Démonstration de la synthase inductible du monoxyde d'azote dans les tissus hépatiques par le biais d'hybridation in situ non radioactive et d'histochémie immunitaire
Il s'agit de Marcus Alexander Burkhardt.
Dr. méd. preuve du monoxyde d'azote inductible - synthase dans les tissus du foie par l'intermédiaire d'examens non - radioactifs in situ - hybridation et immunochimie. né le 30 août 1969 à Kirchheim sous test de maturité Teck le 11 mai 1989 à Nürtingen cours de la faculté de médecine SS 1991 à SS 1997 physique le 1er avril 1993 à l'université Heidelberg étude clinique à Heidelberg
Dans un modèle de sépsis chez le rat, la stimulation de l'iNOS est hépatoprotective. Le rôle de l'iNOS dans les maladies hépatiques aiguës et chroniques n'est pas clair. C'est pourquoi l'objectif du travail était d'étudier la fonction de l'iNOS dans les tissus hépatiques atteints d'infection chronique, la réinfection après transplantation du foie (LTX) et la réjection après LTX.
Deux méthodes différentes ont été mises en place.
à l'intérieur de l'appareil
- l'hybridation,
Ce qui permet la détection de l'ARN iNOS et, d'autre part, la détection de l'ARN iNOS.
L'hystochimie immunitaire permettant d'exposer la protéine iNOS.
Il s'agit d'expériences sur le foie surgelé de 89 patients.
à l'intérieur de l'appareil
- l'hybridation a été réalisée
La fixation du tissu hépatique par paraformaldehyde d'une longueur d'environ 200 bp
L'hystochimie immunitaire a été effectuée après fixation du
Tissu hépatique avec 70% d'éthanol réalisé à l'aide d'anticorps iNOS monoclonaux. Après l'optimisation de différents paramètres de protocole, la présentation spécifique et sensible de l' iNOS mRNA et de l' iNOS a été réalisée. L' iNOS mRNA et iNOS ont été détectés dans les cellules hépatocytes et inflammatoires. Dans le cas de l'hépatite virale chronique, un grand nombre de hépatocytes ont été positifs pour l' iNOS mRNA ou pour l' iNOS. Cependant, dans le cas d'hépatite B ou C réinfection après transplantation hépatique, l'infection in situ-hybridation et l'immunochimie ont montré la plus forte détection d' iNOS mRNA ou d'INOS respectivement.
Les cellules positives à iNOS sont similaires à celles du tissu hépatique rejeté.
Réjection d'un signal clair dans les macrophages intralobulaires similaires
Les tests montrent qu'une réinfection entraîne une augmentation de la synthèse de NO dans les hépatocytes et les cellules inflammatoires par rapport à une réjection, mais la synthèse de NO dans les cellules intralobulaires de type macrophage ne semble être détectable qu'en cas de réjection, ce qui peut être un mécanisme de répulsion pathophysiologique.