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Estudio de las diferencias infraespecíficas en Trifolium Subterraneum L. mediante electroforesis de proteinas

Abstract

Protein of seeds from eight australian cultivars of Trifolium subterraneum L. have been separated ussing acrylamide gel electrophoresis technique. Cuitivars belong to the three existing subespecies according to Katznelson and Morley (1965). The number of bands detected by this procedure was high, as the diagrum shows, and all the cultivars could be differenced by their bands. Results were reproducible, even in cultivars in which seeds of different origin and/or year were used. The contrast was remarkable between the constancy of the patter within every cultivar and the variabiüty of patterns among cuitivars. Coefficients of similarity of protein bands among different cultivars have been stablished. The results obtained are discussed in relation to the ones obtained by morphological and genetic studies by other authors. The interest of the method for the quick identification of cultivars is pointed out.

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Estudio de las diferencias infraespecíficas en Trifolium Subterraneum L. mediante electroforesis de proteinas

Author: Pastor Piñeiro, Jesús Ángel
Publisher: Consejo Superior de Investigaciones Científicas (España)
Year: 1972
Source: https://idus.us.es/bitstreams/c6c19bfc-02d7-48ae-8851-a339ba9b8a0b/download
ESTUDIO
DE LAS
DIFERENCIAS
INFRAESPECI-
FICAS
EN
TRIFOL1UM
SUBTERKANEUM
L.
MEDIANTE
ELECTROFORESIS
DE
PROTEÍNAS
po
PASTOR
PIXK1KO
«ANALES
DE
=
gOWQ OClAj
•AGUD lOLOGlV
PUBLICADO
EN
ANALES
DE
EDAFOLOGÍA
Y
AGROBIOLOGÍA
TOMO
XXXI,
NÚMS.
9-10.—MADRID,
1972
ESTUDIO
DE LAS
DIFERENCIAS
INFRAESPECI-
FICAS
EN
TRIFOLIUM
SUBTERRANEUM
L.
MEDIANTE
ELECTROFORESIS
DE
PROTEÍNAS
po
J.
PASTOR
PJSEIRO
S U
M
M
A R Y
STUDV
OF
INFRAESPECIFIC
DIFFERENCES
IX
TRIFOLIUM
SC íTF.RRA-
NEUM
L. BY
PROTEIN ELECTROPHORESIS
P oicins
o
seeds
oni
eigh
aus alian
cui i a s
o
T i ohum
sub e aueu n
T,.
haw
been
sepa a ed
ussing
ac ylamide
gel
elec opho esis
echniquc.
Cui i a s
belong
;o
he
h ee
exis ing
suhespecies
acco ding
o
Ka znelson
and
Mo ley
(1965).
The
numbe
o
bands
dc ec ed
by
his
p ocedu e
as
high.
as he
diag um
shows,
and
all
he
cui i a s
coulcl
be
di e enced
by
hei
baños.
Resul s
we e
ep oducible,
e en
in
cul i a a
in
which
seeds
oí
di e en
o igin
and/o
yea
we e used.
The
con as
was
cma kable
be ween
he
cons ancy
o he
pa e n
wi hin
e e y
cul i a
and he
a iabiü y
o
pa e ns
among
cui i a s.
Coe icien s
o
simila i y
o
p o ein
baños
among
di e en
cui i a s
ha e
been
s ablished.
The
esul s
ob ained
a e
discussed
in
ela ion
o he
oncs
ob ained
by
mo phological
and
gene ic
s udies
by
o he
au ho s.
The
in e es
o he
me hod
o
he
quick
iden i ica ion
o
cui i a s
is
poin ed
ou .
El
p oblema
de la
subespeciación
y
a iación
de
T i oliiini
sub c^ a-
ncum
L. ha
sido es udiado
po
a ios au o es. Ka znelson
y
Mo ley
(12,
13),
en su
es udio axonómico
de las
ca ego ías
in aespecí icas
de
T.
sub-
e anc nn
T..,
in en an
asocia
ba e as
ep oduc o as
con
ca ac e ís icns
mo ológicas.
Los
esul ados ob enidos
les han
lle ado
a
conclui
que
T i olium
s b e onewn
L.
es á cons i uido
po
es
subespecies
sim-
pá ncas,
ss >.
sub c mneum.
ssp.
yam inicum
y
ssp.
b a hycalychium.
que
son,
en un
!)."">-100
po
100,
in e es é iles. A ibuyen
la
es e ilidad
de los
híb idos
a
cambios
c omosómicos,
aslocaciones
e
in e siones, asociados
con
las
di e encias
de
ipo
subespecí ico
o
a ie al.
Dada
la
g an
di icul ad
que
o ece
la
sepa ación
de las
dis in as
pobla-
ciones
del
ébol sub e áneo
po sus
ca ac e es mo ológicos, pensamos
792
ANALES
DE
EDAFOLOGÍA
V
AGROBIOLOGÍA
en la
con eniencia
de
u iliza mé odos
quimiosis emá icos
pa a
es udia
las
di e encias
in aespeci icas
en
es a especie.
La
elec o o esis
de
p o eínas
se
encuen a en e
las
écnicas
que
han
expe imen ado
un
mayo
inc emen o
en los
úl imos
años
en los
es udios
axonómicos.
La
mayo ía
de los
abajos
se
e ec úan
en
semillas
po
azones p ác icas
muy
impo an es, como
son la
es abilización
de
sus an-
cias
y la
en aja
de no
ene
que
ealiza es udios
a lo
la go
del
ciclo
de
desa ollo.
Fox,
Thu man
y
Boui e
(9)
ob u ie on
las
bandas
de
p o eína
en
semillas
de 1.7
especies
de
leguminosas
y
señala on
la
u ilidad po encial
de
la
écnica. Boui e
y
col.
(4, 5), al
examina
po
sepa ado
las
accio-
nes de
albúmina
y
globulina
en
semillas
de
leguminosas,
obse a on
que
las
globulinas ienen
un
alo axonómico
a
ni el
de
ibu
y
géne o.
En el
caso conc e o
de la
ibu
T i olioleas
el
elec o o eg ama
de
glo-
bulinas
se
ca ac e izaba
po la
p esencia
de dos
bandas
ue emen e
eñi-
das
en la
pa e supe io
del
gel.
A
ni el
de
géne o.
Kleczowska
(14)
encon ó
que
las
p o eínas
de
ébol podían sepa a se median e
elec o-
o esis
en 18
acciones.
Ad iaanse
y
Robbe s
(2)
es udia on
las
acciones
de
albúmina
y
glo-
bulina
en
cul i a es
de
Vicia
aba
L.,
Piswn
sa nmm
L.
ulga is
L. Las
acciones
de
albúmina e an ca ac e ís icas
en las
espe-
cies
es udiadas,
y de las
es
acciones
de
globulina ob enidas
una de
ellas
di e enciaba mejo
los
cul i a es.
Bingham
y Yeh (3)
halla on,
en 30
a iedades
de
al al a
y
26
diploides
y
e aploides
de
Medicado
sa h'a
L. y
Medicago
al
ca a
L.,
que las
p o-
eínas
a
iciales
de las
semillas
e an
cuali a i amen e
simila es
en 12 ó 13
bandas
en
odos
los
casos es udiados.
Es a
semejanza es aba
de
acue do
con los
esul ados ob enidos
en
es udios
gené icos
y
ci ogené icos.
La
mayo ía
de las
a iedades
di e ían
más en los
elec o o eg amas
de las
p o eínas
que en sus
ca ac e es mo ológicos.
La
a iación de ec ada
en
las
p o eínas
e a
su icien e
pa a
jus i ica
el
empleo
del
mé odo
en la
iden i icación
de
a iedades.
Vaughan
y
col.
(21,
22)
es udia on
las
acciones
de
albúmina
y
glo-
bulina
de
semillas
de
a ias especies pe enecien es
a los
géne os
B assica
y
Sinapis,
an o
po
mé odos se ológicos como
de
elec o o esis sob e
geles.
y
co elaciona on
los
esul ados
ob enidos
con lo?
de
la
clasi i-
cación
ya
es ablecida.
C ouden
y
col.
( >)
examina on
174
mues as
de
semillas
de
Umbelí-
e as
pe enecien es
a 99
especies
y 39
géne os
La
in es igación
e eló
di e encias
en e
las
especies examinadas, algunas
de
indudable
signi i-
cado axonómico.
Silano
y
col. (19) es udia on
las
acciones
de
albúmina
y
globulina
de
di e sas a iedades
de
T i ícum
a
es i a
ni
L. y
T i icii-m-
du um
Des .,
no
encon ando di e encias
a ie ales
muy
ma cadas,
si
bien
las
bandas
de
albúmina
de
mo imien o ápido p esen aban
di e encias
mayo es.
ESTUDIO
DE LAS
DIFERENCIAS
WFRAESPEC1FICAS
EN
«TRIFOLIUM
SUBTEKRANEUM»
L.
793
En la
sepa ación
elec o o é ica
de
p o eínas
en
o as pa es
de la
plan a
señalamos
los
abajos
de Lee y
Fai b o he s
(16), e ec uados
en
polen
y
semillas p oceden es
de
cua o axa
de
Typlia,
u ilizando
mé o-
dos
se ológicos
y
elec o o é icos.
Los
esul ados
ob enidos
po
ambos
mé odos e an complemen a ios
y
semejan es
en el
polen
y las
semillas.
Zwa z (24)
es udió
di e encias
a ie ales
en la
pa a a
median e
la
elec-
o o esis
de
p o eínas
del
ubé culo.
Me
Co n
y
col.
(17)
in es iga on
las
p o eínas
del
allo
y
hojas
de
es clones
de
Dian lms.
Hil y
y
Schmi henne
(10) compa a on p o eínas
de la
hoja
de dos
a iedades
de
soja
Ha osoy
y
lla osoy
(5:5,
sin
ap ecia
di e encias
en la
composi-
ción
de
p o eínas
de
ambas a iedades.
Nues o p opósi o
en
es e
abajo
ue:
Iden i ica
cul i a es
de
T i olium
siib c ancum
L.
u ilizando
la
elec-
o o csis
de
p o eínas
de
semillas
en
geles
de
poliac ilamida.
Es udia
la
simili ud
exis en e en e
los
p o einog amas
de
dichos
cul i a es.
Compa a ,
a
ni el
subespecí ico.
los
da os ob enidos
po el
mé odo
quimio axonómico
con la
clasi icación
es ablecida
po
Ka znelson
y
Mo ley.
MATERIAL
Y
MÉTODOS
Se
es udia on ocho cul i a es aus alianos pe enecien es
a las
es
subespecies
de
T i olium
si b e aneum
L..
ssp.
siib e nneum
(Talla ook,
Monn
Ba ke ,
Ge ald on,
Woogenellup.
Bacchus
Ma sh
y
Dwalganup).
T i olium
sub e ancum
L.
ssp.
b acliycal chiuin.
Ka zn.
e
Mo ley
(Cla-
e).
T i nliuní
suMc oncum
L.
ssp.
yaninnicinn.
Ka zn.
e
Mo ley
(Ya loop).
Ex acción
de
p o eínas
Las
p o eínas
se
ex aje on
de las
semillas
de los
ocho cul i a es.
Las
semillas
ue on
p opo cionadas
po el
CSIRO
y po el
Ins i u o
Nacional
de
Selección
de
Semillas
y
Plan as
de
Vi e o.
La
can idad
de
ha ina u ilizada
ue de 1 g . po
cada
20
mi.
de
solución
ex ac o a
( ampón
is-glicina).
po se
es a
azón
la más
idónea pa a
log a
la
esolución
del
mayo núme o
de
bandas.
El
p ocedimien o seguido
ue
el
u ilizado
po
Boul e
y
col.
(4-).
P epa ación
de los
gelcs
elec ai i csis
El
mé odo
empleado
ue el de
O ns ein
y
Da is
(18,
Ti.
simpli icado
po
Tombs
y
Ak oyd
(20) según
lo
señalado
po
Hje én
y
col. (11),
794
ANALES
DE
EDAFOLOGÍA
Y
AGROBIOLOGÍA
quienes usa on
en
luga
de
gel
sepa ado
una
solución
de
saca osa
al 40
po
100.
Se
coloca on
100
[il
de
ex ac o
de
p o eína
en el
ex emo
de
cada gel. Como indicado
se usó
azul
de
b omo enol.
Fox y
col.
(9) y
Vaughan
y
col. (21), en e o os, e ec ua on
po
sepa ado
la
elec o o e-
sis
de
albúminas
y
globulinas,
en
an o
que
Fai b o he s
(8) no
sepa ó
las dos
acciones
an es
de
e ec ua
la
elec o o esis. ob eniendo da os
sa is ac o ios. Noso os hemos seguido
el
c i e io
de
es e
úl imo au o .
Tinción
y
des eñido
Los
geles
se
iñe on
con una
solución
de
neg o
de
almidón
en
me a-
nol/agua/acé ico
(5
:5
:1).
A
con inuación
se
pasa on du an e unas
ho as
a la
misma mezcla
pe o
sin
colo an e.
El
colo an e empleado
da
esul-
ados análogos
a los
ob enidos median e
el uso
de
colo an es enzima-
icos (6).
Examinamos
los
elec o o eg amas sob e
una
supe icie luminosa
y las
bandas
de
p o eína
se
o og a ia on
y
ep esen a on median e esquemas.
Las
o og a ías
y los
densi og amas
no
ecogen
odas
las
bandas
de ec-
adas
a
simple is a, hecho
ya
señalado
po
a ios
au o es
(9,
20)
La
posición
de una
banda
de
p o eína después
de
e ec uada
la
elec o-
o esis
se
exp esa
po un
alo
Rp o
posición ela i a
de la
banda com-
pa ada
con el
en e
de
azul
de
b omo enol.
El
c i e io usado pa a es udia
las
bandas
de
p o eína,
de
acue do
con
Whi ney
y
col. (23),
ha
sido conside a las
simila es
cuando
se
sola-
pan
en más de 50 po
100.
Pa a
compa a
dos
axa
se
calculó
un
índice
de
simili ud
de la
siguien-
e
o ma:
n.°
de
pa es
de
bandas
simila es
n.°
de
bandas
di e en es
+
n.°
de
pa es
de
bancias
simila es
RESULTADOS
Y
DISCUSIÓN
Los
esul ados ob enidos
en la
sepa ación
de las
bandas
de
p o eína
de los
axa
in es igados
se
mues an
en la
ig.
1.
Cada
ep esen ación
de
és a
se
ob u o
a
pa i
de 7 a
9
epe iciones.
La
di e en e
in ensidad
de
inción
que
p esen an
las
bandas
se
exp esa
de la
mane a con encional
que se
indica
en la
igu a. Es a di e encia
de
in ensidad puede
ene
signi icado
axonómico, pe o
en el
p esen e abajo
no la
hemos enido
en
cuen a.
En el
diag ama des aca
el
g an
núme o
de
bandas
que
pueden
ap ecia se
con el
ex ac o
u ilizado.
Las
oscilaciones en e
los
alo es,
una ez
ans o mados
en
alo es
de
Rp,
=on
pequeñas den o
de
cada cul i a
y
se ie
de
expe imen os,
po
lo
que no se
conside ó necesa io inclui
los
alo es
del
e o
s anda d.

LSTUDIO
DK
LAS
DIFERENCIAS
INFRAESl'ECÍFICAS
EN
aTRIFOLIUM
SUBTERRANEUM»
L.
705
o
-
10'-
20-
30-
40-
50-
60-
70-
80-
90-
100-
C.
D.
M.B.
B.M.
T. G.
W.
Y
Fig.
1.—Diag ama
de las
bandas
de
p o eínn
de
semillas
de 8
cul i a es aus alianos
de
T i olium
sub e aneum
L. (C. -
Cla e
; D. -
Dwalganup
; M. B. -
Moun
Ba k -
;
b'. M. -
Bacchus
Ma sh;
T. -
Talla ook
; G. -
Ge alá on
; W. -
Woogenellup
; Y. -
Ya -
loop).
Las
in ensidades
de
inción
se
exp esa on,
en
o den c ecien e,
de la
siguien e
o ma:
in ensidad
1:
líneas
discon inuas
;
in ensidad
2:
lineas
de
azo
ino
;
in en-
sidad
3:
líneas
de
azo
g ueso
;
in ensidad
4:
líneas c uzadas
;
in ensidad
5:
bandas
neg as.
En el
es udio compa a i o
de las
bandas,
Boul e
y
col.
(4)
señala on
que
es
necesa io ene p esen e
lo
siguien e:
n)
e!
ex ac o
inicial
puede
con ene
un
g an
núme o
de
p o eínas
di e en es,
po lo que una
banda
puede
es a o mada
po más de una
p o eína
;
b~]
es
imposible
asegu a
que las
bandas si uadas
en la
misma posición
en
¿ elés
ob enidos
de
di e en es
axa
sean
debidas
a
p o eínas
iguales.
No
obs an e,
en el
caso
p esen e odo
el
ma e ial examinado
son
axa
in aespecí icos
con
bas-
an es
assjos
comunes.
79^
- I.KS
DE
EDAFOLOGÍA
Y
AGROBIOLOGÍA
Todos
los
cul i a es pueden dis ingui se cla amen e
po sus
bandas
de
p o eína
en
con as e
con lo
encon ado
po
IJinghan
y
Veh
(3) en
a iedades
y
poliploides pe enecien es
al
géne o
Medicado,
donde
la
mayo
di e encia
cuali a i a obse ada en e
odo
el
ma e ial
e a la
p e-
sencia
o
ausencia
de una
banda;
eniendo
en
cuen a es a banda podían
es ablece se
cua o
g upos,
den o
de los
cuales
ue
posible
sepa a
la
mayo ía
de las
a iedades sólo
en
azón
de la
di e encia
de
densidad
obse ada
en las
o as bandas.
Hemos
p escindido
de las
bandas
de la
zona inicial
po no se
ácil-
men e
homologables
debido
a su
ex ema
delgadez
y po
su i
algunas
al e aciones.
T A I! L A I
índices
de
simili ud
de las
bandas
de
p o eina
en e
8
cul i a es
de
"T i olium
sub e a-
neu n'
L.
(T.
-
Falla ook
:
B.
_V/.
-
Bacchus
Ma sh
;
G.
-
Ge ald on
;
M.
B.
-
Moun
ia ke
V.
-
Woogeneüiip:
D. -
Di alganup,
C. -
Cla e;
Y. -
Ya loop).
Se
señalan
con
neg i as
los
po cen ajes
iguales
o
supe io es
al
2í
po
100.
T
B.M.
G.
M.B.
W.
D. C. Y
••••(%%
50
m
38
41
W%
42
36
32
¡ü
41
32
41
28
•
21
23
28
25
19
Ü
18
19
28
31
13
31
W l//'
9
14
15
9
12
9
10
ü
T.
B.M.
G.
M.B.
W.
L/.
C.
Y
I.a
abla
1
mues a
los
índices
de
simili ud
de las
bandas
de
p o eína
en e odos
los
cul i a es.
F.l
índice
de
simili ud
más
ele ado
e-,
el
exis en e en e
los
cul i a es
Talla ook
y
Bacchus Ma sh,
."i l
po
100.
Los
cul i a es
Talla ook. Bacchus Ma sh. Ge ald on, Moun
Ba ke
y
Yoogenellup
es án
más
asociados en e
sí que
espec o
a las
o as o mas,
como
lo
pone
de
mani ies o
el que los
índices
de
simili ud
en e
ellos
oscilan
c'e un
2S
a un
."O
po
100.
siendo
alo es
más
al os
que los que
p esen an
espec o
a los
o os es cul i a es.
Dwalganup.
Cla e
y
Ya -
EST DlO
UK
LAS
DJl-'ERENCIAS
DIFEAESPKCÍFICA8
K.N
«TRIFOUL'M
SUBTERKAKBUMl
L. 797
loop. Es o concue da
con la
clasi icación
es ablecida
po
Ka /nelson
y
Mo ley,
que los
in oducen den o
de la
misma
subespecie,
ss >.
;,ul> i>-i i-
ncum,
y con los
da os
de
c uzamien o ob enidos
po
ellos
(1-J.
Exis e
una
excepción,
Aloun
Ba ke ,
que
iene
un
índice
de
simili ud
mayo
espec o
a
Cla e, pe enecien e
a la
ssp.
b achycalycinu n,
que
espec o
a
Woogenellup,
aunque
la
di e encia
no es muy
g ande.
Un
es udio
pa ecido, ealizado
po
Whi ney
y
col.
('23)
en
especies
pe ene-
cien es
a los
géne os
l'c icilliiim
y
Fi sa 'mm,
puso
de
mani ies o
una
mayo
di e encia
in e especí ica
que
ín e
gené ica,
explicando es e hecho
median e
la
hipó esis
de que la
elación
en e
la
semejanza
de
p o eínas
y
la
semejanza es ablecida
po
o os c i e ios
no es
lineal. Así, algunas!
p o eínas
e lejan
solamen e
di e encias
gené icas
meno es;
o as,
en
cambio,
e lejan
di e encias
gené icas
mayo es,
y
en e ellas puede habe
algunas p o eínas
de
apa iencia
di usa,
cuya
a iación
co esponde
a
g andes
di e encias
gené icas.
El
cul i a
Dwalganup,
que
Ka znelson
y
Mo ley
incluyen
en
la
ssp.
siib e aiiemn,
mues a,
con el
g upo
de
cul i a es menciona-
do
con
an e io idad, índices
de
simili ud no ablemen e
más
bajos, pa e-
ciendo
p esen a
una
posición in e media en e dicho g upo
y
Cla e,
aunque
iene
un
índice
de
simili ud
mayo
con
es e úl imo
(31 po
100j.
El
cul i a
Cla e, pe enecien e
a la
ssp.
b achycal 'dnnm,
p esen a
índices
de
simili ud
aún
meno es
en
elación
al
g upo
de
o mas an e io -
men e
ci ado,
excep o
el
caso
ya
mencionado
con
espec o
a
Aloun
Ba ke .
Es o ambién
coincide
con la
clasi icación
es ablecida.
En
el
caso
del
cul i a
Ya loop
los
índices
de
simili ud
son
bajos
espec o
a los
es an es cul i a es,
lo que
es á
de
acue do
con lo
encon-
ado
po los
au o es
ya
nomb ados,
que lo
incluyen
en la
ssp.
yaiinini-
ciim
y
ambién
con los
c uzamien os ealizados
po
ellos.
Un
hecho
que
pa ece opo uno esal a
es la
epe ibilidad
de los
esul ados
den o
de
cada cul i a ,
aun
usando semillas
de
dis in a p o-
cedencia
ob enidas
en
di e en e
época,
en
compa ación
con la
ma cada
di e encia
en e cul i a es.
Es o
concue da
con lo
obse ado
po Fox
y
col.
(9) en
Cy isns
scopa ius
(L.) Link p oceden es
de dos
localidades.
También
Ad iaanse
y
col. (1),
en un
es udio
e ec uado
en 32
cul i a es
de
Pl aseohis
ulga ís
L..
es ablecie on
que los
elec o o eg amas
de
p o eína
no
pa ecían a ec ados
po las
condiciones ex e nas,
ales
como
la
e ilización
con
ni ógeno,
condiciones
climá icas
y
p opiedades
del
suelo.
La sen
(15) es udió
61
a iedades
de
soja, encon ando modelos
de
banda
muy
ep oduc ibles
y
uni o mes den o
de
cada a iedad,
que
no se
eían
a ec adas
po
año, localidad
o
se ie
de
sepa ación elec o-
o é ica.
El
g an
núme o
de
bandas
y el
hecho
de que los
índices
de
simili ud
en e
los
cul i a es
no
sob epasen
el
alo
del 50 po 100
e leja
la
g an
he e ogeneidad
de la
especie
ya
comen ada
po
di e sos au o es.
Los
esul ados ob enidos es án
de
acue do
con las
subespecies
798
ANALES
DE
EDAFOLOGÍA
Y
AGROBIOLOGÍA
que
Ka znelson
y
Mo le n asociando cie as
ba e as
de
es e ilidad
con
de e minadas
ca ac e ís icas
mo ológicas
; sin
emba go,
es as
ba e as
exis en ambién
y
además
muy
di undidas
en e
nume o-
sas
poblaciones
que no se
pueden
sepa a
po
los
ca ac e es
mo o-
lógicos.
Un
hecho
impo an e
en los
p ocesos
de
subespeciación
ha
sido
la
au ogamia
casi absolu a
de
odas
las
o mas
de
ébol
sub e áneo,
lo
que
acili a
la
ijación
de las
al e aciones
c omosómicas
y los
cambios
gené icos.
Es o
causa
una
di e gencia p og esi a
y da
ca ac e ís icas
de
mosaico
a la
es uc u a
de la
a iación
de la
especie.
Concluyendo,
el
mé odo
u ilizado
pa ece
muy
adecuado
pa a
la
'den-
i icación
de
cul i a es
de
ébol sub e áneo
a
pa i
de las
semillas.
Iden i icación
que es
di ícil
sin
es e
sis ema,
pues
exige
en
algunos
de
ellos
la
obse ación
de
la
plan a
en
a ios es adios
de su
ciclo
y
una
des-
c ipción
muy
de allada
que no
puede
se
obje i a
y
además
con
ecuencia
di ícil
de
in e p e a .
Es a
aplicación
puede
ene
in e és
inmedia o,
siendo
ácil
la
com-
pa ación
de los
esul ados;
las
posibilidades
de
con usión
en e
cul i a-
es
son
pequeñas,
dadas
las
ca ac e ís icas
muy
indi iduales
de
cada
p o einog ama,
Ag adecimien o
El
au o
ag adece
al
P o .
D .
F.
González
Be náldez,
ca ed á ico
de
Ecología
de la
Uni e sidad
de
Se illa,
la
ayuda p es ada
pa a
la
ealización
de
es e
abajo.
R K ? U M
K
N
Las
p o eínas
de las
semillas
oe
ocho
cul i a es
pe enecien es
a las
es
subespecies
de
T i olium
sub e aneiim
L. se
sepa a on
median e elec o o esis
en
ge!es
de
poliac i-
lamida.
El
núme o
de
bandas
de ec adas
po
es e p ocedimien o
e a
ele ado, como
e leja
el
diag ama adjun o.
Todos
los
cul i a es
pudie on di e encia se
po sus
bandas.
Los
esul ados e an ep oducibles incluso
en
cul i a es
en los que se
usa on
semillas
de
dis in a p ocedencia
y
ob enidas
en
época di e en e.
Es
no able
el
con as e
en e
la
cons ancia
del
elec o o eg ama ob enido den o
de
cada es i pe
con la
a iabilidad
de
dicho
elec o o eg ama
en e es i pes.
Se
es ablecie on
los
índices
¿e
simili ud
de las
bandas
de
p o eína
en e
los
di e-
en es cul i a es.
Los
esul ados
ob enidos
se
discu ie on
con
los
p opo cionados
po
es udios mo o-
lógicos
y
gené icos
de
o os au o es.
Finalmen e
se
señala
el
in e és
del
7iié odo
pa a
la
ápida
iden i icación
de
cul i a es.
Sección
de
Kco isiología
l'egc al.
Ins i u o
de
I-'ila olagia
y
Biología
Vege al.
Mad id.