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Con aminan es eme gen es
en las aguas del Pa que de
Doñana
Dolo es Camacho-Muñoz, Julia Ma ín, Juan Luis
San os, I ene Apa icio y Es eban Alonso
Depa amen o de Química Analí ica, Escuela Poli écnica
Supe io , Uni e sidad de Se illa.
1. INTRODUCCIÓN
El Pa que Nacional de Doñana, decla ado Pa imonio de la
Humanidad po la UNESCO en 1994, es la ese a biológica más
impo an e de España, y la mayo á ea p o egida. Es un ecosis ema
único en oda Eu opa, debido a su g an di e sidad ecológica.
Las dunas, playas y ma ismas o man pa e de es e espacio
ca ac e ís ico que cons i uye una u a de mig ación e hibe nación
p e e en e pa a miles de a es debido a las singula es condiciones
que con luyen en es e luga , siendo además un e ugio pa a
especies en pelig o de ex inción como el lince ibé ico y el águila
impe ial.
El Pa que de Doñana p esen a un equilib io ex emadamen e
ulne able con necesidades ambien ales especiales, en el que la
calidad de las aguas supe iciales juega un papel muy impo an e.
Di e sos es udios han pues o de mani ies o la p esencia de
me ales pesados en los p incipales apo es híd icos del Pa que [1,
2], sin emba go o os con aminan es no han ecibido la a ención
pe inen e [3, 4].
Los denominados con aminan es “eme gen es” han susci ado
un g an in e és en el mundo cien í ico en los úl imos años. En e
ellos, los á macos ocupan un luga des acado ya que, aunque sus
concen aciones en el medio ambien e son ela i amen e bajas
(µg L-1 o ng L-1), en algunos casos son su icien es pa a p o oca
e ec os ad e sos en los o ganismos [5, 6].No obs an e, a pesa de
que su p esencia en di e sas ma ices medioambien ales (aguas
esiduales y supe iciales y sedimen os) ha sido ampliamen e
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desc i a [7-11], has a el momen o no exis e una legislación en la
que se egule la desca ga de es as sus ancias al medioambien e.
En es e abajo, se es udió la p esencia de dieciséis á macos en el
agua esidual e luen e que a ec a a los p incipales apo es híd icos
de Doñana y en el agua supe icial de es a á ea, así como el iesgo
medioambien al asociado a la p esencia de los á macos. Los
á macos obje o de es udio ue on cinco an iin lama o ios (ácido
salicílico, diclo enaco, ibup o eno, ke op o eno y nap oxeno),
dos an ibió icos (sul ame oxazol y ime op im), un an iepilép ico
(ca bamacepina), un β-bloquean e (p opanolol), un es imulan e
ne ioso (ca eína), cua o ho monas (17 α-e iniles adiol, 17
β-es adiol, es iol y es ona) y dos egulado es lipídicos (ácido
clo íb ico y gem ib ozilo).
2. METODOLOGÍA
2.1 Á ea de es udio y pun os de mues eo
El pe iodo de mues eo aba có desde mayo del 2008 a ab il de 2009.
En ese pe iodo se oma on un o al de cua en a y ocho mues as
de agua supe icial, una cada mes. Los pun os de mues eo S1
(N 37º14’39.1”; O 6º15’56.6”) y S2 (N 37º6’21.2”; O 6º15’29.0”) se
encon aban si uados en el ío Guadiama , el e ce pun o (S3) (N
37º7’33.0”; O 6º29’38.4”) en el a oyo La Rocina y el cua o pun o
(S4) (N 37º10’27.7”; O 6º27’28.5”) en el a oyo El Pa ido. Cada
mues a ue combinación de una se ie de alícuo as omadas a la
misma p o undidad a lo la go de los cauces. Las mues as ue on
ans e idas a ascos de colo opacio y almacenadas a 4ºC has a
el análisis.
Du an e es e mismo pe iodo se oma on cua imes almen e
mues as de agua esidual e luen e p oceden es de once es aciones
depu ado as de aguas esiduales (EDARs) y dos mues as de agua
de un e ido di ec o. Cada mues a ue combinación de las alícuo as
ecogidas du an e 24 ho as pa a que ue an ep esen a i as de
cada e luen e.
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2.2 Ma e iales y mé odos
Los disol en es ace oni ilo, agua y me anol de calidad HPLC
ue on suminis ados po Romil L d. (Ba celona, España). Ace ona
y hexano, ambos de calidad HPLC, y ácido sul ú ico de g ado
analí ico ue on suminis ados po Pan eac (Ba celona, España).
El dihid ógeno os a o po ásico de calidad analí ica ue ob enido
de Scha lau (Ba celona, España). Los p incipios ac i os ácido
clo íb ico, ácido salicílico, ca bamacepina, diclo enaco, ke op o eno
y nap oxeno ue on adqui idos a Sigma-Ald ich (S einheim,
Alemania). 17α-E iniles adiol, 17β-es adiol, es iol, es ona,
gem ib ozilo, ibup o eno, p opanolol, sul ame oxazol y ime op im
(>99%) ue on ob enidos de D . Eh ens o e (Augsbu g, Alemania).
La ca eína ue suminis ada po Me ck (Da ms ad , Alemania). Se
p epa a on disoluciones pa ón 1000 µg mL-1de cada á maco en
me anol y se almacena on a 4ºC, y a pa i de és as se p epa a on
las disoluciones más diluidas de abajo.
La de e minación analí ica se desa olló de acue do al mé odo
p e iamen e desc i o po Camacho-Muñoz e al., (2009) [12], que
se basa en un a amien o de la mues a median e ex acción en
ase sólida con ca uchos Oasis HLB (60 mg) (Wa e s, Mil o d,
MA, USA) y su de e minación median e c oma og a ía líquida de
al a esolución con de ec o es de ila de diodos y de luo escencia
si uados en se ie. La sepa ación c oma og á ica se ealizó usando
una columna ipo ca ucho Zo bax Eclipse XDB- C18 (150mm
x 4.6mm, 5µm) (Agilen , USA), p o egida con una p ecolumna
XDB-C18 (4mm x 4mm, 5µm) (Agilen , USA), y e mos a izada a
30ºC. La elución se ealizó en g adien e con ace oni ilo y disolución
25mM de dihid ógeno os a o po ásico a un lujo de 1.2 mL min-1.
2.3 E aluación de iesgo oxicológico
Los iesgos po enciales de cada á maco ue on e aluados
median e los coe icien es de iesgo (CR) calculados a pa i de la
elación en e (i) las concen aciones medidas de cada á maco,
pa a lo que se emplea on los alo es medios de concen ación
medidos as elimina los alo es anómalos, y (ii) las concen aciones
máximas pa a las que no se p e én que exis an e ec os nega i os.
Las concen aciones máximas pa a las que no se p e én e ec os
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noci os se calcula on a pa i de los nume osos ensayos de
oxicidad desc i os en la li e a u a cien í ica. Se con empla on
es udios ealizados en nume osos o ganismos acuá icos en e los
que se encuen an bac e ias, algas, in e eb ados y peces. Pa a
aba ca la oxicidad de especies más sensibles a las habi ualmen e
con empladas en esos es udios el alo de oxicidad con emplado
ue 1000 eces in e io al bibliog á ico. Valo es de CR supe io es a
1 indica án la exis encia de iesgo pa a los o ganismos acuá icos
[13, 14].
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
3.1 P esencia de á macos en el agua esidual e luen e
Todos los á macos, excep o las ho monas 17-e iniles adiol y
es ona, se de ec a on en las mues as de agua e luen e analizadas
(Figu a 1). Los á macos de ec ados con mayo ecuencia ue on
el nap oxeno (91%), ácido salicílico (83%), p opanolol (83%),
gem ib ozilo (74%) e ibup o eno (63%), mien as que el es o
de á macos se de ec a on en menos del 20% de las mues as
analizadas. La ca bamacepina, aunque sólo se encon ó en el 37%
de las mues as de agua e luen e, llegó a alcanza concen aciones
de has a 17.3 µg L-1. La pe sis encia de es e an iepilép ico en el
medio ambien e, así como su baja eliminación en los a amien os
de aguas esiduales, han mo i ado que nume osos au o es la hayan
conside ado ma cado de con aminación an opogénica [15].
El al o consumo de los an iin lama o ios, así como su en a sin
necesidad de p esc ipción médica, explica que es os á macos sean
los de ec ados en mayo es concen aciones en las aguas e luen e,
en especial el ácido salicílico y el ibup o eno con concen aciones
medias de 8.01 y 5.72 µg L-1, espec i amen e. El es o de á macos
se de ec a on a ni eles de concen ación media comp endida en e
0.05 (ácido clo íb ico) y 1.64 µg L-1 (gem ib ozilo). Es os ni eles de
concen ación ue on simila es a los desc i os po o os au o es en
aguas esiduales e luen e [9, 14, 16, 17]. La mayo p esencia de
á macos se de ec ó en los e luen es que ie en al Pa ido (S4),
seguido del Guadiama (S1 y S2), del Guadalqui i y inalmen e de
la Rocina (S3).
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3.2 P esencia de á macos en el agua supe icial
Los á macos de ec ados con mayo ecuencia en las aguas
supe iciales analizadas ue on el ácido salicílico (92%), ca eína
(63%), gem ib ozilo (83%), ibup o eno (65%), nap oxeno (65%) y
p opanolol (65%). T es de los á macos (ácido clo íb ico, es ona y
sul ame oxazol) no ue on de ec ados en ninguna de las 48 mues as
analizadas. La ho mona 17α-e iniles adiol ue el único á maco no
de ec ado en agua esidual y de ec ado en dos mues as de agua
supe icial en concen aciones de 0.18 y 0.28 µg L-1.
T as una conside able disminución de las concen aciones medidas
en los e luen es, debido p incipalmen e a enómenos de dilución,
se obse ó una dis ibución simila de á macos en las aguas
supe iciales y e luen es (Figu a 1). Los an iin lama o ios ue on los
á macos p esen es en mayo es concen aciones, lo que e ela que
los e luen es de las EDARs son la p incipal uen e de á macos que
a ec an a Doñana. Los ni eles de concen ación de ec ados en las
aguas de Doñana, ue on lige amen e supe io es a los de ec ados
po o os au o es en o as aguas supe iciales de íos [18, 19].
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Figu a 1. Concen aciones medias y máximas de cada p incipio ac i o en el
agua supe icial y el agua esidual e luen e que a ec a a los pun os S1, S2, S3
y S4. Fuen e: G upo Anquimed
3.3 E aluación del iesgo
La Figu a 2mues a los alo es de CR calculados pa a cada
á maco, al y como se desc ibió en la sección 2.3., en las
mues as de agua supe icial. Bajo es as condiciones, ninguno de
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los CR de los á macos supe ó el alo lími e de 1.Los á macos
con mayo es alo es medios de CR ue on el gem ib ozilo (CR =
1 en S4) e ibup o eno (CR = 0.90 en S3 y CR = 0.88 en S4). Sin
emba go, en algunos meses y en algunos pun os de mues eo
conc e os, los CR de a ios á macos excedie on el alo lími e de
1. Los á macos que excedie on el alo lími e pa a el CR ue on las
ho monas 17α-e iniles adiol (en diciemb e en S1 y en sep iemb e
en S3) y 17β-es adiol (en junio en S1 y S2 y en oc ub e en S1), el
an iin lama o io ibup o eno (en agos o en S1, en junio, julio y agos o
en S3 y en sep iemb e en S4) y el egulado lipídico gem ib ozilo (en
ene o, eb e o, sep iemb e, oc ub e y no iemb e en S4).
Figu a 2. Coe icien es de iesgo p omedio de los p incipios ac i os en cada
pun o de mues eo (S) de agua supe icial
Fuen e: G upo Anquimed
4. CONCLUSIONES
Los 16 á macos analizados se de ec a on an o en agua esidual
e luen e (excep o 17α-e iniles adiol y es ona) como en agua
supe icial (excep o ácido clo íb ico, es ona y sul ame oxazol).
Los an iin lama o ios ue on los á macos encon ados en mayo es
concen aciones, an o en el agua esidual e luen e como en el agua
supe icial, lo que se jus i ica po su ele ado consumo mo i ado
po su aplicación a macológica y su acilidad de adquisición po
los pacien es al no necesi a p esc ipción médica. Los iesgos
eco oxicológicos de la p esencia de á macos en el medio acuá ico
del Pa que de Doñana se limi a on a algunos pun os de mues eo
en meses especí icos, en especial du an e los meses es i ales
cuando el lujo de agua es meno . En cualquie caso, la p esencia
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de á macos en los e luen es de las EDARs que a ec an al Pa que
sugie e la necesidad de implemen a a amien os e cia ios que
mejo en la calidad de las aguas e luen es an es de se e idas a
los p incipales apo es híd icos del á ea p o egida de Doñana.
AGRADECIMIENTOS
Los au o es ag adecen la inanciación ecibida de la Agencia
Andaluza del Agua de la Conseje ía de Medio Ambien e de la Jun a
de Andalucía, y del Minis e io de Educación y Ciencia (P oyec o nº
CGL2007-62281) pa a la ealización de es e abajo.
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