ARS PHARMACEUTICA
REVISTA DE LA FACULTAD DE FARMACIA
UNIVERSIDAD DE GRANADA
Tomo XVII -Núm. 4
Consejo de Redacción
Di ec o :
P o . D . D. Jesús Cabo To es
Di ec o Ejecu i o:
P o . D . D. José Luis Val e de
Vocales:
P o . D . D. Albe , o Ramos
Co menzana
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P o . D . D. An onio Ce ezo
Galán
P o!. D a. Ma ía A. López
Sec e a io de Redacción:
P o . D . D. Luis B a o Díaz
Redacción y Adminis ación:
Facul ad de Fa macia.
G anada -España.
Dep. Legal. GR: núm. 17-1960
Imp ime:
G á icas del Su , S. A.
Boque ón, 6
G anada 1976.
1.000 ejempla es
1976
PAG.
TRABAJOS ORIGINALES DE LA FACULTAD
• Es ablecimien o de índices pa a el
es udio de la solubilización de os a-
os po bac e ias del suelo. Po F.
Ruiz Be aque o, Ana M.a Baya y A.
Ramos Co menzana ... ... ... ... ... 399
• Po encial Redox en suelos de la zo-
na de Cabo de Ga a (Alme íaJ. Po
Ga cía T enado, J. G.; Aguila , J.;
Ga cía Na a o, A. y Delgado M. oo. 407
• Disg egación/disolución de comp i
midos como ac o es condicionan
es de su ac i idad e apéu ica. 11.
Comp imidos de P ednisolona. Po
J. Sánchez-Mo cillo, A. Ce ezo y J.
M.a Suñé oo. oo. oo. oo. oo. oo. oo. oo. 437
• Bibliog a ía ... ... ......... ...... ... 455
TRABAJOS ORIGINALES DE LA FACULTAD
---
.�.
---
Depa amen o de Mic obiología. Facul ad de Fa macia.
Uni e sidad de G anada
ESTABLECIMIENTO DE INDICES PARA EL ES.TUDIO DE LA
SOLUBILIZACION DE FOSFATOS POR BACTERIAS DEL SUELO
F. RUIZ BERRAQUERO, ANA M.a BAYA * Y A. RAMOS CORMENZANA
Desde las p ime as in -es igaciones de SACKETT y c.ol. (9), se de
mos ó que de e minadas bac e ías del suelo enían ac i idad solu
bilizado a de os a os y son nume osísimos los abajos encamina
dos a la búsqueda de mic oo ganismos con es a ac i idad y a la
u ilización de los mismos pa a mejo a la e ilidad de los suelos.
Según ALEXANDER (1), de un 10 a un 50 po cien o de las bac e
ias aisladas del suel.o son capaces de solubiliza os a os cálcicos.
Son e icaces en la ans .o mación, di e en es géne os y especies de
bac e ias g am nega i as y G am pos:i i as , SPERBER (lO), TARDIEux
ROCHE (11), y ambién muchos-hongos, RAMOS, CALLAO, CARVALHO (8).
Es as bac e ias y hongos c ecen en medios con os a os bi y icál
cicos, apa i o .o ma e iales insolubles pa ecidos, como única uen e
de os a o. Los mic oo ganismos, nC) solamen e asimilan el elemen
o, sino que ambién hacen soluble una pa e impo an e, libe ando
can idades en exceso de su p opia demanda nu icional.
El uso de los inóculos de os obac e ias ha sido muy discu ido
po los di e s.os in es igado es y en nume osos abajos se exponen
las en ajas y des en ajas de su aplicación, YUNG (14), MENKINA (6),
P SEMSKAYA y KOCHUNOVA (7), AzcoN (2).
Pa ece se que se ob enían g andes en ajas si los mic oo ga
nismos adicionados ue an au óc onos. De ahí, el esul ado an di e
en e a que d-an luga la aplicación de idén icos e ilizan es a dis
in os ipos de suelo. Mien as que la u ilización de un e ilizan e
* Ac ualmen e en el Ins i u o de Ciencias Biológicas, Uni e sidad Ca ó
lica de Valpa aíso (Chile).
A s Pha macéu ica. Tomo XVII. Núm. 4, 1976.
400 ARS PHARMACEUTICA
ob enido a pa i de cepas mÍc obianas locales no da ía luga a Un
des€quilib io an d ás ico.
En es e sen ido pa ece in e esan e es ablece c i e ios de selec
ción, así como écnicas sencillas que pe mi an elegi con acilidad
aquellas bac e ias que en un de e minado suelo eunan las condi
ciones más adecuadas pa a o ma pa e del e ilizan e.
En el p esen e abajo p e endemos es ablece unos índices de
solubilización y así pode es udia las elaciones exis en es en e la
in ensidad y el iempo en que el e ec o solubilizado se hace p e
sen e con mic oo ganismos G am nega i os y G am posi i os aisla
dos de di e en es suelos.
MATERIAL Y METODOS
Se han u ilizado mues as de suelos na u ales y cul i ados de
las p o incias de Ba celona y Alican e.
El medio empleado pa a el aislamien o de solubilizado es es un
medio empob ecido al que se añade como uen e de os a o, os a o
bicálcico insoluble: glucosa 20 g.; c1o u o amónico 7 g.; sul a o
magnésico 0,5 g.; os a o bicálcico 2 g.; aga 11 g.; H20 C.s.p. 1.000
mI.; pH 7,5.
En €s e medio, las colonias cons i uidas po bac e ias solubili
zado as de os a o bicálcico de e minan Ja o mación de un halo
anspa en e á,cilmen e obse ¡¡.ble al con as a con la opacidad
del medio.
Se ealizó un p ime aislamien o de solubilizado es al inal del
e ce día de incubación. A es os mic oo ganismos se les ha deno
minado solubílizado ,es p ecoces (SP). Vuel as a incuba las placas,
se ealiza on obse aciones dia ias has a un plazo de 15 días. Las
colonias que p esen an halo de solubilización a pa i del e ce día
son conside adas como solubilizado es a díos (ST). Los mic oo ga
nismos pe enecien es a colonias que pasados quince días no p e
s€n an halo de solubilización isible se es iman como no solubili
zado es (NS).
La elección del e ce día pa a sepa a dos ca ego ías de solu
bilizado es obedece a que en las expe iencias ealizadas, la mayo ía
de los mic oo ganismos que pasados los €s p ime os días no p é
sen an halo isible, a dan a ios días más en p esen a lo.
Pa a es ima la capacidad de solubilización de los mic oo ganis
mos aislados se p ocede a semb a los en el mismo medio median e
ARS PHARMACEUTICA 401
asa y masi amen e en se ies de 5 a 6 po placa y dispues os ci cu
la men e. Se incuban a 30°C.
A los es días de semb ados se de e mina la capacidad de 50-
lubilización de los SP que son los co espondien es a las colonias
que p esen an halo isible ,en es e pe íodo de incubación (i.s.) que
iene dado po la elacíón en e el diáme o del halo p oducido al
e ce día yel de la colonia co espondien e medido en milíme os:
o del halo (mm)
i.s.
o de la colonia (mm)
De acue do con los índices de solubilización, se han es ablecido
es ca ego ías de S.P. pa a es ima su pode solubilizado :
a) SP con índice de solubilización bajo (i.s.b.) i.s. < 2.
b)
SP con índice de solubilización medio (Ls.m.) 2¿ i.s.
< 4.
c) SP con índice de solubilización ele ado (i.s.e.) i.s. :::::,.. 4.
Pa a los ST (solubilizado es a díos) se de e mina el i.s. a,l
e C'e día de la apa, ición del halo de' S'Ü'lubiliiación y de acue do
a los mismos alo es. El alo del i.s. pa a es e g upo es más limi
ado, ya que la apa íción de la solubilizació� .puede acon ece en
iempos d¡ e en es pa a los dis in os solubilizado es.
En un in en o de ga an iza la di e sidad de las cepas u ilizadas
se aisla on solo aquellos mic oo ganismos que apa ecían con dis
in a mo ología en cada mues a de suelo. (Se ealiza on p uebas
mo ológicas y bioquímicas).
En la elección de mé odos es adís icos adecuados se han u ili
zado los a ados de DOWNIE (4) Y VIEDMA (12).
RESULTADOS
En la Tabla 1 y g á icas se exponen los esul ados ob enidos as
ealiza las de e minaciones de la capacidad de solubilización si
guiendo los c i e ios an e io men e expues os. En cada uno de los
g upos se indican los po cen ajes de G am posi i os y G am ne
ga i os.
402 ARS PHARMACEUTICA
TABLA l.-Dis i'ib lc�ón de los mic oo g ..nis nos de acue do con la in ensidad
de la solubl!1zación y iempo empleado en p oduci la
N.O de
mic oo - l.s.b. l.s.m. l.s.e.
ganismos n.O % n.O °k n.O %
Solubillzado es G am ( +) 23 22 53,65 1 4,34 O 0,00
p ecoces (SP) G am (-) 50 19 46,34 22 95,65 9 100,00
To al 73 41 56,16
23
31,50 9 12,312
Solubillzado es G am (+ ) 18 12 80,00 6
54,54
O�
a díos (ST) G am (-) 16 3 20,00 5
45,45
8 100,00
To al
34
15 44,11 11 32,35 8 23,52
To al 107 56 52,33 34 31,77 17 15.88
Cla es u ilizadas en ablas y g á icas:
ST; Solubilizado es a díos
SP; Solubilizado es p ecoces
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l.s.b.: indlce de solubillzación bajo
l.s.m.: índice de solubilización medio
l.s.e.: indice de solubilización ele ado
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ARS PHARMACEUTICA
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403
404 ARS PHARMACEUTICA
DISCUSION
La écnica en placa pa a de ec a y aisla mic oo ganismos so
lubilizado es ha sido u ilizada con éxi o po di e sos au o es, WE
BLEY (13).
La medida de los halos de solubilización ha sido igualmen e
empleada pa a es ima la capacidad de solubilización de una cepa
bac e iana de es a condición, JOHNSTON (1952).
l.-Los esul ados de solubilización ( abla 10 g á i·ca 1), nos mues
an, de acue do a lo obse ado, un mayo po cen aje de solubili
zado es G am nega i os (61,68 po cien o) que de G am posi i os
(38,3,1 po cien o). Igualmen e esul a se supe io el po cen aje de
solubilizado es p ecoces (68,22 po cien o) que el de solubilizado es
a díos (31,77 po cien o).
Hemos calculado el in e alo de es imación del pa áme o de
cada población binomial con un ni el de con ianza del 95 po cien o,
de acue lo con la ó mula basada en el eo ema de Moi e pa a
mues as g andes y pa áme o no p óximos ni a ce o ni a uno que
es el caso que nos ocupa. Es os in e alos esul an se po la ac
ción de G am nega i os (0,59-0,77), lo que con i ma los esul ados
con el ni el de con ianza del 95 po cien o empleado.
2.-Los da os con i man igualmen e el hecho obse ado de que
el núme o de bac e ias G am posi i as dec ece, aumen ando el de
G am nega i as a medida que cqnside amos ni eles de solubiliza
ción más ele ados.
%G+
%G
Ls.b.
53.,65
46,34
Ls.m.
4,34
95,65
Ls.e.
°
100
Pa a alo a es adís icamen e el c ecimien o del po cen aje de
G am nega i os en las di e en es acciones y la consiguien e dis
minución del co espondien e a los G am posi i os, .se han calculado
igualmen e los lími es de con ianza de los pa áme os no males. Co
mo en es e caso, el amaño de la mues a no es g ande y los alo es
de p se ap oximan a ° y 1, no se puede u iliza la misma ó mula
que en el caso an e io . Pa a esol e es e p oblema hay deducidas
exp esiones analí icas exac as de los lími es de con ianza de P a
pa i de la dis ibución F de Snedeco . Pues o que el núme o de
mic o oganismos co espondien e a los solubilizado es de índice ele-
ARS PHARMACEUTICA 405
ado es muy bajo, los asimilamos a los de índice medio conside ando
únicamen e dos ni eles de solubilización.
Los in e alo esul an se pa a los solubilizado es p ecoces
G am nega i os de índice de solubilización bajo (0,30-0,62) y pa a
los de índice medio y ele ado (0,79-0,99). Se obse a el desplaza
mien o de los lími es de con ianza de las bac e ias G am nega i as
al pasa de la p ime a acción (Ls.b.) a la segunda (Ls.m. o i.s.e.),
lo que nos indica que con un ni el de con ianza del 95 po den 'O
la p ime a acción es meno que la segunda.
Aplicados idén icos cálculos a los G am posi i os los alo es
son: (0,35-0,69) y (0,001�0,16). El desplazamien o de los lími es de
con ianza en es e caso es dec ecien e, lo que nos indica que con el
ni el de con ianza del 95 po cien o la acción de mic oo ganismos
de índices medio y ele ado es meno que la de índice bajo.
A esul ados semejan es se llega si se ealizan las mismas com
p obaciones en los solubilizado es a díos.
3.-El po cen aje de bac e ias G am nega i as que son solubi
lízado es p ecoces (68,49 po cien o), es meno que el co espondien
e a los solubilízado es a díos (57,04 po cien o), al con a io que
ocu e en los G am posi i os (31,50-52,94 po cien o).
Pa a con as a si es as di e encias de po cen ajes obse adas
(c ecien e en un caso y dec ecien e en o o) son signi ica i as a un
ni el de signi icación a, siendo los amaños de la mues a pequeños
y dis in os, y po an o 02 I :J 2 exis e un mé odo en el que se cal-
p, P2
cula un es adíg a o de p ueba que sigue la dis ibución de la " " de
S uclen con 1I g adoS' de lihe ad.
En es e caso se ha ealizado el cálculo pa a las bac e ias G am
nega i as. Si la di e encia de po cen ajes de es e g upo es signi i
ca i a, ambién lo se á pa a las G am posi i as.
Los alo es ob enidos son =2,122 y =1,670; como quie a que
2,122>1,670 la di e encia esul a signi ica i a al ni el de signi ica
ción empleado 0,05 (95 po cien o de con ianza).
RESUMEN
Se ha de e minado la capacidad de solubilización de os a o ino gá
nico de bac e ias del suelo que poseen es a condición. Se es ablecen di e
en es g upos a endiendo de una pa e a la in ensidad solubilizado a de
las baG e ias (median e unos in dices de solubilización) y de o a al iempo
empleado en p oduci la. Pos e io men e se es udian las elaciones exis
en es en e ambos aspec os: capacidad solubilizado a y iempo de solu
bilización y -en e és os y la G am posi i idad y nega i idad de las bac-
406 ARS PHARMACEUTICA
e ias. El obj·e o de es as elaciones 'es con ibui a es ablece c i e ios de
selección que pueden ayuda en la elección de cepas solubilizado as. Se ha
ealizado igualmen e un cuidadoso análisis es adís ico de los esul ados.
SUMMARY
The abili y o dissol e ino ganic phospha e by soil bac e ia was de e 
mined in hese kind o o ganisms. Di e en g oups we e es ablished
acco ding o he in ensi y o he sol ing ac ion using a p oposed solu
biliza ion pa ame e s, and wi h ime equi ed o p oduce i . A s udy o
he posible co ec ion among he abili y o dissol e phospha e, he ime
used and he G am s ain was made. The pu pose o he wo k was o
con ibu e in he c i e ía o selec ion oí he dissol ing phospha e s ains.
A ca e ully s a is ical analysis oI he esul s was also made.
RESUME
On a de e miné la capaci é de solubiliza ion du phospha e ino gani
que des bac e ies du sol qui posec en ce e condi ion. On peu e abli
des di é en g oupes ayan ·comp e d'un co é l'in ensi é solubiliza ice
des bac e ies (a ec d.es indixes de solubiliza ion) e d'au e le emps
employé en la p odui e. Pos é ieu emen s'es udien les éla ions qui exis
en ·en e les deux e la G am posi i i é e nega i i é des bac e ies. L'obje
de ces ela ions c'es de con lbue a s abl1 des c i e iums de selec 10n
qui nous aiden a l'elec ion de souches solubiliza ices. On a e alisé
égalemen un ·comple analyse s a is 1que des ésul a s.
BIBLIOGRAFIA
1. ALEXANDER, M. "In oduc ion o soU mic obiology". Willey and Son s
Inc. London (1967).
2. AZCON, R. Tesis Doc o al. Uni e sidad de G anada (1972).
3. AZCON, R., BAREA, J. M., CALLAO, V. Cuad. C. Biol. 2, 23-30 (19712).
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5. JOHNSTON, H. New Zeeland J. ScL and Tech. B-33, 436-46 (952).
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p o ol, nauch-islled. Ins . Sel. Khoz. 1, 52-4 (1956).
8. RAMOS, A., CALLAO, V. Y CARVALHO de P.C.T. Mic obiol. Esp. 21, 23-37
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9. SACKETT, W. C., PATTEN, A. 1. Y BROWN, C. W. Zbl. Bek . ab . 2, 28, 688
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10. SPERBER, J. 1. Aus al. J. Ag ic. es. 9, 778-812 (958).
11. TARDIEUx-RoCHE, A. Theses Facul e des Sciences. Uni . Pa is (1966).
12. VIEDMA, J. A. Mé odos es adís icos. Ediciones del Cas illo. :M:ad id (972).
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