Réaction qualitative et quantitative de la chaîne de polymérase provenant d'échantillons de sang et d'alcool de patients infectés par le VIH-1 au diagnostic d'encéphalitis HCMV
Nils Lynen
Dr. Médecin Réaction qualitative et quantitative aux chaînes de polymère à partir de l'échantillon de sang et de liquor de patients infectés par le VIH-1 pour le diagnostic d'encephalitis HCMV né le 06.08.1968 à Heidelberg Examen de maturation le 16.05.1987 à Heidelberg
Il s'agissait d'un groupe de patients composé de 17 patients atteints du SIDA et d'un
Groupe de contrôle composé de 12 patients immunocompetents présentant d'autres symptômes neurologiques
Nous avons examiné l'efficacité de la PCR pour le diagnostic d'un HCMV.
Ensephalite: 5 patients atteints du SIDA ont été testés sur un HCMV autopsiquement sécurisé.
Tous les échantillons de sang et d'alcool examinés ont été prématurés.
Il s'est avéré que le PCR niché détectait une HCMV très sensible tant dans le sang que dans le liquor.Cette méthode a permis de détecter l'ADN HCMV dans tous les échantillons examinés dans les monocytes sanguins périphériques, tandis que dans l'alcool, l'ADN HCMV a été détecté dans tous les patients atteints de SIDA et dans 5 des 12 patients immunocompetents.La fréquence de détection de l'ADN HCMV chez les patients immunisés ou latemment infectés a montré que la détection purement qualitative de l'ADN HCMV n'a pas permis de conclure à une maladie manifeste.
Pour différencier une encéphalite HCMV latente d'une encéphalite HCMV manifeste, nous avons étudié
les échantillons sont rééchantillonnés à l'aide d'un protocole PCR semi-quantitatif,
d'une série de séries de dilution ont déterminé la charge virale. dans le sang, le PCR quantitatif n'a pas permis d'indiquer avec certitude la présence d'encéphalite HCMV dans le sang, d'une part parce que la charge virale des patients atteints d'encéphalite HCMV n'était pas très différente de celle des patients atteints d'encéphalite HCMV sans ce diagnostic. d'autre part, il n'y avait pas de différence statistiquement significative entre la charge virale moyenne des patients atteints d'encéphalite HCMV et celle des patients atteints d'encéphalite HCMV sans une maladie HCMV CNS, car peu de sang sont examinés chez les patients atteints d'encéphalite HCMV confirmée.
Les échantillons d'alcool de patients atteints d'encéphalite HCMV autographiquement confirmée
la charge virale moyenne était de 3 558 pour 105 cellules (1 667 à 5 333, médiane = 3 333). Elle était donc significativement supérieure à la charge virale tant chez les patients atteints d' AIDS sans soupçon d' encephalite HCMV dont la charge virale moyenne était de 295/ 105 cellules (9-1 000, médiane = 281, p< 0.01) que chez les patients immunocompetents ayant une charge virale moyenne de 52/ 105 cellules (0-562, médiane = 19, p< 0.01).
La mise en place d'un processus de dépistage de routine rapide et sûr de la contamination
Nous avons examiné 14 échantillons d'alcool à nouveau à l'aide d'un PCR unique modifié, avec une " coupure " de la limite de détection à 500 copies virales par 105 cellules, ce qui devrait empêcher la détection d'échantillons d'alcool latemment infectés. L'ADN du HCMV a été trouvé dans tous les échantillons d'alcool des patients atteints d'une encephalyte HCMV sécurisée.
Les deux patients avaient déjà présenté une charge virale élevée dans la PCR quantitative. Aucun des 5 patients séronégatifs n'a pu détecter l'ADN de la HCMV par cette méthode. La PCR unique s'est donc révélée appropriée dans de plus grands groupes de patients pour le dépistage de routine et la détection de patients présentant un risque accru de maladie du HCMV. Pour confirmer la PCR unique et déterminer l'étendue d'une maladie de la HCMV, une PCR quantitative devrait en tout cas être mise en place. Au cours d'un traitement antiviral, la charge virale peut être utilisée comme marqueur de substitution pour la prise en charge de la thérapie et pour détecter à un stade précoce le développement de la résistance à l'antivirus.