INSTITUTO «LOPEZ-NEYRA» DE PARAS ITOLOGIA
DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA
ANALISIS DE PESTICIDAS FOSFORADOS
POR CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA
po
LóPEZ-NAVARRETE, M_ J.; SÁNCHEZ-MoRENO, M.; MONTEOLIVA, M.
SUMMARY
I has be en ied o ind he bes condi ions o he use o ch oma og aphy
in hin laye , as a echnique o alo a ion and iden i ica ion o he esidues
o pes icides.
When he s a iona y phase is Silicagel GF254, he sensibili y is highe .
A sui able sepa a ion o he pes icides assayed has been ob ained by me
ans o he mobile phase Be nzene-ace ic acid (90/10).
Conce ning he quan i a i e alo a ion, a yield o 70 % has been eached
in he case o Mala hion.
RESUME
On a essayé de ou e les condi ions idéales pou l'emploi de la ch oma
og aphie en 'couche-mince, comme echnique de alo a ion e d'iden i ica
ion des esidus de pes icides. La sensibili é es mayeu e quand le adso ben
es Silicagel GF254.
A ec le sys eme d'elu ion, bencene-acide ace ique (90/10), on a ob enu une
sepa a ion app opiée des pes icides essayés.
Quan a la alo a ion quan i a i e, on ob ien un endemen de 70 % pou
le cas du Mala hion.
INTRODUCCION
En un abajo an e io (l) se desc ibía la ex acción de esiduos
de pes icidas en aguas y la de e minación de és os en el ex ac o
po c oma og a ía gaseosa. En el p esen e abajo se ensaya la
posibilidad de iden i icación y de e minación de esiduos de pes i
cidas o gano os o ados po c oma og a ía en capa ina.
A s Pha maceu ica. Tomo XXII. Núm. 2, 1981.
196 ARS PHARMACEUTICA
MATERIAL Y METODOS
El equipo de c oma og a ía en capa ina empleado ha sido el
de Desaga. Como abso ben es o ase ija silicagel G y silicagel
GF-254 ambos de la casa Me ck. Como ases mó iles: hexano/
ace ona (80/20); benceno/ácido acé ico glacial (90/10) y ciclo
hexano/ace ona (80/20). Los disol en es o gánicos de la casa P o·
bus y edes ilados en el labo a o io.
Reac i os de e elado: a) Ni a o de pla a amoniacal.-Se p e
pa a mezclando una pa e de solución de ni a o de pla a al 10
po 100 en agua con una pa e de amoníaco concen ado y ocho
pa es de alcohol me ílico.
b) Azul de b omo enol-ni a o de pla a.-Se ob iene mezclan
do nue e pa es de solución de ni a o de pla a al 1 po 100 en
ace ona-agua (75/25) con una pa e de azul de b omo enol al
0,4 po 100 en ace ona.
Las placas se p epa an según Rande a h (2) y los pa ones de
pes icidas, disuel os en hexano o hexano/ace ona, se colocan en el
pun o de o igen con mic oje inga. El pun o de o igen a 2 cm del
bo de y la mues a (gene almen e 10 mic oli os) ex endida en
línea de 1 cm. Se man iene en la cáma a c oma og á ica has a que
el en e alcanza 10 cm desde el o igen en cuyo momen o se e i a,
se seca y se p ocede a su e elado.
Mé odos de e elado: Con ni a o de pla a amoniacal.-La placa
se expone a la luz ul a iole a (250 nm) du an e 10 minu os, se
pul e iza el eac i o y se calien a la placa a 1000 C unos 10 mi
nu os. Después se uel e a expone al ul a iole a has a apa ición
de manchas isibles.
Con azul de b omo enol-ni a o de pla a.-La placa se seca a
1000 C du an e sie e minu os, se pul e iza el eac i o, se uel e
a seca du an e cinco minu os y después se pul e iza la solución
de ácido cí ico.
Con ines cuan i a i os se ensayó el mé odo de Tu ne (3) con
ni obenzilpi dina como eac i o de colo ación. Pa a ello y una
ez conocida la si uación exac a de los pes icidas en la placa desa
ollada, se aspó la zona de silicagel co espondien e a la mancha
de pes icida y se ex ajo en un ubo de ensayo con 2 ml. de he
xano-ace ona (80/20). Po cen i ugación se sepa a el adso 
ben e y al sob enadan e, que lle a el pes icida, se le aplica el
mé odo colo imé ico de Tu ne .
ARS PHARMACEUTICA 197
RESULTADOS
Los esul ados se exp esan en las ablas siguien es:
TABL A 1
MINIMO DETECTABLE PARA CADA PLAGUICIDA EN SAYADO Y EN FUN
CION DE LAS FASES FIJAS, MOVILES Y REVELADORES UTILIZADOS
(EXPRESADO EN NANOG RAMOS)
Ni a o de pla a amoniacal Ni a o pla a/azul b omo enol
He: .ano Benceno Ciclohexano Hexano Benceno Ciclohexano
Plaguicida ace ona acé ico ace ona ace ona acé ico ace ona
--------
G GF G GF G GF G GF G GF G GF
---�-- ,-�--,,--,--
E ion 1 3 10 10 3 3 10 5 2 20 10 10
Diazinon 10.0 40 40 20 100 50 2.0 20 20. 20 20 20
Dime oa o 30 20 10 10
40
25 75
75
100 100 100 100
Mala ion 3 10 10 10 10 20 10 5 10 10 10 10
Me ilpa a ion 40 25 40 20 50 20 20 30 40 30 25 3D
Pa a ion 50 25 40 20 50 3D 20 20 20 30 25 30
TABLA 11
RF (x 100) DE LOS DISTINTOS PESTICIDAS EN8AYADOS EN FUNCION
DE LAS FASES FIJAS Y MOVILES UTILIZADAS
Hexano/ace ona Benceno / acé ico Ciclohexano / ace ona
Plaguicida
G GF G GF G GF
E ion 52,3 56,8 84,2 76,2 52,9 51,4
Dia zinon 48,8 51,1 51,7 46,6 51,9 47,7
Dime oa o
5,5
7,0 19,9 14,4 7,9 7,1
Mala ion 30,7
34,4
61,4 50,2 31,0 31,7
Me ilpa a ion 30,2 31,9 73,4 67,6 29,6 28,2
Pa a ion 42,9 45,0 77,3 73,1 42,5 39,2
198 ARS PHARMACEUTICA
TABLA 111
DETERMINACION DE MALATION POR CAPA FINA. TIEM PO OPTIMO
DE INCUBA CION EN EL DESARROLLO DEL COLOR
Densidad óp ica X 100 a 580 nm.
Concen aciones
15' 20' 25' 30' 35'
._----
0,5 � g .. . 7,3 8,6 9,6 8,3 7,3
1,0 �g .. . 14,3 16,0 17,6 16,6 16,0
1,5 �g .. . 26,6 27,6 29,0 27,3 26,3
2,0 �g .. . 35,6 37,6 38,0 36,0 35,3
3,0 � .. . 49,6
53,3
56,3 53,6 53,3
TABLA IV
DETERMINACION DE RESIDUOS DE MALATION POR AISLAMIENTO EN
CAPA FINA SEGUIDO DEL METODO COLORIMETRICO DE TURNER
Concen ación de mala ion ... . ..
Núme o de expe iencias
D. o. (X 100) media ...
Mala i on ecupe ado ...
% de ecupe ación
DISCUSION
Sin desa ollo
2,5 �g
5
40,2
2,26 �g
90,4
Con desa ollo
2,5 �¡g
5
33,0
1,75 .¡. g
70,0
La c oma og a ía en capa ina pa a el análisis de esiduos de
plaguicidas es un mé odo sencillo, ápido y de ácil manejo y es
ecomendado po la O. M. S. como écnica que se puede u iliza
en los labo a o ios de campaña. Hemos ensayado di e en es ad
so ben es, ases mó iles y e elado es en e a los plaguicidas
o gano os o ados de mayo uso en la p o incia de G anada con
los esul ados que se exp esan en las Tablas.
En la Tabla 1 se obse a que la can idad mínima de ec able
depende an o del pes icida como del e elado empleado y de la
ase ija. Pa a el diazinon es más sensible el ni a o de pla a/azul
ARS PHARMACEUTICA 199
de b omo enol, mien as que pa a el dime oa o es el ni a o de
pla a amoniacal. En é minos gene ales ambos e elado es ac úan
análogamen e y la sensibilidad es mayo cuando se u iliza como
abso ben e el silicagel GF-254.
En la Tabla II se p esen an los alo es de R encon ados y
en ella se obse a que, pa a los seis pes icidas ensayados el mejo
sis ema de sepa ación ,es el cons i uido po la ase mó il, benceno/
ácido acé ico (90/10) empleando como ase ija silicagel GF.
El mé odo calo imé ico de Tu ne , empleando ni obencilpi i
dina como eac i o de colo ación pa a la de e minación de pes i
cidas os o ados lo hemos aplicado a la cuan i a i a en capa ina.
Se ha u ilizado pa a ello el mala ion y en la Tabla nI se obse a
que el desa ollo del colo es unción del iempo de incubación
(en ubo de ensayo) alcanzando un máximo a los 25', sea cual
quie a la can idad de pes icida ensayada. La eacción es cuan i
a i a. En la Tabla IV se p esen an los esul ados ob enidos con
jugando la sepa ación en capa ina con la de e minación colo i
mé ica. Como puede e se, cuando el pes icida se deposi a en el
adso ben e y se ex ae sin desa olla hay una pé dida del 9,6
po 100 en el p oceso de ex acción. Es a pé dida es mayo (20,4 %)
cuando se hace un desa ollo p e io debido a la di usión que en
la ase ija su e la mancha de pes icida.
RESUMEN
Se ensaya la Ic oma og a ía en capa ina como mé odo de iden i icación
y de e minación de esiduos de pes icidas. Se encuen a una mayo sensi·
bilidad cuando la ase ija es silicagel GF-254. Con la ase mó il, benceno/
ácido acé ico (90./10.) se consigue una buena sepa ación de los pes icidas
ensayados. La de e minación cuan i a i a del mala ion conjugando s·apa a·
ción en capa ina y mé odo colo imé i'co del Tu ne nos da un endimien o
del 70. po 10.0..
AGRADECIMIENTO
Es e abajo ha sido sub encionado po la Comisión As eso a de In es i·
gación Cien í ica y Técnica.
BIBL IOGRAFIA
l.-MONTEOLIVA, M. (1980.): A s Pha m., 21, 437-448.
2.-RANDERATH, K.: C oma og a ía de capa ina (1969). Ediciones U no. Bi lbao.
3.-TuRNER, G. R. (1974): Analys , 99, 431·434.