Distribución espacio-temporal de Aonidiella aurantii (Maskell) (Hemiptera: Diaspididae) y sus parasitoides del género Aphytis (Hymenoptera: Aphelinidae) en la copa de los cítricos

UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA ESCUELA TÉCNICA SUPERIOR DE INGENIERÍA AGRONÓMICA Y DEL MEDIO NATURAL Distribución espacio-temporal de Aonidiella aurantii (Maskell) (Hemiptera: Diaspididae) y sus parasitoides del género Aphytis (Hymenoptera: Aphelinidae) en la copa de los cítricos. TESINA FINAL DE MASTER ALUMNO/A: D. Pablo Sánchez Gómez DIRECTOR/A ACADÉMICO/A: Dr. D. Ferran Garcia Marí DIRECTOR/A EXPERIMENTAL: Dr. D. Alejandro Tena Barreda VALENCIA, diciembre de 2015 2 Resumen El piojo rojo de California, Aonidiella aurantii (Maskell) (Hemiptera: Diaspididae), es la plaga más importante en la mayoría de zonas citrícolas del mundo. Los parasitoides del género Aphytis son sus principales enemigos naturales pero en la región mediterránea las poblaciones del parasitoide no consiguen controlar a la plaga de forma natural como ocurre en otras regiones. El presente estudio se ha realizado con el fin de mejorar el conocimiento del comportamiento de los parasitoides del género Aphytis en condiciones de campo. En concreto se ha determinado su distribución espacial en la copa y a lo largo del día, así como su hora de emergencia y mortalidad nocturna. Para ello se realizaron muestreos intensivos a lo largo de varios días en una parcela de cítricos localizada en el Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias. Los resultados muestran que mientras A. aurantii tiende a aumentar sus poblaciones en las orientaciones más expuestas al sol y por lo tanto las más cálidas y secas; los parasitoides del género Aphytis tendieron a situarse en las zonas en contacto entre árboles de una misma fila y que por tanto están más sombreadas. Los muestreos a lo largo del día mostraron que los parasitoides tienden a descansar en el envés de las hojas durante la noche (>95% de los parasitoides se encontraron en las hojas en los muestreos realizados a las 8:00 am). Al avanzar el día, los parasitoides del género Aphytis tendieron a desplazarse hacia los troncos y frutos, si bien un gran porcentaje de la población tendió a quedarse en las hojas (~75% de la población permaneció en las hojas). Cabe destacar que las poblaciones de estos parasitoides disminuyeron a lo largo del día, pese a que la emergencia se produce durante las primeras horas de luz, lo que sugiere que bien migran o mueren durante el día. Por el contrario, los 3 muestreos realizados por la noche, cuando se marcaron hojas con Aphytis, mostraron que la mortalidad sufrida por la noche es muy baja. En conclusión, los resultados obtenidos muestran que para estudios y trabajos donde sea necesario determinar las poblaciones de Aphytis, éstos deberían muestrearse en las hojas, preferiblemente en las caras contiguas de las filas y a primera hora de la mañana. Por otra parte, los factores que están afectando negativamente a las poblaciones de estos parasitoides se dan durante el día y no durante la noche por lo que podrían ser de índole biótico, previsiblemente la depredación. Summary The California red scale, Aonidiella aurantii (Maskell) (Hemiptera: Diaspididae), is one of the most important citrus pest worldwide. Aphytis parasitoids are its main natural enemies. However, in the Mediterranean region, these parasitoids cannot successfully control the scale as in other regions. This study was conducted in order to understand the behavior of Aphytis parasitoids under field conditions. In detail, we determined the spatial distribution in the tree canopy and throughout the day as well as its emergency time and mortality during the night. This research was carried out in a citrus orchard located at the Valencian Institute of Agricultural Research. The results showed that A. aurantii tends to settled in the warmer and drier parts (cardinal directions) of the canopy; whereas Aphytis parasitoids tended to be in shaded areas, like those in contact with contiguous trees. Aphytis parasitoids tend to rest on the underside of leaves overnight (> 95% of the parasitoids were found in the leaves on the samples taken at 8:00 am). At midday, they moved to the stems and fruits, although a large percentage of the population remained on the leaves (~ 75% of the population 4 remained in the leaves). It was noticeable that although Aphytis emerged during the early hours of light, parasitoid populations decreased throughout the day, suggesting that either migrate or die during the daytime. By contrast, our sampling of marked leaves, showed that Aphytis do not die during the night. In conclusion, the results show that for further studies looking for Aphytis, these should be sampled in the leaves, likely in the adjacent faces of the rows and during the morning. Resum El poll roig de Califòrnia, Aonidiella aurantii (Maskell) (Hemiptera: Diaspididae), és la plaga més important en la majoria de zones citrícoles del món. Els parasitoids del gènere Aphytis són els seus principals enemics natural però a la regió mediterrània les poblacions del parasitoid no aconsegueixen controlar la plaga de forma natural com passa en altres regions. Aquest estudi s'ha realitzat amb la finalitat de millorar el coneixement del comportament dels parasitoids del gènere Aphytis en condicions de camp. En concret s'ha determinat la distribució espacial a la copa i al llarg del dia, així com la seva hora d'emergència i mortalitat nocturna. Es van realitzar mostrejos intensius al llarg de diversos dies en una parcel.la de cítrics localitzada a l'Institut Valencià d'Investigacions Agràries. Els resultats mostren que mentre A. aurantii tendeix a augmentar les seves poblacions en les orientacions més exposades al sol i per tant les més càlides i seques; els parasitoids del gènere Aphytis van tendir a situar-se en les zones en contacte entre arbres d'una mateixa fila i que per tant estan més ombrejades. Els mostrejos al llarg del dia van mostrar que els parasitoids tendeixen a descansar al revers de les fulles durant la nit (> 95% dels parasitoids es van trobar en les fulles en els mostrejos realitzats a les 8:00 am). En avançar el dia, els parasitoids del gènere Aphytis van tendir a desplaçar-se cap a les branques i fruits, si bé un gran 5 percentatge de la població va tendir a quedar-se a les fulles (~ 75% de la població va romandre en els fulls). En finalitzar el dia els parasitoids van tornar a les fulles. Cal destacar que les poblacions d'aquests parasitoids van disminuir al llarg del dia, tot i que l'emergència es produeix durant les primeres hores de llum, el que suggereix que bé migren o moren durant el dia. Per contra, els mostrejos realitzats a la nit, quan es van marcar fulles amb Aphytis, mostren que la mortalitat soferta a la nit és molt baixa. En conclusió, els resultats obtinguts mostren que per a estudis i treballs on sigui necessari determinar les poblacions de Aphytis, aquestes haurien de mostrejar en les fulles, preferiblement en les cares contigües de les files ia primera hora del matí. D'altra banda, els factors que estan afectant negativament a les poblacions d'aquests parasitoides es donen durant el dia i no durant la nit pel que podrien ser d'índole biòtic, previsiblement la depredació. 6 ÍNDICE 1. INTRODDUCCIÓN.............................................................................10 1.1. El piojo rojo de California Aonidiella aurantii(Maskell)……………………… 10 1.1.1. Posición taxonómica...............................................................11 1.1.2. Origen antecedentes y distribución.........................................11 1.1.3. Plantas hospedadoras.............................................................12 1.1.4. Importancia económica de Aonidiella aurantii.........................12 - Daños 1.1.5. Morfología y desarrollo............................................................13 1.1.6. Biología y ecología....................................................................17 1.1.7. Métodos de control.…...............................................................19 1.1.7.1. Control químico..........................................................19 1.1.7.2. Control biológico........................................................20 1.2. Ectoparasitoides: género Aphytis Howard...............................................21 1.2.1. Posición taxonómica.................................................................21 1.2.2. Antecedentes históricos: origen y distribución..........................23 1.2.3. Morfología y desarrollo............................................................23 1.2.4. Biología y ecología....................................................................25 2. JUSTIFICACIÓN DE OBJETIVOS............................................................28 3. MATERIALES Y MÉTODOS...................................................................29 7 3.1. Descripción parcela de ensayo……………………………………………………………29 3.2. Distribución de Aonidiella aurantii y sus parasitoides en la copa de los cítricos………………………………………………………………………………………………………29 3.3. Hora de emergencia de Aphitys ssp.......................................................30 3.4. Mortalidad nocturna de Aphytis............................................................30 3.5. Análisis de datos …................................................................................31 4. RESUSTADOS Y DISCUSIÓN................................................................32 4.1. Distribución de Aonidiella aurantii y sus parasitoides Aphytis en la copa de los cítricos................................................................................................32 4.2. Distribución de Aphytis a lo largo del día.. ………………….….......................34 4.3. Hora de emergencia de Aphytis …...........................................................37 4.4. Mortalidad nocturna de Aphytis …..........................................................39 5. CONCLUSIONES.................................................................................41 6. BIBLIOGRAFÍA....................................................................................43 8 Índice de figuras: Figuras 1.1. Presencia de A. aurantii en rama y fruto de cítricos (Pina 2007). Figura 1.2. Dimorfismo sexual presente en el escudo de los diaspídidos. A la izquierda escudo de la hembra y a la derecha, escudos de varios machos de A.aurantii. Figura 1.3. Ciclo completo de desarrollo de A. aurantii(Pina, 2007). Figura 1.4. Hembra joven de A. aurantii. A la izquierda, vista dorsal del escudo y a la derecha, aspecto del cuerpo de la hembra joven. (Pina 2007). Figura 1.5. Estados de desarrollo de Aphytis a) huevos, b) larva, c) prepupas con meconios, d) pupa con restos de meconios, e) exuvia, f) adulto ( Vanaclocha, 2012). Figura 1.6. Pupas de los ectoparasitoides A. chrysomphali (a), A. melinus (b) y A. lingnanensis (c) (Vanaclocha, 2012). Figura 1.7. Adulto de A. chrysomphali ( Pina 2007). Índice de gráficas: Gráfica. 4.1. Distribución de escudos de Aonidiella aurantii en los cuatro puntos cardinales del árbol (media de escudos por orientación ± EE). Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre orientación. Gráfica. 4.2. Distribución de parasitoides del género Aphytis en los cuatro puntos cardinales del árbol (media de escudos por orientación ± EE). Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre orientación. 9 Gráfica. 4.3. Número medio de Aphytis por árbol (± EE) una parcela de cítricos a lo largo del día: 8:00, 12:00 y 17:00. Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre horas de muestreo. Gráfica. 4.4. Número medio de Aphytis en 80 hojas(± EE) una parcela de cítricos a lo largo del día: 8:00, 12:00 y 17:00. Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre horas de muestreo. Gráfica. 4.5. Número medio de Aphytis en 40 frutos (± EE) una parcela de cítricos a lo largo del día: 8:00, 12:00 y 17:00. Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre horas de muestreo. Gráfica. 4.6. Número medio de Aphytis en 16 ramas (± EE) una parcela de cítricos a lo largo del día: 8:00, 12:00 y 17:00. Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre horas de muestreo. Gráfica. 4.7. Hora de emergencia de los parasitoides del género Aphytis en campo representada como el porcentaje acumulado de Aphytis ssp. emergidos. Gráfica. 4.8. Mortalidad nocturna de Aphytis en hojas (medida en campo, en el medio natural del depredador) y en el laboratorio. INTRODUCCIÓN 16 macho, el segundo estado ninfal hembra no desarrollará ojos, el cuerpo presentará un aspecto periforme y el escudo será más redondeado. Para la hembra ésta será la última metamorfosis y muda, el macho aún atravesará dos mudas más (Koteja, 1990). Tercer estadio ninfal (N3) o hembra joven Después de la segunda muda, la hembra joven, ya adulta, continúa alimentándose. El escudo y el cuerpo se extienden de nuevo, esta vez para adquirir su tamaño definitivo. La hembra desde el momento en que se inicia la formación del margen gris, se encuentra receptiva a los machos. Esta hembra aún sin fecundar se denomina “hembra joven o hembra virgen”(figura. 1.4). Figura 1.4. Hembra joven de A. aurantii. A la izquierda, vista dorsal del escudo y a la derecha, aspecto del cuerpo de la hembra joven. (Pina 2007). Estado de hembra grávida Después de la inseminación la fracción del escudo que enfrenta al pigidio queda suelta del sustrato vegetal para permitir la salida de las ninfas móviles (Foldi, 1990a). Esta hembra ya fecundada se denomina “hembra grávida” INTRODUCCIÓN 17 Estado de hembra reproductora o de hembra con ninfas Cuando comienza la producción de ninfas, las nuevas ninfas móviles pueden permanecer hasta un día o dos debajo de la cubierta de la hembra antes de iniciar la migración (Tashiro y Moffitt, 1968). Esta hembra con la presencia de ninfas bajo el escudo se denomina “hembra reproductora o hembra con ninfas” Desarrollo del macho Al final del segundo estado larvario, se inicia la formación de los esbozos de las antenas, de las patas, de las alas y de la cubierta peneal, mientras que las piezas bucales y las glándulas del tegumento se reducen (Koteja, 1990). Las transformaciones morfogenéticas continúan en el tercer estado denominado “Prepupa” y en el cuarto estado denominado “Pupa”. Tras la cuarta muda, el “macho adulto” color anaranjado emerge con un cuerpo endeble, falto de piezas bucales pero con las patas, alas y antenas bien desarrolladas (Leonardi, 1920; Koteja, 1990). 1.1.6. Biología y ecología La reproducción de A. aurantii es sexual (Tashiro y Beavers, 1968) y las hembras son ovovivíparas. Los huevos, prácticamente desarrollados, eclosionan en su interior, emergiendo las ninfas móviles (Tashiro y Moffitt, 1968). Las poblaciones de A. aurantii pueden verse afectadas por factores abióticos (principalmente temperatura y INTRODUCCIÓN 18 humedad) y bióticos (tejido vegetal sobre el cual se desarrollan o variedad de planta hospedadora). Factores abióticos La temperatura y la humedad se consideran los principales factores reguladores del número de generaciones del diaspídido que se dan por año, variando substancialmente entre las diferentes regiones, pero oscilando por lo general entre dos y seis (Beardsley y González, 1975). En la Comunidad Valenciana se observan tres generaciones, con un máximo de inmaduros a finales de mayo, otro a finales de agosto y un tercero, menor y parcial, en noviembre o diciembre, en función de las condiciones climáticas (Ripollés, 1990; Rodrigo y García-Marí, 1990 y 1992; Rodrigo, 1993; Rodrigo y Garcia-Marí, 1994; Garcia Marí 2012). Factores bióticos Los factores bióticos que afectan principalmente a las cochinillas son el tejido vegetal sobre el cual se desarrollan y la especie y variedad de la planta hospedadora. Los individuos desarrollados sobre fruto tienen una mayor supervivencia y un desarrollo más rápido que los criados sobre ramas verdes u hojas (Quayle, 1932; Bodenheimer, 1951; Willard, 1972; Atkinson, 1977; Carroll y Luck, 1984a; Hare et al., 1990; Hare y Luck, 1991).Dentro del grupo de los cítricos, el limón es la variedad más susceptible de ser atacada, seguida del naranjo amargo, pomelo, el grupo de las Valencia, de las Navel y, por último, las mandarinas (Quayle, 1932; Cameron et al., 1969; Habib et al., 1972; Cameron et al., 1975; Yu, 1986; VVAA, 1991). INTRODUCCIÓN 19 Distribución en el árbol Asplanato y García-Marí (1998) observaron que las hojas y los frutos son los substratos más favorables para A. aurantii mientras que la madera (sobre todo el tronco y las ramas principales) es el menos adecuado por la alta mortalidad que se observa en este sustrato. Sin embargo, se desconoce si la orientación preferida por A. arurantii viene condicionada por la presencia de sus enemigos naturales. 1.1.7. Métodos de control Actualmente en España se utilizan varios métodos para controlar las poblaciones de A. aurantii como los biotecnológicos que incluyen la confusión sexual; los culturales como la poda, los químicos y los biológicos. Este último se basa en la utilización de depredadores, entomopatógenos y, especialmente, parasitoides, que son los enemigos naturales más efectivos para el control de A. aurantii, y no tienen efecto negativo en el medioambiente (Rosen, 1994). Sin embargo, el control químico continúa siendo el método más utilizado para el control de A. aurantii en los cultivos cítricos españoles a pesar de que interfiere habitualmente de una forma negativa en la efectividad del control biológico. 1.1.7.1. Control químico Las formas sensibles de A. aurantii a los tratamientos químicos están constituidas por los individuos inmaduros de N1 y N2. Tradicionalmente, las aplicaciones con INTRODUCCIÓN 20 insecticidas se realizan contra las formas sensibles de la primera generación de A. aurantii (desde finales de mayo a principios de junio) y, si este tratamiento resulta insuficiente, también contra las de la segunda generación (desde finales de julio a principios de agosto) (Urbaneja et al., 2014). Actualmente hay cinco materias activas autorizadas con A. aurantii en cítricos. Sin embargo, el bajo número de materias activas y su uso repetitivo han favorecido la aparición de resistencias (Hervás-Martinez et al., 2004). Además los tratamientos contra la segunda generación en variedades tempranas pueden dar lugar a la aparición de residuos en fruta. Todos estos problemas, unidos a los efectos secundarios que estos tratamientos tienen sobre los enemigos naturales, han favorecido que actualmente se apueste por otros métodos de control más respetuosos (Vanaclocha, 2012). Por otra parte, conocer la distribución de A. aurantii podría ayudar a disminuir el número de tratamiento o la cantidad utilizada, especialmente para aquellos insecticidas que actúan por contacto, porque éstos se podría focalizar en las zonas donde tiende a asentarse el diaspídido. 1.1.7.2. Control biológico DeBach (1974) indicó que el control biológico mediante enemigos naturales era el método más económico y permanente para regular las poblaciones de diaspídidos en cítricos. Dentro de los enemigos naturales, los ectoparasitoides son los más eficaces y en concreto los pertenecientes al género Aphytis Howard (DeBach, 1974; Rosen y DeBach, 1979 y 1990; Rosen, 1994). Otros enemigos naturales son los endoparasitoides Comperiella bifasciata Howard y Encarsia perniciosi Tower u otros coccinélidos depredadores generalistas. INTRODUCCIÓN 21 En España, y en concreto en la Comunidad Valenciana los parasitoides más abundantes y eficaces son Aphytis melinus DeBach y A. chrysomphali (Mercet) (Hymenoptera: Aphelinidae) (Pina et al., 2003; Pina y Verdú, 2007; Rodrigo y García-Marí, 1990; Sorribas et al. 2008; Vanaclocha et al. 2009). Aphytis chrysomphali es una especie nativa de la cuenca Mediterránea que se encontraba originalmente parasitando a Chrysomphalus dictyospermi (Morgan) (Hemiptera: Diaspididae), y que posteriormente comenzó a utilizar como hospedero a A. aurantii cuando apareció en esta zona (Rosen y DeBach, 1979). Aphytis melinus se ha establecido perfectamente desde que se introdujo en la Comunidad Valenciana para el control de C. dictyospermi como parte de un programa de control biológico clásico (Pina, 2007; Pina y Verdú, 2007). En los últimos años se han llevado a cabo varios esfuerzos tanto por empresas privadas como por organismos públicos para desarrollar un método de control biológico aumentativo basado en las sueltas de masivas de A. melinus (Tena et al., 2015). Por lo tanto, es esencial conocer el comportamiento de estos parasitoides en campo para poder mejorar su potencial como agentes de control biológico. INTRODUCCIÓN 22 1.2. Ectoparasitoides del género Aphytis 1.2.1. Posición taxonómica El género Aphytis pertenece a la familia Aphelinidae, dentro de la superfamilia Chalcidoidea. Es un grupo cosmopolita y muy amplio de pequeños himenópteros de color amarillento o grisáceo, que rara vez exceden el milímetro de longitud y que se desarrollan exclusivamente como ectoparasitoides primarios de diaspídidos (Flanders, 1953; Rosen y DeBach, 1979). 1.2.2. Antecedentes históricos: origen y distribución Todos los países que presentan en sus cultivos A. aurantii, cuentan con una historia más o menos larga de introducciones de enemigos naturales, destacando sobre todo los pertenecientes al género Aphytis. De todas las especies introducidas hasta el momento, las que parecen jugar un mayor papel en el control de las poblaciones de A. aurantii son Aphytis melinus DeBach y Aphytis lingnanensis Compere; no obstante, no hay que olvidar el papel ejercido por Aphytis chrysomphali (Mercet), endémico de la región mediterránea En España, las primeras sueltas del género Aphytis datan de 1976, con la introducción de A. melinus (originario de la India) desde el insectario de “La Station de Zoologie et de LutteBiologique” de Antibes (Francia) y, posteriormente, en 1996, desde el insectario de la Universidad de Riverside (California). En 1999, se liberó A. lingnanensis (Verdú y Pina, 2002) pero su establecimiento no ha sido satisfactorio. En diferentes INTRODUCCIÓN 23 estudios realizados en la Comunidad Valenciana, se ha observado la presencia de A. melinus y A. chrysomphali. Ambos parasitoides son capaces de compartir el mismo hábitat y a su vez competir por el mismo recurso (Pina, 2007; Sorribas et al., 2008; Pekas et al., 2010). 1.2.3. Morfología y desarrollo La hembra del género Aphytis perfora con su ovopositor la cubierta del diaspídido y deposita uno o varios huevos encima o debajo, pero nunca dentro del cuerpo del diaspídido. La larva, protegida por la cubierta, y succionando los fluidos corporales desde el exterior, atraviesa tres estados larvarios que pueden ser reconocidos por su distinto tamaño (figura. 1.5 b)). Figura 1.5. Estados de desarrollo de Aphytis a) huevos, b) larva, c) prepupas con meconios, d) pupa con restos de meconios, e) exuvia, f) adulto ( Vanaclocha, 2012). INTRODUCCIÓN 24 La pupa está claramente aplanada dorsoventralmente, siendo considerablemente más ancha que gruesa (figura 1.5 d)).El adulto emerge practicando con sus mandíbulas un orificio de salida ovalado, o bien simplemente empujando hacia arriba el escudo cuando no se encuentra firmemente sujeto al sustrato (figura. 1.5 f) y 1.6). Figura 1.6. Pupas de los ectoparasitoides A. chrysomphali (a), A. melinus (b) y A. lingnanensis (c) (Vanaclocha, 2012). Tras la emergencia, el adulto deja tras de sí la exuvia de la pupa, los meconios, el resto del cuerpo de la cochinilla y a menudo el orificio de salida en el escudo, que es la indicación inequívoca de que esa cochinilla ha sido parasitada por Aphytis (Rosen y DeBach, 1979). INTRODUCCIÓN 25 Figuraura 1.7. Adulto de A. chrysomphali ( Pina 2007). El dimorfismo sexual en los adultos está poco desarrollado siendo el cuerpo en ambos casos amarillo. 1.2.4. Biología y ecología La duración del ciclo está asociada a factores climáticos (temperatura y humedad, principalmente), siendo muy variable en función de la especie (Viggiani, 1984). La mayoría de Aphytis se desarrollan de forma continua a lo largo del año y presentando de dos a tres generaciones por cada una del hospedador. Un gran número de Aphytis son biparentales y se reproducen sexualmente. Estas especies exhiben una reproducción arrenotoca, donde los huevos sin fertilizar dan lugar a machos y los huevos fertilizados a hembras (Doutt, 1959; Rosen y DeBach, 1979).La hembra de Aphytis es esencialmente monógama. Sólo se aparea una vez, normalmente al poco tiempo de emerger, y el esperma se almacena en la RESULTADOS Y DISCUSIÓN 32 4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 4.1.- Distribución de Aonidiella aurantii y sus parasitoides Aphytis en la copa de los cítricos. Tanto la distribución de A. aurantii como las de sus parasitoides del género Aphytis varió en función de la orientación. El número de escudos de A. aurantii mostró un gradiente decreciente de sur a este pasado por el oeste y el norte (F3, 119 = 4,5; P < 0,001) (Gráfica. 4.1). Gráfica. 4.1. Distribución de escudos de Aonidiella aurantii en los cuatro puntos cardinales del árbol (media de escudos por orientación ± EE). Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre orientación. 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 E N O S Escudos de Aonidiella aurantii / orientación a ab c bc RESULTADOS Y DISCUSIÓN 33 En el caso de los parasitoides se observó un gradiente decreciente pero en este caso de oeste a norte pasando por este y el sur (F3, 119 = 2,74; P = 0,04) (Gráfica. 4.2). Gráfica. 4.2. Distribución de parasitoides del género Aphytis en los cuatro puntos cardinales del árbol (media de escudos por orientación ± EE). Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre orientación. Las poblaciones de A. aurantii tendieron a situarse en la cara sur, siendo las poblaciones aproximadamente un 80% superiores en esta orientación que en el este y el norte. Teniendo en cuenta la orientación de las filas de la parcela (este-oeste), nuestros resultados muestran que A. aurantii tiende a aumentar sus poblaciones en las caras más expuestas al sol, y por lo tanto, las más iluminadas, cálidas y secas. En este mismo sentido, también se detectó un gran número de escudos en la cara oeste que es la opuesta a los vientos húmedos de Levante que predominan en la Comunidad Valenciana. Por lo tanto, parece que A. aurantii se asienta en las zonas secas y cálidas de las copa. Si este resultado se confirma en más parcelas, se debería recomendar 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 E N O S Aphytis / orientación a a bc c RESULTADOS Y DISCUSIÓN 34 realizar los muestreos y tratamientos contra A. aurantii en las caras sur y oeste de los árboles de la Comunidad Valenciana para ahorrar tiempo y ganar precisión en el caso de los muestreos y aumentar la eficacia en el caso de los tratamientos. Al contrario que su hospedante, los parasitoides del género Aphytis tendieron a situarse en las caras más resguardadas de los árboles, aquellas que se juntaban con los árboles contiguos de la misma fila (este y oeste). Por lo tanto, parece que los parasitoides tienden a evitar las temperaturas extremas que se pueden dar en las caras sur (cálidas) y norte (frías) tal y como ya demostraron Rosen y DeBach (1979). Si se tienen en cuenta los resultados de distribución del hospedador y el parasitoide, las bajas poblaciones del primero en la cara este podría deberse a la acción del parasitoide. 4.2.- Distribución de Aphytis a lo largo del día. El número medio de Aphytis a lo largo del día disminuyó cuando se contabilizaron en los tres órganos conjuntamente (hojas, ramas y frutos) (F2, 85 = 4,38; P = 0,01), siendo similar entre las 8:00 y las 12:00 (Gráfica. 4.3). Este patrón varió en función del órgano que se muestreó. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 35 Gráfica. 4.3. Número medio de Aphytis por árbol (± EE) una parcela de cítricos a lo largo del día: 8:00, 12:00 y 17:00. Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre horas de muestreo. Así, el número medio de Aphytis en hojas, con una muestra de 80 hojas por árbol, fue significativamente superior a las 8:00 que a las 12 y las 17:00 (F2, 85 = 4,76; P = 0,01) (Gráfica. 4.4). 0 5 10 15 20 25 30 8:00:00 12:00:00 17:00:00 Aphytis / árbol 0 5 10 15 20 25 30 8:00:00 12:00:00 17:00:00 Aphytis / 80 hojas a a b a b b RESULTADOS Y DISCUSIÓN 36 Gráfica. 4.4. Número medio de Aphytis en 80 hojas(± EE) una parcela de cítricos a lo largo del día: 8:00, 12:00 y 17:00. Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre horas de muestreo. En el caso de los frutos y las ramas, el patrón fue diferente y el número medio de Aphytis, medido sobre 40 frutos y 20 cm de 16 ramas por árbol respectivamente, fue significativamente mayor a las 12:00 que a las 8:00 y las 17:00 para ambos órganos (frutos: F2,85 = 13,64; P < 0,0001) (ramas:F2, 85 = 4,9; P < 0,0001) (Gráfica. 4.5 y 4.6). Gráfica. 4.5. Número medio de Aphytis en 40 frutos (± EE) una parcela de cítricos a lo largo del día: 8:00, 12:00 y 17:00. Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre horas de muestreo. 0 1 2 3 4 5 6 7 8 8:00:00 12:00:00 17:00:00 Aphytis / 40 frutos b a b RESULTADOS Y DISCUSIÓN 37 Gráfica. 4.6. Número medio de Aphytis en 16 ramas (± EE) una parcela de cítricos a lo largo del día: 8:00, 12:00 y 17:00. Letras diferentes sobre las columnas denotan diferencias significativas (P < 0,05) entre horas de muestreo. Los resultados muestran el patrón de actividad de los parasitoides del género Aphytis. Éstos tendieron a moverse de las hojas, donde descansan por la noche, a las ramas y frutos durante el día. La mayoría de los escudos parasitables para Aphytis se encuentran en los frutos (Pekas et al., 2010) y para llegar a estos tuvieron que pasar por las ramas, de ahí el aumento de las poblaciones que se produjo en las ramas. Estos resultados pueden ayudar en futuros muestreos de parasitoides del género Aphytis. Así, se recomendaría muestrear el envés de las hojas a primera hora o en el caso de querer muestrear Aphytis en plena actividad de búsqueda se debería hacer en los frutos a partir del mediodía. 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 8:00:00 12:00:00 17:00:00 Aphytis / 16 ramas bc a b RESULTADOS Y DISCUSIÓN 38 4.3.- Hora de emergencia de Aphytis En la gráfica 4.7 se ha representado el porcentaje acumulado de Aphytis emergidos a lo largo del día. Se observó que alrededor del 75% de los parasitoides emergían antes de mediodía (11:00am) (Gráfica. 4.7). Hasta la fecha no se había estudiado la hora de emergencia de los parasitoides del género Aphytis y parece que siguen el mismo patrón que otros parasitoides de actividad diurna que también tienden a emerger por la mañana (Godfray, 1994). Se ha sugerido que los parasitoides emergen temprano para aprovechar las horas de luz y así poder buscar hospedadores y alimento. Por otra parte, el hecho que emerjan por la mañana pero sus poblaciones no aumenten entre las 8:00 y las 12:00 (Gráfica 4.3) sugiere que, o bien la metodología que se utilizó no fue lo suficientemente robusta para detectar este aumento, o los Aphytis tienden a morir por la mañana, ya sea los que acaban de emerger o los que venían de días anteriores. En otras palabras, los Aphyis emergidos por la mañana compensan a los que mueren en el total de la población. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 39 Gráfica 4.7. Hora de emergencia de los parasitoides del género Aphytis en campo representada como el porcentaje acumulado de Aphytis emergidos. 4.4.- Mortalidad nocturna de Aphytis Cuando se estudió la mortalidad nocturna de Aphytis, se observó que estos no morían por causas fisiológicas ni climáticas durante la noche puesto que sólo un individuo de los capturados e individualizados por la noche murió (Gráfica. 4.8). De forma similar, la mortalidad de los Aphytis que supuestamente murieron en campo en las hojas marcadas fue muy baja. Se recuperaron aproximadamente el 87% de los parasitoides de las hojas marcadas. Es posible que una parte del 13% de Aphytis “desaparecidos” durante la noche migrara a otras hojas tras el marcaje de las hojas y que por tanto no murieran durante la noche. Se debería tener en cuenta que los Aphytis todavía estaban muy activos cuando se marcaron las hojas. 0 20 40 60 80 100 8:00:00 11:00:00 14:00:00 18:00:00 % emeergencia acumulada de Aphytis RESULTADOS Y DISCUSIÓN 40 Gráfica 4.8. Mortalidad nocturna de Aphytis en hojas (medida en campo, en el medio natural del depredador) y en el laboratorio. En cualquier caso cabe destacar que la mortalidad por causas fisiológicas (principalmente desnutrición) o climáticas (frío) fue nula y por depredación parece ser muy limitada por la noche. Por lo tanto, es posible que los Aphytis seleccionen las hojas para descansar, en lugar de los frutos donde sus hospedantes son más abundantes y de mayor calidad, precisamente para evitar la depredación. Teniendo en cuenta todos los resultados, cabe destacar que los factores que están afectando negativamente a las poblaciones de estos parasitoides se dan durante el día y no durante la noche por lo que podrían ser de índole biótico y previsiblemente sea la depredación diurna, si bien otro trabajo final de carrera llevado en paralelo muestra que las poblaciones de Aphytis no aumentan significativamente cuando se excluyen a los depredadores generalistas de los árboles. 0% 5% 10% 15% 20% En hojas Aislados Mortalidad Aphytis (%) CONCLUSIONES 41 5. CONCLUSIONES 1.- Aonidiella aurantii tendió a fijarse en las zonas secas y cálidas de las copa (sur y oeste). Si este resultado se confirma en más parcelas, se debería recomendar realizar los muestreos y tratamientos contra A. aurantii en las caras sur y oeste de los árboles de la Comunidad Valenciana para ahorrar tiempo y ganar precisión en el caso de los muestreos y aumentar la eficacia en el caso de los tratamientos. 2El género Aphytis tendió a situarse en las caras más resguardadas de los árboles, aquellas que se juntaban con los árboles contiguos de la misma fila (este y oeste). Además tiende a situarse en el envés de las hojas a primera hora de la mañana cuando las poblaciones son mayores. Por lo tanto, si en un futuro se quieren realizar muestreos de este género de parasitoides, estos deberían realizarse en zonas resguardadas, en el envés de las hojas y a primera hora de la mañana. 3.- La emergencia de los Aphytis se produce mayoritariamente en el intervalo de 8:00h a 11:00h (alrededor del 75% del total), este resultado sugiere que las sueltas aumentativas de Aphytis en campo deberían hacerse también a primera hora de la mañana y en zonas resguardadas, siguiendo el mismo patrón que tienen de forma natural. 4.- Las poblaciones de Aphytis tienden a disminuir a lo largo de todo el día. Por la mañana esta disminución se ve compensada por la emergencia, pero por la tarde al no haber emergencia las poblaciones descienden. BIBLIOGRFÍA 48