8%), IIaA17G2R1 (2,8%), IIaA18G3R1 (5,7%),
IIaA19G3R1 (1,4%) y IIdA23G1 (1,4%). En es e mismo sen ido, Díaz
e al. (2010a) en un es udio ealizado en e ne os dia eicos de has a
21 días de edad en g anjas de Galicia, obse an solo la p esencia de la
amilia alélica IIa, con el sub ipo IIaA15G2R1 como el más común y
ampliamen e dis ibuido en e ne os, iden i icándose en 26 aislados
(96,3%), dis ibuidos a lo la go de 15 explo aciones; además
iden i ica on en el es o de e ne os el nue o sub ipo IIaA13G1R1.
Pos e io men e, Díaz e al. (2012) en e ne os de la misma edad y de
la misma zona geog á ica comp oba on que p edominaba el sub ipo
An eceden es del ema
53
IIaA15G2R1 (78,3%) y en meno p opo ción el sub ipo IIaA13G1R1
(18,9%). Asimismo, Soilán (2014) en es a misma zona geog á ica
mues a la exis encia de 8 sub ipos di e en es pe enecien es a la
amilia alélica IIa. Al analiza la p esencia de más de un sub ipo GP60
en las explo aciones donde se iden i ica on a ios aislados de C.
pa um, de ec a on que en la mayo ía de las g anjas apa ecía un único
alelo. Sin emba go, en 5 ebaños se obse a on dos sub ipos
di e en es. En odos es os casos es u o p esen e el sub ipo
IIaA15G2R1 (76%), jun o con el IIaA16G3R1 (13%), y en meno
p opo ción el sub ipo IIaA18G3R1 (2,5%), IIaA13G1R1 y
IIaA16G2R1 (1,9%), IIaA11G2R1 y IIaA13G2R1 (1,2%) y
IIaA16G1R1 (0,6%). Algunos de los sub ipos que se han encon ado
en el ganado en Galicia (IIaA13G1R1, IIaA15G2R1, IIaA16G3R1 y
IIaA18G3R1), habían sido p e iamen e de ec ados en humanos de la
misma zona, lo que indica que ienen po encial zoonó ico (Na a o-i-
Ma ínez e al., 2003, 2010; Ve ga a y Quílez, 2004; Quílez e al.,
2008b; Soilán, 2014; Abal-Fabei o e al., 2015). El sub ipo
IIaA15G2R1 es á conside ado como uno de los p incipales sub ipos
esponsables de la c ip ospo idiosis en humanos (Glabe man e al.,
2002; Chalme s e al., 2005; Sulaiman e al., 2005; Al es e al.,
2006). Po el con a io, los sub ipos IIaA16G3R1 y IIaA13G1R1
poseen po encial zoonó ico y se han de ec ado p e iamen e en
humanos en casos espo ádicos y en un núme o educido de aislados
(Jex e al., 2008; Soba y Loga , 2008; Zin l e al., 2009, 2011; Ng e
al., 2011; De Chie ico e al., 2011; Wald on e al., 2011; Iqbal e al.,
2012; del Coco e al., 2014; Koehle e al., 2014; Lassen e al., 2014;
Lobo e al., 2014; Valenzuela e al., 2014). Quílez e al. (2008a) y
Soilán (2014) obse a on que el sub ipo IIaA18G3R1 p esen aba una
escasa impo ancia en el ganado acuno de España, aunque e a el más
p e alen e en ganado acuno en I landa, Aus alia, Nue a Zelanda,
aumen ando el po cen aje de in ección en humanos de es os países
(Thompson e al., 2007; Jex e al., 2008; Zin l e al., 2009, 2011;
Wald on e al., 2011; Ng e al., 2012; Abeywa dena e al., 2013.
Sh es ha e al., 2014).
54
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
1.4.2. En ganado o ino
La c ip ospo idiosis se desc ibió po p ime a ez en es os
umian es en Aus alia, conc e amen e, en co de os de en e 1 y 3
semanas de edad que p esen aban dia ea (Ba ke y Ca bonell, 1974).
No obs an e, el papel de C yp ospo idium spp. como agen e e iológico
p ima io que ocasiona dia ea en los o inos se con i mó a p incipios
de los años 80, as la ealización de in ecciones expe imen ales con
es e p o ozoo en ausencia de o os en e opa ógenos (Angus e al.,
1982a; Snodg ass e al., 1984); desde en onces, su impo ancia como
causan e de dia eas neona ales en co de os se ha inc emen ado de
o ma p og esi a. Así, en la ac ualidad se asocia con una al a
mo bilidad y baja mo alidad, aunque dependiendo de las condiciones
ambien ales y de la p esencia de o os pa ógenos in es inales, es os
p ocesos pueden se a ales (Angus, 1990; Ma os-Fe nández e al.,
1994; Muñoz- Fe nández e al., 1996).
Según Robe son (2009) la p e alencia indi idual de
C yp ospo idium spp. en ganado o ino, a ni el mundial, se ap oxima
al 30%, aunque a ía de o ma conside able en e los di e en es
es udios ealizados, oscilando en e el 5 y el 70%; es a a iación
depende de a ios ac o es, en e los que des acan el manejo de los
animales, la écnica de diagnós ico empleada, el núme o de mues as
ecogidas po animal, la edad de los animales o la p esencia de
sin oma ología clínica. La mayo ía de los es udios ecien es señalan
p e alencias in e io es al 15% en animales sanos (Majewska e al.,
2000; S u dee e al., 2003; P i cha d e al., 2007; Geu den e al., 2008;
Wang e al., 2010; Ye e al., 2013; Koina i e al., 2014; Tzanidakis e
al., 2014), aunque ambién se han señalado p e alencias del 15% al
40% (Ryan e al., 2005; P i cha d e al., 2008; Paole i e al., 2009;
Sa i e al., 2009; Yang e al., 2009). Los es udios longi udinales
mues an que el po cen aje de o ejas que, du an e su ida, se in ec an
con C yp ospo idium spp. es muy ele ado; así, en dos g anjas de
o ino de Aus alia, y ecogiendo 5 mues as po animal, Sweeny e al.
(2011) ap ecia on una p e alencia indi idual que osciló en e el
71,4% y el 81,3%; es os au o es, además, comp oba on que a ios
animales e an posi i os en odos los mues eos, lo que puede e leja
An eceden es del ema
55
cons an es ein ecciones o la imposibilidad de elimina de o ma
na u al las in ecciones po C yp ospo idium spp.
En España, el p ime b o e de c ip ospo idiosis en co de os con
dia ea ue desc i o po Rojo e al. (1985). Pos e io men e, di e sos
au o es han pues o de mani ies o la impo ancia de las in ecciones po
C yp ospo idium spp. en g anjas de o ino con b o es de dia ea
neona al (Tabla 1.5).
Tabla 1.5. P e alencia de in ección po C yp ospo idium spp. en o inos con
dia ea neona al en España
Zona
P e alencia
Au o es
A agón
90,0%
Cla el e al. (1989)
A agón
79,4%
Causapé e al. (2002)
León
70,8%
Ma ín-Gómez e al. (1995b)
Cas illa-León
44,8%
Muñoz e al. (1996)
Cas illa-León
40,2%
Pila -Izquie do e al. (1993)
Galicia
31,6%
Díaz e al. (2015)
Galicia
30,7%
Díaz e al. (2010a)
Es e pa ási o es ambién ecuen e en aquellos ebaños o inos sin
p oblemas de dia eas en co de os, pues se halla on p e alencias de
in ección indi iduales que oscila on en e el 14,7% y el 28,0% (Cla el
e al., 1989; Ma os-Fe nández e al., 1993; Ma ín-Gómez e al.,
1995b; Causapé e al., 2002); Además, C yp ospo idium spp es á
ampliamen e dis ibuido en las g anjas o inas, pues el po cen aje de
ebaños con al menos un animal posi i o oscila en e el 46,7% y el
73% (Pila -Izquie do e al., 1993; Ma ín-Gómez e al., 1995b).
1.4.2.1. Especies desc i as
En ganado o ino se han publicado nume osas in es igaciones
sob e las in ecciones po C yp ospo idium spp., aunque únicamen e
un educido po cen aje de ellos incluyen da os molecula es que, po lo
gene al, es án limi ados a un escaso núme o de aislados del p o ozoo.
Aún así, el núme o de especies y geno ipos encon ado en o ejas,
aunque in e io al hallado en ganado acuno, es conside able e incluye
C. ande soni, C. bo is, C. aye i, C. hominis, C. meleag idis, C.
62
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
He mida e al. (2011) ap ecia on una p e alencia signi ica i amen e
más ele ada en co de os neona os (37,1%) que en o ejas adul as
(5,2%). En ebaños de o ejas de EE.UU., San ín e al. (2007)
obse a on que la p e alencia en los co de os e a del 77,4%, siendo
és a muy supe io (25,0%) a la hallada en sus mad es. En el mismo
sen ido, Sweeny e al. (2011) señala on que el po cen aje de in ección
en los co de os (24,7%-40,7%) e a signi ica i amen e más ele ado
que en las hemb as ges an es (7,3%). Wang e al. (2009), en ganado
o ino de China, comp oba on que el po cen aje de animales que
eliminaban ooquis es del p o ozoo e a signi ica i amen e supe io en
los co de os lac an es (10,8%) y en los des e ados (4,3%) que en las
hemb as adul as (2,1-2,5%). Así mismo, en ebaños de o ejas de
China, Ye e al. (2013) ap ecia on mayo es p e alencias en co de os
de 3-15 semanas (22,2%) que en sus mad es (6,1%) y, además,
obse a on que el po cen aje de o ejas que eliminaban ooquis es del
p o ozoo en el momen o del pa o (7,8%) e a supe io al de las
hemb as una semana después de pa i (1,7%), lo que con i ma el
inc emen o de la exc eción de ooquis es du an e el pe ipa o.
En el ganado o ino, el es udio de la posible elación en e la edad
y la p esencia de de e minadas especies de C yp ospo idium conlle a
g andes di icul ades debido a las limi aciones de los es udios
disponibles has a el momen o. Así, la mayo ía de las in es igaciones
sob e C yp ospo idium spp. en o ejas se cen an animales sin des e a ,
donde C. pa um es la p incipal especie iden i icada an o en b o es de
dia ea neona al (Muelle -Doblies e al., 2008; Quílez e al., 2008b;
Robe son, 2009; Díaz e al., 2010a, 2015; Cacciò e al., 2013; Im e e
al., 2013) como en co de os sanos (P i cha d e al., 2007; Muelle -
Doblies e al., 2008; Paole i e al., 2009; Yang e al., 2009). Las
in ecciones con c ip ospo idios en los o inos de mayo edad (co de os
des e ados y adul os) suelen se asin omá icas (San ín e al., 2007),
po lo que cab ía supone que es os animales es a ían in ec ados po
especies más especí icas de hospedado y menos pa ógenas, como C.
ubiqui um o C. xiaoi. Sin emba go, la in o mación disponible sob e
las in ecciones po C yp ospo idium spp. en es os animales es oda ía
insu icien e debido al limi ado núme o de aislados iden i icados. No
obs an e, es a in o mación se ía de g an in e és, pues pe mi i ía
An eceden es del ema
63
conoce los g upos de edad con un mayo iesgo zoonó ico o que
pod ían ac ua como uen e de in ección pa a los co de os neona os.
Los esul ados de algunos es udios epidemiológicos molecula es
longi udinales sugie en que, al igual que sucede en el ganado bo ino,
es p obable que exis a una elación en e la edad de las o ejas y las
especies de C yp ospo idium que p esen an. En China, Wang e al.
(2010) analiza on mues as ecales de 1.701 o ejas de di e en es
edades, obse ando que C. ubiqui um e a la especie más ecuen e en
odos los g upos de edad, iden i icándose en el 90,2% de los animales
posi i os. C. xiaoi y C. ande soni sólo se de ec a on en co de os y en
hemb as adul as, espec i amen e, pe o en mucha meno p opo ción.
Po el con a io, en o o es udio más ecien e ealizado en el mismo
país, Ye e al. (2013) ap ecia on que C. xiaoi e a la especie
p edominan e an o en las mad es (10/13) como en co de os (21/36),
especialmen e en aquellos de 3-4 semanas de edad (15/16). C.
ubiqui um ambién se encon ó en ambos g upos de edad en meno
p opo ción, aunque ue la especie más ecuen e en los co de os de
15-16 semanas (14/20). C. pa um únicamen e se iden i icó en un
co de o meno de un mes (1/36). Todos es os esul ados sugie en que
las mad es pueden ansmi i C. xiaoi a los co de os en el pe ipa o
(Ye e al., 2013). En es e sen ido, un es udio longi udinal ealizado en
o ino de ap i ud cá nica en Aus alia (Sweeny e al., 2011) ambién
mos ó que C. xiaoi e a la especie más ecuen e en los co de os desde
las 2 semanas de ida has a los 9 meses de edad (315/387), así como
la única iden i icada en los animales adul os (14/14). C. ubiqui um
sólo se de ec ó en co de os, siendo más ecuen e en los meno es de 2
meses. Además, la p esencia de C. pa um ue simila en odos los
g upos de co de os, o mando pa e en nume osas ocasiones de
in ecciones mix as con C. xiaoi, aunque es a úl ima especie no se
iden i icó en o inos adul os (Sweeny e al., 2011). Po el con a io, los
esul ados de o os es udios no han pe mi ido ap ecia di e encias
en e los di e en es g upos de edad. Así, en EE.UU., San ín e al.
(2007) halla on que C. ubiqui um e a la especie p edominan e an o en
los co de os (22 C. ubiqui um, 3 C. xiaoi y 1 C. pa um) como en los
animales adul os (6 C. ubiqui um, 1 C. xiaoi y 1 C. pa um). Además,
en 377 o ejas de g anjas gallegas, Cas o-He mida e al. (2011) sólo
64
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
iden i ica on C. pa um an o en 18 co de os neona os como en 9
o ejas adul as; en es e sen ido, Smi h e al. (2010) obse a on que, en
ebaños o inos del Reino Unido, C. pa um e a ambién la especie
p edominan e en odos los g upos de edad, hallando C. bo is
(posiblemen e C. xiaoi) sólo en un pequeño po cen aje de co de os
lac an es. Es as no ables disc epancias en e los es udios pod ían se
un e lejo de las impo an es di e encias geog á icas en la dis ibución
de las di e sas especies de C yp ospo idium en el ganado o ino, lo
que ha ía necesa io es udia la posible p esencia de asociaciones en
cada una de las zonas desc i as an e io men e (Eu opa, Aus alia y
Amé ica-Asia).
1.4.3. En ganado cap ino
La in ección po C yp ospo idium spp. en cab as se desc ibió po
p ime a ez en Aus alia en un cab i o de 2 semanas de edad con
dia ea (Mason e al., 1981). Desde en onces, es e p o ozoo se ha
iden i icado en b o es de dia ea neona al en g anjas de ganado
cap ino de odo el mundo (Polack e al., 1983; Nagy e al., 1984;
Ma os-Fe nández e al., 1993; San ín, 2013), conside ándose
ac ualmen e como el en e opa ógeno más común en cab i os con
dia ea (Muñoz-Fe nández e al., 1996).
Los po cen ajes de pa asi ación po C yp ospo idium spp. en
ganado cap ino son muy a iables, es imándose que, de media,
ap oximadamen e el 15% de las cab as es án in ec adas (Robe son,
2009), aunque es e po cen aje oscila en e el 3,5% y el 72,5% (Wang
e al., 2014; Rome o-Salas e al., 2016; Kaupke e al., 2017). Es as
a iaciones en la p e alencia se deben a las di e encias geog á icas y
es acionales y a las ca ac e ís icas in ínsecas y ex ínsecas de la
población es udiada (Geu den e al., 2008; Mah ouz e al., 2014).
En España son escasos los es udios ealizados sob e el po cen aje
de in ección po C yp ospo idium spp. en cab as, aunque demues an
que es un pa ási o muy p e alen e en cab i os con dia ea (Tabla 1.7.).
Po el con a io, en ganado cap ino sano, las p e alencias son mucho
más bajas, oscilando en e el 11,0%-19,1% de los animales y el
30,0%-35,5% de las g anjas (Ma os-Fe nández e al., 1993; Ma ín-
An eceden es del ema
65
Gómez e al., 1995b; Muñoz e al., 1996; Cas o-He mida e al., 2007;
Sanz-Ceballos e al., 2009).
Tabla 1.7. P e alencia de in ección indi idual po C yp ospo idium spp. en
ganado cap ino en España
Zona
P e alencia
Au o es
A agón
55,7%
Quílez e al. (2001)
Cas illa-León
41,7%
Muñoz e al. (1996)
Galicia
62,7%
Díaz e al. (2015)
1.4.3.1. Especies desc i as
Los es udios sob e la ca ac e ización molecula de especies y/o
geno ipos de C yp ospo idium ealizados en cab as son oda ía
escasos espec o a los ealizados en ganado acuno y o ino. Como se
e leja en la Tabla 1.8., se han iden i icado 5 especies y dos geno ipos
del p o ozoo y, al igual que en el ganado o ino, las especies de
C yp ospo idium más p e alen es en las cab as son C. pa um, C.
ubiqui um y C. xiaoi (Rieux e al., 2013b; Koina i e al., 2014; Mi e
al., 2014; Tzanidakis e al., 2014; Wang e al., 2014; Díaz e al., 2015;
Taylan-Ozkan e al., 2016); con meno ecuencia se han hallado C.
hominis y C. ande soni. Además, cabe señala la impo ancia que C.
pa um, C. hominis y C. ubiqui um ienen en Salud Pública, debido a
que es as especies poseen po encial zoonó ico y se han hallado en
ese as y suminis os de agua (Robe son, 2009; Ryan e al., 2014).
En el ganado cap ino, es ablece posibles di e encias geog á icas
en la dis ibución de especies y geno ipos de C yp ospo idium
conlle a no ables complicaciones debido al escaso núme o de
animales analizados, p oceden es, en muchas ocasiones, de unas pocas
g anjas localizadas en zonas muy conc e as (Wang e al., 2014). De
odos modos, si se excluyen los es udios de casos clínicos y una
in es igación ealizada en Malasia que incluye, ap oximadamen e, la
mi ad de los aislados iden i icados como C. pa um en cab as (Ma
Yuso e al., 2017), C. xiaoi pa ece se la especie del p o ozoo
p edominan e en el ganado cap ino en odos los con inen es.
C. pa um es la especie con una dis ibución geog á ica más
amplia en el ganado cap ino, ya que se ha de ec ado en un mayo
núme o de países, aunque oda ía no se ha de ec ado en el con inen e
66
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
ame icano (Tabla 1.8). Además, es la especie que se ha iden i icado en
un mayo núme o de mues as p oceden es de cab as, aunque su
p e alencia no es siemp e la más ele ada en los ebaños (Tzanidakis
e al., 2014; Kaupke e al., 2017). Como en el es o de umian es
domés icos, es la p incipal especie asociada a la apa ición de cuad os
dia eicos, especialmen e en los cab i os neona os (Chalme s e al.,
2002; Quílez e al., 2008b; Díaz e al., 2015), aunque su impac o
sob e la salud de los animales pa ece se menos impo an e que en
o os umian es domés icos, como en los bó idos (Kaupke e al.,
2017). Así mismo, las nume osas desc ipciones de casos clínicos en
animales neona os han con ibuido a que el núme o de aislados de es a
especie sea especialmen e ele ado.
C. xiaoi es á ampliamen e dis ibuida en ganado cap ino de los 5
con inen es (Tabla 1.8.), siendo la especie que p edomina en cab as en
Aus alia (Al-Habsi e al., 2017), China (Mi e al., 2014; Peng e al.,
2016), F ancia (Rieux e al., 2013), G ecia (Tzanidakis e al., 2014),
Jo dania (Hijjawi e al., 2016) o Polonia (Kaupke e al., 2017). Se c ee
que es una especie poco pa ógena pa a el ganado cap ino, pues o que
se ha iden i icado undamen almen e en animales sanos (Rieux e al.,
2013; Mah ouz e al., 2014), aunque ambién se ha hallado en un
educido núme o de mues as p oceden es de cab i os con dia ea
(Díaz e al. 2010b, 2015).
C. ubiqui um es la e ce a especie más ecuen emen e hallada en
cab as, aunque el núme o de aislados iden i icados es muy in e io a la
de las dos especies an e io men e ci adas; sin emba go, es la especie
p edominan e en algunos es udios ealizados en China (Wang e al.,
2014) y F ancia (Pa aud e al., 2014). Has a el momen o, es a especie
sólo se ha iden i icado en animales asin omá icos, lo que e leja su
escasa pa ogenicidad pa a el ganado cap ino. No obs an e, se
conside a una especie eme gen e con implicaciones en Salud Pública
debido a su po encial zoonó ico.
Las cab as ambién pueden p esen a in ecciones po o as
especies del p o ozoo con un ango de hospedado es es ingido, como
C. hominis y C. ande soni, así como po algunos geno ipos.
An eceden es del ema
67
Tabla 1.8. Especies y geno ipos de C yp ospo idium iden i icados en ganado
cap ino
País
C. pa um
C. ubiqui um
C. xiaoi
O os
Re e encia
Eu opa
143
21
62
1 C. hominis
Bélgica
11
Geu den e al. (2008)
España*
17*
Quílez e al. (2008b)
España*
2*
Díaz e al. (2010b)
España*
61*
5*
Díaz e al. (2015)
F ancia
7
Ngouanesa anh e al.
(2006)
F ancia
1
18
Rieux e al. (2013b)
F ancia
16
Pa aud e al. (2014)
G ecia
2
5
7
Tzanidakis e al. (2014)
ND, I, CZE*
15
Cacciò e al. (2000)
I alia
21*
D umo e al. (2012)
No uega
4
1
Lange e al. (2014)
Polonia
1
29
Kaupke e al. (2017)
R. Unido*
2*
Chalme s e al. (2002)
R. Unido
1 C. hominis
Giles e al. (2009)
R. Checa
1
Hajušek e al. (2004)
Amé ica
4
EE.UU.
4
Faye e al. (2010)
Á ica
1
5
Egip o
¿?
Shouk y e al. (2009)
Tanzania
5
Pa sons e al. (2015)
Zambia
1
Goma e al. (2007)
Asia
274
36
149
16 C. ande soni
3 C. hominis
1 nue o g
Bangladesh
3
Siddiki e al. (2015)
China
1
1 nue o g
Ka anis e al. (2007)
China
24
4
16 C. ande soni
Wang e al. (2014)
China
14
10
45
Mi e al. (2015)
China
8
2
94
Peng e al. (2016)
Co ea Su
3 C. hominis
Pa k e al. (2006)
Filipinas
30
Domingo e al. (2012)
India
4
Mau ya e al. (2013)
Jo dania
2
Hijjawi e al. (2016)
Malasia
207
Ma Yuso e al. (2017)
Omán*
1
Johnson e al. (1999)
S i Lanka
1
Noo deen e al. (2002)
Tu quía*
9*
Taylan-Ozkan e al.
(2016)
Oceanía
6
8
18
6 C. hominis
1 g a a II
Aus alia
4
8
17
Al-Habsi e al. (2017)
PN Guinea
2
1
6 C. hominis
1 g a a II
Koina i e al. (2014)
TOTAL
424
65
238
16 C ande soni
10 C. hominis
1 g a a II
1 nue o g
* iden i icados a pa i de mues as de cab i os con dia ea
68
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Es as in ecciones se conside an espo ádicas, ya que el núme o de
aislados iden i icado es muy pequeño y solo se han hallado en
de e minadas g anjas.
1.4.3.2. Relación en e la edad de los animales y las especies
iden i icadas
Al es udia la a iación de la p e alencia po C yp ospo idium
spp. al conside a la edad de los animales, la mayo ía de los es udios
coinciden con los esul ados ob enidos en o as especies animales,
señalando que el po cen aje de in ección disminuye con la edad. Así,
Mi e al. (2014), en ebaños de ganado cap ino de China, obse a on
que los alo es más ele ados co espondie on a los co de os lac an es
(20%) y des e ados (15%), mien as que los po cen ajes ue on
signi ica i amen e más educidos en cab as de un año (7,5%) y
adul as (6,3%). En el mismo sen ido, y as analiza un núme o
conside able de mues as ecales (n= 1.265) de cab as en China, Wang
e al. (2014) ap ecia on los po cen ajes de in ección más ele ados en
los cab i os des e ados (4,6%) y en los lac an es (2,1%), mien as que
los más educidos se halla on en los adul os (1,9%), siendo es as
di e encias signi ica i as. O os au o es como Noo deen e al. (2001)
o Peng e al. (2016) ambién comp oba on que los animales jó enes
son los más sensibles a la in ección po es e pa ási o, aunque se ha
obse ado que cuando los animales no p esen an un cuad o clínico,
los po cen ajes de in ección son más ele ados en los cab i os de en e
3 y 9 semanas (44,4%) que en los meno es de 21 días (26,2%)
(Kaupke e al., 2017). Según de G aa e al. (1999), las in ecciones
na u ales po C yp ospo idium spp. en cab as a ec an sob e odo a los
neona os, pudiendo causa cambios pa ológicos en el in es ino que
ocasionan una dia ea acuosa au olimi an e, pé dida de peso y ele ada
mo alidad. Sin emba go, aunque un ele ado po cen aje de cab as
adul as (incluso más del 25%) pueden elimina ooquis es del p o ozoo
de o ma c ónica (Noo deen e al., 2001), las c ip ospo idiosis clínicas
son in ecuen es a pa i del mes de ida (Dela osse e al., 2006;
O′Handley y Olson 2006; San ín, 2013), mani es ándose sob e odo
con e aso en el c ecimien o, educción de la ganancia media dia ia y
pé dida de peso (Ka anis e al., 2007; Sweeny e al., 2011; Jacobson e
An eceden es del ema
69
al., 2016); po ello, lo más ecuen e es que es os animales
pe manezcan como po ado es asin omá icos, debido al desa ollo en
mayo o meno g ado de una inmunidad p o ec o a asociada a la edad,
a una mejo condición ísica de los animales adul os o a una a iación
en la in ec i idad y i ulencia de las cepas que a ec an a es as cab as
(Ka anis e al., 2007; Wang e al., 2014; Kaupke e al., 2017). Sin
emba go, se ha señalado que du an e el pe ipa o el po cen aje de
hemb as que eliminan ooquis es del p o ozoo se inc emen a de o ma
conside able, pudiendo se simila al de los co de os más jó enes
(Wang e al., 2014).
Aunque en ganado acuno se ha demos ado la exis encia de una
elación en e la edad y la p esencia de de e minadas especies de
C yp ospo idium, esul a di ícil llega a una conclusión en el ganado
cap ino debido al educido núme o de aislados iden i icados en es os
animales, y a que muy pocas in es igaciones incluyen una
ca ac e ización molecula de aislados p oceden es de di e en es g upos
de edad. De hecho, sólo es es udios ealizados en China (Mi e al.,
2014; Wang e al., 2014; Peng e al., 2016) p esen an da os comple os.
Así, Mi e al. (2014) obse a on que C. xiaoi, y C. pa um se
obse aban en los g upos de animales meno es de dos años, mien as
que C. ubiqui um se halló en odos los g upos de edad, a excepción de
los cab i os lac an es. El po cen aje de aislados posi i os a C. xiaoi y
C. pa um ue mayo en los cab i os des e ados (48,9% y 80%,
espec i amen e); po el con a io, el núme o de aislados iden i icados
como C. pa um ue simila en los es g upos de edad. Los esul ados
ob enidos pos e io men e po Peng e al. (2016) son muy simila es a
los del es udio an e io , aunque la es a i icación de edades esul ó un
poco di e en e; así, C. xiaoi ue ambién la especie más
ecuen emen e iden i icada en odos los g upos de edad; C. pa um
ambién se encon ó en las cab as de odas las edades, pe o en baja
p opo ción. Po el con a io, C. ubiqui um solo se iden i icó de o ma
espo ádica en una mues a p oceden e de un co de o lac an e y en o a
de un animal adul o. En el mismo sen ido, Rieux e al. (2013b)
ap ecia on que la mayo ía (18/19) de los cab i os sin des e a
es udiados eliminaban ooquis es de C. xiaoi. Es os esul ados sugie en
70
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
una posible ansmisión de C. xiaoi en el pe ipa o, simila a lo
obse ado en ganado o ino (Ye e al., 2013).
En con as e con los es udios an e io es, Wang e al. (2014)
obse a on que C. ubiqui um e a la especie p edominan e en odos los
g upos de edad, a excepción del g upo de los co de os des e ados,
donde C. ande soni ue la especie iden i icada con mayo ecuencia;
es a úl ima especie se halló en una única g anja, aunque se de ec ó en
4 g upos de edad. Sin emba go, la impo ancia de C. xiaoi ue meno ,
iden i icándose solo en cab i os y en hemb as ges an es.
1.4.4. Sub ipos de C. pa um y C. ubiqui um en pequeños
umian es
El gen GP60 es, ac ualmen e, el ma cado gené ico empleado con
mayo ecuencia pa a el sub ipado de aislados pe enecien es a
di e en es especies de C yp ospo idium, incluyendo algunas de g an
impo ancia en humanos, como C. pa um y C. hominis, y o as de
meno ele ancia (C. meleag idis, C. cuniculus, e c.).
Respec o a los sub ipos GP60 de C. pa um, aunque se han
publicado nume osos abajos ela i os an o a los se es humanos
como al ganado acuno, en pequeños umian es és os son escasos; así,
an o en ganado o ino como en cap ino únicamen e se han
iden i icado sub ipos de las amilias alélicas IIa y IId que ienen
po encial zoonó ico (Tablas 1.9 y 1.10). Además de los sub ipos
ecogidos en es as Tablas, en pequeños umian es ambién se han
de ec ado el IIdA4G2T14 y IIdA4G3T13, aunque no se han incluido
debido a que no se indica ni el núme o de aislados de cada uno de
ellos ni la especie donde se halla on (Tzanidakis e al., 2014).
En o inos, al con a io de lo obse ado en cap ino, el núme o de
sub ipos de C. pa um pe enecien es a la amilia IId es muy supe io
a la de sub ipos IIa, aunque es o puede debe se al meno núme o de
aislados iden i icados en es os úl imos. Ambas amilias poseen
po encial zoonósico, aunque los da os ob enidos has a el momen o
sugie en que los sub ipos pe enecien es a la amilia IIa son los más
comunes en las in ecciones po C. pa um en pe sonas (Xiao, 2010).
An eceden es del ema
71
Tabla 1.9. Sub ipos de C. pa um iden i icados en mues as de ganado
o ino
Sub ipo
Nº
aislados
Luga
Re e encia
IIaA13G1R1
1
España
Díaz e al., 2015
IIaA14G2R1
1
España
Díaz e al., 2015
IIaA15G2R1
42
Bélgica, B asil, China,
España, I alia, Papúa N.
Guinea, Reino Unido
Geu den e al., 2008; Quílez e al., 2008b;
Díaz e al., 2010a, 2015; Smi h e al., 2010;
Cacciò e al., 2013; Ye e al., 2013; Koina i
e al., 2014; Paz e Sil a, 2014; Yang e al.,
2014; Wells e al., 2015
IIaA16G1R1
2
Jo dania, Rumanía
Im e e al., 2013; Hijjawi e al., 2016
IIaA16G3R1
15
España
Díaz e al., 2010a, 2015
IIaA17G1R1
12
Polonia, Reino Unido,
Rumanía
Smi h e al., 2010; Im e e al., 2013; Kaupke
e al., 2017
IIaA17G2R1
1
Reino Unido
Smi h e al., 2010
IIaA18G2R1
1
Reino Unido
Wells e al., 2015
IIaA18G3R1
1
España
Quílez e al., 2008b
IIaA19G1R1
3
Reino Unido
Connelly e al., 2013; U si e al., 2016
IIaA19G2R1
7
Jo dania, Reino Unido
Wells e al., 2015; Hijjawi e al., 2016
IIaA19G4R1
1
Papúa N. Guinea
Koina i e al., 2014
IIaA20G2R1
3
I alia
Cacciò e al., 2013
TOTAL IIa
90
IIdA14G1
2
España
Quílez e al., 2008b
IIdA15G1
3
España
Quílez e al., 2008b
IIdA17G1
70
España
Quílez e al., 2008b
IIdA18G1
42
Aus alia, China, España
Quílez e al., 2008b; Yang e al., 2014, 2015
IIdA19G1
43
China y España
Quílez e al., 2008b; Yang e al., 2014
IIdA20G1
1
Rumanía
Im e e al., 2013
IIdA21G1
1
España
Quílez e al., 2008b
IIdA22G1
2
España
Quílez e al., 2008b
IIdA22G2R1
1
Rumanía
Im e e al., 2013
IIdA24G1
3
España y Rumanía
Quílez e al., 2008b; Im e e al., 2013
TOTAL IId
168
Si bien es cie o que, en pequeños umian es, un amplio núme o
de es udios únicamen e han de ec ado sub ipos pe enecien es a la
amilia IIa (Geu den e al., 2008; Díaz e al., 2010a; Smi h e al.,
2010; Cacciò e al., 2013; Connelly e al., 2013; Ye e al., 2013;
Koina i e al., 2014; Lange e al., 2014; Paz e Sil a, 2014; Yang e al.,
2014; Hijjawi e al., 2016; U si e al., 2016; Al-Habsi e al., 2017),
cabe des aca que el núme o de aislados iden i icados en cada una de
es as in es igaciones ue, gene almen e, educido. La di e sidad
gené ica de C. pa um obse ada en es os pequeños umian es es
meno a la de ec ada en ganado acuno, y e leja el escaso núme o de
aislados iden i icados. Po el mismo mo i o, el núme o de sub ipos
de ec ados en el o inos es mayo que en cap inos (Tablas 1.9 y 1.10);
no obs an e, si se conside a el o al de aislados iden i icados has a el
78
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Las in ecciones humanas causadas po C. elis se han de ec ado en
muchos luga es, mos ando una mayo ecuencia en los países en
desa ollo que en las naciones indus ializadas (Raccu , 2007; Lucio-
Fo s e e al., 2010). Di e sos es udios lle ados a cabo en Eu opa
iden i ica on un núme o a iable de casos p oducidos po C. elis
(Mo gan e al., 2000; Ped aza-Díaz e al., 2001; Leoni e al., 2006;
ANOFEL, 2010; Elwin e al., 2012a; Insulande e al, 2013).
Asimismo, se encon a on mues as posi i as pa a es a especie en
humanos de Á ica y del No e y Su de Amé ica (Pieniazek e al.,
1999; Mo gan e al., 2000; Ped aza-Díaz e al., 2001).
C yp ospo idium canis in ec a a pe os domés icos (Canis
amilia is) de odo el mundo. Aún se conoce muy poco sob e es a
especie y la en e medad que causa en es os animales domés icos. Es a
especie ambién se ha de ec ado (T ou e al., 2006) en coyo es (Canis
la ans), en zo os ojos (Vulpes ulpes) (Nolan e al., 2013) y
ocasionalmen e en humanos.
En los úl imos años, C. ubiqui um, an e io men e conocido como
"geno ipo ce ino o geno ipo 3", eme ge como o a impo an e especie
zoonó ica que in ec a a humanos (Faye e al., 2010). Se ha
encon ado en pe sonas de odo el mundo, p incipalmen e en naciones
indus ializadas (Chalme s y Ka ze , 2013). De hecho, en el Reino
Unido, se han a ibuido más casos humanos de c ip ospo idiosis a C.
ubiqui um que a C. canis (Elwin e al., 2012a). El ecien e
econocimien o de C. ubiqui um como un pa ógeno zoonó ico
eme gen e iene una ele ada impo ancia en la salud pública debido a
su amplia dis ibución geog á ica y al amplio ango de hospedado es
que iene (Faye e al., 2010; Li e al., 2014). Es a especie se ha
de ec ado en co de os en Galicia (Soilán, 2014; Díaz e al., 2015), en
umian es sil es es, en oedo es, en ca ní o os (mapaches) en
lému es y en humanos (Feng e al., 2007; Ziegle e al., 2007; Da
Sil a e al., 2003; Elwin y Chalme s, 2008; Faye e al., 2010).
También se ha hallado en uen es de agua po able, aguas plu iales y
aguas esiduales en a ias ubicaciones geog á icas (Zhou e al., 2003;
Jiang e al., 2005; Yang e al., 2008; Jellison e al., 2009; Nichols e
al., 2010; Van Dyke e al., 2012).
An eceden es del ema
79
En España es a en e medad es de decla ación obliga o ia desde el
año 2009, pe o las p uebas de u ina no se lle an a cabo y en muchos
casos puede pasa inad e ida (Ma ín-Ampudia e al., 2012). No
obs an e, la iden idad de las especies y geno ipos de C yp ospo idium
que in ec an a las pe sonas en nues o país no es á bien de inida y se
encuen an disponibles pocos da os sob e la di e sidad in aespecí ica
de es e p o ozoo. La mayo ía de los es udios se ealiza on en
poblaciones en iesgo con sin oma ología o donde ya se sospechaba de
la exis encia de la in ección. Se publica on es udios en población
adul a y en niños ( an o inmunocompe en es como inmuno-
dep imidos), sob e odo VIH-posi i os en di e sas egiones como
Galicia (Abal-Fabei o e al., 2015), Cádiz (Ga cía e al., 1989; Díaz e
al., 1990), Mad id (Alonso-Sanz e al., 1995; del Águila e al., 1997),
Salamanca (Ga cía-Rod íguez e al., 1990; Rod íguez-He nández e
al., 1996), Za agoza (Moles e al., 1998; Ramo e al., 2015), Islas
Cana ias (Ab eu-Acos a e al., 2007) o Ba celona (Segu a e al.,
2015). A a és de es udios molecula es se demues a que en España
ci culan 4 especies de C yp ospo idium (C. pa um, C. hominis, C.
meleag idis y C. elis) impo an es en la epidemiología de la
c ip ospo idiosis humana (Quílez e al., 2008b; Na a o-i- Ma ínez e
al., 2003, 2010). De hecho, los casos de c ip ospo idiosis humana
ocasionados po C. hominis son más p e alen es que los de C. pa um
(Llo en e e al., 2007; Na a o-i-Ma ínez e al., 2012). En es e
sen ido, en los niños de á eas u banas p edominaban las in ecciones
po C. hominis, mien as que, en los de á eas u ales e an más
p e alen es las in ecciones po C. pa um. Es o coincide con lo
señalado po di e sos au o es (Llo en e e al., 2007; Essid e al., 2008;
Zin l e al., 2009; Xiao, 2010; Na a o-i-Ma inez e al., 2012)
quienes indica on que sob e la dis ibución geog á ica de C. pa um y
de C. hominis in luye el hábi a en el que i en las pe sonas. No
obs an e, cabe señala que, aunque C. hominis y C. pa um son
esponsables de la mayo ía de las in ecciones, ambién hay que p es a
a ención a las c ip ospo idiosis ocasionadas po C. meleag idis, C.
elis y C. ubiqui um, ya que ambién se han desc i o casos espo ádicos
(Llo en e e al., 2007; Ma ín-Ampudia e al., 2012), especialmen e en
niños (Llo en e e al., 2007; Ca dona e al., 2011).
80
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
O os es udios sugie en la exis encia de poblaciones de C. pa um
especí icas de humanos (Cacciò, 2005); es e geno ipo se ca ac e izó
bien y se de ec a en nume osos b o es de c ip ospo idiosis eniendo
como uen e p incipal de ansmisión el agua de bebida o des inada a
usos ec ea i os (MacKenzie e al., 1994; Peng e al., 1997; Ong e
al., 1999; Sulaiman e al., 1998; Xiao e al., 2001; Glabe man e al.,
2002; Wa d e al., 2002; Ryan e al., 2005; Baldu sson y Ka anis,
2011). Además, hay que ene en cuen a, que C yp ospo idium puede
se esis en e a los di e en es mé odos pa a el a amien o de aguas,
po lo que la c ip ospo idiosis ep esen a el p incipal p oblema de
salud pública de los se icios de suminis o de agua po able en los
países desa ollados (Faye e al., 2000; Chalme s y Ka ze , 2013).
También se ha de ec ado la p esencia de C yp ospo idium spp. en
e du as escas (Monge e al., 1996), en sid a de manzana (Milla d e
al., 1994; D iedge e al., 2001; Blackbu n e al., 2006) o en bi al os
(F ei e-San os e al., 2000). Pun ualmen e, se han desc i o casos de
in ección espi a o ia po inhalación o aspi ación (Shi ley e al.,
2012).
Obje i os
83
2. Obje i os
Basándonos en los an eceden es expues os, nos plan eamos los
siguien es obje i os:
1º.- De e mina la p e alencia de in ección po C yp ospo idium
spp. en umian es domés icos sin dia ea, en Galicia.
2º.- Iden i ica las especies y geno ipos p esen es en ganado
acuno, o ino y cap ino de es a egión española.
3º.- Conoce las asociaciones de las especies/geno ipos de
C yp ospo idium más ecuen es en las g anjas de umian es
domés icos en Galicia.
4º.- De e mina la ecuencia de las especies/geno ipos de
C yp ospo idium en elación con la edad de los animales.
5º.- Analiza si los animales sin dia ea pueden o igina b o es de
dia ea neona al en las explo aciones de umian es domés icos.
6º.- In es iga si las especies/geno ipos de C yp ospo idium
halladas en los umian es obje o de es udio, son po encialmen e
zoonó icas.
Ma e iales y mé odos
87
3. Ma e iales y mé odos
En es e apa ado se desc iben las ca ac e ís icas gene ales de la
zona y de los animales obje o de es e es udio, así como las écnicas
molecula es empleadas pa a de ec a la p esencia de C yp ospo idium
spp. y pa a geno ipa y/o sub ipa los aislados del p o ozoo.
3.1. CARACTERÍSTICAS GENERALES DE LA ZONA Y DE LOS ANIMALES
Galicia es una egión esencialmen e ganade a si uada en el
no oes e de España (43°47’-41°49’ N; 6°42-9°18’ W). El ganado
acuno de ap i ud leche a y cá nica son los p incipales ac i os del
sec o ganade o en Galicia, siendo Lugo y A Co uña las p o incias
con un mayo censo de bo inos, con 451.970 y 335.654 cabezas de
ganado, espec i amen e (MAGRAMA, 2015). En los úl imos años,
debido undamen almen e al cie e de las explo aciones de pequeño
amaño, en es a Comunidad Au ónoma se ha educido
signi ica i amen e el núme o de g anjas (de 49.355 en el 2008 a
39.479 en 2014), aunque ha aumen ado el núme o de acas po ebaño
(Ins i u o Galego de Es a ís ica, 2017), conduciendo a un mayo g ado
de in ensi icación (mayo p oducción) y ecni icación (uso de
maquina ia más mode na, mejo es ins alaciones) de las g anjas,
especialmen e de ganado acuno leche o. Sin emba go, el aumen o de
animales es abulados, si las medidas higiénico-sani a ias no son las
adecuadas, conlle a un inc emen o del iesgo de con agio con algunos
pa ógenos, como los p o ozoos in es inales (C yp ospo idium spp.,
Eime ia spp., Gia dia spp., e c.). Es e iesgo es meno en las
explo aciones de ca ne, pues la mayo ía de las explo aciones gallegas
de acuno de ca ne se ca ac e izan po se pequeñas emp esas
amilia es, que si en de complemen o a su economía, y po ello la
mayo ía se manejan en égimen semi-ex ensi o. El iempo de pas o eo
depende de las condiciones me eo ológicas; así, po ejemplo, en
p ima e a y o oño, las acas pe manecen odo el día en los pas os,
94
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Gyeonggi, Co ea del Su ) aplicando un ol aje de 110V du an e 70
minu os. A con inuación, se isualiza on en un analizado de imagen.
Las especies y/o geno ipos de C yp ospo idium se iden i ica on
compa ando los pa ones de es icción ob enidos con los ecogidos en
a ios abajos (Feng e al., 2007; Xiao y Ryan, 2008), y que se
esumen en la Tabla 3.4. Un núme o ep esen a i o de los aislados
cuyo pa ón de es icción no coincidió con el de C. pa um se
secuencia on con obje o de con i ma los esul ados de la RFLP.
Tabla 3.4. Pa ones de es icción pa a las especies de C yp ospo idium más
ecuen es en umian es domés icos al conside a la enzima usada
SspI
VspI
MboII
C. ande soni
448, 397
730, 115
769, 76
C. bo is
432, 267, 103, 34
617, 115, 104
412, 185, 162, 76
C. pa um
450, 267, 108, 12, 11
629, 115, 104
771, 76
C. yanae
432, 267, 103, 34
616, 115, 104
574, 185, 76
C. ubiqui um
454, 384, 11
461, 169, 115, 104
-
C. xiaoi
413, 267, 103, 34, 19
617, 115, 104
-
3.2.3. Análisis sub ípico
Los aislados iden i icados como C. pa um y C. ubiqui um en la
RFLP, se sub ipa on median e el análisis de la secuencia de un
agmen o (800-850 y 950 pb, espec i amen e) del gen que codi ica
pa a la glicop o eína de 60 kDa (GP60), empleando PCRs anidadas
desc i as p e iamen e po Al es e al. (2003) y Li e al. (2014),
espec i amen e.
En el caso de la PCR anidada pa a sub ipa C. pa um, en ambas
eacciones se empleó 1 μl de ADN (ADN pa ón pa a la p ime a
eacción y p oduc o de la p ime a PCR pa a la segunda eacción), que
se añadió a una mezcla compues a po ampón de PCR 1x, MgCl2 3
mM, 200 µM de cada dNTP, 0,2 µM de cada cebado (Tabla 3.5) y 5
U de Taq polime asa, en un olumen o al de 50 μl. Las mues as se
some ie on a 40 ciclos de 45’’ a 95°C, 45’’a 52°C y un minu o a
72°C; ambién se incluyó un paso de desna u alización inicial (3
minu os a 95°C) y o o de ex ensión inal (10 minu os a 72°C).
Ma e iales y mé odos
95
Tabla 3.5. Cebado es usados en la ampli icación de los genes que codi ican pa a
la GP60
Cebado
Secuencia (5´-3´)
C. pa um
GP601F (AL 3531)
ATA GTC TCC GCT GTA TTC
GP601R (AL 3535)
GGA AGG AAC GAT GTA TCT
GP602F (AL 3532)
TCC GCT GTA TTC TCA GCC
GP602F (AL 3534)
GCA GAG GAA CCA GCA TC
C. ubiqui um
Ubi-18S-F1
TTTACCCACACATCTGTAGCGTCG
Ubi-18S-R1
ACGGACGGAATGATGTATCTGA
Ubi-18S-F2
ATAGGTGATAATTAGTCAGTCTTTAAT
Ubi-18S-R2
TCCAAAAGCGGCTGAGTCAGCATC
Pa a ampli ica un agmen o del gen gp60 de C. ubiqui um se
empleó 1 μl de ADN pa ón pa a la p ime a eacción y 2 μl del
p oduc o de la p ime a PCR pa a la segunda. Ambas eacciones se
ealiza on en un olumen o al de 50 μl, con eniendo 3 mM de MgCl2,
ampón de PCR 1x, 200 µM de cada dNTP, 0,25 µM de los cebado es
Ubi-18S-F1 y Ubi-18S-R1 o 0,5 µM de los Ubi-18S-F2 and Ubi-18S-
R2 (Tabla 3.5) y 1,25 unidades de Taq polime asa. En la p ime a PCR
ambién se incluye on 400 ng/μl de se oalbúmina bo ina (Sigma, S.
Luis, Mon ana, EE.UU.). El p o ocolo consis ió en una
desna u alización inicial a 94°C du an e 5 minu os, seguida de 35
ciclos de 45‘’ a 94°C, 45’’ a 58° C (p ime a PCR) o a 55°C (segunda
PCR), 1’ a 72°C y una ex ensión inal de 7’ a 72°C.
En ambos casos, los p oduc os de PCR ob enidos se isualiza on
en un analizado de imagen as some e los a una elec o o esis,
empleando el mismo p o ocolo que en la PCR del SSU RNA. Pa a
iden i ica los sub ipos p esen es, se de e minó la secuencia de
nucleó idos u ilizando el p ocedimien o ci ado an e io men e, y las
secuencias consenso se compa a on con las deposi adas en el
GenBank. En C. pa um, el agmen o ampli icado del gen de la GP60
posee en el ex emo 5’ una egión in eg ada po epe iciones de los
inucleó idos TCA/TCG/TCT que codi ican pa a la se ina. Teniendo
en cuen a es a ca ac e ís ica, los sub ipos se nomb a on conside ando
el núme o de epe iciones de TCA y TCG en la egión epe i i a y de
las mu aciones p esen es en la zona sin epe iciones, así como del
núme o de copias de la secuencia ACATCA localizadas al inal de la
zona epe i i a en aquellos sub ipos pe enecien es a la amilia IIa
(Sulaiman e al., 2005).
96
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
3.3. ANÁLISIS ESTADÍSTICOS
Los da os ob enidos en es e es udio se p ocesa on con ayuda de la
hoja de cálculo Mic oso Excel 2007 y su análisis es adís ico se
ealizó median e el paque e es adís ico IBM SPSS S a is ics pa a
Windows, e sión 20.0. (IBM Co po a ion, Chicago (IL), EE.UU.).
Pa a comp oba la posible in luencia de di e en es pa áme os (edad,
p o incia, especie animal, especie de C yp ospo idium, …) sob e el
po cen aje de in ección indi idual se empleó el es Chi-cuad ado. Se
conside ó que las di e encias e an signi ica i as cuando el p- alo ue
meno de 0,05.
Resul ados y discusión
99
4. Resul ados y discusión
En es e apa ado se analiza la p e alencia de in ección po
C yp ospo idium spp. en es especies de umian es domés icos a ni el
indi idual, de explo ación y al conside a la edad de los animales.
Además, se han de e minado las especies de es e pa ási o y su
p e alencia en los di e en es g upos de edad y se han es ablecido
cuales son los sub ipos más ecuen es en el ganado acuno y en el
o ino y el cap ino.
4.1. EN GANADO VACUNO
4.1.1. P e alencia de in ección
Como ya se señaló en el co espondien e apa ado de Ma e iales y
Mé odos, en p ime luga los ooquis es de C yp ospo idium spp.
p esen es en las mues as de heces se concen a on, empleando es e
concen ado pa a ealiza la ex acción del ADN pa asi a io.
Pos e io men e, y median e una PCR anidada, se ampli icó un
agmen o de ap oximadamen e 850 pa es de bases (pb) del gen que
codi ica pa a la subunidad 18S del ARN de es e pa ási o (Figu a
4.1.). Así, se de ec ó la p esencia de ADN de C yp ospo idium spp. en
91 mues as de las 555 analizadas, lo que supone una p e alencia de
in ección indi idual del 16,4%. Al conside a la localización de las
explo aciones, el po cen aje de animales posi i os ue
signi ica i amen e (χ2= 4,409; p= 0,036) supe io en Pon e ed a
(25,4%) que en Lugo (15,2%); en la p o incia de Ou ense no se
de ec a on animales posi i os.
Se debe señala que en el p esen e es udio sólo se pudo dispone
de una mues a po animal; eniendo en cuen a que las in ecciones
asin omá icas po es e p o ozoo se ca ac e izan po una eliminación
in e mi en e de ooquis es, el análisis de una única mues a puede da
luga a alsos nega i os, po lo que nues os esul ados pod ían es a
100
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
subes imando la p e alencia eal de C yp ospo idium spp. en el
ganado acuno sin dia ea (O’Handley e al., 1999; Faye e al., 1998;
Cas o-He mida e al., 2002, 2006; Robe son e al., 2014; Ca dona e
al., 2015). Algunas in es igaciones sugie en que casi la o alidad de
los animales se in ec an con el p o ozoo du an e el p ime mes de
ida; en es e sen ido, Villaco a e al. (1991) halla on una p e alencia
de in ección del 93% en e ne os neona os cuando, al ealiza un
seguimien o indi idual du an e un mes, se analiza on dos mues as
semanales.
Figu a 4.1. Mues as posi i as (calles 1-16) median e PCR del gen que codi ica
pa a la subunidad ibosómica 18S del ARN ( agmen o de ap oximadamen e 850
pb)
El po cen aje de in ección indi idual de ec ado en el p esen e
es udio esul ó, po lo gene al, lige amen e más ele ado que los
señalados p e iamen e en ganado acuno de Galicia po Cas o
He mida e al. (2006, 2007, 2009, 2011), con alo es que oscila on
en e el 6,4% y el 14,2%. En o as egiones de España se halla on
p e alencias simila es a las ob enidas en nues o es udio, como en
A agón (19,7%; Quílez e al., 1996a); po el con a io, en un es udio
ealizado en Ála a, Ca dona e al. (2011), solo halla on un 3% de
bo inos posi i os. Al compa a nues os esul ados con los ob enidos
Resul ados y discusión
101
en ganado bo ino de o os países, como Bélgica, B asil, Canadá,
Egip o, la India, No uega o Reino Unido, se halla on po cen ajes
simila es o lige amen e in e io es (Geu den e al., 2007; Langkjae e
al. 2007; Khan e al., 2010; Dixon e al., 2011; Ame e al., 2013;
Sil a e al., 2013; Smi h e al., 2014). Sin emba go, en algunos países
asiá icos y en EE.UU. se obse a on alo es más ele ados que
oscila on en e el 20% y el 40% (San ín e al., 2004; Nguyen e al.,
2007; Muhid e al., 2011; Mu akoshi e al., 2012), lo que puede
debe se a la in luencia de cie os ac o es como el amaño y manejo
del ebaño, núme o de g anjas y animales mues eados, condiciones
higiénicas de las ins alaciones, edad de los animales y año o
empo ada en la que se ealizó el mues eo (S u dee e al., 2003;
Hamnes e al., 2006; Im e y Dă ăbuş, 2011; Feng y Xiao, 2011).
Con espec o a la p e alencia po explo ación, el 41,6% (62/149)
de las g anjas poseían al menos un animal posi i o a C yp ospo idium
spp. Con espec o a su localización, 48 de es as g anjas es aban
ubicadas en la p o incia de Lugo y 14 en Pon e ed a; no se halla on
explo aciones posi i as en Ou ense. El po cen aje de ebaños posi i os
ue supe io en Lugo (43,2%) que en Pon e ed a (37,8%), aunque
es as di e encias no ue on es adís icamen e signi ica i as (χ2= 0,186;
p= 0,66). Nues os esul ados son simila es a los hallados p e iamen e
po Valde ey (2017) en explo aciones gallegas donde se es udia on
e ne os sin des e a que no p esen aban signos de dia ea neona al
(38,5%). Asimismo, al es udia la p esencia del p o ozoo en bo inos
mayo es de 3 años, Cas o-He mida e al. (2007) obse a on que un
48,3% de los ebaños poseían al menos un animal posi i o a
C yp ospo idium spp. Po el con a io, en o os es udios ealizados
ambién en Galicia, pe o en g anjas en las que había animales con
dia ea neona al, Díaz e al. (2010) y Soilán (2014) señala on
p e alencias de in ección del 60-63%. No obs an e, en odos los casos,
los esul ados de es os es udios ponen en e idencia que
C yp ospo idium es un pa ási o con una amplia dis ibución en las
g anjas de ganado acuno en Galicia. Va ios es udios han demos ado
que la p esencia de es e p o ozoo en las g anjas es á asociada a
condiciones higiénicas de icien es y a un manejo inco ec o de los
animales (de G aa e al., 1999; Cas o-He mida e al., 2002; Díaz e
102
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
al., 2010c); en Galicia son oda ía muy comunes las explo aciones de
pequeño amaño y manejo adicional, menos p o esionalizadas,
donde la higiene y las ins alaciones suelen se peo es y que a o ecen
la con aminación del medio con ooquis es y, po ello, la ansmisión
del pa ási o (Cas o-He mida e al., 2002), lo que explica ía los
po cen ajes an ele ados hallados en ebaños bo inos de es a
Comunidad. Po el con a io, en o os países donde la p oducción de
acuno es á más p o esionalizada se ha ap eciado la exis encia de una
elación posi i a en e el amaño de la explo ación y el iesgo de
in ección, debida p incipalmen e a la ele ada densidad de animales
(Ga be e al., 1994; Quigley e al., 1994).
Al analiza la in luencia de la edad de los animales sob e la
p e alencia de C yp ospo idium spp., se obse ó la exis encia de una
elación in e sa; así, los e ne os meno es de 2 meses mos a on un
po cen aje de in ección signi ica i amen e (χ2= 22.004; p< 0,001) más
ele ado (28,6%) que los de más edad (Figu a 4.2.). Las di e encias
obse adas en e los di e en es g upos de animales de más de dos
meses de edad no ue on es adís icamen e signi ica i as en ningún
caso (p> 0,05).
Figu a 4.2. Po cen aje de in ección po C yp ospo idium spp. en ganado acuno
de Galicia al conside a la edad de los animales
Resul ados y discusión
103
Es os esul ados coinciden con los ob enidos en la mayo ía de
in es igaciones, en las que las p e alencias más ele adas se
obse aban en los animales más jó enes, más ecep i os, que suelen
in ec a se poco iempo después de nace (Cas o-He mida e al.,
2006a; San ín e al., 2008; Khan e al., 2010; Muhid e al., 2011; dos
San os Toledo e al., 2017; Gong e al., 2017). La p e alencia
obse ada en los e ne os lac an es sin dia ea, un 28,6%, coincidió
con la de o os es udios p e ios ealizados en la misma á ea de
es udio, donde se señala on po cen ajes del 22,7-27% (Cas o-
He mida e al., 2002; Valde ey, 2017). Po el con a io, Ga cía
Meniño (2013) halló que un 44% de los e ne os sin dia ea en Galicia
eliminaban ooquis es del p o ozoo. Sin emba go, odos es os
esul ados esul a on mucho más educidos que los señalados en
e ne os con dia ea neona al. Así, en Galicia, Díaz e al. (2010) y
Soilán (2014) obse a on que el 49,2% y el 53,4% de los animales
es udiados, espec i amen e, e an posi i os median e écnicas
mic oscópicas; es os esul ados coinciden con los señalados en
e ne os meno es de 45 días explo ados en A agón (53,8%; Quílez e
al., 1996), así como en el Cen o (50%; De la Fuen e e al., 1998) y en
el No e (57,8% Quílez e al., 2008) de España. En Galicia, Ga cía-
Meniño (2013) encon ó una p e alencia de in ección mucho más
ele ada (76%), aunque es os esul ados pueden debe se al educido
núme o de mues as analizadas. Todos es os da os con i man que
C yp ospo idium spp. es un pa ási o muy p e alen e an o en e ne os
sanos como con dia ea, aunque las p e alencias de in ección son
siemp e supe io es en animales que p esen an sin oma ología clínica
(Ga cía-Meniño e al., 2015).
Los e ne os de en e 2-12 meses y las no illas p esen a on unas
p e alencias de 17,8% y 13,5 %, espec i amen e, que ue on
signi ica i amen e más educidas que las de los e ne os lac an es
(χ2=3,4077; p= 0,049 y χ2=8,796; p= 0,003, espec i amen e). La
mayo ía de los es udios ealizados en bo inos mues an po cen ajes de
in ección po el p o ozoo que oscilan en e el 10 y el 20% en e ne os
des e ados; así, Quílez e al (1996a) obse a on que los animales de
1,5-4 meses de edad mos aban una p e alencia del 14%, mien as que
sólo el 7,7% de los de 4-24 meses e an posi i os. Del mismo modo, en
110
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
10 20 30 40 50
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 GAGTAAGGAA CAACCTCCAA TCTCTAGTTG GCATAGTTTA TGGTTAAGAC
C. spp HQ822146 -----..... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
60 70 80 90 100
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 TACGACGGTA TCTGATCGTC TTCGATCCCC TAACTTTCGT TCTTGATTAA
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
110 120 130 140 150
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 TGAAAACATC CTTGGCAAAT GCTTTCGCAC TAGTTTGTCT TTAACAAATC
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
160 170 180 190 200
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 TAAGAATTTC ACCTCTGACT GTTAAATACA AATGCCCCCA ACTGTCCCTA
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
210 220 230 240 250
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 TTAATCATTA TTTTTATCTT AGAACCAATA AAAAAGATAA AAATCTTTTA
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
260 270 280 290 300
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 TATTATTCCA TGCTGGAGTA TTCAAGGCAT ATGCCTGCTT TAAGCACTCT
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
310 320 330 340 350
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 AATTTTCTCA AAGTAAAATT TCATATACTA ATAATAA-TA TAGTAATATG
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......-.. ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... ....A..T.. ..........
360 370 380 390 400
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 AATTATGTTA ATATTATATA AATATTAAAA ATATTATATA TAAATTATTA
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
410 420 430 440 450
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 ACAGAAATCC AACTACGAGC TTTTTAACTG CAACAACTTT AATATACGCT
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
Figu a 4.5. Alineamien o de secuencias de ADN de los p oduc os de PCR del gen
SSU RNA, incluyendo un aislado ep esen a i o de C. suis-like iden i icado en
ganado acuno de Galicia y C yp ospo idium spp. (HQ822146) y C. suis
(JQ936502). Los pun os indican nucleó idos idén icos a los del aislado B14/87 y
los guiones señalan delecciones. Las mu aciones de nucleó idos con espec o a
dicho aislado se indican en ojo.
Resul ados y discusión
111
460 470 480 490 500
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 ATTGGAGCTG GAATTACCGC GGCTGCTGGC ACCAGACTTG CCCTCCAATT
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
510 520 530 540 550
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 GATACTTGTA AAGGGGTTTA TACTTAACTC ATTCCAATTA CAAAACTAAA
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
560 570 580 590 600
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 AAAGTCCTGT ATTGTTATTT CTTGTCACTA CCTCCCTGTA TTAGGATTGG
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
610 620 630 640 650
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 GTAATTTGCG CGCCTGCTGC CTTCCTTAGA TGTGGTAGCC GTTTCTCAGG
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
660 670 680 690 700
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 CTCCCTCTCC GGAATCGAAC CCTAATTCCC CGTTACCCGT CATTGCCACG
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
710 720 730 740 750
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 GTAGGCCAAT ACCCTACCGT CTAAAGCTGA TAGGTCAGAA ACTTGAATGA
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
760 770 780 790 800
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. suis-like B14/87 TATGTCACAT TAAAAATGTG ATCCGTAAAG TTATTATGAA TCACCAAATT
C. spp HQ822146 .......... .......... .......... .......... ..........
C. suis JQ936502 .......... .......... .......... .......... ..........
810 820
....|....| ....|....| ....
C. suis-like B14/87 ATATTGGTTC TTTATCTAAT AAAT
C. spp HQ822146 .........- ---------- ----
C. suis JQ936502 .......... .......... ....
Figu a 4.5. (Con inuación)
La mayo ía de los aislados iden i icados como C. bo is ue on
idén icos a la secuencia de e e encia MF074602, ob enida en ganado
acuno de China (Cai e al., 2017). El es o mos a on una delección
de una imina en la posición 718 (Figu a 4.6.), mos ando una
homología del 100% con el aislado KC618608 de ec ado po Rzezu za
y Kaupke (2013) en bo inos de Polonia.
112
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
10 20 30 40 50
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 TTACGGATCA CATTATGTGA CATATCATTC AAGTTTCTGA CCTATCAGCT
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
60 70 80 90 100
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 TTAGACGGTA GGGTATTGGC CTACCGTGGC TATGACGGGT AACGGGGAAT
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
110 120 130 140 150
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 TAGGGTTCGA TTCCGGAGAG GGAGCCTGAG AAACGGCTAC CACATCTAAG
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
160 170 180 190 200
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 GAAGGCAGCA GGCGCGCAAA TTACCCAATC CTAATACAGG GAGGTAGTGA
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
210 220 230 240 250
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 CAAGAAATAA CAATACAGAA CCTTACGGTT TTGTAATTGG AATGAGTTAA
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
260 270 280 290 300
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 GTATAAACCC CTTAACAAGT ATCAATTGGA GGGCAAGTCT GGTGCCAGCA
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
310 320 330 340 350
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 GCCGCGGTAA TTCCAGCTCC AATAGCGTAT ATTAAAGTTG TTGCAGTTAA
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
360 370 380 390 400
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 AAAGCTCGTA GTTAATCTTC TGTTAATTTT TATATATAAT ATCACGATAT
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
410 420 430 440 450
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 TTATATAATA TTAACATAAT TCATATTACT TTTTAGTATA TGAAACTTTA
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
Figu a 4.6. Alineamien o de secuencias de ADN de los p oduc os de PCR del gen
SSU RNA de aislados ep esen a i os de C. bo is y C. xiaoi iden i icados en
ganado acuno de Galicia. Los pun os indican nucleó idos idén icos a los del
aislado B05/23 y los guiones señalan delecciones. Las mu aciones de
nucleó idos con espec o a dicho aislado se indican en ojo.
Resul ados y discusión
113
460 470 480 490 500
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 CTTTGAGAAA ATTAGAGTGC TTAAAGCAGG CTATTGCCTT GAATACTCCA
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
510 520 530 540 550
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 GCATGGAATA ATATTAAGGA TTTTTATTCT TCTTATTGGT TCTAGAATAA
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
560 570 580 590 600
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 AAATGATGAT TAATAGGGAC AGTTGGGGGC ATTTGTATTT AACAGTCAGA
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......A.. .......... .......... ..........
610 620 630 640 650
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 GGTGAAATTC TTAGATTTGT TAAAGACAAA CTACTGCGAA AGCATTTGCC
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
660 670 680 690 700
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
C. bo is_B05/23 AAGGATGTTT TCATTAATCA AGAACGAAAG TTAGGGGATC GAAGACGATC
C. bo is B08/15 .......... .......... .......... .......... ..........
C. xiaoi B14/110 .......... .......... .......... .......... ..........
710 720 730 740
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| .
C. bo is_B05/23 AGATACCGTC GTAGTCTTAA CCATAAACTA TGCCAACTAG A
C. bo is B08/15 .......... .......-.. .......... .......... .
C. xiaoi B14/110 .......... ...------- ---------- ---------- -
Figu a 4.6. (Con inuación)
Po úl imo, un único aislado (B14/110) mos ó una ansición (G
x A en la posición 568; Figu a 4.6.), esul ando idén ico a a ios
aislados iden i icados como C. xiaoi, en e ellos el KY055405
(Kaupke e al., 2017). También coincidió al 100% con o as
secuencias de C. bo is, pe o cu iosamen e odas ellas p ocedían de
pequeños umian es domés icos. C. bo is y C. xiaoi p esen an una
secuencia muy simila pa a el 18S; de hecho, hay es udios donde, al
emplea únicamen e es e gen pa a el análisis geno ípico, denominan a
los aislados C. bo is/C. xiaoi (Mi hashemi e al., 2016). Po ello, en
es e caso, se ía ambién in e esan e ca ac e iza es e aislado pa a los
genes de la ac ina y la Hsp70, donde las di e encias son más acusadas
(Díaz e al., 2010b). Sin emba go es e análisis no se pudo ealiza
po que odo el ADN de es a mues a se había u ilizado an e io men e.
114
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Todos es os esul ados nos indican que el ganado acuno gallego
es á in ec ado po las cua o especies p incipales de C yp ospo idium
(C. pa um, C. bo is, C. yanae y C. ande soni) que a ec an a los
bo inos, pues o que, a ni el mundial, son las especies p edominan es
en el ganado acuno (Peng e al., 2003; San ín e al.e al., 2004;
Langkjae e al., 2006; Feng e al., 2007; Faye e al., 2007; Xiao,
2010; Chalme s y Ka ze , 2013). La mayo p e alencia obse ada pa a
C. pa um en el p esen e es udio coincide con nume osas
in es igaciones ealizadas en ganado acuno de Eu opa, que la
conside an la especie más ecuen e en es os animales, a ec ando
p incipalmen e a los más jó enes, aunque a ios au o es han
con i mado que puede a ec a a bo inos de odas las edades (Díaz e
al., 2010a; Smi h e al., 2010; Göh ing e al., 2014). C. bo is ue muy
p e alen e en el ganado bo ino gallego y, de hecho, es udios
ealizados en China, Aus alia, India y EE.UU., así como en a ios
países eu opeos, la han señalado como la especie p edominan e
(San ín e al., 2004, 2008; Khan e al., 2010; Sil e las e al., 2010b;
Wang e al., 2011b; Abeywa dena e al., 2013b; Rieux e al., 2013;
Zhang e al., 2015). Po el con a io, el po cen aje de animales
posi i os a C. ande soni ue muy educido, aunque en algunos países
de Asia y Amé ica, como China, B asil y Canadá, es la especie
p edominan e (Zhou e al., 2007; Liu e al., 2009; Se á e al., 2010;
Dixon e al., 2011; Paz e Sil a e al., 2014).
En el ganado acuno ambién se han iden i icado, aunque de
o ma espo ádica, o as especies como C. elis, C. hominis o C. suis,
así como algunos geno ipos, incluido el suis-like (Bo nay-Llina es e
al., 1999; Smi h e al., 2005; Faye e al., 2006; Langayan e al.,
2006). Es in e esan e des aca que, en nues o es udio, se han hallado
un núme o conside able de aislados iden i icados como geno ipo suis-
like que, aunque se ha encon ado en a ias mues as p oceden es de
bo inos, en gene al se conside a un hallazgo ocasional, limi ado a un
núme o escaso de aislados (Faye e al., 2006; Feng e al., 2007 a;
Khan e al., 2010; Xiao, 2010; Šlape a, 2013); de hecho, su
p e alencia ue muy supe io a la de C. ande soni, una de las especies
más ecuen es en animales adul os (San ín e al., 2004; San ín y
T ou , 2008; Faye e al., 2010a; Wang e al., 2011; Šlape a, 2013;
Resul ados y discusión
115
Smi h e al., 2014). Aunque C. suis se conside a una especie
especí ica del ganado po cino, se ha iden i icado en mues as de
ganado acuno de ap i ud cá nica y leche a, así como en pe sonas
(Xiao e al., 2002 a; Faye e al., 2006; Geu den e al., 2006; Leoni e
al., 2006; Wang e al., 2013b). El geno ipo suis-like ambién se ha
hallado en ganado po cino (Langkjae e al., 2007), así como en o os
hospedado es, como oedo es (Ng-Hublin e al., 2013), pe o la
mayo ía de los aislados iden i icados p oceden de bo inos (Khan e
al., 2010; Ma e al., 2015; Tao e al., 2017). Es e geno ipo es muy
simila a C. suis en el gen 18S, pe o en o os locus, como la ac ina y el
hsp70, las di e encias son signi ica i as (Robinson e al., 2011). Po
ello, es posible que el ganado po cino no sea el hospedado ipo; de
hecho, se ha iden i icado en ganado acuno de Aus alia, Dinama ca,
la India y Reino Unido que no habían enido con ac o con el ganado
po cino (Langkjae e al., 2007; Khan e al., 2010; Robinson e al.,
2011; Abeywa dena e al., 2013a, b). Aunque en el pasado la c ía de
a ias especies animales, compa iendo ins alaciones, e a algo muy
común en Galicia, lo que a o ece ía la apa ición de especies del
p o ozoo en hospedado es poco adecuados, en la ac ualidad es o no es
ecuen e, pudiendo encon a se únicamen e en algunas g anjas
adicionales, de pequeño amaño. De hecho, las g anjas posi i as al
geno ipo suis-like e an explo aciones p o esionales, donde los bo inos
no compa ían ins alaciones con o as especies animales.
Nues os esul ados son ambién impo an es desde el pun o de
is a de Salud Pública, ya que C. pa um, que es la especie más
ecuen emen e iden i icada en el p esen e es udio, es la más
impo an e pa a el se humano desde el pun o de is a zoonó ico; de
hecho, es a especie se ha conside ado, jun o a C. hominis, esponsable
de la mayo ía de los b o es de c ip ospo idiosis humana (Xiao y Feng,
2008; Xiao, 2010). Aunque se desconoce su pa ogenicidad, el
geno ipo suis-like ambién se ha de ec ado de o ma espo ádica en
mues as ecales p oceden es de pe sonas en Canadá y el Reino Unido
(Ong e al., 2002; Robinson e al., 2011). Así mismo, C. ande soni se
ha iden i icado espo ádicamen e en pe sonas en F ancia, India Malawi
y el Reino Unido (Guyo e al., 2001; Leoni e al., 2006; Mo se e al.,
2007; Hussain e al., 2017), a pesa de que no se conside a una especie
116
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
impo an e desde el pun o de is a zoonó ico (San ín e al., 2004;
Šlape a, 2013).
En la mayo ía de las g anjas sólo se halló un único animal
posi i o a C yp ospo idium spp. (Tabla 4.1.). En quince explo aciones
se de ec a on a ios animales que eliminaban ooquis es del pa ási o;
en es os casos se analizó la posible p esencia de di e en es especies
del p o ozoo. En la mayo ía de es as g anjas sólo se iden i icó una
única especie del p o ozoo en odos los bo inos posi i os,
p edominando C. pa um (Tabla 4.1.). En el 40% de los ebaños con
más de un animal posi i o se iden i ica on 2 especies, siendo
especialmen e ecuen e la p esencia C. pa um y C. bo is (Tabla
4.1.). Po úl imo, sólo en dos g anjas (13,3%; 2/15) se halla on 3
especies di e en es; en una se halló la combinación C. pa um+ C.
bo is+ C. yanae, mien as que en la o a se obse ó C. yanae+ C.
bo is+ C. ande soni (Tabla 4.1.).
Tabla 4.1. In ecciones mix as po C yp ospo idium spp. en explo aciones de
ganado acuno en Galicia
Especies iden i icadas
Po cen aje
G anjas con 1 animal posi i o
47/62 (75,8%)
G anjas con al menos 2 animales posi i os
15/62 (24,2%)
1 especie
7/15 (46,7%)
C. pa um
6/7 (85,7%)
C. bo is
1/7 (14,3%)
2 especies
6/15 (40,0%)
C. bo is + C. pa um
3/6 (50,0%)
C. bo is + C. yanae
2/6 (33,3%)
C. bo is + C. suis-like g
1/6 (16,7%)
3 especies
2/15 (13,3%)
C. bo is + C. yanae + C.
pa um
1/2 (50%)
C. bo is + C. yanae + C.
ande soni
1/2 (50%)
4.1.3. Relación en e las especies de C yp ospo idium y la edad
de los animales
Pa a analiza la posible elación sob e la asociación de
de e minados g upos de edad con di e en es especies de
C yp ospo idium, como se señaló en el co espondien e apa ado de
Resul ados y discusión
117
Ma e iales y Mé odos, se conside a on 4 g upos de edad: G1: e ne os
lac an es meno es de 2 meses, G2: e ne os des e ados de en e 2-12
meses, G3: no illas en e 12-24 meses y G4: adul os mayo es de 24
meses.
En los e ne os más jó enes se halla on es especies: C. pa um,
C. bo is y C. yanae (Figu a 4.7.), siendo la p ime a la especie
dominan e en es e g upo de edad. En los animales de mayo edad
p edominan o as especies, siendo C. bo is la más ecuen emen e
iden i icada en odos los g upos de bo inos de más de dos meses (Fig.
4.7.).
Figu a 4.7. Po cen aje de iden i icación de C yp ospo idium spp. en ganado
acuno de Galicia al conside a la edad de los animales
A medida que aumen ó la edad de los animales, se encon ó una
mayo a iedad de especies y geno ipos del pa ási o; así, en los
e ne os de 2-12 meses se iden i ica on dos especies (C. bo is y C.
yanae) y un geno ipo (C. geno ipo suis-like), en las no illas se
halla on las an e io es y C. pa um, y inalmen e, en los bo inos
adul os se encon a on odas las especies y geno ipos iden i icados en
es e es udio (Figu a 4.7.). Es in e esan e señala que la p esencia de C.
ande soni es u o es ingida a es e úl imo g upo.
118
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Cuando se analizó la a iación de los alo es de p e alencia de
cada una de las especies de C yp ospo idium iden i icadas, se obse ó
que el po cen aje de in ección po C. pa um ue del 20,3% en los
e ne os de menos de 2 meses, disminuyendo a un 2,4% en los
animales mayo es de 24 meses; cabe des aca que es a especie no se
halló en e ne os de 2-12 meses. C. bo is y C. yanae se iden i ica on
en odos los angos de edad, expe imen ando una a iación en la
p e alencia muy simila ; así, en los e ne os lac an es los po cen ajes
de in ección (7,5% y 0,8%, espec i amen e) ue on in e io es a los
hallados en los e ne os de 2-12 meses, donde se obse a on los
alo es más ele ados (8,9% y 5,6%, espec i amen e). A pa i de esa
edad, la p e alencia disminuyó p og esi amen e (C. bo is= 7,1% y C.
yanae= 0,8% en las no illas), alcanzando los alo es más educidos
en los bo inos de mayo edad (3,4% y 0,5%, espec i amen e). La
p e alencia de C yp ospo idium geno ipo suis-like ue del 2,2% en los
e ne os de 2-12 meses, del 3,2% en los animales de 12-24 meses de
edad y del 0,5% en los mayo es de 24 meses. C. ande soni
únicamen e se iden i icó en el 1% de los animales mayo es de 24
meses, es ando ausen e en el es o de g upos de edad.
Los da os ob enidos en es e es udio mues an que cie as especies
de C yp ospo idium p esen an una asociación con de e minados
g upos de edad, siendo más simila es al “pa ón clásico” es ablecido
en núme os es udios p e ios (Feng e al., 2007; San ín y T ou , 2008;
Xiao, 2010), aunque con algunas di e encias signi ica i as. Así,
nues os esul ados coinciden con el “pa ón clásico” en que los
e ne os meno es de 2 meses son los más sensibles a la in ección po
C. pa um, que es la especie p edominan e en es e g upo de edad,
aunque ambién se han desc i o in ecciones po C. bo is, C. yanae y
C. ande soni con una meno p e alencia, siendo especialmen e
ecuen es en animales sin dia ea (Wang e al., 2011; Smi h e al.,
2014; Robe son e al., 2014). Asimismo, los da os ob enidos en los
bo inos de más edad ambién coinciden, en gene al, con es e “pa ón
clásico”, que señala que es os animales es án pa asi ados po especies
más adap adas al ganado acuno y menos pa ógenas que C. pa um,
que puede apa ece con una meno p e alencia que en los e ne os
lac an es (San ín e al., 2008); el “pa ón clásico” ambién señala a C.
Resul ados y discusión
119
bo is y C. yanae como las especies p edominan es en bo inos de 2-
12 meses, mien as que C. ande soni es la más común en ganado
bo ino adul o mayo de 1 año.
En los animales sin des e a la especie dominan e ue C. pa um,
lo que concue da con los esul ados ob enidos p e iamen e en e ne os
neona os sin dia ea en Galicia (Cas o-He mida e al., 2002; Ga cía
Meniño, 2013). Valde ey (2017) obse ó que un impo an e
po cen aje de e ne os lac an es sanos e a posi i o a C yp ospo idium
spp., siendo C. pa um la especie más p e alen e has a la 4ª semana
de ida. Además, es a especie ambién es la más ecuen e en e ne os
con dia ea en España, especialmen e du an e las dos p ime as
semanas de ida, donde su p e alencia es más ele ada (Cas o-
He mida e al., 2002b; Quílez e al., 2008a; Díaz e al., 2010a; Soilán,
2014). Un análisis conjun o de odos es os esul ados indica que los
e ne os lac an es asin omá icos, especialmen e aquellos con edades
comp endidas en e las 3 y 4 semanas de ida, poseen una g an
impo ancia epidemiológica, pues ac úan ecuen emen e como
ese o ios de C. pa um, con aminando el medio con ooquis es y, po
an o, cons i uyendo una uen e de in ección pa a o os e ne os
neona os, más ecep i os a la in ección con es a especie y a p esen a
c ip ospo idiosis clínica (Hue ink e al., 2001; Cas o-He mida e al.,
2002; Faye e al., 2006; Thompson e al., 2007; Xiao, 2010; Sil e las
e al. 2009b, 2010b). La apa ición de los p ocesos dia eicos en los
ebaños es a ía elacionado con unas condiciones higiénicas
de icien es en las explo aciones, y acili ados po el manejo adicional
de los animales (Díaz e al., 2014). Además, C. pa um es impo an e
desde el pun o de is a de la Salud Pública, ya que es a especie jun o
con C. hominis, son esponsables de la mayo ía de los b o es de
c ip ospo idiosis en humanos a a és de p oduc os alimen icios, el
agua o el con ac o di ec o con ellos (San ín e al., 2004; Thompson e
al., 2007; Faye , 2008; Xiao, 2010; Chalme s y Ka ze , 2013). Po lo
an o, sí se ienen en cuen a los po cen ajes de in ección obse ados en
es e es udio, los e ne os meno es de 2 meses en Galicia poseen una
g an impo ancia como po ado es y diseminado es de especies del
pa ási o con po encial zoonó ico, po lo que las pe sonas que engan
un con ac o di ec o con es os animales deben oma p ecauciones pa a
126
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
e ne os meno es de es semanas con dia ea en Galicia, siendo el
sub ipo IIaA15G2R1 el más común y ampliamen e dis ibuido en
e ne os, iden i icándose en 26 aislados (96,3%). Asimismo, Soilán
(2014), en e ne os con dia ea p oceden es de es a misma zona
geog á ica, señaló la p edominancia de los sub ipos IIaA15G2R1
(76%) y IIaA16G3R1 (13%).
La a iabilidad gené ica de C. pa um obse ada en el p esen e
es udio ue muy educida, pues solo se iden i ica on 2 sub ipos,
simila a los 3 de ec ados po Díaz e al., (2010a) en e ne os lac an es
de Galicia. En el no e de España, Quílez e al. (2008a) halla on un
mayo núme o de sub ipos en e ne os (6), mien as que Soilán (2014)
iden i icó 8, aunque es a mayo a iabilidad puede obedece a un
mayo núme o de aislados iden i icados.
Los sub ipos IIaA15G2R1 y IIaA16G3R1 encon ados en el
ganado acuno en Galicia habían sido p e iamen e de ec ados en
humanos, lo que indica que ienen po encial zoonó ico (Na a o-i-
Ma ínez e al., 2003, 2010; Ve ga a y Quílez, 2004; Quílez e al.,
2008b; Soilán, 2014; Abal-Fabei o e al., 2015). El sub ipo
IIaA15G2R1 es á conside ado como uno de los p incipales sub ipos
esponsables de c ip ospo idiosis humana (Glabe man e al., 2002;
Chalme s e al., 2005; Sulaiman e al., 2005; Al es e al., 2006). Po
el con a io, el sub ipo IIaA16G3R1, que ambién posee po encial
zoonó ico, se ha de ec ado espo ádicamen e en casos humanos (T o z-
Willians e al., 2006; Zin l e al., 2009; Nazemalhosseini-Moja ad e
al., 2011).
4.2. En ganado o ino y cap ino
4.2.1. P e alencia de in ección
Al analiza la p e alencia indi idual, se obse ó que el 5,9% de
los pequeños umian es e an posi i os a C yp ospo idium spp.
Además, se ap eció que los po cen ajes de in ección ue on simila es
en las o ejas (5,9%; 19/324) y en las cab as (6,0%; 14/234), po lo
que no se cons a a on di e encias signi ica i as en e ambas especies
animales (χ2= 0,003; p= 0,953). Sin emba go, el po cen aje de
Resul ados y discusión
127
in ección hallado en el ganado bo ino ue signi ica i amen e supe io
al hallado an o en el o ino (χ2= 22,389; p< 0,001) como en el cap ino
(χ2= 16,717; p< 0,001). En ambas especies de pequeños umian es se
comp obó que la p e alencia indi idual e a supe io en los animales
p oceden es de explo aciones de Lugo (7,2% o .; 7,6% cap.) que en
los de A Co uña (3,9% o .; 5,7% cap.); ninguna de las cab as
explo adas en la p o incia de Ou ense esul a on posi i as. Con Chi-
cuad ado se cons a ó que es as di e encias no e an signi ica i as (p>
0,05).
La simili ud obse ada en la p e alencia de C yp ospo idium spp.
en o ejas y cab as de Galicia con as a con los de una e isión
publicada po Robe son (2009), quien señaló un mayo po cen aje de
in ección en el ganado o ino (≈30%) que en el cap ino (≈15%). Es os
esul ados concue dan con los obse ados en o ejas (5,1-5,4%) y
cab as (7,7%) adul as de Galicia (Cas o-He mida e al., 2007, 2011),
así como con la mayo ía de los es udios ealizados en pequeños
umian es sanos, donde el po cen aje de animales posi i os no suele
supe a el 8% (Majewska e al., 2000; Ryan e al., 2005; Wang e al.,
2010; Koina i e al., 2014; Wang e al., 2014; Mi e al., 2015; Kaupke
e al., 2017). No obs an e, se debe ene en cuen a que, en nues o
es udio, solo se ecogió y p ocesó una única mues a ecal po animal,
po lo que el po cen aje de in ección obse ado pod ía es a
subes imado, ya que se ha demos ado que la mayo ía de los pequeños
umian es adul os, y que no p esen an dia ea, son po ado es
asin omá icos que eliminan un educido núme o de ooquis es de o ma
in e mi en e (Ka anis e al., 2007; San ín e al., 2007); además, el
mues eo no se ealizó du an e la época de pa ide a, donde el
inc emen o de la exc eción de ooquis es en las hemb as pod ía
acili a la de ección de los animales posi i os (Pa aud e al., 2014;
Wang e al., 2014). Sin emba go, ambién se debe señala que, las
mues as sólo se p ocesa on median e écnicas molecula es que, según
a ios au o es, son las que p esen an los mejo es alo es de
endimien o diagnós ico, siendo más sensibles que las écnicas
mic oscópicas (Ryan e al., 2005; San ín e al., 2007; Wang e al.,
2014).
128
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Po el con a io, la p e alencia de in ección hallada en nues o
es udio esul ó in e io a la obse ada (40%) en pequeños umian es
po o os au o es (Majewska e al., 2000; Ryan e al., 2005; P i cha d
e al., 2008; Paole i e al., 2009; Sa i e al., 2009; Yang e al., 2009).
En es e sen ido, las a iaciones de ec adas en e los esul ados
ob enidos en los di e en es es udios pueden debe se a di e encias
geog á icas y es acionales, así como a la p esencia de a ios ac o es
in ínsecos y ex ínsecos de la población es udiada, en e los que
des acan el manejo de los animales, la écnica de diagnós ico
empleada, el núme o de mues as ecogidas po animal, la edad de los
animales o la p esencia de sin oma ología clínica (Geu den e al.,
2008; Mah ouz e al., 2014).
La p e alencia po explo aciones ue p ác icamen e idén ica en
las g anjas de o ejas (47,4%; 9/19) y en las de cab as (50,0%; 8/16),
po lo que las di e encias no ue on signi ica i as (χ2= 0,024; p=
0,877). Al conside a la localización de los ebaños de o ino se
obse ó que el 33,3% (3/9) de los localizados en A Co uña y el 70%
(7/10) de los de Lugo ue on posi i os; de igual modo, se ap eció que
el 80,0% (4/5) las g anjas de ganado cap ino de A Co uña y el 44,4%
(4/9) de las de Lugo mos a on al menos un animal posi i o. Sin
emba go, en ningún caso es as di e encias ue on signi ica i as (p>
0,05). Es os esul ados demues an que, aunque el po cen aje de
pequeños umian es des e ados y adul os que eliminan ooquis es de
C yp ospo idium spp. es bajo, sin emba go, es e pa ási o es á
ampliamen e dis ibuido en los ebaños de o ino y de cap ino de
Galicia, coincidiendo con los esul ados señalados p e iamen e en la
misma zona de es udio po Cas o-He mida e al. (2007), quienes
obse a on que en el 34,2% de las explo aciones de o ejas y en el
30,0% de las de cab as había po lo menos un animal que eliminaba
ooquis es de es e p o ozoo. Así mismo, en explo aciones gallegas de
pequeños umian es en los que había animales con dia ea neona al,
Díaz e al. (2015) obse a on que el 54,1% de las g anjas de o ino y
el 65,2% de las de cap ino había animales posi i os.
Los esul ados ob enidos en el p esen e es udio son de g an
in e és debido a que, aunque en las explo aciones no se habían
obse ado b o es de dia ea neona al en el úl imo año, la dis ibución
Resul ados y discusión
129
de C yp ospo idium spp. en las g anjas gallegas de pequeños
umian es es amplia; además, la exis encia de po ado es
asin omá icos unido a la p esencia de ac o es de iesgo (mala higiene,
épocas de pa ide a, ins alaciones, manejo inadecuado, hacinamien o,
e c.), muy ecuen es en las g anjas de pequeños umian es de Galicia,
pueden a o ece la apa ición de b o es de dia ea neona al
ocasionados po es e pa ási o y ocasiona impo an es pé didas
económicas (de G aa e al., 1999; Soilán, 2014).
Al conside a la edad de los animales se obse ó que la
p e alencia indi idual po C yp ospo idium spp. ue muy simila en
los co de os des e ados y en las o ejas adul as, mien as que, en
ganado cap ino, el po cen aje de adul os que elimina on ooquis es del
pa ási o ue lige amen e supe io al de los cab i os des e ados (Figu a
4.9); no obs an e, es as di e encias no ue on signi ica i as en ninguna
de las dos especies (p> 0,05).
Figu a 4.9. Po cen aje de in ección po C yp ospo idium spp. en pequeños
umian es al conside a la edad de los animales
Es os esul ados con as an con los ob enidos en a ias
in es igaciones que señalan que la p e alencia de in ección po
C yp ospo idium spp. p esen a una elación in e sa con la edad de los
130
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
animales, de modo que los animales de más edad mues an los
po cen ajes de in ección más educidos, aunque en algunos casos es as
di e encias no ue on signi ica i as (Majewska e al., 2000; Noo deen
e al., 2001; Wang e al., 2009, 2014; Cas o-He mida e al., 2011; Ye
e al., 2013; Mi e al., 2014; Peng e al., 2016). La meno p e alencia
de in ección en los animales de mayo edad pod ía es a elacionada
con una mejo condición co po al de es os o con su mayo espues a
inmuni a ia, ya que las ein ecciones epe idas con el p o ozoo
a o ecen el desa ollo de una espues a inmuni a ia p o ec o a en e
al pa ási o (Wang e al., 2014).
Debido a que los abajos sob e las in ecciones po
C yp ospo idium spp. en pequeños umian es son escasos y emplean
me odologías muy di e en es, las disc epancias obse adas en e
nues os da os y los de o as in es igaciones pueden obedece a
di e en es ac o es elacionados con el diseño del es udio que a ec en a
la exac i ud de los esul ados, en e los que des acan:
a) el núme o de animales mues eados; cuando los casos son
educidos impiden es ima la p e alencia con una p ecisión
acep able (Majewska e al., 2000; No deeen e al., 2001). Po
ejemplo, Cas o-He mida e al. (2011), en Galicia, analiza on
mues as de 136 o inos, así como de o as especies animales,
si bien el obje i o del abajo no consis ió en es ima la
p e alencia en di e en es g upos de edad.
b) el núme o de g upos de edad es udiados no coincide
exac amen e con el de o os abajos, aunque, en gene al, en la
mayo ía los animales se clasi ican según su edad en lac an es,
des e ados y adul os: No obs an e, hay au o es que, den o de
los animales de mayo edad, sepa an los de 12 a 24 meses y los
de más de 24 meses (Mi e al., 2014) y den o de los adul os se
sepa an las hemb as du an e el pe ipa o (Wang e al., 2014).
O os au o es, como Peng e al. (2016) conside an g upos de 0-
2 meses, 3-6 meses, 7-12 meses y más de 12 meses; sin
emba go, es a di isión puede de i a en la apa ición de g upos
con un núme o muy educido de animales, lo que, como se
comen ó an e io men e, puede conlle a una meno p ecisión
Resul ados y discusión
131
en los esul ados ob enidos. En es e sen ido, Mi e al. (2014)
analiza on mues as de 604 animales, pe o únicamen e 16
enían más de 12 meses de edad.
c) ambién deben conside a se el núme o de g anjas
mues eadas, pues si ecogen mues as en un pequeño núme o
de ellas, la p esencia de una explo ación con una ele ada
p e alencia in a- ebaño puede al e a de o ma signi ica i a
los esul ados ob enidos, sob e odo si en cada g anja el
núme o de animales es udiados po g upo de edad no es
simila . Así, en las in es igaciones más comple as ealizadas
has a el momen o en las que se analiza la in luencia de la edad
sob e la p e alencia de C yp ospo idium spp., el núme o de
g anjas es muy educido e in e io a 7 (Ye e al., 2013; Wang
e al., 2010, 2014), y no suelen supe a las 18 (Mi e al., 2014;
Peng e al., 2016). Po ejemplo, en el es udio ealizado po
Wang e al. (2014) se analiza on 1.265 cab as de 7
explo aciones en China, y el núme o de mues as po ebaño
osciló en e 24 y 790.
d) el mé odo de iden i icación de C yp ospo idium spp.
ambién es de g an in e és, pues el empleo de écnicas con
educidos alo es de endimien o diagnós ico puede al e a de
o ma signi ica i a los esul ados. En es e sen ido, debido a
que los adul os eliminan, po lo gene al, un meno núme o de
ooquis es po g amo de heces que los jó enes (Ka anis e al.,
2007), los es udios que u ilizan mé odos mic oscópicos y, po
an o, menos sensibles que los molecula es (Ryan e al., 2005;
San ín e al., 2007; Wang e al., 2014), subes iman la
p e alencia de in ección en los animales de mayo edad ya que
de ec an un meno núme o de animales posi i os y,
consecuen emen e, el núme o de alsos nega i os se
inc emen a á con la edad de los animales.
132
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
4.2.2. Análisis geno ípico: especies de C yp ospo idium
Debido a que la mayo ía de las in es igaciones ealizadas en
g anjas de o ino y cap ino son es udios de b o es de dia ea neona al,
se ha comp obado que C. pa um es la p incipal especie de
C yp ospo idium implicada en es os b o es (Muelle -Doblies e al.,
2008; Quílez e al., 2008b; P i cha d e al., 2008; Díaz e al., 2010,
2015; Im e e al., 2013). En co de os y cab i os des e ados y en
animales adul os que no mues an sin oma ología clínica, los es udios
sob e las especies de C yp ospo idium son limi ados, ya que en la
mayo ía no se ealiza la ca ac e ización molecula de los aislados, po
lo que no se iden i ican las especies y geno ipos, ni su po encial
zoonó ico, al iempo que es escasa la in o mación sob e algunos
ac o es epidemiológicos impo an es, como la edad de los animales y
la consis encia de las heces (Robe son, 2009).
El análisis del pa ón de bandas ob enido, as la diges ión de las
mues as posi i as a la PCR de la 18S con las endonucleasas SspI,
VspI y MboII, pe mi ió iden i ica 3 especies de C yp ospo idium (C.
pa um, C. ubiqui um y C. xiaoi) an o en los ebaños de o ino como
en los de cap ino; es as especies ya se habían iden i icado p e iamen e
en co de os y cab i os lac an es con dia ea de la misma á ea de
es udio (Díaz e al., 2010, 2015). Al conside a ambas especies de
pequeños umian es en conjun o, y como se ap ecia en la Figu a 4.10.,
C. pa um ue la especie más ecuen emen e iden i icada (16/33),
seguida po C. xiaoi (8/33) y C. ubiqui um (6/33). T es mues as
(9,1%), dos p oceden es de o ejas y una de cab a, ue on posi i as a
PCR, pe o las bandas ue on muy débiles, de mane a que el p oduc o
ob enido no ue su icien e pa a ealiza un análisis RFLP.
Pa a con i ma los esul ados ob enidos en la PCR-RFLP, an o
pa a las cab as como pa a las o ejas, se secuenció un núme o
ep esen a i o de aislados de cada una de las especies de
C yp ospo idium cuyo pa ón de es icción ue di e en e al de C.
pa um y se compa a on con las incluidas en la base de da os del
NCBI (Na ional Cen e o Bio echnology In o ma ion); así, se
obse a on es secuencias di e en es (Figu a 4.11.).
Resul ados y discusión
133
Figu a 4.10. Po cen aje de iden i icación de cada una de las especies de
C yp ospo idium iden i icadas en pequeños umian es de g anjas gallegas
Todos los aislados iden i icados como C. ubiqui um, p oceden es
an o de o ino como de cap ino, ue on idén icos a la del geno ipo 1
(EF362479), de ec ado po San ín e al. (2007) en o inos de Ma yland
(EE.UU.), y hallado p e iamen e en co de os con dia ea en Galicia
(Soilán, 2014; Díaz e al., 2015). En el caso de C. xiaoi, se
iden i ica on dos secuencias di e en es (Figu a 4.11.); cabe des aca
que, los aislados p oceden es de ganado cap ino mos a on una
homología del 100% con la secuencia de e e encia KY055376,
ob enida en o ejas de Polonia (Kaupke e al., 2017), mien as que las
de o ino ue on idén icas a la KY055407, ob enidas en cap ino po los
mismos au o es. En e ambas secuencias sólo se halla on dos
mu aciones: una ansición de un nucleó ido (C po T) en la posición
399 y una ans e sión (T po A) en la posición 406 (Figu a 4.11.).
Es os esul ados coinciden con la mayo ía de los escasos es udios
molecula es ealizados p e iamen e en ganado o ino y cap ino, y
pe mi en con i ma que C. pa um, C. ubiqui um y C. xiaoi son las
especies de C yp ospo idium p edominan es en los pequeños
umian es a ni el mundial (Chalme s e al., 2002; Ryan e al., 2005;
San ín e al., 2007; Muelle -Doblies e al., 2008; Yang e al., 2009;
Rieux e al., 2013; Tzanidakis e al., 2014; Wang e al., 2010, 2014;
134
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Mi e al., 2015). De hecho, el es o de especies del p o ozoo
iden i icadas en es os animales son hallazgos ocasionales y, a
excepción de C. hominis en ganado o ino, no supe an la ein ena de
aislados.
10 20 30 40 50
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 ATAACTTTAC GGATCACATT ---ATGTGAC ATATCATTCA AGTTTCTGAC
18S_L17/29 .......... .......... ---....... .......... ..........
18S_L12/14 .......... .......... TAT....... .......... ..........
60 70 80 90 100
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 CTATCAGCTT TAGACGGTAG GGTATTGGCC TACCGTGGCT ATGACGGGTA
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ..........
18S_L12/14 .......... .......... .......... .........A ..........
110 120 130 140 150
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 ACGGGGAATT AGGGTTCGAT TCCGGAGAGG GAGCCTGAGA AACGGCTACC
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ..........
18S_L12/14 .......... .......... .......... .......... ..........
160 170 180 190 200
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 ACATCTAAGG AAGGCAGCAG GCGCGCAAAT TACCCAATCC TAATACAGGG
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ..........
18S_L12/14 .......... .......... .......... .......... ..........
210 220 230 240 250
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 AGGTAGTGAC AAGAAATAAC AATACAGAAC CTTA--CGGT TTTGTAATTG
18S_L17/29 .......... .......... .......... ....--.... ..........
18S_L12/14 .......... .......... .......G.. T...AATA.. ..........
260 270 280 290 300
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 GAATGAGTTA AGTATAAACC CCTTAACAAG TATCAATTGG AGGGCAAGTC
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ..........
18S_L12/14 .......... .......... ....T..... .......... ..........
310 320 330 340 350
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 TGGTGCCAGC AGCCGCGGTA ATTCCAGCTC CAATAGCGTA TATTAAAGTT
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ..........
18S_L12/14 .......... .......... .......... .......... ..........
Figu a 4.11. Alineamien o de secuencias de ADN de los p oduc os de PCR del
gen SSU RNA de di e sos aislados ep esen a i os de C. ubiqui um (L12/14,
geno ipo 1) y C. xiaoi (L11/21, C. xiaoi o igen o ino; L17/29, C. xiaoi o igen
cap ino) iden i icados en pequeños umian es. Los pun os indican nucleó idos
idén icos a los del aislado L291 y los guiones señalan delecciones. Las
mu aciones de nucleó idos con espec o a dicho aislado se indican en ojo.
Resul ados y discusión
135
360 370 380 390 400
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 GTTGCAGTTA AAAAGCTCGT AGTTAATCTT CTGTTAATT- TTTATATATA
18S_L17/29 .......... .......... .......... .........- ........C.
18S_L12/14 .......... .......... ....GGAT.. ........AA ..........
410 420 430 440 450
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 ATATCTCG-- -ATATTTATA TAATATTAAC ATAATTCATA TTACT-----
18S_L17/29 .....A..-- -......... .......... .......... .....-----
18S_L12/14 ....T.TATT A......... ..G....... .......... .....ATATT
460 470 480 490 500
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 TTTTAGTATA TGAAACTTTA CTTTGAGAAA ATTAGAGTGC TTAAAGCAGG
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ..........
18S_L12/14 ..A....... .....T.... .......... .......... ..........
510 520 530 540 550
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 CTATTGCCTT GAATACTCCA GCATGGAATA ATATTAAGGA TTTTTATTCT
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ..........
18S_L12/14 .AT.A..... .......... .......... ....A..A.. .......CT.
560 570 580 590 600
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 TCTTATTGGT TCTAGAATAA AAATGATGAT TAATAGGAAC AGTTGGGGGC
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ..........
18S_L12/14 .T........ ....AG.... ....A..... .......G.. ..........
610 620 630 640 650
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 ATTTGTATTT AACAGTCAGA GGTGAAATTC TTAGATTTGT TAAAGACAAA
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ..........
18S_L12/14 .......... .......... .......... .......... ..........
660 670 680 690 700
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|....|
18S_L11/21 CTACTGCGAA AGCATTTGCC AAGGATGTTT TCATTAATCA AGAACGAAAG
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ..........
18S_L12/14 ...G...... .......... .......... .......... ..........
710 720 730 740
....|....| ....|....| ....|....| ....|....| ....|.
18S_L11/21 TTAGGGGATC GAAGACGATC AGATACCGTC GTAGTCTTAA CCATAA
18S_L17/29 .......... .......... .......... .......... ......
18S_L12/14 .......... .......... .......... .......-.. ......
Figu a 4.11. (Con inuación)
Es os esul ados son ambién impo an es desde el pun o de is a
de la Salud Pública, ya que dos (C. pa um y C. ubiqui um) de las es
especies iden i icadas en ambos umian es domés icos poseen
po encial zoonó ico, especialmen e C. pa um, que jun o con C.
hominis es la especie más ecuen emen e implicada en b o es de
c ip ospo idiosis humana (Xiao, 2010). C. ubiqui um se ha
iden i icado en un núme o su icien e de pe sonas, an o
238
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Quílez, J.; A es-Mazas, E.; Sánchez-Acedo, C.; del Cacho, E.; Cla el,
A.; Causape, A. C., 1996c. Compa ison o oocys shedding and
he se um immune esponse o C yp ospo idium pa um in
ca le and pigs. Pa asi ology Resea ch, 82 (6): 529–534.
Quílez, J.; Ve ga a-Cas iblanco, C.; Sánchez-Acedo. C.; del Cacho, E.;
Lopez-Be nad, F., 2001. P e alencia de C yp ospo idium
pa um en ganado cap ino en la p o incia de Za agoza.
Es udio p elimina . Ac a Pa asi ológica Po uguesa, 8: 167.
Quílez, J.; Sanchez-Acedo, C.; A endaño, C.; del Cacho, E.; Lopez-
Be nad, F., 2005. E icacy o wo pe oxygen-based
disin ec an s o inac i a ion o C yp ospo idium pa um
oocys s. Applied and En i onmen al Mic obiology, 71: 2479-
2483.
Quílez, J.; To es, E.; Chalme s, R.M.; Robinson, G.; del Cacho, E.;
Sánchez-Acedo, C., 2008a. C yp ospo idium species and
sub ype analysis om dai y cal es in Spain. Pa asi ology, 135
(14): 1613–1620.
Quílez, J.; To es, E.; Chalme s, R.M.; Had ield, S.J; Del Cacho, E.;
Sánchez-Acedo, C., 2008b. C yp ospo idium geno ypes and
sub ypes in lambs and goa kids in Spain. Applied and
En i onmen al Mic obiology, 74 (19): 6026-6031.
Quiñones-Ma eu, M.E.; A ila, S.; Reyes-Te an, G.; Ma ínez, M.A.,
2014. Deep sequencing: becoming a c i ical ool in clinical
i ology. Jou nal o Clinical Vi ology, 61 (1): 9-19.
Raccu , C.P., 2007. Wo ldwide human zoono ic c yp ospo idiosis
caused by C yp ospo idium elis. Pa asi e, 14: 15-20.
Rados i s, O.M.; Ac es, S.D., 1983. The con ol o acu e
undi e en ia ed dia hea o newbo n bee cal es. The
Ve e ina y clinics o No h Ame ica. La ge Animal P ac ice, 5
(1): 143-155.
Rahmouni, I.; Essid, R.; Aoun, K.; Bou a bine, A., 2014. Glycop o ein
60 di e si y in C yp ospo idium pa um causing human and
ca le c yp ospo idiosis in he u al egion o No he n Tunisia.
Bibliog a ía
239
The Ame ican Jou nal o T opical Medicine and Hygiene, 90
(2): 346-350.
Rals on, B.; Thompson, R.C.A.; Pe hick, D.; McAllis e , T.A.; Olson,
M.E., 2010. C yp ospo idium ande soni in Wes e n Aus alian
eedlo ca le. Aus alian Ve e ina y Jou nal, 88 (11): 458-460.
Ramo, A.; Quílez, J.; Ve ga a-Cas iblanco, C.; Mon eagudo, L.; Del
Cacho, E.; Cla el, A., 2015. Mul ilocus yping and popula ion
s uc u e o C yp ospo idium om child en in Za agoza, Spain.
In ec ion, Gene ics and E olu ion, 31: 190-197.
Ramo, A.; Quílez, J.; Mon eagudo, L.; Del Cacho, E.; Sánchez-Acedo,
C., 2016a. In a-Species di e si y and panmic ic s uc u e o
C yp ospo idium pa um popula ions in ca le a ms in
No he n Spain. PloS One, 11 (2): e0148811.
Ramo, A.; Mon eagudo, L.V.; Del Cacho, E.; Sánchez-Acedo, C.;
Quílez, J., 2016b. In a-species gene ic di e si y and clonal
s uc u e o C yp ospo idium pa um in sheep a ms in a
con ined geog aphical a ea in no heas e n Spain. PloS one, 11
(5): e0155336.
Ra aszo á, P.; Halano a, M.; Goldo a, M.; Valencako a, A.;
Malceko a, B.; Hu níko á, Z.; Halan, M., 2012. Occu ence o
C yp ospo idium spp. in ed oxes and b own bea in he
Slo ak Republic. Pa asi ology Resea ch, 110 (1): 469-471.
Rehg, J.E.; Law on, G.W.; Pakes, S.P., 1979. C yp ospo idium
cuniculus in he abbi (O yc olagus cuniculus). Jou nal o he
Ame ican Associa ion o Labo a o y Animal Science, 29:
656–660.
Reid, A.; Lymbe y, A.; Ng, J.; Tweedle, S.; Ryan, U., 2010.
Iden i ica ion o no el and zoono ic C yp ospo idium species
in ma ine ish. Ve e ina y Pa asi ology, 168 (3): 190-195.
Ren, X.; Zhao, J.; Zhang, L.; Ning, C.; Jian, F.; Wang, R.; L , C.;
Wang, Q.; A owood, M. J.; Xiao, L., 2012. C yp ospo idium
yzze i n. sp. (Apicomplexa: C yp ospo idiidae) in domes ic
240
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
mice (Mus musculus). Expe imen al Pa asi ology, 130: 274-
281.
Rieux, A.; Cha ie , C.; Po s, I.; Dela osse, A.; Pa aud, C., 2013a.
Molecula cha ac e iza ion o C yp ospo idium isola es om
high-exc e ing young dai y cal es in dai y ca le he ds in
Wes e n F ance. Pa asi ology Resea ch, 112 (10): 3423-3431.
Rieux, A.; Pa aud, C.; Po s, I.; Cha ie , C., 2013b. Molecula
cha ac e iza ion o C yp ospo idium spp. in p e-weaned kids in
a dai y goa a m in wes e n F ance. Ve e ina y Pa asi ology,
192: 268–272.
Rieux, A.; Pa aud, C.; Po s, I.; Cha ie , C., 2014. Molecula
cha ac e iza ion o C yp ospo idium isola es om bee cal es
unde one mon h o age o e h ee successi e yea s in one he d
in wes e n F ance. Ve e ina y Pa asi ology, 202 (3): 171-179.
Robe son, L.J., 2009. Gia dia and C yp ospo idium in ec ions in
sheep and goa s: a e iew o he po en ial o ansmission o
humans ia en i onmen al con amina ion. Epidemiology and
In ec ion, 137 (7): 913-921.
Robe son, L.J.; Gje de, B.K.; Fu use h Hansen, E.F, 2010. The
zoono ic po en ial o Gia dia and C yp ospo idium in
No wegian sheep: a longi udinal in es iga ion o 6 locks o
lambs. Ve e ina y Pa asi ology, 171 (1): 140-145.
Robe son, L.J.; Bjö kman, C.; Axén, C.; Faye , R.; Cacciò, S.M.;
Widme , G. (Eds.), 2014. C yp ospo idium: pa asi e and
disease. Sp inge Science and Business Media.
Robinson, G., Chalme s, R.M., 2012. Assessmen o polymo phic
gene ic ma ke s o mul ilocus yping o C yp ospo idium
pa um and C yp ospo idium hominis. Expe imen al
Pa asi ology, 132: 200–215.
Robinson, G.; Elwin, K.; Chalme s, R.M., 2008. Unusual
C yp ospo idium geno ypes in human cases o dia hea.
Eme ging In ec ious Diseases, 14 (11): 1800–1802.
Bibliog a ía
241
Robinson, G.; Thomas, A.L.; Daniel, R.G.; Had ield, S.J.; Elwin, K.;
Chalme s, R.M., 2006. Sample p e alence and molecula
cha ac e isa ion o C yp ospo idium ande soni wi hin a dai y
he d in he Uni ed Kingdom. Ve e ina y Pa asi ology, 142 (1):
163-167.
Robinson, G.; W igh , S.; Elwin, K.; Had ield, S.J.; Ka ze , F.; Ba ley,
P.M.; Hun e , P. R.; Na h, M.; Innes, E.A.; Chalme s, R.M.,
2010. Redesc ip ion o C yp ospo idium cuniculus Inman and
Takeuchi, 1979 (Apicomplexa: C yp ospo idiidae):
mo phology, biology and phylogeny. In e na ional Jou nal o
Pa asi ology, 40 (13): 1539-1548.
Robinson, G.; Chalme s, R.M.; S aple on, C.; Palme , S.R.; Wa kins,
J.; F ancis, C.; Kay, D., 2011. A whole wa e ca chmen
app oach o in es iga ing he o igin and dis ibu ion o
C yp ospo idium species. Jou nal o Applied Mic obiology,
111 (3): 717-730.
Rod íguez-He nandez, J.; Canu -Blasco, A.; Ledesma-Ga cía, M.;
Ma ín-Sanchez, A.M., 1994. C yp ospo idium oocys s in
wa e o human consump ion. Compa ison o s aining
me hods. Eu opean Jou nal o Epidemiology, 10: 215–218.
Rod íguez-He nández, J.; Canu -Blasco, A.; Ma ín-Sánchez, A.M.,
1996. Seasonal p e alences o C yp ospo idium and Gia dia
in ec ions in child en a ending day ca e cen es in Salamanca
(Spain) s udied o a pe iod o 15 mon hs. Eu opean Jou nal o
Epidemiology, 12: 291–295.
Rojo, F.J.; Gass, A.; Alunda, J.M., 1985. Denuncia en España de la
c ip ospo idiosis o ina. IV Cong eso Nacional de
Pa asi ología. Tene i e, 9-13 de Julio.
Rome o-Salas, D.; Al a ado-Esqui el, C.; C uz-Rome o, A.; Aguila -
Domínguez, M.; Iba a-P iego, N.; Me ino-Cha ez, J.O.;
Pé ez de León, A.A.; He nández-Tinoco, J., 2016. P e alence
o C yp ospo idium in small uminan s om Ve ac uz, Mexico.
BioMed Cen al Ve e ina y Resea ch, 12 (1): 14.
242
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Rosales, M.J.; Co dón, G.P.; Mo eno, M.S.; Sánchez, C.M.; Masca ó,
C., 2005. Ex acellula like-g ega ine s ages o
C yp ospo idium pa um. Ac a T opica, 95: 74-78.
Roy, S.S.; Sa ka , S.; Ba abyal, S.; P amanik, A.K.; Das, P., 2006.
Obse a ions on he epidemiology o bo ine c yp ospo idiosis
in India. Ve e ina y Pa asi ology, 141 (3): 330–333.
Roy, S.S., P amanik, A.K., Sa ka , S., Mis a, S.S., 2010. Compa a i e
molecula epidemiological s udies on bo ine and human
c yp ospo idiosis. Indian Jou nal o Animal Sciences, 80 (10):
945-955.
Ryan, U.M.; Xiao, L.; Read, C.; Sulaiman, I.M.; Monis, P.; Lal, A.A.;
Faye , R.; Pa lasek, I., 2003. A edesc ip ion o
C yp ospo idium galli Pa lasek, 1999 (Apicomplexa:
C yp ospo idiidae) om bi ds. Jou nal o Pa asi ology, 89 (4):
809-813.
Ryan, U.M.; Monis, P.; Enema k, H.L.; Sulaiman, I.; Sama asinghe,
B.; Read, C.; Buddle, R.; Robe son, I.; Zhou, L.; Thompson,
R.C.A.; Xiao, L., 2004. C yp ospo idium suis n. sp.
(Apicomplexa: C yp ospo idiidae) in pigs (Sus sc o a).
Jou nal o Pa asi ology, 90 (4): 769-773.
Ryan, U.M.; Ba h, C.; Robe son, I.; Read, C.; Ellio , A.; Mcinnes, L.;
T aub, R.; Besie , B., 2005. Sheep may no be an impo an
zoono ic ese oi o C yp ospo idium and Gia dia pa asi es.
Applied and En i onmen al Mic obiology, 71 (9): 4992-4997.
Ryan, U.M.; Powe , M.; Xiao, L., 2008. C yp ospo idium aye i n. sp.
(Apicomplexa: C yp ospo idiidae) om he Red Kanga oo
(Mac opus u us). Jou nal o Euka yo ic Mic obiology, 55 (1):
22-26.
Ryan, U.; Faye , R.; Xiao, L., 2014. C yp ospo idium species in
humans and animals: cu en unde s anding and esea ch needs.
Pa asi ology, 141 (13): 1667-1685.
Ryan, U.; Papa ini, A.; Tong, K.; Yang, R.; Gibson-Kueh, S.; O'Ha a,
A.; Lymbe y, A.; Xiao, L., 2015. C yp ospo idium huwi n. sp.
Bibliog a ía
243
(Apicomplexa: Eime iidae) om he guppy (Poecilia
e icula a). Expe imen al Pa asi ology, 150: 31-35.
Ryan, U.; Zahedi, A.; Papa ini, A., 2016a. C yp ospo idium in human
and animals—a one heal h app oach o p ophylaxis. Pa asi e
Immunology, 38 (9): 535-547.
Ryan, U.; Papa ini, A.; Monis, P.; Hijjawi, N., 2016b. I 's o icial -.
C yp ospo idium is a g ega ine: Wha a e he implica ions o
he wa e indus y?. Wa e Resea ch, 105: 305-313.
San ín, M., 2013. Clinical and subclinical in ec ions wi h
C yp ospo idium in animals. New Zealand Ve e ina y Jou nal,
61: 1–10.
San ín, M.; T ou , J.M., 2008. Companion animals. In: Faye , R. and
Xiao, L. (Eds.). C yp ospo idium and C yp ospo idiosis. CRC
P ess, Boca Ra on, pp. 437-449.
San in, M.; Faye , R., 2015. En e ocy ozoon bieneusi, Gia dia, and
C yp ospo idium In ec ing Whi e‐ ailed Dee . Jou nal o
Euka yo ic Mic obiology, 62 (1): 34-43.
San ín, M.; T ou , J.M.; Xiao, L.; Zhou, L.; G eine , E.; Faye , R.,
2004. P e alence and age- ela ed a ia ion o C yp ospo idium
species and geno ypes in dai y cal es. Ve e ina y Pa asi ology,
122 (2): 103-117.
San ín, M.; T ou , J.M.; Faye , R., 2007. P e alence and molecula
cha ac e iza ion o C yp ospo idium and Gia dia species and
geno ypes in sheep in Ma yland. Ve e ina y Pa asi ology, 146
(1-2): 17-24.
San ín, M.; T ou , J.M.; Faye , R., 2008. A longi udinal s udy o
c yp ospo idiosis in dai y ca le om bi h o 2 yea s o age.
Ve e ina y Pa asi ology, 155 (1-2): 15-23.
San os, M.M.A.B.; Pei o, J.R.; Mei eles, M.V., 2005.
C yp ospo idium in ec ion in os iches (S u hio camelus) in
B azil: clinical, mo phological and molecula s udies.
B azilian Jou nal o Poul y Science, 7 (2): 113-117.
244
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Sanz-Ceballos, L.; Illescas Gómez, P.; Sanz Sampelayo, M.R.; Gil
Ex eme a, F.; Rod íguez Oso io, M., 2009. P e alence o
C yp ospo idium in ec ion in goa s main ained unde semi-
ex ensi e eeding condi ions in he sou heas o Spain.
Pa asi e, 16: 315-318.
Sa i, B.; A slan, M.O.; Gicik, Y.; Ka a, M.; Taşçi, G.T., 2009. The
p e alence o C yp ospo idium species in dia hoeic lambs in
Ka s p o ince and po en ial isk ac o s. T opical Animal
Heal h and P oduc ion, 41: 819–826.
Sa ioli, L.; Smi h, H.; Thompson, A., 2006. Gia dia and
C yp ospo idium join he 'Neglec ed Diseases Ini ia i e'.
T ends in Pa asi ology, 22: 203-208.
Segu a, R.; P im, N.; Mon emayo , M.; Valls, M.E.; Muñoz, C., 2015.
P edominan i ulen IbA10G2 sub ype o C yp ospo idium
hominis in human isola es in Ba celona: a i e-yea s udy. PloS
One, 10 (3): e0121753.
Se á, A.D.P.; Funada, M.R.; Souza, S.D.O.; Na a, A.; Rich zenhain,
L.J.; Soa es, R.M., 2010. Occu ence and molecula
cha ac e iza ion o C yp ospo idium spp. isola ed om
domes ic animals in a u al a ea su ounding A lan ic d y
o es agmen s in Teodo o Sampaio municipali y, S a e o
São Paulo, B azil. Re is a B asilei a de Pa asi ologia
Ve e iná ia, 19 (4): 249-253.
Shen, Y.; Yin, J.; Yuan, Z.; Lu, W.; Xu, Y.; Xiao, L., Cao, J., 2011.
The iden i ica ion o he C yp ospo idium ubiqui um in p e-
weaned O ines om Aba Tibe an and Qiang au onomous
p e ec u e in China. Biomedical En i onmen al Sciences, 24:
315–320.
Shouk y, N.M.; Dawoud, H.A.; Ha idy, F.M., 2009. S udies on
zoono ic c yp ospo idiosis pa um in Ismailia Go e no a e,
Egyp . Jou nal o he Egyp ian Socie y o Pa asi ology, 39:
479–488.
Bibliog a ía
245
Sh es ha, R.D.; G inbe g, A.; Dukkipa i, V.S.; Pleydell, E.J.; P a ley,
D.J.; F ench, N. P., 2014. In ec ions wi h mul iple
C yp ospo idium species and new gene ic a ian s in young
dai y cal es on a a m loca ed wi hin a d inking wa e
ca chmen a ea in New Zealand. Ve e ina y Pa asi ology, 202:
287-291.
Siddiki, A.Z.; Mina, S.A.; Fa zana, Z.; Ayesa, B.; Das, R.; Hossain,
A.H., 2015. Molecula cha ac e iza ion o C yp ospo idium
xiaoi in goa kids in Bangladesh by nes ed PCR ampli ica ion
o 18S RNA gene. Asian Paci ic Jou nal o T opical
Biomedicine, 5 (3): 202-207.
Sil a, S.O.; Rich zenhain, L.J.; Ba os, I.N.; Gomes, A.M.; Sil a,
A.V.; Koze ski, N.D.; de A aujo Ce an o, J.B; Keid, L.B;
Soa es, R.M., 2013. A new se o p ime s di ec ed o 18S
RNA gene o molecula iden i ica ion o C yp ospo idium
spp. and hei pe o mance in he de ec ion and di e en ia ion
o oocys s shed by synan h opic oden s. Expe imen al
Pa asi ology, 135 (3): 551-557.
Sil e lås, C.; Bjö kman, C.; Egen all, A., 2009a. Sys ema ic e iew
and me a-analyses o he e ec s o halo uginone agains cal
c yp ospo idiosis. P e en i e Ve e ina y Medicine, 91 (2-4):
73-84.
Sil e lås, C.; Emanuelson, U.; de Ve die , K.; Bjö kman, C., 2009b.
P e alence and associa ed managemen ac o s o
C yp ospo idium shedding in 50 Swedish dai y he ds.
P e en i e Ve e ina y Medicine, 90 (3-4): 242-253.
Sil e lås, C.; de Ve die , K.; Emanuelson, U.; Ma sson, J.G.;
Bjö kman, C., 2010a. C yp ospo idium in ec ion in he ds wi h
and wi hou cal dia hoeal p oblems. Pa asi ology Resea ch,
107 (6): 1435-1444.
Sil e lås, C.; Näslund, K.; Bjö kman, C.; Ma sson, J.G., 2010b.
Molecula cha ac e isa ion o C yp ospo idium isola es om
Swedish dai y ca le in ela ion o age, dia hoea and egion.
Ve e ina y Pa asi ology, 169 (3): 289-295.
246
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Sil e lås, C.; Ma sson, J.G.; Insulande , M.; Lebbad, M., 2012.
Zoono ic ansmission o C yp ospo idium meleag idis on an
o ganic Swedish a m. In e na ional Jou nal o Pa asi ology,
42 (11): 963–967.
Sil e lås, C.; Bosaeus-Reineck, H.; Näslund, K.; Bjö kman, C., 2013.
Is he e a need o imp o ed C yp ospo idium diagnos ics in
Swedish cal es?. In e na ional Jou nal o Pa asi ology, 43
(2): 155-161.
Sischo, W.M.; A will, E.R.; Lanyon, L.E.; Geo ge, J., 2000.
C yp ospo idia on dai y a ms and he ole hese a ms may
ha e in con amina ing su ace wa e supplies in he
no heas e n Uni ed S a es. P e en i e Ve e ina y Medicine, 43
(4): 253-267.
Si ja-Bobadilla, A.; Pad os, F.; Aguile a, C.; Ál a ez-Pelli e o, P.,
2005. Epidemiology o C yp ospo idium molna i in Spanish
gil head sea b eam (Spa us au a a L.) and Eu opean sea bass
(Dicen a chus lab ax L.) cul u es: om ha che y o ma ke
size. Applied and En i onmen al Mic obiology, 71:131–139.
Siwila, J.; Phi i, I.G.; Ve c uysse, J.; Goma, F.; Gab iel, S.;
Clae ebou , E.; Geu den, T., 2007. Asymp oma ic
c yp ospo idiosis in Zambian dai y a m wo ke s and hei
household membe s. T ansac ions o he Royal Socie y o
T opical Medicine and Hygiene, 101 (7): 733-734.
Šlape a, J., 2009. Cen ena y o he genus C yp ospo idium: om
mo phological o molecula species iden i ica ion. In: O ega-
Pie es, M.G., Cacciò, S., Faye , R., Mank, T., Smi h, H.,
Thompson, R.C.A. (Eds.), Gia dia and C yp ospo idium:
F om Molecules o Disease. CAB In e na ional, pp. 31–50.
Šlape a, J., 2013. C yp ospo idiosis and C yp ospo idium species in
animals and humans: a hi y colou ainbow?. In e na ional
Jou nal o Pa asi ology, 43 (12): 957-970.
Sla in, D., 1955. C yp ospo idium meleag idis (sp. no .). Jou nal o
Compa a i e Pa hology, 65: 262-270.
Bibliog a ía
247
Smi h, H., 2008. Diagnos ics. In: Faye , R.; Xiao, L. (Eds.).
C yp ospo idium and C yp ospo idiosis. CRC P ess, Boca
Ra ón, Flo ida (EE.UU.).
Smi h, H.V.; Nichols, R.A.; Mallon, M.; Macleod, A.; Tai , A.; Reilly,
W.J.; B owning, L.M.; G ay, D.; Reid, S.W.; Was ling, J.M.,
2005. Na u al C yp ospo idium hominis in ec ions in Sco ish
ca le. The Ve e ina y Reco d, 156 (22): 710-711.
Smi h, H.V.; Cacciò, S.M.; Cook, N.; Nichols, R.A.B; Tai , A., 2007.
C yp ospo idium and Gia dia as oodbo ne zoonoses.
Ve e ina y Pa asi ology, 149 (1-2): 29-40.
Smi h, R.P.; Chalme s, R.M.; Muelle -Doblies, D.; Cli on-Hadley,
F.A.; Elwin, K.; Wa kins, J.; Paiba, G.A.; Had ield, S.J.; Giles,
M., 2010. In es iga ion o a ms linked o human pa ien s wi h
c yp ospo idiosis in England and Wales. P e en i e Ve e ina y
Medicine, 94 (1-2): 9-17.
Smi h, R.P.; Cli on-Hadley, F.A.; Cheney, T.; Giles, M., 2014.
P e alence and molecula yping o C yp ospo idium in dai y
ca le in England and Wales and examina ion o po en ial on-
a m ansmission ou es. Ve e ina y Pa asi ology, 204 (3-4):
111-119.
Snak, A.; Smide le, F.R.; Mello Fe nandes, N.L.; La a, A.A.; Ga cia,
F.G.; Ogawa, L.; Osaki, S.C., 2017. Occu ence and molecula
cha ac e iza ion o C yp ospo idium sp. in sheep. Semina:
Ciências Ag á ias, 38 (4): 1917-1924.
Snodg ass, D.R.; Angus, K.W.; G ay, E.W., 1984. Expe imen al
c yp ospo idiosis in ge m- ee lambs. Jou nal o Compa a i e
Pa hology, 94 (1): 141-152.
Soba, B.; Loga , J., 2008. Gene ic classi ica ion o C yp ospo idium
isola es om humans and cal es in Slo enia. Pa asi ology,
135 (11): 1263-1270.
Soilán López, M., 2014. C ip ospo idiosis en umian es domés icos de
Galicia: análisis geno ípico y subgeno ípico. Tesis Doc o al.
254
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Ve e ling, J.M.; Je is, H.R.; Me ill, T.G.; Sp inz, H., 1971.
C yp ospo idium w ai i sp. n. om he guinea pig Ca ia
po cellus wi h an emenda ion o he genus. Jou nal o
P o ozoology, 18: 243-247.
Viei a, P.M.; Mede le, N.; Lobo, M.L.; Im e, K.; Mede le, O.; Xiao,
L.; Da abaus, G.; Ma os, O., 2015. Molecula cha ac e isa ion
o C yp ospo idium (Apicomplexa) in child en and ca le in
Romania. Folia Pa asi ologica, 62: 002.
Villaco a Ma ínez de Ma u ana, M.I., 1989. Diagnós ico; incidencia
y p o ilaxis de la c yp ospo idiosis. In ecciones expe imen ales.
Tesis Doc o al. Facul ad de Fa macia. Uni e sidad de San iago
de Compos ela.
Villaco a, I.; A es-Mazas, E.; Lo enzo, M.J., 1991. C yp ospo idium
pa um in ca le, sheep and pigs in Galicia (N.W. Spain).
Ve e ina y Pa asi ology, 38: 249–252.
Wald on, L.S.; Dimeski, B.; Beggs, P.J.; Fe a i, B.C.; Powe , M.L.,
2011. Molecula epidemiology, spa io empo al analysis, and
ecology o spo adic human c yp ospo idiosis in Aus alia.
Applied and En i onmen al Mic obiology, 77 (21): 7757-7765.
Wal ne -Toews, D.; Ma in, S.W.; Meek, A.H.; McMillan, I., 1986a.
Dai y cal managemen , mo bidi y and mo ali y in On a io
Hols ein he ds. I. The da a. P e en i e Ve e ina y Medicine, 4
(2): 103-124.
Wal ne -Toews, D.; Ma in, S.W.; Meek, A.H., 1986b. Dai y cal
managemen , mo bidi y and mo ali y in On a io Hols ein
he ds. II. Age and seasonal pa e ns. P e en i e Ve e ina y
Medicine, 4 (2): 125-135.
Wal ne -Toews, D.; Ma in, S.W.; Meek, A.H., 1986c. Dai y cal
managemen , mo bidi y and mo ali y in On a io Hols ein
he ds. III. Associa ion o managemen wi h mo bidi y.
P e en i e Ve e ina y Medicine, 4 (2): 137-158.
Wal ne -Toews, D.; Ma in, S.W.; Meek, A.H., 1986d. Dai y cal
managemen , mo bidi y and mo ali y in On a io Hols ein
Bibliog a ía
255
he ds. IV. Associa ion o managemen wi h mo ali y.
P e en i e Ve e ina y Medicine, 4 (2): 159-171.
Wang, L.; Xiao, L.; Duan, L.; Ye, J.; Guo, Y.; Guo, M.; Liu, L.; Feng,
Y., 2013a. Concu en in ec ions o Gia dia duodenalis,
En e ocy ozoon bieneusi, and Clos idium di icile in child en
du ing a c yp ospo idiosis ou b eak in a pedia ic hospi al in
China. PLoS Neglec ed T opical Diseases, 7 (9): e2437.
Wang, L.; Zhang, H.; Zhao, X.; Zhang, L.; Zhang, G.; Guo, M.; Liu,
L.; Feng, Y.; Xiao, L., 2013b. Zoono ic C yp ospo idium
species and En e ocy ozoon bieneusi geno ypes in HIV-
posi i e pa ien s on an i e o i al he apy. Jou nal o Clinical
Mic obiology 51: 557-563.
Wang, R.; Qi, M.; Jingjing, Z.; Sun, D.; Ning, C.; Zhao, J.; Zhang, L.;
Xiao, L., 2011a. P e alence o C yp ospo idium baileyi in
os iches (S u hio camelus) in Zhengzhou, China. Ve e ina y
Pa asi ology, 175 (1-2): 151-154.
Wang, R.; Ma, G.; Zhao, J.; Lu, Q.; Wang, H.; Zhang, L.; Jian, F.;
Ning, C.; Xiao, L., 2011b. C yp ospo idium ande soni is he
p edominan species in pos -weaned and adul dai y ca le in
China. Pa asi ology In e na ional, 60 (1): 1-4.
Wang, R.; Li, G.; Cui, B.; Huang, J.; Cui, Z.; Zhang, S.; Dong, H.;
Yue, D.; Zhang, L.; Ning, C.; Wang, M., 2014a P e alence,
molecula cha ac e iza ion and zoono ic po en ial o
C yp ospo idium spp. in goa s in Henan and Chongqing, China.
Expe imen al Pa asi ology, 142: 11–16.
Wang, R.; Zhang, L.; Axén, C.; Bjo kman, C.; Jian, F.; Ame , S.; Liu,
A.; Feng, Y.; Li, G.; L , C.; Zhao, Z.; Qi, M.; Dong, H.; Wang,
H.; Sun, Y.; Ning, C.; Xiao, L., 2014b. C yp ospo idium
pa um IId amily: clonal popula ion and dispe sal om
Wes e n Asia o o he geog aphical egions. Scien i ic Repo s,
4: 4208.
Wang, Y.; Feng, Y.; Cui, B.; Jian, F.; Ning, C.; Wang, R.; Zhang, L.;
Xiao, L., 2010. Ce ine geno ype is he majo
256
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
C yp ospo idium geno ype in sheep in China. Pa asi ology
Resea ch, 106 (2): 341-347.
Wa d, L.A.; Wang Y., 2001. Rapid me hods o isola e
C yp ospo idium DNA om ozen eces o PCR. Diagnos ic
Mic obiology and In ec ious Disease, 41: 37-42.
Wa anabe, Y.; Yang, C.H.; Ooi, H.K., 2005. C yp ospo idium
in ec ion in li es ock and i s iden i ica ion o
C yp ospo idium pa um geno ype in ca le eces in Taiwan.
Pa asi ology Resea ch, 97 (3): 238-241.
Wegayehu, T.; Ka im, M.R.; Li, J.; Adamu, H.; E ko, B.; Zhang, L.;
Tilahun, G., 2017. P e alence and gene ic cha ac e iza ion o
C yp ospo idium species and Gia dia duodenalis in lambs in
O omia Special Zone, Cen al E hiopia. BioMed Cen al
Ve e ina y Resea ch, 13 (1): 22.
Wei zel, T.; Di ich, S.; Möhl, I.; Adusu, E.; Jelinek, T., 2006.
E alua ion o se en comme cial an igen de ec ion es s o
Gia dia and C yp ospo idium in s ool samples. Clinical
Mic obiology and In ec ion, 12: 656-659.
Wells, B.; Shaw, H.; Ho chkiss, E.; Gil ay, J.; Ay on, R.; G een, J.;
Ka ze , F.; Wells, A.; Innes, E., 2015. P e alence, species
iden i ica ion and geno yping C yp ospo idium om li es ock
and dee in a ca chmen in he Cai ngo ms wi h a his o y o a
con amina ed public wa e supply. Pa asi es and Vec o s, 8 (1):
66.
Widme , G.; Feng, X.; Tan i e di, S., 2004. Geno yping o
C yp ospo idium pa um wi h mic osa elli e ma ke s. Me hods
in Molecula Biology, 268: 177–188.
Wielinga, P.R.; de V ies, A.; Van de Goo , T.H.; Mank, T.; Ma s,
M.H.; Ko beek, L. M.; an de Giessen, J.W., 2008.
Molecula epidemiology o C yp ospo idium in humans and
ca le in The Ne he lands. In e na ional Jou nal o
Pa asi ology, 38 (7): 809-817.
Bibliog a ía
257
Xiao, L., 2010. Molecula epidemiology o C yp ospo idiosis: an
upda e. Expe imen al Pa asi ology, 124: 80-89.
Xiao, L.; He d, R.P., 1994. In ec ion pa e ns o C yp ospo idium and
Gia dia in cal es. Ve e ina y Pa asi ology, 55 (3): 257-262.
Xiao, L.; Cama, V., 2006. C yp ospo idium and C yp ospo idiosis. In:
O ega, Y. R. (Ed.). Foodbo ne Pa asi es. New Yo k: Sp inge
Ve lag.
Xiao, L.; Faye , R., 2008. Molecula cha ac e isa ion o species and
geno ypes o C yp ospo idium and Gia dia and assessmen o
zoono ic ansmission. In e na ional Jou nal o Pa asi ology,
38 (11): 1239-1255.
Xiao, L., Feng, Y., 2008. Zoono ic c yp ospo idiosis. Immunology
and Medical Mic obiology. FEMS Immunology and Medical
Mic obiology, 52 (3): 309-323.
Xiao, L.; Ryan, U.M., 2008. Molecula epidemiology. En: Faye R.,
Xiao, L. (Eds). C yp ospo idium and C yp ospo idiosis. CRC
P ess; Taylo and F ancis G oup; Boca Ra on. pp 119-172.
Xiao, L.; He d, R.P.; Rings, D.M., 1993. Diagnosis o
C yp ospo idium on a sheep a m wi h neona al dia hea by
immuno luo escence assays. Ve e ina y Pa asi ology, 47 (1-2):
17-23.
Xiao, L.; Be n, C.; Limo , J.; Sulaiman, I.; Robe s, J.; Checkley, W.;
Cab e a, L.; Gilman, R.H.; Lal, A.A., 2001a. Iden i ica ion o
5 ypes o C yp ospo idium pa asi es in child en in Lima, Pe u.
The Jou nal o In ec ious Diseases, 183 (3): 492–497.
Xiao, L.; Limo , J.; Be n, C.; Lal, A.A., 2001b. Epidemic Wo king
G oup. T acking C yp ospo idium pa um by sequence
analysis o small double-s anded RNA. Eme ging In ec ious
Diseases, 7(1): 141-145.
Xiao, L.; Sulaiman, I.M.; Ryan, U.M.; Zhou, L.; A will, E.R.; Tischle ,
M.L.; Zhang, X.; Faye , R.; Lal, A.A., 2002a. Hos adap a ion
and hos -pa asi e coe olu ion in C yp ospo idium: implica ions
258
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
o axonomy and public heal h. In e na ional Jou nal o
Pa asi ology, 32 (14): 1773-1785.
Xiao, L.; Be n, C.; A owood, M.; Sulaiman, I.; Zhou, L.; Kawai, V.;
Vi a , A.; Lal, A.A.; Gilman, R. H., 2002b. Iden i ica ion o
he C yp ospo idium pig geno ype in a human pa ien . The
Jou nal o In ec ious Diseases, 185 (12): 1846-1847.
Xiao, L.; Faye , R.; Ryan, U.; Up on, S.J., 2004. C yp ospo idium
axonomy: ecen ad ances and implica ions o public heal h.
Clinical Mic obiology Re iews, 17(1): 72-97.
Xiao, L.; Zhou, L.; San ín, M.; Yang, W.; Faye , R., 2007.
Dis ibu ion o C yp ospo idium pa um sub ypes in cal es in
eas e n Uni ed S a es. Pa asi ology Resea ch, 100 (4): 701-706.
Yang, R.; Jacobson, C.; Go don, C.; Ryan, U., 2009. P e alence and
molecula cha ac e isa ion o C yp ospo idium and Gia dia
species in p eweaned sheep in Aus alia. Ve e ina y
Pa asi ology, 161 (1-2): 19-24.
Yang, R.; Jacobson, C.; Ga dne , G.; Ca michael, I.; Angus, J.D.;
Campbell, A.J.; Ng-Hublin, J.; Ryan, U., 2014. Longi udinal
p e alence; oocys shedding and molecula cha ac e isa ion o
C yp ospo idium species in sheep ac oss ou s a es in
Aus alia. Ve e ina y Pa asi ology, 200 (1-2): 50-58.
Yang, R., Ga dne , G.E., Ryan, U., Jacobson, C., 2015. P e alence
and pa hogen load o C yp ospo idium and Gia dia in sheep
aeces collec ed om saleya ds and in aba oi e luen in
Wes e n Aus alia. Small Ruminan Resea ch, 130: 216-220.
Yang, X.Y.; Liu, Z.L.; Yang, L.R.; Ma, Z.Q.; Yan, Z.D., 2004.
P ima y in es iga ion o bo ine C yp ospo idium in es a ion in
Huhho egion o Inne Mongolia. China Jou nal Inne
Mongolia Ag icul u al Uni e si y, 25: 40–42.
Ye, J.; Xiao, L.; Wang, Y.; Wang, L.; Ame , S.; Roellig, D.M.; Guo,
Y.; Feng, Y., 2013. Pe ipa u ien ansmission o
C yp ospo idium xiaoi om ewes o lambs. Ve e ina y
Pa asi ology, 197: 627-633.
Bibliog a ía
259
You, X.; A owood, M.J.; Lejkowski, M.; Xie, L.; Schinazi, R.F.;
Mead, J.R., 1996. A chemiluminescence immunoassay o
e alua ion o C yp ospo idium pa um g ow h in i o. FEMS
Mic obiology. Le e s, 136: 251-256.
Zahedi, A.; Papa ini, A.; Jian, F.; Robe son, I.; Ryan, U., 2016a.
Public heal h signi icance o zoono ic C yp ospo idium species
in wildli e: c i ical insigh s in o be e d inking wa e
managemen . In e na ional Jou nal o Pa asi ology:
Pa asi es and Wildli e, 5 (1): 88-109.
Zahedi, A.; Monis, P.; Auco e, S.; King, B.; Papa ini, A.; Jian, F.;
Yang, R.; Oskam, C.; Ball, A.; Robe son, I.; Ryan, U., 2016b.
Zoono ic C yp ospo idium species in animals inhabi ing
Sydney wa e ca chmen s. PloS one, 11 (12): e0168169.
Zhang, J., 2007. In es iga ion o C yp ospo idium in ec ion in ca le
in Qinghai P o ince. Chinese Jou nal o Ve e ina y Medicine,
43: 36.
Zhang, L.; Sheo an, A.S.; Widme , G., 2009. C yp ospo idium
pa um DNA eplica ion in cell- ee cul u e. Jou nal o
Pa asi ology, 95: 1239-1242.
Zhang, W.; Shen, Y.; Wang, R.; Liu, A.; Ling, H.; Li, Y.; Cao, J.;
Zhang, X.; Shu, J.; Zhang, L., 2012. C yp ospo idium
cuniculus and Gia dia duodenalis in abbi s: gene ic di e si y
and possible zoono ic ansmission. PloS One, 7: e31262.
Zhang, W.; Wang, R.; Yang, F.; Zhang, L.; Cao, J.; Zhang, X.; Ling,
H.; Liu, A.; Shen, Y., 2013. Dis ibu ion and gene ic
cha ac e iza ions o C yp ospo idium spp. in p e-weaned dai y
cal es in No heas e n China's Heilongjiang P o ince. PLoS
One, 8: e54857.
Zhang, X.X.; Tan, Q.D.; Zhou, D.H.; Ni, X.T.; Liu, G.X.; Yang, Y.C.;
Zhu, X.Q., 2015. P e alence and molecula cha ac e iza ion o
C yp ospo idium spp. in dai y ca le, no hwes China.
Pa asi ology Resea ch, 114 (7): 2781-2787.
260
ESTHER NAVARRO GONZÁLEZ
Zhao, G.H.; Ren, W.X.; Gao, M.; Bian, Q.Q.; Hu, B.; Cong, M.M.;
Lin, Q.; Wang, R.J.; Qi, M.; Qi, M.Z.; Zhu, X.Q.; Zhang, L.X.,
2013. Geno yping C yp ospo idium ande soni in ca le in
Shaanxi p o ince, No hwes e n China. PLoS One, 8 (4):
e60112.
Zhao, W.; Wang, R.; Zhang, W.; Liu, A.; Cao, J.; Shen, Y.; Yang, F.;
Zhang, L., 2014. MLST sub ypes and popula ion gene ic
s uc u e o C yp ospo idium ande soni om dai y ca le and
bee ca le in no heas e n China’s Heilongjiang P o ince. PloS
one, 9 (7): e102006.
Zhou, L.; Singh, A.; Jiang, J.; Xiao, L., 2003. Molecula su eillance
o C yp ospo idium spp. in aw was ewa e in Milwaukee:
implica ions o unde s anding ou b eak occu ence and
ansmission dynamics. Jou nal o Clinical Mic obiology, 41
(11): 5254–5257.
Zhou, L.; Faye , R.; T ou , J.M.; Ryan, U.M.; Schae e III, F.W.; Xiao,
L., 2004. Geno ypes o C yp ospo idium species in ec ing u -
bea ing mammals di e om hose o species in ec ing
humans. Applied and En i onmen al Mic obiology, 70 (12):
7574-7577.
Zhou, R.; Li, G.; Xiao, S.; Xia, Y.; Guo, Y., 2007. PCR ampli ica ion
and sequence analyses o ITS-1 DNA om C yp ospo idium
ande soni in dai y ca le. Pa asi ology Resea ch, 100 (5):
1135-1138.
Ziegle , P.E.; Wade, S.E.; Schaa , S.L.; Chang, Y.F.; Mohammed,
H.O., 2007. C yp ospo idium spp. om small mammals in he
New Yo k Ci y wa e shed. Jou nal o Wildli e Diseases, 43:
586–96.
Zin l, A.; P oc o , A.F.; Read, C.; Dewaal, T.; Shanaghy, N.; Fanning,
S.; Mulcahy, G., 2009. The p e alence o C yp ospo idium
species and sub ypes in human aecal samples in I eland.
Epidemiology and In ec ion, 137: 270–277.
Bibliog a ía
261
Zuca o, A.S.; Aquino, M.C.C.; Inácio, S.V.; Figuei edo, R.N.;
Pie ucci, J.C.; Pe i, S.H.V.; Mei eles, M.V.; B esciani, K.D.S.,
2015. Molecula cha ac e isa ion o C yp ospo idium spp. in
lambs in he Sou h Cen al egion o he S a e o São Paulo.
A qui o B asilei o de Medicina Ve e iná ia e Zoo ecnia, 67
(2): 441-446.
