DEPARTAMENTO DE FARMACOLOGIA
ESTUDIO MEDIANTE CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA DE LA
ESENCIA DE THYMUS LONGIFLORUS BOISS
J. Cabo To es, M. M. Cabo Ci es, T. C uz Ga cía y J. Jiménez Ma ín
RESUMEN
Basándonos en la écnica de C oma og a ía en Capa Fina, se ha conseguido la
de ección y pos e io iden i icación de a ios de los componen es de la esencia de
Thymus Longi lo us Boiss. Asimismo se ha lle ado a cabo la cuan i icación de
aquellos componen es que se p esen aban en mayo p opo ción.
SUMMARY
Fine Laye Ch oma og aphy was used o achie e he sepa a ion and subsequen
iden i ica ion o a se ies o componen s o he essen ial oil o Thymus Longi lo us
Boiss. Those componen s ob ained in la ges amoun s we e al so quan i ied by
pho odensi ome y.
INTRODUCCION
Es e abajo se engloba en una de las líneas de in es igación del Depa amen o:
Plan as a omá icas (1,2,3). Nos cen amos en el es udio del Thymus longi lo us Boiss,
po a a se de una especie escasamen e es udiada y que además es endémica de cie as
zonas del Le an e y del Su es e español.
Empleamos la écnica de C oma og a ía en Capa Fina po se un mé odo clásico
de de ección, an o de componen es esenciales, como de o o ipo de p incipios (4).
Resul a una écnica muy álida dada su ep oduc ibilidad, apidez y sencillo u illaje.
Además la C oma og a ía en Capa Fina nos esul a pa icula men e ú il po que
se i á como base pa a la cuan i icación de aquellos componen es de la esencia que
A s Pha maceu ica. Tomo XXIX. Núm. 1, 1988
78 ARS PHARMACEUTlCA
esul en más in e esan es po su mayo abundancia en la misma. La cuan i icación se
ealizó po o odensi ome ía (5,6,7,8), écnica muy in e esan e y sin emba go aún
poco u ilizada en el campo conc e o de las esencias.
MATERIAL Y METO DOS
Mues a.- Thymus longi lo us Boiss, ecolec ado en época de lo ación Uunio), en
la Subes ación de Tabla e (G anada).
La ex acción de la esencia se ealizó po el mé odo de ele enge (9), ob enién-
dose un endimien o medio de 0,72 %.
Análisis cuali a i o po C oma ología en capa Fina.
-Ex enso : Desaga (manual).
-Placas: 20 x 20 cm, capa de 250 Ínic as de espeso de Silicagel G Me ck.
-Ac i ación: a 110· e du an e 30 minu os, p e ia desecación a empe a u a
ambien e y en iadas en desecado sob e Silicagel con indicado de humedad.
-Fase mó il:
. Benceno / E e 85/15
·N-hep ano N-hexano / E e 85/15
-Desa ollo: 10 cm unidimensional ascenden e en cube as "Desaga" a sa u a
ción.
-Re elado : solución e anólica de ainilla al 3%. A 100 mI de es a solución se
le adicionan 4 mI de ácido sul ú ico concen ado en el momen o de su empleo.
-Visualización: median e nebulizado ino de id io, con olando la can idad de
eac i o (ap oximadamen e 25 mI po placa). Pos e io calen amien o en es u a a 110·
e du an e unos 7 minu os.
Análisis cuan i a i o po Fo odensi ome ía
U ilizamos un o odensi óme o Shimadzu High-speed hin-Iaye eh oma o
Scanne (model eS-920). Las lec u as se ealiza on a 520 nm, sob e placas de
Silicagel G Me e, con 25 0 mic as de espeso . La ase mó il seleccionada ue Benceno/
E e 85/15. El e elado se ealizó con ainillina alcohólica adicionada de ácido
sul ú ico al 4% y pos e io calen amien o en es u a a 110· e, du an e 7 minu os.
RESULTADOS Y DISeUSION
Fase mó il.-En el apa ado "Ma e ial y Mé odos", ci ábamos las ases mó iles que
habían esul ado más idóneas como esul ado de una se ie de ensayos p e ios.
T as el es udio c í ico compa a i o de es as ases, adop amos Benceno/E e 85/15
como ase única po es ima que se ap ecia en ella:
a) Mayo núme o de compone es de ec ados y mejo sepa ación de los mismos.
b) Mejo esolución de los p incipios u ilizados.
Iden i icación de componen es.- Los alo es absolu os de R de las manchas
c oma og á ica� que po su in ensidad pa ecían co esponde a los p incipales
componen es de la esencia de Thymus longi lo us Boiss, no ienen, po supues o más
alo que el me amen e o ien a i o, aunque se basa en una acep able coincidencia con
ARS PHARMACEUTICA 79
los ob enidos an e ionnen e en condiciones simila es. Tal o ien ación, es sin emba go
ú il, pa a busca una a i icación más sólida seleccionando los posibles componen es,
al es ado pu o, que es aconsejable con as a con los de la esencia. Dichos componen
es son: bo neol, cineol, e pinen-4-01, ace a o de e penilo y a- e pineol.
La pau a seguida pa a su a i icación p e ia iden i icación ha sido:
-Esencia
-Esencia en iquecida en un de enninado componen e !:
-Componen e !:
Los esul ados ob enidos median e la me odología de allada an e ionnen e, que
dan e lejados en las o og a ías 1,2 Y 3. Su es udio minucioso y azonado, adecuada
men e discu ido en p o y en con a, nos lle a a suge i que en la esencia de Thymus
longi lo us Boiss es án p esen es: Cineol (Tabla 1), Bo neol (Tabla 1), Te pinen-4-01
(Tabla 11), Ace a o de e penilo (Tabla 11) y a- e pineol (Tabla I1I).
De los cinco componen es iden i icados en p incipio po C oma og a ía en Capa
Fina, y dado que es de ellos (a- e pineol, bo neol y e pinen-4-01) son los que
p esen an manchas c oma og á icas de mayo supe icie, nos cen amos en el es udio
de los mismos median e la écnica o odensi omé ica.
Las mues as u ilizadas pa a es a écnica ue on:
-Dilución al 5% de esencia de Thymus longi lo us Boiss
-Dilución de cineol al 1,7% y 2%
-Dilución de a- e pineol al 0,06% y 0, 3%
-Dilución de e pinen-4-01 al 0,05% y 0,2%
En odos los casos los depósi os ue on de 2 111.
En p ime luga se p ocedió a la cons ucción de las cu as pa ón co espondien
es a cineol, a- e pineol y e pinen-4-01; pa a ello se emplea on concen aciones muy
p óximas en e sí y pe ec amen e conocidas de cada uno de es os componen es,
ep esen ándose pos e ionnen e concen ación en e a núme o de cuen as absolu as
que p opo cionaba el o odensi óme o pa a cada una de las concen aciones, así
pudimos llega al conocimien o de cuál e a el ma gen de concen ación con el cual
debíamos abaja pa a la cuan i icación de la mues a p oblema.
Una ez conocidos los má genes de concen ación adecuados, se lle a on a cabo
nume osas lec u as de la mues a en es udio. Los esul ados ob enidos en onna de
"cuen as absolu as" se e lejan en las Tablas IV, V Y VI.
Po úl imo y aplicando un mé odo de in e polación (5 ), se llegó a la de enninación
de los po cen ajes absolu os de los es componen es es udiados en la esencia de
Thymus longijlo us Boiss:
-Cineol: 37,2% ± 0,043
-a- e pineol: 3,44% ± 0,0265
- e pinen-4-01: 2,62% ± 0,00216
Aplicando es a me odología hemos ob enido esul ados conco dan es, incluso
compa ando los ob enidos con placas di e en es, como lo e elan los cálculos
es adís icos. Ello penni e conclui que ins umen al y écnica empleados son adecua
dos pa a es e ipo de análisis cuan i a i o de compues os p esen es en esencias.
80
ARS PHARMACEUTICA
Tabla 1
R x 100
1.- Esencia
28
33
39
52 61 70
2.-
Esencia + Te pinen-4-o1
28
33 39 52 61 70
3.- Te pinen-4-o1
39
4.- Esencia
28
33
39
52 61 70
5.- Esencia + Te pinen-4-o1
28
33
39
52 61 70
6.- Te pinen-4-o1
39
7.-
Esencia 28 J3 39 52 61 70
8.-
Esencia + Ace . e penilo 28 33 39 52 61 70
9.-Ace . e penilo 61
10.- Esencia 28 33 39 52 61 70
1 1.- Esencia+Ace . e penilo 28 33
39
52 61 70
12.- Ace . e penilo 61
.
..
•
•
ARS PHARMACEUTICA 81
Tabla II
R x 100
1.-Esencia 28
33
39 53 61 70
2.- Esencia + Cineol
28
33 39 52 61 70
3.-
Cineol 39
4.-
Esencia 28 33
39
52 61 70
5.- Esencia + Cineol 28 33 39 52 61 70
6.- Cineo) 39
7.- Esencia 28 33 39 52 61 70
8.-E encia + Bo neo) 28 33
39
52 61 70
9.- Bo neol
61
10.-Esencia 28
33
39
52
61
70
11.-Esencia + Bo neol 28
33
39
52
61
70
12.- Bo neol 33

82 ARS PHARMACEUTICA
Tabla III
R x 100
1.-Esencia 29
33
40 53 61
69
2.-Esencia + (X-Te pineol 29
33
40 53 61 69
3.-
(X-Te pineol 29
4.- Esencia 29 33 40 53 6 69
5.- Esencia + (X-Te pineol 29
33
40 53 61 69
6.-(X-Te pineol 29
ARS PHARMACEUTICA 83
Tabla IV
Esencia Thy nus longi lo us al 5 % (lOO Y /2111). Cineol
al 1,7 % (34 Y /2111). Cineol al 2 % (40 Y /2111)
Lec u a o odensi o né icas ("cuen as absolu as")
PLACA Cin(34y) Es (100 y) Cin(40y) Cin(34y) Es (100 y) Cin(40y)
nº I 20034 23241 25324 20322 23060 25498
20370 23018 25427 20374 22983 25279
20349 22597 25028 20213 22937 25164
20318 22829 25138 20319 22852 25137
nº 2 20389 22938 25158 20374 22888 25135
20095 22869 25122 20122 22773 25301
20312 22773 25264 19967 22886 25104
20365 22893 25129 20085 22796 25304
Tabla V
Esencia Thy nus longi lo us al 5 % (100 Y /2111). a- e pineol al 0,06 %
(1,2 Y /2111). a- e pineol al 0,3 % (6 Y /2111)
Lec u as o odensi o né icas ("cuen as absolu as")
I
PLACA a- e (1,2 y) Es(lOOy) a- e (6y) a- e (
I ,2y) Es(lOOy) a- e (6y)
nº 3 1384 2859 4331 1329 2716 4330
1345 2718 4322 1317 2711 4315
1317 2720 4408 1323 2741 4367
1293 2742 4323 1292 2704 4336
nº 4 1300 2273 3640 1337 2697 4330
1299 2703 4343 1304 2737
4344
1297 2716 4348 1311 2722 4361
1315 2716 4365 1306 2748 4364
84 ARS PHARMACEUTICA
Tabla VI
Esencia Thy nus longi lo us al 5 % (100 Y /2 111). Te pinen-4-ol al 0,05 %
(Iy /211 1). Te pinen-4-ol al 0,2 % (4 Y /2111)
Lec u as o odensi o né icas ("cuen as absolu as")
PLACA Te (Iy) Es (lOOy) Te (4y) Te (ly) Es (lOOy) Te (4y)
nQ 5 1275 2585 3692 1239 2568 3696
1262 2586 3715 • 1265 2577 3713
1246 2588 3728 1264 2592 3735
1266 2592 3735 1266 2610 3741
nQ 6 1288 2614 3764 1300 2642 3807
1288 2629 3776 1295 2630 3772
1261 2631 3772 1276 2635 3791
1273 2637 3811 1289 2647 38l·8
BIBLIOGRAFIA
(1) CABO TORRES, J.; CABO ClRES, M. M.; CRESPO GIL, M. E.; JIMENEZ MARTIN, J.;
NA VARRO MOLL, C. "Thymus g ana ensis Boiss. 1.-E ude quali a i e e quan i a i e de son huile
essen ielle". Plan es medo e phy o he . 20 (1), 18-24, (1986).
(2) CABO TORRES, J.; BRAVO DIAZ, L; JIMENEZ MARTIN, J; NAVARRO MOLL, C. "Thymus
hiemalis Lange. E ude quali e quan i a i e de son huile essen ielle pa C. G.". Plan a méd. 39, 270
(1980).
(3) GOMIS HURTADO, E. "Thymus se pylloides subesp. Gado ensis: Es udios a macognós icos".
Tesina, G anada, (1987).
(4) GAMEZ MONTALVO, E. "Me odología sencilla pa a la p elimina de ección de á macos en o ina.
T anquilizan es". Tesis Doc ., G anada (1986).
(5) CABO CIRES, M. M. "C oma og a ía cuan i a i a en capa ina (Densi ome ía) aplicada al es udio
de acei es esenciales". Tesis Doc ., G anada (1978).
(6) SHIBATA, K. "Me h. Biochem. Anal., 7,77 (1959). A a és de SHELLLARD, E. J. "Quan i a i
e pape and hin laye ch oma og aphy". Ed. Academic P ess, pág. 70, Lond es (1968).
(7) DALLAS. M. S. J. "Rep oduc ibles R alues in hin laye Adso ion Ch oma og aphy". J.
Ch oma og., 17, 267 (1965).
(8) SHELLARD, E. J.; ALAM, M. Z.; 'The quan i a i e de e mina ion o some mi agyna oxindole
alkaloids a e sepa a ion by hin laye Ch oma og aphy. IlI. Densi ome y". J. Ch oma og., 33 (2),
347-369 (1968).
(9) CABO TORRES, J.; PARDO GARCIA, P. "Guía de P ác icas de Fa macognosia y Fa macodina
mia". 4 ed., 242-247, G anada (1974).