Procedimiento de obtención de aceites o grasas con alto contenido antioxidante

ES 2 387 590 B1 19 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA 11 21 Número de publicación: 2 387 590 Número de solicitud: 201031431 51 Int. CI.: C12P 7/62 (2006.01) A61K 31/215 (2006.01) A61K 8/37 (2006.01) A23L 1/30 (2006.01) C08K 5/10 (2006.01) 12 PATENTE DE INVENCIÓN B1 54 Título: PROCEDIMIENTO DE OBTENCIÓN DE ACEITES O GRASAS CON ALTO CONTENIDO ANTIOXIDANTE. 73 Titular/es: CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTÍFICAS (CSIC) (60.0%) C/ Serrano, 117 28006 Madrid (Madrid) ES y UNIVERSIDAD DE SEVILLA (40.0%) 72 Inventor/es: CERT VENTULÁ, Arturo; ROMERO SEGURA, Ana; MATEOS BRIZ, Raquel; ALCUDIA GONZÁLEZ, Felipe; ESPARTERO SÁNCHEZ, José Luis y TRUJILLO PÉREZ-LANZAC, Mariana 74 Agente/Representante: PONS ARIÑO, Ángel 22 Fecha de presentación: 27.09.2010 43 Fecha de publicación de la solicitud: 26.09.2012 Fecha de la concesión: 21.10.2013 45 Fecha de publicación de la concesión: 31.10.2013 57 Resumen: Procedimiento de obtención de aceites o grasas con alto contenido antioxidante. La presente invención se refiere a un nuevo procedimiento de obtención de aceites o grasas con alto contenido antioxidante, debido a la acción de compuestos de naturaleza fenólica y en concreto debido al hidroxitirosol y esteres grasos de hidroxitirosilo. Se puede realizar consulta prevista por el art. 37.3.8 LP. Aviso: 5 10 15 20 25 30 Procedimiento de obtención de aceites o grasas con alto contenido antioxidante La presente invención se refiere a un nuevo procedimiento de obtención de aceites o grasas con alto contenido antioxidante, debido a la acción de compuestos de naturaleza fenólica y en concreto debido al hidroxitirosol y a esteres grasos de hidroxitirosilo. La presente invención se enfoca dentro del área de desarrollos en el sector de la alimentación, cosmética y farmacia. ESTADO DE LA TÉCNICA ANTERIOR Los antioxidantes se añaden a los aceites y grasas con el fin de evitar la formación de colores y sabores indeseables originados en la oxidación de los lípidos [Food Antíoxidants, B.J.F. HUDSON ed., Elsevier, London 1990]. Un amplio grado de aditivos antioxidantes son usados comúnmente en la preparación de alimentos grasos [Real Decreto 142/2002, Boletín Oficial del Estado de 20/02/2002, pp. 6756 y subsiguientes modificaciones] y cosméticos [Inventario de Ingredientes Cosméticos, Centro de Publicaciones del Ministerio de Salud y Consumo, Madrid, 1996], de origen natural y sintético, dependiendo de la naturaleza, carácter lipófilo y uso del producto que debe ser protegido de la oxidación. Dentro del grupo de los antioxidantes naturales, el hidroxitirosol (también llamado 2-(3,4-dihidroxifenil)etanol) y sus derivados secoiridoideos, que se encuentran presentes en el aceite de oliva, muestran una capacidad antioxidante mucho mayor que los aditivos antioxidantes normalmente utilizados en alimentos grasos, tales como tocoferoles (de origen natural) y butilhidroxitolueno (de origen sintético) [M. SERVIL/, et al., Riv. Ita!. Sostanze Grasse, 73 (1996) 55]. Sin embargo, el hidroxitirosol es muy poco soluble en grasas por su carácter polar y los derivados secoiridoideos son muy lábiles y P201031431 27-09-2010   2 ES 2 387 590 B1 DESCRIPCION 5 10 15 20 25 30 amargos, por lo que el uso de extractos de productos del olivo como aditivos antioxidantes es muy limitado. Recientemente se han descrito procedimientos para el aislamiento y purificación de hidroxitirosol a partir de los residuos generados en el proceso de obtención del aceite de oliva [J. FERNÁNEZ-BOLAÑOS, US 6,849,770 82, 2005] y del agua de lavado obtenida en la preparación de las aceitunas de mesa estilo Español [M. BRENES et al., J. Agríe. Food Chem. 49 (1995) 2702] que permiten obtener este compuesto a un bajo coste. Estos extractos concentrados tienen consistencia siruposa, lo cual añadido a su poca solubilidad en grasas hacen que sólo se alcanzan bajas concentraciones, que en muchos casos son insuficientes para conferir un efecto antioxidante adecuado a la grasa. En consecuencia se han investigado los esteres de hidroxitirosilo con los ácidos grasos de 2 a 24 átomos de carbono ya que son solubles en grasas, no son amargos y tienen capacidad antioxidante similar a la del hidroxitosol libre, tanto en matrices lipídicas como en sistemas biológicos [M. TRUJILLO et al., J. Agríe. Food Chem., 54 (2006) 3779]. Una referencia sobre la preparación del acetato de hidroxitirosilo a partir del 2-(2,3dimetoxifenil) etanol en 5 pasos fue publicada por Baraldi et al. [P.G. BARALDI el al., Líebígs Ann. Chem., 83 (1983) 684]. También se ha descrito una síntesis del acetato en 3 pasos a partir del hidroxitirosol [M.H. GORDON, J. Agríe. Food Chem., 49 (2001) 2480]. Ambos procedimientos son largos y los rendimientos son bajos. Se han descrito métodos generales de preparación de los esteres grasos de hidroxitirosilo por reacción del hidroxitirosol con compuestos acílicos en distintos medios, utilizando diversos catalizadores ácidos y enzimas. Los compuestos acílicos han sido ácidos grasos [G.J.H. BUISMAN et al., Bíoteehnology Lett., 20 (1998) 131], esteres alquílicos de ácidos grasos [WO 0216628 A 1 CSIC-Uníversídad de Sevilla 28/02/2002] y cloruros de ácidos grasos [WO 03082798 A1, PULEVA BIOTECH, S.A., 09/10/2003; WO 03082259 A 1, PULEVA BIOTECH S.A., 09/10/2003]. En particular, se ha P201031431 27-09-2010   3 ES 2 387 590 B1 5 10 15 20 25 30 descrito la obtención de una mezcla de palmitato, oleato y linoleato de hidroxitirosilo por reacción del hidroxitirosol con aceite de oliva utilizando ácido sulfúrico como catalizador [WO 2004/005237, ejemplo método B, CSICUníversídad de Sevilla 15/01/2004]. En estos procedimientos se persigue la obtención de los esteres con una pureza suficiente para su uso alimentario, por lo que se procede a la eliminación del catalizador y disolvente, y a la purificación del producto por cromatografía. Estas manipulaciones encarecen los productos y limitan en gran medida su utilización como aditivo, en competencia con otros que se utilizan habitualmente. DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención permite obtener aceites y grasas con un alto contenido antioxidante debido al hidroxitirosol y esteres grasos de hidroxitirosilo, mediante una sencilla reacción directa del aceite o grasa con hidroxitirosol, de forma que el aceite o grasa obtenidos puede utilizarse como aditivo para otros aceites y grasas, conservando las propiedades antioxidantes del hidroxitirosol. El hidroxitirosol es un compuesto fenólico de origen natural que tiene una alta capacidad antioxidante con propiedades beneficiosas para la salud que puede ser utilizado con ventaja como aditivo en aceites y grasas, en sustitución de los antioxidantes fenólicos sintéticos (BHA, BHT, TBHQ, galatos) actualmente utilizados en la industria agroalimentaria y cosmética. Por lo tanto la presente invención se refiere a un procedimiento de obtención de aceites o grasas con alto contenido en antioxidantes, en concreto por su alto contenido en ésteres grasos de hidroxitirosilo En general, el procedimiento objeto de la presente invención comprende la reacción del hidroxitirosol, adsorbido sobre un soporte sólido, con los componentes glicerídicos del aceite o grasa, utilizando un catalizador enzimático. P201031431 27-09-2010   4 ES 2 387 590 B1 5 10 15 20 25 30 Con este procedimiento se consigue que hasta el 90% del hidroxitirosol pase al aceite como una mezcla de hidroxitirosol y sus esteres de ácidos grasos. Con este procedimiento se puede obtener un aceite o grasa con alta concentración de derivados de hidroxitirosilo que puede utilizarse directamente como aditivo antioxidante para aceites y grasas, sin necesidad de obtener y purificar previamente los esteres hidroxitirosilo. Un primer aspecto de la presente invención se refiere al procedimiento de obtención de aceites o grasas con alto contenido antioxidante que comprende las siguientes etapas: a) adsorción del hidroxitirosol sobre un soporte sólido. b) agitación de la mezcla anterior con un aceite o grasa en presencia de un catalizador. e) separación de los sólidos de la mezcla, para eliminar el soporte, el catalizador y las impurezas hidrofílicas del hidroxitirosol, para obtener fácilmente el aceite que contiene hidroxitirosollibre y sus esteres. Según una realización preferida, el hidroxitirosol, que tiene una consistencia siruposa, puede ser sintético o un extracto de origen natural, obtenido de hojas de olivo, productos residuales de la elaboración del aceite de oliva, principalmente agua de vegetación, o del agua de lavado de la preparación de aceitunas de mesa estilo español. El hidroxitirosol procedente de extractos vegetales es un concentrado que tiene como impurezas compuestos de naturaleza hidrofílica. El hidroxitirosol tiene una riqueza que varía entre el 1% y el 100% (en peso) dependiendo del proceso de purificación a que ha sido sometido, siendo la mayor parte de las impurezas de naturaleza hidrófila. P201031431 27-09-2010   5 ES 2 387 590 B1 5 10 15 20 25 30 Según otra realización preferida, el soporte sólido es pulverulento y químicamente inerte. Además puede ser un polvo de naturaleza mineral u orgánica, de origen natural o sintético, con diámetro de partícula inferior a 5 mm y sin actividad química, el cual mezclado con el hidroxitirosol siruposo forma un polvo suelto que se dispersa en el seno del aceite, facilitando el contacto entre el hidroxitirosol y el aceite o grasa. Según otra realización preferida, si el soporte de polvo es de naturaleza mineral, este puede ser tierra de radiolarios, tierra de infusorios, tierra de diatomeas, talco, carbonato cálcico, arcillas decolorantes o gel de sílice, con un diámetro de partícula inferior a 5 mm. Según otra realización preferida el soporte de polvo es de naturaleza orgánica y puede ser de tipo celulósico, de ciclodextrinas o de polímeros sintéticos. Según otra realización preferida, la proporción entre el hidroxitirosol y el soporte sólido es desde 1 :0,5 hasta 1 :50 en peso, preferiblemente desde 1 :1 hasta 1 :25. Según otra realización preferida, en la etapa b) el aceite o grasa es de naturaleza glicerídica, de origen vegetal, animal o sintético, así como crudo o procedente de transformaciones físicas de aceites y grasas (refinado o fraccionado) o químicas (hidrogenado). Según otra realización preferida, en la etapa b) el catalizador es de tipo enzimático y es del tipo lipasa y puede estar como polvo, liofilizado o como enzima inmovilizada sobre un soporte ya sea sólido o en forma de gel. Según otra realización preferida, en la etapa b) la mezcla (hidroxitirosilo y soporte) con un aceite o grasa en presencia de un catalizador está en una proporción inferior a 1:10.000 (en peso). P201031431 27-09-2010   6 ES 2 387 590 B1 5 10 15 20 25 30 Según otra realización preferida, en la etapa b), la agitación se lleva a cabo a una temperatura entre 1 O y 100 ºC, durante un periodo de tiempo entre 1 minuto y 1 mes, En otra realización preferida, en la etapa e), la separación de los sólidos de la mezcla de reacción se realiza mediante filtración, sedimentación o centrifugación. Según una realización preferida, la filtración del aceite se puede llevar a cabo en filtros de papel, celulosa, polímeros o tierras filtrantes (tierra de infusorios, silicagel), para separar el aceite del soporte sólido, el catalizador e impurezas del hidroxitirosol insolubles en grasas. La filtración se lleva a cabo a presión atmosférica, sobrepresión hasta 2 atmósferas o a vacío, a temperaturas entre 15 ºC y 100 ºC. Un segundo aspecto de la presente invención se refiere al aceite o grasa antioxidante que comprende hidroxitirosol y los esteres de hidroxitirosilo, de fórmula general (1), de los ácidos grasos mayoritarios que componen el aceite o grasa utilizada. OH donde Res un grupo alquilo o alquenilo de 3 a 23 átomos de carbono, en una concentración total que puede alcanzar hasta los 2.000 milimoles/kg. P201031431 27-09-2010   7 ES 2 387 590 B1 Se entiende en la presente invención que los ácidos grasos mayoritarios del aceite o grasa utilizada son y sin sentido limitativo, tan solo ilustrativo los que se muestran en la tabla 1 . Oliva % Girasol alto oleico % Soja % Palmítico (e16:C) 1 1 Palmítico (e16:0 ) 4 p almítico (e16:0) 10 Esteárico (e18:C) 3 Esteárico (e18:C ) 6 E steárico (e18:0) 4 Oleico (e18:1) 76 e leico (e18:1) 8. ~ Ole ico (e18:1) 21 Linoleico (e18:2) 8 Linoleico (e18:2) 7 Linoleico (e18:2) 55 Linolénico (e18:3) 9 Girasol normal % Colza % Palma % Palmítico (e 1 6:1 ~) 7 Palmítico (e16:0 5 p 3.1mítico (e16:0) 44 Esteárico (e18:0) 4 Esteárico (e18:0) 2 Esteárico (e18:0) 5 Oleico (e18:1) 23 Oleico (e18:1) 59 Oleico (e18:1) 38 Linoleico (e18:2) 64 Linoleico (e18:2) 21 Linoleico (e18:2) 10 Linolénico (e 1 8 : 3 ) 1 o Sebo % Pescado (menhaden oil) % Palmiste % Mirística (e 1 4:0) 3 Mirística (e 1 LO) 6 e 8: o 5 Palmítico (e 1 p:O) 26 Palmítico ( e16 :0) 1 6 e 1 o: o 4 Palmitoleico(e16:1) 4 Palmitoleico(e16:1) 9 LÉ urico (e10:0) 47 Esteárico (e18:C ) 1 9 Esteárico (e18:0 ) 3 IV irístico (e14:0) 16 Oleico (e18:1) 42 Oleico (e18:1) 10 Palmítico (e16:0) 8 Linoleico ( ~ 1 E : 2 ) 4 e 1 8 : 4 3 Esteárico 3 P201031431 27-09-2010   8 ES 2 387 590 B1 (C18:0) EPA (C20:5) 1 3 01 eico (C18:1) 1 4 DHA (C22:6) 1L Lin )leico (C18:2) 3 Tabla 1 En cada caso los esteres de hidroxitirosilo que se forman son los de estos 5 ácidos mayoritarios, aunque la proporción entre ellos no es igual a la que existe entre los ácidos grasos, aunque si es parecida. A parte de estos ácidos de la tabla, los aceites contienen otros ácidos en proporciones menores que no intervienen en la reacción o lo hacen en cantidad 10 tal que sus esteres de hidroxitirosilo no se detectan en cantidades significativas en el producto final. Según una realización preferida, los ésteres de hidroxitirosilo derivan de ácidos grasos saturados o insaturados. 15 Según otra realización preferida el radical R de los ésteres de ácidos grasos de hidroxitirosilo, es un grupo alquilo de 3 a 23 átomos de carbono cuando los ácidos grasos son saturados. 20 Según otra realización preferida el radical R de los ésteres de ácidos grasos de hidroxitirosilo, es un grupo alquenilo de 13 a 23 átomos de carbono cuando los ácidos grasos son insaturados. Otra realización preferida, se refiere al aceite o la grasa para su uso como 25 medicamento. P201031431 27-09-2010   9 ES 2 387 590 B1 5 10 15 20 25 30 Ejemplo 2 154 mg de un concentrado siruposo, obtenido a partir del agua residual producida en un molino de aceite, con un contenido de 52% de hidroxitirosol, se mezclaron con 800 mg de talco (con tamaño de partícula inferior a 0,2 mm) para obtener un sólido pulverulento. La mezcla se dispersó por agitación en 1O g de aceite de pescado (Menhaden oil) refinado comestible y se añadieron 150 mg de la enzima lipasa Gandida antárctíca recombinante expresada en Aspergíllus oryzae, inmovilizada sobre resina acrílica (actividad :::: 10.000 U/g). La mezcla se mantuvo en agitación durante 48 horas, en atmósfera de nitrógeno, a una temperatura de 38 ºC. La mezcla resultante se filtró a través de papel de filtro a presión atmosférica y se obtuvieron 9,4 g de aceite que contiene derivados de hidroxitirosol en las concentraciones siguientes: Hidroxitirosollibre:1.9 milimoles/kg Miristato de hidroxitirosilo: 4.5 milimoles/kg Palmitato+oleato de hidroxitirosilo:17.2 milimoles/kg Palmitoleato de hidroxitirosilo: 4,2 milimoles/kg Estearato de hidroxitirosilo: 2,8 milimoles/kg Octadecatetraenoato + eicosapentaenoato + docosahexaenoato de hidroxitirosilo: 14,0 milimoles/kg Total: 44,6 milimoles/kg Rendimiento de hidroxitirosol libre+ esteres de hidroxitirosilo solubilizados en el aceite: 80,7 % La composición en ácidos grasos mayoritarios del aceite de pescado de partida fue: Mirística: 6,5% Palmítico:15,8% Palmitoleico: 9,2% P201031431 27-09-2010   16 ES 2 387 590 B1 5 Esteárico:3,2% Oleico:1 O, 1 % Octadecatetraenoico: 3,0% Eicosapentaenoico (EPA): 13,0% Docosahexaenoico (DHA):13,9% P201031431 27-09-2010   17 ES 2 387 590 B1 5 10 15 20 25 30 REIVINDICACIONES 1. Procedimiento de obtención de aceites o grasas antioxidantes que comprende las etapas de: a) adsorción de hidroxitirosol sobre un soporte sólido; b) agitación de la mezcla de la etapa a) con un aceite o grasa en presencia de un catalizador; y e) separación del soporte, del catalizador y de las impurezas hidrofílicas del hidroxitirosol, del aceite o grasa. 2. El procedimiento según la reivindicación 1, donde el hidroxitirosol, es de naturaleza sintética o es un extracto de origen natural. 3. El procedimiento según la reivindicación 2, donde el hidroxitirosol es de origen natural, obtenido de hojas de olivo o de productos residuales de la elaboración del aceite de oliva. 4. El procedimiento según la reivindicación 1, donde el soporte sólido es pulverulento y químicamente inerte. 5. El procedimiento según la reivindicación 4, donde el soporte es un polvo de naturaleza mineral u orgánica, de origen natural o sintético, con diámetro de partícula inferior a 5 mm. 6. El procedimiento según la reivindicación 5, donde el soporte es de naturaleza mineral y está formado por tierra de radiolarios, tierra de infusorios, tierra de diatomeas, talco, carbonato cálcico, arcillas decolorantes o gel de sílice. P201031431 27-09-2010   18 ES 2 387 590 B1 5 10 15 20 25 30 7. El procedimiento según la reivindicación 5, donde el soporte es de naturaleza orgánica y es de tipo celulósico, de ciclodextrinas o de polímeros sintéticos. 8. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, donde el hidroxitirosol y el soporte están en una proporción desde 1 :0,5 hasta 1 :50 en peso. 9. El procedimiento según la reivindicación 8, donde el hidroxitirosol y el soporte están en una proporción desde 1 :1 hasta 1 :25 en peso. 1 O. El procedimiento según la reivindicación 1, donde el aceite o grasa es de naturaleza glicerídica, de origen vegetal, animal o sintético, así como crudo o procedente de transformaciones físicas de aceites y grasas, refinado o fraccionado, o químicas, hidrogenado. 11. El procedimiento según la reivindicación 1, donde el catalizador es de tipo enzimático. 12. El procedimiento según la reivindicación 11, donde el catalizador enzimático es una lipasa. 13. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 11 ó 12, donde el catalizador enzimático esta como polvo, liofilizado o como enzima inmovilizada sobre un soporte. 14. El procedimiento según la reivindicación 1, donde en la etapa b) la mezcla obtenida en la etapa a) con el aceite o grasa en presencia de un catalizador, está en una proporción inferior a 1 :10.000 en peso. P201031431 27-09-2010   19 ES 2 387 590 B1 5 10 15 20 25 30 15. El procedimiento según la reivindicación 1, donde en la etapa b), la agitación se lleva a cabo a una temperatura entre 1 O y 100 ºC, durante un periodo de tiempo entre 1 minuto y 1 mes. 16. El procedimiento según la reivindicación 1, donde en la etapa e), la separación de los sólidos de la mezcla de reacción se lleva a cabo mediante filtración, sedimentación o centrifugación. 17. El procedimiento según la reivindicación 16, donde la filtración del aceite se lleva a cabo en filtros de papel, celulosa, polímeros o tierras filtrantes. 18. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 16 ó 17, donde la filtración se lleva a cabo a presión atmosférica, sobrepresión hasta 2 atmósferas o a vacío y a temperaturas entre 15 ºC y 100 ºC. 19. El aceite o grasa antioxidante, que comprende hidroxitirosol libre y los esteres de hidroxitirosilo, de fórmula general (1), de los ácidos grasos del aceite o grasa utilizada, OH (1) donde Res un grupo alquilo o alquenilo de 3 a 23 átomos de carbono. 20. El aceite o grasa según la reivindicación 19, donde los ésteres de hidroxitirosilo derivan de ácidos grasos saturados o insaturados. P201031431 27-09-2010   20 ES 2 387 590 B1 5 10 15 20 25 30 21. El aceite o grasa según la reivindicación 20, donde el ácido graso es de tipo saturado y Res un grupo alquilo de 3 a 23 átomos de carbono. 22. El aceite o grasa según la reivindicación 20, donde el ácido graso es de tipo insaturado y Res un grupo alquenilo de 13 a 23 átomos de carbono. 23. El aceite o grasa según las reivindicaciones 19 a 22, para su uso como medicamento. 24. Composición nutricional, que comprende el aceite o grasa de las reivindicaciones 19 a 22. 25. Composición cosmética, que comprende el aceite o grasa de las reivindicaciones 19 a 22. 26. Composición farmacéutica, que comprende al menos el aceite o grasa de las reivindicaciones 19 a 22 y al menos un transportador farmacéuticamente aceptable, adyuvante y/o vehículo. 27. La composición farmacéutica según la reivindicación 26, que comprende además otro principio activo. 28. Uso del aceite o grasa de las reivindicaciones 19 a 22 como antioxidante. 29. El uso según la reivindicación 28, como bloqueador de radicales libres. 30. Uso del aceite o grasa de las reivindicaciones 19 a 22 o de la composición nutricional de la reivindicación 24, como nutracéutico. 31. Uso del aceite o grasa de las reivindicaciones 19 a 22 o de la composición nutricional de la reivindicación 24, como aditivo en alimentos funcionales. P201031431 27-09-2010   21 ES 2 387 590 B1 32. Uso del aceite o grasa de las reivindicaciones 19 a 22 o de la composición cosmética de la reivindicación 25, como producto cosmético. 33. Uso del aceite o grasa de las reivindicaciones 19 a 22, para la fabricación 5 de un medicamento. 34. El uso del aceite o grasa según la reivindicación 33 para la preparación de un medicamento con actividad antiagregante plaquetaria o para la prevención de enfermedades neurodegenerativas. 10 35. El uso del aceite o grasa según la reivindicación 33 para la preparación de un medicamento que comprenda como principios activos o excipientes sustancias lipídicas susceptibles de oxidación, para la protección de la oxidación de los componentes lipídicos, sólo o junto con otros antioxidantes 15 naturales o sintéticos. 36. Uso del aceite o grasa de las reivindicaciones 19 a 22, como aceite funcional izado. P201031431 27-09-2010   22 ES 2 387 590 B1 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA 21 N.º solicitud: 201031431 22 Fecha de presentación de la solicitud: 27.09.2010 32 Fecha de prioridad: INFORME SOBRE EL ESTADO DE LA TECNICA 51 Int. Cl. : Ver Hoja Adicional DOCUMENTOS RELEVANTES Categoría 56 Documentos citados Reivindicaciones afectadas X X X X X ES 2233208 A1 (PULEVA BIOTECH S.A.) 01.06.2005, página 3, líneas 19-35,45-46; página 4, líneas 47-48; página 4, línea 60 – página 5, línea 24; página 5, línea 65; página 6, línea 23; página 7, líneas 6-12; fórmula (I); resumen. FR 2919800 A1 (SOCIETE LA BIOCHIMIE APPLIQUEE SOLABIA) 13.02.2009, página 1, líneas 5-25; página 3, líneas 9-22; página 4, líneas 20-33; página 6, líneas 15-26; reivindicación 9. US 20030236202 A1 (GEELINGS et al.) 25.12.2003, párrafos [0002]-[0004],[0015],[0058],[0061],[0062]; reivindicación 1. US 20030225160 A1 (GEERLINGS et al.) 04.12.2003, párrafos [0001],[0011],[0012],[0046]; reivindicaciones 6,10,24. US 20050154058 A1 (GONZALEZ et al.) 14.07.2005, párrafos [0002]-[0003],[0014]-[0016],[0018],[0033],[0044]. 19-24,30,31,36 19-23,25,29,32 19-24,26-31,33-36 19-33,35,36 19-36 Categoría de los documentos citados X: de particular relevancia Y: de particular relevancia combinado con otro/s de la misma categoría A: refleja el estado de la técnica O: referido a divulgación no escrita P: publicado entre la fecha de prioridad y la de presentación de la solicitud E: documento anterior, pero publicado después de la fecha de presentación de la solicitud El presente informe ha sido realizado  para todas las reivindicaciones  para las reivindicaciones nº: Fecha de realización del informe 10.09.2012 Examinador S. González Peñalba Página 1/5 INFORME DEL ESTADO DE LA TÉCNICA Nº de solicitud: 201031431 CLASIFICACIÓN OBJETO DE LA SOLICITUD C12P7/62 (2006.01) A61K31/215 (2006.01) A61K8/37 (2006.01) A23L1/30 (2006.01) C08K5/10 (2006.01) Documentación mínima buscada (sistema de clasificación seguido de los símbolos de clasificación) C12P, A61K, A23L, C08K Bases de datos electrónicas consultadas durante la búsqueda (nombre de la base de datos y, si es posible, términos de búsqueda utilizados) INVENES, EPODOC, WPI, NPL, BIOSIS, MEDLINE, EMBASE, XPESP Informe del Estado de la Técnica Página 2/5 OPINIÓN ESCRITA Nº de solicitud: 201031431 Fecha de Realización de la Opinión Escrita: 10.09.2012 Declaración Novedad (Art. 6.1 LP 11/1986) Reivindicaciones 1-18 SI Reivindicaciones 19-36 NO Actividad inventiva (Art. 8.1 LP11/1986) Reivindicaciones 1-18 SI Reivindicaciones 19-36 NO Se considera que la solicitud cumple con el requisito de aplicación industrial. Este requisito fue evaluado durante la fase de examen formal y técnico de la solicitud (Artículo 31.2 Ley 11/1986). Base de la Opinión.- La presente opinión se ha realizado sobre la base de la solicitud de patente tal y como se publica. Informe del Estado de la Técnica Página 3/5