Transducción de señales entre el retículo endoplasmático y el núcleo: la influencia de Brefeldin A en la regulación de la transcripción de la subunidad de gonadotropina en humanos

Mathias Gante

Dr.sc.hum. Transducción de señales entre el retículo endoplasmático y el núcleo: Influencia de Brefeldin A en la regulación de la transcripción de la unidad inferior de la gonadotropina en el hombre Nacido el 27 de marzo de 1967 en Berlín Prueba de madurez el 5 de junio de 1986 en Darmstadt Curso de estudios en la Facultad de Biología de WS 88/89 a SS 94 pregrado el 25 de junio de 1991 en la Facultad de Tecnología de Darmstadt Grado el 21 de abril de 1994 en la Facultad de Tecnología de la Facultad de Doctorado de Ciencias de la Facultad de Ciencias de la Facultad de Ciencias de la Facultad de Ciencias de la Facultad de Ciencias de la Facultad de la Facultad de Biología de la Facultad de Ciencias: Prof. Dr.phil. nat.

La secuencia promotora del gen hCG fue aislada a partir de un banco genómico de ADN de phagenos con una secuencia flanqueadora de 5′. La secuencia fue clonada junto con el área inicial del primer exón de -hCG en un vector de reporte de luciferasa (pGL -1102/+50).

Este vector de reportero genético fue transferido a células cancerígenas de JAR-chorion y posteriormente

las células midieron la actividad de la luciferasa. Trataron a las células con 8 bromo-cAMP,

La actividad promotora de

- hCG se incrementa 3,5 veces después de 12 h,

La inducción hasta este máximo aumentó constantemente y se mantuvo en este nivel hasta aproximadamente 48 h. Cuando las células fueron tratadas con BFA, se observó un efecto biphasic. En los puntos de medición después de 10 minutos y 30 minutos se observó una disminución de la actividad promotora con una inducción de 0,5 y 0,9 respectivamente, mientras que después de 60 minutos y 120 minutos con una inducción de 1,9 y 1,4 respectivamente se observó un aumento de la actividad promotora.

Si se aplicó a las células 8 bromo-cAMP durante 12 h y luego se admitió 1 h BFA, se pudo lograr una inducción de 5,4 que correspondía a la suma de los valores individuales previamente medidos. El lugar de acción del efecto BFA después de 1 h (inducción 1.9 fachada) se redujo mediante ensayos de infección con construcciones de reportero con pequeñas inyecciones del promotor hCG en el rango entre -938 bp y -1102 bp. Un fragmento de ADN que abarca este rango se utilizó para los experimentos de banda de ADN.

El objetivo de la purificación, es decir, la caracterización y secuenciación de esta proteína, debe realizarse a mayor escala y utilizando diferentes columnas.

Por el que

BFA-respondiente proteína de unión de ADN

(15 kDa) es probable que se trate de:

El efecto observado es BFA-responsivo, pero no se puede decir si es específico de BFA. La comparación con el trabajo de otros grupos de trabajo sugiere que se trata de una reacción a la acumulación de proteínas en el ER como se produce por BFA. Presumiblemente se han descrito aquí los componentes de una vía de transmisión de señales que producen una comunicación entre la vía secretorial y el núcleo.