Fluorescence in situ expériences d'hybridation sur des fibres d'ADN étendues

Jürgen Kraus

Dr.sc.hum. Fluorescence in situ HybridisationExpériences sur des fibres d'ADN étendues né le 21.02.1968 à Aschaffenburg Épreuve de maturité le 26.06.1987 à Aschaffenburg Cours de biologie de 1987 à 1993 diplôme d'études supérieures du 12.03.1990 à l'Université de Würzburg Diplôme du 18.11.1993 à l'Université de Würzburg Diplôme de doctorat: génétique humaine Docteur: Prof.Dr.med. Thomas Cremer La technique de fluorescence in situ Hybridisation a été étendue dans son spectre performant depuis le début des années 1990 par deux méthodes essentielles.

Combinaison moléculaire

la technologie FISH à haute résolution a permis de reproduire

Elongation et alignement parallèle des molécules d'ADN cosmide clonées et linéaires

L'orientation des molécules ainsi que leur intégrité ont permis de

par deux couleurs

à l'intérieur de l'appareil

Hybridation réussie de l'ADN vecteur et de l'ADN cosmide total

Un système de modélisation de l'hybridation génomique comparative à haute résolution sur des fibres d'ADN combustives a été établi.

Il a été possible d'établir une corrélation nettement linéaire entre le rapport de contact utilisé et

Le taux de fluorescence mesuré est basé sur l'évaluation d'un total de 651

L'amplification de MYCN dans la cellule neuroblastomique Kelly sur le cosmide MYCN a été démontrée dans des expériences de fibres CGH. En raison de la faible représentation de MYCN dans l'ADN de référence, des évaluations quantitatives comparables n'ont pas été possibles.

Pour augmenter la représentation des séquences de copies individuelles, des

Chromatographie d'affinité séquences répétitives d'ADN génomique ou d'ADN PAC

à distance. Fluorescence

à l'intérieur de l'appareil

Les hybridations sur les chromosomes métaphasés ont pu être réalisées avec ces

Le but d'un programme d'amélioration de la qualité de l'ADN est d'améliorer les performances de l'ADN déployé sans l'ADN de compétiteur Cot-1.

La réalisation d'expériences quantitatives de pêche sans conditions de suppression a permis de

L'analyse CGH d'une cellule neuroblastomique à double

ADN tumoral et de référence déplié par séquence de répétition sans utilisation de Cot-1

L'utilisation d'ADN PAC dépleté comme ADN cible dans une expérience matrice-CGH a permis de démontrer la possibilité d'utiliser de l'ADN dépleté comme ADN cible dans une expérience matrice-CGH en détectant une amplification c-myc connue d'environ 20 fois dans la cellule promyélotique HL-60. Cependant, une augmentation du taux de fluorescence par rapport à l'expérience d'ADN non dépleté comme ADN cible n'a pas été atteinte jusqu'à présent.

Pour déterminer l'ampleur de l'amplification MYCN dans la cellule neuroblastomique Kelly

Deux cosmides marqués différemment par hapte ont été testés [pNb101(test cosmide) /

cAW7(cosmide de référence)] simultanément sur génomiques traditionnellement préparés à la combustion

L'ADN neuroblastomique, ou ADN de référence génomique, est hybridé.

La mesure de la longueur des chaînes de signaux d'hybridation a permis de déterminer l'amplification à 101 fois. Ce résultat est en parfaite conformité avec l'amplification autoradiographique estimée à 100 fois.

Les méthodes de CGH à haute résolution (Fibre-CGH / Matrix-CGH) présentent deux avantages:

Il s'agit d'une approche qui permettra à l'avenir d'utiliser la méthode d'hybridation génomique comparative.

une utilisation routinière en génétique tumorale et en diagnostic clinique

Il s'agit d'une approche de l'automatisation de la procédure et de la mise en œuvre d'une approche de l'automatisation de la procédure.

Il s'agit d'une approche de l'élimination des cariotypes qui nécessitent de la main-d'œuvre et de l'élimination des cariotypes qui nécessitent de la main-d'œuvre et de l'élimination des cariotypes qui nécessitent de la main-d'œuvre et de l'élimination des cariotypes qui nécessitent de la main-d'œuvre et de l'élimination des cariotypes qui nécessitent de la main-d'œuvre et de l'élimination des cariotypes qui nécessitent de la main-d'œuvre et de l'élimination des cariotypes qui nécessitent de la main-d'œuvre.

L'ADN de l'échantillon peut être hybridé pour

à l'extérieur de l'appareil

Le test génomique de l'ADN

L'ampleur des délections et des amplifications dans la sphère kb est physiquement cartographiée et le nombre de délections et d'amplifications dans la sphère kb

L'amplification de l'amplification est déterminée, ce qui permet d'obtenir un amplificateur à haute résolution approprié.

Un système d'analyse génomique dont la sensibilité s'améliore au fur et à mesure que le

Les protocoles d'épuisement seront encore augmentés.

La plupart des aberrations numériques et structurelles sont capturées par la technique FISH

Elle peut ainsi être combinée avec des génomes déjà établis pour l'expression et l'expression de l'organisme.

Les systèmes d'analyse des séquences contribuent essentiellement à l'étude de la biologie du génome.