Criptosporidiosis

1" ! " " " " " " " " " " " " " " " " " " TFG"expe imen al" CRIPTOSPORIDIOSIS " Ma a"A güeso"Ruiz" """""" Facul ad"de"Fa macia,"Uni e sidad"de"Se illa" 2" ! " Ma a"A güeso"Ruiz"" G ado"en"Fa macia" Facul ad"de"Fa macia,"Uni e sidad"de"Se illa" T abajo"de"Fin"de"G ado:"CRIPTOSPORIDIOSIS" TFG"de"ca ác e "expe imen al" Depa amen o"de"Mic obiología"y"Pa asi ología"(Á ea"de"Pa asi ología)" Tu o a"del" abajo:"Dña"Concepción"A iza"As ol i" P esen ación"en"Se illa,"Junio"de"2016"" " 1" ! RESUMEN- La"c ip ospo idiosis"es"una"en e medad"pa asi a ia"que"a ec a" an o"a"animales"como"al" homb e"y"que"es" econocida"como"una"de"las"causas"más"impo an es"de"dia ea"a"ni el" mundial." Es á" p oducida"po " especies" del" géne o" C yp ospo idium,- un" p o ozoo" descubie o"hace"más"de"cien"años"que"in ec a"las"células"in es inales"y"que"se"puede" ansmi i " an o"de"pe sona"a"pe sona"como"de"animal"a"pe sona"y" ambién"median e" inges ión"de"alimen os"o"agua"con aminada."" La" sin oma ología" de" la" en e medad" incluye" no malmen e" una" dia ea" acuosa" abundan e"y"en"ocasiones"dolo "abdominal,"aunque"es" ambién" ecuen e"que"cu se"de" o ma" asin omá ica," sob e" odo" en" pacien es" inmunocompe en es." A" pesa " de" que" puede"a ec a "a"cualquie "géne o,"a"cualquie "edad"y"de"no" ene "una"zona"endémica" conc e a,"es"especialmen e"conside ada"de"mayo " iesgo"en"algunos"g upos"especí icos" como"son"pacien es"inmunocomp ome idos"y"niños,"donde"en"algunos"casos"puede" llega "a"se "mo al."" Po "es e"mo i o,"en"es e" abajo"se"es udia"la"p e alencia"de"es a"en e medad"en"uno" de" es os" g upos," más" conc e amen e" en" niños" que" acuden" a" gua de ías" donde" la" ansmisión"del"pa ási o"median e"la" ía" ecalZo al"es"de"g an"impo ancia."Pa a"lle a lo" a"cabo"se" oma on"mues as" ecales"de"cada"uno"de"los"niños"y"se"analiza on"en"el" labo a o io."El"núme o"de"mues as" ue"de"112,"pa a"su"análisis"se"u ilizó"el"mé odo"de" inción" de" ZiehlZNeelsen" modi icado" o" Kinyoun" y" pos e io men e" se" obse a on" al" mic oscopio"pa a"e alua "la"p esencia"de"ooquis es"de"C yp ospo idium-sp-"en"cada"una" de"las"mues as" omadas." Palab as"cla e:"C ip ospo idiosis,"gua de ía,"p e alencia,"C yp ospo idium." " " " 2" ! ÍNDICE- INTRODUCCIÓN-.................................................................................................................-3" " El"pa ási o"............................................................................................................................."4" " Epidemiología"......................................................................................................................."8" " Mani es aciones"clínicas"de"la"en e medad"......................................................................."13" " Diagnós ico"........................................................................................................................."16" " T a amien o"........................................................................................................................"17" " P e ención".........................................................................................................................."19" - OBJETIVOS-.......................................................................................................................-21" - METODOLOGÍA-................................................................................................................-21" - RESULTADOS-Y-DISCUSIÓN-..............................................................................................-23" " Resul ados".........................................................................................................................."23" " Discusión"............................................................................................................................"26" - CONCLUSIONES-...............................................................................................................-28" - BIBLIOGRAFÍA-..................................................................................................................-28" " " " " " " " " 3" ! INTRODUCCIÓN- La"c ip ospo idiosis"es"una"en e medad"causada"po "C yp ospo idium-sp,"pa ási o"que" ue"desc i o"po "p ime a" ez"en"1907"cuando"Tyzze "descub ió"la"in es ación"en"el" ac o" diges i o"de"un" a ón"que"causaba"una"impo an e"dia ea"(Na a oZiZMa inez"y"cols.," 2011)(Gue an "y"cols.,"2016),"siendo"más" a de"en"el"año"1971"cuando"se"desc ibe"po " p ime a" ez" la" in es ación" en" ganado" bo ino" jo en" p esen ando" como" sín oma" una" dia ea"in ensa"y"c ónica,"la"cual"se"asoció"a"la"p esencia"de"C yp ospo idium- sp,"en" conc e o"C yp ospo idium-pa um-(O egaZPie es"y"cols.,"2009)." A"pa i "de"es e"momen o"se"empieza"a" econoce "la"impo ancia"de"es a"en e medad" en" el" ámbi o" animal" a ec ando" an o" a" es e" ipo" de" ganado" como" a" pollos," a as" y" a ones," pe os," ga os," ce dos" y" monos" (Cobo," 2006)," es ableciéndose" en onces" la" c ip ospo idiosis"en"aquella"época"como"una"zoonosis"de"g an"impo ancia." Tu ie on"que"pasa "años"has a"que"en"1976"apa ecie an"los"p ime os"casos"de"in ección" en" humanos," conc e amen e" dos" casos:" el" p ime o," el" de" un" niño" de" es" años" que" p esen aba" en e ocoli is" y" al" que" se" le" ealizó" una" biopsia" ec al" de ec ándose" la" p esencia"de"C yp ospo idium-sp-(Nime"y"cols.,"1976);"y"el"segundo,"el"de"un"pacien e"de" ein a"y"nue e"años"con"dia ea"in ensa"al"que" ambién"se"le"de ec ó"la"p esencia"de" es e"pa ási o"(Meisel"y"cols.,"1976)."Más" a de"en"el"año"1982"apa ece"el"p ime "caso"de" in ección" en" humanos" VIH" posi i o" econociéndose" en onces" como" un" pa ási o" opo unis a" y" ele ando" la" asa" de" mo alidad" de" es e" ipo" de" pacien es" inmunodep imidos"(Na a oZiZMa inez"y"cols.,"2011)." Uno"de"los"episodios"más"signi ica i os"asociado"a"es a"en e medad" ue"la"epidemia" ocu ida"en"Milwaukee"en"1993"que"a ec ó"a"más"de"cua ocien as"mil"pe sonas"que" acusaban"dia ea"in ensa"y"o os"sín omas"que"du a on"al"menos"nue e"días"(Ko ha ade," 2011),"y"que" ue"debida"a"la"inges a"de"agua"con aminada,"descub iéndose"en onces"la" esis encia"de"es e"pa ási o"al" a amien o"con"clo o"que"se"le"había"aplicado"a"es e"agua" (Mac"Kenzie"y"cols.,"1994)." 4" ! EL"PARÁSITO"" C yp ospo idium"sp- es" un" géne o" pe enecien e" al" phylum" Apicomplexa," clase" Espo ozoea," o den" Eucoccidiida," subo den" Eime iina" y" amilia" C yp ospo didiidae." Den o" de" es e" géne o" exis en" nume osas" especies," en" conc e o" se" han" desc i o" ein icinco"de"las"cuales"dos"de"ellas,"C.-pa um"y"C.-hominis,"a ec an"al"se "humano-y- ambién"o as"especies"como-C.-mu is-y-C.-meleag idis-que"a ec an"a"mamí e os"y"a es" espec i amen e." C yp ospo idium-pa um"es"la"especie" esponsable"de"la"c ip ospo idiosis"en"humanos," animales"domés icos,"y"de"g anja,"de"ahí"la"impo ancia"de"su" es udio."La" o ma"de" in ección"se"p oduce"median e"la"inges ión"de"ooquis es"po "pa e"del"hospedado ."Es a" en e medad"se"puede" ansmi i "de"animal"a"pe sona,"de"pe sona"a"pe sona"o"median e" la"inges ión"de"alimen os"o"agua"con aminada"(Cobo,"2006),"siendo"es a"úl ima"una"de" las" causas" más" ecuen es" epo ando" un" o al" de" 165" epidemias" de" o igen" híd ico" (Bece il,"2014)." CICLO"BIOLÓGICO" El"ciclo"de" ida"de"es e"pa ási o"(Ilus ación"1)"se"p oduce"po "comple o"en"un"solo" hospedado "y"da"comienzo"una" ez"que"se"ingie en"ooquis es"espo ulados,"los"cuales" llegan"al"in es ino"delgado"y"da"comienzo"el"ciclo."" " ILUSTRACIÓN"1."CICLO"BIOLÓGICO"CRYPTOSPORIDIUM-SP.(CENTERS"FOR"DISEASE"CONTROL"AND" PREVENTION"(CDC),"2016)"" 5" ! •!Desenquis amien o" Consis e"en"la" o u a"de"la"pa ed"que"en ol ía"a"los"ooquis es,"libe ando"de"es a"mane a" a"los"cua o"espo ozoí os"que"se"encuen an"en"el"in e io "(Gue an "y"cols.,"2016)."Es e" desenquis amien o" puede" es a " desencadenado" po " di e en es" ac o es" como" la" exposición"a"agen es" educ o es"y"enzimas"diges i as"una" ez"que"ha"llegado"al"in es ino" delgado,"lo" cual" causa" a iaciones" de" pH" y" empe a u a" que" pod ían" a o ece " es e" p oceso,"aunque"de"igual"mane a"se"pod ía"da "de" o ma"espon ánea"(Cacciò,"Widme ," 2014)(Cobo,"2006)." •!In asión-y-a aque" Una" ez"que"los"espo ozoí os"son"libe ados"se"p oduce"el"siguien e"paso"en"el"ciclo,"el" cual" consis e" en" la" in asión" de" las" células" epi eliales" del" in es ino." Los" espo ozoí os" ienen"una"mo ología"especí ica,"poseen"un"complejo"apical"que"es"un"o gánulo"de" pene ación"celula "g acias"al"cual"se"lle a"a"cabo"la"in asión"de"la"célula"epi elial"del" hospedado ." El" espo ozoí o" queda" en uel o" en" una" acuola" pa asi ó o a" que" se" encuen a"al"bo de"del"cepillo"pe o"debajo"de"la"memb ana"de"la"célula"epi elial,"de" o ma" que" la" ubicación" de" C yp ospo idium- sp"es" in acelula " y" ex aci oplasmá ica" (Faye ,"Xiao,"2007)(Cobo,"2006)."" A"medida"que"el"p oceso"a anza,"el"espo ozoí o"pasa"a" oma "una" o ma"más"es é ica"y" se"le"da"el"nomb e"de" o ozoí o"(Bece il,"2014)." •!Rep oducción-asexual-(me ogonia):"" Consis e"en"la"di isión"nuclea "del" o ozoí o"dando"luga "a"una"célula"llamada"me on e" ipo" I" que" puede" con ene " seis" u" ocho" núcleos" que" da án" luga " a" me ozoí os," es uc u almen e" pa ecidos" a" los" espo ozoí os." Es os" me ozoí os" madu os" salen" del" me on e"y"pueden" ol e "a"in ec a "células"epi eliales"y" ol e "a"empeza "un"ciclo"asexual" o" ambién"pueden"ocu i "dos"di isiones"nuclea es"y"con e i se"en"me on es" ipo"II,"los" cuales"da án"cua o"me ozoí os"(Bece il,"2014)." "" 6" ! •!Rep oducción-sexual-- Una" ez"los"me ozoí os"de"segunda"gene ación"son"libe ados"al"lumen"del"in es ino"y" uel en" a" in ec a " las" células" epi eliales," comienza" la" ep oducción" sexual" donde" se" di e encia" en e" game o" emenino" (mac ogame o)" y" game o" masculino" (mic ogamen o)," siendo" den o" de" es e" úl imo" donde" se" p oducen" a ias" di isiones" dando"luga "a"los"mic ogame oci os"que" iajan"has a"el"mac ogame o,"lo"in aden"y"se" p oduce"la" ecundación"dando"luga "al"cigo o"(Gue an "y"cols.,"2016)(Bece il,"2014)" •!Espo ogonia- Es e"cigo o"que"se"ha" o mado"puede"desa olla se"de"dos"mane as"di e en es."Po "un" lado"se"puede"p oduci "un"ooquis e"espo ulado,"con"una"pa ed"g uesa"y"di e enciada"y" que"con iene"cua o"espo ozoí os."Es e"ooquis e"sale"del"o ganismo"del"hospedado "po " las"heces,"con i iéndose"en"la" o ma"in ec an e"(Gue an "y"cols.,"2016)."Es os"ooquis es" que"salen"al"ex e io "pueden"sob e i i "po "meses" ue a"del"o ganismo"has a"que"se" uel a"a"p oduci "o a"in ección," odo"ello"g acias"a"esa"pa ed"que"los"p o ege"(Gómez," 2010)." Po "o o"lado"se"puede"p oduci "un"ooquis e"inmadu o"con"una"pa ed"mucho"más"débil" que"la"del"ooquis e"an e io men e"mencionado"y"que"es"causan e"de"la"au oin ección" del"hospedado "(Pé ez,"2006)."Es e"aspec o"es"muy"impo an e"den o"del"ciclo"ya"que" es"una"de"las"causas"más"impo an es"po "las"que"se"puede"p oduci "la"en e medad"de" o ma"in ensa"e"impa able,"sob e" odo"en"pe sonas"inmunodep imidas." MORFOLOGÍA"DE"LA"FORMA"INFECTANTE" Como"ya"hemos"señalado"an e io men e,"el"ooquis e"espo ulado"es"la" o ma"in ec an e" an o"de"se es"humanos"como"de"animales"y"es"po "eso"po "lo"que"es"impo an e"conoce " su"mo ología,"sob e" odo"a"la"ho a"de"la"iden i icación"del"pa ási o." El"ooquis e"de"C yp ospo idium-pa um"mide"en e"4,5Z5,5"µm,"se"ca ac e iza"po "se " es é ico"y"po " ene "una"pa ed"g uesa,"aunque"la"capa"más"supe icial"de"es a"pueda"se " 7" ! algo"i egula "(Ilus aciones"2"y"3)."También"se"pueden"obse a "en"su"in e io "los"cua o" espo ozoí os"mó iles"en" o ma"de"banana"(Gómez,"2010)""(Faye ,"Xiao,"2007)." """"""""""""""""""""""""" ILUSTRACIÓN"2"Y"3."OOQUISTES"DE"CRYPTOSPORIUM-PARVUM"AL"MICROSCOPIO"TEÑIDOS"MEDIANTE" MÉTODO"DE"TINCIÓN"KINYOUN(BECERRIL,"2014)" " Es"impo an e"sabe "las"ca ac e ís icas"p incipales"de"es a" o ma"de"in ección"(Tabla"1)," como" el" amaño" que" p esen an" los" ooquis es," el" si io" de" in ección" y" los" posibles" hospedado es." De" es a" mane a" se" puede" di e encia " de" mejo " o ma" las" dis in as" especies"de"C yp ospo idium-sp."" ESPECIE- TAMAÑO-OOQUISTES- (µm)- SITIO-DE-INFECCIÓN- HOSPEDADOR- C.-pa um- 4,5"x"5,5" In es ino"delgado" Mamí e os" C.-hominis- 4,5"x"5,5" In es ino"delgado" Humanos" C.-mu is- 5,6"x"7,4" Es ómago" Mamí e os" C.-bailey- 4,6"x"6,2" T áquea,"bolsa"de" ab icio,cloaca" Gallináceas" C.-meleag idis- 4,5Z4,0"x"4,6Z5,2" In es ino" Pa os" C.-suis- 5,05"x"4,41" In es ino"delgado" Ce dos" C.-ande soni- 5,5"x"7,4" Es ómago" Bo inos"y"camellos" " TABLA"1."CARACTERÍSTICAS"PRINCIPALES"DE"DIFERENTES"ESPECIES"DE"CRYPTOSPORIDIUM-SP"(GÓMEZ," 2010) 14" ! o ma"más"se e a"no"solo"a ec ando"al" ac o"gas oin es inal"sino"diseminándose"a" o as"pa es"del"o ganismo." La" inmunosup esión" de" es e" ipo" de" pacien es," no malmen e" VIH" posi i os," queda" pa en e" cuando" p esen an" unos" ni eles" de" lin oci os" CD4" <"200" cél/mm3" (Cacciò," Widme ,"2014)."En"es os"casos"la"en e medad"se"desa olla"de" o ma"más"pe sis en e," donde"además"de"p esen a "los"sín omas" ípicos"an e io men e"desc i os"de" o ma"más" du ade a"y"ag esi a," ambién"puede"implica "la"apa ición"de"nue as"pa ologías."La"causa" de" odo"ello" iene"dada"po "la"au o"in es ación"del"pacien e"ya"que,"al"p esen a "un" núme o" an"bajo"de"lin oci os,"los"ooquis es"de"pa ed"más"delgada"que" esul an"del"ciclo" de" ida"del"pa ási o"pueden" ol e "a"ac ua "in adiendo"los"en e oci os"del"in es ino," ol iendo"a"empeza "el"ciclo." En e"las"a ecciones"que"pueden"apa ece "en"es e" ipo"de"pacien es"podemos"encon a " la"dia ea"ca ac e ís ica"de"es e"pa asi ismo"pe o"de"una"mane a"más"in ensa"llegando"a" elimina "más"de"10"li os"de"heces"líquidas"al"día"causando" ene "que"lle a "a"cabo"una" ehid a ación"del"pacien e"(Bece il,"2014)," ambién"puede"apa ece "sang e"y"moco"en" las"heces,"p oblemas"nu icionales,"dolo "abdominal"bas an e"in enso"y"pé dida"de"peso" no o ia"(Cobo,"2006)."" Po "o o"lado," ambién"es os"pacien es"pueden"p esen a "sín omas" elacionados"con" a ecciones"en"el" ac o"bilia "como" ómi os,"ic e icia"y"en"algunos"casos" ieb e."En"un" es udio" ealizado" en" España" a" 43" pacien es" VIH" posi i os," 8" de" ellos" p esen aban" colangi is" escle osan e" y" colecis i is" (LópezZVélez" y" cols.," 1995)." También" puede" p esen a se" in ección" en" los" conduc os" panc eá icos" lo" que" p o oca" panc ea i is" (Bece il,"2014)." Po " úl imo," en" algunos" casos" se" han" p esen ado" p oblemas" pulmona es" en" cie os" pacien es""mani es ando" os," onque a,"disnea"y"sibilancias"en e"o os."Es a"posible" a ec ación"puede"debe se"al"aspi ado"de"los"mic oo ganismos,"o"po "la"p esencia"de" o os" agen es" in ec an es" (Cobo," 2006)." En" el" es udio" an e io men e" mencionado" (LópezZVélez"y"cols.,"1995)"en"7"de"los"43"pacien es"que"p esen aban" ambién"dia ea," se" encon ó" C yp ospo idium- sp" en" el" análisis" del" espu o," aunque" no" odos" ellos" p esen aban"sín omas"de"a ección" espi a o ia."" 15" ! ENFERMEDAD"EN"NIÑOS" Es"o o"de"los"g upos"más"p edispues os"a"desa olla "la"en e medad"de"una" o ma"más" signi ica i a."Es á"comp obado"en"nume osos"es udios"que"los"pacien es"meno es"de"5" años" ienen"una"mayo "p e alencia"en"cuan o"a"la"c ip ospo idiosis"se" e ie e"(Benne " y"cols.,"2014)."" Los"sín omas"que"p esen an"son"los"que"se"dan"no malmen e."La"dia ea"sigue"siendo"el" p incipal" aunque" se" han" no ado" algunas" di e encias" dependiendo" de" la" especie" que" p o oca"la"in ección,"siendo"C.-hominis-la"que"p o oca"dia ea"acompañada"de" ómi os," males a "y"una"al a"exc eción"de"ooquis es"po "las"heces,"mien as"que"C.-pa um-solo" p o oca"dia ea"y"po "lo" an o"una"in ección"más"le e"(Gómez,"2010)(Cacciò,"Widme ," 2014)."No"siemp e" ienen"po "que"da se"di e encias"sin omá icas"apa en es" elacionadas" con"la"especie" que" p o ocó" la" in ección," en" un" es udio" ealizado" en" España" a" niños" meno es"de"7"años"que"p esen aban" odos"ellos"dia ea"y"males a ,"se" oma on"400" mues as" esul ando"62"de"ellas"posi i as"y"den o"de"esas"C.-pa um-es aba"en"la"mi ad" ellas"(50%)"y"siendo"más"p e alen e"en"niños"que"en"niñas"(Ma ínZAmpudia"y"cols.," 2012)."" "Además"de"es os"sín omas" ambién"se"ha"de ec ado"una"disminución"del"peso"en"niños." En"un"es udio"a"niños"pe uanos"se"mues a"una"pé dida"de"peso"du an e"el"p ime "mes" después"de"la"in ección"(Gómez,"2010)(Huang"y"cols.,"2004),"lo"que"nos"lle a"a"pensa " que" puede" p o oca " malnu ición" en" algunos" casos," y" sumado" a" odos" los" sín omas" an e io men e"desc i os,"hacen"que"la"en e medad"pueda"llega "a"se " a al."" También" es" común" que" se" den" casos" en" los" que" los" niños" p esen en" o o" ipo" de" pa ologías" como" sa ampión" o" ubeola" (Bece il," 2014)" y" eso" p o oque" un" es ado" inmunológico" de icien e" y" se" p oduzca" la" au o" in es ación" de" C yp ospo idium- sp" ag a ando"y"ala gando"aun"más"la"en e medad"y"suponiendo"un"pelig o"g a e"pa a"la" salud"del"pacien e." " " 16" ! DIAGNÓSTICO" A"cualquie "pacien e"que"p esen e"los"sín omas"dia eicos"y"de"males a "pe sis en e" du an e"un" iempo"conside ado,"se"le"debe ía" ealiza "un"es udio"especí ico"pa a" alo a " la"p esencia"del"pa ási o"ya"que"es"una"en e medad"eme gen e,"cada" ez"apa ece"con" más" ecuencia"y"es"pelig osa"en"de e minados"casos." "El"diagnós ico"de"C yp ospo idium-sp"se"puede" ealiza "po "di e en es"mé odos,"en e" los"más"usados"se"encuen an"los"desc i os"a"con inuación:" •!Mé odo-de- inción-ZiehlbNeelsen-modi icado-o-Kinyoun- Es e"mé odo"de" inción"di e encial" ue"descubie o"en"1981"(Hen iksen,"Pohlenz,"1981)" y"desde"en onces"es"uno"de"los"más"u ilizados,"sob e" odo"en"labo a o ios"clínicos"donde" se"necesi a"un"mé odo" ápido"de"di e enciación."" El" es udio" se" ealiza" sob e" mues as" de" heces" conse adas." Se" u iliza" un" colo an e" especí ico" de" Kinyoun" y" azul" de" me ileno." Al" ealiza " la" inción" los" ooquis es" de" C yp ospo idium-sp"debe án"obse a se"al"mic oscopio"apa eciendo"de"un"colo " osa" in enso"en"con as e"con"el" es o"de"la"mues a,"que"apa ece"de"colo "azul"o" iole a" azulado."Es e"mé odo"aunque"es"ba a o"y" ápido," iene" a ias"des en ajas"como"el"hecho" de"se "bas an e"labo ioso"y"de"meno "sensibilidad"que"o os"mé odos.(Omo uyi"y"cols.," 2014)"(Valenzuela"y"cols.,"2014)." •!ELISA- La"de ección"del"an ígeno"empleando"an icue pos"monoclonales,"p esen a"una"mayo " sensibilidad" y" mayo " especi icidad" que" el" mé odo" en" mic oscopio" an e io men e" explicado"(Elgun,"Kol as,"2011)."Po "o o"lado,"p esen a"una"des en aja"llama i a"ya"que" a" a és" de" es e" mé odo" no" podemos" sabe " el" es ado" en" el" que" se" encuen a" la" en e medad,"es"deci ,"si"es á"ac i a,"pasi a"o"si"es"de"una"in ección"an e io "(Omo uyi"y" cols.,"2014)." " " 17" ! •!PCR- Es e"mé odo"de"ampli icación"u iliza"cebado es"especí icos"pa a"C yp ospo idium-sp,"lo" que"lo"con ie e"en"o o"de"los"mé odos"más"sensi i os"y"especí icos"(Rod iguez,"Royo," 2001)." Se" u iliza" en" muchos" casos" como" mé odo" pa a" de ec a " y" di e encia " especies" de" C yp ospo idium-sp"una" ez"que"ya"se"ha"con i mado"la"p esencia"del"pa ási o"en"una" mues a"pe o"no"ha"sido"posible"la"iden i icación"de"la"especie." MÉTODO" SENSIBILIDAD*" VENTAJAS" DESVENTAJAS" "" "" Fácil"uso"y"económico" No"especí ico" TINCIÓN"ZZN" Baja" Podemos"de ec a "si"la" in ección"es á"ac i a" No"podemos"iden i ica "la" especie"con"p ecisión" " " Iden i icación"de"o o" ipo"de" pa ási os" " ELISA" Al a" Especí ica"y" ápida" No"dis inción"en e"in ección" ac i a"o"pasi a" PCR" Al a" De ección"especí ica"del" pa ási o" Equipamien o"ca o"y"p oceso" la go" " " Muy"especí ica"y" ápida" No"dis inción"en e"in ección" ac i a"o"pasi a" " " " " *Sensibilidad"basada"en" a ios"es udios"compa a i os"de"di e en es" écnicas"de"diagnós ico"(Sunno el" y"cols.,"2006)"(Omo uyi"y"cols.,"2014)." TABLA"6."COMPARATIVA"ENTRE"LOS"DISTINTOS"MÉTODOS"DE"DIAGNÓSTICO(SUNNOTEL"Y"COLS.,"2006)" TRATAMIENTO" La"en e medad"puede"cu sa "de"di e en es"modos,"como"ya"hemos"explicado."Puede"se " asin omá ica,"apa ece "solo"sín omas"de"dia ea"y"males a "o"puede"se "más"g a e"en" cie os" casos" conc e os." Es" po " odo" eso" po " lo" que" no" siemp e" se" equie e" de" un" a amien o,"y"que,"cuando"se" equie e,"di ie e"dependiendo"del"es ado"inmunológico" en"el"que"se"encuen e"el"pacien e."En"algunos"casos"en"inmunocompe en es," an o" adul os"como"niños,"si"la"dia ea"es"algo"más"in ensa"pe o"no" p esen a"ningún"o o" sín oma"g a e,"bas a ía"solo"con" ehid a ación"y" eposición"de"elec oli os."" 18" ! Po " el" con a io," en" el" caso" de" pacien es" con" una" sin oma ología" más" g a e" o" en" inmunode icien es,"sí"se" equie e"la"adminis ación"de"un" a amien o" a macológico" (Bece il,"2014)." En"es e"aspec o,"hay"una"g an"di icul ad"a"la"ho a"de"encon a " á macos"e icaces" en e" a"C yp ospo idium-sp"debido"a"que"la" acuola"pa asi ó o a"que"lo"engloba"du an e"las" p ime as" e apas" de" su" ciclo" de" ida," lo" p o ege" en e" a" la" acción" de" an ibió icos" y" an ipa asi a ios"(Gómez,"2010)(Bece il,"2014)."Se"han" ealizado"es udios"de"di e sas" sus ancias"pa a"comp oba "su"ac i idad"con a"el"pa ási o,"pe o"bien"es"cie o"que"no"se" ha"comp obado"una"e icacia"signi ica i amen e"al a"en"ninguno"de"ellos." La" ni azoxanida" es" la" sus ancia" más" e icaz" de" odas" las" p obadas." Se" han" ealizado" es udios"en" odo" ipo"de"pacien es,"en"los"p ime os"de"ellos"si"se" eía"un"e ec o" educ o " en"cuan o"a"la"du ación"de"la"dia ea"y"la"expulsión"de"ooquis es"con" espec o"a"los" pacien es"que"se" a aban"con"placebo"(Abubaka "y"cols.,"2008),"incluso"en"algunos"casos" emi ie on" los" sín omas" en" su" o alidad." La" acción" de" es e" á maco" consis e" en" la" inhibición" de" la" pi u a o" sin asa," la" cual" in e iene" en" el" me abolismo" anae obio." También"se"ha"demos ado"la"ac i idad"del" á maco"disminuyendo"el"c ecimien o"de"los" o ozoí os"y"que,"ac uando"en"combinación"con"o as"sus ancias"como"la"azi omicina," aumen a" aún" más" su" acción" con" espec o" a" cuando" se" usa" de" o ma" aislada" (Fox," Sa a ola z,"2005)." Po "o o"lado,"en"es udios"más" ecien es"en"pacien es"VIH"posi i os"no"se"ha"obse ado" esa" educción" sin oma ológica," po " lo" que" aún" se" necesi a" es udia " en" mayo " p o undidad"la"e ec i idad"del"an ipa asi a io"en"es e" ipo"de"pacien es"(Gómez,"2010)." La"posología" a ía"en" elación"a"la"edad"del"pacien e"(Tabla"7)." EDAD- DOSIS- DURACIÓN-DEL-TRATAMIENTO- 12Z47"meses" 100mg/12h" 3"días" 4Z11"años" 200mg/12h" 3"días" <"11"años" 500mg/12h" 3"días" " " " TABLA"7."POSOLOGÍA"TRATAMIENTO"CON"NITAZOXADINA,"SEGÚN"LA"EDAD"DEL"PACIENTE(FOX," SARAVOLATZ,"2005)" 19" ! O a" de" las" sus ancias" bajo" es udio" es" la" pa omomicina," que" ha" demos ado" su" e ec i idad" en e"a"las"a ecciones"in es inales."Ac úa"sob e"los" ibosomas"del"pa ási o" de eniendo"la"sín esis"de"p o eínas."La"dosis"no mal"es"de"500mg/6"ho as"du an e"14" días,"y"en"pacien es"con"a ección"más"se e a"se"u iliza"en"combinación"con"azi omicina" (600"mg)"du an e"28"días"(Rod iguez,"Royo,"2001)."" Cabe" señala " que" la" pa omomicina" puede" p esen a " incompa ibilidad" con" o os" á macos"po "lo"que" iene"que"se "un" a amien o"cuidadoso"y"con olado"(Rod íguez," 2013)." PREVENCIÓN" Pa a" es ablece " algunas" opciones" de" p e ención" y" con ol" hay" que" ene " en" cuen a" cie os"aspec os"como"la" esis encia"de"los"ooquis es"en"el"medio"y"la"baja"concen ación" de"ooquis es"que"se"necesi a"pa a"que"la"in ección"se"lle e"a"cabo"(Gómez,"2010)." Algunas" de" las" medidas" impo an es" a" ene " en" cuen a" (Cobo," 2006)(Bece il," 2014)" (Ga cía"y"cols.,"2004)":" Z!Al"se "una"en e medad"de" ansmisión" ecalZo al"hay"que"se "cuidadoso"con"la" higiene"pe sonal,"e i a "la"con aminación"con"heces" an o"humanas"como"de"animales" que"pueden"se "po ado es"de"la"en e medad." Z!He i "el"agua"du an e"al"menos"un"minu o"an es"de"consumi "y"almacena la"en" ecipien es"limpios."Sob e" odo"si"se" a" oma "cualquie " ege al"o"moluscos,"he i lo" an es"en"agua." Z!Especial"cuidado"en"gua de ías"donde"se"puede"p oduci "con aminación"po "el" pañal"o"en"si ios"donde"se" abaje"con"animales,"deben"de"lle a "un" igu oso"con ol"de" la"higiene." Z!Educación"social"sob e"la"impo ancia"de"la"en e medad"y"de"las"posibles" ías"de" ansmisión."Es"necesa io"po encia "la" igilancia"de"es e"pa ógeno"impulsando" an o"su" decla ación"a" a és"del"Sis ema"de"In o mación"Mic obiológica"como"su"búsqueda"en" b o es"de"e iología"desconocida"compa ibles"con"c ip ospo idiosis"(Ga cía"y"cols.,"2004)." 20" ! Z!U iliza " il os"en"los"g i os"case os."Impo an e"cambia los"pe iódicamen e." Z!Bebe "agua"embo ellada"que"haya"sido" a ada"an e io men e"pa a"elimina "los" ooquis es." El" agua" es" uno" de" los" medios" de" diseminación" más" impo an es," po " ello" se" han" es udiado" a ias"in e enciones""pa a" educi "la"concen ación"de"ooquis es"y" ambién"" dis in os"mé odos"de"de ección"de"los"mismos"(Ga cía"y"cols.,"2004)." En"España"no"hay"una"legislación"que"con emple"es e"aspec o,"no"hay"ninguna"no ma i a" es ablecida"sob e"los"ni eles"de"concen ación" ole ables"pa a"es e"pa ási o"en"agua" pa a"consumo"humano."De"hecho"en"el"año"2010"se" ealizó"un"es udio"en"Galicia"donde" se" analiza on" di e en es" mues as" de" agua" en" las" cuales" se" de ec ó" la" p esencia" de" C yp ospo idium-sp"(Cas oZHe mida"y"cols.,"2010)." En e"las"posibles"in e enciones"que"se"pueden" ealiza "se"encuen a"el" a amien o"de" agua"con"clo o"(clo ación),"el"más"u ilizado"en"España"pe o"que"se"ha"demos ado"que" no"es"e icaz" en e"a"los"ooquis es"de"C yp ospo idium-sp-(Ga cía"y"cols.,"2004)."O as" posibilidades"que"se"han" is o"que" educen"de"mane a"mode ada"los"casos"de"dia ea" p o ocada"po "el"consumo"de"agua"con aminada,"son"los"sis emas"de" il ación"o"la" desin ección"sola "del" agua" (Clasen" y" cols.," 2008)." La" il ación" elimina"las"pa ículas" suspendidas" en" el" agua," es a" se" mezcla" con" coagulan es" que" a o ezcan" la" sedimen ación" y" acili en" la" il ación" de" mane a" que" se" eliminen" más" pa ículas" y" p o ozoos."También"es"ú il"la"ósmosis"in e sa"pa a"la"eliminación"de"ooquis es"(Ga cía"y" cols.,"2004)." Po "úl imo,"o o"mé odo"que"se"puede"usa "es"la"desin ección"sola "del"agua"median e" la" adiación"UV."Es"ú il"pa a"el"agua"de"bebida,"es"un"mé odo" ápido"y"no"deja" esiduos" (Ga cía"y"cols.,"2004)." " " " 21" ! OBJETIVOS- Z!Es udio"de"la"p e alencia"de"C yp ospo idium-sp"en"niños"meno es"de"5"años." Z!Eje cicio"en"el"labo a o io"sob e"el"p oceso"de"de ección"de"C yp ospo idium-sp" en"dis in as"mues as"de"heces." Z!Es udio"pilo o"sob e"uno"de"los"g upos"de" iesgo"de"es e"pa asi ismo,"niños"que" acuden"a"gua de ías." "El"hecho"de"que"sea"una"en e medad"eme gen e"y"que"puede"causa "sín omas"se e os" hace"que"sea"impo an e"lle a "un"seguimien o" egula ,"sob e" odo"en"zonas"geog á icas" o"si ios"especí icos"donde"puede"habe "un"mayo "núme o"de"casos." Las"gua de ías"suponen"un" oco"de"in ección"bas an e"impo an e"ya"que"hay"un"g an" núme o" de" niños" y" cuidado as" en" cons an e" con ac o" y" al" se " una" en e medad" de" ansmisión" ecalZo al"hay"que" ene "especial"cuidado"en"es e" ipo"ci cuns ancias"donde" la"higiene" a"a" ene "un"papel"bas an e"impo an e."" METODOLOGÍA- Al"se "los"niños"uno"de"los"g upos"de" iesgo"de"es a"en e medad,"pa a"lle a "a"cabo"es e" es udio"se" ealizó"una" ecogida"de"mues as"en"di e en es"gua de ías"de"Se illa,"con" p e ia"au o ización" an o"de"los"p ogeni o es"como"de"las"gua de ías,"ob eniéndose"en" o al"112"de"ellas"con"una" echa"de" ecogida"que"comp ende"desde"Feb e o"has a"Mayo" de"2015."Los"únicos"da os"p opo cionados"pa a"el"análisis" ue on"los"nomb es"de"los" suje os"a"es udio,"la"edad,"el"géne o"y"la"gua de ía"a"la"que"pe enecían."En"ningún"caso" se"especi ica"si"el"niño/a"p esen a"algún" ipo"de"sín oma"o"ha"es ado"expues o"a"algún" ac o " ue a"de"lo"no mal." El" ango"de"edad"de"los"niños" ue"desde"6"meses"has a"5"años"de"edad"y"ninguno"de"ellos" p esen ó"algún"signo"especí ico"que"hicie a"indica "la"p esencia"de"C yp ospo idium-sp." 22" ! Pa a"la" ecogida"de"mues as"se"dis ibuye on"en"las"gua de ías"que"pa icipa on"en"el" es udio"el"en ase"adecuado"pa a"la" oma"de"mues as"de"heces"de"cada"niño,"con"su" co espondien e"e ique a"pa a"iden i ica "a"cada"uno"de"ellos"y"especi ica "algunos"da os" ele an es"pa a"el"análisis"de"da os"pos e io ."En"cada"en ase" epa ido"se"incluye on" unos" milili os" de" SAF" (ace a o" de" sodio," ácido" acé ico" y" o mol)" pa a" la" co ec a" conse ación" de" las" mues as" que" después" se" almacena on" en" el" labo a o io" a" empe a u a"ambien e." Dos"de"ellas"queda on"desca adas"del"es udio"ya"que,"aunque"se"especi ica on"los"da os" de"los"niños,"las"mues as"de"heces"no" ue on" emi idas"y"o as"dos"mues as"más"se" desca a on"po "la"no"ob ención"de"la"au o ización"po "pa e"de"la"gua de ía,"po "lo"que" al" inal"se"ob u ie on"los"da os"de"108"mues as." Se"u ilizó"el"mé odo"de" inción"de"Kinyoun"y"se" ealiza on"los"análisis"en"ba e ías"de" nue e"mues as,"u ilizando"en"cada"una"de"las" eces"un"con ol"pa a"comp oba "que"el" p oceso"de"la" inción"había"sido"co ec o"y"exi oso."" Pa a"la" ealización"de"la" inción"se" omó"una"go a"de"mues a"ex endiéndola"sob e"el" po aobje os"y"dejándola"seca "a" empe a u a"ambien e."Pos e io men e,"una" ez"seca" po "comple o,"se"lle ó"a"cabo"la" inción"u ilizando"en"p ime "luga "me anol"du an e"1" minu o"pa a" ija "la"mues a."A"con inuación"se"u iliza"el"colo an e"de"Kinyoun"y"se" iñe" du an e" 5" minu os" pa a" después" la a " la" mues a" con" alcohol" al" 50%" du an e" 3Z5" segundos"y"la a "con"agua"abundan e."El"siguien e"paso"u ilizado" ue"la"adición"del"ácido" sul ú ico"que"se"deja"ac ua "al ededo "de"dos"minu os,"pa a"después"con a"colo ea " usando"azul"de"me ileno"du an e"un"minu o."Una" ez"pasado"es e" iempo"se"la a"la" mues a"comple amen e"con"agua"y"se"deja"seca "a" empe a u a"ambien e." Cuando" el" p oceso" de" inción" es u o" inalizado" se" p ocedió" a" la" obse ación" de" las" mues as"al"mic oscopio," ealizando"un"ba ido"en"cada"una"de"ellas"con"el"obje i o"de" 10x,"después"con"el"de"40x"y"en"algunas"ocasiones"u ilizando" ambién"el"de"100x"pa a"la" con i mación"de"algunas"de"las"mues as." " 23" ! RESULTADOS-Y-DISCUSIÓN- RESULTADOS" De"las"108"mues as" emi idas"al"Depa amen o"de"Pa asi ología"de"la" acul ad"y"que" ue on" analizadas," 67" de" ellas" pe enecían" a" niños" (62,04%)" y" 41" de" ellas" a" niñas" (37,96%)," odos"ellos"po "debajo"de"los"5"años." En" o al"se"obse ó"la"p esencia"de"C yp ospo idium-sp"en"22"de"las"mues as"(20,37%)" obse adas" al" mic oscopio" y" esul a on" nega i as" 86" de" ellas" (79,63%)" encon ando" di e encias"dependiendo"del"géne o,"ya"que"se"obse a"una"p e alencia"mucho"mayo " en"niños"que"en"niñas"(Tabla"8"y"Tabla"9)."Las"mues as"que" esul a on"posi i as"en"niños" ue on"19"(17,6%)"y"en"niñas"solo"3"(2,8%)." RESULTADO- NIÑOS- NIÑAS- TOTAL- NEGATIVO" 48" 38" 86" POSITIVO" 19" 3" 22" TOTAL" 67" 41" " " " " " TABLA"8."RESULTADOS"DE"LA"DETECCIÓN"DE"CRYPTOSPORIDIUM-SP"MEDIANTE"TINCIÓN"DE"KINYOUN." " " TABLA"9."GRÁFICA"CORRESPONDIENTE"A"LOS"DATOS"RECOGIDOS"EN"LA"TABLA"7." " 0 10 20 30 40 50 60 NIÑOS NIÑAS Nº"DE"CASOS NEGATIVO POSITIVO 30" ! 15.!Gállego" Be engue " J." Manual" de" pa asi ología:" Mo ología" y" biología" de" los" pa ási os."Ba celona:"Uni e sidad"de"Ba celona,"2003."173Z175"p."" 16.!Galmes"A,"Nicolau"A,"A bona"G."C yp ospo idiosis"ou b eak"in"B i ish" ou is s"who" s ayed" a " a" ho el" in" Mallo ca," Spain." Eu osu eillance." Eu opean" Cen e" o " Disease"P e en ion"and"Con ol"(ECDC)"Z"Heal h"Comunica ion"Uni ;"2003;7(33)."" 17.!Ga cía" Tapia" AM," Fe nández" Gu ié ez" Del" Álamo" C," López" Ga cía" C," Ma os" Ga cía"P,"Ma ín"Casano a"P."B o es"epidémicos"de"C ip ospo idiosis"[en"línea]." Sociedad"Española"de"En e medades"In ecciosas"y"Mic obiología"Clínica"(SEIMC)." 2004" [Consul ado" Junio" 2016]." Disponible" en:" h ps://www.seimc.o g/con enidos/ccs/ e isiones ema icas/pa asi ologia/B o c ip o.pd " 18.!Ga cíaZRod íguez"JA,"Ma in"Sánchez"AM,"Canu "Blasco"A,"Cedeño"Mon año"J,"De" Ped o" MIH." The" incidence" o " c yp ospo idiosis" in" child en:" A" oneZyea " p ospec i e" su ey" in" a" gene al" hospi al" in" Spain." Eu " J" Epidemiol." Kluwe " Academic"Publishe s;"1989"Ma ;5(1):70–3."" 19.!Gómez" Ma ín" JE." P o ozoología" médica:" P o ozoos" pa ási os" en" el" con ex o" la inoame icano. Bogo á":"Manual"Mode no;"2010."117Z128"p."" " 20.!Gue an "RL," Walke " DH," Welle " PF." T opical" in ec ious" diseases :"P inciples," pa hogens"&"p ac ice."Philadelphia :"Chu chill"Li ings one."2016."88Z1011"p."" 21.!Hen iksen"S,"Pohlenz"J."S aining"o "c yp ospo idia"by"a"modi ied"ZiehlZ"Neelsen" echnique."Ac a"Ve "Scand."1981;22(3Z4):594Z6." 22.!Huang" DB," Chappell" C," Okhuysen" PC." C yp ospo idiosis" in" child en." Semin" Pedia "In ec "Dis."2004"Oc ;15(4):253–9."" 23.!Kehl" KS," Cici ello" H," Ha ens" PL." Compa ison" o " ou " di e en " me hods" o " de ec ion"o "C yp ospo idium"species."J"Clin"Mic obiol."1995"Ma ;33(2):416–8."" 31" ! 24.!Ko ha ade" RJ." Challenges" in" unde s anding" he" immunopa hogenesis" o " C yp ospo idium" in ec ions" in" humans." Eu opean" Jou nal" o " Clinical" Mic obiology"and"In ec ious"Diseases."2011;30:1461Z72."" 25.!Llo en e"MT,"Cla el"A,"Goñi"MP,"Va ea"M,"Se al"C,"Bece il"R,"e "al."Gene ic" cha ac e iza ion"o "C yp ospo idium"species" om"humans"in"Spain."Pa asi ol" In ."2007;56(3):201–5."" 26.!LópezZVélez" R," Ta azona" R," Camacho" AG," GomezZMampaso" E," Gue e o" A," Mo ei a" V," e " al." In es inal" and" ex ain es inal" c yp ospo idiosis" in" AIDS" pa ien s."Eu "J"Clin"Mic obiol"In ec "Dis."1995"Aug;14(8):677–81."" 27.!Mac"Kenzie"WR,"Hoxie"NJ,"P oc o "ME,"G adus"MS,"Blai "KA,"Pe e son"DE,"e "al." A" massi e" ou b eak" in" Milwaukee" o " C yp ospo idium" in ec ion" ansmi ed" h ough" he"public"wa e "supply."N"Engl"J"Med."Massachuse s"Medical"Socie y;" 1994"Jul"21;331(3):161–7."" 28.!Magi"B,"Canocchi"V,"To dini"G,"Cellesi"C,"Ba be i"A."C yp ospo idium"in ec ion:" diagnos ic" echniques."Pa asi ol"Res."2006"Jan;98(2):150–2."" 29.!Ma ínZAmpudia"M,"Ma iscal"A,"LopezZGigosos"RM,"Mo a"L,"Fe nandezZC ehue " J." Unde Zno i ica ion" o " c yp ospo idiosis" by" ou ine" clinical" and" labo a o y" p ac ices"among"nonZhospi alised"child en"wi h"acu e"dia hoea"in"Sou he n" Spain."In ec ion."2012"Ap ;40(2):113–9."" " 30.!Ma eo"M,"Ma eo"M,"Mon oya"A,"Bailo"B,"Sauga "JM,"Aguile a"M,"e "al."De ec ion" and"molecula "cha ac e iza ion"o "Gia dia"duodenalis"in"child en"a ending"day" ca e" cen e s" in" Majadahonda," Mad id," Cen al" Spain." Medicine" (Bal imo e)." 2014"Oc ;93(15)." 31.!Meisel" JL," Pe e a" DR," Melig o" C," Rubin" CE." O e whelming" wa e y" dia hea" associa ed" wi h" a" C yp ospo idium" in" an" immunosupp essed" pa ien ." Gas oen e ology."1976"Jun;70(6):1156–60."" 32" ! 32.!Na a oZiZMa inez" L," Del" Águila" C," Bo nayZLlina es" FJ." C yp ospo idium:" un" géne o" en" e isión." Si uación" en" España." En e m" In ecc" Mic obiol" Clin." 2011;29(2):135–43."" 33.!Nime"FA,"Bu ek"JD,"Page"DL,"Holsche "MA,"Ya dley"JH."Acu e"en e ocoli is"in"a" human"being"in ec ed"wi h" he"p o ozoan"C yp ospo idium."Gas oen e ology." 1976"Ap ;70(4):592–8."" 34.!Omo uyi" BE," Nwodo" UU," Udem" CS," Okonkwo" FO." Compa a i e" diagnos ic" echniques" o "C yp ospo idium"in ec ion."Molecules."2014;19(2):2674–83."" 35.!O ega"MT,"Ve ga a"A,"Guimbao"J,"Cla el"A,"Ga ín"P,"Ruiz"A."B o e"de"dia ea"y" ansmisión"de"C yp ospo idium"hominis"asociados"al"uso"de"pañal"en"niños." Med"Clin"(Ba c)."2006;127(17):653–6."" 36.!O egaZPie es" G," Caccio" S," Faye " R." Gia dia" and" C yp opso idium:" om" molecules" o" disease." 2009." 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B o e" de" c i p ospo idiosis" en" Guada ama."Re ."Esp."Salud"Pública."2000;"74(5Z6):"527Z536.""" 43.!Sunno el" O," Lowe y" CJ," Moo e" JE," Dooley" JSG," Xiao" L," Milla " BC," e " al." C yp ospo idium."Le "Appl"Mic obiol."2006"Jul;43(1):7–16."" 44.!Valenzuela" O," GonzalezZDíaz" M," Ga ibayZEscoba " A," Bu ga aZEs ella" A." Molecula "Cha ac e iza ion"o "C yp ospo idium"spp."in"Child en" om"Mexico." PLoS"One."2014";9(4)."" " "