Biopsia de médula ósea en perro : técnica y utilidad diagnóstica

CLINICA VETERINARIA DE PEQUEÑOS ANIMALES Volumen 12 Núme o 2 Ab il/Junio 1992 A ículo o iginal M.C. Aceña E Lis e EM. Gascón Depa amen o de Pa ología Animal. Facul ad de Ve e ina ia de Za agoza. c. Miguel Se e , 177 50013 Za agoza Biopsia de médula ósea en pe o: écnica y u ilidad diagnós ica. 37 RESUMEN La biopsia de médula ósea demues a se una écnica impo an e en el diagnós ico de algunos p ocesos caninos. Se desc iben las indicaciones pa a la e aluación de una mues a de médula ósea en el pe o así como la écnica de allada pa a la ob ención de la misma. PALABRAS CLAVE: Médula ósea; biopsia; pe o. ABSTRACT Tbe bone ma ow biopsy is e ealed asa impo an ool in some canine diseases. Clinical indica ions o he assesmen o canine bone ma ow samples a e desc ibed A de azled echnique o ge he sample is also shown. KEY WORDS Bone ma ow; biopsj; dogo 107 M.C. Aceña E Lis e EM. Gascón INTRODUCCIÓN 38 La médula ósea (M.O.) se localiza en las ca ida- des de cie os huesos en el animal adul o (cue - pos e eb ales, cos illas, es e nón, huesos del c á- neo, pel is y epí isis p oximales del ému y hú- me o) y es el p incipal luga de hema opoyesis. En ella se p oducen los e i oci os, los g anuloci os, los monoci os y las plaque as, e incluso algunos lin oci os de i an de la M.O. aunque su p incipal luga de p oducción sea el sis ema lin á ico. La e aluación de un aspi ado o una biopsia de M.O. puede p opo ciona una aliosa in o mación diagnós ica y p onós ica, sob e odo en aquellos casos en los que las al e aciones obse adas en san- g e sugie an la exis encia de mi ans o no he na- opoyé ico. Sin emba go, el alo diagnós ico y p o- nós ico de una mues a medula depende de la adecuada oma de la mues a y manejo de la mis- ma y además es á limi ado po la habilidad, ex- pe iencia e incluso subje i idad del clínico que la in e p e e. La in e p e ación ci ológica de una mues a me- dula equie e expe iencia y sólo el examen epe- ido y u ina io de mues as pe mi i á su ap en- dizaje; sob e es e ema exis en buenas e isiones'": 9, IQ, 12, 15) Es e a ículo p e ende únicamen e p o- po ciona una alo ación gene al y g á ica pa a el e e ina io p ác ico sob e los mé odos de oma de mues as de M.O. y manejo de las mismas, p oce- dimien os áciles y ápidos de ealiza y además de bajo cos e económico. INDICACIONES DEL EXAMEN DE M.O. La e aluación de una mues a de M.O. es á es- pecialmen e indicada en aquellas si uaciones en las que exis e o se sospecha de UJ:;!. allo en el sis e- ma hema opoyé ico y en las que las modi icacio- nes en sang e no pe mi an un diagnós ico de ini- i o. Po ello, la oma de una mues a medula debe i p ecedida de un co ec o examen de san- g e pe i é ica y conside ando además que la he- ma ología debe alo a se conjun amen e con da- os clínicos, bioquímicos o adiológicos. La e alua- ción de la mues a medula e in e p e ación de los esul ados jun o a los da os que acabamos de ci- a nos debe lle a al diagnós ico y p onós ico de- ini i os. 108 Biopsia de médula ósea en pe o: écnica y u ilidad diagnós ica. Como indicaciones cabe ci a : - Anemia no egene a i a: el examen de una mues a de M.O. nos pe mi i á dis ingui las ane- mias de es e ipo que se deben a hipoplasia o apla- sia e i oide'>', de las que ienen o a causa (ane- mias po de iciencias mine ales o i amínicas, aso- ciadas a en e medades c ónicas, e c.). - Panci openia: el llega a de e mina su cau- sa equie e un examen de M.O., pues una dismi- nución de células sanguíneas ci culan es puede e- sul a de una disminución de su p oducción o de un aumen o de su des ucción. Pod emos ealiza un diagnós ico di e encial según se encuen e una M.O. hipocelula o hipe celula '!". - Leucopenia y omboci openia pe sis en es: asociadas o no a anemias, como ocu e en casos de nec osis medula ?'. En cualquie caso pode- mos aplica ambién el azonamien o an e io . - Polici emia, leucoci osis o omboci osis inex- plicables. - P oblemas en la madu ación de células he- má icas de ec ando en sang e células e i oides nu- cleadas con ausencia de polic omasia (no moblas- emia) o des iación neu o ílica a la izquie da sin que exis a in ección ( eacción leucoe i oblás ica), da os que pueden suge i , en e o as, una al e a- ción medula ", - Sospecha de umo hema opoyé ico po p e- sencia de células e i oides o mieloides con mo - ología a ípica en sang e pe i é ica' ", En es os ca- sos el examen medula es imp escindible. - Fieb e de o igen desconocido. Po ejemplo, es e sín oma jun o con ano exia y dep esión son los únicos signos clínicos que pueden apa ece en ases emp anas de leucemia g anulocí ica; po an- o, median e el examen de una mues a de M.O. pod emos emi i un diagnós ico p ecoz'O. - Hipe p o enemias con gammapa ía mono- clonal o policlonal: en el p ime caso las mues as medula es pueden se aliosas en el diagnós ico de p ocesos como el mieloma múl iple'!", la leish naniosis '", la e hlichiosis'P? y algunos casos de Iin o na ", En p ocesos con gammapa ía po- liclonal como algunas micosis sis émicas (his oplas- mosis) pueden obse a se los mic oo ganismos cau- san es de la en e medad en p epa aciones de M.O.(12). CLlNICA VETERINARIA DE PEQUEÑOS ANIMAlES Volumen 12 Núme o 2 Ab illJunio 1992 - Hipe calcemia inexplicable: En casos de lin- ama mul icén ico la implicación medula es más p obable en los animales que p esen an hipe cal- ce nia. En es os casos conc e os, además, es más ecuen e la ausencia de o os signos más ca ac e- ís icos como lin oadenopa ía o esplenomegalia y la mues a medula puede se el único medio de e ela la p esencia de un in il ado neoplásico Iin oide . - Lin oadenopa ías: la e aluación de una mues- a de M.O. pod á apo a más da os pa a el diag- nós ico dependiendo de la a ección lin á ica de que se a e. - Disminución del hie o se co: La médula ósea es, jun o con el hígado, bazo y el ejido mus- cula , uno de los luga es donde se almacenan las ese as de hie o o gánico. La de e minación de hie o en los ó ganos ci ados cons i uye la écnica más sensible en la de ección p ecoz de la de icien- cia de hie o'P", ya que el desa ollo de una ane- mia e opénica (po causas hemo ágicas, p oce- sos malabso i os, o simple ca encia de hie o en la die a) sólo se p oduce cuando los depósi os é- icos no hé nicos o gánicos es án ago ados, sien- do los clásicos signos clínicos de anemia mic ocí- ica e hipoc ómica una mani es ación a día de la e openia. Si la causa de la anemia es ne amen e in lama o ia, la hipo e iemia i á acompañada de un inc emen o de los depósi os de hie o medu- la es ", ácilmen e alo able po p ocedimien os especí icos de inción de los side osomas mac o- ágicos : 12). - Asimismo, el examen de una p epa ación de una mues a M.O. puede se de ayuda en el diag- nós ico de en e medades pa asi a ias como la leish- maniosis en la que pod emos encon a mac ó a- gas medula es pa asi ados ( o o 1). También, po ejemplo, exis en casos desc i os de pa asi osis po Babesia canis en los que en mues as de sang e pe- i é ica no se obse aban e i oci os pa asi ados y, sin emba go, en mues as medula es se comp o- bó la p esencia de un cie o núme o de células o- jas que con enían el pa ási o'V'. Po úl imo ci a , en es e sen ido y aunque no sea un mé odo de diagnós ico, que en p epa aciones de M.O. de pe- os que padecen ila iosis pueden obse a se mi- c o ila ias debido a la con aminación de la mues- a con sang e. Biopsia de médula ósea en pe o: écnica y u ilidad diagnós ica. 39 Fo o 1. Ex ensión de un aspi ado de M.O. eñ do con «panóp ico ápido. en la que se ap ecian a ios mac à agos pa asiiados po leisbmanias. TÉCNICAS PARA LA TOMA DE UNA MUESTRA DE M.O. Exis en dos écnicas básicas pa a la ob ención de una mues a medula : - Aspi ación. - Biopsia. La in o mación que p opo cionan es dis in a aunque complemen a ia. Con la aspi ación se a- lo a mejo la mo ología indi idual de las células, pe mi e iden i ica odos los ipos celula es y po an o ealiza el ecuen o di e encial y de e mina la elación mieloide/e i oide. La biopsia, sin em- ba go, nos da idea del modelo es uc u al de la M.O. (pues conse a la a qui ec u a medula ), de la celula idad global de la médula y es la écnica de elección cuando la mues a aspi ada es á muy hemodiluida o cuando la médula es hipocelula (sospecha de hipoplasia o aplasia) o ha sido eem- plazada po ejido ib oso o g aso; no obs an e el p ocesamien o de la mues a biopsiada es más complejo que el de la mues a aspi ada, como e- emos más adelan e. Enume a emos a con inuación el ma e ial ne- cesa io pa a ealiza ambas écnicas ( o o 2): - Desin ec an e cu áneo. - Anes ésico local. - Bis u í. - Agujas de biopsia/aspi ación. 109 M.C. Aceña E Lis e EM. Gascón 40 FOlO 2. ¡H" enal necesa io pa a ealiza una oma de mues a medula . - Je ingas desechables de 5-10 nl pa a la as- pi ación. - Po aobje os. - Fo mol al 10 %. - Opcionalmen e, an icoagulan e (EDTA o ci- a o sódico al 3,8 %) pa a e i a la cogulación de la mues a aspi ada y del que añadi emos una go a a la je inga de aspi ación. No ol ida que la ma- yo p esencia de ma e ia o gánica en el aspi ado acele a la coagulación del mismo. Como puede e se se a a de ma e ial de uso u ina io en clínica. El único ma e ial especí ico son las agujas ( o o 3). Las más u ilizadas son de los ipos ]amshidi, ]amshidi-Illinois o Rosen hal, desechables o no. En p incipio odas pueden u i- liza se an o pa a biopsia como pa a aspi ación de- pendiendo de su diáme o. Los diáme os de las agujas de aspi ación son mayo es que los de las agujas de biopsia (15-18 g Y 11-13g espec i a- men e) y gene almen e las agujas de biopsia son más la gas que las de aspi ación. La en aja de la aguja]amshidi es que además de pode se u iliza pa a biopsia y pa a aspi ación, su o ma de T aci- li a los mo imien os de o ación pa a su in oduc- ción en la ca idad medula . Po o a pa e, el uso de opes en algunas agujas, como la ]amshidi- Illinois, median e la o ación de una gua da de plás ico, es in e esan e pa a con ola la p o un- didad de- la biopsia. 110 Biopsia de médula ósea en pe o: écnica y u ilidad diagnós ica. Fo o 3. Agujas de biopsia medula (las dos desecha- bles son agujas de jamshi- di; la de ace o co espon- de a una aguja de Rosen - hal). Luga es pa a la oma de mues as En p incipio puede se cualquie a que con en- ga M.O. ac i a, pe o los luga es más ecuen emen- e u ilizados po ene mayo ac i idad he na o- poyé ica y se más accesibles son: - C es a ilíaca y epí isis p oximales del ému y húme o pa a aspi ación, aunque ambién pe - mi en la biopsia. - Ala del ilion pa a biopsia, aunque lógica- men e ambién se pod á ealiza aspi ación en es a localización. - O os: cos illa y es e nón, aunque no son los más idóneos pues en es os luga es p ác icamen e sólo se puede ealiza aspi ación y la can idad de aspi ado que se ob iene es insigni ican e. En gene al, el luga de elección iene de e mi- nado po la alla y con o mación del animal y ló- gicamen e po el dominio de la écnica que posea cada clínico sob e uno de es os luga es. La c es a ilíaca es el luga más u ilizado, sob e odo en pe- os de alla media-g ande '<'. Técnica - Coloca al animal en decúbi o la e al cuan- do se elija la epí isis p oximal del húme o o del ému y el ala del ilion como luga de oma de M.C. Aceña E Lis e EM. Gascón mues a. Si se a a ealiza en la c es a ilíaca el ani- 42 mal puede coloca se en decúbi o la e al o en al. - P epa a qui ú gicamen e la zona median e depilación y desin ección de un á ea de ap oxima- damen e 6 cm". - In il a el ejido subcu áneo, músculos ad- yacen es y pe ios io de luga donde se a a inse - a la aguja con anes ésico local ( o o 4). No mal- men e no es necesa io seda al animal. - Realiza una pequeña incisión en la piel de amaño su icien e (1-2 mm) pa a pe mi i la pe- ne ación de la aguja (la su u a pos e io no se á necesa ia) ( o o 5). - Inse ción de la aguja: - En la epí isis p oximal de húme o: Es abiliza el húme o suje ando el codo y le- xionando el b azo has a palpa un á ea aplanada en e el ubé culo mayo y la cabeza del húme o. Inse a la aguja has a hace con ac o con el hue- so y ealiza mo imien os de o ación a de echa e izquie da di igiendo la aguja hacia el codo y man eniéndola siemp e pa alela a la caña del hú- me o. La aguja se in oduce de 2 a 4 cm según la alla del animal. Pa a asegu a su co ec a coloca- ción hay que lexiona y ex ende la a iculación escapulo-hume al y la aguja debe segui los mo- imien os del húme o ( o o 6). -En la epí isis p oximal del ému : El abo daje puede se do sal o la e al. Pa a el abo daje do sal, es abiliza el ému su- je ando la odilla. Inse a la aguja a a és de la piel y ascia en la osa ocan e ea y ealiza a con- inuación mo imien os de o ación a de echa e iz- quie da di igiendo la aguja pa alela a la diá isis emo al en di ección a la odilla. La aguja es á bien colocada si se mue e en el mismo plano que el é- mu ( o o 7). Pa a el acceso la e al, ija el ému p esionan- do el ocán e mayo en la a iculación coxo emo- al. In oduci la aguja la e almen e a la caña del ému , ap oximadamen e en el á ea co espondien- e al e ce ocán e . Realiza mo imien os de o- ación a de echa e izquie da haciendo a anza la aguja en la ca idad medula . - En la c es a ilíaca: Fija el ala del ilion suje ando sus é ices do - sal y en al. Palpa la po ción más ancha y do sal de la c es a ilíaca e in oduci la aguja en di ec- ción pe pendicula a la misma, median e mo i- 112 Biopsia de médula ósea en pe o: écnica y u ilidad diagnós ica. Fo o 4. In il ación anes êsi- ca del á ea a biopJia . Fo o 5. An eJ de in oduci la aguja de biopsia, se ealiza un peqeño o i icio con la pun a del bis u i. Fo o 6. Aguja de ROJen hal in oducida en la epíjiJiJ p oximal del húme o. CLINICA VETERINARIA DE PEQUEÑOS ANIMALES Volumen 12 Núme o 2 Ab il/Junio 1992 mien as de o ación a de echa e izquie da. Algu- nos au o es ecomiendan la in oducción de la agu- ja en di ección pa alela al eje longi udinal del ala del ilion(2) ( o o 8). . - En el ala del ilion: Con el animal colocado en decúbi o la e al in- se a la aguja pe pendicula men e a la ca a la e- al del ilion a a és del músculo glú eo medio, ealizando mo imien os de o ación a de echa e izquie da. - Una ez colocada la aguja en la ca idad me- dula p ocede emos a ealiza la aspi ación, la biop- sia o ambas: Aspi ación Re i a el iado o es ile e de la aguja, coloca la je inga de succión y ealiza la aspi ación con la misma ( o o 9). Cuando apa ezca mues a en la je inga debe elimina se la p esión nega i a pues sucesi as aspi aciones pueden p o oca hemo- dilución de la mues a po o u a de capila es me- dula es. La mues a suele apa ece len amen e en la je inga, si lo hace ápidamen e es p obable que es é hemodiluida. Es su icien e ob ene 1-1,5 cc de aspi ado. Si la aguja es á bien colocada en la ca i- dad medula , el animal suele mos a un dolo e i- den e al ealiza la aspi ación. En caso de no ob ene mues a al ealiza el a- cío con la je inga en epe idas ocasiones, lo más aconsejable es ol e a coloca el iado , e i a la aguja e in oduci la de nue o, asegu ándose del co ec o uncionamien o y no obs ucción de la aguja. Coloca simplemen e el iado e in oduci el conjun o más p o undamen e, es deci sin an- es ex ae la aguja, no da siemp e buen esul a- do. Biopsia Una ez in oducida la aguja, se e i a el iado y con los mismos mo imien os de o ación se pe- ne a o os dos cen íme os ap oximadamen e y i- nalmen e se ealizan mo imien os de o ación en una sola di ección sob e el eje longi udinal de la aguja an es de e i a la de la ca idad medula que- dando en su in e io un cilind o de ejido medu- la . Biopsia de médula ósea en pe o: écnica y u ilidad diagnós ica. 43 Fo o 7. Aguja de ]amshidi colocada en epí isis p oximal de ému median e abo - daje do sal. Fo o 8. Aguja de Rosen ba! inse ada en c es a ilíaca pa alela al eje longill/dinal del ala del ilión. Fo o 9. Aspi ación de con e- nido medula en c es a ilía- ca as el abo daje pe pendi- cula con aguja de Rosen - hal. 113 M.C. Aceña F Lis e FM. Gascón 44 Fo o 10. Realización del o is a pa i del aspi ado medula . PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS - De la mues a ob enida po aspi ación se oma una go a, se deposi a sob e un po aobje os y se ealiza un o is del mismo modo que en el caso de ex ensiones de sang e pe i é ica ( o o 10). Si no se u iliza an icoagulan e en la je inga los o- is se deben ealiza ápidamen e, unos segundos son su icien es pa a que se coagule la mues a. Además, puede hace se colocando una go a en el cen o del po aobje os y supe poniendo o o p e- sionando y sepa ándolo después e icalmen e; es e p ocedimien o es aconsejable an e sospecha de neoplasia pues p o oca menos o u as en las á- giles células umo ales. Si se ob ienen agmen os de ejido medula en el aspi ado, puede ealiza se el aplas amien o de los mismos supe poniendo o o po aobje os so- b e el p ime o, sepa ándolo luego con cuidado. En caso de mues as hemodiluidas o con ag- men os o espículas isibles de ejido medula , pa a sepa a los o elimina el exceso de sang e se coloca el po aobje os, con la go a de aspi ado en uno de sus é ices, en posición e ical pa a que es- bale la sang e sob an e o queden las espículas me- dula es en la pa e supe io del po aobje os. - Cuando la mues a ha sido ob enida po biopsia, el cilind o de ejido medula se ex ae del in e io de la aguja con la ayuda del iado con 114 Biopsia de médula ósea en pe o: écnica y u ilidad diagnós ica. Fo o 11. Tinciàn de Pea ls:depósi os de hie . ocomo hemoside ina eñidos de aznl en el in e io de un mac á ago medula . mucho cuidado y se conse a en o mol al 10 % pa a se p ocesado po écnica his ológica; es de- ci , debe emos emi i lo a un labo a o io his opa- ológico. También se pueden ealiza imp on as del eji- do biopsiado sob e un po aobje os. Mé odos de inción Las p epa aciones de mues as aspi adas, una ez secas, se iñen con las mismas écnicas que las em- pleadas pa a o is sanguíneos. Pueden u iliza se, po an o, inción de Giemsa, May-G umwald- Giemsa o incluso un mé odo Panóp ico ápido, de lo que se deduce que puede ealiza se en cualquie pequeño labo a o io. Las mues as de biopsia medula , p e io a a- mien o his ológico (inclusión en pa a ina, co es con mic o omo, e c) se iñen no malmen e con la écnica de la he na oxilina-eosina. Pa a el es udio de los depósi os de hie o en am- bos ipos de mues as se equie e una i ición es- pecí ica como la de Pea ls o Azul de P usia muy sencilla de ealiza '! 2) ( o o 11). Asimismo, pa a iden i ica los ipos celula es im- plicados en casos de leucemia se emplean écnicas ci o químicas o inmunohis oquímicas que lógica- men e se ealizan en labo a o ios especializados. M.C. Aceña E Lis e EM. Gascón Biopsia de médula ósea en pe o: écnica y u ilidad diagnós ica. 46 BIBLIOGRAFÍA 1. Aceña, M.C. Es udio de la médula ósea. En: Gómez e al, Manual P ác ico de Análisis Clínicos en Ve e ina ia. Ed. Mi a Edi o es, 77- 95, 1992. 2. Dunn, J. Bone ma ow aspi a ion and biopsy in dogs and ca s. In P ac ice. 12: 200-206, 1990. 3. E ans,RJ., Go man, N.T. Myelop oli e a i e disease in he dog and ca : de ini ion, ae iology and elassi ica ion. Vé . Rec. 121:437-443, 1987. 4. Feldman, BE, Kaneko, JJ., Fa e , T.B. Anemia o in lama o y di- sease in he dog: clinical cha ac e iza ion. Am.]. Vé .Res. 42: 1109- 1113, 1981. 5. Gilmou , M., Lappin, M.R., Thsall, M.A. In es iga ing p ima y ac- qui ed pu e ed cell aplasia in dogs. Vé . Med. 86: 1119-1204,1991. 6. Go man, N.T, E ans,RJ. Myelop oli e a i e disease in he dog and ca : clinical p csen a ions, diagnosis and ea nen . Vé . Rec. 121: 490-496, 1987. 7. G indem, C.B. Bone ma ow biopsy and e alua ion. Vé . Clin. N. Am. N. 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