Risposte qualitative e quantitative alla catena di polimerasi da campioni di sangue e di liquore di pazienti infetti da HIV-1 alla diagnosi di encefalitis HCMV

Nils Lynen

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Sulla base di un collettivo di pazienti composto da 17 pazienti in fase di AIDS e una

Collettivo di controllo di 12 pazienti immunocompetenti con altri disturbi neurologici

Per quanto riguarda le malattie, abbiamo studiato l'efficacia della PCR nel diagnosi di HCMV.

Encephalitis: 5 pazienti affetti da AIDS hanno ricevuto un'autovalutazione HCMV.

Tutti i campioni di sangue e di alcol analizzati erano pre-morte.

I campioni di HCMV sono stati rilevati in tutti i campioni esaminati, mentre nel liquore di tutti i pazienti affetti da AIDS e in 5 dei 12 pazienti immunocompetenti è stato possibile rilevare HCMV DNA. La frequenza di rilevamento di HCMV DNA in pazienti immunologici o latentemente infetti ha mostrato che la rilevazione di HCMV DNA puramente qualitativa non ha permesso di concludere una malattia manifesta.

Per distinguere un'encefalite latente da un'encefalite HCMV manifesta, abbiamo studiato

I campioni vengono ripreso con un protocollo di PCR semi-quantitativo,

Per questo non si è verificato alcuna differenza statisticamente significativa tra l'infezione virale media di pazienti con encefalite HCMV e di pazienti senza encefalite HCMV, poiché pochi campioni di sangue di pazienti con encefalite HCMV verificati sono stati esaminati. Tuttavia, è stato osservato come tendenza che i pazienti con encefalite HCMV verificata hanno avuto una media significativa di infezione virale di 14 pazienti senza encefalite HCMV rispetto a quelli senza encefalite HCMV, mentre i pazienti con encefalite HCMV verificati hanno avuto una media significativa di infezione virale di 105 pazienti senza encefalite HCMV.

I campioni di alcool contenuti in pazienti con encefalite HCMV autotestata

La media di carico del virus è stata di 3.558 per 105 cellule (1.667-5.333, mediano = 3.333). Ciò ha significativamente superato l' carico del virus sia nei pazienti affetti da AIDS senza il sospetto di encefalite HCMV per i quali è stata calcolata una media di carico del virus di 295/ 105 cellule (9-1.000, mediano = 281, p< 0.01) sia nei pazienti immunocompetenti con una media di carico del virus di 52/ 105 cellule (0-562, mediano = 19, p< 0.01).

Per stabilire una procedura di screening di routine rapida e sicura dalla contaminazione

Abbiamo esaminato di nuovo 14 campioni di alcol con un singolo PCR modificato, con un "cut off" del limite di prova per 500 copie virali su 105 cellule, che dovrebbe impedire il rilevamento di campioni di alcol latentemente infetti.

Entrambi avevano precedentemente mostrato un elevato carico virale anche nella PCR quantitativa. In nessun dei 5 pazienti seronegativi è stato possibile verificare il DNA HCMV con questo metodo. Il PCR singolo si è quindi rivelato idoneo in gruppi più grandi di pazienti per lo screening di routine e la diagnosi di pazienti a rischio elevato di malattia HCMV. Per confermare il PCR singolo e determinare la portata di una malattia HCMV, in ogni caso, un PCR quantitativo dovrebbe essere collegato. Nel corso di una terapia antivirale, il carico virale può essere utilizzato come marcatore sostitutivo per l'applicazione della terapia e per identificare precocemente lo sviluppo di resistenza a farmaci antivirali.