Cathepsin B aus humanen Lungentumoren: Kinetische und molekulare Charakterisierung

Cathepsin B aus menschlichen Lungen tumoren: kinetische und molekulare Charakterisierung - Regulierung und klinische Bedeutung

Bernd Werle

Dr. sc. hum. Cathepsin B aus menschlichen Lungentumoren: Kinetische und molekulare Charakterisierung - Regulierung und klinische Bedeutung Geboren am 18.01.1963 in Heidelberg Reifeprüfung am 7.06.1983 in Heidelberg Studiengang des Fachbereichs Chemie von WS 1984/1985 bis WS 1991/1992 Vordiplom am 26.11.1987 an der Universität Heidelberg Diplom am 27.09.1991 an der Universität Heidelberg Promotionsfach: Klinische Chemie Doktor: Prof. Dr. rer. nat. W. Eberthe

Um die letzte Hypothese zu stützen, wurden grundlegende Experimente durchgeführt, um die Aktivität und Stabilität von Cathepsin B abhängig von dem pH-Wert zu untersuchen. Neben dem Aktivitätsmaximum bei pH 6.0 - 6.5 konnten zwei Schultern bei pH 4.5 - 5.5 und pH 7.0 - 7.5 beobachtet werden.

Bemerkenswert ist, dass im Tumorgewebe ein Anstieg der Aktivität von Cathepsin B im sauren pH-Bereich auftritt. Bei pH 7.5, die Prüfung der Stabilität von Cathepsin B nach der Inkubation bei einem pH-Wert von 7.5, ergab, dass die Enzymaktivität von 82 bis 100 Prozent der Ausgangswerte bei pH 5.0 bis 5.5, während die Aktivität in einem pH-Bereich von 5.5 bis 7.4 drastisch auf 26 bis 42 Prozent zurückgegangen ist. Bei pH 7.5, jedoch, die Aktivität von Cathepsin B war immer noch 20 bis 34 Prozent vorhanden. Diese Aktivität war im Vergleich zu normalen Lungenchemikalien in Tumorgeweben signifikant erhöht.

Auf der Grundlage dieser Untersuchungen konnte kein Unterschied in der Molekülmasse zwischen Tumor- und Lungengewebe nachgewiesen werden. Auf der Suche nach sehr viel diskreteren strukturellen Unterschieden wurde Cathepsin Begen durch die Anwendung der 2-Dimensional-Electrophore-Technik analysiert. Cathepsin B ist in der normalen Lungenparenchemie in 1 bis 3 Einzelformen mit einer Molekülmasse von 32 kDa und den zugehörigen isoelektrischen Punkten von 4,98; 5,21 und 5,21 kDabei konnten die Ketten 1 bis 2 in den Doppelketten mit einer Masse von 5,21 kDabei konnten die Ketten 5 bis 5,21 kDabei wurden die Ketten 3 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5,2 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 5 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis 7 bis

Die Untersuchung ergab jedoch, dass die Expression von Cathepsin B-Aktivität bei einem pH-Wert von 7,5 TNM-Phasen oder von sekundären Prognosefaktoren wie dem Alter oder der Verlangsamungsphasen hängt dieser Tumor-assoziierte Cathepsin B-Aktivität als signifikanter als das Wachstum von B-Phasen oder der B-Phasen als das Wachstum von B-Phasen oder der B-Phasen als signifikanter als das Wachstum von B-Phasen oder der B-Phasen als das Wachstum von B-Phasen oder der B-Phasen hängt von der Tatsache ab, dass die Expression von Cathepsin B-Aktivität bei diesem pH-Wert bei 7,5 TNM-Phasen als das Wachstum von B-Phasen hängt.

Die Bestimmung der Substratumsatzrate wird durch die K objektiviert.

- Wert von 0,4 mM für die

Unterschiede in den K-Werten von Cathepsin B aus Tumor- und Lungengewebe konnten nicht nachgewiesen werden. Trotzdem finden wir eine schnellere Umwandlung des Ein-Kette-Forms in die Doppelkette-Form von Cathepsin B aus Tumorgewebe im Vergleich zu dem jeweils zugehörigen Lungenparenzym.