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Master en Condicionantes Genéticos, Nutricionales y Ambientates del Crecimiento y Desarrolto Could a patientwith SMCTA duplication be classified as a human cohesinopathy? 'rr l. : il:i Trabaio tlefiñ de lÉaster ' ].' ,,. ,,, Curso Z07t ZA1l Alumna: :. .. Carolina Baquero Montoya U niversid ad deZaragpaa Tutor: Feliciano Ramos Fuentes '' -: .. ..a '. :: . : ,: ' , .-. : Catedrático de la 'Sacultad,de Í{ll aa, Zaragea ' , '- , ' ,...) AGRADECIMIENTOS A mi tutor Feliciano J Ramos, por creer en mí y apoyarme en todo momento, Al Profesor Juan Pié, por sus enseñanzas y consejos, _ A mis amigas y colegas del Laboratorio de Genética y Genómica Funcional, por su inmensa ayuda, paciencie y apoyo, A mi familia, qRACr᧠2 INDICE Resumen. 5 Justificación deltema.. 6 Memoria científica del proyecto invesügativo,..... 10 Separata artículo publicado 10 Could a patient with §MCIA duplication be classified as a human cohesinopathy?....... 11 Mernoria de la práetica delproyec*o de investigación... 22 §eparatas presentaciones en congresos... 22 Aparición de casosfamiliares delSCdL. 23 Duplication of SMCIA leads to Comelia de Lange spectrum phenotype Separatas posters presentados en congresos Somatic mosaicism in a Comelia de Lange syndrome patient with NlPBLmutation identified by Exom $equencfirg Severe asymmetricallimb involvement in a Comelia de Lange proband with a new NIPBL mutation.. Second SMC3 mutation confirms this gene as a cause of Cornelia de Lange syndrome Separatas seminarios GENUD. . Bone mass in male and females children and adolescents with Dorn syndrorne B-Mtamin status and intake in European adolescents. A review of 27 32 33 36 38 40 3 41 the literature. Body composition changes during interventions to treat overweight and obesity in children and adolescents: A descriptive review... 4g Aspectos perinatales, crecimiento y tipo de lac{ancia de los recién nacidos pequeños para la edad gestacional..... 44 lron and vitamin status biomarkes and its associaüon with physical fitness in adolescents: The HELENA study Maternalpostnatal depression and child growth: A European Prevalencia de la lacrtancia matema durante el primer año de vida en Aragón: Estudio CALINA... 50 Sex differences in the endocrine system in response to protein intake early in life Bibliografia...... 42 51 53 4 RESUMEN Los desordenes causados por mutaciones en los genes codificantes de las subunidades y de las proteinas reguladoras del complejo de cohesinas, son llamadas colectivamente cohesinopatías. La más conocida es el Síndrome de Cornelia de Lange (SCdL), la cual es un desorden multisistémico del desanollo caracterizado por dismorfia facial, malformacionés en las e*rernidades, alteraciones cognitivas y del crecimiento. Mutaciones err cinco genes, subunidades codificantes del complejo de cohesinas (S¡tlCíA, SMC3, RAD?I) y $us regularadores (NIPBL, HDACS), son responsables del - 70o/o de los casos de SCdl-. Aquí, se describe un varón de 16 años con dismorfia facial, retraso en el crecimiento, discapacidad intelectual, hirsutismo y manos pequeñas, quien üene un Marcador Cromosómico Supemumerario (small Supemumerury Mad<er Chromosome (sSMC)) presente en forma de mosaico. Ei sSMC está compuesto de dos segmentos duplicados que abarcan 17 genes, incluyendo el gen SfrlClA, en las regiones Xp11.22 y XB11.21q11-1. En este trabajo se realizo una comparación clínica entre nuestro paciente y el previamente reportado con duplicación de SMCIA, además con cuatro varones portadores de sSMC similares, reportrados en las bases de datos, sugiriendo que todos ellos comparten rasgos clínicos relacionados con las cohesinopatias. Aunque este paciente no tiene el fenotipo craneofacial clásico del SCdL, presenta retraso del crecimiento prey postnatal, discapacidad intelectual y anomalías musculoesqueléticas leves, los cuales son rasgos frecuentemente encontrados en los desordenes de lás cohesinas" JUSTIFICACION DEL TEMA Las cohesinopatlas son desordenes causados por mutaciones en las protelnas estructurales o reguladoras del complejo de cohesinas (1). El complejo de cohesinas es esencial en el funcionamiento de muchos procesos biológicos, entre los que están: Segregación cromosómica, reparación del DNA, expresión génica, y formación de la estructura de la cromatina (1). El complejo tiene una forma de anillo muy conservada que rodea la cromatina y está formado por diferentes componentes estructurales (protelnas) primarios: SMC1A, SMC3, RAD21 y antígenos estromales (SA-1+2+31 y secundarios: ESCO2, HDAC8, PDSSA/B, WAPL, MAU2 y NIPBL (Figura 1). Estos dos últimos, NIPBL y MAU2, conforman un complejo heterodimérico denominado "kollerin", gue regula la carga y la descarga del anillo de cohesinas a la romatina {24). SMC3 IIAU-2 @) NIPBP *APLeffi RAD2I'REC8 SAl'SA2TSA3 Escoz o l*ro", Figura f . El complejo de las cohesinas esta furmado por cuatro subunidades en forma de anillo. Dos de ellas son las protelnas del mantenimiento estrudural (Structural Maintenane of Chromosomes -§MG) , SMCIA y SMC3, y dos subunidades no SMC (RAD 21 y la protelna STAG), que interactrlan con un amplio nrlmero de protelnas incluyendo NIPBL, ESCO2 y HDAC8. La cohesinopatía más conocida es el Síndrome de Cornelia de Lange (SCdL) {OMIM * 12247A,300590, 610759, 614701,300882), una patología del desanollo de origen genético, caracterizada por rasgos faciales distintivos, defectos de reducción en las extremidades super¡ores e inferiores, retraso del desarrollo prey postnatal, 6 discapacidad intelectual y alteraciones del comportarniento (5) (Figura 2 al-Z). En la mayorla de los pacientes aparecen además desordenes de diferentes sistemas, como el gastrointestinal, cardiovascular, neurológico, oftalmológico y auditivo (6). Dentro de las características craneofaciales clásicas se encuentran la sinofridia, pestañas largas con cejas arqueadas, puente nasal deprimido con narinas antervertidas, philtrurn largo y liso, labio superior delgado y micrognatia (Figura 2),las cuales permiten además el reconocimiento del síndrome (6). La prevalencia del síndrome se estima entre 1/45.000 - 1/62.000 recién nacidos vivos {7). NIPBL SMCíA HDACS Figura 2. al - 2 Fenotipo grave de una paciente poÉadora de una mutacién en NIPBL, nÓtese el defecfo de reduccirln de las extrernidades. b1-2 Fenotipo bve de un paciente 6on mulación en NIPBL, el cual no liene alteraciones en las extrem¡dades. c1-2 Fenotipo de un pac¡ente portador de una muiacíón en SMCIA, el cual destaca por su poca afectación. d1-2 Fenotipo de una pac¡ente portadora de una mulación en HDAC8, en la cual se pueden observar discretas diferencias como la nariz tubular y ausencia de las narinas antervertidas. Actualmente se han identlficado 5 genes asociados al fenotipo del síndrome: NIPBL, SMCIA, SMC3, RAD?'| y HDACS (8-13) (Figura 2 a1-2, b1-2, c1-2 y d1-2)- Todos ellos codifican componentes estruc*urales o reguladores del complejo de cohesinas (8-11). Las mutaciones en estos genes son heredadas de forma autosÓmica dominante (NiPBL, §MC3 y RAD21) o ligadas al X (SMCIA y HDACS) (8'f3). Aproximadamente un 600Á de pacientes tienen mutación en NIPBL, localizado en el cromosoma 5p13 (8, 11,14).Un porcentaje mucho menor de los pacientes tiene mutaciones en 8MC1A (- 4-6o/rl (10, 11), localizado en Xp11 y hasta la fecha solo un s ffial v I ?.,r-. 1.l, ', i"tl:i 1,. , ' i\. "'i,. ik. ..'.fl"* 1§ ',".. . '.: *tr ffi 7 varón con fenot¡po leve, ha sido identificado como portador de una mutación en SMCS (11) en el cromosoma'10q25. La reciente descripción de mutaciones en RAD2| (<14/o') (12),localizado en 8q24.11 y en HDACS ubicado en Xq13.1 (13) han sido relacionados con el SCdL. Sin embargo persiste un alto porcentaje de indMduos sin diagnóstico genético (-30 %), lo que hace sospechar de la existencia de más genes implicados o de otras alteraciones moleculares causales, como por ejemplo duplicaciones o deleciones. Mutaciones en el gen E§CO2 (Figura 1) son responsables de otra eohesinoBatía, el síndrome de Roberts/SC-Focomelia, caracterizado por retraso del crecimiento intrauterino, anomalias craneofaciales, discapacidad intelectual y malformaciones en extremidades, gue van desde tetra-focomelia simétrica bilateral hasta hipomelia secundaria a acortamiento mesomélico (15). Otros desordenes de las cohesinas son el síndrome de Varsovia y la discapacidad intelectual ligada alX con otalasemia (1), causadas por mutaciones en los gene$ DDXíl y ATRX, respectivamente. Si bien todas ellas tienen caracterlsticas fenotlpicas distintivas, todas comparten hallazgos como la discapacidad intelectual, el retraso del crecimiento y desarrollo y Ias anomalías en las extremidades (16). El uso de nuevas técnicas de diagnóstico molecular como los CGH-Anays {Comparative Genomic Hybridization Arays) y la secuenciación masiva (Alexf Generation Sequencing -NGS, permitirán identificar alteraciones moleculares como microdeleciones o microduplicaciones y genes causales adicionales relacionados con las cohesinopatías (17). Los CGH-Anays permiten la detección de desequilibrios de - 3 a 5 Mb, y actualmente están indicados como estudios complementarios al cariotipo de alta resolucién en pacientes con discapacidad intelectual, trastomos del espectro autista y anomalías congénitas múltiples sin filiar. Sin embargo, cuentan eon desventajas como la imposibilidad para detectar alteraciones moleculares menores a 400 Kb así como mutaciones puntuales {18). Con respecto a la NGS, su aplicación tacilitará el estudio de forma inmediata de grandes grupos de genes, permitiendo, de una forma rápida, la continnación del diagnóstico y la posibilidad de establecer correlaciones genotipo-fenotipo (1 7). El genorna humano üene un gran número de variaciones en el número de copias {duplicaciones, debciones y reordenamientos cromosómicos), las cuales abarcan el *12o/o del genoma y son responsables del 14.5o/o de las alteraciones moleculares de genes implicados en enfermedades humanas (19). Las alteraciones en I el número de genes sensibles a la dosis han sido relacionadas con múltiples enfermedades genéticas, como por ejemplo la enfermedad de Cñarcot-üarie-Tooth tipo 14, la neuropatía hereditaria con susceptibilidad ? la parálisis por presión, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer, los trastomos del espec'tro autista y la esquizofrenia (19). Hasta la fecha sólo se han descrito duplicaciones en NIPBL y SMCIA, sin embargo los pacientes portadores de éstas no ha sido diagnosticados de SCdL o como afectos de cohesinopatias. En este trabajo se reporta el segundo paciente portador de una duplicación en 8MC1A, que tiene una afectacién multisistémica y una alüeración molecular que, aunque no presenta un cuadro clínico compatible con SCdL clásico, lo incluye dentro de los desórdenes de las cohesinas. I Baquem-Montoya et al. discrepancies might be the result of the larger duplication size found in the first reported individual (2). The recent availability of sSMC databases (12) makes possible to look for patients with similar duplicatious inside marker ch¡omosomes. Thus, we identified four probands with Xp duplicafion, which included the SMCIA gene. Interestingly, all of them had several of the §pical features of cohesin disorders (12, 13, 23, 24), bú none of them has been encompassed within a specific disorder (table S2). Finally, we propose that although inüviduals with SMCIA duplication cannot be classified as CdLS, they could be included within the cohesinopathies, since their phenotypes share corrmon features with most of these disorders. Additionally, the involvement of the cohesin complex's genes should be considered in patients with unexplained intellectual üsability, behavior impairments, growth retardation or musculoskeletal anomalies, either by analysis of mutations or by copy number variations. Supporting lnformation The following Supporting infor¡nation is available for this article: Thble S1. Cünical features ofduplicated genes related to the clinical features found in the probmd Table 52. Overview of ttre clinical features of reported males with a sSMC derived f¡om the X chrornosome Additional Supporting information may be found in the online version of this article. Acknowledgements We sincerely thank ttle patient and his family for participating in this study. We also thank Quantitative Genomic Medicine Laboratories (qGenomics, Barcelona, Spain) for their technical assistance. This surdy was funded by grant ftom The Spanish Minis§ of Health - Fondo de Investigación Sanitaria (FIS) (Ref.# PS09-01422), the Diputación Gener¿l de Aragón (Grupo Consoüdado B20), European Social Fund (Consruyendo Europa desde Aragón), Univexity of Taagoza (Ref.# PIF-UZ-2ü)9-BIO02), Ministerio de Economfu y Hacienda (SAF2010-2f517), and Fundació la Marató de TV3. Reférenc€s 1. Liu J, Krantz ID. Cornelia de l-ange slndrorne, cohesin, md beyond. CIin cÉret 2f0,9: 76: 3O3 -314. 2. Mannini L, Liu J, Krantz ID, Musio A. Spectum and consequences of SMCIA mutations: the urexpected iovolvernent of a core comporent of cohesin in human disease. Hum Mutat 201& 31: 5-10. 3. Kline AD, Krantz ID, Sommer A et al. Cornelia de Lange syndrorc: clinical revieq diagnostic and scoring systems, and anticipatory guidance. AmJ Med Genet A 20O7: l43A: 1287-1296. 4. 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Y = o o §¡ ñ ñ e. o = üt (ú (!s => o. o= ó gE 9 ES E cE = o § ) I 6. o § o (tt I EA 3E 0§3E .i-B§8 O>-Ot r/,TU'(J > 6 §r O= Eü ¿a = t¡ o o tt 6 (, -9 6 tr = ¡t (! o E tú t o o o o o c v (ú o = § o'-sA 0,=6 .ñ*sE O>O att-z o o É o Fe ll 3 do .e .B to EE oo(u (,= =o 6' C\ () tr¡ @ g o o =6 =d) § q'á :CO :8. €g * X = o O(5 O E E O F iEE g O 5 ii .ao: 6 b r!'é lE á E=3,Iñ8i E .c 6 e a § o = a. o r.() o V d E (§ -o o L oo .E .c E f o rF a o L :, (§ o G .9 .c o o -c o o o {s o L a o L o o) E c) (§ .o E- = io o U' o L f (§ o + ñ .9 E o -g tt o F - rú o E g CL CL ¿ a @ .E t, o .Y (E E o c» .c !, c o s o o c o (,) E o (ú .o E5 E E = T' o (ú o o ¡tt o (§ o CD .c !, c + o o to CL g)(l)(, oc -c6 E'= CE ooE EE (6CL -o 9: cLo É (r) E9 att Oo =o (l,<. o bE EE .Y6 Cct oo. E() o-c o EB EE ;E BE 'EU) 8s E9 !; gE 'E !, 68 E§ E EE T I E -E§E F€ ñ = iáE Ex # § ÉÉE tE E o ctl c §t,# € (§= s -.t > =- I '=E 5 H s.= 6 rE Eó S = Eh EH -sE Ol r.t (D o, Pa E.óE E s E* l¿6.o6 Ú)co(i +npB o o =o CoE EEEfi E6:; COLO ga# fi l¡r 8o E o -9 rt) E o or lt = o .ct o c, ro o g o o. e €= t , 5 e I i"E g 4 E 3p e C EEE s E É ii'i o ñ Eo É p Ec, 'E E--E a E 985 I 6ñ g HÉ g § EÉE É á' d¡Eñ .L ú(I): ao E9q l+ '=E!+ E§; @ttt F (¡, ._c 'ñ E -9 o c tú = o J 9oo F q g E ñ Et € g F g üs É EEE g (ú "c o o (, E o (U d¡ E (, €p :- §§ U' ar! E t ¡tr = e o Io 1 Io I I l;: lr l(", ct l, E gls i ilr x 3l= §lr,v lx IY I I I lt: t: ttI lí xtñ <o Iñl SIF lo l= l5 lc lE I I l. lr l(f) lo = lt x l; (a¡ lsr l+ ln l= I I lI Ii F § iE li=É-ü tE le n e :é IEEEg.E IE E E I I I I I I I I I llo l6 =lN Et'- :fl 1"fi E IEE E loo (o + ri +- x @ + §t §a (ú E +_ x ñ !t (» 6 E +- x N t s o o o E + > x tf (ú E + t x tt E c, o. o > (I, .v, (, F (, 3 o o) E5 (oE EÑ o!, SG ;E E (§ E fL s Eeá o)'E -(§ (ÚE' ñ(tr EO otL o (L é_ 9b o)'E _(§ OE (E(Ú E6) oL o fL 9 o § ñ o E úl o (, o g tD o o § o) E 9 o § (, B q E 9 o § (ú E a G o o ¡¡ (ú = 5 z o o § o § o 6 (E E (1, o. E fÚ c o o o. 6 (ú E o o o, .9 o o C C' Nt tú o It, o aú CL § .C d E o a o E o L - o I x E o L 15 o .z L (¡) o C) a a o É = a -a) (ú E E o E o oo L o UI o L ) (ú o E "9 ? := C) o s o = o '5 L a) o ñ -9 ll (ú F (§ g o E -g CL CL ¿ (t, o N o 5 () f E c (ú .x ¿ ú, o E.Y s EB- =E E E¡É *xu H EgE $§E E ÉEÉ EEE = *Eo =E o! fis ..t ** EFE §E§EEEÉEÉ Eo g g+Éefi+ i BF= d¡'> ,o §t E E tr § o o § {, o a'd= ,=oo ijEE (§ccL sÍñ i B g Io = ai' .¿o óo (Ú-C gm I@- CO a eE g E E BE á É E se g r@-E* E I r.§ oo 's.E 8'= §§ E f, o o :c .a 8-= ó E sE E úrr=E o) olP E G oq c) 6 ti: rEt E ÉH É I 'ge ñ (o(s c o o, = 5 (ú .9 o ñ f o g o C (§ o E 6 .sE ^C E& É9 !(l, E 6 -o -9 (, ñ6 E ó br 8 E¿H o '-.cr E :r gr(Úo- .Y 6,9 o = ao g f/.)0, E E Ee E R o. :.<= o E o x-o E :, (¡ g(Ú o .N 8P383 =:-L ,, §t ttt (, §r o e § o z a iE iiP (ú a(, EP .cñ EE s! .= go r,l)> (E>r g8 6E d¡i (r, 3¡ - ? E 4 6>c E §flT E *EE d)ó6iú?i ñi5 o >E E -aE l= OE H *-c ooÉÉ oo >-o '=coE-83; o oo O (Ú-c dr e i $= E O SC (Ú(!€a) E E |.fr(Ú 6 € Eq E t g.= (r, ñ &(, m § 3.a EH E§ §* s 5 o E o E a o (g (ú o o l¡) (, rú .s, I C\¡ o E o o o E o E o o J (Ú = ¡ (ú L o E = c o CL ) U) (§ E o () = a o o c o .g o l¡ tt OE 30 6Cn o>6 'tros oÉo. ÉEO $; g t+t 3-90 Eocr) =-co ór/,b §A o o -ct E É12 Eb EE SEPARATAS PRESENTACIONES EN CONGRESOS MEMORIA DE PRACTICA DEL PROYECTO DE rNvESTrGAclót¡ Títulos ApARrclÓt¡ DE cAsos FAM¡L¡ARES DEL scdl Vll Congreso Nacional del Síndrome Cornelia de Lange La Caruña,'3 de Naviembrc del2012 DUPLICATION OF SMCíA LEADS TO CORNELIA DE LANGE SPECTRUII'I PHENOTYPE 1Oth As¡a-Pacific Conference on Human Genetics Kuala Lumpur, Malaysia, December 5h 2012 ApARrcrór.¡ DE cAsos FAM¡LIAREs DEL scdL JUSTIFICACION La siguiente presentación fue realizada para el Vll Congreso del Síndrome de Cornelia de Lange, el cual está dirigido a los pacientes y sus familias. En él se busca transmitir los conocimientos actuales y avances sobre el síndrome. En este caso en particular, se busco actualizar el concepto de casos familiares en este desorden. Previamente era aceptado que los casos familiares podian ocunir en familias donde alguno de los padres estaba afectado del síndrome, !o cua! es denominado transmisión autosómica dominante. Pero desde hace algunos años se viene introduciendo el mosaicismo germinal como mecanismo causal de casos, en los que los padres son portadores de la mutacién a nivel de óvulo o espetrnatozoides y carecen de los hallazgos físicos del síndrome. 23 2316113 Síndrome Cornelia de Lange Ca ro I ¡n a Baq uero Mantoya Irrodelos de herencia ffiÍffi,tt[e& Aubsómlo domlnanta Patrón v€rtiel @¡citmo germ¡nál Exp6iYldad varlabl! Casos famil¡ares descritos en la ¿1o CASO FAHILIAR debido . ilO§AlC¡§].lO GERttllf{AL? ffiiffit.lheh @ ¿ C{s 6¡o0tfn@ ? ¿ ,lissgg dG r!ffi€m¡a rD um oró¡iñ.6t dón ?GsNll.rc ffitffi¡llfe& Autosómico dom¡nante ^+ ,;.! varios individuos afe@dos Afedt pd iglal a hombres y a msjeres h miud d€ la descendercia hereda l¿ afedac¡ón No slts tereracioñs .r ,§§d La mutacién puede transmitir§e a la 24 casos fam¡r¡ares descritos .mf ffi 'L[e& l¡teret ñ;;ü;;;akórd¡d;; c¡!@cl¡@¡.ktsdrútud krrr ét El., 2oo1: Eddóí Fr §Éñhb d. h qión del F Cill €n d ffi@ñ.3q26.! rn.lgu@ffiEñil¡.6d.SL Desrlpclón 9 @ru lam¡lt.e .,u¿* I r- "*'m fhtrht6lt Casos famil¡arés descritos en la l¡teratura 23l6lL3 w¿* ll rcasos fam¡riares descr¡tos eJi;'ffi /l'Jlúu l¡teratura Ra.d d.1,, :@1: Tr.rsi!áóñ domlnrtrte prt rtr. dd Srcrll R{¡.iór de 25 @ao. f.mll¡.rc5 I¡Gsr¡Ddón dc I n!§o ero f.nillar *¿m i tou,::3: tlrlh¿{d$ Casos familiares descr¡tos en la --' Tmsmisi¡in de Padr€ a Hija de §índroñe de &me¡ie de kn§ @qEdo por ua müt¡dó¡ en la la r€g¡ón 5UfR del €en t'{tP8L Halla4os Clín16 iimilares Mútaeión er N¡PBI + tro¿m ll rdk'*f, ry'¡lls¿\ cons¡derac¡ones en casos familiares Sordera / H¡tpacusia Ret,aso PsEoñobr Aheracbnes€¡ el aprendizaie Tall¿ b¿já HÍffi,,,4e& Ht ¿¡ ru@t uo3a¡cismo Germinal xiu d.L, 2(D6: hicbño mdd p&tr & uÉ dbdó¡aMBñ6pdrcdc &hcffimoSl 25 SEPARATAS POSTERS PRESENTADOS EN CONGRESOS MEMORIA DE PRACTICA DEL PROYECTO DE TNVESTTGAcIóu Títulos Somatic mosaicism in a Cornelia de Lange syndrome patient with NIPBL mutation identified by Exome Sequencing Severe asymmetrical limb involvement in a Gornelia de Lange proband with a new NTPBL mutation XXVII Congreso Nacional de la Asociación Española de Genética Humana Madrid, fi al 12 de Abril det2013 Second SrlrG3 mutation confirms this gene as a cause of Corneiia de Lange syndrome European Human Genetics Conference Paris,France, June 8-1lil' 201 32 Somatic mosaicism in a Gornelia de Lange syndrome patient with NIPBL mutation identified by Exome Sequencing JUSTIFICACION El síndrome de Comelia de Lange es una condición de herencia dominante caracterizada por anomalías craneofaciales típicas, retardo en el crecimiento pre y postnatal, retraso psicomotor, alteraciones en el comportamiento, hirsutismo y compromiso multiorgánico. Mutaciones en cinco genes que codifican componentes del Complejo de Cohesinas, son responsables del TOYo de los casos de SCdL. Aunque el mosaicismo germinal se ha descrito como mecanismo causal de varios casos familiares, solamente se ha comunicado un caso de mosaicismo somático en un paciente NIPBL positivo" El objetivo de este poster es comunicar el diagnóstico de un paciente de SCdL con mosaicismo somático NTPBL positivo, detectado rnediante secuenciaciÓn masiva tras un resultado negativo de secuenciación sanger. Se describe una paciente de 5 años de edad, con: anomalias craneofaciales, retraso del crecirniento pre y postnatal, comunicación interauricular con arteria subclavia aberrante, enfermedad por reflujo gastroesofagico con hipomotílidad esofágica, inserción proximal del pulgar con sinostosis radio-ulnar, retraso psicomotor y compromiso derrnatológico consistente en e¿rfis marmorata. angioma tt¡beroso cervical con ausencia de cambios u otras anornalías en la pigmentación de la piel. Mediante secuenciación completa del exoma del paciente y sus progenitores, se ha detectado una nueva mutación missense en elgen NIPBL (c.6647A>C; p.Tyr2216Ser), que afecta solo a un 28olo de la muestra de DNA de sangre periférica y que altera un residuo altamente conservado del dominio HEAT repeat de interacción de NIPBL con otras proteínas. En conclusión se describe un paciente con SCdL y mosaicismo sornático que cursa, sorprendentemente, con una clínica clásica grave. Además, el diagnÓstico no pudo ser realizado por secuenciación sanger, sino mediante la nueva técnica de 33 secuenciac¡ón masiva de exoma completo. Este resultado sugiere que se puede estar subestimando la detección de mutaciones de genes conocidos responsables del SCdL. 34 Carotina Baguerol,2, María Concelpción Gil-Rodrtguez1, María Hernández-Marcosl, María EspeÍanza Teresa-Rodrigol, Tim tl. Stróm3, Frank J. KaiseÉ, Blanca Genef, Beatriz Puisact, Feliciano J, Ramost'2, Juan Pié1. I Unit of Cliniel Gemtics ard Fwtiml GsomiG, Depatments od Phamaology-Physidogy ad Pediatri6, Medi@l SdEd, Univereity of Z*agoa, Z$áqloa, S94i^. 2 Deparhrent of PBdiaa¡6, Hcpital Clíni6 1-%m Bles', Zaag@, Spain. 3 lml,tut frrr Humangenetilq llelmholtz Zentrum Mün€hen, Neuherberc, Gemdy. a lnsütut Ílr Humangmetik Lübeck, Unúmitiit a Lübed(, Lübedq Gffiny5 Deparknent of Geretiq Biocres H€lth Rffirch lnsütute, Hcpital UniveEittrb Cru6, Ba6kaldo, Spa¡n. Comella dé Laoge syndrome (CdLS; OMIM 122470) is a dominant inheritd disorder characterized by facial dysmorph¡sm, growth retardation, cognitive and behavior impairrErits" hirsutism and multiple organ invoh¡ement Most of QLS probands carry a mutiaüon in one of the five cohes¡n compléxassociated genes f'rrPBL, §MCIA, SfrC3, RAD2I and HDAC8. Somalic mosaicism has been only reported in three GdLS probanG, two of them had mutations in NIPBL. lnterestingly, two weeks ago, Huisrnan et al,, has described 10 NrPBl-mutated individuals with somatic n¡osa¡cism. Gase presentation The patient had classic symptoms of CdLS like typical fucial féatures, preand postnatal grulrth retardation, minor musculoskeletd anomal¡es, severe gastroesophageal reflux d¡sease with a swallowing disorder (that was surgically correc*ed by Nissen Fundoplication and gastrostomy), lab¡a majora hypodasia, hirsutism, diiamamorata and mgniüve impa¡rment (see photos in F¡gure 1). However she also had unusual clinical findings l¡ke the aberrant subdavian adery and the tuberous ang¡orna, visible on the neck (Fig. I iii). lt was noteworthy the absence of abnormal c¡rtaneo{rs pigmentation, segmental overgmMh or asymmetries, which are important dues for rnosab¡sm. Molecular analysis Genomic Dl.lA and RNA were isolated from peripheral blood l€ukocytes, fibmblasts and/or oral mucosa epithelial cells by standard Potocols. The entire coding reg¡on and fanking intron sequences ot NIPBL, SMCIA, SMC}, RAD21 and HDACS were screened for mutations by sanger sequencing. tn order to identify disease-cau$ng mutations, exorne sequencing in kio (patient and her unañectéd parents) was performed too. The quantif,cation of the relative amount of each allele, on DNA and RNA samples from different tissues, was cánied out by pyroseguencing with the PSQ 96MA pyrosequencer. Here, vúe report a pat¡ent with CdLS due to a mutation in the ,\¡rPBL gene (c6BI7A>C; p.(Tyr2216se4) (Fig. 2 and 3) in mosa¡c state détected by exorne sequendngThe mutation affec{s tyrosine 2216, Yth¡ch was evc{utionarily highly conseNed and located in the HEAT repeat domain of proteifl interadion (F¡9.4). In¡tially, mdec¡rlar analyses by sanger sequencing of the fiYe cau€ative genes were pérformed on DNA ftom Uood leukocytes, but unfortunately no mutation was detected. ln this conGxt, the paüent was a good candidate for exome séguencing by the family trio stsategy. The mutat€d allele was found in 287o of cells, evocative of somaüc mosaicism. By pyrosequencing, we confirmed the prasence of ÍVIPB! mutalbn in att the tissues anatlzed, which had differert embr¡¡onic origins: mesodem (peripheral blood leukocytes, fibroblasts) and ectoderm (oral mucosa epithdial cells). However, rclative amounts of wildtyp€ (A) ard rutated allele (C), either in DNA as ¡n cDl,üA from the patient, !,ere tissue'specific. lnterestingly, levels of mutated allele were found in ascerding ordefl Uood leukocytes < oral mucosá epithdial cElls < fibmblasts {Fig. 2 and 3). These findings support the hypothesis that the contribution of mutatiorÉ of the Fwe known causative genes of CdLS are underestimáed, perhaps due to somatic and/or germline mosa¡cismThis highl¡ghts the importance of screening difierent tissues from the proband and the parents, as well as, the combin€d apptication of multide screéniñg technhues. ruruffi F¡gurc 1 . Phsrctype ot fE palimt (i-i, Frchtd ad lá#l vit d the p@baod ¡n tu §d sek of tre. (ii¡) ) Frcnbl üH at ú¡e agp d I yú (tv-v) Hands and feet of the @ at thé age ot 3 yffi d 10 tuuEg iiE¡ElEE AATCf&¡+^T AATCT§¡BAf ii.EE¡EE ir.@@F¡qta ^^fcrM¡sar aarcrl¡D^f li,,),lrl i,, \ ,riillilrxl lil['\/1,ili:,t mtu@ ffi.,f*" lil.I-r, I I r ril^l'iil\ 'Ji ],![l¡ n' l,t Flguc 4. Ld¡d of w¡ó{yp aúe¡l (Y22l6Xü ad dtrd ésitu (S2216Xí) in tu pmposed ffi rtodd lor FGAT tuin of NIPtsL rbhF¡gur. 2. Páttfee of lb ffi f¿mily ard Pa$at ddopBo§m d son 39 ú tE ilB g*. The sqlffiing trausÉ prfdr€d @ gffib DMfw tte Fbdtubl* and reíPh€d Usd Mlt€ {wi) shffi trerer¡t búh ol thé peak d tu dl€b rú4 tb a s47A>c dffi mHiro h d t¡sGFigure 3. AIde sñüfÉtion by pyÉ4rffiing of ffi 30 of tlE ,ÚPBL Fe. Moleqrd a¡dys rec pelffi d gffi{c DNA tu tle t*ood bmryb, ftrobh§ts d ml re ePffid efs' 6 we[ 6 cONAÉom t ood l€iryt€ ild fbrobb§s. A!¡ tu aEilahle ffi@ ñom tE pdiHt, k p** ad B youEs boahs w* anay¿ed. Pyroscquerdng ffiffiffiffiffi §ilillllllllllll "x r Wl&Up. .Set€ a r lrutaH dHc c 35 Severe asymmetrical limb involvement in a Gornelia de Lange proband with a new NIPBL mutation JUSTIFICACION El síndrome de Comelia de Lange es una condición de herencia dominante caracterizada por anomalías craneofaciales típicas, retraso del crecimiento pre' y postnatal, retraso psicomotor, alteraciones en el comportamiento, hirsutismo y frecuente compromiso multiorgánico. A nivel musculoesquelético, los pacientes suelen presentar malformaciones en las extremidades superiores, casi siempre bilaterales, con un grado de afectación variable: desde braquidactilia hasta graves defectos de reducción (oligodactilia/hipomelia). Las extremidades inferiores suelen estar más raramente afectadas y de forma más leve. Hasta la fecha se han identificado mutaciones en cinco genes (NIPBL, SMC1A, SMC3, RADZÍ y HDACB) que codifican componentes estructurales o reguladores del Complejo Cohesinas y son responsables del65% de los casos de SCdL. En este poster describimos un paeiente con SCdL y afectación asimétrica grave de extremidades debida a una nueva mutación delgen NIPBL. El paciente, es un varón de origen senegalés de 3 años, que presenta un fenotipo craneofacial típico de SCdL, retraso en el crecimiento pre y postnatal, comunicación interauricular, retraso psicomotor y malformaciones en extremidades derechas consistentes en oligodactilia del 3o y 4o dedo de la mano, hipoplasia de tibia y agenesia de peroné. Las extremidades izquierdas eran normales. Elestudio genético detectó una nueva mutación mr'ssense de novo (c.6647A>G; p.TyA216Cys), que alteraba un residuo altamente conservado localizado en el dominia HEAT repeat de interacción con proteínas. En conclusión se describe un paciente con un fenotipo craneofacial clásico de SCdL pero con afectación asimétrica grave de extremidades derechas. El estudio molecular identificó una nueva mutacién tipo "missense' en el gen NTPBL @.TyA216Cys). La no existencia de ningún caso de SCdL similar hace que nuestro paciente sirva para expandir nuestro conocimiento del que podríamos denominar "espectro Cornelia de Lange". 36 Severe asymmetrical limb involvement in a Cornelia de Lange proband with a new ñIIPBL mutation Carol¡na Baquerol, Mdña Conc?lpción Gil-Rodríguez1, [fiarte Hernández-Marcos1, Marfa Esperanza Teresa-Rodrigol, Gbrta Bueno-Lozanú, A|icia wcente-Gabás1,2,[né-t Bueno-Martíne21,2, Beatriz Puisac', Juan Pié1, Feliciano J. Ramos1,2 . , Un¡t of Cl¡niel Geneti6 and Furretio@t G$omi6, Departrenls of Phama@logy-Physiology and Ped¡ati6, Med¡€l S{fiool, Univffiity ú Zar"€'ffi, zilagga, S@;i¡- 2 Deparkrent of Pediatri6, Hos!*td gínim "Lozao Bles', zarag@, Spain. Condia de Lange syndrome (CdLS; OMIM 122470) ts aóoñnant inherited dlsorder chaEcterized by typícd taciai dysntorphism, pre and postnatal growth retardation, ¡ntellectual disability. behavior impairments, hirsutism and multiple organ involvement. Anomálies in the extrem¡ties arc particular characteristic, mainly ¡n the upper limbs. Usually hands and feet are small and about one third of patients present $ith limhs redudún defeds. Lotver extremities are less involved lhan upper exhemiües, being the 2d and 3d toe syndac§ly, the most common dinical finding. To date, mutations in five genes, encodirE components ot the cohesion complex (SMC,4, SMC3 and RAD?I) and its regulators (irrP& and HDACS) have been found in -70% of CdLS casesGase presentation The patient's phenotype showed features of moderate CdLS: craniofacial dysmorphilsm, préand postnatal growth ¡etardation, atrial septal defect, feeding and swattowing disorder. hirsutism, drtis mafinorata and délayed devebpmental m¡lestones (see photos ¡n Figure 1)" The craniofac¡al feahrres induded synophrys with arched eyebrou/s, long eyebshes, depréssed nasal bridge with aflteverted nostrils, low s€t ears, long and promirEnt phittrum, thin tips with down-tumed comers, h¡gh arched palate, mhrognathia, lot\. anterior and posterior ha¡rline. He had ol¡godactyly of the 3d and 4s finger, tibial hypoplasia and fibular agenesis in the right limbs (Fig. 1 ii-iv, vi and viii). At the age of 1 year, he was $rgically intervened for an amputation oi the right leg. The kff limbs were normal (Fig. I ii,vi¡ and üii). Molecular analysis Genomic DNA and RNA were isotated tom peripheral blood lymphoc)rtes, f¡brotúasts and/or oral mucosa epithelial cells by §tandard proto@¡s. The entire coding region and flank¡ng ifitron sequences of rVrPBL (exons 2--47) were screened iot niltations by b¡directional sequencing. Relatve quantification of aüele-sp€cific level on DNA and RNA samples was peformed by pyosequencing with the PSQ 96MApyrosequencerHere, we report a patient with CdLS du€ to a missense mutátion in the N/PBL gene {e-6647A>G, p.$y¿216cys)) detec{ed by sanger sequencing (Fig. 2). PyrGsequencing anal],§es confirmed similar levels of each allele (-500/6) ¡n DNA and RNA samples from all tissues analyzed from the patient {oral mucosa epi&etiál ceüs, peripheral blood leukocytes and ftbroHast§} (Fig. 2). These ñnd¡ngs coññrm that the N,PBL mutation is not in mosaic state, even though ffiere is a segmental asymnx*ry of the limbsThe mutation affects tyrosine 2216, a highly conserved evolutionaríly residue and located in the HEAT repeat domain of protein interaction (Fig. 3). The efiects of the p.(Tyr2216c]rs) rrurtation uas predicted as probably damagirqg according to fae€ online predic'tion progrErms, PotyPhen-2 (http:í geneücs.bwh-harvard.edu/pphl) and SIFT (hftpJlsifrjcvi.orgl). Fcrlowing the hypot¡esis of a dominant-negative etrect of NIPBL missense mutatircns and its locáion in HEAT domain, this mutation co{rld disrup its intera€tion with some b¡nding partner. The patient showed a moderate trLS phenotype, although with severe l¡mbs reductions defects (Fig. 1). To date, only 8 patienb with GdLS have been reported to have lolver límb ma.ior abnormalities. Onty one of them had a molecular diagnosis, he canied a frameshift MPBL mutation in exon 46 mutation (c.7878dupA p.{His2627ThrE 5)- The distinctive loyver limb malfurmatiom of our pat¡ent allow us to expand the spectrum of the phenotype of the Cornelia de Lange. #ffi§§ F¡guÉ 1. Photype oÍ S€ páieú, trii) Fmdd tu ¿rd lffi liEüs d tu Pábtt h lhe 6Bt reek of liñr. ti¡-ú) MRI ard tgEW d r¡Jht leg patied á the 59e d tu mrúh ol life. (v) Fl1# úry Oi vñIñg¡úa¡dhñban&; md(úilMl¡ñúsoathe paHdtu+d2 Fm and2ltmtu iuEEt¡a i.ouEu ^^rcr&¡*^t a^,cr&á$^r l,r t,l.)r,,r lllli"iii,ir, l;i, r',,r]i iil Mhd@ Mtu¡,i@ l@* ekl@ fFl*qi;i.wlfm'l a:r@*/Gñ t f,reryg!! l 'oPP*Bg'"m&^* i,r l,r ,i]1"r,,",''iJl",'1,1,',lit mtud¡l!{e eM@ #* ,Mb¡@ tM;e ll-t}"w;l I aro%/cn lL{rylonl_l Nwel hetemzygo§ c.12(E l2O2delGTC i (p.Cfyr2216cys))mutal¡on i. in exon 39 of the NIPBL qene \\ -'--------------,------, l-ffi1 lr g¡r¿9g9,¡{ .,., F¡gure 3, Pffi of w¡d{ype ani¡l@B (Y2216) ed mubted 6ilre (C2216} h t}E prcpcd ffil I¡*l tu HEAT dmain of NIPBL pdein. "HHEH"[email protected]'¡'P..Eg HHEP Mffi HHEffi l, r i,, ) tl'i\i,l 'A.rll r ''irl;,1r,'t,1 &tudtl@ iltu@ @':m,.¡w"Ei l a¡*,er.e] la:.7,6¡/cesl a u,.r/eo&l ü.anu¡alaüE6IEE ^^'crü¡$rr arrcf¡Eaar EEEE E@EE .¡rcr@ar Arrct¡Es¡r I iiü l;,r i fftuffi ,i ;lw-l ' lA'4r,4%,cqd i i.l ttI{¡f¡ri it.!..i:t ?--:._ .,, -.|.. ir$.\.jtil "fu"r-ll|I¡¡llltHltl¡fi¡+ilij,j}-f-e'; ,UrPBL gene Hf Fbtue lsffi F¡gure 2. P€dige d the &ed fam¡y ad Fdia¡ ddoPtEogffi of ñn 3g d tu MP8L ge. lh seqffirrE ardFb porfoñred on @nic Dl,lA fm lhe pff dd rcs epftElial É[q Fíph€rJ Hed leukele a¡d fibrot¡bs (Füfi). § wd É eDl.lA frffi t{ood bmcybs afld fht*as {üiiix} *ws thé peaks ottle aHe €ry¡rE tE c. etTA>G ñisw ffi6... 37 Second SMC3 mutation confirms this gene as a cause of Cornelia de Lange syndrome JUSTIFICACION Síndrome de Comelia de Lange es un trastomo hereditario caracterizado por dismorfia facial, retraso en el crecimiento, alteraciones cognitivas, malformaciones de las entremidades y afectación multisistémica. Mutaciones en cinco genes, codificantes de componentes del complejo cohesinas, son responsables del fenotipo SCdL en el 7A"/o de los pacientes. Sin embargo, en uno de los genes, SMC3, sólo se ha reportado una mutación en un adulto levemente afectado. Aquí, se presenta una segunda mutación nueva en el gen SMC3 en un niño con SCdL. El tiene un fenotipo clásico del síndrome consistente en.dismorfia facial, múltiples anomalías musculoesqueléticas, hirsutismo y retraso grave del desanollo. También tuvo rniopía, una pérdida de audición moderada, estenosis aórtica supravalvular - pulmonar leve, estenosis pilórica, anomalías vertebrales, y enfermedad por refl ujo gastroesofág ico. El anátrisis molecular identificó una mutación de novo en el exón 22 @.2{90la99del) del gen SMC3, la cual produce deleciones en el marco de dos residuos altamente conservados y localizados en la parte C-terminal del dominio coiled-coil, p. (Leu832_Asn833del). El análisis estructural de la proteína SMC3 mutante mostró un carnbio grave en la posición relativa de los residuos que se acompañan, provocando el desplazamiento de los residuos correspondientes de las dos hélices antiparalelas que forman el dominio coiled-coil. Nuestro caso demuestra que las mutaciones en el gen SMC3 pueden causar un fenotipo leve a moderado, coincidiendo con lo prevlarnente informado, en algunos pacientes con rnutaciones en el gen SMCíA. Por último, se recomienda llevar a cabo le estudio molecular de SMC3 en pacientes con fenotipo SCdL en los que no se ha identificado mutaciones en los otros genes conocidos SCdL. 38 r-l.r .g Second SlttC3 mutation confirms this gene as a cause of Cornelia de Lange syndrome Marla Concepción Gil-Rodríguez1, Lilian Bomme Ousagef, Malthew A, Deardottr'í, Carolina Baqueror, María Xibaek2, Beatrtz Pulsac,, María Harnández-lrarcosl, María Espranza Teresa-Rodrigol, Ethel Que/,,ff, Frank J. Kaisets, Paulino Gómez-PuertasT, Ian D. Knnd'a, Fellciano J. Ramost, Juan Pié1. 1 Unit of Cl¡nbal GsEtics and FurE'tbnal GenflúG, Deparbmts of Pharmology-Ptr¡rsiologty arid Pediabics, Med¡cal §cfiool, UniHriB ot Zaragca ard lnstih¡te of l-l€lth §dmG of Aragón, Zaragoa, Spah. 2 Departrent of Clinical Geneti6 and Pediati{s, Odense Un¡vers¡ty Hosdtd, Oderse, Dffimrk. 3 Diüsion of Gsretic, The Childrm§ Hospital of Philaddphb, Philaddphia, Pd USA aThe Unimity o, PsnsylEnia Perdmn Schooi c{ Mediine, Phildelphia, PA, USA5 Ce[ C].de Grcup, Can6 Epigeneli6 atd B¡olQy Prcgm (PEBC), hstihrt d'lnGligtri(re Bbr¡ed¡€ de Edlvitge (IDIBELL), fH6pitalet de Llobrega! Barelm, Spain. o lnsti¡It für Humangeret¡k Lübeck, Univesitát zu Lübec( Lübedq Gemany. 7 Moleatlar Modelling Group, Ceilter of Molearlar Biology "Severo Oúoa" (CSIGUAM), Cantoblan@, Madrid, Spa¡n Univercidad Zaragoza c Comdia & Lange syndrone {frLS) is an inhérited disorder characterized by facial dysnorphism, growih and cognitive impairment, ltnb matformations and muhiile organ ínvdvemeritMutal¡or¡s in fle genes, encod¡ng subunits of the cohesin comdex {SnrcfA, SrlC3, RAD2í} and its regü*ators {N¡PAL, ,{DACa),, acsqrñt for 70% of patients with CdLS or o\redapping phenotype. Ho¡r,ever, b date, only a §ngle mildly afieded adult with a mutation in S,!tC3 (c.1¡!64_1¿l66del, p.(Glu488del)) had been reported in liBatrle. Here, we report on the second ncvel mutalion in the SlrC3 gene in a boy with CdLSCase presentat¡on The patier* tcas bom at 40 weeks gestáio'n by vagind ddiveryBirth webht lvas 2.985 g, length ¿19 cm and heád clrdrmferene 32 on (<10h cenüke for géstational age). He showed dassicat CdLS pheflotype with facial dysmo{phism, mulüple rursculod«detal anomalies, hirsd¡sm and severe developmental delay (Figurc f). He also had myopia, ÍrEderáb hearing loss, mild putslofiary and suprayalvular aortic stenosis, pyloric stenosis, vertebral anomal¡es, fueding and swalbwirE grobleñls, ga$o€§ophageal reffux disease, unilalerat cryptorctidism ánd inguinal hemis {Figure 1). At last examination, when he was 11 ñ?6rths old, ñ¡s reight was 7.5 kg (# centile), length 71 cm (10s cenfle), and head c¡rc*rmference 42 crn {<3d céntile). llllolecular analysis Genornic DNA was isolated from peripheral blood lymphocfes by standard prdocob. Due to previoüa negative results in NIPB{. and SirClA ñutaüon analyses, the entire coding region (exons l-29) and flanking intron sequen€s of SMC3 wse screened 6r ñEtatlons by bidire€Íbnal sequencing. Parental gefldypes were screened lo assess whether the variant was de llovo or inheriiedMdécrlar analysis of SMG3 identiñed a de rovo mutatio{r in exon 22 (c. 24$_2498dd-1 (Fúure 2), which predicúed an in-fame deletion of two residues highly conserved in vertebrat€s and ñxapped to the gteminat coiled-coil domain, p.(L4832_Asn83del) (Figure 3). Sruc&ral analysis of the mutañt SMC3 protein showed a se.ious shifr in the relati\re position of thé acconrpanyirq ¡esidues, badirlg to the dbdacetrent of ihe cotrespondirg residues of the turo anfparallel hel¡ces that toIm the coiled coil (F§ure 3). Our case den¡onstrates that mutations in the §MC3 g€ne máy cause a mild-moderate phenotype, as it has been previursly reprted in sorE patients with mutations in the S¡t/tCfA géñe. However, he also showed ftumerous m{or structural a¡romafíe.s and his craniofacid ñrdíngs were mild and less typical of CdLSEven the paf¡ent exhibited additional feáures distinct from dassicat CdLS i.duding ahsenee of synophrys, short stemum, cleff and butterlyvertebrae, and supraválwlar aortic §emsbTo date, some funcfional indications support ttle hypo{hesis lhat the mechan¡sm of pathogenicity in SMC1A añd SMC3 tdated CdLS might be due to a dominant negátive effect of lhe altered p'rctein r6ulling from misse¡se or in-frame mutationsNevetthéless, shouH not discard the loss of function as addiüonal potefltial cause ofpáthogenesis. Finaly, this emphasizes the importance of S¡tlC3 mutatio¡ screen¡ng in CdLS páients without a rdecL*ar diagnosis, wtlt*t will dow us to bder define the spectrum of the phan@pe and to assess fur genotype.phendype coffdation, ilMtffi ryffi@t F¡guc I . Phddype of üE Fti* (a) FMtal lbw d üÉ p.ú*d in rhe frst @k d fr, (b-c ) Fmntd ald sireai* at lhé age of 5 tmt§ (d) 15 rBúu- (e{ glos&etog@ d the tEnds aÉ üÉ 6mcic sfi@ al lhe age ol5 rsúii Noe ff Frtebm in the Ur@ic spk á{d hrfrtry debB d T6 l€vd (ffi). G+) Lefrhand aldftot of th Fbtallbage or 15 mil¡E §HC3_llM S2? ffi3_rc 82? srca:B¡t a27 ffi3 WsE A2? sUC3-BOü§ A2? sc3_ffio85 82? st€3_YE¡SI 835 ffi3 PNODAOS FlguE 2. HkIe of ttE *éd Éú*y a¡d !trtid d&ptE¡ogE6 of *§ 22 .f the Slrc3 gée The wtE elysb Frh.med o gffiic Dt'lAtu SE @ima Dsipheral blood lÉ@ftes (iE, slws de ¡i@ ffic2,f94_249gdel. E188det sUC3_mU¡r {43 ffi3_pñ@ 483 sc3_R¡r {a3 $c3sgsE t03 ffi3 8CñaU{ {A3 ffis_xErfoPú§ {63 suc3_IE¡sr {93 s{c3_EIS}tOD {64 L83i¡ N833del F¡gurc 3. (Lañ) Sc*EíÉtic rprei{diot ol:he SñIC1A§},1C3 tElerc(fim of tho @}Eslí 6ilr¡q and the l@lis d S|,1C3 ,Mire itr @{e*6d rtdÉh. Fostüo.¡ d ef,ffi ÉirÉs (E}z-Nfi}3¡ io t¡E ffiS pM ésdibed tBB b ¡¡daated by r€d doti T}ie ffid Biri€ {E186}, whn* §* prEYid§& lwt€d by lbárddñ d ¿ t2«}7l ir ¡rdcabd by a tu d (Right) iAdi!¡e se$E@ digrlM of wd pddre hqmbgffi b SMC3 in tt€ ffi s¡¡tBrd.g iréd ElrE E{48 ad LgXz-l{sR Réplwtred s€SsE e: ¡he sqprb§ (SfrC3_Ht irÁNr, tu4e aüe6 (S!dC3-PONGO), Eafü¡§ @Egú6 {S!¡B-RAT). k rtrdlr¡s (S¡!iC3-r{(}(rSE}, Bo§ lñ&6 {SirC3-Bü/lN}, Xenqps láeúb {SlrC3_XEl¡OPt S}, Sed¡aqrres @irhe (Silr€3_YEAST} PlññúM eiP*w (SrúC3_PLASlrlOOl. §stu ee c&.ed a@tdirg to @rEv&n, 39 SEPARATAS SEMINARIOS GENUD MEMORIA DE PRACTICA DEL PROYECTO DE INVESTIGACION Títulos Bone mass in male and female children and adolescenb with Down syndrome B-Vitamin status and intake in European adotescents. A review of the literarure Body composition changes during interventions to treat overweight and obesity in children and adolescenE: A descriptive review Aspectos perinahl§, ereeimiento y tipo de lactancia de los recién nacidos pequeños para la edad gestacional lron and vitamin status biomarkerc and its association with physical fitness in adolescents: The HELENA study Maternal postnatal depression and child growth: A European cohortstudy Prevalencia de la lactancia materna durante el primer año de vida en Aragón: Estudio CALINA Sex differences in the endocrine system in response to protein intake early in life 40 Bone rnass in male and female children and adolescenfs with Down syndrome González-Agüero A., vicente-Rodriguez G., Moreno L.A., casajís J-A. Osteoporos lnt 201 0: DOI 1 0. 1 007/s001 9B-0 1 O-1 449-T Los niños y adolescentes con Síndrome Down (SD) tienen niveles menores de masa ósea cuando se comparan con jóvenes sin SD. La dimorfia sexual de la masa ósea de individuos normales difiere de Ia observada en niños y adoleseentes sin SD. En este estudio se busca comparar la masa ósea y el dimorfismo sexual de la masa ósea entre jÓvenes de sexo masculino y femenino con SD, como también con controles adaptados alsexo y edad sin SD. " La densidad mineral ósea (Bon e minenl densrty (BMD)), la BMD volurnétrica, la densidad mineral aparente ósea (bone mineral apparent density (BMAD», la relación BMD/ talla (BMD/fteighf (BMDH)), y la masa magra total fuéron medidas a partir de DXA. Treinta y dos jóvenes (15 mujeres) con SD y treinta y dos jóvenes (13 mujeres) sin SD participaron en elestudioLas valoraciones ANOVA mostraron una menor BMAD y BMDH en las jóvenes de sexo femenino con SD comparadas con aquellas sin SD. Los test ANOVA revelaron una menor BMD corporal total y de la cadera en todos los jóvenes con SD comparados con los controles. Dentro del grupo de SD, las mujeres tuvieron una mayor BMD de la región lumbar comparadas con los varones. En conclusión. los valores bajos de BMD y de parámetros relacionados junto con las diferencias del dimorfismo sexual, indican qtre el desanollo óseo no es homogéneo en los niños y adolescente con SD. 41 Maternal postnatal depression and child growth: A european cohort study Grote V., Vik T., Von Kries et al. BMC Pediatrics 201 0; 1 0:1 0-14 La depresión postparto tiene una prevalencia del 10 al15o/o. Es un desorden de presentación variable en las diferentes poblaciones. Los factores de riesgo asociados con ella, son eventos estresantes en la vida, desempleo, conflictos matrimoniales, ausencia de apoyo social, bajos ingresos, antecedente de depresión y cesárea. Las madres con depresión se asocian con estilos de vida menos saludables y son más propensas a suministrar una alimentación menos saludable y a alterar los patrones de sueño del bebé. Por otro lado estas madres tienen una ingesta nutricional inadecuada y. desafortunadamente una tendencia a suspender precozmente la lactancia materna, en comparación con las madres no depresivas. En este estudio se busca explorar sí el peso, la longitud o el grosor de los pliegues de los hijos de madres depresivas difiere del de los hijos de madres no depresivas. Además evalúa si la depresión postnatal tiene altera la distribución de las medidas antropométricas y sitienen hacia la parte alta o baja de las curvas. La población del estudio esta constituida par 929 binomios madre-hijo, es un estudio multicéntrico a nivel europeo. Las madres fueron valoradas de acuerdo a la escala de depresión postnatal de Edimburgo (EPDS) a los 2,3 y 6 meses luego del parto. Los valores iguales o mayores a 13 de la EPDS fueron considerados como depresión matema. Se hizo un seguimiento durante 2 años a los niños y el final de este período se valoró el peso, la longitud, elgroso y el índice de masa corporal (lMC), los cuales fueron convertidos posteriormente a desviaciones estándar (DS) basándose en elestudio de referencia de crecimiento multicéntrico de la WHO. Los resultado fueron valorados por medio del Z-Score de peso para la longitud. El Z-score de peso para la longitud de tros hijos de madres depresivas fue mayor a 0.74 DS en relación a los hijos de madres no depresivas. El IMC no mostró ningún cambio significativo en ambos grupos. Los otros datos antropométricos tampoco demuestran cambios en ninguno de los dos grupos y finalmente el aiuste multivariado no mostró carnbios. 48 En condusión, los hilos de madres depr*ivas no üenen un mayor riesgo de padecer alteraciones nutricionales secundarias al estado emocional matemo, cuando son comparados con los hijos de madres no depresivas.. 49 Prevalencia de la lactancia materna durante el primer año de vida en Aragón: estudio CALINA Cuadrón-Andrés L., Sarnper Villagrasa M.P., Alvarez Sauras M.L et al. An Pediatr 2013; DOI: 10.101Glj.anpedi 2013.03.010 La lactancia materna es el alimento ideal durante los primeros meses de vida y es beneficiosa durante el período de introducción de la alimentación complementaria. Actualmente se recomienda administrarla exclusivamente durante los primeros 5 meses de vida y mantenerla hasta el segundo año de vida junto con la alimentación complementaria. Hoy en día la inmigración se ha constituido como un nuevo factor social, el cual podría estar asociado con una modificación de los hábitos de alimentación durante la lactancia" El objetivo de este estudio es analizar Ia prevalencia a.ctual de la lactancia materna en una muestra representativa de lactantes aragoneses, así como los aspectos demográficos, perinatales y sociales que influyen en su variabilidad. Este es un estudio longitudinal observacional en una cohorte representativa de la población de lactantes aragoneses, nacidos entre mazo del 2009 y marzo del 2010 y controlados hasta los 12 meses de edad (N=1602). Las variables evaluadas fueron: obstétricas, perinatales y nutricionales. Dentro de los resultados obtenidos, se encontró que la lac{ancia rnaterna exclusiva o como parte mayoritaria de la alimentación mixta fue superior al resto de modalidades nutricionales. Las variables maternas asociadas de forma significativa con el mantenimiento de la lactancia materna al mes de vida como a los 6 meses fueron: el parto vaginal, el alto nivel educativo, proceder de Africa, madres con sobrepeso o peso normaly ausencia de tabaquismo durante la gestación. En conclusión, en Aragón la prevalencia de la lactancia materna esta por encima de la media española y esta en aumento en comparación con los datos reportados previarnente, Más de la mitad de los lactantes de 6 meses de vida reciben lactancia materna y ya para el año de vida solo un 25a/o. El tipo de parto, el nivel de estudios, la procedencia, el grado de adiposidad y el tabaquismo son los principales condicionantes maternos que influyen en el inicio y mantenimiento de la lactancia materna en Aragón. 50 Sex differences in the endocrine sysfem in response to protein intake early in life Closa-Monasterlo R., Ferré N" Luque V., et al. Am J Clin Nutr 201 1 ;94(suppl):1 920S-7S La programación temprana de la salud se ha convertido en un foco de atención en las últimas décadas. La evidencia actual muestra que la programación temprana y la composición corporal juegan un papel importante en la programación tardía de Ia salud. Se ha sugerido que una ingesta alta de proteínas es un factor de riesgo nutricional para el desarrollo posterior de obesidad. El proyecto de Obesidad lnfantil de la Unión Europea ( EU CHOP) es el primer estudio controlado aleatorizado diseñado para valorar la hipótesis que una alta ingesta de proteínas durante las primeras etapas de la.vida conlleva a una ganancia más rápida de peso durante la infancia. Es conocido que el crecimiento y la composición corporal difiere en entre ambos sexos desde edades tempranas. Las niñas tienen mayor cantidad de grasa corporal y menor cantidad de masa magra, de igual manera el peso y la talla son menores en comparación con los niños. El dimorfisrno sexual es especialmente relevante en el crecimiento, donde las niñas muestran una mayor concentraciÓn del factor de crecimiento relacionado con la insulina (lGF) desde antes de la pubertad en cornparación con los niños. Se ha postulado que los efectos de la ingesta de proteínas en relación al crecimiento y ganancia de peso pudieran estar mediados por el eje IGF-1, Estudios observacionales han sugerido que el eje IGF-I es un rnediador de la prograrnación metabólica del crecimiento. Por lo tanto un aumento de la secreción del IGF-1 durante la niñez, como también de otras hormonas importantes, pudieran afectar la programación y modificar la fisiología normal del adulto. Basado en Io anteriormente mencionado, se hipotetiza que el sexo puede modular las vías de programación metabólicas tempranas, las cuales afectarían la respuesta del niño a la ingesta de diferentes cantidades de proteínas durante las etapas tempranas de la vida. En este estudio se busca investigar si el sexo modula la respuesta de parámetros bioquimicos relevantes y del crecimiento en relación a las cantidades ingeridas de proteínas en etapas tempranas de la vida. 51 Esta inveetigación se realizo por medio de un estudio clínico aleatorizado, multicéntrico y doble ciego. Los participantes fueron seleccionados entre Octubre de 2AA2 y el 31 de Julio de 2004.. Los niños fueron distribuidos en 2 grupos, uno donde recibían fórmula a base de leche entera de vaca con un alto contenido proteico y otro donde la fórmula tenia un baio contenido proteico durante el primer año de vida. Los principales resultados a valorar fueron: - Niveles séricos libre y totales de IGF-1, proteína unidora de I IGF (IGFBP2), IGFBP3 y la leptina por medio de ensayo inmunonadiométrico. - La adiponectina sérica por medio de radioinmunoensayo. - Protelna unidora de leptina. - Péptido C urinario por radioinmunoensayo. - Las medidas antropemétricas: peso, long'rtud, grosor del pliegue tricipital y subescapular. - La ingesta dietética: ingesta proteica e ingesta de energía, las cuales fueron valoradas a los 3 y 6 meses de vida por medio de un diario alimenticio. El estudio cumple los criterios de la declaración ll de Helsinski y fue aprobado por los comités de ética. En todos los casos se obtuvo consentimiento informado por parte de los padres. La respuesta del eje IGF-1 a la alimentación con una fórmula con alto contenido proteico fue modulada por el sexo. Los valores séricos de IGF-1 totales y libres, asf como la IGFBP3 fueron mayores en niñas que en los niños. Cuando se comparo la dieta de alto contenido proteico con la de bajo contenido, se asoció con un mayor valor de tGF-1 y una menor secrecién de IGFBP2. La respuesta a la dieta de alto contenido proteico tuvo una tendencia a ser mayor en niñas que en niños; además esta dieta tuvo una relacién péptido Clcreatinina mayor. La concentración de leptina fue mayor en niñas que en niños y se correlaciono con los parámetros del eje IGF-1. En conclusión, los resultados deles{udio sugieren que la respuesta endocrina a una dieta con un alto contenido proteico en edades tempranas de la vida, puede ser modulada por el sexo. Aunque la respuesta del eje IGF-1 en niñas fue mayor que la de los niños, no se evidenció un efecto acelerado del crecimiento. 52 BIBLIOGRAFIA 1. Liu J, Krantz lD. Cornelia de Lange syndrome, cohesin, and beyond. Clin Genet 2009: 76:303-314. 2. 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