GUÍA DE PRÁCTICAS Y
SEMINARIOS DE
FUNDAMENTOS DE
TOXICOLOGÍA
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EDITADO POR:
P o a. E a Ramos Alonso
P o a. Paula Moyano-Ci es I ano
AUTORES:
P o a. E a Ramos Alonso
P o . Ja ie del Pino Sans
P o . Alejand o Rome o Ma ínez
P o a. Ma ía Jesús Díaz Plaza
P o a. Ma ía Te esa F ejo Moya
P o a. Paula Moyano-Ci es I ano
ISBN: 978-84-09-32028-8
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ÍNDICE:
1. NORMAS DE SEGURIDAD Y BUENAS
PRÁCTICAS EN EL LABORATORIO ...................... - 4 -
2. LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA ................ - 8 -
2.1. De e minación de Amoniaco en Mues as de Agua po el Mé odo de
Nessle . ................................................................................................................... - 9 -
2.2. De e minación De A sénico po el mé odo de Gu zei . .................... - 13 -
2.3. De e minación De Sal En Alimen os Y En Agua De Bebida ............ - 17 -
2.4. Iden i icación de enenos olá iles (Cianu os) ................................... - 21 -
2.5. De e minación Cuali a i a De Plomo En Mues as De Agua .......... - 26 -
2.6. De e minación de Ni a os y Ni i os .................................................. - 29 -
3. SEMINARIOS DE TOXICOLOGÍA ................. - 37 -
3.1. E aluación del iesgo medioambien al ................................................ - 38 -
3.2. Ensayos de oxicidad. Modelos y cálculos de índices de oxicidad. - 53 -
3.3. Fuen es de In o mación en Toxicología. Bases de Da os. ................. - 70 -
3.4. Toma de mues as. No mas pa a la ecogida, p epa ación y emisión
de mues as pa a la in es igación químico- oxicológica. ............................. - 74 -
Dedicado a la p o eso a Ma ía Jesús Díaz, po sus enseñanzas y los buenos
momen os que pasamos jun os en el labo a o io.
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1. NORMAS DE SEGURIDAD Y
BUENAS PRÁCTICAS EN EL
LABORATORIO
Es a guía se ha diseñado pa a o ien a a los alumnos en las P ác icas de
Labo a o io, o eciendo in o mación básica de manejo y p o ocolos pa a lle a
a cabo las écnicas de una mane a segu a, ápida y e icaz.
Se debe ene en cuen a que abaja en un labo a o io conlle a iesgos con
consecuencias muy di e sas en unción de la p ác ica que se es é ealizando.
Po lo que se han conside ado p incipalmen e los iesgos de i ados de las
p ac icas con enidas en es e manual.
Los p incipios de las Buenas P ác icas de Labo a o io (BPL) son u ilizados pa a
ealiza ensayos des inados a ob ene los da os sob e las p opiedades y
pelig osidad pa a las pe sonas, los animales y el medio ambien e de cualquie
sus ancia química.
En es a p ime a pa e se explican las ca ac e ís icas del abajo de labo a o io,
con el in de e i a iesgos de i ados del uso y manejo de los eac i os. Po lo
an o, lo p incipal es que el alumno debe man ene una a ención especial
du an e el p oceso de modo que pe manen emen e aplique las p ecauciones
especí icas pa a cada p ác ica.
No mas básicas:
1. Es obliga o io el uso de la ba a, man eniéndola en odo momen o
ab ochada. Es ecomendable el uso de ga as de segu idad cuando se
manipulen p oduc os químicos.
2. No se puede inge i alimen os o uma en el labo a o io.
3. Recoge se el pelo y e i a pulse as o colgan es que puedan engancha se.
4. A isa de posibles ale gias.
5. La a se las manos al inaliza las p ác icas an es de abandona el
labo a o io, incluso si se ha usado guan es.
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6. El alumno debe espe a el ma e ial y es el esponsable de su
man enimien o has a el inal de las p ác icas. De modo que al inal debe
queda odo pe ec amen e limpio y ecogido al y como lo encon ó.
No mas de abajo:
1. No pipe ea NUNCA con la boca.
2. No abaja sepa ado de la mesa o poya a.
3. Elimina adecuadamen e los esiduos p oducidos en los bidones
habili ados al e ec o, no eliminando nunca es os po el desagüe, aunque
sean pequeñas can idades.
4. El uso de apa a os se á supe isado siemp e po el/los p o eso /es
enca gados de la p ác ica.
Reco da o io de los pic og amas de e ique ado de
p oduc os químicos:
Es impo an e conoce los pa a p e eni lesiones y en e medades en el
labo a o io.
La egulación es ablecida po la Unión Eu opea en 2009 sob e clasi icación,
e ique ado y en asado (CLP) in oduce pic og amas con o ma de ombo que
indican la na u aleza del pelig o o pelig os asociados a la u ilización de
sus ancias o mezclas pelig osas.
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En las e ique as, los pic og amas an acompañados de palab as de ad e encia
(a ención, pelig o), indicaciones de pelig o ( ases H) y consejos de p udencia
( ases P), así como de in o mación sob e el p oduc o y el p o eedo .
I. Los p oduc os químicos con es e pic og ama signi ican:
• Gas bajo p esión, puede explo a cuando se calien a.
• Gas e ige ado, puede o igina quemadu as o lesiones
c iogénicas.
• Gases disuel os.
II. Es e pic og ama se e ie e a sus ancias explosi as,
au o eac i as y pe óxidos o gánicos que pueden causa una
explosión cuando se calien an.
III. Hay que ene en cuen a lo que signi ican es os dos pic og amas de
aspec o simila :
1.- Es e ad ie e ace ca de gases, ae osoles, líquidos y sólidos
in lamables como:
• Sus ancias y mezclas de calen amien o espon áneo.
• Líquidos y sólidos pi o ó icos que pueden incendia se en
con ac o con el ai e.
• Sus ancias y mezclas que emi en gases in lamables en con ac o
con el agua.
• Sus ancias au o eac i as o pe óxidos o gánicos que pueden
p o oca un incendio si se calien an.
2.- Si encuen as es e pic og ama en la e ique a signi ica que es ás en
p esencia de gases, sólidos o líquidos oxida i os que pueden causa
o in ensi ica un incendio o explosión.
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IV. Una sus ancia o mezcla que lle e es e pic og ama puede ene uno o
a ios de los siguien es e ec os:
• Es cance ígena.
• A ec a a la e ilidad y al neona o.
• Causa mu aciones.
• Es un sensibilizan e espi a o io, puede p o oca ale gias,
asma o di icul ad espi a o ia si es inhalado.
• Resul a óxica en de e minados ó ganos.
• Pelig o po aspi ación, que puede se mo al o muy noci o si se
ingie e o pene a a a és de alguna ía.
V. P oduc o químico ex emadamen e óxico en con ac o con la
piel, si se inhala o ingie e, y que puede esul a mo al.
VI. Siemp e que u ilices un p oduc o químico con es e
pic og ama no ol ides que es co osi o y que puede
p o oca quemadu as g a es en la piel y daño ocula .
También es co osi o pa a los me ales.
VII. Es e pic og ama puede e e i se a uno o más de los siguien es
pelig os:
• Toxicidad aguda.
• Causa una sensibilización cu ánea, i i ación de piel y ojos.
• I i an e pa a la espi ación.
• Es na có ico, p o oca somnolencia o ma eos.
• Pelig oso pa a la capa de ozono.
VIII. Es e pic og ama ad ie e de que la sus ancia es óxica o
noci a pa a los o ganismos acuá icos.
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2. LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
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2.1. De e minación de Amoniaco en
Mues as de Agua po el Mé odo de Nessle .
FUNDAMENTO
El eac i o Nessle , en p esencia de iones amoniaco, se descompone
o mando yodu o de dime cu iamonio que pe mi e la de e minación
colo imé ica de los iones amonios. El eac i o de Nessle p oduce una
colo ación g adual de ama illo a pa do, a medida que aumen a la concen ación
de amoníaco.
REACTIVOS
1) P epa ación del eac i o de Nessle :
- Solución A: disol e 160 g de NaOH en 500 ml de H20.
- Solución B: Disol e 70 g de IK en 100 ml de agua y añadi 100 g de I2Hg y
lle a has a 500 ml.
El eac i o Nessle se ob iene mezclando a pa es iguales la solución A+B.
2) Solución de Ta a o de Sodio y Po asio:
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2. Un homb e de unos 70 kg de peso consume 185 g/día de pescado y
ma isco (ni eles de As ino gánico se encuen an en ni eles de 4,390 µg/g
peso esco) y 226 g/día de e du as y ho alizas (ni eles de As
ino gánico se encuen an en ni eles de 0,0006 µg/g peso esco). Sabiendo
que la IDA es de 0,002 mg/kg/día (2 µg/kg/día) y la BMDL01 en e 0,3-
8 µg/kg/día, calcula si la can idad inge ida de As supe a la IDA y la
BMDL01.
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2.3. De e minación De Sal En Alimen os Y
En Agua De Bebida
El obje i o de es a p ác ica es de e mina la concen ación de sal en mues as
de di e en es alimen os (pan, galle as, sopas) y en una mues a de agua del g i o
median e olume ía de p ecipi ación, siguiendo el Mé odo de Moh .
FUNDAMENTO
Los clo u os p ecipi an con AgNO3 o mando un p ecipi ado blanco de AgCl,
según la siguien e eacción:
NaCl + AgNO3→ NaNO3 + AgCl↓
El pun o inal de la alo ación se obse a añadiendo una pequeña can idad de
K2C O4 (colo ama illo) que o ma á un p ecipi ado de Ag2C O4 (pa do-
na anja), una ez e minada la eacción en e el clo u o y la pla a, según la
eacción:
2Ag+ + C O4 = → Ag2C O4↓
REACTIVOS
- Ni a o de Pla a (AgNO3): 0,1 M. PM = 169,87 g /mol
- Dic oma o po ásico (K2C O4) al 10 %
- Disolución de NaCl pa ón: Pesa 1,0 g /1 L (1000 ppm)
Es anda ización de la disolución de AgNO3
Pone en un ma az, 10 ml de la disolución de NaCl (0,1 g /l) añadi 40 ml de
agua des ilada y 0,5 ml de la disolución de K2C O4. Añadi el AgNO3 con una
bu e a has a i aje del indicado de ama illo ( u bio) a pa do-ana anjado
( u bio).
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2.3.1. De e minación de Sal en una Mues a
de Alimen o y en Mues as de Agua del G i o.
(Mé odo de Moh )
PROCEDIMIENTO
1. Pesa 1 g de las mues as solidas y disol e en 10 ml de agua des ilada, agi a
du an e 5 minu os.
2. Toma 100 ml de agua del g i o y segui el mismo p ocedimien o.
3. Las mues as sólidas se il a án con papel de il o a o o ma az.
4. Añadi a es e ma az, que con iene el sob enadan e, 4-5 go as del indicado
(K2C O4).
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5. Valo a es a solución añadiendo despacio con una bu e a, go as de AgNO3,
has a el i aje del indicado ama illo ( u bio) a pa do-ana anjado.
6. Apun a en el cuade no los ml de AgNO3, gas ados pa a las mues as sólidas
(pan, galle as e c.) y agua.
CÁLCULOS
N= nº de equi alen es/Volumen
nº de equi alen es = g/PM
PM NaCl = 58,4 g/mol
Después de ealiza los cálculos pa a la mues a solida y el agua, alo a los
esul ados y comen a us conclusiones.
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PROBLEMAS Y CUESTIONES
1. ¿Cómo p epa a ías la solución de Ni a o de pla a 0,1 N y PM= 169,87
g /mol?
2. Si una pe sona consume 100 g de pan y el con enido en sal de ese pan es
de 17g/kg de ha ina. ¿Cuán o consume de sal y cuán o consume de
sodio? ¿Los ni eles son supe io es o in e io es al ecomendado po la
OMS (5 g/pe sona/día)? En caso de supe a los ni eles ecomendados
po la OMS, ¿cuáles se ían los posibles e ec os óxicos?
3. Sabiendo que el ni el de sal en la mayo ía de los panes es de 16 g de
NaCl/Kg de ha ina (1,6 % o 16000 ppm), y en el agua de bebida son de
0,5 %. Calcula en po cen aje (%) y en ppm (µg/ml o mg/L) los ni eles de
sal encon ados en las mues as analizadas.
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2.4. Iden i icación de enenos olá iles
(Cianu os)
Ni eles en plan as de 200 ppm son óxicos .
Agua de bebida máximo pe mi ido 2 ppm.
2.4.1. De e minación de cianu os: Mé odo de
G igna d
FUNDAMENTO
Es a eacción es á basada en la o mación de isopu pu ina po ijación del ácido
cianhíd ico sob e el ácido píc ico en p esencia de un álcali. Es a eacción es
ca ac e ís ica del cianu o. Las mues as deben conse a se en ío pa a e i a la
acción enzimá ica y bac e iana sin ag egado de conse an es ya que es una
eacción muy sensible.
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MATERIAL Y REACTIVOS
Papel pic osodado.- En un ma az se ponen 0,5 g de ácido píc ico y 5 g de
bica bona o sódico, los cuales se diluyen has a 100 ml de agua.
En es a solución sume gimos i as de papel de il o dejándolo después du an e
10 minu os en oscu idad.
P ocedemos a seca las en una es u a a 37 ºC y las coloca emos en el ma az con
la mues a a ada.
PROCEDIMIENTO
1. Se oman dos ma aces. En un ma az ponemos la mues a p oblema
(homogeneizado de plan as cianogéne icas, yuca, almend a ama ga,
lau el, mandioca e c.), y en o a mues a con ol.
2. Añadimos 50 ml de agua unas go as de clo o o mo y unas go as de ácido
sul ú ico.
3. Se suspende la i a de papel pic osodado en el ma az sin que oque el
líquido y apamos el ma az.
Si hay cianu os en la mues a obse a emos una colo ación ojo ana anjada en
la i a de papel pic osodado; si no exis en cianu os, no se obse a ningún
cambio de colo en la i a. La in ensidad del colo a ia á en unción de los
ni eles de cianu os de la mues a. Compa a con el con ol.
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2.4.2. De e minación de cianu os: Mé odo de
azul de p usia
FUNDAMENTO
Su de e minación se puede hace en alimen os, luidos biológicos y ejidos. Se
basa en la o mación de e ocianu os que después es a ado con una sal é ica,
es una eacción muy especí ica pa a el cianu o.
REACTIVOS
- Soluciones de CNK (10 mg/ml)
- Sul a o e oso 2%
- Clo u o Fé ico al 30%
- HCl 0,1 N
PROCEDIMIENTO
Rec a de calib ado:
A pa i de la solución s ock de 10 mg/ml hace las siguien es diluciones: 8, 3,
1 y 0,1 mg/ml y lle a a un olumen de 5 ml con agua des ilada.
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Añadi a odos los ubos 1 ml de sul a o e oso, agi a y deja eposa 4
minu os.
Añadi unas go as HCl, 2-5 go as de Cl3Fe, mezcla .
Apa ece un colo azul de P usia. De e mina el lími e de de ección del mé odo.
P epa ación de mues as de alimen os:
1. Coloca 10 g de mues a (mandioca..) en un ma az de des ilación
2. Añadi 50 ml agua.
3. Añadi 10 ml de ácido a á ico al 10% y des ila .
4. Recoge el des ilado sob e 5 ml de NaOH 10%, medi el olumen
des ilado.
5. Coge 1ml de la mues a y añadi 1 ml de Sul a o e oso.
6. Añadi unas go as de HCl y unas go as de CL3Fe.
7. Compa a el colo con la ec a de calib ado.
8. Pa a la de e minación cuan i a i a lee a l= 680 nm
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PROBLEMAS Y CUESTIONES
1. Sabiendo que la Dosis de Re e encia Aguda (DRA) pa a los glucósidos
cianogénicos es de 0,009 mg/kg pc (exp esada como equi alen e de CN-)
y que la Inges a dia ia máxima ole able p o isional (IDMTP) es de 0,02
mg/kg pc, exp esada como CN-, y eniendo en cuen a que los máximos
ni eles de HCN pe mi idos en la yuca dulce son de 50 mg/kg, y en la
ha ina de yuca de 10 mg/kg.
Calcula :
• La can idad de CN- inge ida po una pe sona de 60 Kg de peso que come
100 g de yuca dulce y 50 g de ha ina de yuca.
• Si los ni eles inge idos de CN- supe an los de la DRA y IDMTP, desc ibe
los sín omas clínicos de la in oxicación.
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REACTIVOS
• Agua alcalina calien e: alcaliniza 1 L de agua des ilada a pH = 8-9, con
NaOH 0,1 N (1% de NaOH es su icien e). Calen a has a ebullición an es
de su empleo.
• Reac i os Ca ez: Fe ocianu o al 15 % y Ace a o de zinc al 30 %
• Sul anilamida al 1 %: disol e 1 g de sul anilamida en 100 ml de una
solución de HCl 1,5 N. Gua da en asco opacio.
• N-(1-Na il) e ilendiamina al 0,1%: 0,1g /100 ml de H2O.
• Ácido Clo híd ico 1,5 N: PM = 36,47; Riqueza= 35 % y D= 1,18 Kg/L
CONSTRUCCIÓN DE LA RECTA
PATRÓN DE NITRITO SÓDICO
Solución pa ón de ni i o sódico: 0,25 mg/ml.
A pa i de es a solución p epa a las siguien es concen aciones y lle a a un
olumen de 10 mL con agua des ilada: 10, 5, 2,5 y 1,25 µg/mL.
Si es as soluciones son muy concen adas hace una pos e io dilución (1:9) pa a
llega a las siguien es concen aciones: 1; 0,5; 0,25 y 0,125 µg/mL. Una ez
hechas las diluciones añadi a cada ubo:
- 1 mL de la solución de sul anilamida, agi a los ubos.
- 1 mL de N-(1 na il)-e ilendiamina agi a . Deja los ubos en eposo 5 min
has a la apa ición de un colo osado, Lee a 540 nm en un expec o o óme o
(UV/Visible) en e a un blanco.
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PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS
SÓLIDAS
Pa imos de 2 g de mues a p oblema y la disol emos en 25 mL de agua, pH =
8-9 calien e en un ma az.
- Calen amos el ma az a ebullición, y dejamos en ia .
- En el ma az echamos 1 ml de e ocianu o po ásico al 15% y 1 ml de
ace a o de Zn al 30% (se u ilizan como agen es cla i ican es).
- Fil amos el con enido del ma az con papel de il o.
- Del il ado cogemos 1 ml y añadimos 1 ml de sul anilamida y 1 ml de N-
(1-na ile ilendiamina), agi amos y leemos a l = 540 nm.
DETERMINACIÓN DE NITRITOS EN
EL AGUA DE GRIFO
Se coge 1 o 2 ml del agua de g i o y se le añade 1 ml de sul anilamida y 1 ml de
N-(1-na il-e ilendiamina) y leemos a l = 540 nm.
CÁLCULOS: NaNO2 (ppm) = (C x V)/M
C = concen ación de ni i o sódico en la ec a de calib ado.
M = g de mues a omada.
V = ml del sob enadan e.
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PROBLEMAS Y CUESTIONES
1) Explica cómo se hacen las di e en es diluciones a pa i de la solución
es ánda de ni i o sódico de (0,25 mg/ml) pa a ob ene 10, 5, 2,5 y 1,25 µg/ml,
lle a a un olumen inal de 10 ml con agua des ilada. Cons ui la ec a de
calib ado. Calcula los ni eles de Ni i os en las mues as analizadas. Indica si
los ni eles de ni i os encon ados en el agua de bebida y en el embu ido es án
den o de los ni eles pe mi idos.
2) Si el con enido máximo de Ni a os en las hojas de lechuga es de 4000 ppm.
y el IDA pa a los Ni a os es de IDA= 3,65 mg/Kg. ¿Cuán a can idad de lechuga
se pod ía come al día, una pe sona que pese 70 Kilos y consumie a o os
alimen os que cons i uyan una uen e de Ni a os?
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3) En el agua de bebida encon amos ni eles de 1 ppm de Ni i os y su IDA =
0,07 mg/ml. Calcula el MOS sabiendo que una pe sona de 70 Kg consumo
odos los días 2 L de agua. Valo es de MOS in e io es a 100 han sido
in e p e ados po las Agencias Regulado as como una si uación de ale a.
4) Sabiendo que un niño de 7 a 12 años con un peso medio de 35 Kg y sabiendo
que la IDA pa a los Ni a os es de 3,65 mg/kg/día, y que ingie e 2,61 g de
acelgas/pe sona día.
(Con enido medio de Ni a os 1390 mg/ Kg).
- Calcula los mg de NO3/pe sona/día que ingie e un niño en e 7-12 años
- Calcula el % de la IDA que ingie e
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5) Sabiendo que el con enido medio de Ni a os en po i os de ege ales es de 50
mg/Kg, y los po i os son de 250 g y el peso de un niño de 4 meses es de 6,5 Kg
y la IDA = 3,65 mg/Kg.
Calcula :
- Can idad de ni a os en un po i o de 250 g
- % de la IDA pa a un po i o de 250 g
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3. SEMINARIOS DE TOXICOLOGÍA
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3.1. E aluación del iesgo medioambien al
INTRODUCCIÓN
Medioambien e: lo con o man odos los elemen os na u ales y a i iciales que
es án in e elacionados o ma na u al man eniendo un equilib io ecológico. La
ac i idad gene al del homb e puede desencadena la up u a paula ina de al
equilib io lo que conduce a un de e io o del medio ambien e, y po an o a una
deg adación en las condiciones de ida de los se es i os.
Eco oxicología: es la cien í ica que es udia el e ec o de las sus ancias y
compues os químicos óxicos sob e los ecosis emas.
Con aminación: Al e a noci amen e la pu eza o las condiciones no males de
una cosa o un medio po agen es químicos o ísicos. Un con aminan e puede se
no solo una sus ancia que no es á de o ma na u al en el medio, sino ambién
sus ancias na u ales que no se encuen an en las p opo ciones no males,
p oduciendo e ec os de oxicidad.
Los con aminan es se pueden clasi ica de 3 o mas:
Ø Con aminan es según su uen e de p ocedencia.
1. Ag icul u a y ganade ía
2. Gene ado es de elec icidad
3. T anspo e
4. Mine ía
5. Me alu gia
6. Indus ia química y elec ónica
7. T a amien o de esiduos
Ø Con aminan es según el medio ecep o .
1. Con aminan es a mos é icos
2. Con aminan es u banos
3. Con aminan es en in e io es
4. Con aminan es del agua
5. Con aminan es ma inos
6. Con aminan es del suelo
Ø Con aminan es según los impac os ambien ales que ocasionan.
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1. Con aminan es de e ec o in e nade o
2. Con aminan es de acidi icación
3. Con aminan es que p oducen des ucción del ozono
es a os é ico
4. Con aminan es que o iginan eu o ización
5. Con aminan es que p oducen oxicidad
6. Con aminan es que inducen la o mación de smog
7. Con aminan es que p oducen eco oxicidad
DISPERSIÓN DE LOS CONTAMINANTES ATMOSFÉRICOS
Una ez emi idos los con aminan es pueden se ans o mados o deg adados a
o os compues os menos óxicos po la acción de las eacciones químicas y
bioquímicas que ienen luga en el medioambien e, pe o es as eacciones
pueden llega a sa u a se, supe ándose las capacidades de dichas eacciones
pa a ans o ma los con aminan es acumulándose po encima de las
concen aciones segu as y dando luga a los enómenos de oxicidad. Pa a
e i a lo es impo an e que se p oduzca la dispe sión de los con aminan es po
medio de los dis in os ac o es me eo ológicos (Figu a 1).
Figu a 1. Esquema de dispe sión de con aminan es po ac o es me eo ológicos.
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A ni el a mos é ico el p incipal ac o que in luye en la dispe sión de los
con aminan es es el ien o que p esen a dos mo imien os, uno es el ho izon al
y o o en e ical que depende del g adien e é mico (es deci cuando se
asciende un me o en al u a, la empe a u a disminuye un g ado). Al ascende
en al u a y disminui la empe a u a el ai e se condensa, pesa más y baja al
suelo. El suelo es calen ado po la acción sola y po con ección calien a el ai e
p óximo al mismo, lo cual p oduce una expansión del mismo y al disminui su
densidad pesa menos y asciende, p oduciéndose una eci culación de ai e
mediada po la acción sola . Los con aminan es son emi idos en la pa e baja de
la a mos e a p óximos al suelo y a con inuación po la eci culación del ai e
es os con aminan es ascienden a capas supe io es y son dispe sados po la
acción de los ien os en ho izon al.
Dicha eci culación del ai e se ompe al p oduci se el enómeno de in e sión
é mica. Dicho enómeno consis e en la colocación de una masa de ai e de
meno empe a u a p óxima al suelo que la capa de ai e supe io que p esen a
mayo empe a u a (Figu a 2). La p esencia de una capa de in e sión impide
que se p oduzca la eci culación del ai e dado que el ai e más io no a a
ascende y los con aminan es a apados en es a capa queda an a apados y se
concen a an. La in e sión é mica depende de la ho a del día y de la es ación
del año dado que es p oducida po la nula o poca adicación sola . También
in luye la localización geog á ica dado que las zonas de alles con meno
i adiación sola son más p opensas a es e enómeno.
Figu a 2. Esquema de in e sión é mica.
In e sión é mica
- 41 -
CONTAMNINATES ATMOSFÉRICOS
- Ino gánicos:
Ø Co, So, No, halógenos, me ales e iones me álicos u o os.
- O gánicos:
Ø hid oca bu os, oxidan es o oquímicos
- Pa ículas
EXPRESIÓN DE LAS CONCENTRACIONES DE LOS CONTAMINANTES
• Po cen aje en olumen (nº olúmenes del componen e especi ico en 100
olúmenes de ai e)
• ppm (mL/m3): 1ppm co esponde a un olumen de con aminan e po un
millón de olúmenes de ai e.
• Los mg/m3 p opo cionan la masa de con aminan e con enida en 1 m3 de
ai e.
CONTAMINANTES DERIVADOS DEL CARBONO
El ca bono p esen a un ciclo na u al en la a mos e a (Figu a 3). Exis en dos
gases en la a mos e a p oceden es de di e en es uen es na u ales que son el
monóxido de ca bono (CO) y el dióxido de ca bono (CO2). Además, po la
ac i idad del an opogénica exis e adicional de óxidos de ca bono al ciclo del
ca bono aunque dicho apo e es muy in e io al apo ado po las uen es
na u ales, pe o p esen a e ec os dañinos sob e los el medioambien e po al e a
las p opo ciones no males en la a mos e a. El CO p esen a di e sas uen es
na u ales, siendo la p ime a uen e la deg adación del me ano a mos é ico y la
segunda los océanos. Las uen es an opogénicas de deben undamen almen e
a la combus ión incomple a de compues os ca bonados o a la disociación del
CO2 en e o as causas.
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EVALUACIÓN DE IMPACTO AMBIENTAL
Hay dos sis emas de ges ión ambien al, la E aluación del Impac o Ambien al
(EIA), que es un p ocedimien o a p io i, que in en a e i a que se ponga en
ma cha una ac i idad que pueda p oduci e ec os pe judiciales sob e el
medioambien e e aluando los posibles e ec o que puede desencadena y el o o
sis ema son las Ecoaudi o ias, que son una a pos e io i, que e alúa una ez en
uncionamien o una ac i idad si es a se ajus a a la egulación y no ma i a
exigida en ma e ia medioambien al y p opone planes de mejo a de ges ión
medioambien al e i ando que pueda gene a algún daño sob e el
medioambien e.
La E aluación del Impac o Ambien al (EIA) es un p ocedimien o ju ídico-
adminis a i o de ecogida de in o mación, análisis y p edicción des inado a
an icipa , co egi y p e eni los posibles e ec os di ec os e indi ec os que la
ejecución de una de e minada ob a o p oyec o causa sob e el medio ambien e.
Pe mi iendo a la Adminis ación adop a las medidas adecuadas a su
p o ección.
La E aluación de Impac o Ambien al alo a á los e ec os di ec os e indi ec os
de cada p opues a de ac uación sob e la población humana, la auna, la lo a, la
gea, el suelo, el ai e, el agua, el clima, el paisaje y la es uc u a y unción de los
ecosis emas p e isiblemen e a ec ados.
La EIA se ige po el Real Dec e o-ley 9/2018, de 5 de diciemb e que modi ica
el RD Ley 21/2013, de 9 de diciemb e, según el cual debe án some e se a
E aluación de Impac o Ambien al cualquie ac uación, pública o p i ada,
consis en e en la ealización de las ob as, ins alaciones, planes y p og amas o
cualquie ac uación comp endida en el Anexo I de dicho dec e o po el
p ocedimien o o dina io.
Si la ac uación es á comp endida en el Anexo II, se debe á some e se a EIA po
p ocedimien o simpli icado apo ando el in o me de impac o ambien al. En el
anexo II es án ecogida odas las ac i idades que e ie e meno pelig osidad y
en el anexo I las más pelig osas. Las ac i idades pueden se las mismas, y en
esos casos la di e encia es iba en el olumen (cuan o más olumen de
p oducción, mayo pelig osidad).
En el RD Ley 21/2013, de 9 de diciemb e se es ablece a di e encia de
disposiciones an e io es que las ac i idades ecogidas en el anexo II debían de
pasa obliga o iamen e una EIA po el p ocedimien o simpli icado y además
- 49 -
que si el olumen de p oducción pa a una misma indus ia e adicada en
dis in as comunidades au ónomas que no pa a del olumen indicado en el
anexo II debía de pasa EIA po el p ocedimien o o dina io si a suma de odos
los olúmenes p oducidos en las di e en es comunidad au ónomas supe aba lo
especi icado en el anexo I.
El ó gano adminis a i o compe en e
Cuando se a e de p oyec os cuya epe cusión no sob epase el ámbi o
e i o ial de una Comunidad Au ónoma, el ó gano ambien al compe en e se á
el que de e mine la Comunidad Au ónoma.
Cuando un p oyec o pueda enga epe cusiones sob e el medio ambien e de
más de una Comunidad Au ónoma, debe á se au o izado o ap obado po la
Adminis ación Gene al del Es ado, siendo en es e caso el Minis e io de Medio
Ambien e el ó gano ambien al compe en e.
In o me
El in o me que se ealiza iene que se muy po meno izado. Debe inclui :
a) Desc ipción gene al del p oyec o y exigencias p e isibles en el iempo, en
elación con la u ilización del suelo y de o os ecu sos na u ales. Es imación de
los ipos y can idad de esiduos e idos y emisiones de ma e ia o ene gía
esul an es.
b) Una exposición de las p incipales al e na i as es udiadas y una jus i icación
de las p incipales azones de la solución adop ada, eniendo en cuen a los
e ec os ambien ales.
c) E aluación de los e ec os p e isibles di ec os o indi ec os del p oyec o sob e
la población, la auna, la lo a, el suelo, el ai e, el agua, los ac o es climá icos,
el paisaje y los bienes ma e iales, incluido el pa imonio his ó ico-a ís ico y el
a queológico.
d) Medidas p e is as pa a educi , elimina o compensa los e ec os
ambien ales signi ica i os.
e) P og ama de igilancia ambien al.
) Resumen del es udio y conclusiones en é minos ácilmen e comp ensibles.
In o me, en su caso, de las di icul ades in o ma i as o écnicas encon adas en
la elabo ación del p oyec o.
Decla ación de Impac o ambien al
Es el p onunciamien o del ó gano ambien al que de e mina á, a los solos e ec os
ambien ales, la con eniencia o no de ealiza el p oyec o y en su caso, ija á las
- 50 -
condiciones en que debe ealiza se, en o den a la p o ección del medio ambien e
y de los ecu sos na u ales, eniendo en cuen a a es e in las p e isiones
con enidas en los planes ambien ales igen es.
La Decla ación de Impac o Ambien al inclui á las conside aciones ap opiadas
pa a ealiza el seguimien o ambien al de la ejecución, desa ollo o
uncionamien o y, en su caso, clausu a de la ac uación e aluada, de
con o midad con el p og ama de igilancia, p esc ipciones de con ol o c i e ios
de seguimien o es ablecidos.
PROBLEMAS Y CUESTIONES
1. Indique cuál es la no ma i a ac ual po la que se ige la E aluación del
Impac o Ambien al.
2. Según es a no ma i a, ¿se puede es ablece una plan a pa a la elabo ación
p oduc os lác eos que se p e é que eciba más de 200 oneladas de leche/día
sin necesidad de ealiza una e aluación de impac o ambien al?. Razone la
espues a.
- 51 -
3. Se sabe que los abajado es de una indus ia es a expues os dia iamen e a
anilina en ni eles de 8,6 mg/m3, a n-bu ilme cap ano en ni eles de 4,5 mg/m3,
y a ácido ó mico en ni eles de 6 mg/m3 du an e oda la jo nada labo al (8
ho as). Indique si los abajado es es án expues os a ni eles supe io es a los
pe mi idos en el ambien e labo al, sabiendo que el máximo pa a es os ni eles
son de 2 ppm pa a la anilina, 0,5 ppm pa a el n-bu ilme cap ano y 5 ppm pa a
el ácido ó mico.
Pm anilina: 93,13
Pm n-bu ilme cap ano: 90,19
Pm ácido ó mico: 46,03
4. Pa a el ejemplo an e io , indica en aquellos compues os que supe en los
alo es pe mi idos, que posibles e ec os óxicos se pueden p oduci sob e los
abajado es expues os.
- 52 -
5. Ci a cinco cumb es sob e el cambio climá ico y el medio ambien e.
6. Ci a cinco c isis ambien ales mundiales y el luga en el que se p oduje on.
- 53 -
3.2. Ensayos de oxicidad. Modelos y
cálculos de índices de oxicidad.
INTRODUCCIÓN
En la mayo ía de los óxicos, la magni ud de la espues a biológica es á
elacionada con la dosis, po lo an o se puede de ini ma emá icamen e la
elación en e dosis y espues a.
Igualmen e, no odos los animales esponden igual an e la misma
exposición. Pa a ene p esen e es e hecho la elación dosis- espues a debe
con ene una medida de a iabilidad que e leje las medidas inhe en es en las
espues as espe adas en e los animales, como po ejemplo, las des iaciones
ípicas, el e o s anda d, e c.
La elación dosis- espues a que se aplica más comúnmen e es la DL50 que
se de ine como la dosis de sus ancia capaz de ma a al 50% de los indi iduos
que la han ecibido.
ENSAYOS DE TOXICIDAD
Los ensayos de oxicidad son es udios cuali a i os y cuan i a i os de los
e ec os noci os que pueden se ocasionados po cualquie agen e químico o
ísico sob e la es uc u a y la unción de los di e en es sis emas en el o ganismo.
Es os es udios esul an de g an impo ancia pa a e alua la segu idad de
di e en es compues os y p e eni posibles al e aciones que se puedan gene a
en el o ganismo.
Gene almen e, el p ime ensayo de oxicidad ealizado en un nue o
p oduc o es la oxicidad aguda, que se pueden de ini como los es udios
expe imen ales que pe mi en de e mina los e ec os noci os que pueden da se
en un co o pe iodo de iempo as la adminis ación de una única dosis de una
sus ancia, o de a ias dosis adminis adas en 24 ho as.
- 54 -
Los obje i os de las p uebas de oxicidad aguda son:
1) p opo ciona una es imación de la oxicidad in ínseca de la sus ancia,
exp esada como una dosis le al media (DL50) pa a su pos e io
clasi icación
(2) p opo ciona in o mación sob e los ó ganos diana y o as
mani es aciones clínicas de oxicidad,
(3) iden i ica las di e encias en e las especies y las especies suscep ibles,
(4) es ablece la e e sibilidad de la espues a óxica, y
(5) p opo ciona in o mación que ayude al diseño y a la selección de la
dosis pa a es udios a la go plazo (subc ónicos, c ónicos) (Casa e and
Doull Toxicology 2008)
En Toxicología, el é mino más ep esen a i o de la oxicidad aguda de
una sus ancia es la dosis le al 50 (DL50) de inido como la dosis de una sus ancia
que o igina la mue e al 50% de los animales que la han ecibido. Los alo es de
la DL50 son usados como un indicado gene al de la oxicidad aguda de una
sus ancia y se exp esan gene almen e en milig amos (mg) de sus ancia óxica
po kilog amo (kg), y lo más común es que el da o sea acompañado del animal
en el que se p obó ( a as, conejos, e c.).
La de e minación exac a de la mue e del 50 % de los animales empleados
o igina ia una pé dida de animales de expe imen ación eno me po lo que
ac ualmen e se emplean di e sos mé odos pa a su de e minación
MÉTODO DE REED-MUENCH
Es uno de los mé odos más sencillos. Puede ealiza se po p ocedimien os
g á icos o a i mé icos. Se emplean alo es acumula i os y los cálculos se
ealizan eniendo solo en cuen e los alo es p óximos al 50% de
le alidad/mo alidad, calculando la dis ancia p opo cional de los po cen ajes
de le alidad y el loga i mo del inc emen o de las dos dosis adyacen es al 50%
de le alidad.
- 55 -
Tomamos como ejemplo una dosis inicial de 50 mg/kg p.c., siendo las
dosis consecu i as, po an o de 100, 200 y 400 mg/kg p.c.
Dosis
mg/kg
p.c.
Valo es eales
Valo es acumula i os
To al (M+V)
acumula i os
% le alidad de
los alo es
acumula i os
M
V
M
V
50
0
10
0
(9+10)=19
(0+19)=19
0
100
2
8
(0+2)=2
(1+8)=9
(2+9)=11
18,18
200
9
1
(2+9)=11
(0+1)=1
(11+1)=12
91,66
400
10
0
(11+10)=21
0
(21+0)=21
100
A con inuación aplicamos la siguien e ó mula pa a el cálculo de la DL50:
Log DL50 = log dosis in e io + (B x log A)
Siendo A = dosis supe io /dosis in e io
B = 50 - % dosis in e io
% dosis supe io - % dosis in e io
En p ime luga buscamos el alo de B que es la dis ancia p opo cional
de po cen ajes con inuos al 50%. Es os po cen ajes, en es e caso se án 18,18 y
91,66 que co esponden a las dosis de 100 y 200 mg/kg p.c.
B = (
𝟓𝟎$𝟏𝟖,𝟏𝟖
)
𝟗𝟏,𝟔𝟔$𝟏𝟖,𝟏𝟖 =𝟑𝟏,𝟖𝟐
𝟕𝟑,𝟒𝟖 = 𝟎, 𝟒𝟑𝟑𝟎
A con inuación buscamos el loga i mo del inc emen o de dosis con iguas
al 50% de le alidad que en la ó mula co esponde con el loga i mo de A (log
A). Es as dosis co esponden en nues o ejemplo a 100 (dosis baja) y 200 mg/kg
p.c. (dosis al a).
𝑫𝒐𝒔𝒊𝒔4𝒎𝒂𝒚𝒐𝒓
𝑫𝒐𝒔𝒊𝒔4𝒎𝒆𝒏𝒐𝒓 =𝟐𝟎𝟎
𝟏𝟎𝟎 = 𝟐
= A log 2 = 0,3010 = log A
En ealidad lo que es amos buscando es el loga i mo del ac o de
p og esión que es el núme o que nos elaciona las dosis.
- 56 -
A con inuación mul iplicamos los dos alo es ob enidos y sumamos el
loga i mo de la dosis meno adyacen e al 50% de le alidad.
log 100 = 2,0000 (log dosis in e io )
+ 0,4330 x 0,3010 = 0,1303 + (B x log A)
2,1303 Log DL50
Po lo an o Log DL50 = 2,1303
Como el alo que nos in e esa es la dosis le al 50, no su loga i mo, en
úl imo luga buscamos el an iloga i mo del núme o esul an e y nos da á la
DL50.
An log 2,1303 = 134,9895 mg/kg = DL50
Median e es e mé odo no podemos calcula el e o es ánda ni ningún
o o pa áme o de a iabilidad.
La a ian e g á ica de es e mé odo nos pe mi e calcula de una mane a
ápida la DL50 ap oximada de un compues o. Se ep esen an en abscisas las
dosis y en o denadas po una pa e la supe i encia acumula i a y po o a
pa e la mo andad acumula i a. Son dos cu as que se co an en un pun o que
es la DL50.
- 57 -
MÉTODO DE MILLER Y TAINTER
Es e mé odo es hoy en día uno de los más u ilizados a la ho a de es udia
cualquie elación dosis- espues a, y en Toxicología la elación dosis- espues a
más u ilizada o es udiada es la elación dosis-po cen aje de mo andad,
de e minando así la DL50. Las azones po las que se ha plan eado es e mé odo
g á ico-ma emá ico, son las siguien es:
Como hemos is o al p incipio de ealiza es udios de de e minación de
la DL50 (po ejemplo, el mé odo de Reed-Muench), se enían ep esen ando en
una g á ica u ilizando papel milime ado, donde en o denadas se ep esen aba
el % de le alidad y en abcisas la dosis, y así ob enían una cu a análoga a la de
la cu a de Gauss; es a cu a iene o ma sigmoidea asimé ica.
Cu a dosis- espues a sin ninguna ans o mación
Tomada de Toxicología de los alimen os, 2000. P. Valle y B.L. Flo en ino
Es o es debido a que el aumen o de mo alidad no iene dado en la misma
p opo ción que el aumen o de la dosis. Así un aumen o de la mo alidad en un
10% pa a pasa po ejemplo del 30% al 40%, se p oduce solamen e cuando los
es ímulos, en es e caso la dosis del óxico, aumen an en una p opo ción
cons an e y no en una can idad igual.
- 64 -
El cálculo del e o s anda d se ía en es e caso:
E.S. = = 16,13
Po lo an o la DL50 se ía igual a 130 ± 16,13 mg/kg
MÉTODO DE KARBER
Es un mé odo a i mé ico y en él se emplea el in e alo medio del núme o
de mue es en cada g upo de animales y la di e encia en e dosis pa a el mismo
in e alo. La DL50 se ob iene al es a de la dosis capaz de o igina la mue e en
odos los animales empleados un cocien e que es a á o mado po la suma de
p oduc os de di e encias pa ida po el núme o de animales de cada g upo.
LOTES
1
2
3
4
Dosis (mg/kg p.c.)
50
100
200
400
Nº animales
10
10
10
10
Nº de mue os
0
2
9
10
A (Di e encia en e dosis)
50
100
200
B (Di e encia media en e
mue os)
1
5,5
9,5
P oduc o A x B
50
550
1900
Suma del p oduc o A x B
2500
40
88190 -
- 65 -
CÁLCULO
Dosis capaz de o igina la mue e de un 100% de los animales = 400 mg/kg p.c.
DL50 = 400 -
𝑺𝒖𝒎𝒂4𝒑𝒓𝒐𝒅𝒖𝒄𝒕𝒐𝑨4𝒙𝑩4
𝑵º4𝒂𝒏𝒊𝒎𝒂𝒍𝒆𝒔4𝒑𝒐𝒓4𝒍𝒐𝒕𝒆4
= 400 -
𝟐𝟓𝟎𝟎
𝟏𝟎
= 150 mg/kg p.c.
MÉTODO DE DOSIS FIJA
El mé odo de dosis ija se lle a a cabo en a as en dos ases:
En la p ime a se ealiza un es udio p elimina , in es igando de mane a
secuencial los e ec os de a ias dosis adminis adas po ía o al a a as de un
solo sexo (machos o hemb as). El es udio p elimina p opo ciona in o mación
ace ca de la elación en e dosis y oxicidad, así como una es imación de la dosis
le al mínima (DL01). No suelen u iliza se más de 1 animal po dosis en es a
p ime a ase.
- 66 -
En el es udio p incipal, se adminis a a a as la sus ancia po ía o al a
g upos de 5 animales del mismo sexo, en las dosis p e-es ablecidos (5, 50, 500 o
2000 mg/kg p.c.). La dosis u ilizada en p ime luga se á aquella de e minada
median e el es udio p elimina capaz de p oduci “ oxicidad mani ies a”, pe o
sin apa ece le alidad alguna.
Una ez adminis ada la sus ancia se ealizan obse aciones sob e sus
posibles e ec os óxicos. En caso de que la dosis inicial elegida p oduzca una
oxicidad mani ies a, pe o no la mue e, no se á p eciso ealiza o as p uebas
o ensayos.
En caso de que el ni el de dosis elegido no p oduzca oxicidad mani ies a,
se debe á ol e a adminis a la sus ancia al ni el de dosis inmedia amen e
supe io . Si los animales mue en, o si es p eciso sac i ica los debido a una ue e
eacción óxica en los mismos, se debe á ol e a adminis a la sus ancia al
ni el de dosis inmedia amen e in e io .
Es e p ocedimien o pe mi e la iden i icación de la “dosis disc iminan e”,
que es la mayo de las dosis p e-es ablecidas que se puede adminis a sin que
- 67 -
o igine la mue e de los animales (incluyendo el sac i icio de los animales po
mani es aciones óxicas isibles).
DOSIS
RESULTADOS
INTERPRETACIÓN
5 mg/kg p.c.
Supe i encia de menos
del 100%
Compues os que son
MUY TÓXICOS
Supe i encia del 100%
pe o oxicidad mani ies a
Compues os que son
TÓXICOS
Supe i encia del 100% sin
oxicidad mani ies a
Véanse los esul ados
con 50 mg/kg
50 mg/kg
Supe i encia de menos
del 100%
Compues os que
pueden se TÓXICOS o
MUY TÓXICOS. Véanse
los esul ados pa a 5
mg/kg
Supe i encia del 100%
pe o oxicidad mani ies a
Compues os que son
NOCIVOS
Supe i encia del 100% sin
oxicidad mani ies a
Véanse los esul ados
pa a 500 mg/kg
500 mg/kg
Supe i encia de menos
del 100%
Compues os que
pueden se TÓXICOS o
NOCIVOS. Véanse los
esul ados pa a 50
mg/kg
Supe i encia del 100%
pe o oxicidad mani ies a
Compues os que se
conside a que no ienen
oxicidad mani ies a
aguda signi ica i a
Supe i encia del 100% sin
oxicidad mani ies a
Veanse los esul ados
pa a 2000 mg/kg
2000 mg/kg
Supe i encia de menos
del 100%
Veanse los esul ados
pa a 500 mg/kg
Supe i encia del 100%,
con o sin oxicidad
mani ies a
Compues os que no
ienen una oxicidad
aguda signi ica i a
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PROBLEMAS Y CUESTIONES
- Calcula la dosis le al 50 po el mé odo de Reed y Muench y po el mé odo de
Mille y Tain e con los siguien es da os:
Dosis mg/kg p.c.
Valo es eales
Mue os
Vi os
40
0
10
80
2
8
160
7
3
320
10
0
- 69 -
- 70 -
3.3. Fuen es de In o mación en Toxicología.
Bases de Da os.
Con el su gimien o de In e ne se ha acili ado el acceso g a ui o a la
in o mación pa a oda la población. Sin emba go, no oda la in o mación
p esen e en la ed es e az y obje i a po lo que hay que es necesa io sabe
disce ni qué in o mación lo es de la que no lo es. Pa a ello es necesa io ecu i
a páginas o iciales de o ganismos in e nacionales que publican en sus webs
in o mación con as ada y e isada po pa es. En es e sen ido, los es udian es
de oxicología y oxicólogos deben de pode dis ingui en e los di e en es ipos
de uen es de in o mación oxicológica, su localización, in e p e ación y manejo
den o de las á eas oxicológicas ( egulado a, ocupacional, indus ial, clínica,
expe imen al, ambien al, e c).
Pa a acili a el ap endizaje y acceso a la in o mación oxicológica a ios
P o eso es del Á ea de Toxicología de la Uni e sidad de Se illa y del Ins i u o
Nacional de Toxicología de Se illa (Repe o G, Mo eno IM, del Peso A, Repe o
M, Cameán AM) desa olla on una he amien a web denominada
“BUSCATOX” en el cual se ag upan las p incipales webs elacionadas con la
oxicología en sus di e en es ámbi os pe mi iendo una búsqueda ágil y sencilla
de la in o mación oxicológica en di e sas páginas que o ecen dicha
in o mación e az de o ma g a ui a.
En dicha web exis e un menú con di e en es subapa ados en los que podemos
encon a la in o mación oxicológica en los di e en es ámbi os. Así
encon amos un apa ado de Da os oxicológicos donde se localizan webs que
p opo cionan in o mación oxicológica gene al, como po ejemplo Inchem que
publican monog a ías de los compues os óxicos es udiados o como la web
Pubchem que es una base de da os ges ionada po la Biblio eca Nacional de
Medicina no eame icana que p opo ciona in o mación sob e es uc u as
químicas, iden i icado es, p opiedades químicas y ísicas, ac i idades
biológicas, pa en es, salud, segu idad, da os de oxicidad en e o os.
O o apa ado es el de publicaciones donde se encuen a el p incipal buscado
a ni el mundial que es PubMed que es una base de da os ges ionada po la
Biblio eca Nacional de Medicina no eame icana que publica los abajos
cien í icos publicados en las e is as cien í icas. Dicha in o mación es una
in o mación muy especí ica que necesi a de uso de palab as cla e pa a localiza
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exac amen e aquello que se es á buscando y el uso de comandos de inclusión o
exclusión.
También podemos encon a un apa ado de Segu idad química y Ocupacional.
Aquí podemos encon a las Fichas In e nacionales de Segu idad Química
(FISQ) que ecogen in o mación esencial de segu idad y salud de sus ancias
químicas con as ada po un g upo de abajo a ni el in e nacional. También
podemos encon a la web del Ins i u o Nacional de Segu idad y Salud en el
abajo que publica los Valo es Lími es de Exposición (VLAs) de exposición
labo al po debajo de los cuales los abajado es es án p o egidos du an e la
jo nada labo al aunque se p oduzca una exposición du an e odos los años de
abajo. Además hay o as web in e nacionales que ambién publican sus
alo es limi es en o o as.
O o subapa ado es Geno oxicidad y Ca cinogenicidad donde se p esen a el
enlace a Webs que p esen an in o macion especi ica en es e ámbi o como la de
la Agencia In e nacional Pa a la E aluación del Cánce (IARC) que publica
monog a ías de los es udios ealizados sob e dis in as sus ancias y clasi ica las
sus ancias según los es udios ealizados en ca cinógenos pa a el homb e o su
p obabilidad de que así lo sean.
Tenemos o os subapa ados como Medicamen os donde se ubican las
p incipales webs elacionadas con la in o mación Fá macos como po ejemplo
la Agencia Española del Medicamen o y P oduc os Sani a ios (AEMPS),
Agencia Eu opea del Medicamen o (EMA) o la Agencia Ame icana de
alimen os y medicamen os (FDA). También con amos con o os subapa ados
como Alimen os, done se ag upan las p incipales páginas que ecogen
in o mación elacionada con la segu idad de los alimen os como el Codex
Alimen a ius, el Comi é Mix o FAO/OMS de Expe os en Adi i os
Alimen a ios (JECFA), la Agencia Española de Segu idad Alimen a ia y
Ni ación (AECOSAN), la Agencia eu opea de Segu idad Alimen a ia (EFSA)
en e o as p esen ando los limi es máximo de esiduos (LMRs).
Además enemos un subapa ado de e aluación del iesgo donde podemos
encon a Webs que p opo cionan in o mación pa a pode ealiza es a como
puede se la Agencia no eame icana de sus ancias Toxicas y Regis o de
En e medades (ATSDR) que publica los ni eles mínimos de iesgo (MRLs).
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PROBLEMAS Y CUESTIONES
1) Pa a los ensayos de geno oxicidad de un p oduc o a base de plan as exis e
un documen o guía de ensayos no clínicos. ¿Cuál es el es in i o indicado
en el p ime paso pa a su e aluación?
2) Consul ando el documen o guía pa a e alua la oxicidad as dosis
epe idas, con es a a las siguien es p egun as;
a) ¿Qué ejidos deben examina se pa a el es udio ana omo-pa ológico?
b) ¿en cuán os de los animales u ilizados deben ealiza se es os es udios?
3) ¿Cómo es án clasi icadas las siguien es sus ancias po IARC y cuáles son
sus p incipales ó ganos diana pa a aquellos clasi icados como 1?
SUSTANCIA
CLASIFICACIÓN
IARC
ÓRGANO/S
DIANA
ARSÉNICO
ACRILAMIDA
METILEUGENOL
CAFEÍNA
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4) ¿Dónde se puede encon a in o mación sob e el alo LMR del plaguicida
Clo pi i os en p oduc os ag ícolas de la Unión Eu opea? Que ni eles son
más es ic i os, ¿en manda inas o manzanas? y del más es ic i o, ¿cuál
ha sido su e olución?
5) ¿Dónde podemos encon a las di ec ices sob e las opciones pa a la
ges ión de iesgos en elación a los esul ados de la e aluación de iesgos?
6) Que can idad de ho monas puede con ene la ca ne des inada a consumo
humano en la UE? ¿Qué Di ec i a lo e leja?
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Embalaje
• In e io
o P ima io: en ase de plás ico, de osca, ce ando de o ma. Si la mues a
es co osi a o puede queda adso bida en las pa edes del plás ico, no se
oma en es e ma e ial, sino que se oma en id io. Cada mues a debe
en ia se p ecin ada, ce ada, con núme o de e e encia, con echa y ho a
de ecogida, nomb e o iden i icación y i ma de la pe sona que ecoge la
mues a, especi icando lo que con ienen y el pacien e al que pe enecen.
o Secunda io: saco de plás ico con cie e he mé ico. Debe lle a ma e ial
abso ben e po si se p oduce un de ame.
• Ex e io
o Se emplea una ne e a. Siemp e asumimos que necesi an e ige ación.
Algo muy impo an e es solo pone mues a de 1 indi iduo po ne e a,
pa a que no se mezclen las mues as. Deben lle a e ique as que lo
iden i iquen
o Se p oduce la e ige ación (al ededo del embalaje secunda io). El
embalaje puede se he mé ico con e ige ación con igolines o con
salida de CO2 y e ige ación po hielo seco.
o En el ex e io se deben de pega las e ique as que deben iden i ica el ipo
de sus ancia que con iene el en ío y las ca ac e ís icas de manejo siendo
de ma e iales pe du ables, legibles y isibles.
Recepción de mues as en el labo a o io
Una ez que se eciben las mues as en el labo a o io se debe de man ene la
cadena de cus odia pa a ello se deben de segui los siguien es pasos:
1. Recibi las mues as y ellena la hoja de cus odia ano ando:
- Nomb e de la pe sona que en ega la mues a
- Nomb e de la pe sona que ecibe la mues a
- Fecha y ho a de en ega
- Emp esa que ealiza el anspo e (si p ocede)
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2. Comp oba el núme o de e e encia de cada mues a y compa a lo con el
o mula io en iado
-Ano a disc epancias, si exis en
3. Comp oba que odas las mues as es én bien empaque adas y que los
p ecin os es én ín eg os
-Ano a disc epancias, si exis en
4. Al ab i los ecipien es, bolsas, e c. que con ienen las mues as comp oba
que la iden i icación y desc ipción son co ec as
5. Fo og a ia las mues as y ano a su es ado de conse ación
Almacenamien o de las mues as
Si las mues as no pueden se p ocesadas en el momen o de en ega, que
es lo más habi ual, es necesa io ealiza un almacenamien o adecuado de las
mismas pa a e i a que es as se puedan descompone .
Los p incipales ac o es que pueden p oduci descomposición química y
biológica son:
o Luz: Muchos compues os químicos son o olábiles, es deci , la luz los
deg ada. Es a asunción hay que asumi la siemp e, a ando de que las
mues as no es én expues as a la luz. Po lo an o, hay que u iliza ascos no
anspa en es de colo opacio o en uel os con papel de aluminio
undamen almen e en mues as de luidos bilógicos anspa en es como la
o ina. Los alcaloides del co nezuelo de cen eno y las eno iacinas son
o olábiles.
o Hid olisis: Los óxicos ipos és e como los anes ésicos locales son
hid olizados a empe a u a ambien e e incluso a empe a u as bajas po la
acción de es e asas de sang e y ejidos. El pH alcalino a o ece la hid ólisis.
Pa a e i a los se añaden inhibido es de es e asas como luo u o sódico o
acidi ica las mues as has a pH 4.
o Tempe a u a: 4ºC pa a la conse ación y -20ºC pa a el almacenamien o. Solo
se descongela una ez, ya que si no se deg ada la mues a. Se di idi á en
di e en es acciones.
o Oxidación: La oxidación se puede p e eni educiendo al mínimo la can idad
de oxígeno en los ecipien es llenándolos al máximo y ce ándolos
he mé icamen e. Se pueden adiciona an ioxidan es (aunque es o puede
educi los me aboli os oxidados de algunos óxicos a sus p oduc os
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o iginales). También in luye la empe a u a y el pH, así enemos que lo
compues os enólicos se oxidan a 4ºC y los que con ienen azu e son oxidados
en medio alcalino. Los iones me álicos ac úan como ca alizado es. Su e ec o
puede disminui se adicionando una p o eína a la que se unan y dejen de
ac ua (p. ej. se oalbúmina bo ina).
o Descomposición biológica: se descomponen componen es de la mues a
dando luga a la o mación de o as sus ancias nue as (como el alcohol). Pa a
e i a la y ob ene un esul ado más iable, se di ide la mues a en dos: una
pa e sin nada, y la o a con conse an es.
O o ac o que puede al e a la composición de la mues a es la
con aminación. Consis e en el paso a la mues a de compues os o mados
du an e la pu e acción o de los componen es de los en ases.
o Ejemplo de pu e acción: Apa ece ene ilamina y se puede con undi con la
me an e amina. También se p oduce i amina y ip ó ano.
o Ejemplo de con aminación po componen es de los en ases: Plas i ican e
ipo ala os de los en ases o los apones.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Una ez ealizado los análisis sob e las mues as, podemos llega a
iden i ica y cuan i ica el oxico p esen e en la mues a. Sin emba go, en muchos
de los casos no es posible la de ección del oxico en la mues a po di e sas
causas como pueden se :
1. De ec os del mé odo analí ico
2. Descomposición del oxico du an e el almacenamien o
3. Que el oxico se haya eliminado an es de p oduci se los e ec os y
ecoge se la mues a
En el caso de que podamos iden i ica y cuan i ica el oxico p esen e, puede
ocu i que los da os ob enidos no sean exac os debido a:
1. Insu icien e sopo e es adís ico
2. Di e encias in a- e in e indi iduales
3. In e acciones en e óxicos
4. Di e encias de sensibilidad y exac i ud de las écnicas analí icas
empleadas
5. Di e encias en e los alo es de concen aciones oxicas en las dis in as
mues as
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PROBLEMAS Y CUESTIONES
1. Se debe de elabo a un caso de p ác ico de una in oxicación en la que el
alumno indique la his o ia clínica y oda aquella in o mación necesa ia pa a
de e mina que posible oxico la ha o iginado, indica que mues as se han
omado jus i icadamen e, como se han empaque ado y en iado y almacenado.
Indica como se ha man enido la cadena de cus odia paso a paso, y ellena el
o mula io especí ico pa a en ia al INTCF.
(Desca ga los PDF de los o mula ios del INTCF, apa ado de documen ación)