Expression und klinische Bedeutung der Cysteineprotease-Inhibitoren Stefin A, Stefin B und Cystatin C in Lungen-Krebsgewebe und Lungenparenchemie
Eileen Katja Ebert
Dr. med. Ausdruck und klinische Bedeutung der Cysteineprotease-Inhibitoren Stefin A, Stefin B und Cystatin C in Lungengewebe und Lungenparenchyme geboren am 17.07.1971 in Heidelberg Reifeprüfung am 16.05.1990 in Schriesheim Studiengang der Fachrichtung Medizin von WS 1990 bis SS 1997 Physik am 7.09.1992 an der Universität Heidelberg Klinische Studie an der Universität Heidelberg Praxisjahr in St. Joseph's Hospital Heidelberg, Mc Gill University Montreal, Kanada Staatsprüfung am 14.05.1997 an der Universität Heidelberg Promotion: Innere Medizin Doktor: Prof. Dr. med. P.
Gleichgewicht zwischen Proteasen und deren Inhibitoren auf der Proteasenseite
Das Ziel dieser Dissertation war es daher, die Expression von Cysteineprotease-Inhibitoren in Lungentumorgeweben im Vergleich zu Lungenparenchymen (Paarproben) zu untersuchen. im ersten Teil der Arbeit sollten die Cysteineprotease-Inhibitoren in den Gewebehomogenaten nach SDS-PAGE durch Immunoblotting dargestellt werden. im zweiten Teil der Arbeit sollten die Gewebespiegel der Cysteineprotease-Inhibitoren mit Hilfe von Enimmunoassays in einer größeren Serie quantifiziert und mit klinischen Prognosefaktoren korreliert werden.
1. Durch die Übertragung von Proteinen, die im SDS-PAGE getrennt wurden, auf
Nitrosellulose und anschließende immunologische Nachweis mit monoklonalen
Antikörper Stefin A, Stefin B und Cystatin C konnten in Tumor- und Lungengewebe nachgewiesen werden. Aufgrund der geringen Inhibitormengen in den Gewebehomogenaten konnte die Visualisierung nur durch die Anwendung der hochempfindlichen Enhanced Chemoluminescence-Technik erfolgen. Die Stefin-Bands wurden bei 11 kDa und die Cystatin-C-Bands bei 13 kDa detektiert.
2. Die quantitative Bestimmung der Cysteine-Protease-Inhibitoren in 78 paartigen Proben ergab,
Im Lungentumor verglichen mit dem tumorfreien Lungengewebe sind die medianen
Die Wirkstoffspiegel wurden um 1,9-fache (p<0.0001) und von Stefin B um 1,3-fache (p<0.001) erhöht.
Im Gegensatz dazu war die mediane Konzentration von Cystatin C im Lungengewebe um den Faktor 1.4 geringfügig höher als im Tumorgewebe, wobei Cystatin C jedoch quantitativ nur eine geringfügige Rolle spielt, da Cystatin C in molarem Verhältnis zu den Stefinen im Tumorgewebe wie 1 : 49 und im Lungengewebe wie 1: 26 gehörte. Die erhöhten Stefinenkonzentrationen betreffen ausschließlich die primären Lungengewebe, da in den Lungenmetastasen von anderen Organstumoren keine Unterscheidung zwischen normalen und korrespondierenden Geweben besteht.
Inflammationsreaktion (p=0.011). Trotzdem waren die Stefin-Spiegel - für Stefin A
- in inflammationsfreiem Tumorgewebe immer noch höher als im
Kontrollgewebe: Die Gewebespiegel der Stefine in den primären Lungentumoren
Die Ergebnisse der Untersuchungen zeigten, dass die Ergebnisse der Untersuchungen mit dem Ergebnis, dass die Patienten nach der Operation überlebten, korrelierten.
Prognosisch ungünstig (p=0.012) erwiesen sich niedrige Werte für den Stefin-Differenz
B-Konzentrationen zwischen Lungentumoren und dem entsprechenden Lungengewebe,
d. h. in Fällen, in denen die Stefin-Konzentration im Tumorgewebe im gleichen Bereich ist
Die Kontrolle der Lungentumor-assoziierten Cysteineprotease wird hauptsächlich von den Inhibitoren Stefin A und Stefin B getragen. Cystatin C ist von geringem Stellenwert. Trotz erhöhter Stefinkonzentrationen im Lungentumorgewebe besteht auf molarer Basis ein Ungleichgewicht zwischen den Inhibitoren und den Cathepsinen B und L zugunsten der Protease, wenn die gleichen Probeenzentren an anderer Stelle mit demselben Material gemessen werden.