Sensores de ARN de cadena doble en la inmunidad innata

1 SENSORES DE ARN DE CADENA DOBLE EN LA INMUNIDAD INNATA Trabajo Fin de Grado. Blanca García Japón Grado en Farmacia Departamento de Bioquímica y Biología Molecular Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla 2 Universidad de Sevilla Facultad de Farmacia Trabajo Fin de Grado Grado en Farmacia SENSORES DE ARN DE CADENA DOBLE EN LA INMUNIDAD INNATA Autor/a: Blanca García Japón Tutor/a: Consuelo Santa María Pérez Departamento de Bioquímica y Biología Molecular Revisión bibliográfica Facultad de Farmacia. Sevilla, Julio 2021 3 RESUMEN La inmunidad innata es uno de los mecanismos principales en la defensa contra la infección viral. La detección de dsARN viral es uno de los instrumentos que tenemos para combatir la infección. Este dsARN es reconocido por las proteínas de unión a dsARN que distinguen entre el dsARN exógeno y el endógeno gracias a ciertas características que presenta el dsARN viral. Entre estas proteínas encontramos a la familia RLR (RIG-I, MDA5 y LGP2) que se encarga de activar una cascada de señalización que termina con la producción de IFN tipo I, citoquinas, inflamación e ISGs. Otras proteínas importantes son PKR (inhibición de la traducción viral), ADARs (edición del ARN, tanto viral como endógeno), OASes (supresión de la transcripción), Dicer/Drosha (biogénesis de miARN y siARN; silenciamiento del ARN viral), TRBP/PACT (cofactor en el silenciamiento del ARN) y otras helicasas DExD/H (helicasas DEAD-box y helicasas DEAH-box) que actúan como cofactores en la defensa antiviral y en la activación de RIG-I y MDA5. Estudios sobre la interacción entre algunas de ellas describen un aumento de la actividad antiviral de la proteína potenciada o, al contrario, una inhibición de esta actividad. Esta inhibición se da principalmente cuando el sustrato dsARN es endógeno para evitar cualquier complicación como enfermedades neurodegenerativas (p.ej. síndrome de Aicardi-Goutières), aunque la inhibición de ciertas proteínas también se da cuando existe infección viral. En esta revisión bibliográfica nos vamos a centrar en recoger, de forma resumida, las principales funciones de cada una de las proteínas de unión a dsARN y principales interacciones entre ellas estudiadas hasta el momento. Palabras clave: dsARN, RIG-I, PKR, ADAR1, OASes, Dicer/Drosha 4 ABSTRACT Innate immunity is one of the main mechanisms in the defense against viral infection. Detection of viral dsRNA is one of the tools we have to fight infection. This dsRNA is recognized by dsRNA-binding proteins that distinguish between exogenous and endogenous dsRNA by certain characteristics of the viral dsRNA. Among these proteins are the RLR family (RIG-I, MDA5 and LGP2) which are responsible for activating a signaling cascade that leads to the production of type I IFN, cytokines, inflammation and ISGs. Other important proteins include PKR (inhibition of viral translation), ADARs (RNA editing, both viral and endogenous), OASes (suppression of transcription), Dicer/Drosha (miRNA and siRNA biogenesis; viral RNA silencing), TRBP/PACT (cofactor in RNA silencing) and other DExD/H helicases (DEAD-box helicases and DEAH-box helicases) that act as cofactors in antiviral defense and in the activation of RIG-I and MDA5. Studies on the interaction between some of them describe an enhancement of the antiviral activity of the enhanced protein or, on the contrary, an inhibition of this activity. This inhibition occurs mainly when the dsRNA substrate is endogenous to avoid any complications such as neurodegenerative diseases (e.g., Aicardi-Goutières syndrome), although the inhibition of certain proteins also occurs when there is viral infection. In this review we will focus on summarizing the main functions of each of the dsRNA- binding proteins and the main interactions between them that have been studied to date. Key words: dsRNA, RIG-I, PKR, ADAR1, OASes, Dicer/Drosha 5 ÍNDICE 1. Introducción…………………………………………………………………………………………………..6 1.1. Inmunidad innata…………………………………………………………………………………….6 1.2. ARN de cadena doble (dsARN)…………………………………………………………………7 2. Objetivos………………………………………………………………………………………………………..9 3. Metodología……………………………………………………………………………………………………9 4. Resultados y discusión…………………………………………………………………………………..11 4.1. Receptores de tipo RIG-I (RLRs)………………………………………………………………11 4.2. Adenosina desaminasa especifica de ARN bicatenario (ADARs)………………14 4.3. Proteína quinasa R (PKR)…………………………………………………………………………17 4.4. Oligoadenilato sintetasas (OASes) y RNaseL……………………………………………20 4.5. Dicer y Drosha ………………………………………………………………………………………..24 4.6. PACT y TRBP…………………………………………………………………………………………….27 4.7. Otras helicasas implicadas en la respuesta antiviral…………………………………30 5. Conclusiones ………………………………………………………………………………………………….31 6. Bibliografía……………………………………………………………………………………………………..32 7. Anexo: Abreviaturas……………………………………………………………………………………….37 6 1. INTRODUCCIÓN 1.1 . INMUNIDAD INNATA La inmunidad innata es la primera línea de defensa contra los agentes infecciosos (Actor, 2012). Está compuesta por elementos que se encuentran en el organismo antes de la infección (Barrier, 2010). Estos elementos se pueden clasificar en barreras físicas, humorales y en células efectoras. La unión de todos estos componentes conduce a una cascada de señalización que promueve una respuesta inflamatoria en el organismo por la liberación de citoquinas como el factor de necrosis tumoral (TNF) e interleucinas (IL-1, IL-6) (Actor, 2012). Esta respuesta es específica debido a los receptores que se encuentran en la superficie de las células, que son capaces de reconocer polisacáridos, glucolípidos, lipoproteínas, nucleótidos y ácidos nucleicos (PAMP) del cuerpo extraño (Riera Romo et al., 2016). Éstos son conocidos como receptores de reconocimiento de patógenos (PRRs), que abarca cuatro grandes familias como lo son los receptores de tipo Toll (TLRs), los receptores de tipo RIG -I (RLRs), los receptores de lectina tipo C (CLRs) y los receptores de tipo NOD (NLRs). Entre las principales células del sistema inmune innato están los monocitos y macrófagos. Estos reconocen el cuerpo extraño a través de los PRRs, pero en vez de inducir una respuesta inflamatoria, inducen una cascada de señalización que acaba con la fagocitosis. El proceso de fagocitosis consiste en ingerir al agente infeccioso por medio de una vacuola, que denominamos fagosoma. Este fagosoma, dentro de la célula, se une con lisosomas, que contienen sustancias tóxicas que destruyen al organismo invasor (Barrier, 2010). Antes se pensaba que la inmunidad innata sólo era importante para el reclutamiento de respuestas del sistema inmune adquirido y la activación de la inflamación, pero ahora sabemos que el sistema inmune innato tiene sus propias características distintivas. Además, estudios recientes enfatizan su importante rol en la defensa del organismo y su supervivencia (Frizinsky et al., 2019). 7 1.2. ARN DE CADENA DOBLE Uno de los mecanismos centrales de defensa de la inmunidad innata es la detección de ácidos nucleicos extraños y uno de los más destacados es el ARN de cadena doble (dsARN) (Hur, 2019). Se sabe que la unión a dsARN es suficiente para activar la defensa antiviral. La hélice del dsARN adopta la forma A que es diferente a la forma B de la hélice de dsADN. El surco principal es más estrecho y profundo que el del dsADN, mientras que el surco menor es más ancho y menos profundo (Peisley and Hur, 2013), (Figura 1). Las diferentes configuraciones del esqueleto de fosfatos y los 2’ hidroxilos en el surco menor median en la unión entre dsARN y el dominio de unión a dsARN (dsRBD) (Chang and Ramos, 2005), ya que el dominio es capaz de diferenciar entre dsARN y dsADN gracias a estas características (Masliah et al., 2013). Este dominio lo encontramos en las proteínas de unión a dsARN (Tabla 1) y estas tienen diferentes funciones que incluyen la localización, edición del ARN y la supresión traslacional, entre otras. Además, recientemente, se ha visto que también están envueltos en el silenciamiento génico postranscripcional (Doyle and Jantsch, 2002). Figura 1. Estructura de dsADN y dsARN (Peisley and Hur, 2013) 8 Tabla 1. Características y funciones de las familias de proteínas de unión a dsARN Proteínas de unión a dsARN Localización Dominio de unión Función Interacciones RLRs Citoplasma Dominios helicasa y C- terminal Activación de la señal antiviral Induce PKR, OASes y ADARs a través de señalización de interferón ADARs Núcleo dsRBD Edición del ARN Inhibe RLR, PKR y OASes. Ayuda a Dicer PACT TRBP Citoplasma Núcleo y citoplasma dsRBD Modulador de PKR, Dicer y RLRs Inhibe/induce PKR. Ayuda a Dicer y RLRs PKR Citoplasma (20% en núcleo) dsRBD Supresión de la traducción, defensa viral inducida por interferón, apoptosis Amplifica la señal de RLRs RNase L OASes Núcleo NTase Supresión de la replicación Amplifica la señal de RLRs Dicer Drosha Citoplasma Núcleo dsRBD Procesamiento del dsARN Induce/inhibe RLRs Otras helicasas Citoplasma Dominio helicasa Cofactores en la respuesta antiviral Ayuda a RLRs Abreviaciones: RLRs, receptores tipo RIG-I; ADARs, adenosina desaminasa específica de ARN bicatenario; dsRBD, dominio de unión a dsARN; PKR, proteína quinasa R; RNase, ribonucleasa; OAS, oligoadenilato sintasa Algunas de estas proteínas como DICER, ADARs y TRBP residen en el núcleo, a comparación de, por ejemplo, PKR y PACT que se encuentran en el citoplasma (Saunders and Barber, 2003). 9 2. OBJETIVOS Las infecciones virales son y han sido siempre de gran importancia, por lo cual el conocimiento de los mecanismos mediante los cuales nuestro organismo actúa frente a estos patógenos es primordial. Entre estos mecanismos esenciales de defensa se encuentra la inmunidad innata activada por el dsARN exógeno viral que es detectado en el organismo por las proteínas de unión al dsARN. Por lo tanto, los objetivos de esta revisión bibliográfica son: 1. El conocimiento sobre los diferentes tipos de proteínas de unión a dsARN. Es decir, como se unen al dsARN, cuál es su función y otras características distintivas. 2. Resumir los conocimientos actuales de las nuevas funciones o características conocidas de cada una de las proteínas. 3. METODOLOGÍA El presente Trabajo Fin de Grado se ha realizado mediante la búsqueda de artículos científicos, tanto experimentales como revisiones bibliográficas, en diferentes bases de datos como Pubmed y Medline, priorizando los artículos con fecha de publicación más recientes. En primer lugar, se llevó a cabo una búsqueda con palabras clave más generalizadas como inmunidad innata (innate immunity), ARN de cadena doble (double stranded RNA), proteínas de unión a dsARN (dsRNA binding proteins). Una vez revisado dichos artículos se pasó a buscar conceptos más concretos como RIG-5, ADAR, PKR, OAS, Dicer o PACT; y, también, la unión de estas con inmunidad innata (innate immunity). Además, de la bibliografía citada en estos artículos se ha podido llegar a otros relacionados con el tema de estudio. Entre los artículos más importantes sobre el tema destacan el de Saunders y Barber de 2003 y el de Hur de 2019, los cuales hacen un resumen de todos los tipos de proteína de unión a dsARN. 16 Figura 5. (Arriba) Desaminación de adenosina a inosina por ADARs. (Abajo) Estructura de ADAR1, ADAR2 y ADAR3 (Samuel, 2019) ADAR1 se encarga predominantemente de la edición del ARN en las regiones no codificantes que forman estructuras duplex, mientras que ADAR2 se encarga de las regiones codificantes. El objetivo principal de ADAR2 es la región Q/R de GluRB, sin embargo, si ADAR3 se une al pre-ARN de GluRB inhibe la edición de la región Q/R por parte de ADAR2 (Samuel, 2019). Por otro lado, la función de ADAR1 es sin duda la más importante de la familia ADARs. Se ha demostrado que ADAR1 previene la activación del sistema inmune innato gracias a la edición del dsARN endógeno. El dsARN endógeno se parece mucho al dsARN viral por lo que puede activar a MDA5. ADAR1 lo que hace es cambiar los pares de bases hasta el punto que MDA5 no es capaz de reconocer el dsARN (Figura 6) y, por lo tanto, no se activa la cascada de señalización del sistema inmune (Eisenberg and Levanon, 17 2018). Además, también inhibe la supresión traslacional y apoptosis inducida por PKR (proteína de unión a dsARN). Todo esto ayuda a que la traducción durante la respuesta IFN sea eficaz. Adicionalmente, ADAR1 puede actuar como una proteína de unión a dsARN independientemente de su actividad de edición. Por ejemplo, puede modular la ruta de microARN formando un complejo con Dicer (Ota et al., 2013). Por último, se ha visto que mutaciones en la proteína ADAR1 puede causar enfermedades como el síndrome de Aicardi-Goutières (AGS), y que estas mutaciones están relacionadas con la regulación positiva de la señal del IFN tipo I en la ausencia de infección viral (Rice et al., 2017). Figura 6. ADAR1 previene la activación del sistema inmune (MDA5 y PKR) por dsARN endógeno(Chung et al., 2018). 18 4.3. PROTEÍNA QUINASA R (PKR) La proteína quinasa R (PKR) es una proteína inducida por interferón activada por dsARN. Esta proteína es sintetizada en su forma latente, pero al unirse al dsARN, ocurre una dimerización de PKR y, posteriormente, una serie de autofosforilaciones en residuos de serina y treonina que la activan. La principal función de PKR es inhibir la traducción mediante la fosforilación de la subunidad α del factor de iniciación eucariota 2 (eIF2α) (Figura 7) (Ucci et al., 2007). Por tanto, la producción de dsARN durante la infección viral activa a PKR y, en consecuencia, se produce la inhibición de la síntesis de proteínas virales. Como parte de la respuesta antiviral, PKR también media la apoptosis celular y puede hacerlo incluso en ausencia de infección viral (García et al., 2006). La sobreexpresión de Figura 7. Esquema de la activación de PKR por la unión a dsARN (García et al., 2006). PKR en ausencia de infección viral resulta en la fosforilación de eIF2α y la inducción de la apoptosis por la vías de la caspasa 8 y 9 (Xu et al., 2018). 19 La habilidad del dsARN para unirse a PKR y producir la autofosforilación depende de la longitud de éste. Por lo menos se necesita 30bp para la activación de PKR. El mecanismo por el cual es activado todavía está siendo objeto de investigación, pero la hipótesis más aceptada es la de la dimerización de dos monómeros de PKR (Hesler et al., 2021). Una vez dimerizada, el dominio quinasa se autofosforila en cis (Figura 8b), lo que estabiliza la estructura de dímero incluso en ausencia de dsARN (Dey et al., 2014). La composición estructural de PKR consiste en (Figura 8a): ➢ Región N-terminal: dos copias del dominio de unión a dsARN (dsRBD; dsRBD1 y dsRBD2). Aunque se ha visto que dsRBD1 actúa como la principal unión con dsARN, las dos copias de dsRBD son necesarias para una alta afinidad en esta unión (Gal-Ben-Ari et al., 2019). ➢ Región C-terminal: proteína quinasa que es el dominio catalítico. Este dominio requiere de una α-hélice específica para la unión con el sustrato eIF2α situada en la superficie del dominio (Dar et al., 2005). Para contratacar la acción de PKR, numerosos virus han desarrollado mecanismos para inhibir a la quinasa y prevenir la inhibición de la síntesis de proteínas virales. Por ejemplo, el virus vacuna codifica dos proteínas que impiden la actividad de PKR. La proteína E3L tiene un dominio dsRBD y compite por el dsARN e incluso llega a unirse a él impidiendo así la unión de PKR y dsARN. Otra proteína del virus vacuna, conocida como K3L, es estructuralmente homologa al sustrato de PKR, eIFα, y se piensa que compite con ella por PKR, inhibiendo así la fosforilación del sustrato eIFα y, en consecuencia, la inhibición de la traducción y síntesis de proteínas virales (Saunders and Barber, 2003). La correlación entre PKR y diferentes enfermedades neurodegenerativas se conoce desde hace años. Unos niveles altos de PKR son observados en pacientes con VIH, Alzheimer, Parkinson, enfermedad de Huntington y demencia (Gal-Ben-Ari et al., 2019). Actualmente hay algunos estudios relacionados con la función antibacteriana de PKR. Su función antiviral se conoce desde hace más de 30 años, pero se ha visto recientemente que PKR pude ejercer también una función antibacteriana mediante el lipopolisacárido (LPS) que se encuentra en la pared bacteriana de las gram (-), como 20 Eschirichia coli. El LPS es capaz de inducir la autofosforilación de PKR con la consecuente inhibición de la traducción. Además, se ha observado que la mutación o inhibición de PKR deriva en un aumento de la microbiota intestinal provocando infecciones (Yang et al., 2021). Figura 8. (a) Activación de PKR con autofosforilación en cis (Dey et al. 2014). (b) Composición estructural de PKR (Nallagatla et al., 2011). 21 4.4. OLIGOADENILATO SINTETASAS (OASes) Y RNaseL Las oligoadenilato sintetasas son sensores citoplasmáticos, que al unirse al dsARN, sintetizan 2’-5 oligoadenilato (2’-5’A) con ayuda de ATP. Esta molécula, entonces, activa al RNaseL latente formando un dímero. El RNaseL activo hace escisiones en el ssARN de la regiones ricas en uracilo (U), normalmente después de un UU o UA, e inducen la autofagia y apoptosis de las células virales e inhibe la replicación (Chakrabarti et al., 2011). Estos ARN pequeños pueden ser detectados por RIG-I ampliando así la producción de IFN y, por tanto, regulando positivamente la expresión de OAS ya que el IFN induce la transcripción de los genes OAS (Figura 9a). Al ser una ruta común en la defensa antiviral, algunos virus han desarrollado algunos mecanismos para inhibirla. Uno de ellos es, por ejemplo, la degradación de 2’-5’A por una 2’fosfoesterasa (2’PDE). Otro de los mecanismos conocidos es mediante una fosfatasa que retira el grupo 5’fosfato de 2’-5’A (Ezelle et al., 2016). Existen 4 isoformas de OAS en el humano, tres activas catalíticamente (OAS1, OAS2 y OAS3) y una inactiva (OASL). Las tres isoformas activas catalíticamente contienen en su estructura 1, 2 o 3 dominios NTase respectivamente. Mientras que OASL contiene, además, dos dominios tipo ubiquitina (UBL) en la región C-terminal (Figura 9b). OAS2 y OAS3, a pesar de tener dos o tres dominios catalíticos, solo uno de ellos es activo. Sin embargo, se ha demostrado que estos dominios inactivos también ejercen una función a la hora de unirse al dsARN, al hacerlo de manera similar al dominio catalítico activo de OAS1 (Hur, 2019). Existe una hipótesis sobre la oligomerización de estas enzimas y la actividad enzimática de las mismas. Entonces, OAS1 formaría monómeros, dímeros o tetrámeros; y OAS2 formaría dímeros. La oligomerización de OAS3 aún no es conocida, posiblemente porque carece de los tres residuos de aminoácidos en el dominio que posiblemente medien en la oligomerización de las enzimas (Koul et al., 2020). OAS1 reconoce dsARN de una longitud de, aproximadamente, ~ 17bp; OAS2 prefiere una longitud de ~ 35bp y OAS3 de ~ 50bp. Por lo tanto, OAS2 solo es activada cuando esta forma un dímero y el dsARN tiene una longitud de ~ 35bp (Figura 10). 22 Figura 9. (a) Esquema de la ruta OAS/RNaseL en la inmunidad innata (Ezelle et al., 2016). (b) Estructuras de las 4 isoformas de la familia OAS (Hur, 2019). Como hemos visto anteriormente, una de las funciones de esta ruta OAS/RNaseL es la apoptosis y autofagia de la células virales exógenas. RNaseL es capaz de inducir la 23 transcripción de genes antivirales y antitumorales. Uno de los genes que son inducidos es el gen DRAK1, miembro de la familia de las proteínas quinasas asociadas a la muerte (DAPK). La función de DRAK1 es inducir la apoptosis mediante la translocación de Bax a la mitocondria acompañado de la perdida de potencial en la membrana mitocondrial y la escisión de la caspasa 3 y PARP (Manivannan et al., 2019). Figura 10. Esquema de como OAS2 es activada en forma de dímero y con un dsARN de longitud ~ 35bp (Koul et al., 2020). RNaseL induce la autofagia gracias a la señal de c-Jun N-terminal quinasa y PKR, lo que resulta en la degradación de p62 y la acumulación de autofagosomas. Se ha visto anteriormente que la autofagia suprime a la apoptosis, pero sí la autofagia es excesiva, entonces puede haber un cambio a apoptosis. Este cambio está fomentado por los productos de la escisión llevada a cabo por RNaseL (Ezelle et al., 2016). 24 Un estudio sobre la interacción de la vía OAS/RNaseL con ADAR1 en células endógenas muestra que la mutación de ADAR1 conduce a la auto activación de una o más isoformas de OAS lo que resulta en activación de RNaseL y, por tanto, de la apoptosis celular. Esta muerte celular contribuye potencialmente en la enfermedad neurodegenerativa de Aicardi-Goutières (AGS) (Li et al., 2017). 25 4.5. DICER Y DROSHA Dicer y Drosha pertenecen a la familia de las ribonucleasas (RNasa) III. Estas dos proteínas están implicadas en la vía de interferencia del ARN. En esta vía la primera proteína en actuar es Drosha que realiza una escisión en el micro-ARN (miARN) primario para obtener una pequeña horquilla denominada pre-mARN. Esta pequeña horquilla sale del núcleo hacia el citoplasma y es fragmentada por Dicer generando el miARN maduro (Kwon et al., 2016). Además, Dicer es capaz de hacer escisiones en el dsARN viral obteniendo como resultado ARN pequeño de interferencia (siARN) (MacKay et al., 2014). Tanto el miARN como el siARN se une al complejo efector Argonauta formándose el denominado complejo de silenciamiento inducido por ARN (RISC) que inhibe la traducción en los ARN mensajeros diana virales (Figura 11) (Andika et al., 2019). La estructura general de Dicer y Drosha es (Figura 12): ➢ Dicer: empezando por el extremo N-terminal observamos el dominio helicasa, un dominio PAZ, un dominio Duf283, el dominio RNasa III y el dominio de unión a dsARN (dsRBD). ➢ Drosha: contiene también un domino PAZ, el dominio RNasa III y el dominio dsRBD. Pero, además, los dominios P-rich y RS-rich. Como podemos contemplar las estructuras de ambas proteínas son bastantes similares, pero con algunas diferencias. Los dominios que comparten las dos son el dominio PAZ, RNasa III y dsRBD. El dominio PAZ es el que reconoce los extremos 5’ fosforilados del dsARN (Song and Rossi, 2017) y posiciona a este de la mejor forma para que el dominio RNasa III haga la escisión (Kwon et al., 2016). El dominio helicasa de Dicer es idéntico al dominio helicasa de la familia RLRs. Están presentes Hel1 y Hel2 que se conservan entre todos los miembros de la familia helicasa y, además, está presente Hel2i al igual que en RIG-I, MDA5 y LGP2 (Ahmad and Hur, 2015). Con este dominio, las dos familias se unen a dsARN de una forma similar. Esta unión similar puede implicar que Dicer forme un complejo de detección de dsARN junto a uno de los RLRs. Un ejemplo de esto es el complejo formado junto con LGP2 que induce 32 5. CONCLUSIONES El estudio de las proteínas de unión a dsARN supone un avance en el conocimiento de los mecanismos utilizados por el organismo en la defensa antiviral. Muchas de las funciones de las principales proteínas ya se conocían desde hace muchos años, pero con el tiempo se ha seguido investigando sobre ello y aumentando el nivel de entendimiento sobre ellas. Hemos observado que la mayoría no actúan por su propia cuenta, sino que interactúan entre ellas para ejercer una acción potenciada como RIG-I y PKR; o, también, para inhibir esa actividad como TRBP a PKR. Se ha visto que muchas de ellas son la causa principal o secundaria de enfermedades autoinmunes cuando son activadas por dsARN endógeno en vez de dsARN exógeno viral. Una de las principales enfermedades causada por mutaciones en ADAR1 es el síndrome de Aicardi-Goutières, enfermedad neurodegenerativa. Aunque ha crecido mucho el número de estudios sobre estas proteínas aún queda un largo camino para conocer detalladamente muchos de los mecanismos por el cual ejercen su función en las células humanas. 33 6. BIBLIOGRAFÍA Actor JK. Introduction to Immunity and Immune Systems. 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ANEXO: ABREVIATURAS ADAR – Adenosina desaminasa específica de ARN bicatenario ARNi – ARN de interferencia dsARN – ARN de doble cadena dsRBD – Dominio de unión a dsARN eIF2α - Subunidad α del factor de iniciación eucariota 2 INF – Interferón ISGs – Genes estimulados por interferón LPS – Lipopolisacárido MAVS - Proteína mitocondrial de señalización antiviral miARN - micro-ARN OASes - Oligoadenilato sintetasas PAMP – Patrón molecular asociado a patógenos PKR – Proteína quinada R PRRs – Receptores de reconocimiento de patógenos RISC – Complejo de silenciamiento inducido por ARN RLRs – Receptores de tipo RIG-I RNasa – Ribonucleasas siARN - ARN pequeño de interferencia VSRs - Supresores virales del silenciamiento del ARN