Semisíntesis estereoselectiva del 3-b-D-glucósido del sitosterol, principio antihiperglucemiante de Ceutaurea seridis L. var. Maritima Lge.

DEPARTAMENTO DE FARMACOGNOSIA y FARMACODINAMIA FACULTAD DE FARMACIA UNIVERSIDAD DE VALENCIA "SEMISINTESIS ESTEREOSELECTIV A DEL 3-� -D-GLUCOSIDO DEL -SITOSTEROL, PRINCIPIO ANTIHIPERGLUCEMIANTE DE CENTAUREA SERID/S L. V AR. MAR/T/MA LGE." A. Villa del F esno; M. Paya Pe is y R. Za agoza Mo eno RESUMEN Se han es ablecido las condiciones ope a o ias pa a la semisín esis es e eose lec i a del 3- � -D-glucósido del � -si os e ol, p incipio an ihipe glucemian e ais lado de la sumidad lo ida de Cen au ea se ídis L. a o ma i ima Lge. El endi mien o del p oceso ue de 11,6 po cien o, ne amen e supe io al ob enido a pa i de la especie ege al que ue 0,03 po cien o. SUMMARY The s e eoselec i e semisyn hesis condi ions ha e been es ablished o ob ain � -si os e ol 3-� D-glucoside, which is an an ihype glycemic p incipe isola ed om he ae ial pa o Cen au ea se idis L. a . ma i ima Lge. The yield was 11,6 pe cen , much highe han he one ob ained om he ege al species, which was 0,03 pe cen . INTRODUCCION En an e io es abajos se ha aislado, iden i icado y es ablecido el e ec o an ihi pe glucemian e del 3-� -D-glucósido del � -si os e ol (1,2), he e ósido es e oídico p esen e en la sumidad lo ida de Cen au ea se idis L. a o ma í ima Lge. en la p opo ción 0,03 po cien o e e ida a d oga seca. Dicha especie es ampliamen e u ilizada a ni el popula en la Comunidad Valenciana como an idiabé ica. En base a que se ob u o dicho p incipio con un bajo endimien o (0,03 po cien o) y que en la ac ualidad la sín esis de he e ósidos, en pa icula los es e oí dicos se haya muy desa ollada dada su impo ancia en Te apéu ica, nos plan ea mos la semisín esis es e eoselec i a de dicho he e ósido. A s Pha maceu ica. Tomo XXVII. Núm. 1, 1986. 104 ARS PHARMACEUTlCA Son di e sos los mé odos que se disponen pa a la ob ención de he e ósidos a pa i de sus geninas co espondien es (3,4,5). No obs an e, en gene al, p esen an como incon enien e la o mación de ambos es e oisóme os. Noso os hemos seleccionado el mé odo p opues o po Wul , K uge y Rohle (6,7,8) en base a la es e eoespeci icidad del p oduc o de eacción, siemp e que se ope e bajo unas condiciones de e minadas. RESULTADOS Y DISCUSION La eacción de o mación del he e ósido·se ha lle ado a cabo en obscu idad pa a e i a la desac i ación del ca alizado , a empe a u a ambien e y bajo el e ec o de ondas sono as de al a ecuencia. En es as condiciones ob u imos mejo es en dimien os que los que cab ía espe a po el mé odo o iginal de es os au o es (agi ación manual y empe a u as del o den de -100C). Esquemá icamen e el p o ceso empleado ha sido: HO é e e ílico ul asonidos H OAc OH ESQUEMA 1 + ie:" ; Ac o � Ji OAc a - ace ob!'omogl'..1cos2. CH3-yH-CH2-CH2-COOAg OH he e 6sido ace ilado KOE alcoho�ic2. al 5% e lujo 2 ho as )-8 �D-gluc6sido del S -s:"":Qs:e ol ARS PHARMACEUTICA 105 El p oduc o de la saponi icación ue pu i icado po c oma og a ía en columna de silicagel G Me ck con ase mó il clo o o mo/me anol (9: 1) y pos e io segui mien o de los dis in os elua os median e CCF, empleando como e elado aini llina sul ú ica. El endimien o en la ob ención del 3- � -D-glucósido ue del 11,6 po cien o. Pa a la a i icación de su es uc u a se han ealizado p uebas de ipo ísico y enzimá icas. Las de ipo ísico (pun o de usión: 281-2840C sin co egi y espec o IR) son pe ec amen e supe ponibles a las ealizadas con el he e ósido na u al. La hid ólisis enzimá ica nos pe mi ió a i ica que el he e ósido ob enido ía se misin é ica sólo se encon aba en con igu ación � espec o al enlace é e , como así lo indicaba la ausencia de p oduc os de hid ólisis (� -si os e ol y a -D-glucosa), al se a ado dicho he e ósido con una a -glucosidasa. PARTE EXPERIMENTAL l. Ob ención de la genina ( � -si os e ol). Se ob u o a pa i de la especialidad come cial si os e olR de los labo a o ios "D . Es e e". Dicho p epa ado se come  cializa en sob es g anulados conjun amen e con saca ina y excipien es ap opiados. La pu i icación se ealizó po ex acción líquida en ampolla de decan ación con clo o o mo y agua des ilada sa u ada de bica bona o sódic9 (solubiliza la saca ina en la ase acuosa). El ex ac o clo o ó mico, una ez secado con sul a o sódico anhid o y concen ado a p esión educida en o a apo , ue lle ado a una columna c oma og á ica de silicagel G, ob eniendo as su elución con clo o o mo, en los p ime os elua os el � -si os e ol que c is alizó en agujas acicula es. 2. Ob ención del ca alizado ( '( -hid oxi ale a o de pla a). 12,5 g (0,3M) de NaOH se disuel en en 10 mI de agua des ilada. A dicha solución se añaden agi ando du an e 30 minu os, una mezcla de 12,5 mI de e anol y 25,0 g (0,25M) de '< - ale olac ona. Se calien a 30 minu os a e lujo y después de en ia se o ma una masa iscosa que es desecada a 600C median e acío. Se añaden 230 mI de e anol calien e con 30 mI de alcohol isop opllico. Al cabo de un día p ecipi an 21 g de la sal sódica. Rendimien o 60 po cien o. Pos e io men e, 5 g (35,6mM) del '( -hid oxi ale a o sódico se disuel en en 34 mI de agua des ilada. Se ajus a a pH = 7 Y se añaden, e i ando la luz, una solución de ni a o de plan a (8,5 g en 22 mI de agua des ilada). El p ecipi ado de la sal de pla a o mada, se la a con agua, ace ona y é e e llico. Se conse a en desecado con pen óxido de ós o o. Rendimien o 75 po cien o a pa i de la sal sódica. 3. Ob ención y pu i icación del he e ósido semisin é ico. 6g de a -ace ob o moglucosa Me ék pa a sín esis, 6 g de � -si os e ol y 6, 5 g de 4-hid oxi ale a o de pla a, ue on in oducidos en un ma az e lenmeye con 35 mI de é e e llico exen o de humedad. El conjun o se p o egía de la luz y e a some ido du an e 3 ho as a la acción de ul asonidos en un apa a o B asonic-220. 106 ARS PHARMACEUTICA Pos e ionnen e, el he e ósido ace ilado ue saponi icado con 50 ml de po asa alcohólica al 5 po cien o en un ma az de boca esme ilada conec ado a un sis ema de e lujo, du an e 2 ho as y bajo la acción de un agi ado magné ico. A con inua ción se concen ó en o a apo , se añadió agua des ilada y se ealizó una ex ac ción con clo o o mo en ampolla de decan ación. Los ex ac os clo o ó micos una ez desecados y eunidos ue on pu i icados po c oma og a ía en columna de silicagel G con ase mó il clo o onno/me anol (9: 1) y pos e io seguimien o de los dis in os elua os median e CCF empleando como e elado ainillina sul ú ica. El endimien o ue del 11,6 po cien o. 4. Ra i icación es uc u a. -P uebas ísicas: Se ha empleado un apa a o ipo Ko le ma ca "Reiche The mo a " monocula pa a la de e minación del pun o de usión y un "G a ing ln a ed Spec opho ome e " Pe kin Elme pa a los espec os IR. -Hid ólisis enzimá ica: Se disuel e 1 mg del he e ósido semisin é ico en 2 ml de una solución ampón a pH = 5 (solución 0,5M de ace a o sódico ajus ada a pH = 5 con ácido acé ico) y 1 mg de o: -glucosidasa "Sigma Co po a ion". El con jun o se deja una noche a 37oC. El p oduc o de la eacción, se c oma og a ía sob e c oma o olio de silicagel G con ase mó il: bu anol ácido acé ico/é e e í lico/agua (9:6:3: 1), u ilizando como e elado ainillina sul ú ica. BIBLIOGRAFIA 1. VILLAR, A.; PAYA, M.- A ch. Fa macol. Toxico!., 5, 301 (1981). 2. VILLAR. A.: P A Y A, M. -Plan o Med. e Phy o he ., en p ensa. 3. KOCHETKOV, N.K.; KHORLIN, A.J.; BOCHKOV, A.F.- Te ahed on, 23,693 (1967). 4. HELFERICH, B.; ZIRNER, J.-Chem. Be . 95,2604 (1962). 5. FLOWERS, H.N.; JEANLOZ, R.W.-J. O g. 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