Validación de métodos molecular-citogenéticos para detectar cambios cromosómicos en leucemia linfática aguda (ALL)

Ulrike Rita Mathieu-Strauss

Dr. sc. hum. Validación de métodos molecular-citogenéticos para la detección de cambios cromosómicos en leucemia linfática aguda (ALL) Nacido el 04.04.65 en Heidelberg Prueba de madurez el 23.06.1984 en el Oberwald-GymnasiumWald-Michelbach Curso de estudios de la Facultad de Biología de 1985/86 a 1991/92.

La hibridación fluorescente in situ (FISH) con sondas de ADN seleccionadas permite que la

Prueba de ADN genómico en metapasecromosomas y en núcleos de interfase de

ALL. Durante este trabajo, se estableció y validó una serie de sondas de ADN para la citogenética de interfase. Para dos cambios estructurales cromosómicos que afectaron a las regiones cromosómicas 19p13 (loco TCF-3) y 9p21 (gen CDKN2) se compusieron diferentes ensayos de ADN. Mientras que se estableció el potencial diagnóstico de la translocación t ((1;19) ((q23;p13) en una línea celular, una sonda específica (cosp16) en el cromosoma 9p21 se aplicó con éxito a los pacientes. Durante este trabajo se encontró que una deleción del gen CDKN2 en 9p21 en T-ALL es muy frecuente (6/7 casos, 86%) en casos raros de BALL (1/23), en cambio, 4%.

La detección de las hiperdiploidias ocurridas en la ALL se realizó en 40 casos de ALL con un conjunto de sondas de ADN seleccionadas en un estudio cuantitativo. Las sondas de ADN se seleccionaron según la frecuencia de los cromosomas alterados numéricamente. Se compusieron seis sondas alfoides, específicas para los cromosomas 4, 10, 17, 18, 22 y X, y dos cosmidas, específicas para los cromosomas 14 y 21, para este enfoque. Se demostró que con las técnicas actuales de análisis de la evolución de una zarbogenética de interfase, en la que se evalúan más de 200 sondas, se utiliza un enfoque multicolor con más de tres sondas de ADN.

Los resultados del estudio interfase se combinaron con los datos del análisis de bandaje en

una de las

Estudio ciego

Los resultados obtenidos en el análisis de la banda de banda fueron muy positivos.

los casos de hiperdiploides fueron 11 con la citogenética de la interfase también como hiperdiploides

Estos resultados muestran que el número de sondas debe aumentar significativamente,

Este esfuerzo sólo parece ser justificado en el futuro con la introducción de un método de conteo automático que podría aplicarse como una alternativa al análisis de bandaje anterior.

Para el análisis de la CGH, en un experimento se utilizan sub- y superrepresentaciones.

los materiales cromosómicos pueden ser detectados, existen dos sistemas de evaluación

La detección de más de 46

Los cromosomas fueron posibles en 13 de 16 casos, en tres casos con un conjunto de cromosomas tetraploides, debido a la limitación de esta técnica, no se pudo demostrar un conjunto de cromosomas hiperdiploides. Para capturar con la mayor exactitud posible los cambios cromosómicos en ALL, se requiere una combinación de las técnicas descritas.