Observation de l'activité enzymatique induite dans le traitement génétique des tumeurs malignes par suicide: études in vitro avec le gène thymidine kinase du virus Herpes simplex dans les cellules hépatoires

Christine Germann

Dr.sc.hum. Résumé de l'activité enzymatique induite dans la thérapie génique des tumeurs malignes avec des suicides: études in vitro avec le virus Herpes-Simplex Thymidinkinase géné dans les cellules hépatomères né le 13.01.1969 à Erbach test de maturité le 15.06.1988 à Michelstadt cours de la faculté de pharmacie du WS 1988 au WS 1993 1. Examens d'État du 22 mars 1991 à l'Université des Philippines de Marburg 2. Examen d'État le 30 mars 1993 à l'Université Philipps-Marburg Approbation le 07 septembre 1994 Titre de doctorat: Centre allemand de recherche sur le cancer (DKFZ)

Dr.med. Uwe Haberkorn

Das

Herpes-Simplex-Virus

Thymidinkinase-Gen ist in Kombination mit dem

Virusstatikum

Gancyclovir ein vielversprechendes

Le système suicidaire qui se développe actuellement, en particulier chez les tumeurs cérébrales

präklinischen

Gentherapiestudien erprobt wird. Ein

limitierender Parameter ist die

Une insuffisance de l'efficacité infectieuse lors de la transmission du suicide sur les tumeurs à traiter

Il est donc nécessaire qu'il y ait plusieurs infections pour obtenir une quantité suffisante de cellules.

Thymidinkinase- aktivität

zu erreichen. Mit der

Positronen-Emissions-Tomographie steht eine nicht

invasive,

Une méthode nucléaire médicale permettant de déterminer l'activité de l'enzyme induite dans le

Les tissus tumoraux peuvent être détectés.

Expériences in vitro avec des substrats

du virus Herpes-Simplex

Thymidinkinase und mit entsprechenden

Stoffwechseltracern auf ihre

La possibilité d'être utilisé comme radiotraceur est une condition fondamentale et le contenu de la

Le travail actuel. Le gène thymidinkinase du virus Herpes-Simplex (HSVtk) a été introduit dans les cellules de l'hépatome Morris des rats et l'expression du HSVtk a été vérifiée en déterminant la sensibilité au gancyclovir. L'enrichissement du nucléosidanalogon Gancyclovir et du substrat de difluorooxycytidine a augmenté avec l'augmentation de la concentration de Gancyclovir, la durée d'incubation et l'augmentation de la proportion de cellules exprimant HSVtk. La corrélation élevée entre l' enrichissement en gancyclovirine et la difluoréoxycytidine et l' inhibition de croissance permet de tirer des conclusions sur l' efficacité de la thérapie envisagée. Des expériences de transport montrent que le gancyclovir et la difluorodeoxycytidine sont majoritairement introduits dans les cellules par l'intermédiaire des protéines de transport des nucléosides. Comparé à l' uptaque de gancyclovir, l' enrichissement en difluorooxycytidine était 3 à 4 fois plus élevé dans les cellules exprimant HSVtk et 5 fois plus élevé dans les cellules contrôlées. Une raison possible est que, en raison de sa structure moléculaire, la difluorooxycytidine peut également être un substrat de la thymidine kinase humaine.

En raison de son faible enrichissement en

Les cellules d'expression HSVtk ont

également été examinées.

Nukleosidanalogon

Fluordeoxycytidin als ungeeignetes

Le substrat HSVtk. Les résultats fournissent la base pour l'utilisation du gancyclovir et de la difluorooxycytidine comme indicateurs de l'activité induite de HSVtk avec le PET. Dans la deuxième partie du travail, des expériences ont été menées pour absorber différents traceurs métaboliques après la thérapie avec du gancyclovir. Dans les cellules exprimant le HSVtk, une augmentation de la fluorodeoxyglucose et de l'enrichissement en 3-O-méthylglucose s'est produite jusqu'à 195%, malgré une diminution du nombre cellulaire. Cela peut être interprété comme une réaction au stress des cellules tumorales. Le mécanisme sous-jacent est la redistribution des protéines de transport des réserves intracellulaires à la membrane cellulaire.

Des expériences avec des mélanges à partir de cellules de contrôle et

HSVtk-exprimierenden Zellen zeigen

une dépendance de ces effets par rapport au nombre

La diminution de l'enrichissement

des cellules synthétiques

L'acide

aminé, l'acide aminé et

la diminution de l'enrichissement en méthhionine

Aminosäuretransportes und der Protein-

La diminution

de l'enrichissement en thymidine indique une

amélioration de l'efficacité de la thymidine.

Une baisse de la synthèse de l'ADN. En raison de son affinité avec la thymidine kinase cellulaire, la difluoreoxycytidine ne peut pas être utilisée comme traceur métabolique. Les données in vitro obtenues démontrent qu'il est possible d'évaluer à un stade précoce une thérapie estimée avec du gancyclovir grâce à la tomographie d'émission de positron et aux traceurs métaboliques utilisés.