Die Selbstverknüpfung des NS1-Proteins als Schlüsselelement für den Parvoviralen Lebenszyklus
Aurora Pujol Onofre
Dr.med. Die Selbstverknüpfung des NS1-Proteins als Schlüsselelement für den Parvoviral-Lebenszyklus Geboren am 15.05.1968 in Barcelona, Spanien Reifeprüfung am 07.06.1986 in Barcelona, Spanien Studiengang der Fachrichtung Medizin vom WS 1986 bis SS 1993 Klinisches Studium in Barcelona, Spanien Praktisches Jahr in Barcelona, Spanien und Heidelberg Staatsexamen am 05.07.1993 an der Universität Autonoma de Barcelona Promotionsfach: Deutsches Krebsforschungszentrum (DKFZ) Doktorvater: Prof. Rommelaere, PhD Die Oligomerisierung NS1 als Schlüsselreignis des autonomen Lebenszyklus der autonomen Lebenszyklus H-1 und MVM (Minute der Mäuse), gehören zur Familie der Mausen. Diese Prozesse sind in einer unabhängigen Phase des Verteidigungsprozesses der Verteidigung der Verteidigung der Verteidigung der Verteidigung der Verteidigung der Verteidigung der Verteidigung der Verteidigung der Verteidigung der Verteidigung der Verteuerung der Verteuerung der Verteuerung der Verteuerung der Verteuerung der Verteuerung der Verteuerung der Verteuerung der Verteuerung.
Es ist in der Lage, ATP zu binden und zu hydrolysieren und zu besitzen Endonuklease- und Helikaseaktivität. Es reguliert weiterhin die Aktivität der viralen Promotoren und Steuern der Replikation der viralen Genome, Funktionen, die mit dem zytotoxischen Wirkung von NS1 in neoplastisch transformierten Zellen zusammenhängen. Für viele dieser Eigenschaften wurde postuliert, dass NS1 als Homo-Oligomer vorliegen muss. Unser Ziel war, diese Oligomerisierung nachzuweisen, und deren Folgen für die Funktion von NS1 zu untersuchen. Für eine immense Lokalisierung der Oligomerisierungsdomäne wurden Tehranten Hybrid System eingesetzt.
Eine genaue Identifikation der beiden Elemente bestehenden Interaktionsmotiven konnte dann
Mit Hilfe einer Peptid-Immuno-ELISA
Peptide, sterben sterben
Oligomerisierungsdomäne von NS1 repräsentierten, als spezifische
in vitro
Inhibitoren der Helikaseaktivität von NS1.
in vivo
durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch durch
Mikroinjektionsexperimente eine vollständige Hemmung der parvoviralen DNA Replikation
In weiteren Studien sollte die Frage geklärt werden, ob NS1-Oligomerisierung für die Regulierung der Transkription notwendig ist. Mit einer dominant-negativen NS1-Mutanten, die zwar weiterhin oligomerisieren können, aber nicht mehr transkriptionell aktiv ist und keine DNA mehr bindet, wurden eine Reihe von Versuchen durchgeführt. Es konnte gezeigt werden, dass die Oligomerisierung von NS1 nicht nur für die virale DNA-Replikation notwendig ist, sondern auch Voraussetzung für die transkriptionelle Regulierung der viralen und heterologen Promotoren sowie für die Zytotoxization von NS1 in transformierten Zellen.