De ección de micoplasmas
hemo ópicos en pe os con
sospecha de hemopa ógenos
de Galicia: ac o es de iesgo
y e ec o en el hema oc i o.
Xiana Pé ez Ga cía
Facul ad de Ve e ina ia
G ado en Ve e ina ia
Año 2024
Modalidad del T abajo: Expe imen al
T abajo de
Fin de
G ado
Licencia
Excep o donde se haga cons a explíci amen e, es a ob a pe enece a Xiana Pé ez Ga cía y es á
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De ección de micoplasmas hemo ópicos en pe os con sospecha de hemopa ógenos de Galicia:
ac o es de iesgo y e ec o en el hema oc i o. © 2024 by Xiana Pé ez Ga cía is licensed
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RESUMEN
Los micoplasmas hemo ópicos (hemoplasmas) son bac e ias epicelula es obligadas que in ec an
los glóbulos ojos de una amplia a iedad de mamí e os, pudiendo causa anemia hemolí ica de
g a edad a iable. En el pe o se desc iben dos especies: Mycoplasma haemocanis y “Candida us
Mycoplasma haema opa um”. En ellos, la in ección suele ene un cu so c ónico asin omá ico,
pe o la esplenec omía y la inmunosup esión a o ecen el desa ollo de una in ección aguda
mani ies a.
Los obje i os de es e abajo ue on de e mina la p esencia de micoplasmas hemo ópicos en
pe os con sospecha clínica de in ección po hemopa ógenos, iden i ica las especies de ec adas
molecula men e y de e mina si cie os ac o es in luyen en la p esencia de es os pa ógenos.
Además, se e aluó el e ec o de los micoplasmas hemo ópicos sob e el alo del hema oc i o en
in ecciones únicas y en coin ección con Babesia spp.
Pa a ello se analiza on 60 ex acciones de ADN ob enidas de mues as de sang e de pe os de
Galicia con sospecha clínica de in ección po hemopa ógenos median e PCR con encional pa a
la de ección de hemoplasmas. Pos e io men e, las mues as posi i as se secuencia on y se es udió
su a iabilidad gené ica median e la cons ucción de un á bol ilogené ico. A con inuación, con
los da os ecogidos de cada animal (edad, sexo, ap i ud, in ección po Babesia spp., hema oc i o),
se ealizó un análisis es adís ico pa a alo a los posibles ac o es de iesgo y el e ec o de la
in ección sob e el hema oc i o en in ecciones únicas o mix as con Babesia spp.
Un o al de 14 mues as (23,3%) esul a on posi i as, y las especies encon adas ue on: “Ca. M.
haema opa um” (20%) y M. haemocanis (3%). El análisis es adís ico no mos ó una asociación
signi ica i a en e la edad, el sexo y la coin ección con Babesia spp. espec o a la posi i idad po
hemoplasmas; sin emba go, la ap i ud de caza se asoció signi ica i amen e con una mayo asa de
in ección. Además, se de e minó que los micoplasmas hemo ópicos, solos o en coin ección con
Babesia spp., no mues an un e ec o signi ica i o sob e el alo del hema oc i o.
Es e abajo ep esen a el p ime es udio molecula de la ocu encia de es as in ecciones en pe os
de Galicia, y en él se de ec a on las dos especies de micoplasmas hemo ópicos conside adas
p opias de la especie canina. Además, el análisis es adís ico e ue za la idea de que la ansmisión
de es os pa ógenos se p oduce a a és de ec o es, ya que los pe os de hábi a u al, como los
de caza, p esen a on una mayo asa de in ección. Sin emba go, los micoplasmas hemo ópicos
no pa ecen ene una g an capacidad pa ógena, ya que su p esencia no se asoció con un meno
alo de hema oc i o, an o en in ecciones únicas como en coin ecciones con Babesia spp.
Palab as cla e: micoplasmas hemo ópicos, pe os, PCR, ac o es de iesgo, hema oc i o,
coin ección.
RESUMO
Os micoplasmas hemo ópicos (hemoplasmas) son bac e ias epicelula es ob igadas que in ec an
os glóbulos e mellos dunha ampla a iedade de mamí e os, podendo causa anemia hemolí ica
de g a idade a iable. No can desc íbense dúas especies: Mycoplasma haemocanis e “Candida us
Mycoplasma haema opa um”. Neles, a in ección adoi a e un cu so c ónico asin omá ico, pe o
a esplenec omía e a inmunosup esión a o ecen o desen ol emen o dunha in ección aguda
mani es a.
Os obxec i os des e aballo o on de e mina a p esenza de micoplasmas hemo ópicos en cans
con sospei a clínica de in ección po hemopa óxenos, iden i ica as especies de ec adas
molecula men e e de e mina se ce os ac o es in lúen na p esenza des es pa óxenos. Ademais,
a aliouse o e ec o dos micoplasmas hemo ópicos sob e o alo do hema oc i o en in eccións
únicas e en coin ección con Babesia spp.
Pa a iso analizá onse 60 ex accións de ADN ob idas de mos as de sangue de cans de Galicia
con sospei a clínica de in ección po hemopa óxenos median e PCR con encional pa a a
de ección de hemoplasmas. Pos e io men e, as mos as posi i as secuenciá onse e es udouse a
súa a iabilidade xené ica median e a cons ución dunha á bo e iloxené ica. A con inuación, cos
da os ecollidos de cada animal (idade, sexo, ap i ude, in ección po Babesia spp., hema oc i o),
ealizouse unha análise es a ís ica pa a alo a os posibles ac o es de isco e o e ec o da in ección
sob e o hema oc i o en in eccións únicas ou mix as con Babesia spp.
Un o al de 14 mos as (23,3%) esul a on posi i as, e as especies a opadas o on: “Ca. M.
haema opa um” (20%) e M. haemocanis (3%). A análise es a ís ica non mos ou unha asociación
signi ica i a en e a idade, o sexo e a coin ección con Babesia spp. espec o á posi i idade po
hemoplasmas; con odo, a ap i ude de caza asociouse signi ica i amen e cunha maio axa de
in ección. Ademais, de e minouse que os micoplasmas hemo ópicos, sós ou en coin ección con
Babesia spp., non mos an un e ec o signi ica i o sob e o alo do hema oc i o.
Es e aballo ep esen a o p imei o es udo molecula da oco encia des as in eccións en cans de
Galicia, e nel de ec á onse as dúas especies de micoplasmas hemo ópicos conside adas p opias
da especie canina. Ademais, a análise es a ís ica e o za a idea de que a ansmisión des es
pa óxenos p odúcese a a és de ec o es, xa que os cans de hábi a u al, como os de caza,
p esen a on unha maio axa de in ección. Con odo, os micoplasmas hemo ópicos non pa ecen
e unha g an capacidade pa óxena, xa que a súa p esenza non se asociou cun meno alo de
hema oc i o, an o en in eccións únicas como en coin ecciones con Babesia spp.
Palab as cha e: micoplasmas hemo ópicos, cans, PCR, ac o es de isco, hema oc i o,
coin ección.
ABSTRACT
Hemo opic mycoplasmas (hemoplasmas) a e obliga e epicellula bac e ia ha in ec he ed
blood cells o a wide a ie y o mammals, po en ially causing hemoly ic anemia o a ying
se e i y. In dogs, wo species a e desc ibed: Mycoplasma haemocanis and “Candida us
Mycoplasma haema opa um.” In hese animals, he in ec ion usually has a ch onic
asymp oma ic cou se, bu splenec omy and immunosupp ession a o he de elopmen o an
acu e mani es in ec ion.
The objec i es o his s udy we e o de e mine he p esence o hemo opic mycoplasmas in dogs
wi h clinical suspicion o hemopa hogen in ec ion, iden i y he molecula ly de ec ed species, and
de e mine i ce ain ac o s in luence he p esence o hese pa hogens. Addi ionally, he e ec o
hemo opic mycoplasmas on hema oc i le els was e alua ed in single in ec ions and coin ec ions
wi h Babesia spp.
To his end, 60 DNA ex ac ions ob ained om blood samples o dogs om Galicia wi h clinical
suspicion o hemopa hogen in ec ion we e analyzed using con en ional PCR o he de ec ion o
hemoplasmas. Subsequen ly, posi i e samples we e sequenced, and hei gene ic a iabili y was
s udied by cons uc ing a phylogene ic ee. Then, wi h he da a collec ed om each animal (age,
sex, ap i ude, in ec ion wi h Babesia spp., hema oc i ), a s a is ical analysis was pe o med o
assess possible isk ac o s and he e ec o he in ec ion on hema oc i in single o mixed
in ec ions wi h Babesia spp.
A o al o 14 samples (23.3%) es ed posi i e, and he species ound we e: “Ca. M.
haema opa um” (20%) and M. haemocanis (3%). S a is ical analysis did no show a signi ican
associa ion be ween age, sex, and coin ec ion wi h Babesia spp. conce ning hemoplasma
posi i i y; howe e , hun ing ap i ude was signi ican ly associa ed wi h a highe in ec ion a e.
Fu he mo e, i was de e mined ha hemo opic mycoplasmas, alone o in coin ec ion wi h
Babesia spp., do no show a signi ican e ec on hema oc i le els.
This s udy ep esen s he i s molecula in es iga ion o he occu ence o hese in ec ions in
dogs om Galicia, de ec ing he wo species o hemo opic mycoplasmas conside ed
cha ac e is ic o he canine species. Addi ionally, he s a is ical analysis ein o ces he idea ha
he ansmission o hese pa hogens occu s h ough ec o s, as u al habi a dogs, such as hun ing
dogs, showed a highe in ec ion a e. Howe e , hemo opic mycoplasmas do no seem o ha e a
high pa hogenic capaci y, as hei p esence was no associa ed wi h lowe hema oc i le els, bo h
in single in ec ions and coin ec ions wi h Babesia spp.
Keywo ds: hemo opic mycoplasmas, dogs, PCR, isk ac o s, hema oc i , coin ec ion.

ÍNDICE
1. INTRODUCCIÓN .............................................................................................................. 8
1.1 E iología ........................................................................................................................... 8
1.2 Epidemiología .................................................................................................................. 9
1.2.1 Dis ibución geog á ica ........................................................................................... 9
1.2.2 Hospedado es ........................................................................................................ 10
1.2.3 T ansmisión ........................................................................................................... 11
1.2.4 Fac o es de iesgo ................................................................................................. 12
1.3 Pa ogenia ........................................................................................................................ 14
1.4 Signos clínicos ................................................................................................................ 15
1.5 Diagnós ico ..................................................................................................................... 15
1.5.1 Hemog ama y bioquímica ..................................................................................... 15
1.5.2 Examen ci ológico ................................................................................................. 16
1.5.3 PCR ...................................................................................................................... 17
1.6 T a amien o .................................................................................................................... 17
1.7 P e ención y con ol ...................................................................................................... 18
2. OBJETIVOS ..................................................................................................................... 19
3. MATERIAL Y MÉTODOS ............................................................................................. 20
3.1 O igen y ca ac e ís icas de las mues as incluidas.......................................................... 20
3.2 Análisis de labo a o io .................................................................................................... 21
3.2.1 PCR con encional ................................................................................................. 21
3.2.2 Secuenciación del ADN ....................................................................................... 23
3.3 Análisis ilogené ico ...................................................................................................... 24
3.3.1 Iden i icación de las especies de micoplasmas hemo ópicos ............................... 24
3.3.2 Alineamien o y cons ucción del á bol ilogené ico .............................................. 24
3.4 Análisis es adís ico ........................................................................................................ 26
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ...................................................................................... 27
4.1 Ca ac e ís icas de la población mues eada ................................................................... 27
4.2 P esencia de micoplasmas hemo ópicos ....................................................................... 27
4.3 Especies de micoplasmas hemo ópicos y análisis ilogené ico ..................................... 29
4.4 Ca ac e ís icas de la población posi i a a micoplasmas hemo ópicos y análisis de los
ac o es de iesgo asociados .......................................................................................... 31
4.5 E ec o de los micoplasmas hemo ópicos sob e el hema oc i o y análisis del e ec o de la
coin ección con Babesia spp. ......................................................................................... 35
5. CONCLUSIONES ........................................................................................................... 38
6. BIBLIOGRAFÍA .............................................................................................................. 39
ADN: Ácido desoxi ibonucleico.
AIC: Akaike In o ma ion C i e ion.
ARN: Ácido ibonucleico.
ARN : Ácido ibonucleico ibossomal.
BLAST: Basic Local Alignmen Sea ch Tool.
Ca.:“Candida us”.
CMhp: “Candida us Mycoplasma haema opa um”.
EDTA: Ácido e ilendiamino e aacé ico.
EE.UU.: Es ados Unidos.
F: o wa d.
HCT: hema oc i o.
INVESAGA: In es igación en Sanidade Animal de Galicia.
Mhc: Mycoplasma haemocanis.
Mh : Mycoplasma haemo elis.
NCBI: Na ional Cen e o Bio echnology In o ma ion.
pb: pa de bases.
PCR: eacción en cadena de la polime asa.
qPCR: PCR en iempo eal.
R: e e se.
pm: e oluciones po minu o.
TAE: T is, ace a o y EDTA.
TR + I + G: Gene al Time Re e sible + In a ian si es + Gamma-dis ibu ed.
UI: unidades in e nacionales.
ÍNDICE DE ABREVIATURAS
1. INTRODUCCIÓN
Los micoplasmas hemo ópicos, comúnmen e conocidos como hemoplasmas, son un g upo de
bac e ias g amnega i as de pequeño amaño, no cul i ables y sin pa ed celula que in ec an los
glóbulos ojos de una amplia a iedad de mamí e os, pudiendo causa en ellos una anemia
hemolí ica de g a edad a iable (Ba ke y Taske , 2022).
Las p incipales especies que in ec an a los animales de compañía son Mycoplasma haemocanis y
“Candida us Mycoplasma haema opa um” en el pe o, y Mycoplasma haemo elis, “Candida us
Mycoplasma haemominu um” y “Candida us Mycoplasma u icensis” en el ga o. En es a especie,
M. haemo elis se conside a el agen e causal de la anemia in ecciosa elina (Sykes y Taske , 2014),
mien as que la mayo ía de pe os in ec ados po hemoplasmas p esen an in ecciones c ónicas
asin omá icas (Willi e al., 2010).
1.1 E iología
Los micoplasmas hemo ópicos ue on desc i os po p ime a ez en 1921 po M. Maye , quien
p opuso el é mino Ba onella mu is pa a e e i se a los cue pos de inclusión obse ados en los
glóbulos ojos de una a a de labo a o io a ec ada po anemia se e a (Maye , 1921; e isado po
Nei z, 1938). Años más a de, W. Kiku h (1928) iden i icó un pa ógeno simila en un pe o
esplenec omizado, que denominó Ba onella canis, y R. Cla k (1942) designó como
Epe y h ozoon elis al pa ógeno causan e de un cuad o anémico ulminan e en un ga o.
O iginalmen e, los hemoplasmas ue on clasi icados den o de los géne os Haemoba onella y
Epe y h ozoon (o den Ricke siales, amilia Anaplasma aceae) debido a su opismo e i oci a io,
pequeño amaño y p esun a ansmisión po a ópodos (K eie y Ris ic, 1984, e isado po Willi
e al., 2007). Sin emba go, análisis ilogené icos pos e io es basados en la secuenciación del gen
que codi ica el ARN ibosomal 16 S (ARN 16S) e ela on que, en ealidad, es os o ganismos
es aban más es echamen e elacionados con los micoplasmas, con los que compa ían
ca ac e ís icas eno ípicas como su pequeño amaño, la ausencia de pa ed celula y los exigen es
equisi os de c ecimien o (Neima k y Kocan, 1997; Rikihisa e al., 1997). Es o condujo a su
eclasi icación den o del géne o Mycoplasma (o den Mycoplasma ales, amilia
Mycoplasma aceae) (Neima k e al., 2001). Sin emba go, es e géne o se ca ac e izaba po
albe ga especies bac e ianas como M. pneumoniae o M. geni alium, que colonizan epi elios
mucosos, p esen ando un opismo muy di e en e en compa ación con los hemoplasmas (Ba ke
y Taske , 2022). Un es udio ilogené ico pos e io basado en los genes gapA y dnaK sugi ió que,
aunque los hemoplasmas pe enecen a la amilia Mycoplasma aceae, es os debe ían con o ma
un géne o sepa ado (Hicks e al., 2014).
Debido a sus exigen es ca ac e ís icas de c ecimien o, los micoplasmas hemo ópicos no pueden
se cul i ados in i o. Es o limi a su ca ac e ización eno ípica comple a, lo que hace necesa io
que el p e ijo "Candida us" se aplique a los hemoplasmas ecién desc i os has a que se disponga
de más in o mación que espalde su clasi icación (Neima k e al.; 2001, 2002).
En el caso del pe o, obje o de es e abajo, se han desc i o p incipalmen e dos especies de
hemoplasmas: Mycoplasma haemocanis (Mhc) y “Ca. M. haema opa um” (CMhp) (Kiku h,
1928; Sykes e al., 2005). De mane a análoga a lo desc i o pa a o os hemoplasmas, se a a de
o ganismos g amnega i os, sin pa ed celula y pleomó icos. Es os pa ógenos son
epie i oci a ios obligados y se encuen an adhe idos a la supe icie del e i oci o, donde pueden
encon a se indi idualmen e o ag upados en cadenas (Messik, 2004).
Mhc es un hemoplasma ela i amen e g ande, con un diáme o de 0,3 a 2 µm, y se ca ac e iza po
ag upa se o mando la gas cadenas de o ganismos en la supe icie de los e i oci os, aunque
ambién puede apa ece indi idualmen e (Messick e al., 2002; Venable y Ewing, 1968). P esen a
g andes simili udes gené icas espec o a M. haemo elis (Mh ), habiéndose hipo e izado que uesen
una misma especie (B inson y Messick, 2001), pe o es udios pos e io es basados en el análisis de
secuencias gené icas pa ciales y del genoma comple o pe mi ie on di e encia los como especies
dis in as (Bi kenheue e al., 2002; Do Nascimen o e al., 2012).
Po o a pa e, CMhp se asemeja a “Ca. M. haemominu um” an o mo ológica como
gené icamen e, p esen ando un amaño uni o memen e pequeño de ap oximadamen e 0,3 µm de
diáme o y no ag upándose en cadenas. De mane a simila a lo desc i o pa a Mhc y Mh , a pesa
de sus simili udes, los análisis ilogené icos pe mi ie on dis ingui las como especies dis in as
(Sykes e al., 2005).
1.2 Epidemiología
1.2.1 Dis ibución geog á ica
Los micoplasmas hemo ópicos, incluyendo M. haemocanis y “Ca. M. haema opa um”,
p esen an dis ibución mundial, habiéndose desc i o casos en odos los con inen es. De o ma
gene al, M. haemocanis es la especie más p e alen e (Ba ke y Taske , 2016).
En los di e en es es udios epidemiológicos basados en la eacción en cadena de la polime asa
(PCR), la p e alencia no i icada pa a la hemoplasmosis canina a ía ampliamen e, con angos
que oscilan en e el 1,2% (Wengi e al., 2008) y el 56,7 % (Beus e al., 2024). Es a a iabilidad
pod ía a ibui se a dis in os ac o es, como la di e en e clima ología de las á eas es udiadas, las
ca ac e ís icas de la población mues eada (es ado clínico, ap i ud o exposición a ec opa ási os) y
las di e encias en la sensibilidad diagnós ica de los ensayos de PCR u ilizados (Aquino e al.,
1.5.2 Examen ci ológico
La iden i icación de micoplasmas hemo ópicos median e mic oscopía óp ica en o is sanguíneos
es posible, pe o p esen a una sensibilidad baja (0-37%), ya que pa a log a su isualización es
necesa io que es én p esen es en sang e una g an can idad de mic oo ganismos. Su especi icidad
ambién es limi ada, ya que es necesa io dis ingui los hemoplasmas de posibles p ecipi ados de
inción, a e ac os de desecación y pequeños cue pos de Howell-Jolly. Desde un pun o de is a
écnico, pa a lle a a cabo es e mé odo diagnós ico debe emplea se sang e esca, ya que las
bac e ias ienden a desp ende se de los e i oci os a las pocas ho as de la ex acción. Asimismo,
la mues a debe eñi se de o ma cuidadosa pa a e i a la apa ición de alsos posi i os asociados
a a e ac os de inción. Las inciones de ipo Romanowsky son las más u ilizadas pa a es e
p opósi o (Sykes y Taske , 2014).
Típicamen e, los micoplasmas se isualizan en la supe icie de los glóbulos ojos, de o ma
indi idual, en pa es, o ag upados o mando cadenas. En elación con es o, M. haemocanis iene
cie a endencia a ag upa se en cadenas (Figu a 1), po lo que la iden i icación de igu as
compa ibles es ela i amen e más sencilla; en cambio, “Ca. M. haema opa um”, con su meno
amaño (0,3 µm) y una disposición ípicamen e indi idual o en pa es, iende a pasa desape cibido
con mayo acilidad (Ba ke y Taske , 2022; Messick y Ha ey, 2012). Además de la
isualización del pa ógeno, en el examen ci ológico ambién se pueden obse a hallazgos ípicos
de la en e medad, como anisoci osis, polic omasia, isualización de cue pos de Howell – Jolly y
p esencia de au oaglu inación (Sykes y Taske , 2014).
Figu a 1. F o is de p oceden e de un pacien e canino in ec ado po M.
haemocanis. Tinción Di -Quick, 100X. Las lechas neg as señalan la
disposición indi idual de los mic oo ganismos a lo la go de la supe icie
e i oci a ia, mien as que las lechas ojas mues an su ag upación ca ac e ís ica
en cadenas. Ex aído de Kim e al. (2020).

1.5.3 PCR
La eacción en cadena de la polime asa es la p ueba de elección pa a el diagnós ico de la in ección
po micoplasmas hemo ópicos en el pe o, ya que p esen a una sensibilidad muy supe io a la
ci ología. Sin emba go, es impo an e ene en cuen a que la PCR pod ía no de ec a o ganismos
en es ados de in ección subclínica, donde el animal p esen a un bajo núme o de mic oo ganismos
en la sang e (Ba ke y Taske , 2022; C iado – Fo nelio e al., 2003; Jensen e al., 2001).
Se pueden emplea an o la PCR con encional como la PCR en iempo eal (qPCR) (Ba ke e
al., 2010; C iado – Fo nelio e al., 2003; Sha i iyazdi e al., 2016; Willi e al., 2009). En su
mayo ía, los ensayos se basan en la de ección de segmen os del gen ARN 16S especí icos, pe o,
mien as que la PCR con encional sólo in o ma sob e la p esencia del pa ógeno, la qPCR apo a
además in o mación cuan i a i a, pe mi iendo ealiza un seguimien o de la in ección y e alua
la espues a al a amien o (Pi o i e al., 2020). No obs an e, debido al ecuen e ca ác e
subclínico de la hemoplasmosis en pe os, un esul ado posi i o de PCR debe in e p e a se con
cau ela, conside ando siemp e los signos clínicos, el his o ial del pacien e y la posible p esencia
de en e medades concu en es o es ados de inmunosup esión (Ba ke y Taske , 2022).
1.6 T a amien o
En cuan o a la e apia an imic obiana especí ica, el empleo de e aciclinas (doxiciclina,
oxi e aciclina) o luo oquinolonas (en o loxacina, ma bo loxacina) du an e 3 – 4 semanas se
asocia de mane a gene al con una mejo ía clínica, aunque no siemp e log a la eliminación
comple a de la in ección (Ba ke y Taske , 2022; Hulme – Moi e al., 2010; Kim e al., 2020;
Lapsina e al., 2023; Pi o i e al., 2012). No malmen e, la doxiciclina es el á maco de p ime a
elección, y se adminis a a una dosis de 5 - 10 mg/kg cada 24 ho as po ía o al (Messick, 2003;
Zobba e al., 2020). En algunos casos, los a amien os se ex ienden du an e 6 – 8 semanas pa a
inc emen a la p obabilidad de e adica la in ección; sin emba go, no exis e ningún plan
e apéu ico que ga an ice la eliminación comple a de la in ección po micoplasmas hemo ópicos
en ninguna especie. Dado que la espues a al a amien o no puede p edeci se de mane a empí ica,
idealmen e debe ía moni o iza se median e qPCR pa a asegu a que el núme o de
mic oo ganismos es á disminuyendo. No obs an e, es o puede no se necesa io si el animal
mues a una espues a ápida a o able al a amien o (Ba ke y Taske , 2022).
Además de la e apia especí ica, en algunos casos puede se necesa io un a amien o de sopo e.
Po ejemplo, el empleo de glucoco icoides se ha suge ido pa a abo da el posible componen e
inmunomediado de la anemia; no obs an e, su uso gene a con o e sia, ya que, po un lado, su
adminis ación a dosis inmunosup eso as ha demos ado induci un aumen o en el núme o de
hemoplasmas (Taske , 2020) y, po o o, la mayo ía de pe os no suelen mos a dicho
componen e inmunomediado (Ba ke y Taske , 2016; Wa man e al., 2010). Po lo an o, su
u ilización u ina ia no es á ecomendada, ese ándose pa a aquellos casos en los que el animal
no esponde a la e apia an imic obiana o p esen a e idencia de anemia inmunomediada. El
a amien o de sopo e ambién incluye la adminis ación de luido e apia in a enosa pa a
co egi la deshid a ación, así como la ans usión de sang e o de concen ado de hema íes en
aquellos animales que p esen en signos de anemia descompensada ( aquica dia, debilidad,
aquipnea, acidosis me abólica) (Ba ke y Taske , 2022).
En gene al, si se ins au a el a amien o adecuado, el p onós ico de la hemoplasmosis en pe os
suele se a o able, mos ando una mejo ía clínica en 2 -3 días (Taske , 2020). En algunos casos,
los animales son e ac a ios a la e apia an imic obiana inicial, lo cual puede eque i el cambio
de an ibió ico o la adición de un segundo an imic obiano (Hulme – Moi e al., 2010). Sin
emba go, a pesa de log a la emisión de la en e medad, en muchos casos los animales con inúan
in ec ados como po ado es c ónicos (Ba ke y Taske , 2022; Zobba e al. 2020).
1.7 P e ención y con ol
En la ac ualidad no exis en acunas come ciales especí icas disponibles pa a p e eni las
in ecciones po micoplasmas hemo ópicos en ninguna especie. Po an o, se debe conside a
como medida p e en i a p incipal el con ol de los ec o es median e la despa asi ación egula
con a ec opa ási os (Ba ke y Taske , 2016; 2022). Se ecomienda especialmen e el uso de
ec opa asi icidas del g upo de las isoxazolinas como lu alane y lo ilane , ya que, además de se
e ec i os en e a pulgas y ga apa as, ambién lo son con a los áca os de la sa na, que han sido
asociados como un ac o de iesgo pa a la hemoplasmosis canina (No acco e al., 2010; Zhou e
al., 2022). Asimismo, en los colec i os donde la in ección sea endémica, se ecomienda e i a las
in e acciones ag esi as en e pe os, dado que es as pueden acili a la ansmisión del pa ógeno
(Huggings e al., 2023).
Po o a pa e, dada la posibilidad de ansmisión ia ogénica, es ecomendable ealiza p uebas
de de ección de hemoplasmas median e PCR en pe os que ac úen como donan es de sang e
(Sykes y Taske , 2014), especialmen e en países con al as asas de p e alencia, si el donan e iene
un his o ial de exposición a ec o es a ópodos o si el pe o ecep o ha sido esplenec omizado
(Wengi e al., 2008). De igual mane a, se debe ía conside a la ealización u ina ia de PCR pa a
la de ección de hemoplasmas en pacien es que ayan a se esplenec omizados o que es én bajo
a amien o con á macos inmunosup eso es, con el in de p e eni el ec udecimien o de una
posible in ección c ónica (B inson y Messick, 2001).
2. OBJETIVOS
Con lo que se ha desc i o an e io men e, los obje i os p opues os en el p esen e T abajo de Fin
de G ado ue on los siguien es:
- Es udia la p esencia de di e en es especies de micoplasmas hemo ópicos en pe os de
Galicia con sospecha clínica de in ección po hemopa ógenos.
- De e mina la in luencia de la edad, el sexo, la ap i ud y la coin ección con Babesia spp.
sob e la p esencia de micoplasmas hemo ópicos en pe os.
- E alua la elación en e la in ección simple po micoplasmas hemo ópicos y la coin ección
con Babesia spp. con espec o al alo de hema oc i o en pe os con sospecha de in ección
po hemopa ógenos.
3. MATERIAL Y MÉTODOS
3.1 O igen y ca ac e ís icas de las mues as incluidas
El p esen e es udio se lle ó a cabo en e diciemb e de 2023 y ma zo de 2024. Du an e es e
pe iodo, se analiza on un o al de 60 mues as de sang e de pe os p oceden es de di e en es
municipios de Galicia, en su mayo ía de la p o incia de Lugo (Figu a 2).
Las mues as de sang e incluidas en es e abajo habían sido ecolec adas p e iamen e, en e los
años 2021 y 2022, g acias a la colabo ación de dos clínicas e e ina ias ubicadas en el á ea de
Lugo. En es as clínicas, se selecciona on aquellos animales que acudían a consul a con sospecha
de in ección po hemopa ógenos, basándose en la p esencia de signos clínicos compa ibles
(mucosas pálidas, ano exia, decaimien o) e his o ial de exposición a ambien es con p esencia de
ec o es. Las mues as se ob u ie on median e punción enosa y se en ia on en e ige ación al
labo a o io del g upo INVESAGA de la Facul ad de Ve e ina ia de Lugo en ubos con
an icoagulan e EDTA. Las clínicas de o igen egis a on la edad, sexo y ap i ud de cada animal
mues eado, y es a in o mación ue ecogida en una base de da os. Adicionalmen e, se adjun ó el
hemog ama de cada animal, ob enido en ambas clínicas con el analizado hema ológico P oCy e
Dx, IDEXX. Se egis ó el alo de hema oc i o en es a misma base de da os da os, y se
conside a on anémicos aquellos animales con un alo in e io al 37,3% de acue do con los
alo es de e e encia indicados po el ab ican e. En seis animales no ue posible ecoge es a
in o mación.
A Co uña
A Fonsag ada
Cas o de Rei
Gun ín
Pa adela
Ribei a de Piquín
A Pas o iza
Bece eá
Cas o e de
F iol
Sa ia
Ou ei o de Rei
O Co go
Lugo
Figu a 2. Mapa de Galicia mos ando la localización de los municipios de
p ocedencia de los pe os mues eados. Los di e en es onos de azul/ g is y su núme o
co espondien e indican la can idad de mues as ecolec adas en cada municipio.
Una ez en el labo a o io y siemp e en las 48 ho as pos e io es a la ecogida, las mues as de
ADN se some ie on a una ex acción de ADN con un ki come cial (High Pu e PCR Templa e
P epa a ion Ki , Roche Diagnos ics GmbH, Mannheim, Alemania), y pos e io men e se
analiza on pa a la p esencia de Babesia spp. median e PCR con encional den o del ma co de
o o p oyec o de in es igación, ca ac e izando aquellas mues as posi i as has a el ni el de
especie. De es a mane a, pa a el p esen e es udio se dispuso de dichas ex acciones de ADN, que
se encon aban almacenadas a -20 ºC, así como del esul ado de la p esencia de Babesia spp. en
las mismas y su iden i icación a ni el de especie.
3.2 Análisis de labo a o io
3.2.1 PCR con encional
Las mues as de ADN ob enidas p e iamen e se analiza on median e PCR con encional pa a la
de ección de micoplasmas hemo ópicos. Pa a ello, se emplea on cebado es p e iamen e desc i os
que emplean como diana el gen ARN 16S y que pe mi en ampli ica cualquie especie de
hemoplasma (C iado – Fo nelio e al., 2003). Los eac i os empleados pa a la ealización de la
PCR y la concen ación de cada uno pueden obse a se en la abla 2. El p ocedimien o comple o
de PCR se lle ó a cabo de la siguien e mane a:
1. P epa ación de la mezcla maes a (Mas e Mix). Se p epa ó una mezcla maes a con los
eac i os necesa ios pa a la eacción de PCR. Cada eac i o se añadió en un ubo de
mic ocen í uga de 1,5 ml, u ilizando las concen aciones inales que se de allan en la Tabla
2. A con inuación, la mezcla se homogeneizó en un agi ado de ubos y se cen i ugó a
13000 pm du an e 10 s.
2. P epa ación de los ubos de eacción. Se o uló un núme o de mic o ubos de 0,2 ml
equi alen e al núme o de mues as a p ocesa , y a con inuación se añadie on 47 µl de la
Mas e Mix a cada uno de ellos. Pos e io men e, se ag ega on 3 µl de mues a de ADN o
con ol posi i o/nega i o a su ubo co espondien e, pa a un olumen inal po mues a de
50 µl. Como con ol nega i o se empleó agua bides ilada es é il (MO BIO Labo a o ies
Inc., Ca lsbad, EE.UU.), y como con ol posi i o se u ilizó una mues a posi i a a
Mycoplasma wenyonii p e iamen e iden i icada median e secuenciación. Una ez
p epa ados, los ubos se cen i uga on a 1600 pm du an e 1 minu o.
3. Ampli icación po PCR. Los ubos de eacción se in oduje on en un e mociclado Bio-
Rad T100 (Bio-Rad Labo a o ies Inc., He cules, EE.UU.) pa a lle a a cabo la
ampli icación del ADN p esen e en las mues as. El p o ocolo é mico empleado se de alla
en la Tabla 3.

Tabla 2. Lis ado de eac i os empleados pa a la p epa ación de la Mas e Mix.
1 Suminis ados po NZYTech Lda. (Lisboa, Po ugal).
2 Desc i os po C iado-Fo nelio e al., 2003. Suminis ados po Roche Diagnos ics GmbH (Mannheim, Alemania).
3 Suminis ado po MO BIO Labo a o ies Inc. (Ca lsbad, EE. UU).
Tabla 3. P o ocolo é mico empleado pa a la ampli icación de ADN.
4. Elec o o esis en gel de aga osa. Una ez comple ada la ampli icación, se ealizó una
elec o o esis isualiza los p oduc os de PCR. El p ocedimien o empleado ue el siguien e:
− P epa ación del gel de aga osa. Se u iliza on geles de aga osa al 1%, p epa ados
mezclando 60 ml de ampón TAE 1x (T is-Ace a o-EDTA, PanReac-AppliChem,
Ba celona, España) con 0,6 g de aga osa (Aga ose elec opho esis g ade, NZYTech Lda.,
Lisboa, Po ugal). La mezcla se calen ó y homogeneizó has a es a comple amen e
anspa en e, y a con inuación se en ió bajo agua ía y se añadie on 3 µl de RedSa eTM
(iN RON Bio echnology Inc., Seúl, Co ea del Su ), un colo an e que se une de mane a
inespecí ica a las cadenas de ADN pe mi iendo su isualización después de exci a lo bajo
luz ul a iole a. La mezcla se e ió en un sopo e ni elado con un peine colocado
p e iamen e, y se dejó solidi ica du an e 40 minu os.
Reac i o
Concen ación
inicial
Concen ación
inal
Volumen inal /
eacción
Cl2Mg1
50 mM
1,5 mM
1,5 µl
Tampón T is – HCl1
10 x
1 x
5 µl
Desoxi ibonucleó idos- i os a o (dNTPs)
NZYMix1
2 mM
200 mM
5 µl
Cebado Fo wa d:
ATACGGCCCATATTCCTACG2
10 µM
1 µM
5 µl
Cebado Re e se:
TGCTCCACCACTTGTTCA2
10 µM
1 µM
5 µl
Taq polime asa NZYTaq DNA Polyme ase1
5 U/ µl
2,5 U
0,5 µl
Agua bides ilada es é il3
-
-
25 µl
TOTAL
47 µl
Tempe a u a
Tiempo
Ciclos
95 ºC
5 min
1
95 ºC
30 s
40
60 ºC
45 s
72 ºC
45 s
72 ºC
10 min
1
− Ca ga de mues as. Una ez solidi icado el gel, se e i ó el peine, o mándose así los
pocillos. El gel se colocó en una cube a de elec o o esis y se cub ió con una solución
TAE 1x. Se ca ga on 5 µl del ma cado de peso molecula (NZYDNA Ladde V, 100-
1000 bp, NZYTech Lda., Lisboa, Po ugal) en el p ime pocillo del gel. En una placa de
mic o i ulación, se añadie on 2 µl de ampón de ca ga (6x NZYDNA loading dye,
NZYTech Lda., Lisboa, Po ugal) y 10 µl de cada p oduc o de PCR, y luego se ca gó odo
el olumen en los pocillos co espondien es del gel de aga osa.
− Elec o o esis. Una ez ca gadas odas las mues as, se ce ó la cube a y se con igu a on
los pa áme os de elec o o esis: 100 V, 400 mA, 37 min.
− Visualización y análisis de esul ados. El gel de aga se e eló en el analizado de
imagen GelDoc Go (Bio-Rad Labo a o ies Inc., He cules, EE.UU.) pa a isualiza las
bandas de ADN. Se conside a on posi i as aquellas mues as con bandas a la misma
al u a que el con ol posi i o y que co espondían ap oximadamen e con un peso de 600-
700 pa es de bases (pb) según el ma cado de peso molecula (Figu a 3).
3.2.2 Secuenciación del ADN
Una ez comple ado el análisis de las mues as, aquellas que esul a on posi i as se emi ie on a
un labo a o io ex e no (STAB Vida Lda., Capa ica, Po ugal) donde ue on pu i icadas y
secuenciadas median e el mé odo Sange . Una ez p ocesadas, es e labo a o io p opo cionó dos
c oma og amas pa a cada mues a, uno o wa d y o o e e se. Un c oma og ama es una
ep esen ación g á ica de una secuencia de ADN, en la que cada pico y su colo co espondien e
indican el nucleó ido iden i icado pa a cada posición.
Figu a 3. Elec o o esis en gel de aga osa al 1% de los p oduc os de PCR
ampli icados con cebado es especí icos pa a Mycoplasma spp. P ime y úl imo
ca il: ma cado de peso molecula de 100 a 1000 pb; C+: con ol posi i o; C. NEG:
con ol nega i o; MP01 – MP23: mues as p oblema.
A con inuación, se empleó el p og ama Ch omasP o 2.1.4 (Technelysium, B isbane, Aus alia)
pa a ensambla los dos c oma og amas ob enidos pa a cada p oduc o de PCR, gene ando así una
única secuencia consenso (Figu a 4). Es as secuencias se e isa on manualmen e pa a co egi
ambigüedades en la asignación de bases y elimina las egiones de baja calidad p esen es al inicio
y inal de es as. Las secuencias consenso edi adas se gua da on en o ma o FASTA.
3.3 Análisis ilogené ico
3.3.1 Iden i icación de las especies de micoplasmas hemo ópicos
Cada secuencia consenso ob enida se compa ó con secuencias de e e encia p e iamen e desc i as
y publicadas en la base de da os GenBank del Na ional Cen e o Bio echnology In o ma ion
(NCBI), u ilizando la he amien a BLAST (Basic Local Alignmen Sea ch Tool;
h ps://blas .ncbi.nlm.nih.go /Blas .cgi). Cada una de las secuencias del es udio se iden i icó
como la especie de Mycoplasma spp. más p óxima según el po cen aje de homología ob enido.
3.3.2 Alineamien o y cons ucción del á bol ilogené ico
Pa a la cons ucción del á bol ilogené ico, p ime o se ealizó el alineamien o de las secuencias
consenso ob enidas. Se u ilizó el p og ama Molecula E olu iona y Gene ic Analysis X (MEGA
X) (Kuma e al., 2018), seleccionando el algo i mo de alineamien o Clus alW. Las secuencias
ue on e isadas y eco adas manualmen e pa a asegu a que odas u iesen la misma longi ud
(628 pb).
Figu a 4. Vis a del ensamblaje de los c oma og amas median e el p og ama Ch omasP o 2.1.4.
Además de las secuencias ob enidas en es e abajo, ambién se incluye on en el alineamien o
di e en es secuencias nucleo ídicas de e e encia de la base de da os GenBank
(h ps://www.ncbi.nlm.nih.go /genbank/), co espondien es a di e en es especies de micoplasmas
hemo ópicos. Adicionalmen e, se incluyó la secuencia de una especie de micoplasma no
hemo ópico (Mycoplasma bo is), ilogené icamen e más dis an e del g upo de in e és, pa a
emplea la como aíz del á bol ilogené ico. La in o mación de es as secuencias se desc ibe en la
Tabla 4.
Tabla 4. Secuencias de e e encia empleadas pa a la cons ucción del á bol ilogené ico, ob enidas de
la base de da os GenBank.
A con inuación, el alineamien o ue impo ado al p og ama jModel Tes 2.1.10 (Da iba e al.,
2012) pa a selecciona el modelo de sus i ución de nucleó idos más adecuado pa a la cons ucción
del á bol ilogené ico. La selección del modelo se ealizó en base al c i e io es adís ico AIC
Mycoplasma spp.
Secuencia empleada
Código de acceso
GenBank
Mycoplasma haemocanis
Isola e cupsd254 16S ibosomal RNA gene
pa ial sequence
MZ221174
Mycoplasma haemo elis
16S ibosomal RNA gene pa ial sequence
EU145745
Mycoplasma wenyonii
16S ibosomal RNA gene pa ial sequence
AY946266
Mycoplasma o is
Isola e TA5 16S ibosomal RNA gene pa ial
sequence
JF931135
Mycoplasma pa um
Gene o 16S ibosomal RNA pa ial sequence
s ain: Mo ioka9
AB610850
Mycoplasma suis
S ain HLJ/2010 16S ibosomal RNA gene
pa ial sequence
KF740480
Candida us Mycoplasma
haema opa um
Isola e cupsd243 16S ibosomal RNA gene
pa ial sequence
MZ221181
Candida us Mycoplasma
haemominu um
16S ibosomal RNA gene pa ial sequence
AY297712
Candida us Mycoplasma u icensis
Isola e D9 16S ibosomal RNA gene pa ial
sequence
DQ464425
Candida us Mycoplasma
haemobos
Isola e ca le no. 18 16S ibosomal RNA gene
pa ial sequence
EU367965
Mycoplasma bo is (ou g oup)
S ain GDZJMbo is2014-1 16S ibosomal
RNA gene pa ial sequence
KM576849
Candida us Mycoplasma haemo is
Isola e TA3 16S ibosomal RNA gene pa ial
sequence
JF931133
Tabla 6. Ca ac e ís icas de los animales posi i os a la PCR pa a la de ección de
hemoplasmas. Se mues a ambién la iden i icación a ni el de especie de las secuencias
nucleo ídicas ob enidas.
1
: : macho / : hemb a
2
: Casos en lo que exis ía coin ección con Babesia spp. En e pa én esis se desc ibe la especie/s a las que esul a on posi i os.
3:
CMhp: “Candida us Mycoplasma haema opa um”; Mhc: Mycoplasma haemocanis.
Código
mues a
Edad
(meses)
Sexo1
Ap i ud
Babesia spp.2
% HCT
Especie
hemoplasma4
M10
86
♂
Caza
Sí (B. ulpes)
17
CMhp
M11
50
♂
Caza
Sí (B. ulpes)
19
CMhp
M21
23
♂
Compañía
No
27
CMhp
M26
64
♂
Caza
No
28
CMhp
M37
78
♂
Compañía
Sí (B. ulpes)
32
CMhp
M38
82
♀
Caza
No
18
CMhp
M43
67
♂
Compañía
Sí (B. canis)
28
CMhp
M44
75
♂
Compañía
Sí (B. canis)
25
CMhp
M48
91
♀
Caza
No
21
CMhp
M49
108
♂
Caza
Sí (B. ulpes)
27
Mhc
M50
120
♂
Caza
Sí (B. ulpes)
25
CMhp
M52
87
♂
Caza
No
44
CMhp
M53
24
♂
Caza
Sí (B. ulpes,
B. canis)
30
Mhc
M55
62
♀
Caza
Sí (B. ulpes)
25
CMhp
3/21
11/33
0%
10%
20%
30%
40%
Hemb as Machos
Sexo
9/36
5/24
18%
20%
22%
24%
26%
Coin ección No coin ección
Babesia spp.
10/16
4/38
0%
20%
40%
60%
80%
Caza Compañía
Ap i ud
2/8
12/46
24%
25%
25%
26%
26%
27%
≤2 años > 2 años
Edad
(A)
(B)
(D)
(C)
Figu a 6. Diag amas de ba as que ep esen an el po cen aje de pe os posi i os a
micoplasmas hemo ópicos en elación con di e en es ac o es epidemiológicos. (A)
Po cen aje de animales posi i os dis ibuidos po g upos de edad. (B) Po cen aje de animales
posi i os seg egados po sexo. (C) Po cen aje de animales posi i os según su ap i ud. (D)
Po cen aje de animales posi i os en elación con la coin ección po Babesia spp.

Es os da os son me amen e desc ip i os y ela i os a la población es udiada, po lo que no pueden
se in e p e ados como un e lejo de la p e alencia de in ección po hemoplasmas en los dis in os
sec o es de la población canina desc i os. Así, con el in de de e mina si las di e encias
encon adas en e los di e en es g upos e an signi ica i as, se ealizó un análisis es adís ico
uni a ian e pa a cada una de es as a iables (Tabla 7). Dado que solo 2 animales esul a on
posi i os a CMhp, el análisis es adís ico se ealizó pa a el conjun o de micoplasmas hemo ópicos,
y no pa a cada una de las especies. De acue do con el análisis de eg esión, las a iables “edad”,
“sexo” e “in ección con Babesia spp.” no mos a on una in luencia signi ica i a sob e la p esencia
de micoplasmas hemo ópicos en la población es udiada (p- alo > 0,05). Sin emba go, la a iable
“ap i ud” sí p esen ó una asociación signi ica i a con la posi i idad a micoplasmas hemo ópicos
(p- alo < 0,05).
Tabla 7. Modelo de eg esión logís ica uni a iable de los ac o es de iesgo (edad, sexo, ap i ud,
in ección con Babesia spp.) asociados a la in ección po hemoplasma.
*Ca ego ía de e e encia. OR, Odds Ra io; 95% CI, In e alo de con ianza al 95 %;
El análisis de eg esión no encon ó di e encias signi ica i as en e la p e alencia de micoplasmas
hemo ópicos y la edad (p- alo > 0,05). La asociación de la exposición con hemoplasmas y la
edad no es á cla a en la bibliog a ía. Los esul ados de es e es e es udio concue dan con o os en
los que ampoco se encon ó es a asociación es adís ica (Ba ke e al., 2010; Happi e al., 2018;
Ra agnan e al., 2017; Rou a e al., 2010; Wengi e al., 2008). Sin emba go, in es igaciones de
o os au o es de e mina on que los animales de mayo edad enían una mayo p obabilidad de
in ección po micoplasmas hemo ópicos (Ak as y Ozubek, 2018; Beus e al., 2024; So o e al.,
2016), lo que pod ía a ibui se al mayo iempo de exposición al pa ógeno a lo la go de la ida o
a una posible in ección c ónica, ya que muchos de los animales in ec ados pe manecen como
po ado es a la go plazo (So o e al., 2016). Po o a pa e, No acco e al. (2010) encon a on
mayo p e alencia en jó enes, y lo a ibuye on a una mayo asa de exposición de es os animales
Va iable
To al
animales
Posi i a
Nega i a
OR
95% CI
p- alo
Edad (n = 54)
≤24 meses
>24 meses
8
46
2
12
6
34
*
1,05
0,2-7,9
0,948
Sexo (n = 54)
Hemb a
Macho
21
33
3
11
18
23
*
3,00
0,8-14,8
0,130
Ap i ud (n = 54)
Compañía
Caza
38
16
4
10
34
6
*
14,17
3,6- 67,7
<0,001
Babesia spp. (n = 60)
No
Sí
24
36
5
9
19
27
*
1,27
0,4 - 4,7
0,709
PCR hemoplasma
a las ga apa as, debido bien a su mayo ac i idad o a que la mayo pa e de los jó enes incluidos
en su es udio p ocedían de colec i idades.
En cuan o al sexo, aunque hubo un mayo po cen aje de posi i os en machos, no se encon ó
ninguna asociación signi ica i a en e el sexo y la posi i idad a hemoplasmas (p- alo > 0,05), lo
cual concue da con lo desc i o po Hasi i e al. (2016), No acco e al. (2010), Rou a e al. (2010)
y Wengi e al. (2008), en e o os. En nues o es udio, el mayo núme o de machos posi i os
pod ía debe se a que la mayo ía de los pe os de caza e an machos (11 de los 16), y es a ap i ud
se elacionó es adís icamen e con una mayo posi i idad. Aunque es común no obse a es a
asociación, algunos es udios encon a on que los pe os machos enían una mayo p obabilidad
de se posi i os a micoplasmas hemo ópicos (Ba ke e al. 2010; Sasaki e al. 2008; So o e al.,
2016). Es a mayo posi i idad en los machos se a ibuyó a un mayo con ac o ag esi o en e
animales, más ecuen e en es e sexo, du an e el cual se pod ía ansmi i la in ección po
micoplasmas (Ak as y Ozubek, 2017; de Fa ia Valle e al., 2014).
El análisis es adís ico mos ó una asociación signi ica i a en e la ap i ud y la posi i idad a
hemoplasmas (p- alo <0,05; OR =14,17), indicando que los pe os de caza se in ec an con mayo
ecuencia. Es e hallazgo se explica p obablemen e po la mayo exposición a ec opa ási os en
es e ipo de animales, que es án más en con ac o con el medio ambien e. Es o es consis en e con
o os es udios en los que se obse ó una asociación es adís ica signi ica i a en e la posi i idad a
hemoplasmas y la in es ación po ga apa as (Happi e al., 2018), y ga apa as y pulgas (de Fa ia
Valle e al., 2014). De o ma simila , ambién se ha obse ado una mayo exposición en pe os
agabundos, más expues os a ec o es y po an o a la in ección (Ak as y Ozubek, 2018;
Ra agnan e al., 2017). El único ec o demos ado expe imen almen e es Rhipicephalus
sanguineus (Sene i a na e al., 1973), espaldado adicionalmen e po e idencia indi ec a en
di e sos es udios epidemiológicos que asocia on una mayo p e alencia de hemoplasmosis en
á eas donde es e ec o es á p esen e (Inokuma e al., 2006; No acco e al., 2010; Rou a e al.,
2010; Wengi e al., 2008). Sin emba go, en el no oes e de España la especie de ga apa a
p edominan e es Ixodes icinus y, aunque ambién se ha de ec ado la p esencia de R. sanguineus
en es a egión (71% I. icinus s. 15% R. sanguineus) (Peña López, 2019), de acue do con lo que
de ienden algunos au o es (Beus e al., 2024; Millán e al., 2018; Suh e al., 2017), pa ece
p obable que o os ec o es es én implicados en la ansmisión de los hemoplasmas caninos.
La mayo posi i idad en animales de caza ambién puede es a elacionada con que es os animales
con i en más ecuen emen e con o os pe os en caniles. En es e sen ido, algunos es udios han
encon ado asociación en e la posi i idad a hemoplasmas y la esidencia en p o ec o as u o as
colec i idades (Ak as y Ozubek, 2018; Kemming e al., 2004a; No acco e al., 2010; Ra agnan
e al., 2017). Es o pod ía se debido a que en es os ambien es se a o ezca una mayo densidad
de ga apa as, aunque cabe menciona que en colec i os ambién pueden se más ecuen es las
in e acciones ag esi as, que se han suge ido como una posible o ma de ansmisión de
micoplasmas hemo ópicos (de Fa ia Valle e al., 2014; Huggings e al., 2023; Sasaki e al., 2008).
No se encon ó elación en e la in ección con Babesia spp. y la p esencia de micoplasmas
hemo ópicos (p- alo > 0,05). Es a al a de asociación es adís ica es consis en e con los hallazgos
de Ande sson e al. (2017) y Happi e al. (2018), quienes ampoco encon a on una elación
signi ica i a en e es as in ecciones en sus es udios. Con a iamen e, o as in es igaciones (Ak as
y Ozubek, 2018; Cannon e al., 2016) demos a on una asociación signi ica i a en e la in ección
con Babesia spp. y micoplasmas hemo ópicos, sugi iendo una ansmisión común a a és de
ec o es a ópodos, lo que indi ec amen e sugie e una exposición compa ida a es os pa ógenos
en las poblaciones es udiadas. Sin emba go, los esul ados de es e es udio no son consis en es con
es a hipó esis.
4.5 E ec o de los micoplasmas hemo ópicos sob e el hema oc i o y análisis del
e ec o de la coin ección con Babesia spp.
No se obse a on di e encias no ables en cuan o a los alo es de HCT desc i os en pe os
in ec ados con micoplasmas hemo ópicos en elación con los obse ados en pe os lib es de es a
in ección (26 % y 30,7 % espec i amen e) (Figu a 7.A). Al conside a las coin ecciones con
Babesia spp. (Figu a 7.B), se obse ó que la mediana del hema oc i o ampoco ue no o iamen e
in e io en las in ecciones mix as con hemoplasmas (25,1 % en e a 26,9 %).
Cuando se analiza on odas las posibles combinaciones de coin ección (Figu a 8), la mediana del
hema oc i o más baja se encon ó en la in ección única po Babesia ulpes (19,1 %), seguida de
la coin ección en e B. ulpes y micoplamas hemo ópicos (25,1 %). No se obse ó un pa ón que
indicase que la coin ección en e micoplasmas hemo ópicos y Babesia spp. lle ase a una
educción mayo del hema oc i o debido a un posible e ec o siné gico de es os mic oo ganismos.
Neg
Myc
% HCT
Neg
Myc
Myc + B
(A)
(B)
Figu a 7. Valo es de hema oc i o (HCT) en pe os con y sin in ecciones po micoplasmas
hemo ópicos (A) e incluyendo la coin ección simul ánea con Babesia spp. (B). Neg, nega i o;
Myc, micoplasma hemo ópico; B, Babesia spp.
Se lle ó a cabo un análisis es adís ico de eg esión lineal pa a e alua el e ec o de es as
in ecciones sob e el hema oc i o (Tabla 8). El esul ado del modelo no mos ó que se p odujese
una disminución signi ica i a el HCT en in ecciones simples con micoplasmas hemo ópicos
espec o al es o de animales es udiados (p- alo > 0,05). Sin emba go, in ecciones simples con
B. ulpes sí se asocia on a una mayo bajada del hema oc i o (p- alo < 0,05). Finalmen e, las
coin ecciones con hemoplasmas no se asocia on a una mayo bajada del HCT en ningún caso (p–
alo > 0,05).
Tabla 8. Resul ados del análisis de eg esión en e el hema oc i o (%) y la p esencia
de in ecciones simples y mix as con Mycoplasma spp. y Babesia spp.
* Ca ego ía de e e encia
n: nº animales; Coe .: coe icien e; CI95%: in e alo de con ianza al 95% del coe icien e.
En el p esen e es udio, debido a las ca ac e ís icas de la población incluida, es di ícil e alua el
impac o clínico de los micoplasmas hemo ópicos en pe os. Nue e de los 14 pe os que esul a on
posi i os es aban coin ec ados con Babesia spp., además de que el 77 % de los animales incluidos
mos aban un HCT in e io al ango isiológico y no se habían explo ado o as causas de anemia.
Los hemoplasmas en pe os suelen cu sa de o ma asin omá ica (Messick, 2004). No obs an e,
ecien emen e se comunicó en el País Vasco el caso de un pe o inmunocompe en e con his o ial
de in es ación po ga apa as que desa olló una in ección aguda po M. haemocanis (Ga cía
Luccioni y Rod íguez López, 2018), y es o ambién ue epo ado po Sha i iyazdi e al. (2014)
en I án. Además, se ha demos ado que en animales esplenec omizados o inmunodep imidos
Mycoplasma spp.
Babesia ulpes
Babesia canis
n
Coe .
(CI95%)
p- alo
n
Coe .
(CI95%)
p-
alo
n
Coe
(CI95%)
p- alo
Nega i o
46
*
*
48
*
*
35
*
*
In .
simple
5
-1,9
(-10,4 – 6,5)
0,648
5
-10,1
(-19,0 – (-1,1))
0.028
22
5,1
(0,1 – 10,1)
0.050
In . mix a
9
-4,2
(-10,8 – 2,4)
0,204
7
-4,9
(-11,9 – 2,0)
0.160
3
0,9
(-9,7 – 11,4)
0,871
Myc+Bc+B
Myc+Bc
Neg
Myc
B + Myc
B
Bc
% HCT
Figu a 8. Valo es de hema oc i o (HCT) en pe os pa a cada combinación de in ección
micoplasmas hemo ópicos y Babesia spp. Neg, nega i o; Myc, micoplasma hemo ópico;
B , Babesia ulpes; Bc, Babesia canis.
puede cu sa de o ma aguda (Hulme-Moi e al., 2010; Kemming e al., 2004b; Kim e al., 2020;
Lapsina e al., 2023; Pi o i e al., 2012; Zobba e al., 2020). Es o sugie e que es a pa ología
debe ía conside a se en el diagnós ico di e encial de pacien es caninos anémicos con his o ial de
exposición a ec opa ási os.
La p esencia de micoplasmas hemo ópicos en animales con sospecha de hemopa ógenos puede
suge i su implicación en la clínica obse ada, aunque es o no se puede con i ma en es e es udio
debido a su diseño. Además, los esul ados ob enidos mues an que las in ecciones con
hemoplasmas no pa ecen es a asociados con alo es de hema oc i o más bajos en la especie
canina. Es o concue da con los hallazgos de Aquino e al. (2016), Ba ke e al. (2010), Hasi i e
al., (2016), Happi e al. (2018), Rou a e al. (2010) y Wengi e al. (2008). Tampoco se encon a on
alo es de HCT más bajo cuando se p esen a on en coin ección con Babesia spp. Un posible
e ec o siné gico en e hemoplasmas y Babesia spp. ue p opues o po Sonoda e al. (1978)
( e isado po Sasaki e al. 2008). Sin emba go, o as publicaciones en las que se incluye on
animales posi i os a ambos pa ógenos no obse a on un ag a amien o de la sin oma ología
clínica, de o ma simila a lo que se obse a en es e es udio (Cannon e al., 2016; Happi e al.,
2018). Así, a pesa de que ambos pa ógenos in ec an los e i oci os, la coin ección en e ellos no
pa ece implica un peo cu so clínico.
Po úl imo, es e es udio cuen a con cie as limi aciones debido al núme o ela i amen e pequeño
de casos analizados (n = 60), a que se ealizó median e un mues eo di igido con el in de
maximiza el núme o de animales posi i os a hemopa ógenos y a que el limi ado núme o de
animales posi i os impidió ealiza un análisis indi idual pa a las di e en es especies de
micoplasmas hemo ópicos encon adas. No obs an e, es os esul ados con ibuyen a amplia el
conocimien o de los hemoplasmas caninos, y, has a donde alcanza el conocimien o de la au o a,
cons i uyen el p ime es udio molecula de la ocu encia de in ecciones causadas po
M. haemocanis y “Ca. M. haema opa um” en pe os de Galicia.

5. CONCLUSIONES
1. En el p esen e es udio, el 23,3% de pe os con sospecha clínica de in ección po
hemopa ógenos es aban in ec ados con micoplasmas hemo ópicos.
2. Se iden i ica on molecula men e las dos especies de micoplasmas hemo ópicos
conside adas p opias de la especie canina: Mycoplasma haemocanis y “Candida us
Mycoplasma haema opa um”. M. haemocanis esul ó se la especie más ecuen e
(12/14 animales).
3. La ap i ud del pe o ue iden i icada como un ac o de iesgo pa a la in ección con
micoplasmas hemo ópicos; así, los animales de caza p esen a on una mayo p obabilidad
de es a in ec ados en compa ación con los de compañía. En cambio, no se encon a on
di e encias signi ica i as en unción del sexo, la edad y la coin ección con Babesia spp.
4. La in ección po micoplasmas hemo ópicos no demos ó es a asociada a los alo es más
bajos de hema oc i o en pe os con sospecha de in ección po hemopa ógenos, lo que
e ue za la idea de que es as in ecciones no suelen ene un cu so g a e en los pe os.
5. No se obse ó una disminución signi ica i a en los alo es de hema oc i o en los pe os
coin ec ados con micoplasmas hemo ópicos y Babesia spp. en compa ación con aquellos
in ec ados únicamen e con micoplasmas, lo que pa ece desca a en p incipio un e ec o
siné gico de es as in ecciones en elación con es e pa áme o.
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