Efectos del estrés psicologico en la respuesta linfocitaria a los mitógenos

Anuario de Psicologia 1994, no 61, 33-39 O 1994, Facultat de Psicologia Universitat de Barcelona Efectos del estrés psicologico en la respuesta linfocitaria a 10s mitogenos* F. Xavier Borras Universitat AutGnoma de Barcelona Se resumen 10s trabajos realizados hasta el presente en el ámbito de la psiconeuroinmunologia, dentro del grupo de investigación en psicologia de la salud de la Universitat Autbnoma de Barcelona, acerca de 10s efectos del estrés vital percibido y del estrés psicológico prequirúrgico en la respuesta prolifeativa de 10s linfocitos a la estimulación con mitógenos. Palabras clave: Estrés prequirúrgico, estrés vital percibido, psiconeuroinmunologia, respuesta linfocitaria a 10s mitógenos. We review the studies done atpresent in the field of psychoneuroimrnunology within the research group on health psychology at the Universitat Autbnoma de Barcelona concerning the effects of perceived life stress and presurgical psychological stress on the proliferative Iymphocyte response to mitogens stimulation. Key words Lymphocyte Response to Mitogens, Perceived Life Stress, Presurgical Stress, Psychoneuroimrnunology. Desde que Ader y Cohen (1975) mostraron la posibilidad de condicionar pavlovianamente una supresion de la respuesta de anticuerpos a la inoculacion de un antigeno, el campo interdisciplinari0 conocido como psiconeuroinmunologia ha experimentado un rapido avance, poniendo de manifiesto múltiples y complejas interacciones entre comportamiento, sistema neuroendocrino y sistema inmune (Ader, Felten y Cohen, 1991). En 10s primeros años de desarrollo de la psiconeuroinmunologia, la respuesta linfocitaria a 10s mitogenos fue una de las pruebas de evaluación de la función inmune mas empleadas por 10s investigadores del campo, particularmente dentro del estudio de 10s efectos del estrés en * Este trabajo ha sido realizado, en parte, gracias a las ayudas PB89-0312 de la DGICYT del Ministeri0 de Educación y Ciencia, y AR89 de la CIRIT de la Generalitat de Catalunya. Direccidn del autor: E Xavier Borris. Universitat Autonoma de Barcelona, Unitat de Psicologia Basica. Apartat postal 29. 08193 Bellaterra (Barcelona) Espaila. la inmunidad. En este procedimiento, 10s linfocitos, previamente separados de la sangre, son cultivados in vitro juntamente con unas sustancias denominadas mitógenos. Existen diferentes mitógenos, que estimulan de manera inespecifica diversas subpoblaciones de linfocitos: asi, la concanavalina A (Con A) y la fitohemaglutinina (PHA) estimulan predominantemente 10s linfocitos T (en mayor grado 10s T cooperadores en el caso de la PHA); por su parte, el mitógeno de fitolaca, mas conocido como pokeweed (PWM), estimula tanto 10s linfocitos T como 10s B, siendo estos últimos responsables de la producción de anticuerpos. Al estar en contacto con estas sustancias, 10s linfocitos se activan y se dividen mitóticamente, pudiéndose determinar de manera indirecta la proliferación de 10s linfocitos a través del grado en que incorporan un nucleótido marcado radioactivamente, previamente añadido al medio de cultivo. A juicio de algunos autores (Kiecolt-Glaser y Glaser, 1986), la respuesta de 10s linfocitos a la estimulación con mitógenos puede considerarse un rnodelo de la capacidad funcional del sistema inmune para hacer frente a 10s agentes infecciosos, como virus y bacterias. Desde el informe pionero de Bartrop, Lazarus, Luckhurst, Kiloh y Penny (1977) de una depresión de la respuesta de 10s linfocitos T a la estimulación con Con A y PHA en personas viudas recientes -posteriormente refrendado de forma prospectiva por Schleifer, Keller, Camerino, Thornton y Stein (1983) con 10s mitógenos Con A, PHA y PWM-, diversos trabajos en humanos han generalizado la observación de una respuesta a 10s mitógenos deprimida a otras situaciones de estrés de distinta intensidad y duración (véase Borras, 1992). Entre las situaciones estresantes que han sido estudiadas se encuentran: el paro laboral (Arnetz, Wasserman, Petrini y otros, 1987); el aislamiento social y la soledad (Kiecolt-Glaser, Ricker, Ricker, George y otros, 1984); la separación matrimonial o el divorcio (Kiecolt-Glaser, Fisher, Ogrocki, Stout, Speicher y Glaser, 1987); y 10s examenes académicos (Dorian, Garfinkel, Brown, Shore, Gladman y Keystone, 1982; Glaser, Kiecolt-Glaser, Stout, Tarr, Speicher y Holliday, 1985). El objetivo de este trabajo sera resumir brevemente 10s datos empiricos obtenidos hasta el presente dentro de la linea de investigación en psiconeuroinmunologia que se viene desarrollando, de manera modesta pero continuada, desde 1986, en la Universitat Autonoma de Barcelona, acerca de 10s efectos de 10s acontecimientos estresantes en la respuesta de proliferación linfocitaria a la estimulación con mitógenos. Efectos del estrés vital percibido en la respuesta linfocitaria a 10s mitógenos La mayor parte de las investigaciones psiconeuroinmunológicas en humanos sobre 10s efectos del estrés en la respuesta linfocitaria a 10s mitógenos determinan este parametro inmunológico en un grupo de sujetos que han vivido un acontecimiento estresante particular (por ejemplo, la pérdida del cónyuge) y 10 comparan con las determinaciones obtenidas en un grupo de control acoplado o, preferiblemente, en esos mismos sujetos, pero en otro momento temporalmen- Estres y respuesta Iinfocitaria 35 te distante del evento estresante (previo o posterior al mismo). Aunque este planteamiento es riguroso y objetivo, parece ignorar que el impacto psicologico percibido por 10s sujetos que experimentan un hecho vital común puede variar ampliamente, en funcion, principalmente, de su apreciacion y afrontamiento del mismo. En este sentido, un enfoque alternativo y complementario que, aunque de mayor debilidad metodologica (y quizás por el10 también menos frecuentemente empleado), podria resultar valioso, consiste en registrar y valorar subjetivarnente, de forma retrospectiva, 10s acontecimientos estresantes autoinformados por 10s sujetos, correlacionando estos datos, de manera meramente descriptiva, con las medidas inmunologicas. Utilizando esta estrategia, Linn, Linn y Klimas (1988a, b), por ejemplo, han obtenido una asociacion entre, por una parte, 10s acontecimientos y el estrés vital percibido reciente y, por otra, una menor reactividad linfocitaria a 10s mitogenos PHA y PWM. Los primeros trabajos llevados a cabo en la Universitat Autonoma de Barcelona (Borras, 1989; Borras, Casas, Roldán, Bayés y Cuchillo, 1988) en el campo de la psiconeuroinmunologia se dirigieron, de acuerdo con el planteamiento expuesto, a estudiar 10s efectos del nivel global de estrés vital percibido, valorado a partir de diversas áreas de acontecimientos estresantes (salud, economia, relaciones interpersonales y afectivas, trabajo/estudios), en la respuesta linfocitaria a 10s mitogenos. El primer0 de estos trabajos (Borras y otros, 1988) fue llevado a cabo con dieciocho estudiantes varones exentos de patologia. Las muestras de sangre necesarias para las pruebas inmunologicas se obtuvieron aprovechando, naturalmente con el consentimiento informado de 10s interesados, una pequeña parte (10 ml) de las extracciones de sangre que algunos estudiantes donan voluntariamente, de manera periodica y con fines altruistas, en la misma Universidad. Se obtuvieron algunas correlaciones negativas, moderadas (entre -0.47 y -0.53) pero estadisticamente significativas (p< .05), entre el grado de estrés percibido por 10s estudiantes durante las últimas semanas, globalmente y en algunas áreas concretas de acontecimientos vitales, y la respuesta a 10s dos mitogenos que se utilizaron (PHA y PWM). Este resultado, que sugiere una menor reactividad linfocitaria en 10s sujetos que informan de niveles subjetivos mas elevados de estrés vital, parece coherente con 10s resultados de 10s trabajos que examinan 10s sujetos expuestos a un hecho vital estresante particular. Una investigacion posterior (Borras, 1989) se dirigio a complementar las observaciones realizadas en el estudio previo, comparando para el10 la estimulabilidad linfocitaria en dos grupos de estudiantes -como en el caso anterior, donantes de sangreseleccionados por sus puntuaciones extremas (altas y bajas) de estrés vital percibido. En este caso, sin embargo, las diferencias en la reactividad linfocitaria a 10s mitogenos Con A, PHA y PWM de ambos grupos de sujetos no alcanzaron la significacion estadística. Efectos del estrés prequirúrgico en la respuesta linfocitaria a 10s mitogenos Con un planteamiento distinto, en una investigacion posterior (Borras, 1991, 1993) nos cuestionamos la existencia de cambios en la respuesta linfocitaria a 10s mitógenos de las personas que deben ser sometidas próximamente a una intervención quirúrgica, cambios que serian consecuencia del estres derivado de la anticipación de dicho acontecimiento vital (estrés prequirúrgico). Se trata de una situación de estrés psicológico calificable de aguda o discreta, en el sentido de no repetida crónicamente. El estres precluirúrgico permanece practicamente inidit0 como situación estresante dentro de la literatura psiconeuroinmunológica, aun cuando su estudio ofrece, a nuestro entender, diversos aspectos de interés, entre 10s cuales consideramos: a) la facilidad para llevar a cabo estudios prospectivos (al menos en aquellos casos en que la intervención puede ser fijada con anticipación); y b) la posibilidad de examinar empiricamente la traducción clínica de las relaciones psicoinmunológicas que hayan podido ponerse de manifiesto, a través de la recuperación postquirúrgica de 10s pacientes, enfrentados todos ellos a una agresión biológica similar. Con el fin de abordar estas cuestiones, se comparo la respuesta de proliferación de 10s iinfocitos a 10s mitógenos Con A, PHA y PWM en un grupo de doce pacientes adultos varones 1) veintiséis días antes de ser sometidos a una intervención de hernia inguinal electiva, y 2) la misma mañana en que tendría lugar la operación. Las entrevistas de evaluación psicológica efectuadas a 10s pacientes indicaban la presencia de niveles significativamente elevados de ansiedad y estrés (Borras, 1991). Por otra parte, 10s analisis hormonales llevados a cabo de forma paralela a las determinaciones inmunolCPgicas revelaban valores elevados de ACTH y PRL en la mañana de la herniorrafía, mostrando el impacto neuroendocrino de la situación de estres preoperatorio. Ya en relación al objetivo principal del trabajo, la comparación de 10s datos inmunológicos procedentes de las dos muestras de sangre extraídas en 10s momentos mencionados genero resultados de cierta complejidad de interpretación, dada la existencia de interacciones estadisticamente significativas (p< .025) entre a) 10s cambios existentes en la estimulabilidad linfocitaria entre 10s dos momentos que se evaluaban y b) 10s habitos tóxicos de consumo de tabaco y alcohol de 10s pacientes. Es decir: no se encontraron cambios sistematicos en la respuesta inmune celular de todos 10s sujetos; tampoc0 se trata de que 10s pacientes que informaban fumar o consumir bebidas alcohólicas habitualmente mostrasen una respuesta linfocitaria distinta de la de 10s pacientes no fumadores/n0 bebedores. Lo que sugerian nuestros datos era la existencia de patrones diferenciales en 10s sujetos con y sin estos habitos tóxicos respecto a 10s cambios presuntamente producidos por el estres preoperatorio en la respuesta a 10s mitógenos. Esto es: mientras que en 10s sujetos no fumadores/no bebedores habituales la respuesta linfocitaria era menor la mañana de la intervencidn quirúrgica que veintiséis días antes, en 10s sujetos fumadores/bebedores la reactividad de 10s linfocitos era mayor la mañana de la operación que en la muestra extraída hacía veintiséis días. La primera parte de estos resultados parece coherente con 10s datos procedentes de otros eventos vitales estresantes, que indican una depresión de la respuesta proliferativa de 10s linfocitos a 10s mitógenos. Sin embargo, la segunda parte parece inesperada, en cuanto que señala, no ya una influencia de 10s consumos de tabaco y alcohol en la respuesta linfocitaria a 10s mitógenos -hecho previamente conocido que, siguiendo la recomendación metodológica de Kiecolt-Glaser y Glaser (1988), nos indujo a tener en cuen- Estrés y respuesta linfocitaria 37 ta estas variables extrañas-, sino su posible influencia antagonista o ((amortiguadora)) de 10s efectos de una situación de estrés psicológico en la inmunidad celular. En una revisión de la investigación en animales acerca de la interacción entre etanol y estres, Pohorecky (1990) resume algunos datos que podrian estar relacionados con esta posibilidad. En todo caso, la modesta envergadura del presente estudio previene la extracción de conclusiones firmes en ausencia de otros trabajos que repliquen en nuestro contexto sociocultural (esto es, principalmente, en una población con unos habitos tóxicos concretos) 10s resultados aquí expuestos. Si parece posible, con todo, recomendar la necesidad de controlar o evaluar las variables consumo de tabaco y consumo de alcohol en la investigación psiconeuroinmunológica, algo que hasta ahora no se ha tenido habitualmente en cuenta en la literatura al respecto. Conclusiones En una revisión meta-analítica reciente de la literatura psiconeuroinmunológica en humanos, Herbert y Cohen (1993) concluyen la existencia de una relación entre el estrés y la respuesta proliferativa a 10s mitógenos, indicando una mayor incidencia de 10s eventos estresantes objetivos que de 10s autoinformes subjetivos de estrés. El primer caso incluiria, en relación con 10s estudios reseñados en este trabajo, el tener que someterse próximamente a una intervención quirúrgica, mientras que en el segundo caso se hallarian 10s estudios con autoinformes del impacto subjetivo de 10s acontecimientos vitales estresantes experimentados por 10s sujetos. A nuestro entender, 10s resultados obtenidos en ambos casos han dado so10 un soporte parcial a la existencia de una depresión de la reactividad linfocitaria en 10s sujetos sometidos a estrés psicológico. Recordemos, en este sentido, que únicamente uno de 10s dos trabajos que empleaban autoinformes de estrés obtenia algunas correlaciones estadísticamente significativas, y aun éstas so10 moderadamente explicativas. En segundo lugar, el estudio sobre el estrés prequirúrgic0 ponia de manifiesto un posible y complejo papel modulador de una variable extraña -10s habitos de consumo de tabaco y alcohol- en la relación entre estrés y estimulabilidad linfocitaria. No siendo posible, por tanto, extraer conclusiones firmes acerca de 10s efectos de las situaciones de estrés que se han analizado en la respuesta de 10s linfocitos a la estimulación con mitógenos, es posible que, contrariamente, nuestros resultados puedan ser mas provechosamente interpretados en el sentido de poner en cuestión la consistencia y solidez, y por tanto la idoneidad, de las pruebas de reactividad linfocitaria a 10s mitógenos que se han utilizado (Con A, PHA, PWM) como medidas de evaluación de la capacidad funcional del sistema inmune en la investigación psiconeuroinmunológica sobre 10s efectos del estrés en humanos. Maier y Laudenslager (1988), coautores de un influyente estudio experimental en animales habitualmente citado en la literatura en apoyo del papel de 10s factores psicológicos en la modulación de la función inmune (Laudenslager, 38 EX. Borras Ryan, Drugan, Hyson y Maier, 1983), han informado, en un editorial de la revista Brain, Behavior, and Immunity, haber llevado a cabo seis replicaciones exactas de su experimento original, no habiendo obtenido resultados fiables y, en un caso, incluso, resultados opuestos a 10s originales. Atribuyen ellos esta inconsistencia, justamente, al empleo de una variable dependiente deficiente, por 10 cua1 recomiendan ccprecaución al confiar en el uso de la proliferación linfocitaria in vitro estimulada con mitógenos en 10s estudios sobre el estrés)) (Maier y Laudenslager, 1988, p. 88). Es conocida la alta variabilidad de la respuesta a 10s mitógenos (Dorey y Zighelboim, 1980), motivo por el cua1 se suelen utilizar transformaciones logaritmicas de 10s datos para estabilizar la variancia. A este inconveniente deberia sumarse la posible existencia, segun hemos visto, de variables extrañas que podrian llegar a cuestionar la generalidad y la validez ecológica de 10s datos. Desde otros puntos de vista, se ha puesto en entredicho que la respuesta de 10s linfocitos a la estimulación mitogénica -una prueba de caracter in vitro, y que por tanto minimiza influencias neuroendocrinas que pueden resultar fundamentales en un organismo vivo completopueda reflejar la compleja multiplicidad de factores que determinan la capacidad funcional del sistema inmune, asi como su relevancia clínica (Cohen, 1987). Tampoco parecen aducibles en su favor la sencillez técnica o el bajo coste economico de la tecnologia y de 10s materiales necesarios. En conclusión, consideramos que, aunque la respuesta linfocitaria a 10s mitógenos ha sido una de las pruebas mas utilizadas por 10s investigadores, uno de 10s objetivos que la psiconeuroinmunologia deberá abordar de forma prioritaria en 10s próximos años consiste en buscar otras medidas, complementarias o alternativas, de evaluación de la funcióin inmune mas fiables y consistentes, con menor variabilidad y que reflejen con mayor validez tanto la complejidad del sistema inmune, como la relevancia para la salud de las alteraciones debidas a factores conductuales que en esas medidas puedan determinarse. El camino esta abier- to, y es posible que vias como, por ejemplo, la iniciada con la determinación de interleucinas o interferones (véase Borras, 1990) nos conduzcan a avances importantes. Finalmente, quisiéramos señalar que de manera muy modesta y provisional, y seguramente dando respuesta solamente a alguna de las demandas que proponiamos, por nuestra parte hemos empezado a examinar algunos indicadores hematológicos, como 10s recuentos de determinadas subpoblaciones de leucocitos, en particular 10s neutrófilos y 10s imonocitos (Borras, Bayés y Casas, 1993). Ader, R. & Cohen, N. (1975). Behaviorally conditioned immunosuppression. Psychosomatic Medicine, 37, 333-340. Ader, R., Felten, D.L. & Cohen, N. (Eds.) (1991). Psychoneuroimmunology (2a. ed.). San Diego: Academic. Arnetz, B.B., Wasserman, J., Petrini, B., Brenner, S.-O., Levi, L., Eneroth, P., Salovaara, H., Hjelm, R., Salovaara, L., Theorell, T. & Petterson, I.-L. (1987). Immune function in unemployed women. Psychosomatic Medicine, 49, 3-12. Bartrop, R.W., Lazarus, L., Luckhurst, E., Kiloh, L.G. & Penny, R. (1977). Depressed lymphocyte function after bereavement. The Lancet, i, 834-836. Estrés y respuesta linfocitaria 39 Borras, EX. (1989). Estres i sistema immunitari. Trabajo de investigacibn de pregrado no publicado, Universitat Autonoma de Barcelona. Borras, EX. (1990). Los parámetros inmunológicos como variable dependiente en el estudio de losprocesos de adaptación. En I1 Congreso del Colegio Oficial de Psicólogos. Comunicaciones. Area 5: Psicologia y Salud: Psicologia de la Salud (pp. 101-106). Valencia: Colegio Oficial de Psicologos. Borras, EX. (1991). Modulació psicol6gica de la funció immune. Tesis doctoral editada en microfotografias, Universitat Autonoma de Barcelona. Borras, EX. (1992). Factores psicologicos, sistema inmune y estrés. Revista de Psicología de la Salud, 4, 29-58. Borras, EX. (1993). Evaluacion de la influencia del estrés a través de pruebas inmunologicas. En M. Forns y M.T. Anguera (Eds.), Aportaciones recientes a la evaluacion psicologica (pp. 391-407). Barcelona: PPU. Borras, EX., Bayés, R. y Casas, J.M. (1993). Efectos del estrés prequir~irgico en algunas subpoblaciones de leucocitos. Medicina Clínica, 100 (9), 356. Borras, EX., Casas, J.M., Roldán, R.M., Bayés, R. y Cuchillo, C.M. (1988). Estrés y estimulabilidad linfocitaria. Psiquis, 9, 360-365. Cohen, J.J. (1987). Immunity and behavior. Journal of Allergy and Clinical Immunology, 79, 2-5. Dorey, E & Zighelboim, J. (1980). Immunologic variables in a healthy population. Clinical Immunology and Imrnunopathology, 16, 406-415. Dorian, B.J., Garfinkel, P.E., Brown, G.M., Shore, A., Gladman, D. & Keystone, E. (1982). Aberrations in lymphocyte subpopulations and functions during psychological stress. Clinical and Experimental Immunology, 50, 132-138. Glaser, R., Kiecolt-Glaser, J.K., Stout, J.C., Tarr, K.L., Speicher, C.E. & Hoiiiday, J. E. (1985). Stressrelated impairments in cellular immunity. Psychiatry Research, 16, 233-239. Herbert, T.B. & Cohen, S. (1993). Stress and immunity in humans: A meta-analytic review. Psychosomatic Medicine, 55, 364-379. Kiecolt-Glaser, J.K., Fisher, L.D., Ogrocki, P., Stout, J.C., Speicher, C.E. & Glaser, R. (1987). Marital quality, marital disruption, and immune function. Psychosomatic Medicine. 49, 13-34. ~iecolt-Glaser, J.K. & Glaser, R. (1986). Psychological influences on immunity. ~sychosomarics, 27,621-624. Kiecolt-Glaser, J. K. & Glaser, R. (1988). Methodolonical issues in behavioral immunoloav research with -- humans. Brain, Behavior, and ~mmunity, 2,67-78. Kiecolt-Glaser, J.K., Ricker, D., George, J., Messick, C., Speicher, C.E., Carner, W. & Glaser, R. (1984). Urinary cortisol levels, cellular immunocompetency, and loneliness in psychiatric inpatients. Psychosomatic Medicine, 46, 15-23. Laudenslager, M.L., Ryan, S.M., Drugan, R.C., Hyson, R.L. & Maier, S.F. (1983). Coping and immunosuppression: Inescapable but not escapable shock suppresses lymphocyte proliferation. Science, 221, 568-570. Linn, B.S., Linn, M.W. & Klimas, N. (1988a). Effects of psychophysical stress on surgical outcome. Psychosomatic Medicine, 50, 230-244. Linn, B.S., Linn, M.W. & Klimas, N. (1988b). Impact of preoperative stress on immune function and surgical outcomes in head and neck cancer patients. Psychosomatic Medicine, 50, 201. Maier, S. F. & Laudenslager, M. L. (1988). Inescapable shock, shock controlability, and mitogen stimulated lymphocyte proliferation. Brain, Behavior, and Imrnunity, 2, 87-91. Pohorecky, L.A. (1990). Interaction of ethanol and stress: Research with experimental animals An update. Alcohol and Alcoholism, 25, 263-276. Schleifer, S.J., Keller, S.E., Camerino, M., Thornton, J.C. & Stein, M. (1983). Suppression of lymphocyte stimulation following bereavement. Journal of the American Medica1 Association, 250, 374-377.