L'istruzione strutturale e la caratterizzazione di nuovi sistemi di trasporto legati a membrane

Popolo di Spitzenberger

Dott. sc. hum. Structural understanding and characterization of novel, membrane-bound transport systems. nato il 18 gennaio 1970 a Hildesheim, test di maturità il 29 maggio 1989 a Hildesheim, studioso della facoltà di chimica dal WS 1989/90 al WS 1994/95, laureato il 24 ottobre 1991 all'Università di Hannover, laureato il 25 ottobre 1994 all'Università di Hannover, dottorato di ricerca: farmacologia.

Il presente lavoro ha condotto, sulla base dei dati di sequenza dei trasportatori OCT1 e OCT2 a livello molecolare, la struttura e la caratterizzazione di nuove proteine di trasporto putative, i cui disegni cDNA sono stati isolati da tessuti renali umani e ratti.

In primo luogo, una ricerca condotta dalla banca dati TIGR Humanen cDNA ha consentito di identificare un

La sezione EST, che, a causa di un'omologia significativa con l'OCT2 come frammento del cDNA,

Un piano di costruzione di un sistema di trasporto umano corrispondente è stato elaborato.

l'ibridazione specifica dell'acido nucleico è stata una biblioteca di cDNA di cellule Caki-1.

Le cellule adenocarcinometiche renali, come le cellule adenocarcinometiche umane, sono state campionate per l'intera sequenza di nucleotidi.

cDNA isolato (2192 bp) contiene l'area completa di codifica di una proteina che

Aminoacidi (

UT2h

La sequenza di informazioni appena ottenuta è stata utilizzata per

con compresse di consenso degenerate nella reazione a catena della polimerasi un omologo

La clonazione del tessuto ratto è stata utilizzata per amplificare il cDNA del tessuto ratto.

L'obiettivo è quello di sviluppare una più ampia caratterizzazione del gene, ad esempio la distribuzione dei tessuti.

per la clonazione UT2h è riuscita l'isolamento di una sequenza di cDNA,

Il clone è stato modificato in modo da ridurre l'esistenza di una serie di problemi di trasformazione.

Il clone completo (3029 bp) contiene l'area codificante di una proteina che comprende 557 aminoacidi (UT2r). UT2h e UT2r sono strettamente omologhi, probabilmente ortologici.

L'analisi dell'idropatia ha rilevato che UT2h e UT2r sono proteine di membrana integrale con

12 transmembrandomani

Questa caratteristica mostra che

a una funzione di trasporto

L'analisi della sequenza consente di classificare UT2h e UT2r nella superfamiglia dei uni, dei sintomi e degli antiportatori (MFS), come definito da Marger e Saier (1993).

L'UT2r-mRNA ha mostrato una distribuzione ubiquita con notevoli potenze di espressione nei reni e nelle testicoli, e questo modello di distribuzione tissutale non esiste fino ad ora in nessuna delle proteine di trasporto renale omologhe a UT2 e apre potenziali connessioni transorganiche in questo gruppo di trasportatori.

L'esame funzionale di UT2h e UT2r ha rilevato trasfezioni transitori di

HEK 293 cellule

Fino ad ora nessun indizio di trasporto per una serie di cationi organici

e anioni a base di sostanze classiche come tetraetillammonio, N-methylphenylpyridinium

L'esperimento di un'eccessiva espressione costitutiva delle proteine

Un approfondimento della comprensione funzionale e regolamentare dell'UT2h e dell'UT2r è legato a una futura modifica o sviluppo dei parametri di espressione genica e di localizzazione dei tessuti studiati.