Untersuchung der biologischen Relevanz von TNF-alpha-supprimierten, endothelialen Genen nach verschiedenen Stimuli in vitro und unter patholphysiologischen Bedingungen in vivo
Birgit Liliensiek
Dr. sc. hum. Untersuchung der biologischen Relevanz von TNF-supprimierten, endothelialen Genen nach verschiedenen Stimuli in vitro und unter pathophysiologischen Bedingungen in vivo Geboren am 25.08.1965 in Osnabrück Reifeprüfung am 03.06.1986 in Osnabrück Studiengang des Fachbereichs Biologie von WS 1986 bis SS 1992 Abschluss am 23.11.1988 an der Universität Osnabrück Diplom am 18.05.1992 an der Universität Osnabrück Promotion: Innere Medizin Doktorat: Priv.-Doz. Dr. med. P. P. Nawroth Die biologische Relevanz von 6 TNF-supprimierten, aus einer subtrven Genbank klonierten, endothelialen Rindergenen konnte mit Hilfe von Versuchen in vitro und in vivo ermittelt werden.
Unbehandelte und mit TNF-Behinderten
die BAEC-Stimuler wurden isoliert, mit
Wachsende Fibroblasten oder verletzte, einlagige Fibroblastkulturen inkubiert
Eine der zu untersuchenden, klonierten, endothelialen cDNAs, die für den Wachstumsfaktor CTGF kodiert wurden, wurde mit TNF-behandelten BAEC-Zellkulturüberschreitungen in kultivierten Fibroblasten verbreitet, zeigte, dass TNF-BAEC die Sekretion von Mitogenen für Fibroblasten reduzierte. Eine der zu untersuchenden, klonierten, endothelialen cDNAs, die für den Wachstumsfaktor CTGF kodiert wurden.
Wundheilung ist notwendig, wird von Endothelzellen
in vitro
Durch die Sekretion von
Wachstumsfaktor CTGF kontrolliert, dessen Ausdruck wiederum negativ durch
Die Unterdrückung von CTGF durch
Es handelt sich um eine potentielle
Die Möglichkeit, bei Wundheilungstörungen zu intervenieren, als Begleiterscheinung von
Erkrankungen mit erhöhten TNF-Phasen
Konzentrationen im Plasma. ESbl-lacZ-Lymphzellen, die spontane Lebermetastasen bilden, wurden in immun- oder immunkompetente Mäuse injiziert, bis zur maximalen Metastasengröße inkubiert, die sinus-leberalen Lebermetastasen in vivo isoliert und die Genexpression von 49 TNF-supprimierten Genen untersucht. Für 4 der untersuchten Gene wurde eine Veränderung der Expression in gesunden, sinus-leberalen Endotellen aus dem Zielorgan der Metastasierung in Abhängigkeit vom Immunzustand der Tumorträgermäuse bis zur maximalen Metastasengröße nachgewiesen.
Für die Untersuchung der Genexpression wurde außerdem ein
Das Lebertransplantationsmodell wurde verwendet.
(Tag 1, 2 und 6) der Abstoßreaktion entnommen und zur Isolierung von GesamtRNA und Proteinen verwendet wurden. Genexpressionsuntersuchungen der genannten 49 Gene auf RNA-Ebene zeigten, dass die Expression von Polyubiquitin (A4) und Fibronektin (A8) durch die akute Abstoßreaktion modifiziert wurde. Polyubiquitin mRNA (A4) wurde im Untersuchungszeitraum unterdrückt, während eine geringere Proteinmenge erst am letzten Tag (Tag 6) der Abstoßreaktion entdeckt wurde. Fibronektin (A8) wurde zunächst auf RNA-Ebene induziert.