Interactions du facteur de croissance analogue à l'insuline I et Ia,25 (OH) 2D3 concernant la prolifération et l'expression des recettes des cellules cartilaginaires épiphysiques en rats in vitro

Lutz Thorsten Weber

Le docteur Med. Interactions du facteur de croissance analogue à l' insuline I et 1 ,25(OH) concernant la prolifération et l' expression des recettes des cellules cartilaginaires épiphysiques des rats nés in vitro le 27 mars. 02. 1969 in Duisburg Reifeprüfung am 16. 06.1988 à Duisburg cours de médecine de la SS 1990 à WS 1996/97 physique le 30. 03.1992 à l'Université de Freiburg Études cliniques à Freiburg et Heidelberg 11 1996 à l'Université de Heidelberg Titre de doctorat: médecine pédiatrique Otto Mehls Les enfants atteints d'insuffisance rénale chronique présentent souvent un trouble de croissance lié à des troubles de l'homéostase des somatotrophes et des hormones calciotrophes. Le cartilage de croissance est un organe cible de l'IGF-I et de l'OH25 et exprime les récepteurs respectifs. Étant donné que les deux systèmes hormonaux sont perturbés simultanément, la présente étude devrait clarifier l'étendue de l'interaction entre .25(OH) et l'IGF-I dans la cellule de croissance du cartilage. Il convient de clarifier en détail dans quelle mesure 1 ,25(OH) influence l'expression des recettes de l'IGF-I et la prolifération cellulaire dépendante de l'IGF-I,

Modulé l'expression de la prescription et la prolifération cellulaire dépendante de la vitamine D. Les chondrocytes de cartilage de croissance obtenus ex vivo de la tibiametaphyse proximale de rats Sprague-Dawley pesant 60 g ont été examinés, après culture dans un médium avec sérum de veau fœtal (FCS,10%) dans des conditions sans sérum, dans des cultures monocouches et dans des cultures de suspension stabilisées par l'agarose. L' expression du récepteur de vitamine D et du récepteur de type I de l' IGF a été étudiée à l'aide d' études de liaison (analyses de Scatchard) à l'aide de -1,25(OH) et de l' anticorps iodé alpha-IR3 du récepteur de type I de l' IGF. La synthèse de l'ADN des cellules a été quantifiée par l'incorporation de la thymidine, la prolifération cellulaire par des courbes de croissance (cultures monocouches) et des colonies (cultures de suspension stabilisées par l'agarose).

IGF-I a augmenté la teneur en

thymidine avec une efficacité maximale en fonction de la dose

bei 60 ng/ml. Der Effekt von 1

,25(OH)

auf die Zellproliferation gestaltete sich

biphasisch. Niedrige Konzentrationen (10

-12

M) ont stimulé la prolifération, alors que des taux élevés de

Konzentrationen (10

M) keinen derartigen Effekt zeigten. Das Stereoisomer 1

,25(OH)

En tant que contrôle de spécificité, il n'a eu aucune incidence sur les

-Thymidininkorporation. L'effet de l'IGF-I sur la synthèse de l'ADN a été additif à l'effet de 1,25(OH) (IGFI (60 ng/ml) 196 4%; 1 ,25(OH) (10 -12 M) 180 7 %; IGF-I + 1 ,25(OH) %; gegenüber Kontrolle, p<0,05 ANOVA). L'effet additif a été spécifiquement évité par l'anticorps IGF-I (AB-1) polykonal. Les expériences de culture monocouche ont été confirmées par des expériences avec des cultures de suspension stabilisées par l'agarose.

L'IGF-I (60 ng/ml) a considérablement augmenté l'expression du récepteur de type I.

Il a également été inhibé par coincubation avec l'anticorps IGF-I. La coincubation avec 1 ,25 ((OH) (10 -12 M) a entraîné une augmentation significative de l'expression de la prescription. 1 ,25(OH) (10 -12 M) a provoqué une régulation homologue élevée de l'expression de la prescription de la vitamine D. La coincubation d'IGF-I (60 ng/ml) et d'1,25(OH) (10-12 M) a augmenté l'expression de la prescription de la vitamine D à trois fois la valeur de base.

Cette augmentation n'a pas pu être observée lors de la coincubation avec IGF-II (60 ng/ml) et 1

,25(OH)

(10

-12

L'indice de prolifération de l'IGF-II est le même que celui de l'IGF-I, mais le taux de prolifération de l'IGF-II est le même que celui de l'IGF-I, et le taux de prolifération de l'IGF-II est le même que celui de l'IGF-I.

stimulierte. Aktinomycin D führte zu einer Hemmung des IGF-I Effektes. Cela indique un mécanisme de transcription, c'est-à-dire que l'IGF-I a entraîné une reconstitution des récepteurs plutôt qu'une réactivation des récepteurs restants. D'après les résultats obtenus, l'IGF-I et 1 ,25(OH) augmentent à la fois l'expression du récepteur homologue et l'expression du récepteur hétérologue. Ces résultats peuvent expliquer, au niveau moléculaire, les effets additifs de l'IGF-I et de l'1,25*OH sur la prolifération cellulaire.

Si les résultats obtenus sont in

vivo

les enfants atteints d'une maladie chronique

L'insuffisance rénale est une correction des deux systèmes hormonaux souhaitable pour obtenir une efficacité optimale.

Il convient de prendre en compte le fait que, si les miroirs sont trop élevés pour 1,25 *OH, ils peuvent entraîner l'inhibition des interactions, comme nous l'avons montré dans notre système expérimental.