Biosíntesis de carotenoides en hongos

280 15. biosÍn esis de ca o enoides en Hongos Ja ie Á alos y M. Ca men Limón biosín esis de Ca o enoides en hongos in oducción Los hongos son o ganismos no o osin é icos que o man un eino den o de los euca io as y que poseen una eno me e sa ilidad me abólica y capacidad de adap ación a ambien es ecológicos muy di e sos. En muchos casos, su me abolismo incluye la capacidad de sin e iza ca o enoides, obje o de es e capí ulo. Los hongos se di iden en a ios g upos axonómicos, en e los que igu an los ascomice os, que deben su nomb e a la o mación de ascas, los basidiomice os, que o man basidios, y los zigomice os, que o man zigospo as. Con independencia del g upo axonómico, los hongos pueden desa olla se o mando ilamen os (hongos ilamen osos) o células indi iduales (le adu as). Po sus acilidades de cul i o y manipulación en el labo a o io, los in es igado es p e ie en es udia algunos hongos. Además, la di e sidad de su me abolismo hace de ellos o ganismos de g an in e és bio ecnológico; algunas especies se han empleado como modelos de in es igación en la sín esis de ca o enoides. Capí ulo 15 281 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos La sín esis de ca o enoides en hongos se p oduce a pa i del pi o os a o de ge anilge aniol (GGPP). El GGPP se sin e iza as cua o pasos consecu i os de condensación a pa i de un p ecu so de cinco á omos de ca bono, el pi o os a o de isopen enilo (iPP). Es e compues o se sin e iza en di e en es o ganismos median e dos u as biosin é icas di e en es. La p ime a de i a del hid oxime ilglu a il coenzima A (HMG-CoA) a a és del me alona o, y la segunda, de la condensación de la hyd oxie il- iamina y el glice aldehído 3- os a o, con la D-1- deoxixilulosa 1- os a o como in e media io (Rohme e al., 1993). En los casos in es igados, la sín esis de ca o enoides en los hongos ocu e a a és de la u a del me alona o. Todos los ca o enoides ienen su o igen en el i oeno, un ca o enoide incolo o de 40 á omos de ca bono que se sin e iza po condensación de dos unidades de GGPP a a és de un in e media io en con o mación cis ( igu a 1). La in oducción de dobles enlaces conjugados a es a molécula apo a a los subsiguien es ca o enoides la capacidad de abso be luz isible, dándoles las ca ac e ís icas pigmen aciones ama illa, ana anjada o ojiza. La u a di ie e después en dis in os hongos en unción de las modi icaciones químicas que se in oducen, que no malmen e incluyen la ciclación de uno o los dos ex emos de la cadena lineal (anillos ε o β) o la in oducción de g upos oxigenados. Aunque la capacidad de p oduci ca o enoides es una ca ac e ís ica ecuen e en los hongos, no odos poseen es a u a biosin é ica. Algunas especies muy empleadas en in es igación, como Aspe gillus nidulans o Saccha omyces ce e isae, ca ecen de los genes pa a es a u a. En es e capí ulo se esume el conocimien o sob e los ca o enoides p oducidos po hongos, p es ando especial a ención a aquellos en los que se ha p o undizado más a ni el bioquímico y gené ico. igu a 1. Biosín esis del β-ca o eno en hongos. La lecha discon inua esume los cua o pasos consecu i os de desa u ación, cuyos in e media ios son el i o lueno, el z-ca o eno y el neu ospo eno (no mos ados). 282 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos de Ca RA se sepa an como p o eínas independien es (To es- Ma ínez, Mu illo y Ce dá-Olmedo, 1980), p obablemen e po diges ión p o eolí ica (A ach e al., 2001). Dicha sepa ación ísica se ha demos ado ecien emen e en B. ispo a median e el econocimien o con an icue pos especí icos pa a cada dominio p o eico (B ei enbach, F ase y Sandmann, 2012). La o ganización gené ica de los dos genes de la sín esis de β-ca o eno es simila en las es especies muco ales in es igadas, con ambos genes ansc i os de o ma di e gen e a pa i de una única secuencia egulado a. La u a biosin é ica en es os o ganismos se ha con as ado sólidamen e po es udios gené icos y bioquímicos, alcanzando su mayo de alle en P. blakesleeanus. Se conocen desde hace a ias décadas los mu an es albinos del gen ca B (que acumulan i oeno) y los mu an es del gen ca RA que pueden se albinos (po que no acumulan ningún ca o enoide) o ojos (po que acumulan licopeno) en unción del dominio enzimá ico a ec ado (Ce dá-Olmedo, 1985; 1987). Dichos mu an es se ob u ie on pos e io men e en M. ci cinelloides (Na a o, Sandmann y To es-Ma ínez, 1995; Velayos e al., 1997) y en B. ispo a (Meh a y Ce dá-Olmedo, 1995; Meh a, Ob az so a y Ce dá- Olmedo, 2003). El mismo esul ado se ob u o median e el empleo de inhibido es químicos de es as enzimas, como la di enilamina pa a la desa u asa (Salgado, Beja ano y Ce dá- Olmedo, 1989) o el CFTA [2-(4-clo o enil)- io ie ilamina • HCl] pa a la ciclasa (Goodwin, 1980). Los mu an es ca B de P. blakesleeanus acumulan el isóme o 15-cis del i oeno (Goodwin, 1980), pe o los in e media ios pos e io es ienen con igu ación odo-cis. Es e hecho, unido a que odos los mu an es que poseen i oeno es án a ec ados en el mismo gen ca B (Oo aki e al., 1973) y que la desa u asa Ca B es capaz de econoce la o ma cis del i oeno (F ase y B amley, 1994), sugie e que la isome ización a la o ma odo- ans la ealiza P oducción de β-ca o eno El β-ca o eno es uno de los ca o enoides más ex endidos en la na u aleza y su sín esis se lle a a cabo en di e en es hongos. La sín esis de β-ca o eno a pa i de i oeno equie e cua o pasos de desa u ación, que dan como in e media io el licopeno y dos ciclaciones de ipo β ( igu a 1). A di e encia de o os o ganismos, las cua o desa u aciones las lle a a cabo una misma desa u asa. Las dos ciclaciones las p oduce ambién una misma ciclasa. Sín esis de β-ca o eno en muco ales En los zigomice os, el β-ca o eno pa ece se el ca o eno más ecuen e, y se ha desc i o su sín esis en a ias especies del o den muco ales, como Phycomyces blakesleeanus (Ce dá-Olmedo, 1987), Blakeslea ispo a (Na a o e al., 1995; Á alos y Ce dá-Olmedo, 2004) y Muco ci cinelloides (Na a o, Sandmann y To es-Ma ínez, 1995; F ase e al., 1996). El gen esponsable de la desa u asa se ha es udiado en de alle en los es muco ales mencionados, donde se denomina ca B (Ruiz-Hidalgo e al., 1997; Velayos e al., 2000; Rod íguez-Saiz e al., 2004). A di e encia de las enzimas de la ca o enogénesis de bac e ias y o ganismos o osin é icos, en los hongos la ac i idad ciclasa se encuen a en el ex emo amino de una enzima bi uncional, cuya egión del ex emo ca boxilo lle a a cabo la sín esis de i oeno a pa i del GGPP. Es a doble ac i idad se descub ió inicialmen e en la le adu a Xhan ophyllomyces dend o hous (Ve does e al., 1999) y se con i mó pos e io men e en los genes ca RA de P. blakesleeanus (A ach e al., 2001) y ca RP de M. ci cinelloides (Velayos e al., 2000a; Sanz e al., 2011). Un gen simila se ha iden i icado ambién en B. ispo a (Rod íguez-Saiz e al., 2004). En P. blakesleeanus se asume que los dos dominios p o eicos 283 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos P oducción de neu osPo axan ina en ascomice os La neu ospo axan ina es un apoca o enoide monocíclico de 35 á omos de ca bono con un g upo ca boxilo en el ex emo lineal de la molécula ( igu a 2). Su nomb e p o iene de su descub imien o en Neu ospo a c assa, donde se encon ó jun o con o os ca o enoides (Zaloka , 1957). El análisis pos e io de su es uc u a química e eló que se a a del ácido β-apo- 4’-ca o enoico (Aasen y Jensen, 1965). La neu ospo axan ina es p oducida ambién po los géne os Fusa ium (Bindl, Lang y Rau, 1970; Á alos y Ce dá-Olmedo, 1986), Ve icillium (Valadon y Mumme y, 1969; Valadon e al., 1982) y Podospo a (S obel e al., 2009). En algunos hongos, la neu ospo axan ina es obje o de modi icaciones químicas secunda ias, como la es e i icación con un g upo me ilo en Ve icillium aga icinum (Valadon y Mumme y, 1977) o con un g upo glucosilo en Fusa ium sp. (Sakaki e al., 2002). El análisis de los ca o enoides in e media ios de ec ados en Neu ospo a (Ha ding e al., 1969; Mi zka y Rau, 1977) y en Fusa ium (Bindl, Lang y Rau, 1970; Á alos y Ce dá-Olmedo, 1987), sugie en u as biosin é icas de neu ospo axan ina muy pa ecidas en ambas especies, con cinco desa u aciones y un paso de ciclación, aunque con di e encias en el o den en que ocu en algunas de las eacciones ( igu a 2). Así, en e los ca o enoides encon ados en N. c assa igu a el 3,4-didehid olicopeno, esul ado de cinco desa u aciones en la molécula de i oeno. Sin emba go, la ciclación puede p oduci se en pasos an e io es, como demues a la de ección de g-ca o eno o β-zeaca o eno, p oceden es de la ciclación del neu ospo eno o el licopeno. Es os compues os se encuen an ambién en Fusa ium, mien as que el 3,4-didehid olicopeno no ha sido aún desc i o en es e hongo (Bindl e al., 1970; Á alos y Ce dá-Olmedo, 1987). la p opia desa u asa. Di e en es e idencias expe imen ales demues an que en P. blakesleeanus, y posiblemen e ambién en las o as especies muco ales es udiadas, las enzimas de la ca o enogénesis se o ganizan como un complejo mul imé ico, o mado po cua o desa u asas y dos ciclasas, que se ans ie en los sus a os en e sí (De la Gua dia e al., 1971; A agón e al., 1976; Candau, Beja ano y Ce dá-Olmedo, 1991; Sanz e al., 2002). La si uación es algo más compleja en B. ispo a, donde se han encon ado e idencias de dos ciclasas di e en es, una enca gada de ealiza las dos ciclaciones y o a capaz de hace sólo la p ime a ciclación pa a p oduci g-ca o eno. Sín esis de β-ca o eno en o os hongos Además de los zigomice os, algunos hongos de o os g upos axonómicos ambién p oducen β-ca o eno como ca o eno p edominan e. En e ellos igu an los basidiomice os Rhodospo idium sp. (De Miguel e al., 1997), Scle o inia scle o io um (Geo giou e al., 2001), Scle o ium ol sii (Geo giou e al., 2001a), Spo idiobolus pa a oseus (Han, He y Hang, 2012), Us ilago maydis (Es ada e al., 2010) y Us ilago sp. (Will, Ga be y Kezdy, 1984; Will y Newland, 1985) y los ascomice os Lep ospkae ia micho ii (Je ebzo -Quin in y Je ebzo , 1980), Aspe gillus gigan eus (El-Jack, Mackenzie y B amley, 1988), Ce cospo a nico ianae (Daub y Payne, 1989), Asche sonia aley oides (Van Eijk e al., 1979) y Penicillium sp. (Han e al., 2005). Los genes esponsables de es a u a han ecibido escasa a ención a ni el molecula en es os o ganismos, y sólo se ha desc i o el gen de la desa u asa en C. nico ianae (Eh ensha y Daub, 1994). Como se desc ibi á más adelan e, el β-ca o eno puede es a p esen e además como in e media io o p oduc o la e al de la sín esis de xan o ilas en o os hongos. También acumulan β-ca o eno algunos mu an es de X. dend o hous (Johnson, 2003) o Rhodo o ula glu inis (Bhosale y Gad e, 2001). 284 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos 1990; Schmidhause e al., 1990), AL-2 la sin asa de i oeno (Schmidhause e al., 1994) y AL-3 la ans e asa de p enilo que sin e iza GGPP a pa i de FPP (Sandmann e al., 1993). Mien as que los mu an es nulos pa a los genes al-1 y al-2 son iables, sólo se ob ienen mu an es con ac i idad esidual de AL-3 (Ba ba o e al., 1996), un esul ado cohe en e con la u ilización del GGPP pa a la sín esis de o os e penoides esenciales. Análisis más de allados con i ma on que AL-1 es capaz de lle a a cabo las cinco desa u aciones de la u a Los p ime os pasos de la u a coinciden con los de la sín esis de β-ca o eno, empezando po la sín esis de i oeno a pa i de GGPP (Spu geon, Tu ne y Ha ding, 1979). Los genes esponsables de los p ime os pasos se iden i ica on inicialmen e en N. c assa g acias al análisis gené ico de mu an es albinos, denominados al-1, al-2 (Huang, 1964) y al-3 (Goldie y Subden, 1973). Sus pos e io es es udios a ni el molecula mos a on que AL-1 es la desa u asa esponsable de las eacciones de desa u ación (Ba ley e al., igu a 2. Biosín esis de la neu ospo axan ina en Fusa ium y Neu ospo a. Los in e media ios pueden a ia según el o den en que se p oduzcan las eacciones. De acue do con los in e media ios de ec ados en las dis in as especies, los pasos indicados con lechas blancas sólo se han obse ado en Neu ospo a, con lechas g ises sólo en Fusa ium, y con lechas neg as en ambos géne os. Como ama la e al, el g-ca o eno puede se con e ido ambién en β-ca o eno ( eacción no mos ada en la igu a). 285 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos apoyen la sepa ación ísica de los dominios sin asa de i oeno y ciclasa como polipép idos independien es. Las cinco desa u aciones y la ciclación dan luga al o uleno, el p ecu so de la neu ospo axan ina. La sín esis de es a xan o ila equie e dos ac i idades enzimá icas adicionales. Una oxigenasa de ca o enoides, codi icada po los genes cao- 2 en Neu ospo a (Saelices e al., 2007) y ca T en Fusa ium (P ado-Cab e o e al., 2007), p oduce una o u a asimé ica en el ex emo lineal de la molécula de o uleno pa a p oduci β-apo-4’-ca o enal, que iene 35 á omos de ca bono. CAO-2 no es capaz de econoce como sus a o al g-ca o eno, po lo cual son necesa ias las cinco desa u aciones pa a que es a enzima pueda lle a a cabo su eacción. Sin emba go, es capaz de p oduci el co e oxida i o en ausencia de ciclación, como indica la in oducción de la ciclación al inal de la u a en Neu ospo a cuando es e hongo se incuba a baja empe a u a (Es ada e al., 2008a). El β-apo-4’-ca o enal es sus a o de una deshid ogenasa de aldehído, codi icada po los genes ylo-1 en Neu ospo a (Es ada e al., 2008b) y ca D en Fusa ium (Díaz- Sánchez e al., 2011), y que oxida el g upo aldehído a ca boxilo pa a gene a inalmen e la neu ospo axan ina. La pa icipación de es os genes en la u a biosin é ica ue con i mada po el eno ipo de sus pé didas de unción po mu ación. Los mu an es albinos o ca ecen de ca o eno (al-2, al-3, ca RA) o acumulan i oeno (al-1, ca B), indis inguible a simple is a. Los mu an es cao-2 (Saelices e al., 2007) y ca T (P ado-Cab e o e al., 2007) p esen an una pigmen ación ojiza, causada po la acumulación de o uleno. Finalmen e, los mu an es de los genes ylo-1 (Es ada e al., 2008b) y ca D (Díaz-Sánchez e al., 2011) mues an una pigmen ación ama illen a, causada po una mezcla compleja de ca o enoides. La ca encia de la deshid ogenasa de aldehído (Hausmann y Sandmann, 2000) y que AL-2 posee ambién ac i idad ciclasa (A ach, Schmidhause y Á alos, 2002), como ya se ha mencionado pa a la enzima o óloga de o os hongos. Es a unción dual de AL-2 se ha con i mado además median e análisis de nue os alelos mu an es del gen (Díaz- Sánchez e al., 2011a) y median e ensayos enzimá icos en un sis ema he e ólogo (Sandmann e al., 2006). Es e úl imo es udio mos ó además que AL-2 lle a a cabo p e e en emen e una única ciclación, como cabe espe a de su pa icipación en la sín esis de un apoca o enoide monocíclico como la neu ospo axan ina. Se han iden i icado ambién genes simila es a al-1, al-2 y al-3 en Fusa ium ujiku oi, donde se han denominado espec i amen e ca B, ca RA (Linnemanns öns e al., 2002; P ado-Cab e o e al., 2009) y ggs1 (Mende, Homann y Tudzynski, 1997), habiéndose iden i icado ambién en o as especies de Fusa ium (Jin, Lee y Lee, 2010; Ádám e al., 2011; Rod íguez-O iz e al., 2012). En el caso de al-2 y ca RA, a di e encia de su homólogo de muco ales, no hay da os que 286 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos ca o enal a β-apo-4’-ca o enol y, p esumiblemen e, a de i ados es e i icados (Díaz-Sánchez e al., 2011). La mayo ía de es os genes ambién mu an en Gibbe ella zeae (Fusa ium g aminea um), con i mando los eno ipos obse ados en F. ujiku oi (Jin, Lee y Lee, 2010). sÍn esis de as axan ina y o as xan o ilas La as axan ina es una xan o ila de colo ojizo p oducida po mic oalgas y bac e ias, con ecuencia en ecosis emas acuá icos, en los que a a és de la cadena alimen a ia acaban siendo uen e de pigmen ación (colo “salmón”) en muchos peces y c us áceos, así como en algunas a es, como los lamencos. La as axan ina es p oducida ambién po la le adu a X. dend o hous, an e io men e conocida como Pha ia hodozyma (Johnson, 2003). Es a xan o ila posee un no able in e és bio ecnológico, especialmen e debido a su empleo en acuicul u a pa a p opo ciona pigmen ación en uchas y salmones (Higue a-Ciapa a, Félix-Valenzuela y Goycoolea, 2006). Su p oducción indus ial se basa en g an medida en cul i os de X. dend o hous y del alga Haema ococcus plu ialis (Domínguez-Bocaneg a, Ponce-Noyola y To es-Muñoz, 2007). La as axan ina se sin e iza a pa i del β-ca o eno median e la in oducción de g upos ce o e hid oxilo en sus anillos β ( igu a 3a ). La sín esis de β-ca o eno es lle ada a cabo en x. dend o hous po la desa u asa C i (Ve does e al., 1999a) y la sin asa de i oeno-ciclasa C YB (Ve does e al., 1999). Como ya se ha indicado, el análisis bioquímico de C YB pe mi ió asigna po p ime a ez la ac i idad ciclasa en hongos a la egión del ex emo amino de la sin asa de i oeno. En X. dend o hous la con e sión de β-ca o eno en as axan ina la debe ía da luga a la acumulación de β-apo-4’-ca o enal ca o enal, po lo que es os mu an es debe ían ene un colo ana anjado, pe o la ines abilidad de es e ca o enoide p o oca la acumulación de o os de i ados. En el caso del mu an e ylo- 1, en unción de las condiciones de cul i o, se ha de ec ado apo-4’-licopenal, apo-4’-licopenol (Es ada e al., 2008a), apo- 4’-g-ca o enal, apo-4’-g-ca o enol, y de i ados es e i icados, como 4’-apolicopeno-4’-mi is a o o 4’-apo-g-ca o eno-4’- mi is a o (Sandmann, Takaichi y F ase , 2008). La complejidad química de es e mu an e, conocido hace más de cua en a años (Goldie y Subden, 1973), e asó mucho la iden i icación de la ac i idad enzimá ica a ec ada. Sin emba go, el mu an e del gen o ólogo en Fusa ium, ca D, p esen a un colo ana anjado en la ase inicial de cul i o, pe o i a a un colo ama illen o a medida que en ejece debido a la con e sión del β-apo-4’- 287 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos El in e és bio ecnológico de las xan o ilas ha jus i icado nume osos es udios pa a su búsqueda en o as le adu as. T as la as axan ina des aca la o ula odina, un de i ado ca boxílico del o uleno de es uc u a simila a la neu ospo axan ina ( igu a 3b). La sín esis de o ula odina ha ecibido especial a ención en el géne o Rhodo o ula (F engo a y Beshko a, 2009; Moliné, Libkind y Van B oock, 2012), pe o ambién se ha encon ado en o as le adu as, como Peniopho a (A pin, Leb e on y Fiasson., 1966), Cys o ilobasidium, Rhodospo idium, Spo obolomyces, y Spo idiobolus (Da oli, Mie au y Webe , 2004; Buzzini e al., 2007; iu ko e al., 2008). También se han iden i icado o as xan o ilas en hongos, como la can axan ina en Can ha ellus cinnaba inus (Haxo, 1950), el 16’-hid oxi o uleno en Cys o ilobasidium (He z e al., 2007), la plec aniaxan ina en Dioszegia sp. (Madhou e al., 2005) y la ilipsiaxan ina en Phillipsia ca minea (A pin y Liaaen-Jensen, 1967). La disponibilidad de he amien as molecula es pe mi e modi ica gené icamen e o os hongos pa a p oduci xan o ilas. La in oducción en M. ci cinelloides de genes he e ólogos de o igen bac e iano ha pe mi ido la p oducción de can idades a iables de β-c ip oxan ina, zeaxan ina, equinenona, can axan ina y as axan ina además de su p oduc o habi ual, el β-ca o eno (Papp e al., 2006; 2013; Cse ne ics e al., 2011). Los mismos ca o enoides los sin e izan es i pes de S. ce e isiae a las que se han in oducido genes bac e ianos y la le adu a X. dend o hous pa a la p oducción de xan o ilas (Ukibe e al., 2009). ealiza una sola enzima de la amilia de las oxigenasas P450 (Ál a ez e al., 2006; Ojima e al., 2006), codi icada po el gen c S/as , con la pa icipación de al menos una educ asa de ci oc omo P450 pa a p opo ciona los elec ones en las eacciones de oxigenación (Alcaíno e al., 2008). Es e paso biosin é ico di ie e en algas y bac e ias p oduc o as de as axan ina, donde su sín esis a pa i de β-ca o eno es mediada po dos enzimas independien es con ac i idades hid olasa y ce olasa (F ase , Miu a y Misawa, 1997). igu a 3. Biosín esis de o as xan o ilas en hongos: a) biosín esis de la as axan ina en X. dend o hous. Sólo se indican los pasos a pa i del g-ca o eno. En una ama la e al, el g-ca o eno puede su i una quin a desa u ación pa a p oduci o uleno, el cual puede se obje o de las eacciones de hid oxilación y ce olización en el anillo β pa a p oduci 3-dihid oxi-4- ce o o uleno como p oduc o secunda io; b) es uc u a química de o as xan o ilas úngicas. 288 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos En algunos casos la o oinducción se ha es udiado con g an de alle. En P. blakesleeanus, la o o espues a se limi a a una e apa conc e a del desa ollo, an es de la o mación de los espo angió o os, es uc u as en las que se desa ollan las espo as asexuales (Beja ano e al., 1991). En es a ase del desa ollo, la aplicación de dis in os lujos de luz al mismo iempo pe mi ió de ec a dos ni eles de sensibilidad, con dis in os umb ales y angos de espues a. Una exposición a luz muy débil p oduce una pequeña es imulación que se sa u a a lujos mayo es, has a alcanza un umb al capaz de p oduci una espues a mucho más ue e. Se ha encon ado ambién una espues a bi ásica al lujo luminoso en N. c assa (Sch o , 1980). La o oinducción es pa icula men e e icaz en es e hongo, capaz de p oduci un inc emen o sensible de la ca o enogénesis después de sólo un minu o de exposición a la luz (Zaloka , 1955) o incluso menos (Rau, Lindemann y Rau- Hund, 1968), alcanzando su alo máximo ap oximadamen e 6-8 ho as después del es ímulo. Sin emba go, una ez dispa ada la espues a a un pulso de luz, el hongo es insensible empo almen e a un segundo pulso (Sch o , 1981), indicando un bloqueo empo al del sis ema de o o ecepción. La espues a es menos e icaz en Fusa ium aquaeduc uum (Bindl, Lang y Rau, 1970) y F. ujiku oi (Á alos y Sch o , 1990), y en es os casos es necesa io al menos una ho a de iluminación pa a una espues a de ec able. En los casos in es igados, la inducción median e la luz iene luga a ni el de ansc ipción de los genes es uc u ales. En los hongos muco ales, el inc emen o es pa icula men e ue e en M. ci cinelloides, y es su icien e un pulso de 10 minu os de luz azul pa a que los ni eles de ARNm de los genes ca B y ca RA aumen en has a 300 eces (Velayos e al., 2000; 2000a), mien as que el inc emen o no es an acusado en P. blakesleeanus (Ruiz-Hidalgo e al., 1997; Blasco e al., 2001; egulación de la sÍn esis de ca o enoides en Hongos Debido al in e és en las aplicaciones de los ca o enoides y al uso de algunos hongos pa a su p oducción bio ecnológica, la egulación de su sín esis ha ecibido especial a ención en es os o ganismos. En unción de las especies, la sín esis se es imula median e la luz o po algunas condiciones ad e sas de cul i o, como la escasez de nu ien es o el es és oxida i o. En algunos casos se conocen los mecanismos de egulación asociados a de e minadas e apas del desa ollo o del ciclo de ida. La exis encia de p o eínas egulado as especí icas se e idencia debido a la exis encia de mu an es egula o ios, algunos de los cuales se han es udiados con especial de alle. Se desc iben a con inuación los p incipales aspec os de los mecanismos de egulación. Es imulación median e la luz La inducción po luz es un ca ác e ecuen e en los hongos p oduc o es de ca o enoides (Á alos, Beja ano y Ce dá-Olmedo, 1993). En e los casos mejo conocidos igu an la o oinducción de la sín esis de β-ca o eno en P. blakesleeanus (Beja ano e al., 1991), M. ci cinelloides (Na a o, Sandmann y To es-Ma ínez, 1995; Velayos e al., 1997) y A. gigan eus (El-Jack, Mackenzie y B amley, 1988) jun o con la de neu ospo axan ina en N. c assa (Á alos y Co ochano, 2013) y en dis in as especies de Fusa ium (Á alos y Es ada, 2010). También se ha desc i o o oinducción de la sín esis de as axan ina en mu an es de X. dend o hous (Meye y Du P eez, 1994). Sin emba go, la inducción po luz no es una egla gene al. Así, po ejemplo, la sín esis de β-ca o eno no aumen a signi ica i amen e en B. ispo a (Su e , 1970) o en U. maydis (Es ada e al., 2010) cuando se cul i an bajo iluminación con inua. 295 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos (Ha ding, 1974). Es e e ec o equie e sín esis de p o eínas de no o, ya que no iene luga en p esencia de cicloheximida. Es in e esan e esal a que la iluminación de N. c assa a baja empe a u a no sólo p oduce la sín esis de mayo es can idades de ca o enoides, sino que la p opo ción de neu ospo axan ina en la mezcla de ca o enoides es mayo . Es a ci cuns ancia ha acili ado el es udio de mu an es en pasos a díos de la u a, como los a ec ados en los genes cao-2 (Saelices e al., 2007) e ylo-1 (Es ada e al., 2008b), que acumulan así el ca o enoide in e media io de o ma más limpia. Además, en N. c assa se ha obse ado que la empe a u a de e mina el o den en el que se p oducen las eacciones (Es ada e al., 2008a): a baja empe a u a la ciclación po AL-2 se p oduce en úl imo luga y CAO-2 lle a a cabo la o u a oxida i a sob e el 3,4-didehid olicopeno en luga de sob e el o uleno. De es a o ma, los p ecu so es inmedia os de la neu ospo axan ina son el apo-4’-licopenal y el ácido apo-4’-licopenoico ( igu a 2). Po el con a io, a al a empe a u a el 3,4-didehid olicopeno es econocido p e e en emen e po el dominio ciclasa de AL-2 pa a p oduci o uleno. En F. ujiku oi, la sín esis de neu ospo axan ina es es imulada po la escasez de ni ógeno, una señal nu icional que con ola la sín esis de o os me aboli os, como las gibe elinas o la bika e ina. Es e e ec o a ni el de ca o enogénesis se descub ió inicialmen e en cul i os con micelio inmo ilizado, en los que se obse ó que la mayo p oducción de ca o enoides en escasez de ni ógeno decae si se añade es e nu ien e (Ga bayo e al., 2003). Resul ados simila es se encon a on en expe imen os de in e cambio del micelio inmo ilizado en e condiciones de p esencia o ausencia de ni ógeno. En o os expe imen os se obse ó que la sín esis de ca o enoides, an o de la es i pe sil es e como de mu an es supe p oduc o es, es mayo en medio con una baja elación N/C, y que la inducción El AMP cíclico (AMPc) es una impo an e señal en el desa ollo de los hongos. Las mu aciones en el gen de la ciclasa de adenila o en algunas especies dan luga a al e aciones en el desa ollo y el c ecimien o y a cambios en la sín esis de ca o enoides. Así, los mu an es de dicho gen, c -1 en N. c assa (K i sky e al., 1982) y acyA en F. ujiku oi (Ga cía- Ma ínez, Ádám y Á alos, 2012), con ienen más ca o enoides en la oscu idad. En F. ujiku oi, además, da luga a una meno espues a a la luz, mien as que en N. c assa los ni eles de AMPc aumen an du an e la o oinducción de la ca o enogénesis y la o o espues a se educe en p esencia de AMPc exógeno (Ha ding, 1973). También se han obse ado conexiones egula o ias en o os genes asociados a la señalización po AMPc. La sob eexp esión del gen gna-1 de N. c assa, que codi ica la p o eína Ga de un complejo G he e o imé ico, da luga a hi as aé eas más la gas y a una educción en el desa ollo de conidios y en la p oducción de ca o enoides (Yang y Bo ko ich, 1999). Po o a pa e, la mu ación del gen dcc-1, que codi ica una quinasa de his idina, p oduce un aumen o an o de la conidiación como de la p oducción de ca o enoides, y es e e ec o es e e ido po adición de AMPc exógeno (Ba ba-Os ia, Lledias y Geo gellis, 2011). Regulación po condiciones ambien ales Las condiciones de cul i o pueden a ec a a la p oducción de ca o enoides de o ma dis in a en di e en es hongos. Un ejemplo signi ica i o se encuen a en el e ec o de la empe a u a. La sín esis de neu ospo axan ina en espues a a la luz se educe en F. aquaeduc uum cuando disminuye la empe a u a (Rau, 1962), sin emba go, en N. c assa se obse a el e ec o con a io: la o oinducción es an o más e icien e cuan o más baja es la empe a u a a la que se ilumina el cul i o, alcanzado la espues a óp ima en e 6 y 12 °C 296 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos P. blakesleeanus (Ce dá-Olmedo, 1987) o X. dend o hous (Johnson, 2003). Sin emba go, la ecuencia de la sín esis de ca o enoides en los hongos sugie e unciones biológicas ele an es. Se esumen a con inuación las unciones mejo conocidas. El β-ca o eno como p ecu so de las ho monas sexuales en los muco ales Los ácidos ispó icos, ho monas sexuales de los muco ales mencionadas an es, se sin e izan a pa i de β-ca o eno, y és a es posiblemen e la p incipal unción de es e ca o eno en dicho g upo axonómico. Es os compues os pe enecen a una amilia químicamen e compleja (Aus in, Bu’Lock y Wins anley, 1969; Aus in, Bu’Lock y D ake, 1970), denominada ispo oides. En unción de di e en es modi icaciones químicas, los ácidos ispó icos se clasi ican en a ios ipos, denominados po las le as A, B, C, D y E (Caglio i e al., 1966; Aus in, Bu’Lock y Wins anley, 1969; Su e e al., 1989). La sín esis de es as ho monas se ha es udiado en de alle en B. ispo a, en cuyos cul i os se encuen an di e en es de i ados del me abolismo del β-ca o eno, incluyendo ispo oides de 18 ca bonos, ciclo a nesoides de 15 ca bonos y me ilhexanoides de sie e ca bonos (Ba e o e al., 2011). Compues os pa ecidos se han iden i icado en los cul i os de P. blakesleeanus (Polaino e al., 2012). La u a biosin é ica de los ácidos ispó icos comienza con la o u a oxida i a del β-ca o eno, un ipo de eacción lle ada a cabo po enzimas de la amilia de las oxigenasas de ca o enoides. La enzima a ca go de es a eacción se iden i icó po p ime a ez en Rhizopus o yzae y B. ispo a, y se denominó Tsp3 (Bu mes e e al., 2007). El gen sp3 se ac i a en los cul i os mix os en ambas especies y en el caso po escasez de ni ógeno es independien e y adi i a con la inducción po la luz (Rod íguez-O iz, Limón y Á alos, 2009). Además, la ans e encia del micelio de un medio con ni ógeno a una solución de glucosa p oduce un aumen o ápido aunque ansi o io de los ni eles de ARNm de los genes ca RA y ca B. La ca o enogénesis ambién es ep imida po ni ógeno en N. c assa, como indican los mayo es ni eles de ARNm de los genes al-1 y al-2 en condiciones de escasez de es e nu ien e (Sokolo sky e al., 1992). Es e e ec o se obse a ambién en los mu an es del complejo WC, indicando que ambién en N. c assa la inducción po escasez de ni ógeno es independien e de la inducción po luz. unciones biológicas de los ca o enoides en los Hongos En los o ganismos o osin é icos, los ca o enoides desempeñan papeles impo an es en la o osín esis, como po ejemplo en la cap ación de luz y en la o op o ección de la maquina ia o osin é ica, en e o os p ocesos (Domonkos e al., 2013). Además, en las plan as supe io es, los ca o enoides p opo cionan colo es llama i os a muchas lo es y u os, ayudando a su ciclo de ida median e la a acción de insec os pa a la polinización y la dispe sión de las semillas. En los animales, los ca o enoides inge idos en la die a si en de uen e de e inoides, con impo an es papeles en la isión ( i amina A) y en el desa ollo (ácido e inoico) (Blomho y Blomho , 2006), además de p opo ciona pigmen ación en algunos casos. En lo que espec a a los hongos, los ca o enoides no desempeñan unciones i ales. Así lo indica an o la ausencia de es os pigmen os en algunas especies como la iabilidad de los mu an es albinos, como los desc i os en F. ujiku oi (Á alos y Ce dá-Olmedo, 1987), 297 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos modi icada pa a p oduci β-ca o eno (Medina, Ce dá-Olmedo y Al-Babili, 2011). Pos e io men e se con i mó la misma eacción enzimá ica pa a Tsp3 en B. ispo a (Sahade an e al., 2013). En P. blakesleeanus, el β-apo-12’-ca o enal es obje o de una nue a eacción de co e, lle ada a cabo po una segunda oxigenasa de ca o enoides, AcaA, pa a p oduci un apoca o enoide de 18 á omos de ca bono, la β-apo-13- ca o enona (Medina, Ce dá-Olmedo y Al-Babili, 2011), que es obje o de nue as eacciones químicas pa a da luga a los ácidos ispó icos. El o o apoca o enoide esul an e de es a se ie de eacciones posee 15 á omos de ca bono, y es el p ecu so de los ciclo a nesoides, una amilia de compues os químicos cuya unción es desconocida. Reacciones simila es muy p obablemen e se p oducen en o os muco ales, como B. ispo a. de B. ispo a, median e su exp esión he e óloga en una es i pe de E. coli p oduc o a de β-ca o eno, se demos ó la capacidad de la enzima Tsp3 pa a co a dicha molécula. Pos e io men e, el análisis químico de los apoca o enoides p esen es en cul i os mix os de P. blakesleeanus, muy especialmen e el hallazgo de de i ados de sie e á omos de ca bono, lle ó a pos ula la exis encia de dos eacciones de co e consecu i as sob e los dobles enlaces 11’,12’ y 12,13 de la molécula (Polaino e al., 2010) ( igu a 4). El gen sp3 de P. blakesleeanus esul ó se ca S, ya mencionado, y el eno ipo supe p oduc o de β-ca o eno de los mu an es de es e gen se debe po lo an o a la ausencia de su o u a enzimá ica (Tagua e al., 2012). La iden idad del gen se con i mó an o po el hallazgo de mu aciones en a ios mu an es ca S independien es como po la capacidad de p oduci β-apo-12’-ca o enal cuando se exp esa en E. coli igu a 4. Me abolismo del β-ca o eno como in e media io en la sín esis de o os compues os: a) p ime os pasos del co e oxida i o del β-ca o eno pa a la sín esis de los ácidos ispó icos. Se mues a el ácido ispó ico B como ejemplo ep esen a i o de es a amilia. Se indican con lechas g ises los si ios de co e econocidos po las oxigenasas Ca S y AcaA en P. blakesleeanus; b) p oducción de e inal as el co e simé ico del β-ca o eno ealizado po las enzimas Ca X de F. ujiku oi y Cco1 de U. maydis. 298 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos o ma e inal. Aunque la neu ospo axan ina es el ca o enoide acumulado mayo i a iamen e en F. ujiku oi y N. c assa, en es os hongos se han de ec ado pequeñas can idades de g-ca o eno (Mi zka y Rau, 1977; Á alos y Ce dá-Olmedo, 1987), lo que implica que sus ciclasas pueden in oduci un segundo anillo en la molécula de g ca o eno. En el caso de N. c assa, es udios in i o mos a on que la desa u asa AL-1 no econoce el g-ca o eno como sus a o pa a p oduci o uleno (Hausmann y Sandmann, 2000), lo que indica que la neu ospo axan ina se sin e iza a a és del 3,4-didehid olicopeno y que el des ino del g-ca o eno es su acumulación o su con e sión a β-ca o eno. A di e encia de N. c assa y F. ujiku oi, no hay in o mación sob e sín esis de ca o enoides en L. maculans, aunque la sín esis de β-ca o eno en L. micho ii (Je ebzo -Quin in y Je ebzo , 1980) sugie e una ac i idad biosin é ica simila en el p ime o. La p ime a oxigenasa de ca o enoides iden i icada en hongos capaz de p oduci e inal ue Ca x en F. ujiku oi (Thewes e al., 2005; P ado-Cab e o e al., 2007a). En es e hongo, la unción de la ca o enogénesis pa a p oduci e inal se pone en e idencia po la o ganización gené ica del gen ca X o mando un ag upamien o génico (clus e ) con los dos genes necesa ios pa a p oduci β-ca o eno, ca RA y ca B, y con el gen de la opsina Ca O. Los cua o genes del clus e es án suje os a un mismo mecanismo de egulación po luz, bajo con ol del p oduc o del gen ca S. El basidiomice o U. maydis posee es genes pa a opsinas, y una enzima capaz ambién de p oduci e inal a pa i de β-ca o eno (Es ada e al., 2010). Sin emba go, no se ha iden i icado aún la enzima esponsable de la sín esis de e inal en N. c assa. El papel del β-ca o eno como p ecu so de e inal aslada su unción biológica al papel que desempeñen las opsinas en los hongos. Sin emba go, los in en os po a e igua el papel Los genes y enzimas esponsables de los pasos pos e io es en la u a de los ácidos ispó icos son ac ualmen e obje o de in es igación. En e las enzimas igu a la deshid ogenasa de 4-dihid ome il ispo a o, Tsp1, pu i icada de cul i os de Muco mucedo es imulados po ácidos ispó icos (Czempinski e al., 1996). El análisis del gen sp1 mos ó que la es imulación sexual se p oduce a ni el de ac i idad enzimá ica y no de ansc ipción (Schimek e al., 2005). Expe imen os simila es pe mi ie on iden i ica ambién sp2, el gen de la deshid ogenasa de 4-dihid o ispo ina, en es e caso egulado an o a ni el de ansc ipción como de ac i idad enzimá ica (We zel e al., 2009). Genes simila es se encuen an en P. blakesleeanus (Polaino, 2009) y en o os muco ales (Schimek y Wös emeye , 2009). El β-ca o eno como p ecu so de e inal El e inal es un apoca o enoide de 20 á omos de ca bono, p oceden e no malmen e de la o u a simé ica del β-ca o eno ( igu a 4b) (Von Lin ig, 2012). Además del p ecu so de o os apoca o enoides, el e inal es el c omó o o de las opsinas, una ex ensa amilia de o o ecep o es de memb ana con di e en es unciones en los p incipales g upos axonómicos, an o en bac e ias y a queas como en euca io as (E ns e al., 2014). En los animales, las opsinas desempeñan un papel undamen al en la isión, ya que son esponsables de la de ección de luz en la e ina. Muchos hongos poseen ambién p o eínas de la amilia de las opsinas, supues amen e dependien es de e inal pa a eje ce su unción (B own, 2004). En e ellas han ecibido especial a ención NOP-1 en N. c assa (Bieszke e al., 1999; 1999a), OPS en Lep osphae ia maculans (Waschuk e al., 2005) y Ca O (P ado e al., 2004) y OpsA (Es ada y Á alos, 2009) en F. ujiku oi. La p esencia de opsinas sugie e la exis encia en es os hongos de una oxigenasa de ca o enoides capaz de 299 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos Roukas, 2011) o la adición de hyd oxi olueno bu ilado (Nanou y Roukas, 2010) aumen an los ni eles an o de ca alasa y SOD como de β-ca o eno. Sin emba go, dichas ac i idades enzimá icas son meno es en los cul i os mix os que en los cul i os indi iduales, mien as que la adición de inhibido es de ac i idad SOD p oduce un aumen o en el con enido en β-ca o eno (Gessle , Sokolo y Beloze skaya, 2002). Un esul ado especialmen e concluyen e es el aumen o en la esis encia al pe óxido de hid ógeno mani es ado po es i pes de S. ce e isiae a las que se han in oducido a i icialmen e genes pa a la p oducción de ca o enoides (Ukibe e al., 2009). La inducción de la sín esis de ca o enoides po la luz puede es a asociada a un aumen o de la oxidación. En N. c assa, la luz p oduce un e ec o nega i o sob e la espi ación, an o en micelio como en p epa aciones de mi ocond ias, y es e e ec o es más acusado en los mu an es albinos que en los con oles sil es es (Ramadan-Talib y P ebble, 1978). En consonancia con su e ec o pe judicial, la luz aumen a los ni eles de ca alasas y de SOD (Gessle , Sokolo y Beloze skaya, 2002), y además los e ec os del es és oxida i o sob e la sín esis de ca o enoides son sólo pa en es en es as condiciones (Yoshida y Hasunuma, 2004; iigusa, Yoshida y Hasunuma, 2005). Los e ec os pueden se especialmen e acusados en el caso de la adiación UV. Como ya se ha indicado, los conidios de N. c assa acumulan ca o enoides con independencia de la iluminación. Es muy signi ica i o que los conidios albinos sean más sensibles que los pigmen ados a la exposición a luz blanca en p esencia de agen es o osensibilizado es, como el azul de me ileno, o la adiación UV-A en ausencia de es os compues os. En consonancia con es e esul ado, se ha encon ado una co elación en e el con enido en ca o enoides de di e en es es i pes sil es es de Neu ospo a y la la i ud a la que se aisla on (Luque e al., 2012). Las es i pes p oceden es biológico de opsinas úngicas median e expe imen os de mu agénesis di igida no han dado esul ados (Bieszke e al., 1999a; P ado e al., 2004; Es ada y Á alos, 2009), ya que los mu an es mues an eno ipo sil es e en las condiciones de cul i o en labo a o io. Los ca o enoides como an ioxidan es Una ca ac e ís ica especialmen e conocida de los ca o enoides es su po encial como agen es p o ec o es en e al es és oxida i o (Edge, McGa ey y T usco , 1997; Young y Lowe, 2001). Como odos los se es i os, los hongos poseen enzimas des inadas a con a es a las especies eac i as de oxígeno (ROS) o madas po el me abolismo no mal de la célula. En e ellas han ecibido especial a ención las ca alasas y las dismu asas de supe óxido (SOD) (Gessle , Sokolo y Beloze skaya, 2002; Hansbe g, Salas-Lizana y Domínguez, 2012). Sin emba go, nume osas p uebas indi ec as apoyan un papel auxilia de los ca o enoides como p o ec o es del es és oxida i o en hongos de di e en es g upos axonómicos. En muchos casos se ha obse ado una co elación posi i a en e los ni eles de es és oxida i o y la acumulación de ca o enoides. Como ejemplos ep esen a i os, la p esencia de pe óxido de hid ógeno en los cul i os inc emen a la p oducción de β-ca o eno en B. ispo a (Jeong e al., 1999), as axan ina en X. dend o hous (Liu y Wu, 2006) 2 y neu ospo axan ina en N. c assa (iigusa, Yoshida y Hasunuma, 2005) y en F. aquaeduc uum (Bindl, Lang y Rau, 1970). Un e ec o pa ecido se obse a en las es i pes a ec adas en su capacidad de ac ua con a las ROS, como los mu an es ca en es de la enzima SOD-1 (Yoshida y Hasunuma, 2004) o de la ca alasa CAT-3 (Michán, Lledías y Hansbe g, 2003) en N. c assa. En B. ispo a a ios indicios asocian el es és oxida i o al con enido en β-ca o eno: el aumen o de oxígeno en el cul i o (Nanou y 300 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos ube imus y Cys o ilobasidium capi a um son an o más esis en es a la adiación UV-B cuan o mayo es su con enido en ca o enoides (Moliné e al., 2009). Conside ados en su conjun o, es os y o os da os publicados espaldan un e ec o p o ec o de la ca o enoides en e a daños p oducidos po la luz isible y po la adiación UV. de la i udes más al as p oducen menos ca o enoides y sus conidios son más sensibles a la adiación UV. Resul ados pa ecidos se han ob enido en o os hongos. Así, las células de Wangiella de ma i idis que con ienen ca o enoides son más esis en es a la adiación UV que las no pigmen adas (Geis y Szaniszlo 1984), y las es i pes na u ales de Spo obolomyces AGRADECIMIENTOS 301 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos Aasen, A.J. y Jensen, S.L. 1965. Ac a Chem. Scand., 19: 1843-1853. Ádám, A.L., Ga cía-Ma ínez, J., Szücs, E.P., Á alos, J., Ho nok, L. 2011. FEMS Mic obiol. Le ., 318: 76-83. Alcaíno, J., Ba ahona, S., Ca mona, M., Lozano, C., Ma cole a, A., Nikli schek, M., e al. 2008. BMC Mic obiol., 8: 169. Almeida, E.R. y Ce dá-Olmedo, E. 2008. Cu . Gene ., 53: 129-137. Ál a ez, V., Rod íguez-Sáiz, M., De la Fuen e, J.L., Gudina, E.J., Godio, R.P., Ma ín, J.F., e al. 2006. Fungal Gene . Biol., 43: 261-272. A agón, C.M., Mu illo, F.J., De la Gua dia, M.D., Ce dá- Olmedo, E. 1976. Eu . J. Biochem., 63: 71-75. A paia, G., Ca a oli, A., Macino, G. 1995. De . Biol., 170: 626-635. A pin, N., Leb e on, P., Fiasson, J.L. 1966. Bull. Soc. Mycol. F ., 82: 450-459. A pin, N. y Liaaen-Jensen, S. 1967. Bull. Soc. Chim. Biol., 49: 527-536. A ach, N., Fe nández-Ma ín, R., Ce dá-Olmedo, E., Á alos, J. 2001. P oc. Na l. Acad. Sci. USA, 98: 1687-1692. A ach, N., Schmidhause , T.J., Á alos, J. 2002. Mol. Gene . Genomics, 266: 914-921. Aus in, D.G., Bu’Lock, J.D., Wins anley, D.J. 1969. Biochem. J., 113: 34P. Aus in, D.J., Bu’Lock, J.D., D ake, D. 1970. Expe ien ia, 26: 348-349. Á alos, J. y Ce dá-Olmedo, E. 1986. Phy ochemis y, 25: 1837-1841. Á alos, J., Ce dá-Olmedo, E. 1987. Cu . Gene ., 25: 1837- 1841. Á alos, J., Mackenzie, A., Nelki, D.S., B amley, P.M. 1988. Biochim. Biophys. Ac a, 966: 257-265. Á alos, J., Sch o , E.L. 1990. FEMS Mic obiol. Le ., 66: 295-298. Á alos, J., Beja ano, E.R., Ce dá-Olmedo, E. 1993. Me hods Enzymol., 214: 283-294. Á alos, J., Ce dá-Olmedo, E. 2004. En D.K. A o a (ed.). Handbook o Fungal Bio echnology, pp. 367-378. Nue a Yo k: Ma cel Dekke . Á alos, J. y Es ada, A.F. 2010. Fungal Gene . Biol., 47: 930-938. Á alos, J. y Co ochano, L.M. 2013. En D.P. Kasbeka y K. McCluskey (eds.). Neu ospo a: Genomics and Molecula Biology pp. 227-241. No olk: Cais e Academic P ess. REFERENCIAS 302 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos Baima, S., Macino, G., Mo elli, G. 1991. J. Pho ochem. Pho obiol. B., 11: 107-115. Baima, S., Ca a oli, A., Macino, G., Mo elli, G. 1992. J. Pho ochem. Pho obiol. B., 15: 233-238. Ba ba-Os ia, C., Lledias, F., Geo gellis, D. 2011. Euka yo . Cell, 10: 1733-1739. Ba ba o, C., Calissano, M., Pick o d, A., Romano, N., Sandmann, G., Macino, G. 1996. Mol. Gen. Gene ., 252: 353-361. Ba e o, A.F., He ado , M.M., A eaga, P., Gil, J., González, J.A., Alcalde, E., e al. 2011. O g. Biomol. Chem., 9: 7190-7195. Ba ley, G.E., Schmidhause , T.J., Yano sky, C., Scolnik, P.A. 1990. J. Biol. Chem., 265: 16020-16024. Beja ano, E.R., Pa a, F., Mu illo, F.J., Ce dá-Olmedo, E. 1988. A ch. Mic obiol., 150: 209-214. Beja ano, E.R., Á alos, J., Lipson, E.D., Ce dá-Olmedo, E. 1991. Plan a, 183: 1-9. Bhosale, P.B. y Gad e, R. V. 2001. Appl. Mic obiol. Bio echnol., 55: 423-427. Bieszke, J.A., B aun, E.L., Bean, L.E., Kang, S., Na ig, D.O., O ko ich, K.A. 1999. P oc. Na l. Acad. Sci. USA, 96: 8034-8039. Bieszke, J.A., Spudich, E.N., Sco , K.L., Bo ko ich, K.A., Spudich, J.L. 1999a. Biochemis y, 38: 14138-14145. Bindl, E., Lang, W., Rau, W. 1970. Plan a, 94: 156-174. Blakeslee, A.F. 1904. P oc. Am. Acad. A s Sci., 40: 205- 319. Blasco, J.L., Roessink, D., i u iaga, E.A., Esla a, A.P., Galland, P. 2001. J. Plan Res., 114: 25-31. Blomho , R. y Blomho , H.K. 2006. J. Neu obiol., 66: 606- 630. B ei enbach, J., F ase , P.D., Sandmann, G. 2012. Phy ochemis y, 76: 40-45. B own, L.S. 2004. Pho ochem. Pho obiol. Sci., 3: 555-565. Bu mes e , A., Rich e , M., Schul ze, K., Voelz, K., Schach schabel, D., Boland, W., e al. 2007. Fungal Gene . Biol., 44: 1096-1108. Buzzini, P., innocen i, M., Tu che i, B., Libkind, D., an B oock, M., Mulinacci, N. 2007. Can. J. Mic obiol., 53: 1024-1031. Caglio i, L., Cainelli, G., Came ino, B., Mondelli, R., P ie o, A., Quilico, A., e al. 1966. Te ahed on, 22: 175-187. Candau, R., Á alos, J., Ce dá-Olmedo, E. 1991. Appl. En i on. Mic obiol., 57: 3378-3382. REFERENCIAS 303 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos Candau, R., Beja ano, E.R., Ce dá-Olmedo, E. 1991. P oc. Na l. Acad. Sci. USA, 88: 4936-4940. Ca a oli, A., Cogoni, C., Mo elli, G., Macino, G. 1994.. Mol. Mic obiol., 13: 787-795. Cas illo, M., Ga cía-Ma ínez, J., Á alos, J. 2013. Appl. En i on. Mic obiol., 79: 2777-2788. Cas illo, M. y Á alos, J. 2015. PLoS One 10: e0119785. Ce dá-Olmedo, E. 1985. Me hods Enzymol., 110: 220-243. Ce dá-Olmedo, E. y Hü e mann, A. 1986. Angew. Bo ., 60: 59-70. Ce dá-Olmedo, E. 1987. En E. Ce dá-Olmedo y E. D. Lipson (eds.). Phycomyces, pp. 199-222. Cold Sp ing Ha bo : Cold Sp ing Ha bo Labo a o y P ess. Choudha i, S.M., Anan hana ayan, L., Singhal, R.S. 2008. Bio esou . Technol., 99: 3166-3173. Co ochano, L.M. y Ga e, V. 2010. Fungal Gene . Biol., 47: 893-899. Cse ne ics, A., Nagy, G., i u iaga, E.A., Szeke es, A., Esla a, A.P., Vág ölgyi, C., e al. 2011. Fungal Gene . Biol., 48: 696-703. Czempinski, K., K u , V., Wös emeye , J., Bu mes e , A. 1996. Mic obiology, 142: 2647-2654. Daub, M.E. y Payne, G.A. 1989. Phy opa hology, 79: 180-185. Da oli, P., Mie au, V., Webe , R.W.S. 2004. Appl. Biochem. Mic obiol., 40: 392-397. De Fabo, E.C., Ha ding, R.W., Sh opshi e J ., W. 1976. Plan Physiol., 57: 440-445. De la Gua dia, M.D., A agón, C.M., Mu illo, F.J., Ce dá- Olmedo, E. 1971. P oc. Na l. Acad. Sci. USA, 68: 2012-2015. De Miguel, T., Calo, P., Díaz, A., Villa, T.G. 1997. Mic obiologia, 13: 67-70. Degli-innocen i, F. y Russo, V.E. 1984. J. Bac e iol., 159: 757-761. Díaz-Sánchez, V., Es ada, A.F., T au mann, D., Al-Babili, S., Á alos, J. 2011. FEBS J., 278: 3164-3176. Díaz-Sánchez, V., Es ada, A.F., T au mann, D., Limón, M.C., Al-Babili, S., Á alos, J. 2011a. PLoS One, 6: e21948. Domínguez-Bocaneg a, A.R., Ponce-Noyola, T., To es- Muñoz, J.A. 2007. Appl. Mic obiol. Bio echnol., 75: 783-791. Domonkos, i., Kis, M., Gombos, Z., Ughy, B. 2013. P og. Lipid Res., 52: 539-561. REFERENCIAS 304 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos Dong, W., Tang, x., Yu, Y., Nilsen, R., Kim, R., G i i h, J., e al. 2008. PLoS One, 3: e3105. Edge, R., McGa ey, D.J., T usco , T.G. 1997. J. Pho ochem. Pho obiol. B., 41: 189-200. Eh ensha , M. y Daub, M.E. 1994. Appl. En i on. Mic obiol., 60: 2766-2771. El-Jack, M., Mackenzie, A., B amley, P.M. 1988. Plan a, 174: 59-66. E ns , O.P., Lodowski, D.T., Els ne , M., Hegemann, P., B own, L.S., Kando i, H. 2014. Chem. Re ., 114: 126- 163. Esla a, A.P., Ál a ez, M.i., Ce dá-Olmedo, E. 1974. Eu . J. Biochem., 48: 617-623. Es ada, A.F. y Á alos, J. 2008. Fungal Gene . Biol., 45: 705-718. Es ada, A.F., Maie , D., Sche zinge , D., Á alos, J., Al- Babili, S. 2008a. Fungal Gene . Biol., 45: 1497-1505. Es ada, A.F., Youssa , L., Sche zinge , D., Al-Babili, S., Á alos, J. 2008b. Mol. Mic obiol., 69: 1207-1220. Es ada, A.F. y Á alos, J. 2009. J. Mol. Biol., 387: 59-73. Es ada, A.F., B e o , T., Mengel, C., Díaz-Sánchez, V., Alde , A., Al-Babili, S., e al. 2010. Fungal Gene . Biol., 46: 803-813. Flo es, R., Ce dá-Olmedo, E., Co ochano, L.M. 1998. Phycomyces. Pho ochem. Pho obiol., 67: 467-472. F ase , P.D. y B amley, P.M. 1994. Biochim. Biophys. Ac a, 1212: 59-66. F ase , P.D., Ruiz-Hidalgo, M.J., López-Ma as, M.A., Ál a ez, M.i., Esla a, A.P. B amley, P.M. 1996. Biochim. Biophys. Ac a, 1289: 203-208. F ase , P.D., Miu a, Y., Misawa, N. 1997. J. Biol. Chem., 272: 6128-6135. F engo a, G.i. y Beshko a, D.M. 2009.. J. Ind. Mic obiol. Bio echnol., 36: 163-180. Ga bayo, i., Vílchez, C., Na a-Saucedo, J.E., Ba bo in, J.N. 2003. Enzyme Mic ob. Technol., 33: 629-634. Ga cía-Ma ínez, J., Ádám, A.L., Á alos, J. 2012. PLoS One, 7: e28849. Geis, P.A. y Szaniszlo, P.J. 1984. Mycologia, 76: 268-273. Geo giou, C.D., Tai is, N., Polyc a is, A. 2001. Mycol. Res., 105: 1110-1115. Geo giou, C.D., Ze oudakis, G., Tai is, N., Ko na os, M. 2001a. Fungal Gene . Biol., 34: 11-20. Gessle , N.N., Sokolo , A. V, Y., B. V, Beloze skaya, T.A. 2002. Appl. Biochem. Mic obiol., 38: 205-209. Goldie, A.H. y Subden, R.E. 1973. Biochem. Gene ., 10: 275-284. REFERENCIAS 311 15. Biosín esis de ca o enoides en hongos We zel, J., Scheibne , O., Bu mes e , A., Schimek, C., Wös emeye , J. 2009. Euka yo . Cell, 8: 88-95. Will, O.H., Ga be , E.D., Kezdy, F.J. 1984. Cu . Mic obiol., 10(2): 57-63. Will, O.H. y Newland, N.A. 1985. Bo . Gaz., 146: 204-207. Yang, Q. y Bo ko ich, K.A. 1999. Gene ics, 151: 107-117. Yoshida, Y. y Hasunuma, K. 2004. J. Biol. Chem., 279: 6986-6993. Young, A.J. y Lowe, G.M. 2001. A ch. Biochem. Biophys., 385: 20-27. Youssa , L. y Á alos, J. 2007. Cu . Gene ., 51: 19-30. Youssa , L., Schmidhause , T.J., Á alos, J. 2005. Mol. Mic obiol., 55: 828-838. Zaloka , M. 1955. A ch. Biochem. Biophys., 56: 318-325. Zaloka , M. 1957. A ch. Biochem. Biophys., 70: 568-571. REFERENCIAS