Investigaciones comparativas para la detección de ácido ribonucleico interferón alfa e interferón beta-mensajero mediante la hibridación in situ con probas radioactivas y no radioactivas

Christoph Helmer Antoni, también miembro de la Comisión Europea.

Dr. med. Investigaciones comparativas para la detección de ácido interferonico e interferonico messenger -ribonucleico mediante la hibridación in situ en Heilbronn mediante el uso de sondas radioactivas y no radioactivas Nacido el 20.05.68 en Bremen Prueba de madurez el 02.06.87 en Bremen Curso de la Facultad de Medicina de SS 1989 a SS 1996 Física el 03.04.91 en la Universidad Ruprecht-Karlsberg Heidelberg Clínico de Heidelberg Práctico año en Heilbronn Exámenes Estatales el 06.05.96 en la Universidad Rupert-Karlsberg Heidelberg Proceso de doctorado: Centro Alemán de Investigación del Cáncer (DKFZ) Doctorado: Biología Privada.

Uso de nucleótidos marcados con digoxigenina (DIG).

Anticorpos conjugados de enzimas o colorantes fluorescentes. El objetivo de este trabajo era analizar la sensibilidad y la capacidad de disolución de varios métodos para detectar transcripciones de mRNA en preparados citológicos con la ayuda de ISH. Los estudios se realizaron en células humanas de diferentes orígenes, como los mRNA inducibles pero de baja redundancia de las citocinas IFN-2 e IFN- en ejemplos de mRNA inducibles pero de baja redundancia de las citocinas IFN-2.

La investigación se centró en la comparación de diferentes procedimientos de marcado.

Además de las sondas con marcas radioactivas, las sondas con marcas radioactivas también deben ser utilizadas para la detección de los ácidos nucleicos específicos.

La comparación final de los resultados del ISH

Cuando se utilicen sondas con marcas radiactivas o no radiactivas, se debe tener en cuenta la

Los métodos de detección no radioactiva pueden ser utilizados en el campo de la detección.

Para el estudio, se seleccionaron leucócitos sanguíneos periféricos (PBL) de donantes sanos, así como dos líneas celulares (células de namalva, células MG-63). La inducción de la IFN se realizó con el virus Sendai (SV), un conocido inductor de la IFN. Se compararon más adelante la naturaleza y cantidad de interferonas secernadas, así como los resultados de la hibridación del bloto de la RNS con la ISH. Se trataría de presentar una correlación entre la secreción de la IFN y la expresión de genes a nivel celular y en el extracto celular total.

Las células de PBL y Namalva segregaron grandes cantidades de interferón en el medio después de la infección con SV. La infección con 640 unidades de hemagglutinación (HAU) de SV logró una inducción máxima de interferón. En las pruebas de neutralización con anticuerpos contra la IFN y Namalva, se mostró que las proporciones relativas de ambos tipos de IFN en las células de PBL y Namalva variaron. Así, las células de Namalva infectadas por SV segregaron a 75% de IFN y a 25% de IFN, mientras que en PBL se pudieron detectar proporciones iguales de IFN y IFN. En análisis de Blot de RNS de más de seis horas con las células infectadas por SVN con PBL y Namalva, se mostró una señal significativa para las células de PBL y Namalva 2 en las células de PBL y Namalva. Así, las células de Namalva infectadas por SV se segregaron a 75% de IFN y a 25% de IFN, mientras que en PBL se pudieron detectar las mismas proporciones de IFN y IFN.

En términos de densidad, se encontró una proporción de

2 mRNS por IFN

En la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva, en la región de Namalva.

En todos los tipos de células estudiados, después de la inducción viral de la IFN, se observó una señal muy heterogénea en el ISH, lo que permite concluir que hay diferentes expresiones de la IFN mRNA a nivel individual. Los análisis de frecuencia de la IFN- 2 mRNA mostraron una proporción de 5,9% de células positivas en la PBL. En el caso de la IFN mRNA, los valores se situaron en 7,1% para las muestras marcadas por DIG y en 6,4% para las muestras marcadas por P. En las dos muestras de Namalva, se observaron diferencias significativas en comparación con las marcas. En las encuestas realizadas, las frecuencias de las muestras más grandes de las muestras de la IFN- 2 mRNA se situaron entre el 3,2% de las muestras de base y el 5,8% de las muestras de la IFN- 2 mRNA en la exposición sola. En el caso de las muestras de la IFN- 2 y de la IFN- 2 mRNA, se demostró que las marcas de la IFN- 2 y de la IFN- 2 mRNA no pudieron ser eliminadas con un margen positivo con un margen positivo, y en el caso de que las muestras de la IFN- 2 y de la IFN- DIG no pudieran ser eliminadas por un margen positivo con un margen positivo con un margen positivo con un margen positivo con un margen positivo con un margen positivo, el 4,8% de la cual se mostró.

Las células positivas se asignan a los monocitos.

El porcentaje de monocitos en las imágenes de sangre diferencial del donante fue de 5.4% en una muestra de

La comparación estadística de los resultados mostró que los métodos de marcación en la detección de IFN-2 mRNS en PBL proporcionaron resultados similares, mientras que el DIG marcado en la detección de IFN-mRNS proporcionó una mayor frecuencia de células positivas. En las células de Namalva se encontró una clara diferencia entre los métodos. Las sondas marcadas por radioactividad dieron frecuencias significativamente más altas para ambas especies de IFN-mRNS. Esto puede resultar en que los preparados con células de Namalva respondieron muy bien a cualquier tipo de sonda de tratamiento.

En resumen, se puede decir que las sondas marcadas DIG presentan resultados comparables a los

El problema es que, en la actualidad, las sondas de radioactividad se encuentran en condiciones de suministrar sondas con marcas radioactivas.

Es el resultado de la percepción subjetiva de la intensidad del color de los objetos.

Así que con las sondas marcadas DIG se hacen buenas declaraciones de calidad,

En cambio, las declaraciones cuantitativas sólo cumplen con las condiciones.

Las sondas son una alternativa más rápida a la de los por el tiempo de exposición más largo

En la actualidad, los sistemas de detección de radioactividad son más complejos que los sistemas de detección de radioactividad.

Los preparados de células adherentes (MG-63) de las sondas DIG muestran buenos resultados:

En la actualidad, el uso de la radioisótopo P en tejidos puede producir buenos resultados, lo que abre nuevas perspectivas que permiten una mayor utilización de la hibridación in situ, en particular en el diagnóstico rutinario.