scieee Open visual document viewer

El uso de pentoxifilina mejora la movilidad espermática en los casos de microinyección espermática con biopsia testicular.

Rodríguez Díaz, Rubí Nieves,Blanes Zamora, Raquel,Vaca Sánchez, Rebeca,González Pérez, Jonay,Báez Quintana, Delia Rosa,Alberto Bethencourt, José Carlos

Abstract

La pentoxifilina (PTX) activa la movilidad espermática. Nuestro objetivo es valorar si la pentoxifilina mejora los resultados de microinyección espermática con biopsia testicular (TESE) dado que es frecuente hallar espermatozoides inmóviles. Material y métodos:Se analizaron 101 ciclos de inyección intracitoplasmática de espermatozoides con TESE, en los que se valora la edad de la mujer, el número de ovocitos, los ovocitos maduros, la tasa de fertilización, la tasa de división, los embriones óptimos, los embriones transferidos y la tasa de gestación por punción y por transfer. Se comparó, según la causa de infertilidad: TESE en fresco o congelada; con espermatozoides móviles o inmóviles; pacientes vasectomizados o azoospérmicos, y si se usó o no PTX. Resultados: Para causa de infertilidad mixta se obtienen menos embriones óptimos (1,6 frente a 2,3; p < 0,05). Con TESE congelada se transfirieron menos embriones (1,53 frente a 2,16; p < 0,05) y aún así se consiguió igual tasa de gestación que en fresco. Microinyectar espermatozoides inmóviles disminuye la tasa de fertilización y de gestación. No hay diferencias entre pacientes vasectomizados y azoospérmicos. No hay diferencias significativas entre los grupos con y sin PTX. Discusión:Se consiguen iguales resultados en fresco que en congelado. La PTX activa la movilidad espermática y en todos los casos se microinyectaron espermatozoides móviles, lo que mejora las tasas de fertilización y de gestación.

Full text

242 Re In And ol. 2008;6(4):242-8 El uso de pen oxi ilina mejo a la mo ilidad espe má ica en los casos de mic oinyección espe má ica con biopsia es icula Raquel Blanes Zamo a, Rebeca Vaca Sánchez, Jonay González Pé ez, Delia Báez Quin ana, Rubí Rod íguez Díaz y José Ca los Albe o Be hencou Unidad de Rep oducción Humana. Hospi al Uni e si a io de Cana ias (HUC). Tene i e. España. RESUMEN Obje i os: La pen oxi ilina (PTX) ac i a la mo ilidad espe má ica. Nues o obje i o es alo a si la pen oxi ilina mejo a los esul ados de mic oinyección espe má ica con biopsia es icula (TESE) dado que es ecuen e halla espe ma ozoides inmó iles. Ma e ial y mé odos: Se analiza on 101 ciclos de inyección in aci o- plasmá ica de espe ma ozoides con TESE, en los que se alo a la edad de la muje , el núme o de o oci os, los o oci os madu os, la asa de e ilización, la asa de di isión, los emb iones óp imos, los emb iones ans e idos y la asa de ges ación po punción y po ans e . Se com- pa ó, según la causa de in e ilidad: TESE en esco o congelada; con espe ma ozoides mó iles o inmó iles; pacien es asec omizados o azoospé micos, y si se usó o no PTX. Resul ados: Pa a causa de in e ilidad mix a se ob ienen menos em- b iones óp imos (1,6 en e a 2,3; p < 0,05). Con TESE congelada se ans i ie on menos emb iones (1,53 en e a 2,16; p < 0,05) y aún así se consiguió igual asa de ges ación que en esco. Mic oinyec a es- pe ma ozoides inmó iles disminuye la asa de e ilización y de ges a- ción. No hay di e encias en e pacien es asec omizados y azoospé - micos. No hay di e encias signi ica i as en e los g upos con y sin PTX. Discusión: Se consiguen iguales esul ados en esco que en congela- do. La PTX ac i a la mo ilidad espe má ica y en odos los casos se mi- c oinyec a on espe ma ozoides mó iles, lo que mejo a las asas de e - ilización y de ges ación. Palab as cla e: Pen oxi ilina. TESE esca. TESE congelada. Mo ili- dad espe má ica. ABSTRACT The use o pen oxy ylline imp o es spe m mobili y in cases o ICSI wi h TESE Objec i es: Pen oxi ylline (PTX) ac i a es spe m mo ili y. Ou objec i e is o e alua e whe he PTX imp o es ICSI wi h es icula biopsy (TESE) esul s gi en ha i common o ind. Ma e ial and me hods: We analysed 101 ICSI wi h TESE cycles, in which we we assessed emale age, oocy e numbe , ma u e oocy es, e iliza ion a e, di ision a e, op imal emb yos, ans e ed emb yos, ges a ion a e by mic oinjec ion and by ans e . We compa ed, by in e ili y cause; esh o ozen TESE; mo ile o immo ile spe ma ozoa; asec omized o azoospe mic pa ien s, and whe - he PTX was used o no . Resul s: Less op imal emb yos we e ob ained wi h mixed in e ili y causes (1.6 s. 2.3; p < 0.05). Al hough ewe emb yos we e ans e ed wi h eez- hawed TESE (1.53 s. 2.16) hey s ill had he same p egnancy a e as esh. Mic oinjec- ion o immo ile spe ma ozoa ga e lowe e iliza- ion a es and lowe p egnancy a es. The e we e no di e ences be ween asec omized and azoos- pe mic pa ien s. The g oups wi h and wi hou PTX showed no signi ican di e ences. Discussion: The same esul s we e ound wi h esh and ozen TESE. PTX does ac i a e spe m mo ili y, and in all cases whe e mo ile spe m was mic oinjec ed mo ile spe m he e was imp o ed e iliza ion and p egnancy a es. Key wo ds: Pen oxi ylline. F esh TESE. F eeze- hawed TESE. Spe m mo ili y. ORIGINALES Co espondencia: D . R. Blanes Zamo a. O a, s/n. 38320 La Cues a. La Laguna. San a C uz de Tene i e. Tene i e. España. Co eo elec ónico: [email p o ec ed]. 274.108 INTRODUCCIÓN Desde la inco po ación de la mic oinyección espe má- ica (ICSI) como écnica en ep oducción asis ida, se pudo empeza a a a a un impo an e g upo de pa- cien es in é iles, los azoospé micos, a los que se pue- de suma los a ones asec omizados y aquellos con c ip ozoospe mia se e a. Pa a la ex acción de espe - ma ozoides se p ac ica p incipalmen e la biopsia es i- cula (TESE), aunque ambién se puede aplica la as- pi ación es icula o la aspi ación de epidídimo. Los espe ma ozoides es icula es son mayo i a ia- men e inmó iles inmedia amen e después de la biop- sia, y si es a mues a se congela aún se acen ua á más la inmo ilidad espe má ica. T as la descongelación, es ecuen e encon a una baja asa de mo ilidad espe - má ica, de modo que una pau a habi ual en el labo a- o io de emb iología es deja la mues a de biopsia un iempo en cul i o pa a acili a la ecupe ación de mo- ilidad1. Sin emba go, a pesa del iempo de cul i o, hay una se ie de mues as que no ecupe an ninguna mo ilidad. La congelación es á asociada a una pé dida de la mo ilidad espe má ica del 25 al 75%. El p oceso de congelación-descongelación de espe ma ozoides in- cluye además un inc emen o en la gene ación de adi- cales supe óxido que pueden p o oca pe oxidación de los lípidos de memb ana al e ando su luidez y a ec ando a su unción2. Algunos espe ma ozoides c iop ese ados ienen memb anas in ac as as la des- congelación, pe o es án inmó iles debido a su bajo es ado me abólico de modo que conse an su capaci- dad ecundan e. En ICSI un ac o de e minan e pa a ob ene bue- nos esul ados es ene la ga an ía de que los espe ma- ozoides que se mic oinyec an es én i os, y la mejo o ma de ene es a ga an ía es inyec a espe ma ozoi- des mó iles. Pa a las mues as que ienen una ausencia o al de espe ma ozoides mó iles hay a ias écnicas de selección de espe ma ozoides iables: el llamado “me- chanical ouch”3o oque mecánico de la cola espe má- ica y alo ación de la capacidad de ecupe ación de la o ma de la cola o de la igidez de és a, aunque es a écnica es la más inocua pa a el espe ma ozoide, e- quie e cie a expe iencia y iene un componen e de subje i idad. O a écnica es el HOS es o es hipo- osmó ico, que consis e en pone los espe ma ozoides en un medio hipoosmó ico, de modo que los espe - ma ozoides i os con su memb ana ín eg a se hincha- án y la cola queda á en ollada siendo así ácilmen e iden i icable; sin emba go, es e es puede se pe judi- cial pa a el espe ma ozoide y no se ecomienda mucho su uso. En úl imo luga , una o ma de iden i icación de espe ma ozoides i os es el uso de pen oxi ilina (PTX). La PTX eúne 2 ca ac e ís icas muy impo an- es: es un ac i ado de la mo ilidad espe má ica pues es un inhibido de la os odies e asa, y además inhibe la gene ación de anión supe óxido en su unción como an ioxidan e. Un e ec o nega i o de la PTX es que puede causa bloqueo meió ico en los o oci os de mamí e o, da peo es asas de desa ollo en emb iones de a ón, bloqueo en 2 células en algunas cepas de a- ón o pa enogénesis en o oci os de a ón. En conclu- sión iene un e ec o pe nicioso pa a los o oci os. Pa a e i a es e e ec o ad e so es necesa io usa la de mane a que la PTX es é en con ac o con los espe ma ozoides pa a iden i ica aquellos con mo ilidad, pe o as la iden i icación hay que la a los en medio lib e de PTX an es de la mic oinyección en el ó ulo. El p esen e abajo p e ende alo a qué pa áme- os se pueden mejo a al inco po a el uso de PTX en la u ina de abajo de la ICSI con TESE y es able- ce el mejo p o ocolo de abajo que edunde en una mejo a de los esul ados. MATERIAL Y MÉTODOS Pacien es Análisis e ospec i o de 101 ciclos ICSI con TESE ealizados en nues a unidad en e 2005 y 2007 con muje es meno es de 41 años. Se alo a on los siguien es pa áme os: edad de la pacien e, núme o de ó ulos, ó ulos madu os (MII), asa de e ilización, asa de di isión emb iona ia, cali- dad de la coho e emb iona ia o emb iones de buena calidad (EBC), núme o de emb iones ans e idos, asa de ges ación po punción (%Ges/P) y asa de ges ación po ans e (%Ges/T), según causa de es e- ilidad (donde es ablecemos 2 g upos: A, si la causa de in e ilidad es masculina, o B, si además hay una causa emenina, que conside a emos como causa mix- a), según si se u ilizó TESE in aciclo en esco o TESE congelada, en unción de si se encon a on es- pe ma ozoides mó iles o si sólo se mic oinyec a on espe ma ozoides inmó iles, según si se usó PTX o no (pa a pode ecupe a espe ma ozoides mó iles en la ICSI) y según si el pacien e p esen a una azoospe mia po asec omía o si es azoospé mico. El análisis c omosómico e eló un ca io ipo no mal en odos los pacien es. Recupe ación de espe ma ozoides del ejido es icula Los espe ma ozoides del ejido es icula ue on ob e- nidos median e TESE bajo anes esia local. Se ealizó una pequeña incisión en el esc o o, a a esando la ú- Blanes Zamo a R e al. El uso de pen oxi ilina mejo a la mo ilidad espe má ica en los casos de mic oinyección espe má ica con biopsia es icula Re In And ol. 2008;6(4):242-8 243 nica aginalis y albugínea (1-1,5 cm). Se ealiza on ex acciones de pa énquima es icula de dis in as zo- nas de la glándula has a la ob ención de espe ma o- zoides. En caso de no ob ene espe ma ozoides en un es ículo se p ocedió a ealiza múl iples biopsias en el con ala e al. Los p ocedimien os ue on ealizados po un and ólogo. El ejido ob enido se colocó en una placa de Pe i de doble pocillo bajo campana de lujo lamina con medio amponado (Flushing Médium, Medicul . Denma k), dislace ado bajo lupa es e eoscópica con la ayuda de 2 hojas de bis u í y obse ado al mic os- copio in e ido pa a comp oba la p esencia de es- pe ma ozoides. A con inuación se ans i ió a un ubo alcon cónico de 15 ml y se incubó du an e 45 min. T as la ob ención de ma e ial es icula en el que hay espe ma ozoides, una pa e se p ocesa pa a ICSI y o a se c iop ese a y almacena en nues o banco c iogénico de semen. De igual mane a se p ocede con las TESE diagnós icas con esul ado posi i o que se c iop ese an pa a su uso en un a amien o pos e io . La mues a des inada a la ICSI se cen i uga a 300 g du an e 5 min, con obje o de sepa a el ejido es icula de los espe ma ozoides, esuspendemos el pelle en 100 µl y se obse a el pelle al mic oscopio en busca de espe ma ozoides. Se ecoge el sob enadan e y se cen i- uga a 400 g du an e 5 min pa a ob ene una suspen- sión de espe ma ozoides más limpia de ejido y glóbu- los ojos. El segundo pelle se esuspende en 100 µl de medio amponado. Es e segundo pelle , si con iene es- pe ma ozoides, es a á más limpio pa a usa lo en la mi- c oinyección. Se incuba el pelle ob enido du an e al menos 45 min has a el momen o de la ICSI. C iop ese ación y descongelación del ejido es icula Pa a la c iop ese ación del ejido es icula se lle ó a cabo el siguien e p o ocolo: se añadió c iop o ec o en p opo ción 1:1 (F eezing médium I ing, USA), se dejó el ubo a empe a u a ambien e du an e 10 min pa a que el c iop o ec o pene a a en las cé- lulas. La mues a se homogeneizó y se accionó en los c io ubos de 2 ml o pajuelas de 0,5 ml co espon- dien es. Se equilib ó en la ne e a du an e 1 h. A con- inuación se colocó en con ac o con apo es de ni ó- geno líquido du an e 30 min. La mues a debe es a a 1 cm de la supe icie del ni ógeno líquido, a con i- nuación los c io ubos o pajuelas se sume gie on en ni ógeno líquido y se almacena on en nues o banco de semen. La descongelación de las mues as ob enidas po TESE se ealiza a empe a u a ambien e bajo campa- na de lujo lamina . Una ez descongelada la mues a se coloca en un ubo alcon cónico de 15 ml. Se aña- de un olumen simila de medio de cul i o (IVF Mé- dium, Medicul . Denma k) y se cen i uga a 400 g du an e 5 min pa a elimina el c iop o ec o . El so- b enadan e se coloca en o o ubo alcon cónico de 15 ml y se cen i uga a 800 g du an e 5 min. El pelle ob enido se esuspende en medio de cul i o (IVF Médium, Medicul . Denma k). Es imulación o á ica La sup esión hipo isia ia se lle ó a cabo median e p o- ocolo la go de es imulación, p o ocolo co o o p o o- colo an agonis a, con análogos de la GnRH (P oc ín. Lab. Abbo . Mad id; Syna el. Lab. SEID Ba celona), ce o ide (Se ono In e na ional S.A.) o o galu an (O - ganon. Ba celona) induciendo el desa ollo olicula múl iple con FSH (Gonal-F; labo a o ios Se ono. Ma- d id; Pu egon Lab. O ganon. Ba celona) o FSH aso- ciada a menopu (Fe ing. Mad id). El con ol de desa ollo olicula se ealizó con de- e minaciones se iadas de es adiol sé ico y ecog a ía ans aginal. Cuando los olículos alcanza on un a- maño de 18 mm, se indicó la adminis ación de 10.000 UI de hCG (O i elle. Se ono.Mad id). La ecupe ación de los o oci os se ealizó a las 34- 36 h as la adminis ación de la hCG po punción ans aginal bajo guía ecog á ica. La suplemen ación de la ase lú ea ue con la admi- nis ación ía aginal de 400 mg de p oges e ona mi- c onizada (U oges an. Lab. SEID; P oge ik. Lab. E ik) comenzando al día siguien e de la ex acción o oci a ia y aumen ando a 600 mg/día desde el día del ans e . El emba azo clínico se con i mó a los 17 días pos ans e con la de e minación de ␤hCG y a los 24 días pos ans e po ecog a ía aginal median e la p esencia de, al menos, un saco ges acional con la ido ca díaco. Mic oinyección espe má ica, alo ación, e ilización, di isión y ans e encia emb iona ia El p ocedimien o de ICSI se ealizó al como lo des- c ibió an S ei eghem e al4. En la p epa ación de la placa de ICSI, en los casos donde no hay espe ma ozoides mó iles, se colocó la mic ogo a de 5 µl de semen, 1 µl de la solución de PTX (Hemo ás 300 mg. Labo a o ios Robe . Ba ce- lona). En las ICSI ealizadas sin PTX, si únicamen e se dispone de espe ma ozoides inmó iles, su iabilidad se alo ó mecánicamen e con la pipe a de ICSI po la écnica del oque mecánico desc i a po Ma qués de Oli ei a e al3. Blanes Zamo a R e al. El uso de pen oxi ilina mejo a la mo ilidad espe má ica en los casos de mic oinyección espe má ica con biopsia es icula 244 Re In And ol. 2008;6(4):242-8 El cul i o de los o oci os y emb iones se ealizó usando la se ie de medios Medicul (Medicul , Den- ma k). La alo ación de la e ilización ICSI se ealiza a las 18-20 h pos inseminación bajo mic oscopio in e ido po la p esencia de 2 p onúcleos y 2 co púsculos po- la es. La calidad emb iona ia se clasi ica según un sco- e emb iona io que ca aloga a los emb iones dándoles una pun uación que oscila en e 0 y 10, alo ando el núme o de blas óme os, su sime ía y el g ado de agmen ación ci oplasmá ica. Los emb iones óp imos son los que ienen sco es 8, 9 y 10. Se ans ie e un máximo de 3 emb iones en e los días 2, 3 y 4 de cul i o emb iona io y los emb iones sob an es que cumplen los c i e ios de calidad son c iop ese ados. Es adís ica El análisis es adís ico se ealizó usando el paque e es- adís ico SPSS e sión 15. El es de la ␹2se u ilizó pa a de e mina las di e encias signi ica i as en e los g upos. El ni el de signi icación conside ado ue p < 0,05. RESULTADOS Se alo ó un o al de 101 ciclos de ICSI con TESE de o ma e ospec i a de los que ob u o esul ados com- pa a i os de edad, núme o de o oci os ob enidos, nú- me o de los que son madu os MII, asa de e iliza- ción, asa de di isión, núme o de EBC ob enidos, núme o de emb iones ans e idos, %Ges/P y %Ges/T: – Según causa de in e ilidad ( abla 1).Se es able- cen 2 g upos según si la única causa de in e ilidad es la masculina o si además hay una causa emenina, que se conside a á como causa mix a. Cuando además de la causa masculina hay alguna causa emenina de es e ilidad se obse a que los esul- ados no p esen an di e encias signi ica i as en asa de e ilización ni en asa de ges ación, pe o se obse a una di e encia en el núme o de emb iones de buena calidad ob enidos. – Según si se u ilizó TESE in aciclo en esco o TESE congelada ( abla 2). A pesa de que en las TESE con- geladas se ans ie e un núme o signi ica i amen e meno de emb iones se obse a que no hay di e en- cias signi ica i as ni en asa de e ilización ni en el núme o de EBC ni en la asa de ges ación. Blanes Zamo a R e al. El uso de pen oxi ilina mejo a la mo ilidad espe má ica en los casos de mic oinyección espe má ica con biopsia es icula Re In And ol. 2008;6(4):242-8 245 TABLA 1. Resul ados de mic oinyección espe má ica (ICSI) según causa de in e ilidad Causa masculina Causa mix a N59 (media ± DE) 42 (media ± DE) p Edad 32,2 ± 4,4 34,2 ± 5,0 ns Núme o de ó ulos 9,95 ± 4,26 8,24 ± 4,74 ns Ó ulos madu os 8,39 ± 4,00 6,93 ± 4,51 ns Tasa de e ilización 50,66 ± 22,22 53,05 ± 24,13 ns Tasa de di isión 89,9 ± 26,4 94,6 ± 18,7 ns Emb iones de buena calidad 2,31 ± 1,97 1,60 ± 1,53 0,048 Emb iones ans e idos 1,98 ± 0,92 1,83 ± 0,85 ns Tasa ges ación/punción 19% 12% ns Tasa ges ación/ ans e 21% 12% ns DE: des iación es ánda ; ns: no signi ica i o. TABLA 2. Resul ados de mic oinyección espe má ica (ICSI) según si se u ilizó mues a de biopsia en esco o congelada TESE esca TESE cogelada N63 (media ± DE) 38 (media ± DE) p Edad 32,8 ± 4,8 33,4 ± 4,6 ns Núme o de ó ulos 9,79 ± 3,75 8,32 ± 5,52 ns Ó ulos madu os 8,35 ± 3,67 6,84 ± 5,01 ns Tasa de e ilización 52,33 ± 21,23 50,71 ± 25,81 ns Tasa de di isión 94,8 ± 16,7 87,0 ± 31,5 ns Emb iones de buena calidad 2,08 ± 1,63 1,89 ± 2,14 ns Emb iones ans e idos 2,16 ± 0,83 1,53 ± 0,86 0,003 Tasa ges ación/punción 16% 16% ns Tasa ges ación/ ans e 16% 18% ns DE: des iación es ánda ; ns: no signi ica i o; TESE: biopsia es icula . – En unción de si se encuen an espe ma ozoides mó iles o si sólo se mic oinyec a on espe ma ozoides in- mó iles ( abla 3). Cuando sólo se inyec an espe ma- ozoides inmó iles se ob iene una asa de e iliza- ción y una asa de ges ación signi ica i amen e meno es. – Según si el pacien e es asec omizado o azoospé mi- co ( abla 4). Los pacien es asec omizados no ob ie- nen ningún esul ado signi ica i amen e mejo que el es o de las TESE, aunque se ea una lige a endencia a ene una mejo asa de ges ación. – En unción de que se haya usado PTX o no ( a- bla 5). En la abla 5 se compa a el g upo de no PTX que u ie on mo ilidad espe má ica (n = 48) con es- pec o al g upo con PTX con mo ilidad (n = 24), pa a alo a si habiendo mo ilidad espe má ica hay alguna di e encia po el hecho de habe usado PTX. Se ob- se a que a pesa de que se ans ie en menos emb io- Blanes Zamo a R e al. El uso de pen oxi ilina mejo a la mo ilidad espe má ica en los casos de mic oinyección espe má ica con biopsia es icula 246 Re In And ol. 2008;6(4):242-8 TABLA 3. Resul ados de mic oinyección espe má ica (ICSI) según si se mic oinyec a on espe ma ozoides mó iles o sólo inmó iles Espe ma ozoides mó iles Espe ma ozoides inmó iles N77 (media ± DE) 24 (media ± DE) p Edad 33,0 ± 4,9 33,0 ± 4,2 ns Núme o de ó ulos 9,18 ± 4,34 9,42 ± 5,17 ns Ó ulos madu os 7,81 ± 4,17 7,71 ± 4,64 ns Tasa de e ilización 53,99 ± 22,71 44,18 ± 22,55 0,041 Tasa de di isión 92,36 ± 23,5 90,42 ± 24,0 ns Emb iones de buena calidad 2,03 ± 1,75 1,96 ± 2,12 ns Emb iones ans e idos 1,95 ± 0,86 1,83 ± 1,01 ns Tasa ges ación/punción 21% 0% 0,015 Tasa ges ación/ ans e 22% 0% 0,015 DE: des iación es ánda ; ns: no signi ica i o. TABLA 4. Resul ados de mic oinyección espe má ica (ICSI) según si el pacien e es azoospé mico o asec omizado No asec omía Vasec omía N80 (media ± DE) 21 (media ± DE) p Edad 33,04 ± 4,62 32,95 ± 5,31 ns Núme o de ó ulos 9,46 ± 4,58 8,38 ± 4,29 ns Ó ulos madu os 7,95 ± 4,33 7,14 ± 4,05 ns Tasa de e ilización 51,2 ± 24,6 53,4 ± 15,47 ns Tasa de di isión 89,9 ± 26,1 99,2 ± 3,7 ns Emb iones de buena calidad 2,00 ± 1,8 2,05 ± 1,9 ns Emb iones ans e idos 1,90 ± 0,9 2,00 ± 0,7 ns Tasa ges ación/punción 15% 19% ns Tasa ges ación/ ans e 16% 19% ns DE: des iación es ánda ; ns: no signi ica i o. TABLA 5. Resul ados mic oinyección espe má ica (ICSI) según si se u ilizó pen oxi ilina (PTX) en la mic oinyección o no No PTX PTX N48 (media ± DE) 24 (media ± DE) p Edad 33,1 ± 4,8 33,2 ± 5,4 ns Núme o de ó ulos 9,6 ± 3,6 8,4 ± 5,8 ns Ó ulos madu os 8,3 ± 3,6 7,0 ± 5,3 ns Tasa de e ilización 55,7 ± 19,1 60,1 ± 20,9 ns Tasa de di isión 98 ± 8,2 96,3 ± 11,4 ns Emb iones de buena calidad 2,4 ± 1,7 1,6 ± 1,7 ns Emb iones ans e idos 2,2 ± 0,7 1,8 ± 0,7 0,008 Tasa ges ación/punción 19% 24% ns Tasa ges ación/ ans e 21% 25% ns DE: des iación es ánda ; ns: no signi ica i o. nes en el g upo de PTX (p = 0,08), no hay di e encias signi ica i as en la asa de ges ación. El uso de la PTX “pe se” no p esen a di e encias signi ica i as en los esul ados. DISCUSIÓN La PTX es un inhibido de la os odies e asa del g u- po de las me ilxan inas. Inhibe la o u a del adenosin mono os a o cíclico (cAMP) y es bien conocido que la concen ación in acelula de cAMP juega un im- po an e papel en la mo ilidad espe má ica. El uso de PTX en el p ocesamien o de los espe ma ozoides in- mó iles, ya sea de mues as en eyaculado comple a- men e as enozoospé micas ya en mues as de TESE en esco o en congelado, se ha demos ado que es e ec i a5. Sabiendo además que la PTX es óxica pa a los o oci os, es o de e mina la o ma de abajo al e- aliza la mic oinyección y siemp e se ealiza á un paso de la ado del espe ma ozoide iden i icado p e io a la mic oinyección del ó ulo6. A la is a de los esul ados son a ias las conclusio- nes a las que llegamos. En p ime luga , se consiguie- on mejo es esul ados en calidad emb iona ia cuando la única causa de in e ilidad es la masculina que si a és a se le añade alguna causa de in e ilidad emenina. No obs an e el esul ado inal de asa de ges ación no da di e encias signi ica i as. Con espec o al uso de espe ma ozoides de TESE en esco o de mues a congelada, se e que no hay di e encias en asa de ges ación en ambos g upos, y ello a pesa de que en el g upo de TESE congelada se ans i ió un núme o signi ica i amen e meno de emb iones. Es e esul ado aco de con la bibliog a ía7 nos pe mi e pode p og ama los ciclos de es imula- ción con enien emen e de mane a que en nues a unidad el c i e io que enemos es ablecido es que pa a las pa ejas que acep an un semen de donan e en caso de no ob ene espe ma ozoides en la biopsia, p og amamos la TESE en esco sinc onizada con el día de la ex acción olicula , y en las pa ejas que no acep an un semen de donan e como al e na i a a la ausencia de espe ma ozoides, se les p og ama una TESE diagnós ica en la que si hay espe ma ozoides se congela la mues a y pos e io men e se p og ama el ciclo de es imulación de la muje pa a insemina con la mues a congelada. También hay que menciona que en los casos de TESE en esco pa a un p ime ci- clo ICSI, el c i e io de nues o labo a o io es congela pa e de la mues a biopsiada pa a que se u ilice en caso de eque i un segundo o e ce ciclo de a a- mien o. Hay g upos de abajo que hacen ex ensible el c i e io de congelación a mues as de eyaculado de pacien es c ip ozoospé micos y oligozoospé micos se- e os8pa a ga an iza se la disponibilidad de espe ma- ozoides el día de la inseminación en caso de ausencia o al de espe ma ozoides en ese día, p ác ica que en nues a unidad no se lle a a cabo sal o con adas ex- cepciones. En el g upo de es udio de es e abajo se inco po ó el uso de la PTX a pa i de una echa de e minada, de modo que las biopsias p e ias a esa echa (un o al de 76) son sin PTX y ello incluye mues as an o con espe ma ozoides mó iles como con espe ma ozoides odos inmó iles. A pa i de la inco po ación de la PTX la casi o alidad de las mues as lle a PTX en las go as de mic oinyección po que en las mues as que son o almen e inmó iles consigue que se ecupe en algunos espe ma ozoides mó iles, y en las que ya hay algunos espe ma ozoides mó iles nos pe mi e ecupe- a una mayo mo ilidad en un mayo núme o de es- pe ma ozoides debido a que la PTX aumen a la p o- po ción de espe ma ozoides hipe ac i ados5, lo que edunda en una mejo selección de los espe ma ozoi- des que hay que mic oinyec a y la ealización de la ICSI en meno iempo. Cuando no usábamos PTX y la mues a e a con espe ma ozoides comple amen e inmó iles, u ilizamos la écnica del “mechanical ouch”3, es deci , con un golpe a la cola del espe ma- ozoide con la pipe a ICSI se obse a la lexibilidad y capacidad de ecupe ación de la posición inicial de la cola pa a alo a que es un espe ma ozoide i o, y si la cola se mues a ígida se desecha el espe ma ozoide y se conside a no iable. Con es a écnica, de los 24 casos egis ados en es e es udio, se consiguió un 44,18% de asa de e ilización que, como cabía espe- a , es signi ica i amen e meno que en el g upo con espe ma ozoides mó iles, un p omedio de 1,96 em- b iones de buena calidad po pacien e y una media de emb iones ans e idos de 1,83, que no a ía signi i- ca i amen e del núme o de emb iones ans e idos en los casos en que se usa on espe ma ozoides mó iles, y a pesa de ello no hubo ninguna ges ación en es e g upo, en e a un 21% de ges ación del g upo con espe ma ozoides mó iles. Es en es e aspec o en el que la PTX ha apo ado una cla a en aja en los esul ados de e ilización y ges ación, dado que su p incipal apo ación es pe mi i la co ec a iden i icación de los espe ma ozoides i os9al po encia su mo ilidad6, y ello sob e odo es aplicable a las mues as congeladas dado que la congelación iene como consecuencia una impo an e pé dida en la mo ilidad espe má i- ca2,10. Pe o no solamen e es bene iciosa la PTX en los casos de ausencia o al de mo ilidad sino que ambién iene sus en ajas en los casos donde la mo ilidad es escasa, po que al po encia la pe mi e que se eduzca Blanes Zamo a R e al. El uso de pen oxi ilina mejo a la mo ilidad espe má ica en los casos de mic oinyección espe má ica con biopsia es icula Re In And ol. 2008;6(4):242-8 247 Blanes Zamo a R e al. El uso de pen oxi ilina mejo a la mo ilidad espe má ica en los casos de mic oinyección espe má ica con biopsia es icula 248 Re In And ol. 2008;6(4):242-8 el iempo de incubación de la mues a, el iempo de la mic oinyección y que, además, se pueda hace una mejo selección espe má ica11,12. Es o es impo an e dado que se ha demos ado que el iempo de incuba- ción p olongado de los espe ma ozoides es icula es causa agmen ación del ADN13. Den o del g upo es udiado, se pueden di e encia 21 casos de pacien es asec omizados y una de nues- as p egun as e a sabe si los esul ados se ían signi i- ca i amen e mejo es en es e g upo, y sin emba go nos encon amos con que los esul ados sólo mues an una pequeña endencia a mejo a la asa de ges ación pe o no signi ica i a, de modo que no podemos a i ma que en es e g upo engamos un mejo p onós ico. AGRADECIMIENTOS A la Unidad de And ología del Hospi al Uni e si a io de Cana ias po la ejecución de las biopsias es icula- es de los pacien es de la Unidad de Rep oducción. Al equipo de en e me ía de nues a unidad po su pa icipación en la coo dinación de los p ocedimien- os qui ú gicos ealizados. Bibliog a ía 1. Núñez-Calonge R, Co és S, Pe amo B, Caballe o P. In luen- ce o incuba ionno ozen- hawed es icula immo ile spe m on he ou come o in acy oplasma ic spe m injec ion in non- obs uc i e azoospe mic pa ien s. Fe il S e il. 2007;88 Suppl 1:S360. 2. Blanes R, Fe nández PJ, Jiménez A, Romeu A. La pen oxi ili- na como agen e an ioxidan e en el p oceso de c iop ese ación espe má ica. Re Ibe Fe il. 2004;21:237-45. 3. Ma qués de Oli ei a N, Vaca Sánchez R, Rod íguez Fies as S, López Salgado T, Rod íguez R, Albe o Be hencou JC, e al. P egnancy wi h ozen- hawed and esh es icula biopsy a e mo ile and immo ile spe m mic oinjec ion, using he mechani- cal ouch echnique o assess iabili y. Hum Rep od. 2004;19: 262-5. 4. Van S ei eghem AC, Nagy Z, Jo is H, Liu J, S aessen C, Smi h J, e al. High e iliza ion a e a e in acy oplasmic spe m injec ion. Hum Rep od. 1993;8:1061-6. 5. Yo ich JL. Pen oxi ylline: ac ions and applica ions in assis ed ep oduc ion. Hum Rep od. 1993;8:1786-91. 6. Hu ado de Mendoza MV, González-U o AL, C uz N, Gu- ié ez P, Cascales F, Sille o JM. In si u use o pen oxi ylline o assess spe m i ali y in in acy oplasmic spe m injec ion o e- a men o pa ien s wi h o al lack o spe m mo emen . Fe il S e il. 2000;74:176-7. 7. Gio ge i C, Chinchole JM, Hans E, Cha les O, F anquebalme JP, Glowaczowe E, e al. C ude cumula i e deli e y a e o- llowing ICSI using in en ionally ozen- hawed es icula spe - ma ozoa in 51 men wi h non-obs uc i e azoospe mia. RBM Online. 2005;11:319-24. 8. Koscinski I, Wi eme C, Le eb e-Khalil V, Ma celli F, De os- sez A, Rigo JM. Op imal managemen o ex eme oligozoos- pé mica by an app op ia e c yop ese a ion p og amme. Hum Rep od. 2007;22:2679-84. 9. Nagy Z, Liu J, Jo is H, Ve he en G, Tou naye H, Camus M, e al. The esul s o in acy oplasmic spe m injec ion is no e- la ed o any o he h ee basic spe m pa ame e s. Human Re- p od. 1995;10:1123-29. 10. Ko acic B, Vlaisa lje ic V, Reljic M. Clinical use o pen oxi i- lline o ac i a ion o immo ile es icula spe m be o e ICSI in pa ien s wi h azoospe mia. J And ol. 2006;27:45-52. 11. Tasdemi I, Tasdemi M, TabukÇuo lu S. E ec o pen oxi y- lline on immo ile es icula spe ma ozoa. J Assis Rep od Ge- ne . 1998;15:90-2. 12. G i eau JF, Lobel B, Lau en MC, Micha diè e L, Le Lannou D. In e es o pen oxi ylline in ICSI wi h ozen- hawed es i- cula spe ma ozoa om pa ien s wi h non-obs uc i e azoos- pe mia. Rep od Biomed Online. 2006;12:14-8. 13. Dalzell LH, Thomson-C ee ME, McClu e N, T aub AI, Lewis SE. E ec s o 24 hou s incuba ion a e eeze- hawing on DNA agmen a ion o es icula spe m om in e ile and e i- le men. Fe il S e il. 2003;79 Suppl 3:1670-72.