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Biomecánica, 11, 2003, pp. 3-9
Es udio in i o de la ac i idad ci o óxica de esinas
den ales ipo BIS-GMA
RÍOS, M1, CEPERO, J2, KRAEL, R3, DAVIDENKO,N3, GONZÁLEZ, A2
1Cen o de Con ol Es a al de Equipos Médicos (CCEEM). G upo de E aluación P eclínica,
2Ins i u o de Oncología y Radiobiología (INOR). Depa amen o de Ensayos P eclínicos,
3Cen o de Bioma e iales. Uni e sidad de La Habana.
.
Resumen
Las esinas composi es se emplean desde hace a ias décadas en dis in as aplicaciones
es oma ológicas, ol iéndose indispensables pa a log a una al a calidad en los se icios mode -
nos. Uno de los monóme os ac ílicos más u ilizados en es os ma e iales polimé icos de ecub imien-
o es el 2-bis-[p-(2-hid oxi-3-me ac iloxip opoxi) enil] p opano, conocido comúnmen e como Bis-
GMA. El conocimien o de las in e acciones de es os ma e iales con el sis ema biológico es de i al
impo ancia debido al uso an di undido de los mismos en la p ác ica clínica. El compo amien o de
una célula i a en con ac o con un ma e ial ex año es un p oblema esencial en las aplicaciones
biomédicas de políme os sin é icos. Los ensayos in i o son sis emas muy ú iles pa a la e aluación
de los e ec os biológicos de los bioma e iales.
En el labo a o io de Inmuno a macología del INOR se lle ó a cabo la e aluación de la
oxicidad de dos esinas den ales ipo Bis-GMA p oducidas po el Cen o de Bioma e iales de la
Uni e sidad de La Habana: el Ob uden Fo ocu ado (FC), esina o opolime izable pa a es au a-
ciones den ales y el Cub idem Au ocu ado (AC), sellan e den al pa a osas y isu as. Es e es udio
o ma pa e de las e aluaciones p eclínicas biológicas de bioma e iales y equipos médicos
implan ables que se lle a a cabo en Cuba a a és de la Red Funcional de Implan ología del
Minis e io de Salud Pública. Se aplicó el mé odo de ci o oxicidad in i o desc i o po S anley pa a
la e aluación oxicológica de ma e iales den ales. Ambos composi es esul a on ci o óxicos pa a
la línea de ib oblas os L929, lo que se co esponde con lo desc i o en la li e a u a pa a es e ipo
de ma e ial. Su ci o oxicidad se encon ó en el ango de la de los análogos come ciales e aluados.
Abs ac
Composi e esins a e being used in den al applica ions some decades ago and hey ha e become
indispensable o high quali y mode n se ices. The bis-phenol-A-diglycidyle he dime hac yla e,
commonly known as Bis-GMA, is one o he ac ylic monome s mo e used in hese illing polyme ic
ma e ials.The knowledge o biological sys ems and den al ma e ials in e ac ions has a i al
impo ance because o he sp ead use o hese ma e ials in clinical p ac ice. The cell beha io in he
s ange ma e ial in e ace is an essen ial p oblem in he biomedical applica ions o syn he ic polyme s.
In i o assays a e use ul sys ems o he biological e alua ion o bioma e ials.
In he Immunopha macology labo a o y a Oncology Ins i u e we e alua ed he cy o oxici y o
wo Bis-GMA den al esins p oduced by he Ha ana Uni e si y Cen e o Bioma e ials: Ob uden
FC, pho ocu ed esin o den al es o a ions and Cub idem AC, den al sealing o pi s and issu es.
This s udy is pa o he p eclinical biological e alua ion o bioma e ials and medical de ices ha
ake place in Cuba h ough he Heal h Minis y Func ional Implan ology Ne wo k. We applied he
in i o cy o oxici y es desc ibed by S anley o a oxicological e alua ion o den al ma e ials.
Bo h composi es we e cy o oxic in L929 ib oblas line, in acco dance wi h he li e a u e epo s o
his kind o ma e ials. Thei cy o oxici y was in he ange o he comme cial analogs e alua ed.
Palab as Cla es: composi e esins, polyme ic ma e ials, syn he ic polyme s, Bis-GMA den al esins,
in i o assays, biological e alua ion, cy o oxici y.
4
In oducción
Los bioma e iales son po de inición aquellos
ma e iales que asumen las unciones de los ejidos
en los ó ganos na u ales, siendo capaces de imi a
en lo posible las p opiedades del ejido en su am-
bien e biológico. Los bioma e iales deben euni los
equisi os de ac ibilidad uncional, bioes abilidad,
biocompa ibilidad y es e ilidad.1, 2
Hoy en día, es una p ác ica habi ual en Odon o-
logía el empleo de ecub imien os polimé icos, an-
o con ines p e en i os (sellan es de osas y isu as,
adhesi os, e c) y es au a i os (ob u an es) como
es é icos. En la mayo pa e de es os ma e iales el
p oceso de polime ización ( aguado) se inicia a a-
és de un mecanismo de adicales lib es, p oduci-
dos an o po ía química (sis emas au ocu ados)
como po la acción de la luz (sis emas o ocu ados).
La mayo ía de los ecub imien os den ales
o opolime izables, con ienen una mezcla, cuidado-
samen e seleccionada, de monóme os ac ílicos
mono- y mul i- uncionales, siendo uno de los más
u ilizados el 2-bis-[p-(2-hid oxi-3-me ac ilo-
xip opoxi) enil] p opano, conocido comúnmen e
como Bis-GMA, que ue desa ollado po Ra ael
Bowen en 1956. Es os ma e iales compues os,
composi es, es án gene almen e cons i uidos po una
ma iz polimé ica y un elleno ino gánico. El análi-
sis de las esinas den ales y los ma e iales
composi es han demos ado que la mayo ía de ellos
con ienen dime ac ila os de i ados del Bis-GMA.3-
11
A pesa del p og eso en el desa ollo de nue os
ma e iales den ales polimé icos, han exis ido algu-
nos p oblemas en su aplicación; en e ellos: deg a-
dación química, daños mecánicos del políme o en
el ambien e de la mucosa o al y ambién p oblemas
alé gicos y oxicológicos. Se han epo ado eac-
ciones alé gicas a las esinas de composi es causa-
das po las moléculas de Bis-GMA; o as sus an-
cias, como el me il me ac ila o, p esen an una oxi-
cidad pulpa ela i amen e al a. Es os sis emas
polimé icos se colocan en con ac o con el ejido in-
media amen e después de mezclados, po lo que
uno o más de sus componen es pueden mig a al
mismo, ocasionando espues as locales i i an es, o
óxicas de o igen sis émico.3, 4,12-19
La despolime ización es ampliamen e econoci-
da como el mayo incon enien e de los ma e iales
de es au ación den al basados en esinas. La can-
idad de p oduc os mig ables se elaciona indi ec-
amen e con el peso molecula y di ec amen e con
la di usibilidad de las moléculas del políme o. Los
componen es ci o óxicos son ex aídos de las esi-
nas en di e en es can idades y a di e en es p o-
po ciones y la can idad de p oduc os óxicos
mig ables puede se a ec ada po el pH. Las sus-
ancias que eluyen pueden inhibi el c ecimien o
celula , p o oca cambios en el pH del medio y al-
e a a ios p ocesos me abólicos, como el me a-
bolismo lipídico. Algunos es udios ealizados con
esinas ac i adas po di e en es ías han demos-
ado un mayo e ec o ci o óxico pa a los elua os
ecob ados a un meno iempo de ex acción.3,20-25
El uso de esinas pa a es au aciones indi ec as
es á di undiéndose con apidez y cons i uye una
aplicación impo an e en la p ác ica clínica, po lo
que es de i al impo ancia el conocimien o de las
in e acciones de es os ma e iales con el sis ema
biológico. El compo amien o de una célula i a en
con ac o con un ma e ial ex año es un p oblema
esencial en las aplicaciones biomédicas de políme os
sin é icos. Los es udios oxicológicos cons i uyen una
he amien a e icaz en es as in es igaciones y sus
esul ados pueden se i de base pa a hace p e-
dicciones y p oyecciones azonables ace ca de las
condiciones en que el p oduc o o ece segu i-
dad.1,3,26-30
Los ensayos in i o son sis emas muy ú iles
pa a la e aluación de los e ec os biológicos de los
bioma e iales y ienen como en ajas que no e-
quie en el uso de animales de expe imen ación, la
apidez con que se ealizan los es udios y la ela-
ción cos o/e ec i idad de los mismos. Los cul i os
de células son modelos oxicológicos al e na i os
de g an sensibilidad, lo que es una en aja impo -
an e pa a el amizaje de oxicidad de u ina de los
bioma e iales, aunque no siemp e las espues as in
i o son indicado as de eacciones in i o ya que
las condiciones que pueden ep oduci se in i o
son solo una pa e de las que pueden p esen a se
in i o. Una de las p incipales a acciones del uso
del cul i o de ejidos es la posibilidad de obse a el
compo amien o de ipos especí icos de células i-
as en un ambien e con olado.21,31-36
La e aluación cuan i a i a del daño celula se
basa en la medición de la libe ación de azado es
adioac i os po las células ma cadas expues as a
un agen e óxico. Un sis ema de ensayo ecomen-
dado en es e ipo de es udio es la línea celula L-
Co espondencia:
Cen o de Con ol Es a al de Equipos Médicos
(CCEEM). G upo de E aluación P eclínica. Calle 4 No.
455 e/ 19 y 21. Vedado. Plaza de la Re olución. CP 10
400. Ciudad de La Habana. Cuba. Tel. (537) 832 50 72
E-mail: [email p o ec ed]
5
929 de ib oblas os. Es as células es án especiali-
zadas en el es ablecimien o y man enimien o de la
es uc u a de la ma iz ex acelula , en cuya un-
ción son muy impo an es las in e acciones célula-
célula y célula-sus a o. Es a es una línea celula
es ablecida, disponible y bien ca ac e izada, que ha
demos ado esul ados ep oducibles en muchos la-
bo a o ios.37
En el Labo a o io de Inmuno a macología del
INOR se lle ó a cabo la e aluación de la oxicidad
in i o de dos esinas ipo Bis-GMA ob enidas en
el Cen o de Bioma e iales de la Uni e sidad de La
Habana, el Ob uden FC y el Cub idem AC, como
pa e de la e aluación p eclínica biológica de
bioma e iales y equipos médicos implan ables que
se lle a a cabo en Cuba a a és de la Red Funcio-
nal de Implan ología del MINSAP.
Ma e iales y Mé odos
El Ob uden FC es una esina o o-polime izable
pa a es au aciones den ales y el Cub idem AC es
un sellan e den al au ocu ado pa a osas y isu as.
En ambos ma e iales la ma iz polimé ica es á cons-
i uida po Bis-GMA y dime ac ila o de
e ae ilenglicol en di e en es p opo ciones, en e
o os compues os. El Ob uden FC p esen a como
elleno ino gánico cua zo cubano del yacimien o del
Cacahual, que cons i uye el componen e sólido
mayo i a io (77 % del ma e ial). Pa a la e aluación
oxicológica de es os ma e iales se aplicó el ensayo
de ci o oxicidad in i o (con ac o di ec o) en la lí-
nea de ib oblas o de a ón L929, desc i o po
S anley.38
Ensayo de ci o oxicidad in i o:
Las células L929 se subcul i a on en Medio
RPMI 1640 suplemen ado con 10 % de sue o
e al bo ino, du an e 3-5 días p e ios a la ealiza-
ción del ensayo. Luego se colec a on en ipsina
al 0.25% en solución salina, se ma ca on du an-
e 24 h con 1.5 mCi 51C /106 células y se ajus a-
on a una concen ación inal de 3 x 105 células/
mL; la iabilidad ue del 97%.
Los ma e iales se deposi a on en placas de
polies i eno es é iles de 24 pozos po 10 éplicas.
Se ealiza on dos se ies de ensayos, cada una en
dos placas de cul i o: en un caso las células se sem-
b a on a los 30 min del mezclado inicial de los com-
ponen es del ma e ial (2.0 mL de la suspensión
celula po pozo) y en el o o la siemb a se ealizó a
las 24 ho as de comenzada la polime ización. Se
emplea on 2.0 mL de la suspensión celula como
con ol nega i o y 2.0 mL de dicha suspensión
más 0.2 mL de enol al 6.4 % como con ol posi i-
o, ambos po 5 éplicas.
Las placas se incuba on a 37ºC, po 4 y 24 h
espec i amen e, en ambos casos y se e aluó la
ci o oxicidad de los ma e iales al cabo de cada iem-
po de con ac o con las células. T anscu ido el iem-
po se ex ajo 1.0 mL del medio sob enadan e de
cada pozo en las placas co espondien es y se
cen i ugó a 2500 pm du an e 10 min, sepa ándo-
se 0.5 mL del sob enadan e pa a el con eo de la
adioac i idad du an e 10 min/ ubo. Se calculó el
% de libe ación de 51C , empleando como alo de
e e encia de adioac i idad o al el p omedio de
los con eos de 4 mues as de 0.5 mL de la suspen-
sión celula ma cada. Pa a el análisis es adís ico
de los esul ados se ealizó una compa ación múl i-
ple de medias a a és de la p ueba de Duncan.
Resul ados y Discusión
Los esul ados ob enidos en la aplicación del
ensayo de ci o oxicidad in i o con el Cub idem
AC y un análogo come cial (Col ene b illian ma gin
bond) (Figu a 1) indican que ambos son se e a-
men e ci o óxicos, de acue do con la clasi icación
p opues a po S anley, ya que los po cen ajes de
libe ación de 51C exceden el doble del alo de la
media del con ol nega i o en los ensayos de 24
ho as con el ma e ial esco y endu ecido. No exis-
e di e encia en e la ci o oxicidad del p oduc o y la
del con ol come cial.
Los esul ados ob enidos con el Ob uden FC
y un con ol come cial (Degu ill LC) (Figu a 2)
mues an que ambos ma e iales ambién esul-
an se e amen e ci o óxicos. En los ensayos de
4 y 24 h de exposición, an o con el ma e ial esco
como endu ecido, la libe ación de 51C po las célu-
las excede el doble del alo de la media del con ol
nega i o, lo que ambién ocu e con el con ol
come cial.Es os esul ados concue dan con epo -
es an e io es en la li e a u a que e idencian que
esinas den ales basadas en Bis-GMA y
dime ac ila os de glicoles, como los casos de es e
es udio, mani ies an e ec os óxicos signi ica i os
sob e cul i os celula es, lo cual se a ibuye a la
mig ación de los monóme os u oligóme os
esiduales hacia el cul i o celula . El ma e ial
mig able ep esen a al ededo de un e cio del peso
de la po ción o gánica del composi e.21,39
Los componen es usuales de las esinas den a-
les han mos ado acción ci o óxica aún en g andes
6
Figu a 1. Ci o oxicidad in i o del Cub idem AC con el ma e ial esco (30 min) y
endu ecido (24h). Ensayo a las 4 y 24 ho as de con ac o.
Cn: Con ol nega i o C: Cub idem AC Cc: Con ol come cial
30 min 24 h
Cn: Con ol nega i o O: Ob uden FC Cc: Con ol come cial
30 min 24 h
Figu a 2. Ci o oxicidad in i o del Ob uden FC con el ma e ial esco (30 min) y
endu ecido (24h). Ensayo a las 4 y 24 ho as de con ac o.
En los ensayos ealizados con ambos ma e-
iales cubanos se ob u o que el ma e ial endu e-
cido e a menos ci o óxico que el polime izado 30
minu os an es de la siemb a, al cabo de 4 ho as de
exposición de las células. Es e esul ado se debe a
que al aumen a el iempo de polime ización del
ma e ial, es meno la can idad de sus ancias
mig ables que se desp enden del mismo. El g ado
0
10
20
30
40
50
60
70
80
% Libe ación
G upos
4 Ho as 14,3 58,5 62,2 14,2 26,3 42,1
24 Ho as 30,8 67,4 72,1 32,6 74,2 75,5
Cn CCc Cn CCc
0
10
20
30
40
50
60
70
80
% Libe ación
G upos
4 Ho as 14,2 70,8 69,8 14,1 36,7 61,1
24 Ho as 30,7 72,6 69,8 32,6 72,8 74,4
Cn OCc Cn OCc
diluciones y se ha demos ado que la ex acción
p e ia del ma e ial con sol en es adecuados p o o-
ca la educción de su ci o oxicidad casi en un 90%,
en una azón di ec amen e dependien e de la em-
pe a u a de ex acción. Se ha e idenciado que la
ci o oxicidad de los ma e iales den ales cons i ui-
dos po Bis-GMA es causada p incipalmen e po
es e componen e.21,40,41
7
de polime ización de los composi es es ce ca de un
25 % en la capa supe icial y un 75% en el olu-
men.21 A las 24 ho as de con ac o no se ob u ie on
di e encias en la libe ación de 51C causada po los
ma e iales escos y endu ecidos; es o puede de-
be se a un aumen o de la concen ación de p oduc-
os óxicos en el medio, al se mayo el iempo de
ex acción a que se some en los ma e iales.
La mayo ía de los ma e iales den ales compues-
os de sis emas polimé icos han demos ado e ec-
os óxicos cuando se ensayan en animales de ex-
pe imen ación. Algunos expe imen os in i o han
demos ado que las esinas de es au ación y los
cemen os a base de ac ílicos son i i an es a la pul-
pa, elacionándolo con el hecho de la di usión de
algunos monóme os a a és de la den ina, lo cual
se ha e idenciado con el me ac ila o de me ilo y
o os componen es.3,42-44
Sin emba go, Mjo y Langeland no encon a-
on elación en e el g ado de i i ación pulpa in
i o y la ci o oxicidad in i o de cie os ma e ia-
les. Los esul ados epo ados po No hup expli-
can en pa e es as con adicciones, la compa ación
de la epe ibilidad y la ep oducibilidad del ensayo
de ci o oxicidad en los modelos in i o e in i o
demues a las en ajas del modelo in i o. Se ha
obse ado que esinas den ales colocadas en ca-
idades den ales p o undas con ondo ce cano a la
pulpa, e incluso con la pulpa expues a, solo p odu-
cen una espues a óxica muy lige a a pesa de
mani es a ele ada oxicidad in i o. Es e hecho
puede a ibui se a que en las écnicas in i o la
acción de los mig an es óxicos sob e las células es
cons an e, mien as que in i o la acción es aguda
( empo al), debido a la ápida mig ación de odo el
monóme o esidual g acias a la acción lixi ian e y
diluyen e de la sali a, lo que se apoya en las obse -
aciones de Pham y Fe acane, quienes encon a-
on que ap oximadamen e el 60% de los compo-
nen es mig ables de una esina den al e an eluidos
en solución salina du an e las 8 ho as pos e io es al
aguado.21,45-50
Las esinas de es au ación den al, ya sean
sellan es de osas y isu as u ob u an es, se aplican
habi ualmen e en pequeñas can idades en si ios
donde no hay con ac o di ec o con el ejido pulpa o
gingi al, siendo además poco p obable su inges ión,
po lo que se minimiza el iesgo sis émico de oxici-
dad po ía o al.
Las eacciones obse adas en el ejido pulpa o
gingi al con la aplicación de los ma e iales de es-
au ación den al pueden se causadas po a ios
ac o es, ales como: aumas du an e la p epa a-
ción del pacien e, la aplicación de los ma e iales de
ecub imien o y el p ocedimien o de acabado, de-
ec os en el ecub imien o, up u as po con ac-
ción, in ección esidual y a amen e debido a e ec-
os óxicos del ma e ial. Si las esinas se aplican
ap opiadamen e, se espe a que sean bien ole adas
po el ejido pulpa . Se conside a que las eaccio-
nes pulpa es son debidas undamen almen e al e ec-
o de bac e ias en la in e ase dien e– ecub imien-
o. Si el ejido no es á expues o y si se e i a la pe-
ne ación bac e iana, en onces las eacciones
gingi ales son p incipalmen e a ibuibles a la placa
bac e iana.3,51,52
Las écnicas de cul i o de células cons i uyen
sis emas muy simples pa a el amizaje de oxicidad
de u ina de los bioma e iales y un medio muy e ec-
i o pa a la in es igación de los mecanismos de las
espues as óxicas. Con el desa ollo de las écni-
cas de cul i o de ejidos, los es udios in i o se
han con e ido en uno de los mé odos más impo -
an es pa a la e aluación biológica de los ma e ia-
les den ales, cons i uyendo una e e encia obligada
an es de p o undiza en los es udios in i o. Se
han ealizado es udios de alidación que han de-
mos ado que exis e una al a co elación (97%)
en e los ensayos de oxicidad local in i o e in
i o, es o se debe a que los mecanismos de acción
son gene almen e los mismos.21,25,32-34,53
Conclusiones
El ob u an e den al Ob uden FC y el sellan e
den al Cub idem AC esul a on se e amen e
ci o óxicos en con ac o con la línea L929 de
ib oblas os de a ón, de acue do a lo epo ado pa a
las esinas basadas en dime ac ila os a omá icos
ipo Bis-GMA. El g ado de ci o oxicidad mos ado
po ambos ma e iales es u o en el ango de los aná-
logos come ciales e aluados.
Es os es udios complemen a on o os ensayos
p eclínicos biológicos desa ollados que posibili a-
on euni la e idencia cien í ica álida necesa-
ia pa a la au o ización del egis o clínico al
Cub idem AC, egis ado en Cuba en la especiali-
dad de es oma ología.
Bibliog a ía
1. Suh H. Recen ad ances in bioma e ials. Yonsei
Med J. 1998; 39(2): 87-96.
2. Ve a R, Ma ínez A, Ba celó F, Palacios J, Cas a-
ño V. Mac omolecula Symposia, Polycha -7. 1999,
en p ensa.

8
3. Lindén LA. Pho ocu ing o Polyme ic Den al
Ma e ials and Plas ic Composi e Resins, en:
Radia ion cu ing in polyme science and
echnology. Vol 4: P ac ical aspec s and
applica ions, Fouassie JP y Rabek JF (eds.),
Else ie Science Publishe s LTD, (1993), pp 78.
4. Casa e y Doullis. Toxicology, en: The basic
science o poisons, Doull Klaasen (ed.), Cd
McMillan Publishing Co, (1980), p 11.
5. B ankley WA, Segli RR. Summa ies o clinical
ele an s udies o den al ma e ials om he 1995
mee ing o Ame ican Associa ion o Den al
Resea ch. Gene al Den is y. 1996:3, 250-62.
6. Wa s DC y col. Den al ma e ials: 1995 li e a u e
e iew. J. Den . Res. 1997:25, 173 -208.
7. Da idenko N, Díaz JM, Sas e R. Recub imien os
den ales o opolime izables. Re is a de Plás icos
Mode nos. 1999; 78 (519): 287-96.
8. B aue GM. Biomedical and Den al Applica ions
o Polyme s, Gebelein CG y Kobli z FF (eds), New
Yo k, Plenum P ess, (1981), p 395.
9. CRA Newsle e . 1991; 15(4):2.
10. Dodon IL. Pos e io Composi e Resin Den al
Res o a i e Ma e ials, Vanhe le G y Smi h DC (eds.),
Minesso a Mining and Manu ac u ing co, MN,
USA, (1985), p 71.
11. Ruy e IE y Sjo ik IJ. Ac a Odon ol Scand. 1981;
39, 133.
12. Niinimaki A, Rosbe g J y Saa i S. Con ac De ma-
i is. 1983; 9, 148.
13. Nygaa d-Os by, B. Odon ol Tisk . 1955; 63, 173.
14. Oysaed H, Ruy e IE y Sjo ik-Kle en. IJ Den Res.
1988; 67, 1289.
15. S enman E y Be gman M. Scand J Den Res. 1989;
97,76.
16. Lindén LA. Polyme ic Ma e ials Encyclopedia,
Salamo e JC (ed.), CRC P ess, Boca Ra on FI, (1996),
1839.
17. Dau zenbe g H y Jeage W. Polyelec oly es,
Hanse P (ed.), New Yo k, (1994).
18. S anley HR. Local and sys emic esponses o den-
al composi es and glass ionome s. Ad Den Res.
1992; 6: 55-64.
19. Van Noo R y col. Den al ma e ials: 1992 li e a u e
e iew. J Den . 1994; 22(1): 5-28.
20. Labella R, Da y KW, Lamb ech s P, Van Mee beek
B, Vanhe le G. Monome hac yla e comonome s o
den al esins. Eu J O al Sci. 1998; 106(3): 816-24.
21. Ra hbun MA, C aig RG, Hanks CT, Filisko FE.
Cy o oxici y o a Bis-GMA den al composi e be o e
and a e leaching in o ganic sol en s. Jou nal
o Biomedical Ma e ials Resea ch. 1991; 25: 443-
457.
22. Le eb e CA, Schus e GS, Ma JC, Knoe nschild
KL. The e ec o pH on he cy o oxici y o elua es
om den u e base esins. In J P os hodon . 1995;
8(2): 122-8.
23. Schus e GS, Le eb e CA, Di ksen TR,
Knoe nschild KL, Caughman GB. Rela ionship
be ween den u e base esin cy o oxici y and cell
lipid me abolism. In J P os hodon . 1995; 8(6): 580-6.
24. She idan PJ, Koka S, Ewoldsen NO, Le eb e CA,
La in MT. Cy o oxici y o den u e base esins. In J
P os hodon . 1997; 10(1): 73-7.
25. Kawaha a H, Yamagami A, Nakamu a M. Biological
es ing o den al ma e ials by means o issue cul u e.
Expe imen al elec o-chemical and biological
es .1992;18(2),443-67.
26. Cou ney JM, Lamba NM, Gaylo JD, Ryan CJ,
Lowe GD. Blood-con ac ing bioma e ials:
bioenginee ing iewpoin s. A i O gans. 1995;
19(8): 852-6.
27. S anley HR. Biological e alua ion o den al
ma e ials. In den J. 1992; 42(1): 37-46.
28. B aue GM y An onucci JM. Polyme s: Bioma e ials
and Medical Applica ions, K oschwi z JI (ed.).
Wiley, New Yo k, USA, (1989), p.109.
29. Polyzois GL, Dahl JE, Hens en-Pe e sen A.
Biological es ing o den al ma e ials: de elopmen
o na ional and in e na ional s anda ds. J Bioma e
Appl. 1995; 9(4): 355-62.
30. La sson KS. Sc eening es o sys emic e ec s o
den al ma e ials. J Den . 1994; 22 (2): S 12-5.
31. T e o Rae. Tissue cul u e echniques in
biocompa ibili y es ing, en: In oduc ion o
biocompa ibili y es ing. Techniques o
Biocompa ibili y Tes ing, William DF (ed.), CRC
Se ies o Biocompa ibili y, CRC P ess, Boca Ra on,
Flo ida, (1986), p 81.
32. Spangbe g LS. Co ela ion in i o and in i o
sc eening es s. J Endodon . 1978; 4, 296-99.
33. Nakamu a M, Doi H, Yokoyama K, Kawaha a H.
Biocompa ibili y es o mic o illed esins and
composi es o co e use in i o. Den Ma e J. 1984;
3, 280-87.
34. Ekwall B. Sc eening o oxic compounds in
mammalian cell cul u es. Ann New Yo k Acad Sci.
1983; 407, 64-77.
35. Cascone MG, T icoli M, Ce ai P, Sba ba i Del
Gue a R. Cell cul u es in he biocompa ibili y s udy
o syn he ic ma e ials. Cy o echnology. 1993; 11(1):
S137-9.
36. Pizzo e a o A, Ciape i G, S ea S, Cenni E, A ciola
C , G anchi D, Sa a ino L. Cell cul u e me hods
o es ing biocompa ibili y. Clin Ma e . 1994; 15(3):
173-90.
37. Jawequi HO. Cell adhesion o bioma e ials: The ole
o se e al ex acelula ma ix componen s in he
a achmen o non- ans o med ib oblas s and
pa enchymal cells. T ans Am Soc A i In en O gans.
1987; 33, 66-74.
38. S anley HR (ed.). Toxici y Tes ing o Den al
Ma e ials, CRC P ess Inc. Boca Ra on, Flo ida, (1985),
p 13.
9
39. Sode holm KJ, Ma io i A. Bis GMA-based esins
in den is y: a e hey sa e?. J. Am Assoc. 1999;
130(2): 201-9.
40. Ande son DAF, Zimme man ER, Fe acane JL.
Cy o oxici y o combina ions o den al composi e
componen s. J. Den . Res. 1987; 66, 133, Abs . 214.
41. Tsuchiya H, Hoshino Y, Tajima K, Takagi N.
Leaching and cy o oxici y o o maldehyde and
me hyl me hac yla e om ac ylic esin den u e base
ma e ials. J P os he Den . 1994; 71(6): 618-24.
42. G oussman LJ. Full eac ion o he inse ion o sel -
cu ing ac ylic esins illing ma e ials. J Am Den s
Assoc. 1953; 461,265.
43. S anley HR. Sil e dlow H, Buonoco e MC. Full
eac ion o an e io es o a i e ma e ials. J Am Den s
Assoc. 1967; 751,132.
44. S anley HR. Biological es ing and eac ion o den-
al ma e ials, en: Den al Ma e ials Re iew, C aig RG
(ed.), Uni e si y o Michigan, Ann A bo , (1977), p
205.
45. Mjo IA y Hens en-Pe e sen A. Biologic e alua ion
o illing ma e ials. A compa ison o esul s using
cell cul u e echniques, implan a ion es and pulp
s udies. In e na ional Den al Jou nal. 1977; 27, 124.
46. Langeland K. Co ela ion o sc eening es o usage
es . J. Endodon . 1978; 4, 300-3.
47. Cox CF, Keal HJ, Keal CL. Biocompa ibili y o
su ace sealed den al ma e ials agains exposed
pulps. J. P os he . Den . 1987; 57, 1-8.
48. Ande son DAF, Fe acane JL, Seale NS. Pulpa
eac ions o a iably cu ed and sealed den al
composi es. J. Den . Res. 1989; 68, 346, Abs 1319.
49. No hup SJ. Cy o oxici y o plas ics and elas ome s.
S imuli o he e ision p ocess. Pha macopoeial
Fo um. Sep /Oc . 1987: 2939-40.
50. Pham DC, Fe acane JL. Leaching om lig h cu ed
. J. Den al. Res. 1988; 67,225, Abs 903.
51. Schmal z G. The biocompa ibili y o non-amalgam
den al illing ma e ials. Eu J O al Sci. 1998; 106 (2
P 2): 696-706.
52. Pameije CH y S anley HR. Pulp eac ions o esin
cemen s. Am J Den . 1992; 5(2): 81-7.
53. No hup SJ. Cu en P oblems Associa ed wi h
Toxici y E alua ion o Medical De ice Ma e ials and
Fu u e Resea ch Needs. Fundamen al and applied
Toxicology. 1989; 13: 196-204.