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ESTUDIO DE CAMPO ETIOLÓGICO Y LESIONAL DE LAS MAMITIS EN GANADO OVINO DE RAZA LATXA DE GUIPÚZCOA Ane Miren Garciandia Gabilondo 2013 Trabajo fin de máster: Máster de Iniciación a la investigación en Ciencias veterinarias 2 ESTUDIO DE CAMPO ETIOLÓGICO Y LESIONAL DE LAS MAMITIS DE GANADO OVINO DE RAZA LATXA EN GUIPÚZCOA a Autor/a: Ane Miren Garciandia Gabilondo Director/a: Delia Lacasta Lozano Facultad de veterinaria de Zaragoza 25 de Noviembre de 2.013 Repositorio de la Universidad de Zaragoza-Zaguan http://zaguan.unizar.es 3 Agradecimientos: A todos aquellos que han hecho posible la realización de este trabajo en cualquiera de sus fases… A Delia Lacasta, por TODO A Chema Gonzalez, por ayudarme con la estadística A Luis Miguel Ferrer y Juan José Ramos, por su ayuda, por su sabiduría… A Marta Ruiz de Arcaute,por ayuda y generosidad A Miren Ortega y Luis Figueras de G.T.V A Lourdes Mintegi y Feli Arrese de” ArdiekinConfelac”. A Saioa Elizalde de “Artzai Gazta”. A Ana García de NeikerTecnalia. A Iñaki Elgarresta, Esti Martinez y Ekain Murua de E.L.E. A Gemma Arandia, por albergarme cuando venía a Zaragoza. A los pastores, por su colaboración. A toda mi familia, en especial a mis padres (Inasio y Begoña). 4 ÍNDICE 5 RESUMEN 7 INTRODUCCIÓN 11 1. EL GANADO OVINO EN LA COMUNIDAD AUTONOMA VASCA 11  PRINCIPALES CARACTERÍSTICAS DE LA RAZA LATXA 12  CARACTERISTICAS SOCIO CULTURALES Y ECOLOGICAS 13  SITUACION DEL GANADO OVINO EN GIPUZKOA 14  ANTECENDENTES HISTÓRICOS 15  SITUACIÓN ACTUAL 16  LA GANADERIA en las explotaciones “profesionales” en GIPUZKOA 18 2. PRODUCCIÓN LÁCTEA EN EL OVINO LATXO 22  RECUERDO ANATÓMICO Y FUNCIONAL 25 a. DESARROLLO DE LA GLÁNDULA MAMARIA 26 b. BAJADA DE LA LECHE 27  COMPOSICIÓN DE LA LECHE 29  LA MAMITIS EN EL GANADO OVINO 29 a. MAMITIS CLÍNICA 30 b. MAMITIS SUBCLÍNICA 31 c. MAMITIS CRÓNICA 32 d. FUENTES DE INFECCIÓN 33  PROGRAMA PARA LA MEJORA DE LA CALIDAD DE LECHE EN GIPUZKOA 33 a. PROTOCOLO DE ACTUACION ANTE RECUENTOS CELULARES ELEVADOS, RECUENTOS S. aureus ELEVADOS 42 O BROTES DE MAMITIS CLINICAS b. PROTOCOLO DE ACTUACION ANTE UN PROBLEMA DE BACTEROLOGIA ELEVADA 43 c. EXPLOTACIONES SIN PROBLEMAS APARENTES PERO QUE DEMANDAN EL PROGRAMA 43 JUSTIFICACIÓN Y OBJETIVOS 44 6 MATERIAL Y MÉTODOS 47 1. CARACTERÍSTICAS DE LAS EXPLOTACIONES ANALIZADAS 48 2. REALIZACIÓN DE CALIFORNIA MASTITIS TEST (CMT) 53 3. TOMA DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO 55 4. EXPLORACIÓN CLÍNICA DE LA GLÁNDULA MAMARIA 56 5. ESTUDIO MICROBIOLÓGICO DE LAS MUESTRAS 59 6. ESTUDIO ESTADÍSTICO 62 RESULTADOS Y DISCUSIÓN 64 1. MICROBIOLOGÍA 65 2. LESIONES GLÁNDULA MAMARIA 68 a. TIPO DE LESIÓN 68 b. RELACIÓN DE OVEJAS CMT POSITIVO CON LA PRESENCIA DE LESIÓN MAMARIA 71 c. RELACIÓN ENTRE PRESENCIA DE LESIÓN MAMARIA Y CULTIVO MICROBIOLÓGICO 72 d. RELACIÓN DE LOS AISLAMIENTOS MICROBIOLÓGICOS CON EL TIPO DE LESIÓN MAMARIA 78 3. LINFONODOS 82 a. RELACIÓN ENTRE AFECCIÓN DE LINFONODOS Y CMT 82 b. RELACIÓN ENTRE AFECCIÓN DE NÓDULOS LINFÁTICOS Y AISLAMIENTO MICROBIOLÓGICO 83 c. RELACIÓN ENTRE AFECCIÓN DE NÓDULOS LINFÁTICOS Y MICROORGANISMOS 85 4. LACTACIONES 87 5. RECUENTO CÉLULAS SOMÁTICAS EN TANQUE. 90 CONCLUSIONES 93 REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 95 7 RESUMEN 8 Las mamitis han sido y siguen siendo uno de los principales motivos de preocupación de los ganaderos y técnicos que trabajan con el ovino de leche, dadas sus graves consecuencias a nivel económico (disminución en la producción láctea, desvieje, coste de los tratamientos…), higiénico (problemas sanitarios que además pueden afectar a la salud pública a través de la comercialización de productos lácteos con una calidad higiénico-sanitaria deficiente) y legal. Con el fin de arrojar algo de luz sobre los aspectos más desconocidos de esta patología, nos planteamos realizar el presente trabajo. El estudio ha sido llevado a cabo en doce explotaciones profesionales de ganado ovino de leche situadas en 10 municipios de Guipúzcoa, que trabajan únicamente con la raza autóctona Latxa y que son elaboradores del queso D.O. Idiazábal. Las actuaciones realizadas y los datos recogidos en estas explotaciones para el presente estudio se llevaron a cabo en el marco del Programa de Mejora de la Calidad de la Leche de la Diputación foral de Guipúzcoa, durante las campañas que van del año 2004 al 2013. Tras la realización del California Mastitis Test (CMT) a todos los animales en ordeño presentes en ese momento en la explotación, se les realizaba una toma de muestra de leche individual a todas aquellas ovejas CMT positivo. Posteriormente al ordeño, se realizaba la exploración física de las ubres y de los nódulos linfáticos supramamarios de estos animales. Los datos obtenidos eran recogidos en una ficha individual y posteriormente, vertidos todos los datos en una tabla excell para analizarlos estadísticamente mediante el programa SPPS. El número total de muestras individuales analizadas fue de 271. Los resultados microbiológicos obtenidos muestran que el primer grupo de microorganismos aislados son los Staphylococcus coagulasa negativo (SCN) con un 34,2% de aislamientos, seguidos a cierta distancia de S. aureus (11,4%), Mannheimia haemolytica (5,2%), Streptococcus spp. (4,7%), Enterococcus (3,6%) y, en menor porcentaje, por otros microorganismos de menor incidencia en las mamitis subclínicas y crónicas sobre las que se centra el estudio. El porcentaje de muestras que no presentan ningún tipo de crecimiento es del 38,2%. 9 En el estudio de la relación de animales con lesión mamaria y cultivo microbiológico, los resultados arrojan que los animales que presentaban cultivo positivo pero que no tenían lesión en glándula mamaria, supusieron el 20,7% de las 271 ovejas analizadas. Estos animales son los que presentan mamitis subclínicas, sin sintomatología apreciable pero con reducción de la producción láctea. Por otro lado, los animales con cultivo positivo y lesión en glándula mamaria, que son aquellas ovejas que presentan mamitis crónicas, supusieron un 41 % de las muestras analizadas. Los falsos positivos al CMT, o animales con cultivo negativo y sin lesión en glándula mamaria, resultaron ser el 17,3% y los animales con lesión en glándula mamaria pero cultivo negativo, que son animales con fluctuaciones en la dinámica de eliminación del microorganismo causante de las lesiones, fue de 21%. Este último grupo es el que nos interesa especialmente ya que estos animales, al tener cultivo negativo no serán eliminados por el ganadero, sin embargo, son probablemente eliminadores del microorganismo de manera intermitente y por lo tanto, fuente de infección. Las exploraciones de las glándulas mamarias realizadas a los animales CMT positivos revelaron que un 61,36% de los animales presentaban algún tipo de lesión detectable, frente a un 38,64% que no presentaba lesión aparente. Las dos principales lesiones detectadas en mama fueron: atrofia del parénquima mamario con un 71,8% de los casos y lesiones nodulares con un 20,5 %. Seguido a bastante distancia de induración (5,3%), leche enquistada (0,6%), edema (0,6%) y lesiones cutáneas (0,6%). Con respecto a la relación entre lesiones mamarias y microorganismos aislados de la leche, se obtuvieron diferencias significativas al comparar la capacidad de producir lesión mamaria de los dos microorganismos más frecuentemente aislados, SCN y S. aureus, siendo éste último aislado más frecuentemente de mamas con lesiones mamarias palpables. Las lesiones que tiende a producir S. aureus, con frecuencias similares, son: atrofias (35,5%), lesiones nodulares (32,3%) y tumefacción (19,4%). Sin embargo, los SCN son los principales causantes de mamitis subclínicas sin lesión detectable, pero cuando producen lesión, ésta es mayoritariamente de tipo atrófico (57,6%). 16  Creación de las asociaciones profesionales: Desde los años 89 comenzaron a crearse asociaciones de ganaderos para el control lechero y la mejora genética de la oveja Latxa (E.L.E. Asociación de criadores de ganado Latxo de Guipúzcoa), así como asociaciones profesionales de elaboradores de queso artesanales (Artzai gazta).  Y como colofón al incentivo para la producción de queso se creó la denominación de origen del queso Idiazábal. Con todo ello, se produce una “profesionalización” del ganadero de ovino, con un ligero aumento del número de ovejas por rebaño y del número total de cabezas en Guipúzcoa, pero con un descenso en el número de explotaciones. SITUACIÓN ACTUAL En la actualidad, la actividad ganadera ovina en Guipúzcoa nos muestra dos situaciones bien diferenciadas: a) Explotaciones “profesionales”: Dedicadas exclusivamente a la producción ovina y cuyas características generales son:  Tamaño medio de la explotación: 434 ovejas.  Inversiones importantes en instalaciones (cintas de alimentación, ordeño mecánico, queserías con su pertinente registro sanitario…).  Integrados en asociaciones profesionales:  De control lechero y mejora genética.  De elaboradores artesanos de queso.  D.O. Idiazábal Cabe destacar que, dentro de este grupo de explotaciones profesionales, existen ciertas diferencias entre aquellos pastores que hacen queso en su explotación, con lo cual concluyen todo el proceso productivo a nivel de granja, y aquellos que entregan la leche directamente a la industria quesera. Estos últimos, por lo general, no han realizado tantas inversiones en instalaciones, tienen una menor producción láctea, pero aprovechan más los pastos comunales. 17 El número de explotaciones de ovino en Guipúzcoa con más de 200 ovejas era de 92 en diciembre de 2012, según el EUSTAT. b) Explotaciones “no profesionales”: son aquellas en las que la producción ovina no es la única actividad laboral que desarrolla el pastor. Las explotaciones de este tipo a su vez las podríamos dividir en:  Explotaciones mixtas: donde las ovejas se entremezclan con vacuno de carne y/o con yeguas y en las que, generalmente, algún miembro de la familia, además, se encuentra trabajando en otro sector. Estas explotaciones cuentan con unas 150 cabezas por rebaño y el ovino supone una fuente de ingresos para ese caserío, pero no la única. En consecuencia, las ovejas se explotan menos intensamente. Según el EUSTAT el número de explotaciones de este tipo en 2012 era de 114.  Pequeñas explotaciones familiares: que son caseríos que prácticamente han abandonado la actividad ganadera y que se dedican a otros trabajos o profesiones, pero que continúan viviendo en el caserío (cabe destacar la cercanía física del mundo rural, del industrial y del urbano en Guipúzvoa debido al reducido tamaño de la provincia). Estos caseríos mantienen pequeños rebaños, menores de 50 ovejas, para limpiar los terrenos, sin apenas fines lucrativos, vendiendo únicamente los corderos que producen, pero sin explotar la producción láctea. En la gestión de estos caseríos influye una cuestión cultural ya que, tradicionalmente, siempre ha habido ganado ovino en los caseríos guipuzcoanos, el cual se encargaba de mantener los montes “limpios”. Los actuales caseros mantienen un pequeño núcleo de ovejas destinadas fundamentalmente a este fin, que se mantienen por motivos sociales y ecológicos. Estas pequeñas explotaciones (2.269 en el año 2012, EUSTAT), tienen una gran importancia en el mantenimiento del ecosistema, la biodiversidad y el paisaje propio de Guipúzcoa. 18 El presente trabajo ha sido realizado en explotaciones de las que hemos denominado como “profesionales”, ya que son éstas las que están más preocupadas y ocupadas en la obtención de una leche de elevada calidad higiénica y sanitaria. LA GANADERIA en las explotaciones “profesionales” en GUIPUZCOA En la actualidad, las ganaderías profesionales de ganado ovino de Guipúzcoa se explotan en un sistema semiextensivo, el cual ha sufrido cierto grado de intensificación durante los últimos 30 años. Las causas que ha promovido esta mayor intensificación han sido:  Mejora genética de la oveja Latxa y el consecuente aumento en producción láctea.  Mejora de las instalaciones y del manejo.  Reconocimiento y aumento del consumo del queso de Idiazábal.  Cambio paulatino del modo de vida de la sociedad, que ha afectado en igual medida al modo de vida de los ganaderos. A pesar de que hoy en día el sistema de producción no es tan extensivo como lo era hace 30 años, los pastos y su aprovechamiento siguen siendo la base de la rentabilidad del ganado de ovino latxo en Guipúzcoa. Las ovejas tienen un único parto al año, el cordero está con la madre de 20 días a un mes, y se sacrifica como lechal, con un peso vivo de 10-13 kg. A continuación las ovejas pasan a ordeño, se ordeñan entre 4 y 6 meses, para finalmente, llegado el verano, secar la totalidad del rebaño hasta el siguiente parto. Tras el secado, todos los ganados son llevados al monte para aprovechamiento de pastos. Allí nos encontramos ante dos grupos principales de sistemas de pastoreo:  Aquellos que, a partir de los meses de mayo y hasta octubre aproximadamente, suben a las sierras comunales más altas: sierra de Aralar, sierra de Urbia, etc.  Aquellos que no tienen derecho a pastos comunales y han de aprovechar los pastos bajos, incluso en periodo estival. 19 Los partos suelen estar agrupados para una mejor gestión por parte del ganadero. La agrupación se realiza, tanto mediante sincronización hormonal con esponjas con progestágenos e inyección de PMSG previa a la inseminación, como, simplemente, mediante el uso del efecto macho, ya que durante la época de lactación los machos no suelen estar en las naves junto con las ovejas. Las ovejas se bajan de los montes a las explotaciones (caseríos) hacia mediados de octubre, donde pasan a suplementarse en pesebre, mientras aprovechan los pastos de alrededor de la explotación para asegurar un buen preparto. Los primeros partos comienzan en noviembre. Tal y como hemos comentado anteriormente, en todas las granjas realizan agrupación de partos, o bien para la inseminación o por el efecto macho. Las granjas que inseminan, además echan los machos después de la I.A. para asegurar la cubrición de todos los animales. No obstante, en la mayor parte de las explotaciones suele haber un primer golpe de partos en noviembre-diciembre y otro más suave hacia febrero-marzo (partos de corderas y primalas). Antiguamente los partos solían venir para San José, época que coincidía con los pastos nuevos, y por lo tanto se producía cordero y leche sin apenas suplementación, únicamente aprovechando los pastos primaverales. Algunas de las nuevas explotaciones ecológicas están comenzando a volver a los partos en estas fechas para aprovechar más y mejor los pastos. Pero volviendo al manejo que se realiza en la mayor parte de las granjas, en diciembre los corderos son llevados al matadero, con pesos vivos que varías desde 9 a 13 kilos, aproximadamente, tras un mes de lactación (únicamente se alimentan de leche materna). La carne de cordero suele alcanzar el máximo precio en Navidad, éste es el motivo principal por el que las fechas de partos se fueron modificando a través de los años para poder vender los corderos en esta época. Sin embargo, la realidad es que hoy en día, el cordero supone una fuente de ingreso ínfima en las explotaciones de ovino de Gipuzkoa, en comparación con los ingresos que aporta la leche. 20 Tras la retirada de los corderos, las ovejas son llevadas a ordeño dos veces al día. La recría se suele mantener con las madres unos 15 días más, pero, aún así, estás ovejas se llevan a ordeño junto con las demás. Un ordeño se realiza por la mañana y otro por la tarde-noche, con un intervalo entre ellos aproximado de doce horas. La hora del ordeño varía de invierno a primavera, para poder aprovechar mejor los pastos. Algunas explotaciones pastorean el ganado durante todo el año, pero la mayoría mantienen a las ovejas estabuladas, sin sacarlas a pasto, los meses de noviembre, diciembre y enero y durante este tiempo, los animales son alimentados mediante cintas de alimentación, dos veces al día. En estos meses los pastos son aprovechados, sobre todo, por las yeguas y por el ganado vacío y/o con partos más tardíos. Hacia finales de febrero, las ovejas comienzan a salir a los pastos de alrededor del caserío, ya que siguen ordeñándose, pero ya empieza a haber suficiente hierba para ser aprovechada a diente. Además, después del ordeño, se les suministra maíz, cebada, avena, alfalfa, pulpa de remolacha o soja, dependiendo del precio y disponibilidad de la materia prima. A continuación se saca el ganado el campo, el cual volverá a la nave para el ordeño de la tarde y quedará estabulado durante la noche. A partir de Mayo-Junio, por lo general, el ganado vuelve a sacarse tras el ordeño de la tarde y duerme fuera, ya que el día alarga mucho y pueden seguir aprovechando los pastos tras el ordeño de la tarde. La mayoría de los pastos bajos o del valle están cercados, divididos en parcelas, lo que evita en gran medida que el pastor tenga que estar físicamente presente mientras el ganado come; básicamente basta con que se limite a vigilar y cambiar de campos cuando haya que hacerlo. Esto supone un importante ahorro en mano de obra. El secado definitivo de los animales se realiza en la mayoría de los rebaños de Guipúzcoa, como muy tarde, a finales de Julio. Por lo general, se seca más tarde en aquellas explotaciones que no tienen acceso a los pastos comunales altos. Si el año va bien y no hay grandes sequías, el aprovechamiento de los pastos sin suplementación añadida, se realiza desde junio hasta septiembre, a excepción de las corderas, a las que cada día más, se tiende a suplementar. 21 Además, en primavera, si el pasto es abundante, se realizan un par de cortes que se henifican o ensilan para su posterior uso en invierno. Por otro lado, en Guipúzcoa, aún hay un elevado número de cabezas de ovino que sube a los montes altos o sierras comunales los meses de Mayo a Octubre. Algunas de estas explotaciones realizan las inseminaciones en la sierra, otras prefieren realizar las cubriciones abajo y subir un poco más tarde. A continuación mostramos en un esquema el resumen del manejo del ovino en las explotaciones “profesionales” de Guipúzcoa. Cordero: 20-30 días Peso vivo: 10-13 kgr Lactaciones de 3 a 6 meses. Inseminación. Monta natural. Sierras comunales Pastos bajos 22 2.PRODUCCIÓN LÁCTEA EN EL OVINO LATXO La explotación del ovino Latxo en Guipúzcoa está destinada a la producción láctea con el fin de elaborar el queso denominación de origen Idiazábal. Con lo cual, en los últimos años se han llevado a cabo programas de mejora destinados a aumentar la producción láctea en esta raza. Entendemos por programa de mejora al conjunto de actuaciones diseñadas y desarrolladas por una asociación de criadores de una raza oficialmente reconocida o por un servicio oficial, orientadas a la conservación, mejora y/o fomento de la raza correspondiente. Tal y como hemos comentado anteriormente, la mejora productiva fue propulsada desde las instituciones públicas a través de subvenciones destinadas a promover las medidas necesarias para mejorar las producciones: controles lecheros, inseminaciones artificiales, ayudas para mejora de instalaciones, etc. En el año 1981 se inició un plan de conservación y mejora de esta raza autóctona y se crearon las Asociaciones de Criadores territoriales en la Comunidad Autónoma del País Vasco (AGORALA en Álava, ACOL en Vizcaya y ELE en Guipúzcoa). Con la creación de las asociaciones, en el año 1982 se puso en marcha el programa de Control Lechero. Tres años más tarde (1985) comenzó a realizarse el Control Lechero también en Navarra y en 1988 se creó la asociación en dicho territorio (ASLANA). Pero no fue hasta el año 1989 cuando se agruparon las cuatro asociaciones en la Confederación de Asociaciones de Criadores de Ovino de razas Latxa y Carranzana (CONFELAC). La evolución censal en CONFELAC ha sido: AÑO 1983 1985 1990 1995 2000 2005 2010 CAV Explotaciones 262 263 239 208 194 175 165 Ovejas 54.457 61.392 63.786 64.031 63.791 65.178 60.594 NAVARRA Explotaciones __ __ 44 48 66 67 59 Ovejas __ __ 14.663 21.343 18.022 30.684 30.784 TOTAL Explotaciones 262 263 283 256 260 242 224 Ovejas 54.457 61.392 78.449 85.374 81.813 95.862 91.378 Tabla 1: Datos de Confelac emitidos por el Ministerio de Medio ambiente, y medio rural y marino (http://aplicaciones.magrama.es/arca-webapp). 23 Tal y como se puede observar en la tabla 1, con la creación de la Asociación Navarra en 1988 se produjo un importante incremento del número de rebaños, aunque en los últimos años se ha observado un ligero descenso, debido, fundamentalmente, al cese de la actividad por parte de algunos ganaderos. No obstante, el censo de ovejas presentes en la asociación ha ido aumentando progresivamente y en los últimos 5 años se mantiene más o menos estable, con una ligera tendencia al descenso. Estos datos evidencian un aumento considerable del tamaño de los rebaños a lo largo de estos años. Si comparamos los datos de la tabla de CONFELAC con el resto de la población de Latxa y Carranzana, observamos que, aproximadamente una cuarta parte del total del censo en la CAV (60.594 ovejas de un total de 213.763) es el que se encuentra en Control Lechero y el tamaño medio de los rebaños que son socios de CONFELAC es mucho mayor que el del resto de la población: En Guipúzcoa, 57 de las 92 explotaciones con más de 200 ovejas existentes están integradas en Confelac, y no podemos olvidar que existen además 2.383 explotaciones con menos de 200 ovejas. En la actualidad (2012) CONFELAC cuenta con 84.347 ovejas registradas, distribuidas en 228 rebaños, de los cuales, 53.625 animales de 159 explotaciones proceden de la CAV (el restos son los censos correspondientes a Navarra). El estudio llevado a cabo en este trabajo ha sido desarrollado en algunas de las explotaciones de la confederación. Como observamos en la Tabla 2 y en la Figura 1, la evolución productiva de los rebaños integrados en Control lechero en la CAV expresada en base a la Lactación Tipo (la estimación de la leche producida desde el parto hasta el día 120 de la lactación, expresada en litros), se ha incrementado de manera exponencial desde el año 1983 hasta la actualidad. 1983 1985 1990 1995 2000 2005 2010 LCR 74 96 104 127 131 136 163 LCN 96 110 113 123 128 143 160 Tabla 2: Evolución de la producción de la LCR: Latxa cara rubia y la LCN: Latxa cara negra en las últimas 3 décadas expresada en datos productivos de Lactación Tipo. 24 Figura 1. Muestra la evolución de la lactación tipo en rebaños LCR (Confelac). A continuación pasaremos a describir los datos productivos actuales (campaña 20112012) de la oveja Latxa en la Comunidad Autónoma Vasca (CAV) y en Guipúzcoa: Medias de lactación en la CAV:  Lactación tipo (a 120 días): 168 litros  Lactación real: 207 litros  Leche ordeñada: 164 litros (teniendo en cuenta la leche ingerida por los corderos durante el amamantamiento).  Días de ordeño: 164 (si excluimos el mes de amamantamiento). Medias de lactación en Guipúzcoa:  Lactación tipo: 170 litros.  Lactación real: 215 litros.  Leche ordeñada: 181 litros.  Días ordeñados: 153 días. Sin embargo, hay que resaltar que los rebaños de “élite”, aquellos que llevan varios años realizando un trabajo más intenso a nivel genético, así como de manejo, sanidad, etc., presentan un desarrollo productivo superior, y hablamos de medias de lactación tipo de 233 litros para la LCR (Latxa cara rubia) en CAV y 212 litros para la LCN (Latxa cara negra) en CAV (Datos obtenidos de Confelac). 25 RECUERDO ANATÓMICO Y FISIOLÓGICO A continuación vamos a realizar un breve recordatorio de la anatomía y fisiología de la glándula mamaria, que nos va a servir de base de conocimiento para el entendimiento de las mamitis, foco de estudio del presente trabajo. En la oveja, a diferencia de los bóvidos, la ubre está constituida por dos glándulas mamarias ubicadas en la región inguinal, a izquierda y derecha de la línea ventral media. Las glándulas están separadas internamente por el ligamento suspensor medio y exteriormente por el surco intermamario. La unidad funcional de la glándula mamaria es el alvéolo, que tiene forma esférica o piriforme y está compuesto por un estrato simple de células epiteliales que rodean la cavidad alveolar. Estas células epiteliales secretan leche hacia la luz alveolar desde donde es derivada por un pequeño conducto. Cada alvéolo está rodeado por algunas células mioepiteliales y por una red delicada de capilares sanguíneos. Las células mioepiteliales son contráctiles y juntas comprimen el alvéolo durante la expulsión de la leche. Los alvéolos se agrupan en pequeños racimos o lobulillos que son drenados por pequeños conductos. Los lobulillos a su vez se agrupan en grandes racimos o lóbulos y estos son drenados por conductos de gran tamaño. La unión de estos grandes conductos que drenan los lóbulos forma conductos todavía más grandes que derivan finalmente en la cisterna de la glándula o seno lactóforo. Ésta se vacía en la cisterna del pezón, que es una cavidad en el interior de la ubre y se localiza justo por debajo de la cisterna de la glándula. La leche eventualmente sale del pezón a través de la parte más angosta del mismo o canal, en la punta del pezón. 32 en tanque resulta una útil herramienta para determinar el estatus de infección intramamaria en el rebaño. Las bacteriologías del género Staphylococcus representan el grupo de agentes más frecuentemente aislados de mamitis subclínicas, siendo responsables del 75-80% de los casos (Bergonier et al., 1999; Jones y Watkins, 1998; Menzies y Ramanoon, 2011). En rebaños de España cuyos recuentos celulares oscilaban entre 250.000 cels/ml y 1 millón de cels/ml se estimaron prevalencias de mamitis subclínicas de entre el 16% y 35%, respectivamente (Romeo M., Ziluga I. y Marco J., 1998). La persistencia de las mamitis subclínicas durante la lactación depende en gran medida del patógeno que las produce, pero, por lo general, es una persistencia alta, puesto que SCN, los gérmenes más comunes, presentan una elevada prevalencia en las explotaciones ovinas de Guipúzcoa y, además, la detección y eliminación de los animales afectados no suele ser todo lo precoz y eficaz que debiera. La presencia de las mamitis subclínicas durante el periodo seco es un factor importante a considerar de cara a establecer estrategias de control. Hay estudios que demuestran que en el ganado ovino se produce un rango de autocuración que oscila entre el 35% y el 67%. Esta variación está condicionada por el tipo de manejo productivo, sobre todo periodos secos más o menos cortos (Esnal et al. 1994; Bergonier et al. 1996; Hueston et al , 1989; Ahmad et al., 1992). C. MAMITIS CRÓNICAS Las mamitis crónicas se definen como inflamaciones de la glándula mamaria que se prolongan en el tiempo, pudiendo llegar a desarrollar lesiones irreparables en la ubre, por lo que a su vez las mamitis crónicas pueden ser: subclínicas, cuando aún no existen lesiones apreciables en la glándula mamaria, o clínicas, con lesiones en la ubre irreparables. El estudio realizado por Marco (1994), sobre explotaciones de ovino de leche de raza Latxa en la Comunidad autónoma Vasca, describe prevalencias de lesiones mamarias de 16,8% de las ovejas. 33 Imagen 2. Mamitis crónica con presencia de lesión nodular. Foto: Ferrer L.M D. FUENTES DE INFECCIÓN Las principales fuentes de infección a tener en cuenta son los animales portadores y las infecciones mamarias subclínicas. Concretamente, los principales reservorios de Staphylococcos son los animales con mamitis subclínicas y/o crónicas y también aquellos animales que presentan lesiones cutáneas en los pezones, aunque SCN y S. aureus también se pueden aislar en cultivos procedentes de pieles de pezón sanas, así como de piel de orificios externos (Burriel A.R., 1997; Scott P.R et al., 1997). Otra vía importante de contagio sería a través de los corderos, al transmitir microorganismos existentes en sus tonsilas en el periodo de amamantamiento, como por ejemplo Mannhemia haemolytica, que tiende a producir mamitis clínicas de tipo agudo (Omaleki L., Barber S.R., Allen J.L. y Browning G., 2010). Sin embargo, otras bacterias productoras de mamitis se encuentran en el medio ambiente, tales como Enterococcos (en las camas en mal estado) y Pseudomonas (en agua o ambientes húmedos) (Scott M.J y Jones J.E., 1998). Además, no podemos olvidar la potencial fuente de infección que puede resultar una máquina de ordeño con pezoneras sobreutilizadas y/o con una incorrecta limpieza y desinfección del circuito, así como las manos del ordeñador en caso de ordeño manual, sobre todo en el caso de Staphylococcus (Ziluga et al., 1998; Burriel, 1998). 34 PROGRAMA PARA LA MEJORA DE CALIDAD DE LA LECHE EN GIPUZKOA Dada la importancia que tiene a distintos niveles y ámbitos el problema de las mamitis en el ovino de leche y la calidad de la leche y puesto que en Guipúzcoa la explotación ovina pasa por ser una explotación cuyo principal producto es el queso de Idiazábal, queso realizado a partir de leche cruda, desde la diputación de Guipúzcoa, se promovió la instauración de un programa de calidad de leche, dirigido a todos los pastores de la provincia, cuyo objetivo era el control y la mejora de la calidad de la leche en las explotaciones ovinas de Guipúzcoa. El programa se puso en funcionamiento durante la campaña 1999-2000 y, tras 13 años de realización ininterrumpida, todavía hoy se sigue implementando. El programa se coordina desde la Asociación de criadores de la oveja Latxa en Guipúzcoa (E.L.E.) y es llevado a cabo por 2-3 veterinarios, contratados para tal fin. El funcionamiento del programa ha sufrido diferentes variaciones desde sus inicios hasta la actualidad, variaciones sobre las que nos parece importante hacer hincapié, ya que ayudan a conocer mejor la realidad actual de las explotaciones ovinas en Guipúzcoa. En un principio, el programa fue dirigido a las explotaciones que contaban con un censo superior a 100 animales; por lo tanto, se vieron incluidas, tanto aquellas explotaciones con dedicación exclusiva al ovino, como aquellas explotaciones mixtas o con dedicación parcial que, como hemos visto, son tan numerosas e importantes en Guipúzcoa. Además, no debemos olvidar que entre los pastores “profesionales” (aquellos con dedicación exclusiva) tenemos dos situaciones bien diferenciadas:  Por una parte nos encontramos con los pastores que no hacen quesos, y que por lo tanto entregan toda la leche a alguna de las tres industrias que funcionan en Guipúzcoa. Estas explotaciones, generalmente, cuentan todavía con instalaciones obsoletas, sin ordeño mecánico y con naves antiguas, a pesar de tener un número elevado de ovejas (una media de 500). Además, tienen una producción láctea por oveja menor que la de los queseros, porque la mayoría de ellos no están integrados en la asociación de mejora genética 35 (únicamente el 20% de los ganaderos integrados en E.L.E. no son elaboradores de queso). Por lo tanto, son explotaciones con un mayor número de animales, pero con menores inversiones en instalaciones y alimentación. Aprovechan en mayor medida los pastos, hacen uso de un mayor número de hectáreas y muchos de ellos pasan los periodos estivales en las sierras o montes altos. Las industrias que les recogen la leche realizan toma de muestra de la leche de tanque, por lo que cada ganadero ha de tener como mínimo 4 muestras analizadas y válidas en las que se indican: los recuentos celulares, la bacteriología y la presencia o no de inhibidores, así como la posible presencia de agua añadida en la leche. Estas muestras de tanque son analizadas en el laboratorio interprofesional de Lekunberri (ILL Lekunberri) y los resultados están a disposición tanto del ganadero, como de la diputación, y, desde que se dio inicio al programa de calidad de leche, también tienen acceso a los mismos en E.L.E., puesto que las actuaciones y avisos se pasarán y coordinarán desde esta asociación.  Por otra parte, contamos con los ganaderos elaboradores de queso, que a su vez son explotaciones, en su mayoría, con un perfil muy concreto. El número de animales por explotación ronda alrededor de las 430 cabezas. Son explotaciones que han realizado muchas más inversiones en instalaciones (máquinas de ordeño mecánico, naves nuevas, queserías con su correspondiente registro sanitario, cámaras de queso, cintas de alimentación, parrillas en naves…) y genética. Muchas de ellas están integradas en la asociación de mejora genética de Guipúzcoa, y, prácticamente todas, en la asociación de elaboradores artesanos de queso (Artzai gazta). Estas explotaciones se ven obligadas a llevar su APPC correspondiente y, como parte del mismo, han de tener resultados de análisis de leche de tanque de, como mínimo, 2 muestras al mes, en las que se analizarán: o Recuentos de células somáticas y bacteriología de cada muestra o Composición de la leche ( prot., grasa, extracto seco...). o Recuentos de S. aureus en una de las muestras mensuales. o Recuentos de coliformes, salmonella y butíricos en una muestra mensual, como mínimo. 36 Por otra parte, y aunque no sea obligatorio, desde Artzai gazta, instaron a analizar muestras de tanque para detección de listeria monocytogenes, de forma voluntaria y en la periodicidad que los pastores determinen. Hacemos hincapié en la diferenciación entre ganaderos “queseros” y “no queseros” porque los problemas e inquietudes que presentan referentes a la calidad de la leche son, a menudo, muy distintos y, por lo tanto, requieren un trato diferenciado, ya que modifican sustancialmente los resultados obtenidos. Como hemos comentado, al principio se actúo en todas las explotaciones con censos superiores a 100 ovejas y se aplicaba el programa de control de la calidad de la leche de manera voluntaria en aquellas explotaciones que así lo requerían. Por otra parte, E.L.E. (la responsable de coordinar y centralizar los datos) recibía periódicamente tanto los resultados de las tomas de muestras incluidas en el programa, como las analíticas concernientes a las muestras tomadas por las industrias, así como las correspondientes a las muestras de tanque emitidas por los elaboradores de queso. Una vez analizados todos los resultados, se comenzaba a avisar a aquellos ganaderos que tenían en su haber 2 o más muestras consecutivas con recuentos superiores a 600.000 células somáticas, o recuentos bacteriológicos superiores a 500.000 UFC. Por supuesto, los avisos por recuentos elevados de S. aureus en tanque eran (y son) inmediatos y prioritarias las actuaciones por el problema de salud pública que puedan acarrear. Las dos primeras campañas en las que el programa de calidad de leche se puso en marcha, se actuó en un número elevado de explotaciones (136 y 81), y los principales motivos de aviso y/o actuación eran: los recuentos celulares elevados, la bacteriología elevada, ambos parámetros elevados, actuaciones por recuentos elevados de S. aureus en tanque y problemas de mamitis clínicas. No obstante, y a pesar de que esa era la situación entre las explotaciones de más de 100 ovejas sobre las que se trabajaba, pudimos observar que la mayoría de las explotaciones que tenían problemas de bacterias y/o de células, y por lo tanto serios problemas de mamitis subclínicas, eran aquellas explotaciones que entregaban leche a las centrales, no elaboradoras de queso y con escaso interés por la situación higiénico 37 sanitarias de la leche que producían. Con los años, hemos podido observar que se trata de un problema de mentalidad del ganadero; no acaban de creerse que el hecho de que tengan unos recuentos celulares elevados sea indicativo de un alto grado de mamitis subclínicas y de que ello incida directamente en un descenso de la producción láctea. Lo único que realmente ven, creen y les preocupa es no tener demasiadas mamitis clínicas, y que las células en tanque no lleguen a 1 millón, ya que es a partir de esas cifras cuando desde las industrias lecheras comienzan a establecer los descuentos. A pesar de acudir a estas explotaciones, realizar actuaciones e intentar mentalizar de la importancia de eliminar los animales con lesiones y detectar los subclínicos, los ganaderos no acababan de ver la importancia y la situación no mejoraba sustancialmente. Por lo tanto, a partir de la campaña 2003-2004 se decidió dedicar todo el esfuerzo humano y económico a aquellas explotaciones que realmente querían mejorar la calidad higiénico-sanitaria de la leche que producían a pesar de que el programa seguía abierto a la totalidad de los rebaños con más de 100 ovejas. Ello condujo, por una parte a reducir el número de rebaños sobre los que se actuó, y por otra parte, a modificar la principal causa de actuaciones, ya que el perfil de los ganaderos que demandaban el programa era otro (queseros) y, por lo tanto, sus características e intereses también eran distintos. En la Figura 2 vemos la evolución del número de actuaciones que se realizaron en el marco del programa de calidad de leche en la campaña del 2003-2004 y en la del 2008-2009 (en las gráficas se cita únicamente el año de inicio de la campaña, pero en el sistema de explotación de ovino latxo siempre consideramos periodos bianuales, con el inicio de la campaña el 1 de Septiembre del año pertinente y el fin de ésta campaña suele considerarse el 31 de agosto del año siguiente). 38 84 27 0 20 40 60 80 100 campaña Evolución del nº de actuaciones 2003 2008 Fig. 2. Evolución actuaciones del programa de la calidad de leche. Y en las Figuras 3, 4 y 5 podemos observar la comparativa de las diferencias que presentaban las explotaciones sobre las que se actuaba en la campaña del 2003 y en la del 2008. 33 67 85 15 0 20 40 60 80 100 2003 2008 comparación en función a producto final lecheros queseros Fig. 3. Diferencias entre las explotaciones sobre las que se actuó en las campañas del 2003 y 2008 en función a su producto final. 39 59,5 40,5 88 12 2003 2008 Tipo de dedicación dedic.parcial dedic.exclusiva Fig. 4. Diferencias entre el tipo de dedicación (parcial o exclusiva) entre las explotaciones sobre las que se actuó en 2003 y en 2008. 34 66 81,5 18,5 0 20 40 60 80 100 2003 2008 Tipo de ordeño ordeño manual ordeño mecánicol Fig. 5. Diferencias entre el tipo de ordeño que tenían las explotaciones sobre las que se actuó en el programa de calidad de leche en el año 2003 y el 2008. Los ganaderos “queseros” están mucho más concienciados con la importancia de obtener una buena calidad de leche, ya que ellos mismos ven las consecuencias sobre sus quesos si parten de una leche de calidad insuficiente. Es por ello que, las medias anuales de recuentos celulares en estas explotaciones que realizan quesos son mucho más bajas que en los lecheros. 40 Estos ganaderos productores de queso están más acostumbrados a eliminar animales con lesiones mamarias, a realizar CMT con cierta periodicidad y acuden al programa de calidad de leche, fundamentalmente, como herramienta de control del estado sanitario de las ubres y, ocasionalmente, ante casos de recuentos elevados de S. aureus en tanque o ante problemas de mamitis clínicas. En la Figura 6 observamos las diferencias en los motivos de actuación del programa entre las campañas del 2003, en las que todavía se actuaba en todas las explotaciones de más de 100 cabezas y la del 2008, en la que las actuaciones estaban ya centradas en las explotaciones “queseras”. Fig. 6. Diferencias en los motivos de actuación entre las campañas 2003 y 2008. En la figura 7 mostramos las diferencias entre los motivos de actuación según sean explotaciones cuyo producto final es el queso o aquellas que venden la leche a las centrales. Podemos observar que los recuentos celulares y las bacterias son el principal motivo de llamada en las explotaciones lecheras, no así en las que producen queso, en las que los principales motivos de actuación son: las mamitis clínicas, el control del estado sanitario y la presencia de S. aureus. 41 Fig.7. Diferencias entre los motivos de actuación del programa de calidad de leche en explotaciones “lecheras” y “queseras”. Desde la campaña 2006-2007 y hasta la actualidad el perfil de las explotaciones sobre las que se actúa es similar, al igual que los motivos por los que se actúa. Son explotaciones de dedicación exclusiva al ovino, elaboradoras de queso en su mayoría, con instalaciones modernas y adecuadas (ordeño mecánico), con recuentos medios de células en tanque óptimos ( En los ganaderos integrados en Artzai gazta y durante la campaña 2.011-2.012, el 68% de las muestras de tanque analizadas se encuentran en valores inferiores a las 500.000 células por ml., el 26% entre 500.000 y un millón y únicamente un 6% de las muestras de tanque analizadas superan el millón de células somáticas) y muy mentalizados sobre la importancia de tener un estado óptimo higiénico-sanitario de las ubres, ya que ellos sí ven directamente la repercusión que una mala calidad de leche tiene sobre el queso que elaboran a diario. En la actualidad está establecido un protocolo de actuación bien marcado en función de la causa que lleva a realizar el programa de calidad de leche en cada granja. A 010 20 30 40 aureus control mamitis células listeria células y bacterias motivos de actuación no queseros queseros 48 1. CARACTERÍSTICAS DE LAS EXPLOTACIONES ANALIZADAS El estudio ha sido llevado a cabo en 12 explotaciones de ovino de raza Latxa de la provincia de Guipúzcoa, distribuidos en diez municipios diferentes, que se muestran en el mapa detallado a continuación. Los datos analizados en el presente estudio fueron recogidos durante el trabajo realizado para el Programa para la Mejora de la Calidad de la Leche, instaurado en Guipúzcoa desde 1.999 y para el que he estado trabajando desde el año 2000. Por lo tanto, todas las explotaciones analizadas participan de forma habitual en dicho programa. Los datos estudiados provienen de actuaciones realizadas en estas explotaciones durante alguna de las siguientes campañas: 2004-05, 2006-07, 200708,2008-09, 2009-10 y 2012-13. El número total de explotaciones muestreadas para el presente estudio es de 12 y son las que se citan a continuación: 1. Explotación 1: ABAROA, Olaberria. 2. Explotación 2: AIZPORRA, Zaldibia. 3. Explotación 3: ARMUÑO, Berastegi. 4. Explotación 4: ARRETA, Beizama. 5. Explotación 5: ILLORRETA, Bedaio (Tolosa). 6. Explotación 6: GALARRAGA , Errezil. 7. Explotación 7: LEKUNGARAI, Oiartzun. 8. Explotación 8: OIHAN TXIKI KOOP, Orexa. 49 9. Explotación 9: ORORTEGI, Aia. 10. Explotación 10: ARANBERRI, Ataun. 11. Explotación 11: AGERREBURU, Aia. 12. Explotación 12: GALTZATA, Oiartzun. El perfil de las doce explotaciones en las que hemos analizado los datos recogidos es, en rasgos generales, bastante similar; once de las doce explotaciones participantes se caracterizan por ser explotaciones “profesionales”, con dedicación exclusiva al ovino de leche. La única explotación que no es de dedicación exclusiva, complementa su actividad pecuaria con el trabajo fuera de la explotación de uno de los miembros de la familia. A excepción de una, que es una cooperativa, son explotaciones de tipo familiar, en las que la mano de obra está compuesta por miembros de la misma familia, sin trabajadores externos. Las doce explotaciones incluidas son elaboradoras de queso, con su correspondiente registro sanitario y con importantes inversiones en instalaciones: máquina de ordeño, queserías, nave específica para el rebaño… Imagen 1.Explotación. Imagen 2. Cintas transportadoras. Imagen 3. Artesanos queseros. Imagen 4. Elaboración de queso artesano. 50 Todas trabajan bajo el sistema de un único parto por año, a excepción de la cooperativa, cuyo censo, 1.791 cabezas, es considerablemente superior a la media de rebaños profesionales en Guipúzcoa, y que trabajan bajo el sistema de cuatro épocas de partos al año (Diciembre; Febrero-Marzo; Junio y Septiembre). Son explotaciones integradas en asociaciones profesionales de control lechero y mejora genética, así como en la asociación de elaboradores artesanos de queso “Artzai gazta” y también en la Denominación de origen de queso Idiazabal. A continuación mostramos una tabla con las principales características de las 12 explotaciones participantes en el estudio: EXPLOTACIÓN 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 *Tipo dedicación 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 1 1 *Censo AÑO 689 410 343 321 418 150 422 1791 455 503 410 299 Censo reposición 153 80 60 80 40 32 56 340 86 80 80 45 % reposición 26% 24% 18% 29% 11% 27% 15% 23% 23% 20% 23% 20% % desvieje 15% 20% 17% 29% 21% 21% 17% 21% 22% 20% 20% 19% *Variedad LCN LCR LCN LCR LCR LCR LCR LCR LCR LCR LCR LCR *Alojamiento N N N N N C N N N N C N Ordeño mecánico SÍ SÍ SÍ SÍ SÍ SÍ SÍ SÍ SÍ SÍ SÍ SÍ *Tipo máquina LB LA LB LB LB LB LB LB LA LB LB LB *Tipo de secado G S S S S G S S S S S S *Tipo suelo P P CC P P P P CC P P CC P Tabla 1. Principales características de las explotaciones y las instalaciones recogidas para el estudio. El significado de las siglas se describe a continuación: *Tipo dedicación: 1 exclusiva, 2 mixta *Censo año: Censo que tenía la explotación durante la campaña en la que se actuó. *Variedad: LCR Latxa cara rubia, LCN, Latxa cara negra. *Alojamiento: N nave, C cuadra en el caserío * Tipo máquina: LA línea alta, LB línea baja * Tipo secado: G general, S selectivo * Tipo suelo: P parrilla, CC cama caliente 51 Decidimos analizar estos parámetros a nivel de granja porque pensamos que podrían tener repercusión en la aparición de mamitis, aunque con los datos recogidos para este trabajo se diluye mucho el análisis de su influencia, de modo que no han sido, por el momento analizados. A continuación explicaremos un poco más algunos de los datos de explotación recogidos. En el estudio del tipo de alojamiento que poseen las ovejas en estabulación, denominamos “nave” cuando se trata de una instalación nueva o remodelada, independiente del caserío (aunque siempre en sus terrenos), que consta de espacio suficiente para estabular a la totalidad del rebaño y donde también suelen ir incluido el espacio para la máquina de ordeño y la quesería (debidamente aislada de donde están las ovejas). Y denominamos “cuadra tradicional integrada en el caserío”, cuando las ovejas se localizan en el espacio tradicional que han ocupado las cuadras en los caseríos del país vasco, con o sin modificación de las mismas. Otro de los parámetros recogidos es el tipo de suelo que poseen las ovejas en la nave y/o cuadra. En los casos estudiados, todas ellas tenían o bien parrilla (denominada también cama fría), que recubre la fosa o bien paja (cama caliente), paja que, en invierno, suele renovarse una vez al día o cada dos días debido a la elevada humedad de la zona. El tipo de máquina de ordeño que posee cada explotación lo describimos a continuación:  Máquina de ordeño de Línea Alta: La conducción o tubería por dónde va la leche está colocada por encima de la plataforma de ordeño. Tiene la ventaja de que una misma unidad de ordeño se emplea en ambos lados de la sala. El nivel de vacío debe ser más alto para una buena ascensión de la leche.  Máquina de ordeño de Línea Baja: La tubería está colocada por debajo del nivel de las ovejas. La conducción de la leche se hace con mucha facilidad, pero cada unidad de ordeño sólo sirve para un lado de la sala. El tipo de secado hace referencia a si realizan tratamiento de secado intramamario en todas las ovejas (secado sistemático), o si realizan un secado selectivo, realizando 52 únicamente el tratamiento intramamario en el momento del secado en aquellas ovejas y cuarterones que han presentado algún problema: mamitis subclínica diagnosticada, mamitis clínicas, etc., o que aún están produciendo una cantidad considerable de leche cuando decide secarse la totalidad del rebaño. A continuación recogemos los datos productivos de cada explotación (Tabla 2). Los parámetros analizados son:  Lactación tipo: Es una estimación de la leche producida desde el parto hasta el día 120 de la lactación, expresada en litros. Estos datos los obtenemos a través de la “Asociación de Criadores de ganado Latxo de Gipuzkoa” (E.L.E), puesto que todas las explotaciones sobre las que realizamos este estudio están integradas en la asociación y por lo tanto tienen datos de control lechero.  Motivos de actuación: Tal y como apuntábamos en la introducción, los motivos por los que se actúa y se participa dentro del programa de calidad de la leche son diversos, pero en este estudio, las actuaciones se debían, o bien a recuentos celulares de S. aureus en tanque (las alertas se dan a partir de 1.000 UFC /ml., pero a veces se actúa incluso con recuentos inferiores ya que se pueden dar casos de toxina en queso con recuentos no demasiado elevados), o bien a revisiones rutinarias del estado sanitario de las ubres en la explotación. Nos parece importante diferenciar este dato, porque a pesar de que la sistemática de actuación es prácticamente similar para ambos casos, cuando nos encontramos en explotaciones en las que tienen recuentos de S. aureus en tanque, tomamos muestras de leche de aquellos animales que dan un CMT de grado dudoso y que en ausencia de problema de S. aureus probablemente lo daríamos como CMT negativo. Esto se hace así porque no podemos arriesgarnos a dejar eliminadores en el rebaño, dado el riesgo que ello supone a nivel de salud pública.  Recuentos de células somáticas de muestra de tanque: Con este dato ofrecemos los datos de las medias de los recuentos de tanque en la campaña sobre la que se actuó y los obtenemos a través de las “Asociación de elaboradores de queso artesanos” (Artzai-gazta). Los ganaderos integrados tienen una media de al menos 2 recuentos celulares de tanque al mes. 53 Explotación 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 *LT 2004-2005 152 178 185 *LT 2006-2007 164 *LT 2007-2008 155 123 *LT 2008-2009 189 145 129 *LT 2009-2010 126 189 141 196 147 *LT 2012-2013 220 *Motivo de actuación R A A A A A A R A A A R *RCS medio en campaña 412 527 477 159 1.628 467 466 467 478 354 --- 151 Tabla 2. Datos productivos de las explotaciones en estudio. * Lactación tipo en campaña de actuación (LT): lactación a 120 días (en litros) * Motivo de actuación: A recuento de S. aureus en tanque, R revisión. * RCS: Recuento de células somáticas en tanque medio durante la campaña en la que se realizó la actuación clínica. Tanto si se acude a la explotación por un elevado recuento de S. aureus en tanque, como para realizar una revisión enmarcada en el Programa para la Mejora de la Calidad de la Leche, el protocolo de actuación a nivel de granja es el siguiente: 1º. Se realiza el CMT a todas las ovejas que están en ordeño. 2º. Se toman muestras de leche para realizar un estudio microbiológico de los animales CMT positivos. 3º. Se lleva a cabo una palpación de la ubre en aquellas ovejas que muestran resultados positivos al CMT. 2. REALIZACIÓN DE CALIFORNIA MASTITIS TEST (CMT) El California Mastitis Test (CMT) es una prueba indirecta y rápida que se realiza a modo de screening a nivel de campo y que consiste en la adición de un compuesto químico a la leche, el cual rompe las células (lisador) y deja salir su ADN fuera de la membrana celular, estos filamentos de ADN tienen tendencia a formar unas estructuras tipo gel 54 cuando se unen unos con otros. El grado de viscosidad de la muestra nos da idea de la cantidad de células somáticas que tiene la leche y, en consecuencia, nos detecta la presencia de mamitis subclínicas, no detectables en la exploración clínica de la ubre. A nivel práctico, el CMT resulta una útil herramienta que, además de discriminar las infecciones subclínicas, sirve como primera estimación de cara a determinar la pérdida de potencial lechero dentro de un rebaño (Romeo et al.,1995). En el trabajo del Programa de control de Calidad de la leche los CMTs se realizan siempre a la entrada de las ovejas a la fosa de ordeño, antes de poner las pezoneras para ordeñar. El CMT lo realizamos con paletas específicas de ovino, que tienen únicamente dos pocillos, uno para cada glándula mamaria. La rutina llevada a cabo al realizar el CMT es la siguiente: tras desechar los primeros chorros, recogemos leche en cada pocillo (leche de la derecha en pocillo derecho y leche de la izquierda en pocillo izquierdo), a la cual añadimos el reactivo específico para el CMT (puede ser de diferentes marcas comerciales: Drofilsa, CMT detector de farco veterinaria…) en la misma cantidad aproximada de la leche del pocillo, y a continuación agitamos la paleta en círculos, observando por una parte la precipitación y la viscosidad que va adquiriendo la muestra y por otra parte, el cambio de color. En función al grado de viscosidad obtenido, graduamos los resultados en tres niveles diferentes:  Grado 1 de reacción (+): Débil precipitación, que además va disminuyendo rápidamente conforme pasa el tiempo.  Grado 2 de reacción (++): Un grado de viscosidad más aparente y que se mantiene durante más tiempo.  Grado 3 de reacción (+++): La muestra se “coagula“ de forma clara y el color cambia también de manera patente. Se toma nota del número de identificación de las ovejas que dan resultado positivo a la prueba y del grado de reacción y, además, estos animales son identificados mediante una marca de espray en la mama afectada para, de ese modo, poder mantenerla identificada y controlada hasta la obtención de los resultados microbiológicos. 55 3. TOMA DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO A las ovejas con resultado CMT positivo, sea el grado que sea, se les toma muestra de leche para realizar un análisis microbiológico y detectar los microorganismos implicados en el proceso. Las muestras de leche se toman siempre al inicio del ordeño. Tras desechar los primeros chorros, realizamos el CMT e inmediatamente después se toma muestra del lado positivo o de ambos en el caso de que los dos sean CMT positivo, siempre en tubos independientes para cada cuarterón y bien identificados. Los tubos para la recogida de muestra son estériles (vacuette, 9 ml), la muestra suele ser de aproximadamente 8 ml y el protocolo de recogida de muestra es el siguiente: 1º. Limpieza y desinfección del pezón mediante toallitas desinfectantes. 2º. Desechamos los primeros chorros de leche. 3º. Destapar el tubo de muestras, asegurando que el tapón no entra en contacto con ningún material “contaminante”. 4º. Toma de muestra de la leche colocando el tubo de manera inclinada y sin que tenga contacto con el pezón para evitar contaminaciones. 5º. Identificación de la muestra con el número de oveja y cuarterón afectado. 6º. Refrigeración a 4ºC hasta su envío al laboratorio, el cual se debe realizar en menos de 48 horas. 7º. Desinfección de las manos antes de tomar otra muestra. Imagen 5. Material necesario para la toma de muestras. 56 Las muestras son enviadas en refrigeración a los laboratorios de Neiker Tecnalia (Instituto vasco de investigación y desarrollo agrario), siempre y cuando sea posible su envío inmediato. En ocasiones, cuando no es posible su envío inmediato, las muestras son congeladas para enviarlas posteriormente (nunca se mantienen muestras más de una semana en congelación). En el presente estudio únicamente se incluyen 7 muestras de leche de animales CMT negativos, el resto de las muestras, 264 eran procedentes de animales CMT positivos, porque esa es la rutina de trabajo que utilizábamos en aquellas campañas. Estas muestras de estos 7 animales CMT negativos las recogimos porque se trataba de animales con lesiones palpables en ubre, o animales que habían sido tratadas de mamitis clínicas con anterioridad y cuyas muestras decidimos analizar para descartar la existencia de posibles portadores, ya que nos encontrábamos ante explotaciones que tenían elevados recuentos de S. aureus en tanque. 4. EXPLORACIÓN CLÍNICA DE LA GLÁNDULA MAMARIA Una vez realizado el CMT y tras realizar la toma de muestras para microbiología y marcar las ovejas CMT positivas, los ganaderos ordeñan la tanda de ovejas que están en la fosa. Cuando las ubres ya están ordeñadas pasamos a realizar la exploración clínica de las mamas de las ovejas CMT positivo. En la exploración clínica de la ubre se detectan tanto lesiones de la piel que recubre la mama y los pezones (impétigo, verrugas…), como lesiones de la glándula mamaria. En la palpación del parénquima mamario se pretende valorar la consistencia y sensibilidad de la glándula. En casos de mamitis aguda, el tejido glandular se aprecia duro, caliente y sensible a la palpación y en los casos de mamitis crónica, el tejido también estará duro, pero ni caliente, ni doloroso. En ocasiones se pueden detectar nódulos o induraciones concretas. En el caso particular de las mamitis indurativas crónicas provocadas por el virus de Maedi Visna, las ubres muestran una simetría perfecta, aumento del tamaño y tejido glandular muy duro. 57 En la exploración de la ubre no hay que olvidar los nódulos linfáticos supramamarios, ya que suponen la primera barrera defensiva de la mama y nos dan mucha información acerca de su estado. Se localizan en la parte superior de la ubre y, en condiciones normales, puede resultar difícil su localización. Para su palpación se debe abordar la ubre por detrás, pellizcando en la zona más alta y detectando las formaciones nodulares que saltan al ser presionadas. Un importante aumento de los nódulos linfáticos es indicador de mamitis de tipo crónico. Imagen 6. Palpación de la ubre. Imagen 7. Importante aumento del tamaño de los nódulos linfáticos. 64 RESULTADOS Y DISCUSIÓN 65 1.- MICROBIOLOGÍA Se analizaron 271 muestras individuales de leche recogidas en 12 explotaciones de ganado ovino de Guipúzcoa, dentro del Programa de Mejora de la Calidad de la Leche llevado a cabo por el departamento de agricultura y ganadería de la Diputación de Guipúzcoa durante el periodo que comprende desde la campaña de 2004-05 hasta la de los años 2012-13. Los resultados microbiológicos obtenidos en las 271 muestras de leche recogidas de ovejas positivas al California Mastitis Test (264 ovejas CMT positivas y 7 muestras de ovejas CMT negativas) fueron los siguientes (Figura 1 y Tabla 1): Figura 1: porcentaje de aislamientos en leche de las ovejas muestreadas. 66 Microbiología Nº muestras Porcentaje Sin crecimiento 104 38,2 SCN 93 34,2 S.Aureus 31 11,4 M.Haemolytica 14 5,2 Streptococcus spp. 13 4,7 Enterococcus spp. 10 3,6 E.Coli 3 1,1 Bacillus spp. 1 0,4 S.Liquefaciens 1 0,4 Pseudomona Aeruginosa 1 0,4 Corynebacterium spp. 1 0,4 271 100% Tabla 1: Número total de aislamientos microbiológicos y porcentaje en leche de ovejas sospechosas. El grupo de microorganismos más frecuentemente aislados en la toma de muestras realizada son los Staphylococcus coagulasa negativos (SCN). A cierta distancia se encuentran los aislamientos de Staphylococcus aureus, Mannheimia haemolytica, diferentes especies de Streptococcus, y posteriormente otros gérmenes de menor incidencia en las mamitis subclínicas y crónicas detectadas mediante el CMT. Si analizamos el porcentaje de los microorganismos únicamente sobre los cultivos positivos observamos la importancia relativa que tienen los SCN (Figura 2). 67 Figura 2: Porcentaje de aislamientos microbiológicos únicamente sobre los cultivos positivos. Los datos obtenidos en nuestro estudio son muy similares a las frecuencias obtenidas por Juan C. Marco en el desarrollo de su tesis doctoral en 1994. Este trabajo de tesis doctoral trataba sobre la mastitis en la oveja Latxa (“Mastitis en la oveja Latxa, epidemiología, diagnóstico y control”) y se basó en un estudio llevado a cabo en explotaciones comerciales del País Vasco durante los años 1991 y 1992, en los que se realizaron visitas a lo largo de, prácticamente, todo el periodo de ordeño (Enero-Julio), realizando muestreos, CMT, palpación de ubres y análisis microbiológico de las muestras. Se muestrearon un total de 6.046 ubres. Los resultados de aislamientos microbiológicos obtenidos en muestra de leche individual mostraban unas prevalencias de 52,9% de SCN, 19,4% de S. aureus, 11,6% para Streptococcus spp., 5,8% de Pasterella haemolytica (actualmente Mannheimia haemolytica) y el resto, Enterobacterias, Serratia liquefaciens, Pseudomona Aeruginosa, en porcentajes que van desde el 0,4% al 0,8%. Estos resultados concuerdan plenamente con los obtenidos en el presente trabajo. En otro estudio llevado a cabo por Marogna G. et al. (2010), en 15 rebaños de ovejas de raza Sarda, que se caracterizaban por ser explotaciones con problemas recurrentes de mamitis y recuentos celulares medios en tanque de más de 5 millones de células, describen como las principales bacterias aisladas a: SCN en un 36,8% de los casos, S. aureus con un 18%, Streptococcus spp. en un 38,8% y enterococcus en un 7%. Si bien el 68 porcentaje de animales con cultivo positivo a S. aureus es similar y los SCN siguen siendo los microorganismos más aislados, cabe destacar la elevada proporción de aislamientos de microorganismos del género Streptococcus. Esta diferencia puede estar determinada, entre otras cosas, por tratarse de rebaños con serios problemas de mamitis clínica, cuyos recuentos medios de células somáticas en tanque superan los 5 millones. Tal y como se describe en la bibliografía, algunas especies de Streptococcus (S. uberis) se transmiten fundamentalmente durante el ordeño y si la eliminación del circuito de la máquina, así como la eliminación de los portadores, no es la adecuada, pueden dar lugar a grandes brotes y disparar los porcentajes de mamitis debida a estos gérmenes. No obstante, los porcentajes de aislamientos microbiológicos varían cuando la población a estudiar es la de aquellos animales que presentan únicamente mamitis clínicas. Mork et al. (2007) realizaron un estudio sobre 509 ovejas con mamitis clínicas en Noruega y aislaron S. aureus en un 65,3% de las muestras, E. coli en un 6,4%, SCN en un 2,9% , Streptococcus uberis en 1,6% y Streptococcus dysgalactiae en1,5%. Por lo que podemos evidenciar, tal y como se describe en otros estudios, que SCN sería el principal germen aislado en las mamitis subclínicas (Bergonier et al., 2.003), mientras que S. aureus se aísla sobre todo a partir de las mamitis clínicas. 2.- LESIONES GLÁNDULA MAMARIA Se llevó a cabo una exploración clínica mamaria mediante palpación de las 271 ovejas sospechosas de mamitis, la mayoría de las cuales mostraron resultados positivos al CMT. A cada una de ellas se le realizó una ficha clínica individual con los datos obtenidos. A. TIPO DE LESIONES De las 271 ovejas examinadas, el número total de animales que presentaron lesiones palpables de algún tipo en la glándula mamaria fue de 170 (62,7%), frente a 101 (37,3%) que no presentaban lesiones detectables mediante palpación. 69 Marco (1994), en su trabajo sobre mamitis en la oveja Latxa, describe un 32,4% de ubres calificadas como lesionadas. El porcentaje obtenido por Marco es claramente inferior al muestro, pero hemos de tener en cuenta el hecho de que nuestro muestreo está dirigido a aquellos animales que, en principio, pueden ser “conflictivos”, ya que son CMT positivos o muestran alguna sospecha de mamitis, sin embargo Marco habla de porcentajes de ubres lesionadas frente al total de animales de la granja. Por lo tanto, los datos finalmente no resultan tan discrepantes. En este mismo estudio, disponían de datos de exploración mamaria de 295 ovejas, de las cuales 166 eran cultivo positivo. Al analizar únicamente las que mostraban cultivo positivo, obtuvieron que el 57,8% presentaba lesiones, frente al 42,2 % que estaban libres de lesión aparente. Este porcentaje se acerca en gran medida al obtenido por nosotros. Sin embargo, en un estudio realizado por Marogna G. et al. (2010), sobre una población de ovejas sardas con procesos recurrentes de mamitis, en el que los autores analizan y describen lesiones mamarias clasificándolas únicamente entre agudas y crónicas. Los resultados muestran que un 19% de los animales tenían al menos un síntoma clínico de mamitis aguda y un 46% al menos un signo clínico de mamitis crónica. Estos datos concuerdan con los obtenidos en nuestro estudio, con un 62,7% de animales con lesiones, ya que las lesiones que nosotros detectamos en sala de ordeño, prácticamente siempre corresponden a lesiones mamarias de tipo crónico. Análisis realizado teniendo en cuenta el sesgo que supone llevar a cabo únicamente la palpación a los animales sospechosos. Más comparable sería el estudio realizado por Herrtage y col. (1974) sobre animales de desvieje cuyas glándulas mamarias eran exploradas en vivo a su llegada al matadero. El porcentaje de glándulas mamarias con lesión en este caso fue de 50,2%, dato que se acerca a nuestros resultados, hecho que parece lógico, puesto que estos animales con ubres lesionadas que describimos en nuestro estudio son candidatas al desvieje. Las frecuencias de detección de los diferentes tipos de lesiones en glándula mamaria halladas en nuestro trabajo se muestran en la Tabla 2. 70 Tipo de Lesiones Frec. % Atrofia 122 71,8 % Lesiones nodulares 35 20,5% Induración 9 5,3% Leche enquistada 1 0,6% Impétigo 1 0,6% Edema 1 0,6% Atrofia+ nódulos 1 0,6% 170 100% Tabla 2: Frecuencia de aparición de los diferentes tipos de lesiones mamarias. Las lesiones encontradas con una mayor frecuencia son la atrofia de alguna de las glándulas mamarias (71,8%) y la presencia de nódulos y/o abscesos de diferentes tamaños (20,5%). Estos datos contrastan con los obtenidos por Marco (1994), en los que destaca la induración de la glándula mamaria como lesión predominante (10,5%). Además, el autor describe que este tipo de lesión disminuye su porcentaje de aparición al aumentar los días de lactación (a partir del día 30). Tal vez esta sea la causa de la discrepancia de los datos, ya que en nuestro estudio la mayoría de las tomas de muestra se realizan entre los días de lactación 38 y 180, con un valor promedio de 76 días, siendo en nuestro caso la atrofia la principal lesión observada. En este sentido, Marco ( 1994), en este mismo estudio, sí que cita la atrofia como la siguiente lesión en porcentaje de aparición, con un 3,7% de los animales analizados, seguida por la presencia de nódulos (1,4%). Asimismo, describe también un ligero aumento de la presencia de atrofias conforme aumentan los días de lactación, concretamente a partir del día 104, lo cual parece lógico y puede responder a la cronificación de las que inicialmente eran mamitis subclínicas no detectadas. Otra de las posibles explicaciones al elevado número de induración observado en el estudio de Marco en comparación con el nuestro, podría ser la modificación en la sistemática de ordeño mecánico y la mayor experiencia con el mismo durante estas últimas 2 décadas. 71 B. RELACIÓN DE OVEJAS CMT POSITIVO CON LA PRESENCIA DE LESIÓN MAMARIA De las 271 muestras tomadas de leche, 264 dieron CMT positivo, ya que, como hemos dicho, el test de screening que se usaba era precisamente el CMT, de modo que a todas las que daban CMT positivo se les tomaba muestra para microbiología y se les realizaba la exploración mamaria. De estos 264 animales que dieron positivo en mayor o menor grado frente al CMT, 162 presentaban algún tipo de lesión aparente en glándula mamaria (61,36%), frente a 102 (38,64%), que tenían la ubre sin ningún tipo de alteración detectable (Figura 3). Recalcar en este punto que en esta clasificación de glándulas mamarias con lesión no incluimos la afección de los linfonodos, ya que los estudiaremos en otro apartado. Figura 3. Porcentaje de animales CMT + con y sin lesión mamaria. En La tesis doctoral de Marco J.C. (1994), se demuestra la asociación significativa entre ambos parámetros (lesiones mamarias y CMT), concretamente, el autor dice que la probabilidad de reacción CMT positiva en presencia de lesión mamaria es 6,81 veces superior que la probabilidad de reacción positiva al CMT con ausencia de lesión. En nuestro estudio no hallamos estas diferencias debido a que la mayor parte de las ovejas de las que partíamos eran CMT positivas, como ya hemos explicado. Las Heras del Río et al.(2002), en un estudio que evalúa el efecto de la infección subclínica intramamaria por diferentes agentes etiológicos sobre determinados 72 parámetros de interés clínico, resuelve que las infecciones producidas por SCN están asociadas a reacciones CMT de tipo moderado, las causadas por Corynebacterium a reacciones de CMT tipo leve y finalmente, las infecciones producidas por S. aureus y Estreptococcus spp. estarían más ligadas a reacciones inflamatorias muy fuertes y por lo tanto a CMT de grado +++. Del mismo modo, en los estudios realizados por Groos et al.,1978; Kalinowska et al., 1985; Torres Hernandez y Hohenboken.,1979 se constató la relación existente entre el CMT y el efecto de las mamitis ovinas sobre la disminución de la producción lechera, el menor peso de corderos, así como la mayor mortalidad de los mismos, determinando que aquellos animales que dan CMT positivo tienen mayor probabilidad de tener disminución en la producción, menor ganancias de peso de sus corderos y una mayor mortalidad de los mismos. Asimismo, Romeo et al. (1995) describen y hallan diferencias significativas en el descenso de la producción de los animales CMT positivos con respecto a los CMT negativos y, además, el descenso es significativamente mayor en aquellos animales con reacciones CMT más intensas. C. RELACIÓN ENTRE PRESENCIA DE LESIÓN MAMARIA Y CULTIVO MICROBIOLÓGICO En este apartado analizamos la relación entre cultivos microbiológicos positivos/negativos y aquellos individuos con presencia o ausencia de lesión mamaria (Tabla 3). Cultivo + Cultivo - GM sin lesión 56( 54,4%) 47( 47,6%) 100% GM con lesión 111(66,1%) 57(33,9%) 100% 271 Tabla 3. Relación entre presencia de lesión mamaria y aislamiento microbiológico. Falsos positivos (17,3%) E Mamitis subclínicas (20,7%) Mamitis crónicas (41%) Eliminación intermitente (21%) 73 Este análisis, en primer lugar, revela una fuerte tendencia a la significación en la asociación de lesiones palpables en glándulas mamarias con el cultivo positivo de las muestras de leche (p=0,54). En la tesis doctoral de Marco(1994) se describe una asociación significativa entre lesión mamaria e infección para los siguientes microorganismos: S. aureus, S. simulans, S. epidermis, Strectococcus, Enterococcus y Enterobacterias. Del mismo modo, en concordancia con nuestros datos, el estudio realizado por Marogma G et al.(2010) sobre una población de ovejas Sardas con procesos de mamitis recurrentes y recuentos celulares medios de tanque superiores a 5 millones por ml., mostró una correlación positiva entre la presencia de síntomas clínicos en la glándula mamaria y la positividad del cultivo microbiológico cuando las lesiones mamarias eran abscesos y/ o nódulos, no obstante, no hallaron diferencias significativas cuando el tipo de lesión era atrofia mamaria. Un 66,1 % (111) de los animales con lesiones mamarias palpables presenta cultivo positivo para algún microorganismo. Podemos decir que estos son los animales con lesiones de mamitis crónicas, candidatos a un desvieje inmediato. Estos, a su vez, suponen un 41% del total de muestras analizadas (111/271). En el estudio de Marogna G.et al.(2010), en que analizan y describen las lesiones mamarias y la microbiología en rebaños con problemas recurrentes de mamitis y RCS elevados de tanque, observan que un 46% de las ovejas estudiadas poseen al menos un síntoma clínico de mamitis crónica. En nuestro estudio, si analizamos el porcentaje de presencia de mamitis crónicas en el total del rebaño, es decir, los animales con lesiones palpables en mama y cultivo positivo frente al total de animales en ordeño durante las actuaciones, sería de un 2,5%, muy inferior al que describen Marogna et al. Pero hay que tener en cuenta que en su estudio, los recuentos celulares de leche de tanque eran superiores a 5 millones y se trataba de explotaciones ovinas con problemas recurrentes de mamitis. La distribución de los aislamientos microbiológicos para estas muestras de cultivo positivo procedentes de glándulas mamarias con lesiones aparentes se muestra en la Figura 5. 80 en concordancia con los obtenidos por Marco(1994) en su estudio, el cual constata que S. aureus muestra una mayor asociación a lesiones atróficas, mixtas y nodulares, con una frecuencia sensiblemente superior al resto de los estafilococos. Figura 6. Tipo de lesión mamaria en función del microorganismo aislado. Por lo tanto, los resultados obtenidos en este estudio corroboran lo que es citado en múltiples trabajos, que relacionan los SCN como el principal productor de mamitis subclínicas (Kirk. et al.,1980; Bork et al.,1989; Watkins et al., 1991; Ahmad et al.,1992; Keisler et al.,1992; Gonzalez Rodriguez et al.,1995; Jones y Watkins,1998; Lafi et al., 1998;Croft et al.,2000). Mientras que S. aureus produce, o bien mamitis clínicas agudas o sobreagudas (escasamente reflejadas en este estudio) o crónicas, con un mayor porcentaje de animales con lesiones en glándulas mamarias de tipo atrófico y nodular. Estas diferencias, en nuestro estudio, resultaron ser significativas (p= 0,000) y el riesgo de presentar lesiones palpables en glándulas mamarias es casi 4 veces mayor (factor de riesgo: 3,775) ante una infección de S. aureus que ante una de SCN (Figura 7). 81 Figura 7. Porcentaje de lesión mamaria en función del microorganismo aislado. La diferencia entre el tipo de lesiones que producen SCN y S. aureus se hace más evidente si nos centramos únicamente en los animales con lesiones palpables en glándulas mamarias (Figura 8). Figura 8. Tipo de lesión mamaria que producen SCN y S. aureus. Marco(1994), en su tesis doctoral, corrobora nuestros datos y al comparar S. aureus con SCN, observó 2,1 veces más atrofias por S. aureus que por SCN, 3,4 veces más formaciones nodulares y 1,3 veces más lesiones mixtas. Del mismo modo, Marogma et al.,(2010), en el estudio realizado sobre rebaños de ovejas sardas con problemas de mamitis recurrentes, revela diferencias significativas y una correlación entre aislamiento de S. aureus y lesiones o síntomas de mamitis 82 crónicas; concretamente con la presencia de nódulos, abscesos y atrofias en glándula mamaria. Por último, citar el grupo de los Streptococcus spp. como agentes importantes de la producción de mamitis en el ganado ovino. En la mayor parte de las ocasiones se aíslan de muestras procedentes de ovejas con lesiones mamarias, obteniéndose en nuestro trabajo únicamente en un 23% de mamas sin lesión. Las lesiones con las que se relacionó este microorganismo fueron, fundamentalmente, atrofia (38,4%) y formaciones nodulares (23%), aunque también se aisló en un 7,7% de los casos en lesiones indurativas. El resto de los microorganismos menores aislados también producen lesiones en mayor o menor porcentaje, pero dado que han sido aislados en un número bajo de muestras que no es representativo, no expondremos aquí los resultados. Podemos concluir que, a la vista de los resultados obtenidos se empiezan a vislumbrar relaciones claras entre microorganismos y tipos de lesión que producen, serán necesarios estudios posteriores para corroborar estos resultados que creemos que pueden resultar de gran utilidad en el trabajo de campo, tanto del ganadero, como del veterinario que trabaja con mamitis. 3.-LINFONODOS La afección de los nódulos linfáticos supramamarios, los cuales defienden de infecciones a la glándula mamaria, la vamos a estudiar en un capítulo aparte porque no siempre está relacionada su alteración con afección de la glándula mamaria y pensamos que pueden dar información adicional en su valoración. A. RELACIÓN ENTRE AFECCIÓN DE LINFONODOS Y CMT En la recogida de datos, únicamente dimos dos valores diferentes en función al estado de los linfonodos, diferenciando aquellos que presentaban un aumento de su tamaño, fuera cual fuese, y los nódulos linfáticos que mostraban un aspecto normal. 83 Al analizar y contrastar los datos obtenidos hemos podido observar que los animales con linfonodos aumentados de tamaño dan un mayor número de reacciones positivas al CMT que aquellos que no tienen alteración en el tamaño o forma de los mismos. De un total de 264 animales que eran CMT positivo, 71 presentaban alteración en los linfonodos, frente a 193 con linfonodos normales. El análisis estadístico de los datos obtenidos confirma (p= 0.2) que el riesgo de que un animal con linfonodos aumentados de tamaño sea CMT positivo es 6,7 veces mayor que en aquellos animales que tienen los linfonodos supramamarios normales. En concordancia con estos resultados, en el estudio realizado por Las Heras del Río et al. (2002), en el que se evalúa el efecto de infección subclínica intramamaria por diferentes agentes etiológicos sobre determinados parámetros de interés clínico, CMT, recuentos bacterianos, tumefacción den linfonodos supramamarios, etc., los autores describen que los microorganismo aislados que dan lugar a mayores reacciones al CMT irían acompañados de recuentos bacterianos en leche más elevados y de una mayor tumefacción en linfonodos supramamarios. B. RELACIÓN ENTRE AFECCIÓN DE NÓDULOS LINFÁTICOS Y AISLAMIENTO MICROBIOLÓGICO Del total de 271 ovejas muestreadas, un 28% (76) mostraban un aumento de tamaño apreciable de los nódulos linfáticos supramamarios y 195(72%) no mostraban alteración de los linfonodos. De las ovejas con afección de nódulos linfáticos un 71,10% dieron cultivo de leche positivo a algún microorganismo, en contraste con las que no tenían afección de nódulos linfáticos que sólo dieron cultivo positivo un 57,90% (Figura 9). 84 Figura 9. Relación entre la afección de nódulos linfáticos y aislamientos microbiológicos. El estudio de los datos y su contraste estadístico muestra que existen diferencias significativas entre aquellos animales con linfonodos aumentados de tamaño y los que no con respecto a la microbiología (p=0,46). Las ovejas que muestran los nódulos linfáticos supramamarios aumentados de tamaño tienen 1,78 veces más riesgo de estar padeciendo una infección bacteriana en la glándula mamaria que las que no los tienen afectados o, lo que vendría a ser lo mismo, tenemos una mayor posibilidad de obtener cultivo positivo de una oveja con los linfonodos aumentados que de una oveja cuyos linfonodos estén normales. Estos datos discrepan con los resultados obtenidos por Marco (1994) en su estudio sobre la mamitis en la oveja Latxa, el cual, tras analizar la tumefacción de los linfonodos, resuelve que no ha mostrado una relación significativa con la infección mamaria y por lo tanto debe excluirse como criterio de anormalidad de la ubre. No obstante, en concordancia con nuestros resultados, Marogna G. et al. (2010), en el estudio realizado sobre hallazgos clínicos en explotaciones afectadas por episodios de mamitis bacterianas recurrentes, describe que el hallazgo clínico más común es el aumento del tamaño de linfonodos supramamarios y que las ovejas con linfonodos reactivos tienen un 38% más de posibilidades de ser cultivo positivo que las que tienen los linfonodos normales. 85 C. RELACIÓN ENTRE AFECCIÓN DE NÓDULOS LINFÁTICOS Y MICROORGANISMO En la Tabla 5 observamos el porcentaje de aislamientos microbiológicos en los animales con nódulos linfáticos aumentados de tamaño y en los que presentan los linfonodos normales. Microbiología LN Normales LN Alterados Sin crecimiento 42,1% 28,9% SCN 37,4% 25% S. aureus 9,2% 17,1% M. haemolytica 3,6% 9,2% Streptococcus spp. 2% 11,8% D. coli 1,5% 0 Bacillus spp. 0,5% 0 Enterococcus spp. 3,1% 5,3% Ser. liquifaciens 0,5% 0 Pseudomona aeruginosa 0 1,3% Corynebacterium spp. 0 1,4% Tabla 5. Porcentaje de aislamientos microbiológicos en animales con nódulos linfáticos afectados y no afectados. Al comparar la reacción que producen en los linfonodos los diferentes microorganismos productores de mamitis observamos que existen diferencias significativas. S. aureus produce significativamente (p=0,19) una mayor alteración en los linfonodos que los SCN (Figura 10). El 42% de los animales con cultivo positivo a S. aureus tenían los nódulos linfáticos aumentados de tamaño, siendo en los animales positivos a SCN únicamente en un 20%. Esto concuerda con lo dicho hasta ahora en relación a que SCN son productores de mamitis subclínicas, sin alteración de la glándula mamaria ni, como vemos ahora, de los nódulos linfáticos. No así S. aureus que es un microorganismo relacionado fundamentalmente con mamitis clínicas, en las que hay afección del parénquima mamario, pero también de los nódulos linfáticos que lo protegen. 86 Figura 10. Afección de linfonodos en animales con aislamientos positivos en leche a SCN y S. aureus. En el caso de los aislamientos positivos a microorganismos del Gº Streptococcus observamos que un 11,8% de los animales con linfonodos afectados son positivos a estos gérmenes y únicamente un 2% de los que tenían linfonodos normales. Estos datos arrojan significación, con lo cual podemos concluir que también las mamitis producidas por Streptococcus spp. se acompañan de mayor alteración en linfonodos que las de SCN. Dato que también concuerda con los resultados de la alteración del parénquima mamario ya que eran más productores de mamitis clínicas, al igual que S. aureus. Este dato concuerda con el obtenido por Marogma et al.(2010), donde describen la existencia de correlación significativa entre aislamiento de Streptococcus uberis y la reactividad de los linfonodos supramamarios. Del mismo modo, en el estudio realizado por Las Heras del Río et al.(2002), donde estudian la relación entre el grupo bacteriano aislado de las mamitis subclínicas y algunos parámetros de interés clínico, observaron que Staphylococcus aureus ocupa el primer lugar en cuanto a la alteración del estado de linfonodos supramamarios, seguidos por SCN, Corynebacterium y, en último lugar, los Streptococcus, pero sin diferencias significativas entre los grupos, aunque mostró una tendencia a la significación entre S. aureus y el resto. También detectan una correlación positiva moderada del CMT con los recuentos bacterianos (0,15) y la alteración de linfonodos (0,18) por lo que, de madera moderada también, parece que los aislados que dan lugar a mayores reacciones al CMT irían acompañados de mayores recuentos bacterianos y darían lugar a mayor tumefacción de linfonodos supramamarios. 87 Asimismo, en el estudio llevado a cabo por Marogma et al.(2010), sobre rebaños de ovejas sardas que se caracterizaban por tener episodios recurrentes de mamitis, concluye que los animales con los linfonodos alterados tienen un 38 % más posibilidades de presentar un cultivo positivo en la muestra de leche que aquellos que tienen los linfonodos supramamarios sin alteraciones. Si comparamos SCN con M. haemolytica observamos que las infecciones mamarias producidas por Mannhemia haemolytica se acompañan de más reacciones en linfonodos que las producidas por SCN. No obstante, y dado al pequeño número de muestras de M. haemolytica obtenidas en el estudio, no se alcanzó significación en los datos. Serán necesarios estudios posteriores para confirmar este hecho. El resto de los datos de los microorganismos menores productores de mamitis también se contrastaron con los datos positivos de SCN (principal germen aislado en las mamitis), sin embargo no hayamos diferencias significativas debido al pequeño número de aislamientos positivos a estos gérmenes. Nuevamente estudios posteriores serán necesarios. 4.-LACTACIONES A pesar de que es un estudio sesgado porque carecemos de la distribución completa por lactaciones de los rebaños, sí que podemos corroborar con los datos obtenidos que el mayor número de animales CMT positivos se obtiene en animales que están entre la 3ª y 4ª lactación (Figura 11). Además, la mayoría de las muestras con cultivo positivo proceden de animales situados en alguna de estas dos lactaciones. 88 Figura 11. Número de lactación en el que se encontraban las ovejas en el momento de su estudio. En concordancia con estos resultados, algunos estudios realizados al respecto (Gross et al. 1978; Lafi et al.1998) describen un aumento de la positividad del CMT conforme avanza la edad o lactación del animal. Del mismo modo, la revisión sobre mamitis en pequeños rumiantes realizada por Bergonier et al.(2003) detalla diferentes trabajos realizados donde se describe un aumento de la prevalencia de mamitis conforme avanza el número de lactaciones, tanto en ovino, como en caprino (Boscos et al.,1996; Fthenakis et al.,1994; Leitner et al., 2001; Seyi et al.,2000). No obstante, debemos ser cautos al interpretar estos datos dada la dificultad que genera el diferenciar entre incidencia y prevalencia (cronicidad o reactivación), puesto que el aumento de las prevalencias durante la lactación podría deberse a que existe una incidencia que determina nuevos contagios o, por el contrario, que el aumento de prevalencia conforme aumenta la lactación se deba a que infecciones ya existentes anteriormente cronifican o se reactivan. Arsenault et al.(2008) en su estudio sobre factores de riesgo e impacto de las mamitis en ovino de carne en Quebec, dice también que el riesgo de obtener un CMT positivo aumenta con la edad. Asimismo, describen que el riesgo de obtener un cultivo positivo en las muestras de leche aumenta en animales con dos partos o más. Estos datos son concordantes también con los obtenidos por nosotros tal y como muestra la figura 12. 89 Figura 12. Número de lactación en el que se encontraban las ovejas que dieron cultivo positivo. El que disminuya el número de animales positivos a partir de la 5ª lactación no significa que se den menos cultivos positivos en animales más viejos, sino que hay menos animales que lleguen a estas lactaciones y, como consecuencia, el número de muestras es menor. Exactamente igual ocurre si analizamos los animales que presentan mayor número de lesiones palpables en glándulas mamarias. Estos también son los que se encuentran entre la 3ª o 4ª lactación. En cualquier caso, serán necesarios estudios posteriores para corroborar esta tendencia, pero los datos obtenidos parecen indicar que existe un mayor número de animales afectados y con microbiología positiva en aquellas ovejas que se encuentran entre su tercera o cuarta lactación, aunque probablemente, cuando analicemos un mayor número de datos veremos que el porcentaje de animales afectados aumenta con la edad. 96 1. Ahmad G, Timms LL, Morrical DG, Brackelsberg PO. Ovine subclinical mastitis efficacy of dry treatment. 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