Papel del inmunogen isg15 de lubina (Dicen a chus lab ax) en las
in ecciones po be anoda i us
Pa icia Mo eno*, Es he Ga cía-Rosado, Juan José Bo ego, M. Ca men Alonso.
Uni e sidad de Málaga, Depa amen o de Mic obiología, Facul ad de Ciencias. Campus
Tea inos s/n 29010, Málaga. pa i[email p o ec ed]
En peces, al igual que en e eb ados supe io es, la espues a an i i al inna a es á mediada po
el sis ema in e e ón ipo I (IFN I), que ac úa median e la ac i ación de genes denominados isg
(in e e on-s imula ed genes), en e los que se incluye el gen isg15. La p o eína codi icada po
es e gen, denominada ISG15, p esen a ac i idad an i i al ac uando como ci oquina, o median e
un mecanismo denominado ISGilación, que consis e en su unión co alen e a p o eínas í icas
o celula es.
En e las en e medades de e iología i al que a ec an a la lubina (Dicen a chus lab ax),
des aca la nec osis ne iosa i al, causada po el i us de la nec osis ne iosa (NNV, géne o
Be anoda i us), que p esen a dos segmen os de ARN monoca ena io de pola idad posi i a:
ARN1 (polime asa i al) y ARN2 (p o eína de la cápside). Las di e encias en la secuencia de la
egión a iable T4 del segmen o ARN2 pe mi en su clasi icación en 4 geno ipos, siendo el
geno ipo RGNNV el único asociado a episodios de ele ada mo alidad en lubina.
El p esen e es udio con ibuye a amplia el conocimien o del papel del sis ema IFN I en lubina
en e a in ecciones po be anoda i us, desc ibiéndose la es uc u a del gen isg15, analizando
su ansc ipción en espues a a poli I:C y RGNNV; y e aluando su ac i idad in i o.
La lubina p esen a un gen isg15, compues o po dos exones y un in ón localizado en la egión
5’-UTR. El ORF, de 474 pb, codi ica una p o eína de 157 aminoácidos cons i uida po dos
dominios ipo ubiqui ina y un mo i o RLRGG en el ex emo ca boxilo e minal. La clonación del
ORF en el plásmido pcDNA His/Max, y su pos e io ans ección en la línea celula E-11, ha
pe mi ido ob ene una línea celula es able (DLISG15-E11), en la que se ha demos ado,
median e inmuno luo escencia indi ec a, la localización ci oplasmá ica de es a p o eína.
El análisis de ansc ipción mues a una espues a más emp ana e in ensa as la inducción
po poli I:C que po RGNNV. Poli I:C es imula la exp esión génica desde las 4 has a las 24 h
pos -inyección (p.i.) en ambos ó ganos, y con una ciné ica simila . Sin emba go, ambos
ó ganos di ie en en el ni el de ansc ipción del gen as la in ección po RGNNV,
p oduciéndose una es imulación emp ana, desde las 12 h p.i., y de mayo ni el en el ce eb o
que en el iñón ce álico, ó gano en el que la exp esión comienza a las 72 h p.i.
La ac i idad an i i al se ha e aluado median e el análisis compa a i o de la eplicación de
RGNNV, de e minada median e PCR cuan i a i a, en células DLISG15-E11 y células con ol no
ans ec adas, no obse ándose di e encias signi ica i as. Sin emba go, ISG15 pod ía ac ua a
o o ni el del ciclo de mul iplicación i al, po lo que se es án ealizando ensayos de
endimien o í ico ex acelula median e i ulación, y de ISGilación median e Wes e n-blo .
El hecho de que el ce eb o sea el p incipal ó gano diana pa a la mul iplicación de
be anoda i us, y el papel an i i al a ibuido a la ISG15, jun o con los esul ados ob enidos,
con ibuyen a dilucida la impo ancia de es e gen en e a las in ecciones po RGNNV en
lubina, inc emen ándose el conocimien o del papel del sis ema del IFN I en la de ensa en e a
las in ecciones í cas y la elación pa ógeno-hospedado .