Validazione di metodi citogenetici molecolari per il rilevamento di alterazioni cromosomiche nella leucemia linfatica acuta (ALL)

Ulrike Rita Mathieu

Dott. sc. hum. Validazione di metodi citogenetici molecolari per la rilevazione di alterazioni cromosomiche nella leucemia linfatica acuta (ALL) nato il 04.04.65 a Heidelberg esame di maturità del 23.06.1984 presso l'Oberwald-GymnasiumWald-Michelbach corso di studio della facoltà di biologia dal 1985/86 al 1991/92

L'ibridazione fluorescente in situ (FISH) con sonde di DNA selezionate consente di

La prova del DNA genomico sui cromosomi metafase e nei nuclei interfase di

ALL. Nel corso di questo lavoro è stata stabilita e validata una serie di sonde di DNA per la citogenetica di interfase. Per due alterazioni strutturali cromosomiche riguardanti le regioni cromosomiche 19p13 (locuso TCF-3) e 9p21 (gen CDKN2) sono stati composti diversi gruppi di DNA. Mentre il potenziale diagnostico di traslocazione t(1;19) q23;p13) è stato stabilito su una linea cellulare, una sonda specifica (cosp16) sul cromosoma 9p21 è stata applicata con successo al materiale del paziente.

La rilevazione delle iperdiploidi che si verificano in ALL è stata condotta in 40 casi ALL con una selezione di campioni di DNA in uno studio quantitativo. I campioni di DNA sono stati selezionati in base alla frequenza dei cromosomi alterati numericamente. Sei campioni alfoidi, specifici per i cromosomi 4, 10, 17, 18, 22 e X, e due campioni di cosmici specifici per i cromosomi 14 e 21 sono stati composti per questo approccio.

I risultati dello studio interfase sono stati raccolti con i dati dell'analisi di bandaggio in

Una di queste

Studio a cieco

15 provati con l'analisi della fascia

I casi di iperdiploidi sono stati 11 con la citogenetica di interfase anche considerati iperdiploidi.

Questi risultati indicano che la percentuale di sondaggi dovrebbe essere notevolmente aumentata,

L'obiettivo è quello di individuare tutte le aberrazioni. Questo sforzo sembra essere giustificato in futuro solo con l'introduzione di un metodo di conteggio automatico, che potrebbe essere applicato in alternativa all'analisi di fasciazione precedente.

Per l'analisi CGH, che utilizza in un esperimento le sottorepresentazioni e le sovrepresentazioni

I dati relativi ai materiali cromosomici possono essere rilevati, ci sono stati due sistemi di valutazione

La rilevazione di più di 46

I cromosomi sono stati possibili in 13 dei 16 casi, in tre casi con un set di cromosomi tetraploidici, a causa della limitazione di questa tecnica non è stato possibile fornire alcuna prova di un set di cromosomi iperdiploidici. Per catturare con la massima precisione i cambiamenti cromosomici in ALL, è necessaria una combinazione delle tecniche descritte.