Éclaircissement structurel et caractérisation des nouveaux systèmes de transport liés à la membrane
Le peuple de Spitzenberger
Dr. sc. hum. Découverte structurelle et caractérisation de nouveaux systèmes de transport liés à la membrane né le 18 janvier 1970 à Hildesheim test de maturité le 29 mai 1989 à Hildesheim diplôme d'études supérieures en chimie du WS 1989/90 au WS 1994/95 diplôme d'études supérieures du 24 octobre 1991 à l'Université de Hanovre diplôme du 25 octobre 1994 à l'Université de Hanovre doctorat en pharmacologie père: Prof. Dr. med. E. Schömig Les reins contiennent de nombreuses protéines de transport membraniques impliquées dans la translocation de diverses substances polaires, dont les cations et les anions organiques.
Dans le cadre du présent travail, la structure et la caractérisation des nouvelles protéines de transport putatives ont été éclairées et caractérisées sur la base des données de séquences des transporteurs moléculaires éclairés pour les cations organiques OCT1 et OCT2, dont les plans cDNA ont été isolés à partir de tissus rénaux humains et rats.
Une première recherche menée par la base de données de l'ADN humain TIGR a permis d'identifier un
Une partie de l'EST qui, en raison d'une homologie significative avec l'OCT2 en tant que fragment de l'ADN c
Un plan de construction d'un système de transport humain correspondant a été défini.
L'hybridation spécifique de l'acide nucléaire est devenue une bibliothèque d'ADN caki-1
Les cellules adénocarcinées rénales (humaines) ont été échantillonnées jusqu'à la séquence nucléotide complète.
cDNA isolé (2192 bp) contient la zone de codage complète d'une protéine qui
Comprend les acides aminés (
UT2h
Les données de séquence recueillies ont été utilisées pour
En utilisant des compresseurs de consensus dégénérés dans la réaction en chaîne de la polymérase, un homologue
La clonation à partir de tissus de rats a été utilisée pour l'amplification d'une section d'ADN provenant des tissus de rats.
Il s'agit d'une approche plus complète de la caractérisation du gène, par exemple de la répartition des tissus.
La clonage UT2h a permis d'isoler une séquence de cDNA dont les cadres de lecture
Environ 10% de l'ensemble de l'espace de traduction prévu du clone manquait.
Le clone complet (3029 bp) contient la zone codante d'une protéine comprenant 557 acides aminés (UT2r). UT2h et UT2r sont strictement homologues, probablement orthologues.
L'analyse de l'hydropathie a révélé que UT2h et UT2r sont des protéines membranaires intégrées
12 générations transmembrantaires
Cette caractéristique démontre
à une fonction de transport
L'analyse de la séquence permet de classer UT2h et UT2r dans la superfamille des unités, des signaux et des antiporteurs (MFS), telle qu'elle a été définie par Marger et Saier (1993).
UT2r mRNA a montré une distribution omniprésente avec des capacités d'expression nettes dans les reins et les testicules. Ce modèle de distribution tissulaire n'existe jusqu'à présent dans aucun des homologues de UT2, les protéines de transport rénaux, et ouvre des liens potentiels entre les organes dans ce groupe de transporteurs.
L' examination fonctionnelle de UT2h et UT2r a révélé que, dans le cas d' une transfection transitoire,
HEK 293 cellules
Jusqu'à présent, aucun indice de transport pour une série de cations organiques
et anions à base de substrats classiques tels que le tétraétylammonium, le N-méthylphénylpyridinium
L'expérience de l'expression constitutive des protéines
L'amélioration de la compréhension fonctionnelle et réglementaire de l'UT2h et de l'UT2r est liée à la modification ou à l'amélioration des paramètres d'expression des gènes et de localisation tissulaire étudiés jusqu'à présent.