Los laboratorios de investigación genética de la Junta para la Ampliación de Estudios

Los laboratorios de investigación genética de la Junta para la Ampliación de Estudios LUIS ALFREDO BARATAS DÍAZ (*) JOAQUÍN FERNANDEZ PÉREZ ("1 El grado de desarrollo alcanzado por la Genética español; durante el primer tercio del siglo XX se debió fundamentalmente a la actividad de la Junta para la Ampliación de Estudios e Investigaciones Científicas, que pensionaba jóvenes investigadores españoles en los mejores laboratorios de investigación genética de la época; tal es el caso de José Fernández Nonídez (1892-1947), que en la Universidad de Columbia trabajó junto a Thomas H. Morgan (1866-1945) y Edmund B. Wilson (1856-1939). De la Junta dependieron, además, las dos instituciones más importantes en el desarrollo de la Genética en España de estos años: el Laboratorio de Biología y la Misión Biológica de Galicia. El Laboratorio de Biología del Museo Nacional de Ciencias Naturales de Madrid, dirigido por. Antonio de Zulueta y Escolano, acogió a todos los naturalistas que realizaron estudios sobre lo que podríamos llamar genética clásica: herencia ligada al sexo, citogenética, etc. De forma complementaria, en la Misión Biológica de Galicia, un grupo de ingenieros agrónomos se ocupó de la investigación en genética vegetal y animal aplicadas. Estos científicos, bien fuesen biólogos o ingenieros agrónomos, realizaron una importante labor didáctica, dando a conocer sus trabajos y los problemas, perspectivas e importancia de su disciplina, a la comunidad científica, utilizando diversas publicaciones como las de la Real Sociedad Española de Historia Natural (el Boletín, las Conferencias y Reseñas, etc.) y a un público no especializado, a través de revistas de divulgación, conferencias, artículos de prensa, etc. (*) Historia de la Biología. Facultad de Biología. Universidad Complutense. 28040 Madrid. , DYNAMIS Acta Hispanica ad Medicinae Scientiarumque Histo~iam Illustmndam. Vol. 9, 1989, pp. 225-235. ISSN: 021 1-9536 EL LABORATORIO DE BIOLOGÍA DEL MUSEO NACIONAL DE CIENCIAS NATURALES Antonio de Zulueta (1885-197 l), el único director del Laboratorio, fue, sin duda, el naturalista español más importante entre los que se ocuparon del conocimiento genético en este período, no sólo por su obra científica, también por su obra didáctica. Nacido en Barcelona el aiio 1885, se licenció en Ciencias por las Universidades de Madrid y París (l), doctorándose en la primera, en 19 1 1, con un estudio sobre los Copépodos parásitos de Celentéreos (2). Gracias a una beca de la Junta para la Ampliación de Estudios Zulueta se instaló en Berlín, donde estudió con Max Hartmman (18761961) (3) en el Laboratorio de Protozoos del Real Instituto de Enfermedades Nerviosas. Al poco tiempo tuvo Zulueta que interrumpir su estancia en Alemania al ser nombrado Conservador del Museo de Ciencias Naturales de Madrid (4). A su regreso a Madrid accedió a la dirección del Laboratorio de Biología, creado por el Museo y la Junta, y comenzó a impartir unos Cursos Practicas de Biología. En el Laboratorio de Biología continuó Zulueta las investigaciones sobre la división nuclear de los Protozoos, emprendidas en Berlín (5), entregando a la imprenta, entre 19 15 y 19 1 7, tres artículos, que aparecieron en la Serie Zoológica de los Trabajos del Museo Nacional de Ciencias Naturales. Con ellos llegó a deducir que la cariocinesis se da en los Protozoos por mitosis, de forma semejante a como se produce en el resto de las células eucariontes (6). (1) Una nota necrológica de Antonio de Zulueta en: ALVAREZ, J. (1 97 1). Don Antonio de Zulueta y Escolano (1885-1971). Bol. R. Soc. Española Hist. Nat. (Biol.), 9, 353-355. (2) Cfr. Archivo General de la Administración. Sección de Educación. Expediente personal de Antonio de Zulueta. (3) Max Hartmann (1876-1961) fue un estudioso de la sistemática y sexualidad de los Protozoos. Editor de la prestigiosa revista Archiu fur Protistenkunde, publicó diversos libros sobre sexualidad, genérica y filosofia natural. Véase un pequefio apunte biográfico de Hartmann en: CORLISS, J. 0. (1978). A salute to fifty four great microscopist of the past: A pictorical footnote to the history of Protozoology. Trans. Amer. Micros. Soc, 97 (4), 419-458. (4) C' JAE (1 9 12). Memona correspondzente a los años 191 0 y 191 1. Madrid, pp. 99100. (Las referencias a la Junta de Ampliación de Estudios e Investigaciones Científicas se harán utilizando la abreviatura JAE). (5) C' JAE (191 8). Memoria correspondzente a los años 191 6 y 191 7. Madrid, p. 161. (6) Los tres artículos sobre la división celular de los Protozoos realizados por Zulueta son: Los laboratorios de investigación geneiica de la Junta ... 227 A pesar de no conocerse con exactitud en qué momento y por qué razón se inició Zulueta en la investigación y conocimiento genético, creemos probable que dos factores influyesen sobre él: de un lado, el conocimiento citológico y citogenético inherente a sus investigaciones en Protozoos, y de otro lado, la creciente importancia que dentro de la Biología de principios de siglo alcanzó la Genética. Antonio de Zulueta comenzó en 19 18 sus estudios sobre la variación de color en los élitros de Phytodecta uariabillis, coleóptero crisomélido, común en los alrededores de Madrid, estudios que culminó en 1925 (7); pero la dificultad de cría de este insecto, agravada por el hecho de tener una sola generación anual de descendientes, obligó al investigador a realizar otros trabajos de forma simultánea (8). De esta manera, en 19 19 y 1920, mientras realizaba experimentos sobre la herencia mendeliana en gusanos de seda, ideó un mecanismo para el avivamiento extemporáneo de larvas, que permitía obtener hasta tres generaciones anuales (9); trabajo de gran interés económico para la industria sedera que se mantenía en algunas regiones españolas, y repitió en ratones y conejos los clásicos experimentos que Mendel realizó con Pisum satiuum (1 0). Como hemos indicado, en el año 1925 se publicó, en la revista Eos (1 l), ZULUETA, A. DE (1915). Sobre la reproducción de Dinenympha gracillis (Leidy). Trabajos del Museo Nacional de Ciencias Naturales, sene Zoológica, núm. 23. ZULUETA, A. DE (191 5). Sobre la estructura y bipartición de Nictotherus ovalis (Leidy). Trabajos del Museo Nacional de Ciencias Naturales, sene Zoológica, núm. 26. ZULUETA, A. DE (1917). Promitosis y sindíeresis. Dos modos de división nuclear en Amebas del grupo «Limax». Trabajos del Museo Nacional de Ciencias aural les, serie Zoológica, núm. 33. (7) Cb JAE (1920). Memoria correspondiente a los años 1918 y 1919. Madnd, p. 159. (8) Las dificultades para la cría de Phytodecta variabillis las presenta adecuadamente Fernando Galhn en: GALAN, F. (1987). Antonio de Zulueta y Escolano. Introductor de la Genética Experimental en España (1885-1971). Bol. R. Soc. Española Hist. Nat. (Actas), 83, 64-65. La simultaneidad de los trabajos empiendidos por Zulueta queda claro en distintos tomos de Memorias de la Junta: JAE (1 922). Memoria correspondiente a los años 1920 y 1921. Madrid, pp. 17 1-1 72. JAE (1 925). Memoria correspondiente a los años 1922-23 y 1923-24. Madrid, p. 215. (9) Cj: ZULUETA, A. DE (1921). Experiencias sobre el avivamiento extemporáneo de los huevos de la mariposa del gusano de seda. Mem. R. Soc. Española Hist. Nat., Tomo ext. 50 aniv., pp. 495-501. (10) C[ JAE (1920), op. cit., en nota 7, p. 159, y JAE. (1927). Memoria correspondiente a los años 1924-25 y 1925-26. Madnd, 1927, pp. 292-295. (1 1) Véase: ZULUETA, A. DE (1925). La herencia ligada al sexo en el Coleóptero Phytodecta vanabillis (01.). Eos, Revista Española de Entomología. Tomo 1, Cuaderno 2, pp. 203-231. su trabajo sobre Phytodecta variabillis, que' le exigió llevar la genealogía de cientos de individuos durante varios años y la realización de un riguroso análisis de &a. Este trabajo constituye una importante contribución al conocimiento genético, ya que en él se comprueba la transmisión de genes por parte del cromosoma Y, en un animal con determinación cromosómica del sexo típica XX-XY. Este trabajo refutó la opinión generalizada entre la comunidad científica sobre la no existencia de genes activos sobre el cromosoma Y. Durante 1926 atacó Antonio de Zulueta el estudio de la pecilandría (polimorfismo limitado al sexo masculino) en Trichogrbmma evanenscens, pequeño himenóptero parásito, probando que dicho polimorfismo no es de carácter genético. Con este estudio acudió Zulueta, en representación del Museo Nacional de Ciencias Naturales, al V Congreso Internacional de Genética, celebrado en Berlín (12). La última aportación del Director del Laboratorio de Biología se realizó en el Instituto Tecnológico de California en Pasadena, en el año 1930, donde Zulueta fue invitado por Thomas H. Morgan y becado por la Fundación del Amo. Zulueta acudió a los Estados Unidos para tomar contacto con los métodos de estudio genético con Drosophila, y pudo establecer una localización más precisa del gen ctlight)) ' de Drosophila melanogaster (1 3). Como ya se ha indicado, Zulueta realizó una importante labor didáctica. En el Laboratorio dirigió, desde 19 1 1 hasta 1936, los Cursos Prácticos de Biología, y en la Real Academia de Ciencias Físicas, Exactas y Naturales impartió clases de Genética desde la ((Cátedra Conde de Cartagena)) (14). (12) Véase la comunicación a dicho Congreso en: ZULUETA, A. DE (1927). Le polimorphisme des Males chez I'Himenoptere Trichogramma evanenscens. Verhandlhungen des V Internationalen Kongress für Vererbungswissenchaft. Zeitschnft für inductive Abstamungs und Vererbungslehre. Suplementband, 11, pp. 1606-161 1. (1 3) El gen ((ligho), que determina una coloración amarillenta y pálida en los ojos de Drosophila melanogaster, fue descubierto en 1924 y situado sobre el segundo cromosoma del diptero por Calvin B. Bridges (1889-1938). Cuando Zulueta llegó al Instituto Tecnológico de California diseñó, en estrecha colaboración con Bridges, un plan experimental para una más precisa localización del gen «ligho). Cf: ZULUETA, A. DE (1931). Nueva localizacián del gen light. Eos. Revista Española de Entomologia 7 (2), 249-253, y tarnbikn: JAE (1930). Memoria de los años 1928-29 y 1929-30. Madrid, pp. 238-239. (14) Los Cursos prácticos de Biología constaban de unas cuarenta sesio.nes de tres horas de duración, distribuidas de octubre a abril, y pretendían instruir a los alumnos en la realizació~n de disecciones y preparaciones biológicas. Entre los alumnos de estos cursos, Los laboratorios de investigación genética de la Junta ... 229 A pesar de no crearse una auténtica escuela de genéticos en el Laboratorio de Biología del Museo, diversos naturalistas realizaron, aunque de forma esporádica y ocasional, algunas investigaciones genéticas en el Laboratorio de Biología. Uno de ellos fue Manuel Bordás Celma, Doctor en Ciencias y Rector de las Escuelas Pías de Vilanova y la Geltní. Bordás fue el pionero de los estudios genéticos españoles, con un estudio sobre la garnetogénesis de Sagitta (un Quetognato planctónico), realizado en 19 1 1 en el Laboratorio de Carnoy en la Universidad de Lovaina; estudios que continuó, de forma irregular hasta 1922, en el Laboratorio de Biología. El conjunto de los trabajos de Bordás aportaron las primeras observaciones en favor de la modalidad parasindética (adosamiento longitudinal) de la conjugación de los cromosomas durante la primera división meiótica (15). Otro importante biólogo relacionado con el Laboratorio fue José Fernández Nonídez, zoólogo y citólogo, que realizó en 19 14 y 191 5 estudios sobre la espermatogénesis de Blaps lusitania, proporcionando «el más clásico y notable ejemplo de un cromosoma Y simple, homólogo de un cromosoma X complejo)) (1 6). Siendo catedrático de Zoología en la Universidad de Murque no solían sobrepasar lqveintena y eran normalmente estudiantes de Ciencias, Medicina o Magisterio, destacan Fernando Galán, Mario García Banús o Jimena de la Vega. La información m+ cabal respecto de los Cursos se puede obtener en el conjunto de las Memorias anuales de la Junta para la Ampliación de Estudios. Además de los cursos en el Museo, Zulueta se distinguió por'las traducciones del inglés que hizo de diversos libros «clásicos» de Biología. Una enumeración de las traducciones de textos científicos realizadas por Zulueta puede encontrarse en: GALÁN (1987), op. cit. en nota 8, p. 70. (15) Los trabajos científicos de carácter citogenético de Manuel Bordás son: BORDÁS, M. (1 9 12). Contnbuttion a l'étude dela spermatogenese dans Sagitta bipuntacta. La Cellule, 28, 165-214. BORDAS, M. (1914). Doctrinas actuales sobre la reducción numérica de la Sagilta bipuntacta. Mem. R. Soc. Española Hist. Nat., núm. 10, 5-125. BORDÁS, M. (1921). La profase de reducción en Dendrocoelum lacteum -0erst-. Trabajos del Museo Nacional de Ciencias Naturales. Serie Zoológica, núm. 14. BORDAS, M. (1922). El problema de la reducción cromática en la espermatogénesis de Dendrocoelum lacteum. Libro en honor de Santiago Ramdn y Cajal, Madnd. Tomo 11, pp. 37-78. (16) El ((complejo XD es el multivalente formado durante la metafase de la primera división meiótica, por el cromosoma X, el cromosoma Y y dos autosomas, que se asocian con el cromosoma X. La cita corresponde a: GALAN (1987), op. cit. en nota 8, p. 67. Los trabajos citogenéticos publicados por José Fernández Nonidez en España son: FERNÁNDEZ NONÍDEZ, J. (1914). Los cromosomas en la espermatogénesis de Blaps lusitanica. Trabajos del Museo Nacional de Ciencias Naturales. Serie Zoológica, n.O 18. FERNÁNDEZ NONÍDEZ, J. (1915). Estudios sobre las células sexuales: 1. Los cromosomas goniales y las mitosis de maduración en Blaps lusitanica y B. walti. Mem. R. Soc. Española Hist. Nat, 10, 149190. 230 LUIS ALFREDO BARATAS D~AZ y JOAQU~N FERNANDEZ PÉREZ cia recibió una pensión de la Junta para la Ampliación de Estudios para realizar investigaciones en cito:ogía en relación con la determinación del sexo. Gracias a esta beca se desplazó en 19 18 al Departamento de Zoología de la Universidad de Columbia, donde, asesorado por Edmund B. Wilson, realizó una revisión de sus trabajos madrileños (1 7). A partir de 191 9, Fernández Nonídez empezó a colaborar con Thomas H. Morgan, estudiando aspectos anatómicos e histológicos de los animales objeto de los estudios genéticos de Morgan (1 8). Desde ese momento dedicó su actividad científica a la Anatomía Microscópica y la Embriología (19). Pero su estancia en la Universidad de Columbia trajo importantes consecuencias para la Genética española, ya que Fernández Nonídez, en contacto con la escuela genética más importante de su tiempo adquirió grandes conocimientos en dicha materia. De esta forma, a su regreso a España, impartió, en el verano de 1920, un cursillo de conferencias en el Museo Nacional de Ciencias Naturales, del cual resultó la publicación, en 1922, de un libro: La herencia rnendeliana. Introducción al estudio de la Genética, primero de esta materia escrito en castellano, en el que el autor explica los principios básicos de la nueva ciencia (20). Posteriormente, en 1923, publicó: Variación y herencia en los animales domésticos y plantas cultivadas, breve obra de introducción y divulgación para un público no especializado (21). Tras su estancia en Madrid, Fernández Nonídez regresó a Estados Unidos en 1921, donde llegó a ser profesor de Anatomía en la Facultad de Medicina de la Universidad de Cornell. Su relación con la ciencia española se limitó, desde entonces, a su permanencia como socio de la Real Sociedad Es- (1 7) Fruto de esta revisión de sus trabajos madrileños fue el articulo: FERNANDEZ NONIDEZ, J. (1920). The meiotic phenomena in the spermatogenesis of Blaps, with special reference to X complex. Journal ofMorphology, 34, 69-1 18. Artículo, éste, que aparece citado en repetidas ocasiones en el clásico manual de Genética de Wilson: WILSON, Edmund B. (1925). The cell in development and heredity. 3rd. edition. New York. ne MacMUan Corripany. (18) C$ JAE (1920), op. cit. en nota 7, pp. 46-48, para una completa información de las actividades de Fernkndez Nonídez en la Universidad de Columbia. (19) Así lo indican: GA~N (1987), op. cit. en nota 8, pp. 54-55, y L~PEZ PIÑERO, J. M. et al. (1983). Diccionario histdrico critico de la ciencia moderna en España. Barcelona, Ed. Península, p. 335. (20) FERNANDEZ NON~DEZ, J. (1922). La herencia mendeliana. Introduccidn al estudio de la Genkticu. Madrid, Ed. Junta para la Ampliación de Estudios. . (2 1) FERNANDEZ NON~DEZ, J. (1 923). Variacibn y herencia en los animales dombticos y las plantas cultivadas. Madrid, Ed. Espasa-Calpe. 1 Los laboratorios de investigación genktica de la Junta ... pafiola de Historia Natural, hasta su muerte en 1947, y a la preparación de nuevas ediciones de sus textos de Genética (22). LA MISI~N BIOL~GICA DE GALICIA En la Misión Biológica de Galicia, creada en 1921 por la Junta para la Ampliación de Estudios, el que fue su primer director Cruz Gallástegui Unamuno, realizó una importante labor en los temas de mejora genética vegetal, sobre todo del maíz, al tiempo que participó en distintos proyectos de mejora animal, fundamentalmente de ganado vacuno y de cerda. Cruz Gallástegui (1 89 1-1 962) estudió en la Real Escuela de Agricultura de Hohenheim (Alemania), desde 19 10 a 19 14 (23), donde entró en contacto con el médico y fisiólogo gallego Juan López Suárez (24), el hombre que influyó de una forma más decisiva sobre la carrera del ingeniero vasco. L6pez Suárez, durante su estancia en Estados Unidos, en el año 1916, como pensionado de la Junta para la Ampliación de Estudios, había captado toda la importancia y trascendencia de la nueva genética, y fue él quien inclin6 a Gallástegui hacia estos estudios (25). Cuando a instancias de aquél, Gallástegui se desplazó a Estados Unidos, a finales de 19 17, el médico gallego (22) En el expediente personal de José Fernández Nonídez de la Sección de Educación del Archivo General de la Administración se pueden encontrar las sucesivas solicitudes de excedencia de éste como Catedrático de la Universidad de Murcia, hasta llegar a 1929, cuando, siendo profesor de Anatomía en la Universidad de Cornell, renunció a su Cátedra en España. En 1935, cuando su estancia en Estados Unidos era ya definitiva, Fernhdez Nonídez preparó una segunda edición, muy ampliada, de su primer libro: FERNANDEZ NONÍDEZ, J. (1 935). La herencia mendeliana. Introducción al estudio de la Genética. 2.a ed. Madrid, Junta para la Ampliación de Estudios. (23) Ct ODRIOZOLA, A. (1962). D. Cruz Gallástegui y Unamuno. Revista de Economía de Galicia, n.O 25-30, 5-7, y también: ODRIOZOLA, A. (1985). Cruz Gallástegui Unamuno, entre la Genética y la Agricultura. En Homenaje a Cruz Gallástegui Unamuno. Pontevedra, Ed. Exc. Dip. Pontevedra, pp. 66-99. (24) Juan López Suárez fue doctor en Medicina y pensionado por la Junta para la Ampliación de Estudios a lo largo de 19 16 en Estados Unidos, donde trabajó en Fisiopatología del Aparato Digestivo, pasando a formar parte, en 191 7 del plantel investigador del Rockefeller Insutute for Medical Research. Véase: JAE (1918), op. cit. en nota 5, pp. 36-37. (25) LÓPEZ SUAREZ, J. (1962). D. Cruz Gallástegui, modelo de hombre sabio, bueno y eficiente. Revista de Economía de Galicia, núm. 25-30, 101. le introdujo ante Thomas H. ~or~an,.;quien aconsejó a Gallástegui que visitase a Edward M. East (1879-i938) en la Universidad de Harvard (26). Gallástegui se incorporó rápidamente al grupo de East en Harvard, estudiando Genética y las técnicas de mejora aplicadas sobre el maíz. En ia primavera de 19 18 Gallástegui se trasladó a la Conneticut Agricultural Experimental Station, en la que un discípulo de East, Donald F. Jones (1890-1963), se disponía a valorar los primeros resultados obtenidos con dobles hídridos de maíz (27). Vemos, por tanto, que la estancia de Gallástegui junto a East y Jones coincidió con los logros más significativos de estos en la mejora del maíz (28). Regresó Gallástegui a España en 1921, tras haber adquirido una sólida formación no sólo en Genética, sino también en Biología Vegetal. Para entonces López Suárez había gestionado, por medio de la Sociedad Económica de Amigos del País de Santiago y ante la Junta para la Ampliación de Es- . tudios, la creación de una estación «con el objeto de realizar investigaciones y trabajos científicos relacionados con los problemas agrícolas e industriales que en la región gallega existen)) (29). Nació así, en marzo de 1921, la Misión Biológica de Galicia, de la que Cruz Gallástegui fue nombrado Director. La Misión se instaló, en su primera etapa, en los locales de la s.c cuela de Veterinaria en Santiago de Compostela; y en esta etapa santiaguesa (que ocupa de 1921 a 1927), Galléstegui se ocupó del «problema del castaño)) y (26) Edward East,realizó gran número de experimentos sobre líneas puras y sus cruces, desarrollando ampliamente la idea de George Shull de cruzar individuos de lineas puras para determinar un aumento de producción debido a la heterosis o vigor híbrido. C' MANGELSDORF, P. C. (1951). Hibnd Corn: Its genetic basis and its significance in human affairs. In: Genetics in the 20th Century. L.C. DUNN. (Ed.) New York, The MacMillan Co., pp. 555-572. Para la entrevista entre Galláctegui e East véase: LÓPEZ SU~REZ (1962), op. cit. en nota 25. (27) Dondd Forsha Jones, que había sido discípulo de East, y por tanto asistió a las múltiples experiencias de este con líneas puras de maíz, desarrolló en 191 7 los dobles hibndos de maíz, consistentes en un cruce de híbndos sencillos de líneas puras. Los dobles híbndos presentan una mayor producción y ésta se mantiene durante varias generaciones, cosa que no sucede con los híbndos sencillof. C' MANGESLDORF (1951), op. cit. en nota 26. (28) CJ LÓPEZ SUAREZ (1962), op. cit. en nota 25. Ver también: ODRIOZOLA (1985), op. cit. en nota 23, pp. 75-85 y JAE (1920), op. cit. en nota 7, pp. 49-50. (29) Véase: JAE (1922), op. cit., en nota 8, pp. 222 y SS. y LÓPEZ SUAREZ (1961). op. cit., en nota 25, pp. 101-102. Los laboratorios de investigación genética de la Junta ... 233 de la mejora del maíz. Los trabajos sobre el castaño (30) estaban encaminados a conseguir un híbrido interespecífico entre el castaño autóctono (Castanea crenata) y el castaño japonés (Castanea sativa), ya que el primero es sensible a la enfermedad conocida como «mal de la tinta)) (3 1) y la especie japonesa no. Gallástegui intentaba conseguir un híbrido que presentase la inmunidad de la especie japonesa y la riqueza maderera de la española. Estos trabajos se saldaron con un relativo fracaso, ya que, aunque no logró demostrar la inmunidad del híbrido ni su multiplicación vegetativa, al menos consiguió una técnica eficaz y original para la fecundación artif~ial del castaño (32). Más prolongados, ya que abarcan las dos etapas de la Misión (en Santiago, la primera, y Pontevedra), y más fructíferos fueron los trabajos sobre el maíz. El método de mejora seguido fue la obtención de líneas puras consanguíneas para producir híbridos sencillos y dobles, que presentaban un considerable aumento de vigor (este fenómeno se conoce con el nombre de heterosis) (33). En la Misión se consiguieron y conservaron hasta 230 líneas puras en 1933, en su práctica totalidad de variedades autóctonas; y los dobles híbridos obtenidos con estas líneas rindieron hasta 7.000 kilos de grano por hectárea frente a una producción anterior de 3.000 kilos (34). (30) Para hacerse una correcta idea de la actividad de la Misión respecto al «problema del castaño)) han de verse los capítulos correspondientes a la Misión Biológica de Galicia en cl conjunto de Memorias de la Junta para la Ampliación de Estudios entre los años 1922 y 1929. (31) El «mal de la tinta» es una infección por producida hongos oomicetales (Phytophora cambivora y Ph. cinnamoni) que durante las primeras décadas de este siglo afectó gravemente a los castaños europeos. C' VIETEIZ, E. (1985). La Influencia de Cruz Gallástegui Unamuno en la mejora del castaño. En: Homenaje a Cruz Gallástegui Unamuno. ~ontevedra, Ed. Exc. Dip. Pontevedra, pp. 11-42. - - (32) La práctica de la fecundación artificial exige la recolección y conservación del polen, ya que las especies autóctona y japonesa florecen en fechas distintas; y además es necesario la utilización de distintas soluciones para facilitar la fertilización entre las distintas especies. Gallástegui solucionó estos dos inconvenientes utilizando tubos de cristal, bien secos, cerrados y en oscuridad, para la consewación del polen y con soluciones acuosas de goma arábiga para fomentar la fertilización. GALLÁSTEGUI; C. (1 926). Técnicas ,de hibridación del castaño. Bol. R. SOC. Española Hist. Nat., 26, 88-95. (33) Vkase nota 26. (34) Los datos sobre el número de líneas puras obtenidas y la producción de híbndos sencillos y dobles pueden obtenerse en las Memorias de la Junta para la Ampliación de Estudios de 1922 a 1935; y kbién en la comunicación realizada al primer Congreso Internacional del Maíz, celebrado en Pau: GALLÁSTEGUI, C. (s.f.). Le Meis dans la region