Prove di sintasi di nitrogeno monoossido inducibile nei tessuti epatici mediante in situ non radioattivo - ibridazione e istochimia immunitaria
Marcus Alexander Burkhardt
Dott. medico dimostrazione dell'inducibile monoossido di nitrogeno - sintesi nei tessuti epatici mediante non - radioattivi in situ - ibridazione e immunostochemia. nato il 30.08.1969 a Kirchheim sotto test di maturità di Teck l'11.05.1989 a Nürtingen corso di studio della facoltà di medicina da SS 1991 a SS 1997 fisica il 01.04.1993 all'Università di Heidelberg studio clinico a Heidelberg
In un modello di sepsis in ratti, la stimolazione di iNOS ha un effetto hepatoprotettivo. Il ruolo di NO nelle malattie epatiche acute e croniche non è chiaro. Pertanto, l'obiettivo del lavoro è stato quello di studiare la funzione di iNOS nei tessuti epatici con infezione cronica, reinfezione dopo trapianto di fegato (LTX) e reiezione dopo LTX.
Sono stati introdotti due metodi diversi.
in situ
- Ibridazione,
che consentono la rilevazione dell'iNOS mRNA e, in secondo luogo, la rilevazione dell'iNOS mRNA
L'istosochemia immunitaria con la quale si presenta la proteina iNOS.
Le parti di fegato congelate di 89 pazienti.
in situ
- l'ibridazione è stata effettuata
Il paraformaldeide fissa il tessuto epatico a una lunghezza di circa 200 bp.
L'istosochemia immunitaria è stata rilevata dopo la fissazione del sistema immunitario.
Tessili liverici contenenti 70% di ethanol con l'aiuto di anticorpi monoclonali iNOS. Dopo l'ottimizzazione di diversi parametri protocolli, la presentazione specifica e sensibile dell' iNOS mRNA e dell' iNOS è riuscita. In entrambi i hepatociti e nelle cellule infiammatorie sono stati rilevati iNOS mRNA e iNOS. Nel caso dell'epatite virale cronica, un gran numero di hepatociti è risultato positivo per iNOS mRNA o per iNOS. Tuttavia, in un'epatite B o C reinfettazione dopo la trasplantazione del fegato, sia in situ che nell'ibridazione e nella chimica immunitaria, l'indicazione più forte di iNOS mRNA o nell'infiammazione è stata rilevata.
Le cellule iNOS-positive sono simili a quelle che si trovano nei tessuti del fegato e che vengono respinte.
Rejezione di una significativa trasmissione di segnale nel macrophago intralobulare
Le cellule (cellule di cupro). Gli esperimenti dimostrano che in una reinfezione la sintesi di NO in cellule epatocitiche e infiammatorie è più elevata rispetto a una reiezione. Tuttavia, la sintesi di NO nelle cellule intralobulari simili al macrophagene sembra essere rilevabile solo con la reiezione.