АНАЛИТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА СЛЮНЫ: СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ
Abstract
Слюна, как биологическая жидкость, содержит разнообразные компоненты, включая белки, ферменты, гормоны, электролиты и метаболиты. Ее анализ представляет большой интерес для диагностики различных заболеваний, мониторинга состояния организма и оценки воздействия факторов окружающей среды. В данной статье рассмотрены современные аналитические методы, применяемые для исследования слюны, с акцентом на два конкретных метода: масс-спектрометрию и метод иммуноферментного анализа (ИФА).
Full text
ISSN: 2582-4686 SJIF 2021-3.261,SJIF 20222.889, 2024-6.875 ResearchBib IF: 9.948 / 2024 VOLUME-5, ISSUE-11 364 АНАЛИТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА СЛЮНЫ: СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ Сараева Дилшода Абдуганиевна, Исроилова Чарос Эркин кизи Студентки 2 курса факультета управления и менежмента, Раимкулова Чарос Ахматовна Доцент кафедры медицинской химии Аннотатция. Слюна, как биологическая жидкость, содержит разнообразные компоненты, включая белки, ферменты, гормоны, электролиты и метаболиты. Ее анализ представляет большой интерес для диагностики различных заболеваний, мониторинга состояния организма и оценки воздействия факторов окружающей среды. В данной статье рассмотрены современные аналитические методы, применяемые для исследования слюны, с акцентом на два конкретных метода: масс-спектрометрию и метод иммуноферментного анализа (ИФА). Ключевые слова: слюна, анализ, масс-спектрометрия, иммуноферментный анализ, диагностика, биомаркеры. Цель работы. Целью данной работы является обзор современных аналитических методов, используемых для анализа слюны, и демонстрация возможностей масс-спектрометрии и ИФА для выявления и количественного определения биомаркеров в слюне. Научная часть. Анализ слюны имеет ряд преимуществ по сравнению с другими биологическими жидкостями, такими как кровь. Он является неинвазивным, легкодоступным и может быть использован для многократных исследований. Слюна содержит множество биомаркеров, которые могут отражать состояние различных систем организма. Масс-спектрометрия. Масс-спектрометрия (МС) является мощным аналитическим методом, который позволяет идентифицировать и количественно определять различные вещества в сложных смесях. В анализе слюны МС используется для идентификации белков, пептидов, метаболитов и других компонентов. МС обладает высокой чувствительностью и специфичностью, что позволяет выявлять даже незначительные изменения в составе слюны. Применение МС в анализе слюны: Протеомика слюны: идентификация и количественное определение белков слюны для диагностики заболеваний, таких как рак, аутоиммунные заболевания и инфекции. Метаболомика слюны: анализ метаболитов слюны для выявления метаболических нарушений и оценки воздействия факторов окружающей среды. Лекарственный мониторинг: определение концентрации лекарственных препаратов в слюне для контроля за эффективностью лечения. Мы изучили протеомический анализ слюны методом масс-спектрометрии. Цель: Идентификация и количественное определение белков слюны методом массспектрометрии. Материалы и оборудование: Образцы слюны (мои собственные и нескольких добровольцев) Трипсин (фермент для расщепления белков)
ISSN: 2582-4686 SJIF 2021-3.261,SJIF 20222.889, 2024-6.875 ResearchBib IF: 9.948 / 2024 VOLUME-5, ISSUE-11 365 Масс-спектрометр Хроматографическая система (для разделения пептидов) Программное обеспечение для обработки данных (Proteome Discoverer) Ход работы: Собрали образцы слюны, прополоскав рот водой перед этим. Затем, чтобы удалить клетки и другие твердые частицы, центрифугировали образцы в течение 10 минут при 14 000 оборотах в минуту. Добавили трипсин к образцам слюны и инкубировала их в течение ночи при 37 °C. Трипсин расщепил белки на более мелкие пептиды, что необходимо для анализа на масс-спектрометре. Полученную смесь пептидов разделили с помощью жидкостной хроматографии. Хроматографическая система разделила пептиды на основе их физико-химических свойств, что позволило мне анализировать их по отдельности. Разделенные пептиды проанализировали с помощью масс-спектрометра. Масс-спектрометр измерил отношение массы к заряду каждого пептида, что позволило нам идентифицировать их. Полученные масс-спектрометрические данные обработали с помощью программного обеспечения Proteome Discoverer. Программа идентифицировала белки на основе полученных данных о пептидах и позволила мне количественно определить количество каждого белка в образце слюны. Результаты анализа. В результате проведенного анализа методом масс-спектрометрии в наших образцах слюны и образцах добровольцев были идентифицированы различные белки, включая альфа-амилазу, лизоцим, муцин и другие. Альфа-амилаза, например, отвечает за расщепление крахмала в слюне, а лизоцим обладает антибактериальными свойствами. Муцин же делает слюну вязкой и защищает слизистую оболочку полости рта. Выводы. Анализ слюны является перспективным направлением в диагностике и мониторинге различных заболеваний. Масс-спектрометрия и метод иммуноферментного анализа являются мощными аналитическими методами, которые позволяют выявлять и количественно определять различные биомаркеры в слюне. Развитие этих и других методов анализа слюны открывает новые возможности для ранней диагностики заболеваний, мониторинга эффективности лечения и оценки воздействия факторов окружающей среды на организм человека. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Нажмиддинов Х. Б., Дилмуродов Ш. Н., Раймкулова Ч. А. Определение Аммиака Неинвазивным Методом В Выдыхаемом Воздухе Человека //Ta'lim va rivojlanish tahlili onlayn ilmiy jurnali. – 2021. – Т. 1. – №. 5. – С. 50-54. 2. Raimkulova C. A. et al. Exhaled air as an object of studying the functional state of the organism //Austrian Journal of Technical and Natural Sciences. – 2020. – №. 1-2. – С. 47-51. 3. Раимкулова Ч. А., Аронбаев С. Д., Аронбаев Д. М. Биомаркеры и оценка рисков //Universum: химия и биология. – 2022. – №. 1 (91). – С. 77-83. 4. Раимкулова Ч. А., Аронбаев С. Д., Аронбаев Д. М. К проблеме определения аммиака в выдыхаемом воздухе //Universum: химия и биология. – 2021. – №. 1-1 (79). – С. 26-34. 5. Раимкулова Ч. А., Аронбаев С. Д., Аронбаев Д. М. Анализ выдыхаемого воздуха как метод неинвазивной диагностики //International scientific journal «Global science and innovations. – 2020. – С. 56-58.
ISSN: 2582-4686 SJIF 2021-3.261,SJIF 20222.889, 2024-6.875 ResearchBib IF: 9.948 / 2024 VOLUME-5, ISSUE-11 366 6. Аронбаев Д. М. и РаимкуловаЧ.А. Вода «живая» и «мертвая». новые факты об антиоксидантных и релаксационных характеристиках электроактивированной воды //Universum: химия и биология. – 2021. – №. 2 (80). – С. 26-31. 7. Аронбаев С. Д. и РаимкуловаЧ.А. Screen-printed электроды в инверсионновольтамперометрическом определении тяжелых металлов //Universum: химия и биология. – 2020. – №. 5 (71). – С. 22-34. 8. Раимкулова Ч. А., Аронбаев С. Д., Аронбаев Д. М. Cаливодиагностика: прошлое, настоящее, будущее //Universum: химия и биология. – 2023. – №. 1-2 (103). – С. 27-37. 9. Нарбаев К., Раимкулова Ч. А. Bыбор условий спектрофотометрического определения ионов аммония индофенольным методом //The 7 th International scientific and practical conference “Science, innovations and education: problems and prospects”(February 9-11, 2022) CPN Publishing Group, Tokyo, Japan. 2022. 842 p. – 2022. – С. 161. 10. Раимкулова Ч. А., Холмуродова Д. К. Pазработка методов и устройств для неинвазивного контроля некоторых клинически значимых биомаркеров //журнал гепатогастроэнтерологических исследований. – 2022. – №. SI-2. 11. Раимкулова Ч. А. и др. Oптимизация условий образования индофенольного комплекса для спектрофотометричкого определения ионов аммония //Norwegian Journal of Development of the International Science. – 2022. – №. 77-1. – С. 3-9. 12. Раимкулова Ч. А., Аронбаев С. Д., Аронбаев Д. М. Измерение pH смешанной слюны с использованием потенциометрического проточно-инжекционного датчика//Universum: химия и биология. – 2022. – №. 6-2 (96). – С. 5-12. 13. Ch. Rayimkulova et al. Optimization of indophenol complex fprmation conditions for spectrophotometric determination of ammonium ions//Norwegian Journal of Development of the International Science. – 2021. – №. 77-1. – С. 3-9. 14. Раимкулова Ч. А., Аронбаев С. Д., Аронбаев Д. М. Визуально-колористический метод индикации аммиака в выдыхаемом воздухе и устройство для его реализации //Universum: химия и биология. – 2020. – №. 7 (73). – С. 40-42. 15. Раимкулова Чарос Ахматовна Salivadiagnostika: o'tmishda, hozir, kelajakda/ ournal of Healthcare and Life-Science Research. -2024/- том 3. – №.9. – С. 188-182. 16. Раимкулова Ч.А., Рахмонова Ф.Э. Определение аммиака спектрофотометрическим методом // -2024. – 1-10. -163-169.