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Trabajo Fin de Grado “Caracterización morfológica y evaluación fisicoquímica de diferentes accesiones de manzano recuperadas en zonas de montaña de Aragón” Autor Lourdes Castel Duaso Directoras: Dra. Pilar Errea Abad Dra. Ana Pina Sobrino Ponente Celia Montaner Otín Facultad / Escuela Politécnica Superior de Huesca Año 2014 Repositorio de la Universidad de Zaragoza – Zaguan http://zaguan.unizar.es Agradecimientos Quiero expresar mi más sincero agradecimiento a todas las personas que de un modo u otro me han acompañado durante la realización de este proyecto: En primer lugar a mis directoras de proyecto, las Dras. Pilar Errea Abad y Ana Pina Sobrino, gracias por confiar en mí y abrirme la puerta hacia el verdadero mundo de la investigación. He disfrutado muchísimo en la realización de este proyecto y no habría sido posible sin vuestra dirección, apoyo y disponibilidad durante todo este tiempo. Con vosotras el camino ha sido mucho más fácil y divertido. Al Centro de Investigación y Tecnología Agroalimentaria de Aragón (CITA), por permitirme utilizar sus instalaciones. A Mayte Espiau por ayudarme siempre que me surgían dudas en los análisis de manzanas y por acompañarme en los viajes a Ligüerre. Gracias por guiarme en el comienzo de esta aventura. A todo el personal de hortofruticultura y en especial a mis compañeros de laboratorio: Rosa, Quique, Olga, Pepe, J.Miguel y Teresa por su ayuda, su cariño y por hacerme pasar muy buenos momentos. Gracias a ellos, todo ha sido más fácil y ameno. A mis padres y hermano por estar siempre ahí, por su comprensión y apoyo incondicional. Nunca pensé que aquellos injertos de vid, manzano y olivo me llevarían hasta este proyecto de recuperación de variedades autóctonas. A mis amigos, por su interés y su amistad a pesar de no entender muy bien de que va el proyecto. Por esos buenos momentos vividos y por los que nos quedan. A Juan A., por estar siempre a mi lado, con su infinita paciencia y comprensión. Por apoyarme durante los buenos y malos momentos y por seguir a mi lado en la próxima aventura. Resumen Los recursos fitogenéticos constituyen un patrimonio de la humanidad de valor incalculable que deben ser conservados. Su pérdida representaría un proceso irreversible que supondría una grave amenaza para la estabilidad de los ecosistemas, el desarrollo agrícola y la seguridad alimentaria de la población mundial. Dentro de estos recursos fitogenéticos, se debe destacar por sus características la importancia del patrimonio frutal de zonas de montaña que fueron abandonadas, conllevando cambios sustanciales en el medio rural en lo que se refiere a tipos de cultivo y sistemas de producción. Lo que unido a las diferentes preferencias de los consumidores y del mercado, llevó a relegar al olvido o al cultivo marginal a estas especies anteriormente consideradas fundamentales. Sin embargo, diversos estudios han vuelto a poner en valor el potencial de estas variedades autóctonas frente a otras más extendidas. Este hecho está haciendo que se pongan en marcha planes de recuperación de estas variedades tradicionales al objeto de estudiarlas exhaustivamente para conocer mejor sus características agronómicas y fisiológicas. De esta manera, se consigue preservar la riqueza y diversidad genética de las variedades autóctonas en zonas de montaña, además de fomentar una posible regeneración frutícola gracias al potencial de desarrollo inherente a estas especies. Entre todas las especies estudiadas en zonas de montaña abandonadas en el territorio aragonés hay que destacar la manzana, por ser la especie tradicionalmente más importante en esta área geográfica, así como una de las que muestran un mayor rango de variabilidad fenotípica y de genotipos locales diferentes. El objetivo de este proyecto ha sido el estudio de las características agronómicas y fisicoquímicas, de variedades de manzana recuperadas y conservadas en zonas de montaña de Aragón, con el fin de ofrecer productos diferenciados de calidad que puedan tener una parcela en un mercado específico. Para ello se han evaluado 56 accesiones de manzano preservadas en el banco de germoplasma de manzano del CITA y que, provienen de diferentes prospecciones realizadas en zonas de montaña de Aragón desde el año 2001, y otras 15 variedades de referencia empleadas con fines comparativos. La caracterización agronómica se ha llevado a cabo siguiendo los descriptores cuantitativos y cualitativos propuestos por la UPOV para el fruto del manzano. De los resultados obtenidos se deduce que la variabilidad de las accesiones locales es mayor que las variedades de referencia, lo que sugiere que este material podría poseer características de gran interés potencial para incorporarlos en programas de mejora. Los resultados de los análisis fisicoquímicos mostraron un intervalo de variabilidad muy amplio para los valores de azúcares, oligoelementos y proteínas, siendo superior en la mayoría de los parámetros las variedades locales frente a las de referencia. Lo que pone de manifiesto la calidad organoléptica y nutricional de las variedades locales y su aptitud tanto para consumo en fresco como para la elaboración de sidra. Abstract Plant genetic resources are a priceless heritage. The loss of genetic resources constitutes an irreversible process that could suppose a serious threat to the stability of ecosystems, agricultural development and food security of the world population. Within the framework of these plants genetic resources it should be emphasized the importance of abandoned mountain areas fruit patrimony, leading to substantial changes in rural areas related to types of farming and production systems. This phenomenon along with the different consumer preferences and market led to consign to oblivion or marginal farming these species previously considered fundamental. However, several studies have reestablished the potential of these autochthonous varieties over other more widespread ones. In this context, a lot of prospecting missions have been developed in order to recover these traditional varieties and to study them at both agronomic and physiological levels. In this way, it is possible to preserve the richness and genetic diversity of native varieties from mountain areas, as well as promoting a possible fruit regeneration thanks to potential development inherent to these species. Among all species studied in abandoned mountain Aragonese territory, it should be highlighted the apple for being traditionally the most relevant species in this geographical area, as well as one of the species that showed an important range of phenotypic variability and number of autochthonous genotypes. The objective of this project has been the study of the agronomic and physicochemical features of apple varieties recovered in mountain areas from Aragon. For this, it has been evaluated 56 apple accessions preserved in the CITA germplasm collection recovered from different prospecting missions in mountain areas of Aragon since 2001, as well as other 15 cultivars used as references for comparative purposes. For agronomic characterization it has been used quantitative and qualitative descriptors proposed by UPOV. On the basis of the results obtained showed that the local accessions variability is greater than in the reference varieties studied which could suggest that this material could possess characters of great potential interest for incorporation into breeding programs. The results of the physicochemical analysis showed a broad range of variability values for sugars, trace elements and proteins, being greater in most local varieties parameters in comparison with the reference ones. These results point out that the organoleptic and nutritional quality of local varieties and their suitability for both fresh consumption and for cider. La ciencia tiene las raíces amargas, pero muy dulces los frutos Aristóteles vi Tabla 21: Cálculo del número de clases (CN), para algunos descriptores cuantitativos de las accesiones (locales, y comerciales) y los descriptores UPOV estudiados. .................................. 69 Tabla 22: Accesiones que destacan por valores extremos en uno o varios caracteres cuantitativos de fruto. ................................................................................................................. 71 Tabla22: Dendrograma de asociación de 15 variedades de manzano comerciales y 56 accesiones locales con base a 32 variables cuantitativas y cualitativas estudiadas del fruto. ... 73 locales con base a 32 variables cuantitativas y cualitativas del fruto. ........................................ 73 1 1. INTRODUCCIÓN GENERAL Introducción 1 1. INTRODUCCIÓN GENERAL 1.1 El manzano 1.1.1. Clasificación y características botánicas. El manzano, denominado de forma general como Malus x Domestica pertenece a la familia de las Rosáceas, subfamilia pomoideas, género Malus, en el cual se han reconocido hasta 78 especies primarias (Phipps et al., 1990). Las variedades de manzano forman dos grupos cromosómicos, pueden ser diploides (2n = 34 cromosomas) donde el polen y los óvulos están perfectamente constituidos, presentando una meiosis adecuada y un poder germinativo del polen elevado. También pueden ser triploides (3n = 51 cromosomas) en este caso, la constitución del polen y de los óvulos no es la adecuada, siendo la meiosis irregular, el poder germinativo es bajo (entre el 5% y el 10%) y las variedades tienden a tener frutos con pocas semillas y se caen fácilmente (Ctifl, 2002). Se trata de árboles y arbustos generalmente de hoja caduca, con una altura entre 1.5 y 7 metros (dependiendo del patrón) y un ancho en la base de 1 a 4.5 metros (Jackson, 2003). Bajo condiciones naturales su copa varía de una forma redonda hasta una piramidal. La corteza es escamosa cubierta de lenticelas, en las zonas viejas del árbol la corteza es de color gris parduzco mientras que en las ramas más jóvenes es de color verde ceniciento (Coque et al., 1996). Sus ramas no presentan espinas. Las yemas son ovoides con varias escamas imbricadas; las reproductivas son mixtas terminales insertadas sobre dardos y lamburdas en la mayoría de las variedades, y también brindillas. Las yemas mixtas contienen de 5 a 8 flores y un número similar de hojas, donde la flor central en la mayoría de los casos es más grande y precoz que las laterales. (Jackson, 2003). El manzano tiene los brotes cortos, de los que salen hojas con nervios alternos bien desarrollados. Presenta hojas simples o pinnadas, aserradas o lobuladas, de color verde e intenso en el haz, mientras que por el envés el color se torna más claro y son pubescentes. Su peciolo suele tener una longitud equivalente a la mitad de la del limbo. Posee estípulas plegadas o convultas. La inflorescencia es un corimbo que contiene de 8 a 11 flores hermafroditas con una fuerte tendencia a la alogamia (Ctifl, 2002). Una flor contiene 5 sépalos, 5 pétalos suborbiculares o trasovados que van del color blanco a rosa o carmín, de 15 a 50 estambres con anteras amarillas dispuestos en 3 franjas, que se insertan en la parte alta del pistilo, el cual se divide en 5 estilos unidos en su base (Westwood, 1982). El ovario tiene cinco lóculos, cada uno de ellos suele albergar uno o dos óvulos, por lo que el número máximo de semillas presentes en una manzana es de diez, aunque hay variedades que pueden llegar a tener treinta semillas (Jackson, 2003). El hipanto y el gineceo permanecen Introducción 2 fusionados para formar un ovario ínfero el cual se desarrolla en un fruto carnoso e indehiscente. La floración tiene lugar en primavera, generalmente de Abril a Mayo, las manzanas más precoces maduran en Junio, existiendo especies que mantienen el fruto durante la mayor parte del invierno. Se puede decir que el manzano es autoincompatible y de polinización entomófila, siendo las abejas las representantes del 60-95% de la fauna polinizadora. El fruto es un pomo sin células pétreas con cáliz persistente o caduco (Luby et al., 2001). Su forma es oblonga, cónica u oblicua, presentando un diámetro entre 2 a 13 cm, con una amplia diversidad de tonalidades desde verdes a amarillas y rojas (Ryugo, 1993). Su zona central está dividida en cinco partes una por cada carpelo. En esta zona central se encuentran las semillas, casi siempre de color marrón oscuro, protegidas por paredes de consistencia coriácea. El pedúnculo es de longitud variable, adherente y a veces está inserto en una depresión. El cáliz es persistente y forma el ojo, colocado igualmente en una depresión más o menos regular y profunda (Coutanceau, 1971). El número de manzanas que existen en el árbol influye en el calibre de los frutos, ya que para conseguir un calibre adecuado, lo importante es el grado de división celular, el cual ocurre durante las primeras semanas tras el cuajado. De aquí la importancia de la poda para eliminar las yemas de flor. El aclareo es esencial en el caso de cosechas abundantes. Mejora el tamaño de los frutos, su calidad y su sabor, y evita que las ramas se rompan. Según la localización del cultivar, la maduración varía mucho desde 70 días a más de 180 (Westwood, 1993). Es necesaria una correcta iluminación para tener una adecuada función fotosintética y así obtener frutos de buen tamaño (Coque et al., 1996). 1.1.2. Requerimientos edafoclimáticos El manzano es una de las especies frutales menos exigentes en cuanto a suelo y clima. Se cultiva en numerosas latitudes, principalmente en climas templados. La principal limitación para el cultivo del manzano en comarcas meridionales es el requerimiento de horas frío, por encima de las 1.000 horas frío (en función de las variedades). Presenta una temperatura mínima de crecimiento de 7°C y una máxima de 35°C, con un óptimo de crecimiento entre 18°C y 24°C. Aunque resiste muy bien el frío invernal, sus flores son sensibles a las heladas tardías primaverales. Soporta temperaturas inferiores a los -10 °C, aunque al descender por debajo de los -15 °C pueden perderse algunas yemas florales. Sin embargo, es el estado de cuajado y fruto pequeño el más crítico, en el que no se soportan temperaturas menores de -2⁰C. Introducción 3 La utilización de riego anti-heladas u otros sistemas de protección son habituales en aquellas zonas con elevado riesgo. El viento es un factor negativo en el momento de la floración y durante la maduración de las manzanas. Lo esencial es que el emplazamiento sea soleado y protegido. En las exposiciones sur y sureste, la gran intensidad luminosa puede producir frutos vítreos y los grandes calores favorecen el oscurecimiento interno, la escaldadura superficial o los golpes de sol. El manzano precisa terrenos bien drenados y aireados, con humedad suficiente en los períodos críticos de la floración y de rápido crecimiento. La amplia gama de patrones o portainjertos favorece su plantación en numerosos suelos, aunque prefiere los silíceoarcillosos, no salinos, bien drenados y con un contenido en cal activa inferior al 10%. La pluviometría anual media suficiente para el cultivo del manzano, se cuantifica en unos 1000 mm. El pH más favorable oscila entre el valor 5.5 y 6.5 pero el manzano puede desarrollarse en terrenos con pH comprendido entre 4 (valor mínimo) y 8.5 (valor máximo) (Álvarez, 1988). 1.1.3. Origen del cultivo del manzano Todavía no se conoce con certeza cuál es el origen del manzano. En su formación habrían contribuido principalmente especies procedentes del Este-Asiático, Oriente asiático, Cáucaso, Europa y el Norte de América (Höfer et al., 2013). Según Vavilov (1930), los centros de origen del manzano estaban comprendidos en la zona de los Balcanes y Asia. Vavilov, mencionó tres especies diferentes de Malus sobre las 80 especies y géneros de Linneo acerca de árboles frutales y arbustos silvestres que se encuentran en las principales zonas del Cáucaso: Malus communis Desf., M. sylvestris Mill. y M. paradisiaca Med. La especie de Malus predominante en el centro del Cáucaso fue descrita por primera vez por Uglitzkikh como Malus orientalis (Ûzencuk, 1939). En Langenfelds (1991) M. orientalis fue descrita en dos subespecies, ssp. orientalis (var. orientalis y var. Montana) y ssp. turkmenorum. Diversos estudios afirman que las tres especies primarias de Malus son: M. sieversii (Ledeb.) Roem., M. orientalis y M. sylvestris (L.) Mill (Forsline et al, 2003). La manzana cultivada (Malus domestica Borkh) no es un simple grupo taxonómico. La teoría más reciente, se basa en la morfología y la evidencia molecular considerando M. sirvesii (Lebed.), como el principal ancestro salvaje de Malus domestica (Harris et al., 2002; Robinson et al., 2001) y M. orientalis como una especie de menor importancia (Hokanson et al., 1997; Gharghani et al., 2009). Aunque el verdadero origen de las manzanas cultivadas sigue siendo muy polémico, es importante tener en cuenta que el cultivo de la manzana se extendió muy temprano hacia el oeste, para después extenderse hacia el norte a lo largo de las diversas ramas de la ruta de la seda (Ponomarenko, 1987). En cualquier caso el manzano cultivado es de origen híbrido englobando a varias especies del género Malus y de ahí su denominación de Malus x domestica, Borkh (Korban y Skirvin, 1983). Introducción 4 1.2. Situación actual del cultivo del manzano. A nivel mundial el manzano es el segundo cultivo frutal más importante en lo referente a producción y el quinto en superficie cultivada (FAO 2014). En la actualidad se dispone de una amplia gama de variedades en los circuitos comerciales que permiten cubrir las diferentes épocas de recolección, aportando una gran diversidad de gustos y coloraciones adaptados a las exigencias de los consumidores. Se han obtenido variedades resistentes a diversas enfermedades como por ejemplo al moteado, algunas de las cuales están empezando a comercializarse. A pesar de tener gran diversidad de variedades de manzano, es un número muy reducido de variedades las que se han difundido a escala mundial (Castellarnau, 2002). El hecho de que el manzano sea una especie ampliamente cultivada puede deberse a: - El manzano es un árbol frutal que se adapta tanto a zonas cálidas y secas como a zonas frescas y húmedas resistiendo muy bien las bajas temperaturas. - Es una fruta con alto valor terapéutico y alimentario. - Se puede transformar en diversos productos muy demandados por el mercado sin perder calidad. Además presenta buena aptitud para el transporte a larga distancia favoreciendo la exportación y la importación. 1.2.1. Situación Mundial y Europea. A nivel mundial y Europeo, Asia es el continente que mayor número de toneladas de manzana produce con un 65%, siendo China el país que más produce, más de la mitad de la producción mundial. Europa es la segunda área geográfica más productiva, con un 19% de la producción total, siendo Francia el país de la Unión Europea el principal productor seguido de Italia. (Figura.1) Figura 1: Fuente: FAOSTAT http://faostat.fao.org/site/613/DesktopDefault.aspx?PageID=613#ancor Introducción 5 Según los datos obtenidos de la FAO, si analizamos la producción media de manzano de la década 2002-2012, (Figura 2), se puede observar que España está muy por debajo de la producción de los países que más producen ya que el mayor productor mundial de manzanas es China, encontrándose en segundo lugar Estados Unidos, en tercer lugar Turquía y en el puesto número 17 se encuentra España. Figura 2: Fuente: FAOSTAT (http://faostat.fao.org/site/339/default.aspx) Como ya se ha comentado, a nivel europeo destacan Italia y Francia como productores de manzana, pero a diferencia de España, en estos países, la mayor parte de la producción tiene lugar en zonas de montaña y media montaña. Por ejemplo en Italia, el 80% de la producción de manzana tiene lugar en zonas de montaña y media montaña de las regiones de SúdTyrol, y el Trentino donde se producen las variedades de Marlene y Val Venosta. Mientras que en Francia, hay 7.800 ha de manzano en la zona de montaña de los Altos Alpes, 3.000 ha en zona de media montaña en Périgord-Limousin donde se cultiva principalmente la variedad “Golden”. La principal región productora junto con la del Tarn et Garonne es el Departamento de Val de Loira, situado a mayor latitud. Lo expuesto anteriormente, evidencia que el cultivo de manzana de calidad diferenciada, en particular ‘Golden’, necesita ser cultivado en climas suaves de montaña, media montaña o situados a mayor latitud, lo que permite mejorar la firmeza, el color y la calidad de las variedades cultivadas (Iglesias, 2012). Introducción 6 Los datos expuestos (figura 5) muestran la diferencia existente en la actualidad en la localización y estructura productiva del manzano en España en comparación de Italia y Francia. A nivel de España, se han realizado en los últimos años diversas plantaciones comerciales de manzano en altura en Sierra Nevada (Granada), el Burgo de Osma (Soria) y Calatayud (Zaragoza), entre otras. La mayoría están situadas en alturas próximas a los 700 m de altitud, con el objeto de obtener una manzana de mayor calidad. Figura 5: Comparación de la ubicación de las zonas productoras de manzana en España e Italia en 2010. Se observa que en España se sitúan principalmente en el Valle del Ebro (color verde) mientras que en Italia se encuentran en las zonas de montaña alpinas (color marrón). 1.2.2. Situación en España. El sector de la fruta dulce realiza una aportación a la Producción Final Agrícola del 31%, siendo el subsector que más aporta, a pesar de la reducida extensión que ocupa en relación a otros cultivos (Bernardo et al., 2009). Dentro de la fruta dulce, la manzana de mesa es la especie más cultivada, siendo el Valle del Ebro la principal zona productora, por lo que Aragón y Cataluña son dos de las regiones españolas más productoras, junto con Navarra, La Rioja, Castilla y León y la Comunidad Valenciana. La cornisa cantábrica, es la mayor productora de sidra (Bernardo et al., 2009). La concentración del cultivo del manzano en un número reducido de variedades ha sido muy acusada a nivel mundial y sobre todo en España, puesto que en la última década aproximadamente el 90% de la producción se ha centrado sólo en cinco grupos varietales (‘Golden’, ‘Gala’, ‘Red Delicious’, ‘Reineta’ y ‘Fuji’). El que se concentre el cultivo en las Introducción 7 variedades más productivas, nos da una idea de la pérdida de variabilidad de esta fruta, pues se está tendiendo a la desaparición de cierta cantidad de cultivares, que podrían solucionar futuros problemas a largo plazo. Según el Ministerio de Agricultura y Medio Ambiente (figura 3), el grupo varietal más importante en cuanto a superficie y consumo en España es ‘Golden’, con un 34.9% de la superficie, aunque en los últimos años ha sufrido un retroceso, junto con el grupo de las ‘Red Delicious’. Mientras que ‘Gala’, ‘Fuji’ han aumentado su producción. Este retroceso del grupo ‘Golden’ es consecuencia a que la calidad obtenida no es competitiva con las variedades importadas de zonas de montaña o media montaña de Francia e Italia. Figura 3: Fuente MAGRAMA. http://www.magrama.gob.es/es/estadistica/temas/estadisticasagrarias/Manzano.A%C3%B1o 2012 Como ya se ha mencionado, por comunidades autónomas, la mayor productora de manzana es Cataluña con 10.807 hectáreas seguida de Aragón con 4.753 hectáreas según datos del MAGRAMA 2014. La producción de manzana tiene lugar mayoritariamente en zonas de llanura (figura 4), que se caracterizan por sus elevadas temperaturas y baja humedad ambiental en el período estival, condiciones climáticas a las que el manzano no presenta una buena adaptación, lo cual no es extraño debido a que su origen se remonta a las montañas caucásicas con suaves temperaturas y alta humedad ambiental. Condiciones en las que el árbol no dispone ni requiere de un sistema de control de la transpiración eficiente como puede ser el caso de otras especies originarias del clima mediterráneo como el olivo o el almendro. Por tanto, en las zonas donde mayoritariamente se cultiva, el árbol está sometido a un estrés que genera el progresivo cierre de los estomas para reducir la pérdida de agua por transpiración como consecuencia de las altas temperaturas. Este cierre estomático conlleva una serie de consecuencias adversas en las variedades cultivadas en climas cálidos, excepto las de recolección tardía (temperaturas previas a la Introducción 14 Evolucion de la densidad demografica en algunas comarcas de la montaña española (1900-1980) 0 5 10 15 20 25 1900 1910 1920 1930 1940 1950 1960 1970 1980 hab./km2 Montañas de burgos Pirineo Navarro Pirineo aragones Prepirineo occidental aragones Cameros riojanos Alto tajuña Figura 7: Evolución de la densidad demográfica en algunas comarcas de montaña española (1900-1980), (Lasanta y Errea, 2001). Una de las zonas españolas más afectadas por este fenómeno fue la provincia de Huesca, donde muchos de sus pueblos fueron completamente abandonados, lo que provocó que la superficie agrícola cultivada del Pirineo aragonés se redujera drásticamente, en torno al 70% (Figura 8). Al mismo tiempo que se daba este fenómeno migratorio y de abandono de los núcleos rurales, se producía la modernización de los sistemas agrícolas primitivos, que tenía en la mecanización y la especialización de la producción sus pilares fundamentales. Además, con el fin de aumentar la productividad se introducen variedades mejoradas genéticamente. Todo ello, supone la sustitución de los cultivos tradicionales por otros mejorados de diversas procedencias y la rentabilización de las producciones. Figura 8: Evolución de la población del Sobrarbe de los años 1900 a 2001. Introducción 15 Como consecuencia de estos dos fenómenos, el migratorio y la modernización de la agricultura, los habitantes de las montañas se encuentran en una situación de desigualdad ante los del llano, por lo que para contrarrestar la disminución demográfica sin reducir la producción se utilizan sistemas extensivos que disminuyan la inversión de trabajo e incrementen los rendimientos, y con el fin de aprovechar los espacios fértiles que admiten la mecanización se abandonan los pocos menos aptos para ello. Esto provoca que algunos de los cultivos tradicionales de la montaña dejen de tener sentido en un mercado competitivo abierto, además de que su producción y calidad pudiera ser más baja, de manera que se abandonan (Errea, 2007). Actualmente, las tendencias frutícolas han vuelto a cambiar y difieren mucho de los objetivos de hace unas décadas, buscando unos sistemas sostenibles que garanticen la calidad de los alimentos y la adaptación de los diferentes cultivos al medio natural, características que cumplían los frutales tradicionales, seleccionados durante generaciones y que se han cultivados durante años por determinadas características. De manera que dichos cultivos tradicionales pueden llegar a ser una fuente de materia prima importantísima para satisfacer estas nuevas “antiguas” tendencias y constituir un fondo genético de gran valor. 1.4.2. Recuperación de frutales en peligro de extinción Como hemos citado anteriormente, se pasó de los huertos familiares en los que había una gran cantidad de especies y variedades, a unas plantaciones de monocultivo, pasando la fruticultura a seguir un esquema de producción industrial, produciéndose una alarmante pérdida de material genético. A esta selección se le une la necesidad de conseguir a su vez, variedades que sean uniformes y productivas, sustituyendo a las variedades antiguas de la zona (Lasanta et al., 2001) Para evitar la desaparición de este material potencialmente interesante y con importante valor genético, tanto organismos nacionales como internacionales han puesto de manifiesto la necesidad de conservar, reproducir y clasificar parte del material existente en vías de desaparición. Además de la mera conservación de las variedades locales para futuras generaciones como parte de nuestra identidad cultural, la reunión y el estudio de esta diversidad genética de especies tradicionalmente cultivadas tiene un enorme potencial para recuperar el cultivo de especies o variedades tradicionales en el medio rural y explotar la variación conservada a través de procesos de selección y mejora genética, siendo las variedades locales la base para el desarrollo de nuevas variedades más productivas. De ahí que instituciones como la Unión Europea o la FAO las consideran como una pieza esencial en la seguridad alimentaria. A esto se le añade el cada vez mayor interés en buscar una diversificación varietal que complemente el grupo de variedades tradicionales y que respondan a un conjunto de características que satisfagan a las exigencias de productores, comerciantes y consumidores (Errea, 2007), ya que a la hora de enfrentarse a posibles variaciones en el mercado actual, podrían encontrarse en las variedades autóctonas, soluciones que nos pudieran producir Introducción 16 aquello que el mercado exija en ese momento o también podrían albergar posibles soluciones a un problema futuro, en el caso de plagas y enfermedades. Estas variedades antiguas, son menos productivas, pero más adaptadas a cada zona y más heterogéneas y por lo tanto con mayor variabilidad intraespecífica (Jackson et al., 1999) Ya en los 50 y 60 se llevó a cabo una recolección de germoplasma frutal por parte del departamento de pomología de la estación experimental de Aula Dei en Zaragoza, dirigido por Joaquín Herrero, con el fin de elaborar la cartografía frutal de España, reuniéndose importantes y representativas colecciones varietales de los frutales de hueso y pepita. Por otro lado, problemas de diferente índole originaron el arranque de muchas de estas colecciones, pudiéndose en algún caso una pérdida irreparable (Cambra, 1975). En 1994, el equipo del centro de recursos filogenéticos del INIA de Madrid realizó una campaña de prospección y recolección de especies hortícolas en el Pirineo oriental y occidental (Navarra y Cataluña), observando un fuerte proceso de erosión genética para esas zonas. Desde entonces han ido sucediéndose programas de recuperación de material vegetal en riesgo de extinción. En el Centro de Investigación y Tecnología Agroalimentaria de Aragón (CITA) se inició hace 10 años, un programa de recuperación de variedades frutales tradicionales, con el objetivo de asegurar la supervivencia de los recursos filogenéticos y evitar la desaparición de este rico y diverso patrimonio (Pina et al., 2009; Pina et al., 2012). Son muchos los emplazamientos de Aragón donde se localizan valiosos materiales vegetales mantenidos en cultivo por diversas características (figura 9). Sin embargo, el abandono de los huertos tradicionales, la falta de cuidados y la recolonización por parte de la vegetación natural, así como la finalización de la vida de los frutales han ocasionado la rápida desaparición de esta materia vegetal. Por todo ello, es prioritario conservar, reproducir y clasificar todo el material existente antes de que sea demasiado tarde y evitar de esta manera, la pérdida inminente de un material potencialmente interesante y utilizable en los sistemas agrícolas actuales. La estrategia de recuperación de material vegetal se basa en la prospección y propagación de material frutal, en su caracterización pomológica y molecular y la evaluación del potencial agronómico del mismo. Una etapa fundamental del proceso de recuperación es la de ubicar todo el material existente en la geografía aragonesa. 1.4.3. Características que aportan las variedades autóctonas. Diversos programas de mejora genética en manzano de considerable interés se están llevando a cabo en diferentes países como Estados Unidos, Nueva Zelanda, Australia, Alemania, Francia, Inglaterra, Suiza, Italia, y Japón entre otros. Los mejoradores cambian continuamente en función de las necesidades de los agricultores, del mercado y de los nuevos desafíos impuestos por el ambiente. Las variedades locales, poseen los genes o combinaciones génicas que nos solucionan los anteriores problemas o los que se vayan presentando (Iglesias, Introducción 17 2002). Generalmente, los programas de mejora genética están basados en la introgresión de genes desde especies de Malus silvestres en manzanos comerciales (Malus X domestica) (Cruz, 2003). A continuación se citan algunas características que pueden aportar las variedades locales: - Resistencia a plagas y enfermedades: actualmente cada vez hay más restricciones en el uso de fungicidas, lo que hace que haya mayor demanda de encontrar germoplasma que nos proporcione mayor diversidad y resistencia a insectos, enfermedades y nematodos (Iglesias et al, 2007). La variabilidad es la que concede a las especies la capacidad de adaptarse a presiones cambiantes como las plagas y enfermedades. La ventaja de las plantaciones heterogéneas, es que aunque se produzcan daños sólo afectarán a una pequeña parte de la plantación ya que al existir pocos individuos de la misma variedad las posibilidades de propagación se reducen. • Moteado (Venturia inaequalis): Se ha encontrado en M. florivunda el gen más usado para la resistencia al moteado en programas de mejora (Royo, 2002; Cruz, 2003). • Oídio (Podosphaera leucotricha): En M. robusta se ha encontrado el gen de resistencia a esta enfermedad (Cruz, 2003). • Fuego bacteriano (Erwinia amilovora): M. robusta ha presentado un alto nivel de resistencia a la enfermedad. La variedad Scifresh, es la más plantada en Nueva Zelanda y está en fase de expansión en otros países por su excelente calidad gustativa y su resistencia al fuego bacteriano (Martínez et al., 2009). - Adaptación a condiciones adversas ambientales como al calor, al frío, a la sequía y otras: Debido al efecto invernadero y al cambio climático es necesario ir adaptando las variedades a estas nuevas condiciones (Iglesias, 2005). - Calidad organoléptica: Aunque el mercado demanda productos homogéneos de fácil manejo y transporte generalmente para su proceso industrial, también existe paralelamente una demanda muy creciente de otro tipo de características distintas valoradas muy positivamente como pueden ser el aroma, el gusto… Es el caso de algunos cultivares tradicionales de manzanas que ofrecen aromas, sabores, formas o colores distintos a los estándares actuales. (Iglesias et al., 2007). - Relacionados con las técnicas y los costos del cultivo: Los costos del cultivo de las plantaciones son menores cuando las variedades son más resistentes a las plagas y a las enfermedades, además de adaptarse mejor a las técnicas de producción ecológica y de lucha integrada. Se han encontrado genes relacionados con los hábitos de crecimiento que regulan el crecimiento enanizante y compacto (Alson et al., 2000). - Relacionados con la producción de fruta destinada a la industria de transformación: En el caso de la industria de producción de sidra, un problema al que se enfrentan es la necesidad de recurrir a las manzanas de producción más abundantes, como la Golden, Starking, etc., para poder completar la producción, con la consiguiente pérdida de calidad del producto (Dapena, Introducción 18 1990). Las variedades locales pueden ser una alternativa que mejore la calidad del producto por sus características para esta determinada industria. En manzano es necesario que se establezcan medidas encaminadas a dos objetivos: conservar las variedades antiguas y propiciar su salida al mercado. 1.5. Bancos de germoplasma El germoplasma se entiende como el conjunto de variabilidad genética que se puede encontrar en una especie, comprendido por los recursos fitogenéticos naturales, limitados y perecederos, que proporcionan la materia prima, o los genes, que debidamente usados y combinados por los mejoradores dan lugar a nuevas variedades (Esquinas-Alcazar, 1983). Podemos clasificar los recursos fitogenéticos en 3 grupos atendiendo a su origen: - Variedades locales cuya distribución es más o menos amplia por el territorio. - Variedades modernas enfocadas a la industrialización con alta capacidad productiva. - Variedades silvestres de la especie cultivada y de otras especies generalmente próximas que han podido intercambiar genes con la cultivada. Al conjunto de colecciones de recursos fitogenéticos se les denomina Bancos de germoplasma, en cuyas infraestructuras se conserva la diversidad genética bien en forma de semilla o en estado vegetativo durante largos periodos de tiempo. En estas colecciones deben estar incluidas las variedades autóctonas, algunas variedades mejoradas del propio país o importadas y las especies filogenéticamente próximas. 1.5.1. Organizaciones implicadas en la conservación de germoplasma. Fue a mediados del s. XX cuando se tomó conciencia de la necesidad de preservar los recursos genéticos que estaban desapareciendo inexorablemente. Fue la FAO (Fundación de la Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura) la que impulsó las primeras iniciativas para la conservación de los recursos genéticos. Más tarde, apoyada por la ONU (Organización de las Naciones Unidas), IBPGR. (International Board for Plant Genetic Resources), el IPGRI (International Board for Plant Genetic Resources) y la UPOV (Unión Internacional para la Protección de las Obtenciones Vegetales) se ha ido avanzando hacia la organización de un sistema mundial para la conservación y utilización de los recursos genéticos. En España, la iniciativa más importante es el Programa de Conservación y Utilización de los recursos genéticos, creado en 1993 y que es gestionado por INIA (Instituto Nacional de Investigación Agroalimentaria). Introducción 19 La finalidad de este programa es la siguiente: - Evitar la pérdida de diversidad genética de las especies, variedades y ecotipos vegetales autóctonos y cultivares en desuso. - Evaluar y documentar el material obtenido para facilitar su uso en programas de mejora. 1.5.2. Bancos de germoplasma de manzano En España los Bancos de germoplasma de manzano se encuentran en el Norte Peninsular y más concretamente en la cornisa cantábrica, donde podemos encontrar la mayor diversidad genética de manzano (tabla 3). Tabla 3: Bancos con germoplasma de manzano en España. Región Centro Nº accesiones Aragón CITA 183 A Coruña Xunta de Galicia. Conselleria de Política Agroalimentaria e desenvolvemento Rural. Centro de Investigaciones Agrarias de Mabegondo (CIAMLCO) 407 Asturias Servicio Regional de investigación y desarrollo Agroalimentario (SERIDA) 800 Lleida Generalitat de Catalunya. Universitat de Lleida. Escola Tecnica Superior dÈnginyeria Agraria (BGUDL) 113 Navarra Gobierno de Navarra. Universidad Pública de Navarra. Escuela Técnico Superior de Ingenieros Agrónomos. (ETSIAN) 282 Zaragoza Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Estación Experimental de Aula Dei (EEAD) 54 Figura 9: Parcela experimental de accesiones locales perteneciente al CITA, situada en Ligüerre (Huesca) Introducción 20 En Aragón, desde el CITA, se colabora con diversos agricultores en diversos proyectos (figura 9) para recuperar las variedades tradicionales locales con el objetivo de darlas a conocer y evitar que desaparezcan. Por otro lado se intenta promover las variedades locales de fruta como promotoras del desarrollo rural. 1.6. Caracterización morfológica Los descriptores se usan para clasificar correctamente los recursos fitogenéticos de los Bancos de Germoplasma. Cada especie tiene unos descriptores específicos. Los caracteres realmente útiles son aquellos que pueden ser vistos a simple vista, se transmiten fácilmente, tienen alto valor taxonómico y agronómico, se pueden aplicar a pequeñas muestras y permiten diferenciar una variedad de otra (UPOV, 2014). El método que se emplee para la identificación de los caracteres debe ser estable, de forma que se manifiesten de la misma forma independientemente del medio donde se desarrolle la planta o la edad de la misma, del patrón injertado, de la técnica cultural, etc. (Royo et al., 1994). En este trabajo se han estudiado caracteres morfológicos y fisicoquímicos. Los caracteres morfológicos presentan gran interés y son los únicos reconocidos por el Reglamento Técnico de Control y Certificación de plantas de plantas de vivero de frutales pero hay que tener en cuenta que presentan ciertas desventajas frente a la identificación molecular: - Se necesita un gran número de variedades de referencia donde se puedan comparar en condiciones ambientales similares. - El proceso de identificación es muy largo ya que es necesario observar flores y frutos. - Las condiciones ambientales y de la planta influyen en exceso de los caracteres fenotípicos. - En ocasiones, diferencias agronómicas de gran interés no se corresponden con suficientes diferencias fenotípicas para poder distinguir con seguridad (Royo et al., 1994). Para la caracterización morfológica del manzano, se han utilizado los descriptores UPOV y Bioversity International (IBPGR). 1.6.1. Descriptores de la UPOV La Unión Internacional para la Protección de las Obtenciones Vegetales (UPOV) es una organización intergubernamental con sede en Ginebra (Suiza). La UPOV fue constituida en 1961 por el Convenio Internacional para la Protección de las Obtenciones Vegetales (“Convenio de la UPOV”). Introducción 21 La misión de la UPOV es proporcionar y fomentar un sistema eficaz para la protección de las variedades vegetales con miras al desarrollo de obtenciones vegetales en beneficio de la sociedad. El Convenio de la UPOV es el fundamento en que se apoyan los miembros para fomentar el fitomejoramiento mediante la concesión, a los obtentores de variedades vegetales, de un derecho de propiedad intelectual: el derecho de obtentor. Actualmente, forman parte de esta organización 71 países. Para manzano el descriptor UPOV empleado es el TG 014, formado por 47 caracteres la mayoría relativos al fruto. 1.6.2. Bioversity International (IPGRI). Con la finalidad de evitar la pérdida de biodiversidad de los cultivos nace International Board for Plant Genetic Resources (IBPGR) el cual fue establecido en 1974 por el Consultative Group on International Agricultural Research (CGIAR). Su misión fue la de coordinar un programa internacional de recursos genéticos de forma que se organizaran misiones de colecta de los mismos y se construyeran y expandieran los bancos de genes regional e internacionalmente. La FAO actuó como secretaría de la IBPGR (Biodiversity International). Investigadores de todo el mundo, prepararon descriptores que sirvieran como base a futuros trabajos de documentación y evaluación de variedades. En estos descriptores se encontraban datos de recolección, localización de la variedad, resistencia a plagas y enfermedades. Concretamente para manzano el descriptor fue escrito en 1982 (Jaramillo, 2000). En 2006, el IPGRI y la Red internacional para el Mejoramiento del Banano y el Plátano (INIBAP) se unieron y formaron Bioversity International. Bioversity se concentra en 6 áreas de enfoque para lograr el objetivo de garantizar que tanto individuos como instituciones sean capaces de hacer un uso razonable de diversidad biológica agrícola. Las áreas de enfoque son las siguientes: - Desarrollo de estrategias de colaboración mundial con la finalidad de conservar y utilizar los recursos genéticos para la alimentación y la agricultura. - Control de la situación y las tendencias de la diversidad útil, incluyendo la localización de la diversidad in situ y de la erosión genética. - Mejora de la conservación ex situ y el uso de la diversidad de especies útiles, Conservando y haciendo un uso sostenible de especies silvestres. - Gestionar la biodiversidad agrícola para una mejor nutrición, mejorar los medios de vida y sistemas de producción sostenibles para los pobres. Introducción 22 1.7. Calidad organoléptica y nutricional. En los últimos años, el interés de los principales agentes implicados en el ciclo de la manzana (productores, distribuidores y consumidores) se ha encaminado hacia la búsqueda de la calidad del producto. Con este fin, se divide el estudio de la calidad de un producto vegetal en cuatro componentes principales, de los que en este trabajo se han estudiado dos: - Calidad organoléptica o sensorial: se encuentran la apariencia (tamaño, color, forma, defectos, etc.), la textura (firmeza, jugosidad, fibrosidad, etc.) y el flavor (sabor y aromas) (Bruhn et al., 1991). - Calidad nutricional: Abarca todos los componentes nutritivos de la fruta como carbohidratos, proteínas, lípidos, vitaminas y minerales. La calidad nutricional está relacionada con la capacidad de los alimentos de proporcionar elementos nutritivos que favorezcan una buena salud y que eviten la aparición de enfermedades (Cámara, 2006), por lo que se puede decir que es igual a la suma del valor alimenticio y del valor terapéutico del producto vegetal. Estas dos características han sido las protagonistas de las campañas publicitarias sobre las manzanas en los últimos tiempos responsables del aumento del consumo de manzanas en Europa (Bernardo et al., 2009). Dentro de la calidad nutricional hay que destacar la presencia de sustancias antioxidantes, que juegan un papel de protección frente a enfermedades cardiovasculares y el cáncer (Lee, 2007). Así, los antioxidantes derivados de las plantas, como la vitamina E, vitamina C y polifenoles se están convirtiendo, poco a poco, en importantes factores de la dieta humana (Lule y Xia, 2005). Por otra parte, los productos vegetales alimenticios, contienen vitaminas naturales, que cubren las necesidades del organismo mejor que las vitaminas sintéticas a pesar de que estas últimas tengan una función similar. Por lo que conviene tomar en cada comida alimentos frescos (frutas, ensaladas, zumos naturales…) para aportar al organismo la cantidad de vitaminas, sustancias minerales y sustancias celulósicas necesarias para la digestión. La composición alimenticia y analítica de la manzana, como en el resto de los frutales, podrá variar en función de las diferentes variedades existentes. 1.7.1. Compuestos nutricionales en manzana. Desde el punto de vista nutricional, las frutas son productos ricos en agua, pobres en proteínas (1-3%) y lípidos (entre 0,1 y 0,2%, excepto en aguacates, olivas y frutos secos) y con un amplio rango de valores en lo que a carbohidratos se refiere, que suelen situarse entre el 10% y el 25%. Además, son ricos en micronutrientes: vitaminas (particularmente vitamina C) y minerales (Knee, 2002). Introducción 23 La manzana, además de ser un alimento muy agradable, se recomienda desde el punto de vista médico para combatir el reumatismo, la gota, la obesidad, la hipertensión arterial, y como preventivo contra el infarto de miocardio. Por otra parte, también puede considerarse como un auténtico y útil medicamento, siendo especialmente recomendable para quienes trabajan con sustancias tóxicas y para los fumadores (Álvarez, 1988). La manzana muestra diferencias entre la pulpa y la piel. La piel es rica en catequinas, procianidinas, phloridizin y esteres de los ácidos hidrixicinámicos entre otros compuestos. Además, contiene glucósidos flavonoides adicionales, como la quercetina y cianidinas. La quercetina contribuye a evitar el depósito de colesterol en las arterias y su estrechamiento. Así mismo contienen sales minerales, fósforo, calcio, magnesio, hierro, cobre y manganeso, así como distintas vitaminas; aunque su contenido en vitamina A es pobre, abunda la vitamina B 1 (aneurina), la C (ácido ascórbico), la B 2 (riboflavina), la PP o ácido nicotínico (la piel contiene más del doble que la pulpa), el ácido pantoténico, y la vitamina H (biotina). En la tabla.4, se muestran la medida de los diferentes componentes para 100 gramos de pulpa fresca. Tabla4: Estimación de los componentes en 100 gramos de pulpa fresca de manzano (Carrera, 1999): Agua: 84 Cenizas: 0,3 (K; Ca; Mg; S; P; ...) Glúcidos: 14 glucosa+ fructosa: 7 - 12 sacarosa: 2-6 almidón: 0 en el fruto maduro celulosa: 0,9 Sorbitol Pectinas y protopectinas: 0,4 Ácidos orgánicos: 1,5 (Ácidos málico, cítrico, fumárico, mercúri co, clorogénico, sitimico, ácidos cetónicos, etc.). Fenoles diversos: 0,3 - 0,5 (Ácido paracumarilquinico, paracumaril - glucosa, epicatéquina, leucoantocianos, floruzina, antocianos...) flavonoles, ac.clorogénico. Lignina: 0,4 Pi gmentos no fenólicos: carotenoides, clorofilas. Lípidos: 0,2 (glicéricos, fosfolípidos, etc.) Constituyentes de ceras: parafinas, alcoholes, ácidos e hidroxiácidos. Prótidos: aminoácidos libres (licina, triptófono, asparagina, etc.) Constituyentes vol átiles (aroma): alcoholes (etanol, butanol, hexanol...) esteres (acetato de butilo, de hexilo, butirato de butilo, etc.) Vitaminas: aneurina 70 μg; riboflavina 25 μg. Ácido ascórbico: 0,002 - 0,050 Reguladores de crecimiento (sobre todo en las semill as) Gases: CO2, O2, N2, H2O, C2H4, etc. Material y métodos 31 3. MATERIAL Y MÉTODOS 3.1. Material vegetal disponible El material vegetal analizado para realizar este proyecto pertenece al banco de germoplasma del CITA e incluye variedades de referencia (comerciales) y accesiones prospectadas en zonas de montaña de Aragón. • Variedades de referencia (comerciales): se analizaron 15 variedades de referencia (tabla 5). • Variedades locales: 56 accesiones de manzano pertenecientes a la Comunidad Autónoma de Aragón recuperadas y conservadas en base a su riesgo de desaparición y localizadas en zonas de montaña abandonadas (tabla 6). El material vegetal recuperado corresponde a variedades que se han conservado en climas de montaña, por lo tanto están expuestas a una mayor radiación y altitud, resisten las heladas, están adaptadas a unas condiciones particulares en muchos casos extremas al frío, resisten enfermedades y han sobrevivido con falta de cuidados. Las accesiones locales incluidas en este estudio se han caracterizado molecularmente en Pina et al., 2014. Tabla5: Variedades de referencia (comerciales) analizadas pertenecientes al Banco de Germoplasma del CITA. Variedad Parcela Akane P. colección Cita Cox´s P. colección Cita Elstar P. colección Cita Fuji 4113 P. colección Cita Fuji 4165 P. colección Cita Gala P. colección Cita Golden Delicius P. colección Cita Granny Smith P. colección Cita Idared P. colección Cita Mack Intosh P. colección Cita Melrose P. colección Cita Pink Lady P. colección Cita Reineta P. colección Cita Reinta Gris P. colección Cita Verde Doncella P. colección Cita Objetivos 32 Tabla 6: Código, origen, comarca, parcela y coordenadas en la que actualmente se encuentra el origen del conjunto de accesiones que han sobrevivido en las condiciones de montaña de Aragón pertenecientes al Banco de Germoplasma del CITA. Código Origen Comarca Parcela LAT(N) LONG (W) ALT (m) MA-058 Aínsa Sobrarbe (HU) Ligüerre 42.41 0.14 580 MA-100 Cenarbe Jacetania (HU) Ligüerre 42.66 -0.51 1240 MA-105 Sahún Ribagorza (HU) Ligüerre 42.58 0.47 1135 MA 107 Sahún Ribagorza (HU) Ligüerre 42.58 0.47 1135 MA-108 Sahún Ribagorza (HU) Ligüerre 42.58 0.47 1135 MA-109 Sahún Ribagorza (HU) Ligüerre 42.58 0.47 1135 MA-110 Sahún Ribagorza (HU) Ligüerre 42.58 0.47 1135 MA-115 Sahún Ribagorza (HU) Ligüerre 42.58 0.47 1135 MA-140 Daroca Campo de Daroca (Z) CITA 41.11 -1.41 797 MA-141 Daroca Campo de Daroca (Z) CITA 41.11 -1.41 797 MA-143 Daroca Campo de Daroca (Z) CITA 41.11 -1.41 797 MA-144 Daroca Campo de Daroca (Z) Ligüerre 41.11 -1.41 797 MA-145 Daroca Campo de Daroca (Z) Ligüerre 41.11 -1.41 797 MA-146 Daroca Campo de Daroca (Z) CITA 41.11 -1.41 797 MA-147 Daroca Campo de Daroca (Z) CITA 41.11 -1.41 797 MA-149 Daroca Campo de Daroca (Z) Ligüerre 41.11 -1.41 797 MA-156 Laguarta Alto Gállego (HU) Ligüerre 42.41 -0.11 1154 MA-163 Aínsa Sobrarbe (HU) Ligüerre 42.41 0.14 580 MA-166 Aínsa Sobrarbe (HU) Ligüerre 42.41 0.14 580 MA-171 El Frago Cinco Villas (Z) CITA 42.27 -0.92 629 MA-182 Aínsa Sobrarbe (Z) Ligüerre 42.41 0.14 580 MA-192 Coscojuela Sobrarbe (HU) Ligüerre 42.37 0.14 998 MA-193 Aínsa Sobrarbe (HU) Ligüerre 42.43 0.12 580 MA-195 Aínsa Sobrarbe (HU) Ligüerre 42.41 0.14 580 MA-199 Escoain Sobrarbe (HU) Ligüerre 42,60 0,13 1200 MA-200 El Frago Cinco Villas (Z) Ligüerre 42.27 -0.92 629 MA-201 El Frago Cinco Villas (Z) CITA 42.27 -0.92 629 MA-215 Poo (AS) Municipio de Cabrales (AS) CITA 43,42 -4,78 180 MA-221 Poo (AS) Municipio de Cabrales (AS) CITA 43,42 -4,78 180 MA-224 Tramacastilla Sierra de Albarracín (TE) Ligüerre 40.43 -1.56 1260 MA-225 Tramacastilla Sierra de Albarracín (TE) Ligüerre 40.43 -1.56 1260 MA-231 Albarracin Sierra de Albarracín (TE) Ligüerre 40.41 -1.44 1171 MA-232 Torres Albarra. Sierra de Albarracín (TE) Ligüerre 40.13 -1.53 1171 MA-233 Torres Albarra. Sierra de Albarracín (TE) Ligüerre 40.43 -1.53 1237 MA-239 Guadalaviar Sierra de Albarracín (TE) Ligüerre 40.39 -1.73 1519 MA-242 Sta Eulalia Hoya de Huesca (HU) Ligüerre 42.21 -0.30 867 MA-245 Barcabo Sobrarbe (HU) CITA 42.24 0.07 713 MA-245 Barcabo Sobrarbe (HU) Ligüerre 42.24 0.07 713 MA-246 Bertoz Betorz (HU) CITA 42.26 0.02 1000 MA-247 Castillazuelo Somontano de Barbastro (HU) Ligüerre 42.07 0.06 368 MA-248 Castillazuelo Somontano de Barbastro (HU) Ligüerre 42.07 0.06 368 MA-249 Castillazuelo Somontano de Barbastro (HU) Ligüerre 42.07 0.07 368 Material y métodos 33 MA-251 Daroca Campo de Daroca (Z) CITA 41.11 -1.41 797 MA-253 Isarre Jacetania (HU) Ligüerre 42.24 -0.29 718 MA-255 Vadiello Jacetania (HU) Ligüerre 42.24 -0.28 604 MA-256 Vadiello Crtra adelante Jacetania (HU) Ligüerre 42.24 -0.28 604 MA-257 Vadiello Presa Jacetania (HU) Ligüerre 42.24 -0.28 604 MA-267 Yosa de Sobremonte Alto Gállego (HU) Ligüerre 42.62 -0.36 1210 MA-279 Agorreta Pirineo occidental (NA) Ligüerre 42.95 -1.48 595 MA-280 Novales Hoya de Huesca (HU) CITA 42.03 -0.29 464 MA-281 Novales Hoya de Huesca (HU) CITA 42.03 -0.29 464 MA-295 Javierre del Obispo Alto Gállego (HU) Ligüerre 42.54 -0.32 878 MA-298 Susin Alto Gállego (HU) Ligüerre 42.56 -0.30 1065 *Las variedades: “MA-215”, “MA-221” y “MA-279” se incluyeron en el estudio aunque no pertenecen a Aragón, porque se encontraban en unas condiciones de clima, latitud, y altitud muy similares a las que se han estudiado. Las variedades que están tanto en la parcela del CITA como en Ligüerre han sido injertadas sobre patrón MM106, estando un año en vivero antes de trasplantarse a parcela. Las características más destacables de este portainjertos son: MM106 Es un patrón de vigor medio y con buena eficiencia en la entrada en producción y alta productividad. Da buen anclaje, se adapta a distintos suelos y climas y además resiste bien la sequía y las bajas temperaturas, aunque muestra sensibilidad a Phythopthora. 3.2. Toma de muestras. Las muestras se localizaban en tres fincas experimentales, dos de las cuales están situadas en el CITA (Zaragoza) de 0.65 ha cada una y la tercera en Ligüerre de Cinca (Huesca) de 1 ha. En todas las plantaciones hay variedades locales recuperadas de Aragón, a excepción de una parcela del Cita denominada “parcela colección”, en la cual se cultivan variedades comerciales que son de referencia. Las fincas del CITA se riegan a manta y el terreno de Ligüerre tiene instalado el riego por goteo suministrándole el agua con la ayuda de una bomba. El suelo es adecuado para que se desarrolle adecuadamente el cultivo ya que se usaban como campos de cereal anteriormente. La recogida de muestras se realizó durante el periodo Junio – Diciembre del 2013, y se llevaron a cabo las siguientes actividades: - Cada semana se visitaron las fincas experimentales y se observó de forma visual como avanzaba la maduración. - Las accesiones que mostraban síntomas de madurez se palpaban y se comprobaba la firmeza de la pulpa con el penetrómetro. Las que daban valores inferiores a 7 ó organolépticamente resultaban agradables al gusto se recolectaron haciendo dos lotes: Objetivos 34 - El primer lote estaba compuesto por 15 muestras, las cuales se destinaron a los análisis de caracterización pomológica y a los análisis fisicoquímicos. - El segundo lote estaba compuesto por unos 50 frutos, los cuales se colocaron en unas barquillas etiquetadas con el nombre de la accesión, la fecha de recolección y la finca de la que procedían para evaluar la capacidad de conservación. 3.3. Caracterización y evaluación pomológica. La caracterización pomológica de las variedades recuperadas y las variedades comerciales pertenecientes al banco de germoplasma del CITA se ha basado en una descripción morfológica, adaptada a los descriptores definidos para cada especie por organismos internacionales (UPOV e IPGRI). Además se ha evaluado algún descriptor que se consideraba importante por el equipo del CITA. También se ha evaluado la capacidad de almacenamiento y conservación a temperatura ambiente de los distintos genotipos. Se recogieron 50 frutos por árbol, se almacenaron a temperatura controlada 8°C - 5°C y se evaluó su capacidad de almacenaje valorando de 0 (mal conservadas) a 5 (excelente conservación). Por último, se realizaron determinaciones de parámetros fisicoquímicos (pH, acidez, sólidos solubles) y bioquímicos (azucares, proteínas y oligoelementos). 3.3.1. Toma de datos pomológicos para cada variedad. Para cada accesión de la que se tomaron muestras se ha realizado: - Una ficha en la que se incluye: nombre de la variedad, fecha de recolección, fecha de toma de datos, observador, parcela donde fueron recogidos los frutos, número de frutos que se recolectaron en total, época de cosecha (en el caso de que los frutos hayan sido recolectados con antelación) y descriptores evaluados de los frutos (figura 10, anexo 1). - Se congeló una parte de las muestras para posteriores estudios (no incluidos en este proyecto) tanto de piel como de pulpa y 100 ml de jugo de cada lote de accesiones, estando compuesto cada lote por un conjunto de 10 manzanas de la misma accesión. Material y métodos 35 Figura 10: Modelo de ficha de accesión (Anexo I). 3.3.2. Parámetros analizados en el fruto. El estudio se realizó sobre 10 frutos de cada variedad, cuando los frutos más expuestos a la radiación presentaban una firmeza de pulpa aproximadamente entre 5 y 7 kg. En algunas variedades, debido a la escasez de frutos, se tomaron menos muestras. De las que existía suficiente cantidad, se colocaron en las cámaras frigoríficas del CITA para evaluar su capacidad de conservación. Los parámetros estudiados están incluidos en el descriptor UPOV TG014 (2005) para el manzano y otros se estudiaron por considerarse importantes para ayudar a caracterizar una variedad (color del núcleo de las lenticelas, aureola, apertura del ojo, posición del diámetro máximo y conservación). Los caracteres estudiados se dividieron en cualitativos (tabla 7) y cuantitativos (tabla 8). Los primeros se evalúan de forma visual, y los segundos mediante diferentes aparatos calibrados (Barea, 1991). Ambos se evaluaron acorde con las especificaciones recogidas en el descriptor para manzano de la UPOV. A continuación se adjuntan las tablas con los diversos caracteres cualitativos y cuantitativos estudiados y la clasificación. Objetivos 36 Tabla 7: Descriptores y clasificación de los caracteres cualitativos analizados en el fruto del manzano según la UPOV. DESCRIPTOR ES CLASIFICACIÓN Forma general UPOV (U-28) 1 - Cónica 4 - Aplanada globulosa 2Oblonga 5-Aplanada cónica 3Globulosa Acostillado UPOV(U - 29) 1 - Ausente o débil 2 - Moderado 3 - Fuerte Coronado del extremo calicino UPOV (U-30) 1 - Ausente o débil 2 - Moderado 3 - Fuerte Pruina de la epidermis (U - 33), 1 - Ausente o débil 2 - Moderado 3 - Fuerte Cera de la epidermis UPOV (U - 34) 1 - Ausente o débi l 2 - Moderado 3 - Fuerte Color de fondo. UPOV (U-35) 1 - No visible 2Amarillo blanquecino 3Amarillo 4 - Verde blanquecino 5Verde amarillento 6Verde Zona relativa de color de superficie (chapa) UPOV (U-36) 0 - ausente 1Muy pequeña 2 - 2 colores (placas o estrías) 3Mayor del 80% Tono color superficial (Chapa) UPOV (U-37) 0 - No hay 1Rojo 2Rosa 3 - Naranja 4púrpura 5marrón rojizo Intensidad del color superficial (chapa) UPOV (U-38) 0 - No hay 1Clara 2 - Media 3Oscura Distribución del color superficial (chapa) UPOV (U-39) 0 - Ausencia 1Placas continuas 2Placas estriadas 3 - En estrías 4Difundido Anchura de las estrías UPOV (U-40) 0 - No hay 3Estrechas 5 - Media 7Anchas Russeting alrededor de la base peduncular UPOV (U-41) 1 - < 30% 2 - 30 - 70% 3 - > 70 % Russeting en las caras UPOV (U - 42) 1 - < 30% 2 - 30 - 70% 3 - > 70 % Russeting alrededor de la cavidad ocular UPOV (U-43) 1 - < 30% 2 - 30 - 70% 3 - > 70 % Número de lenticelas UPOV (U - 44) 3 - Bajo 5 - Medio 7 - Alto Tamaño de l as lenticelas UPOV (U-45) 3 - Pequeñas 5 - Medias 7 - Grandes Color del núcleo de la lenticela 1 - Blanco 2 - Marrón 3 - Negro Aureola 1 - Con aureola 2 - Sin aureola Color de la pulpa UPOV (U-53) 1 - Blanco 2Crema 3Amarillento 4 - Verdoso 5Rosáceo 6Rojizo Apertura del ojo 1 - Cerrado 2 - Algo abierto 3 - Abierto Longitud del sépalo UPOV (U - 32) 3 - Corto 5 - Medio 7 - Largo Apertura de lóculos UPOV (U - 54) 1 - Cerrados 2 - Parcialmente abiertos 3 - Abiertos Posición del diámetro máximo 1 - Hacia el cáliz 2 - En el medio 3 - Hacia el pedúnculo Material y métodos 37 Tabla 8: Descriptores y clasificación de los caracteres cuantitativos analizados en el fruto del manzano según la UPOV. DESCRIPTORES CLASIFICACIÓN Tamaño UPOV(U-24) 1 - Muy pequeño <83.1 2-Pequeño 83.1-180.2 3-Medio 180.2-277.3 4 - Grande 277.3 - 374.4 5-Muy grande 374.4-471.15 6-Extr. Grande >471.15 Altura UPOV (U-25) 1 - Corta <49.4 2Media 49.4-65 3Larga 65-80.6 4 - Muy larga 80.6 – 96.3 5Extr. Larga >96.3 Diámetro UPOV (U-26) 1 - Muy pequeño <43.7 2-Pequeño 43.7-61.1 3-Medio 61.1-78.6 4 - Grande 78.6 - 96 5-Muy grande 96 – 113.4 6-Extr. Grande >113.4 Relación altura/diámetro UPOV (U-27) 1 - Extr. Pequeña <0.48 2Muy pequeña 0.480.61 3-Pequeña 0.61-0.75 4 - Mediana 0.75 - 0.88 5-Grande 0.88-1.01 6-Muy grande 1.01-1.14 7-Extr. Grande >1.14 Tamaño del ojo UPOV (U - 31) 1 - Pequeño <6 2 - Medio 6 - 9 3 - Grande >9 Longitud del pedúnculo UPOV (U-46) 1 - Corto <8 2Medio 8-19 3 - Largo 19 - 30 4Muy largo >30 Grosor del pedúnculo UPOV (U-47) 1 - Delgado <2 2Medio 2-4 3 - Grueso 4 - 6 4Muy grueso >8 Profundidad cavidad peduncular UPOV (U-48) 1 - Poco profunda <9.1 2Media 9.1-15.8 3Profunda 15.8-22.5 4 - Muy profunda 22.5 - 29.2 5-Extr. Profunda >29.2 Anchura cavidad peduncular UPOV (U-49) 1 - Muy estrecha <15 2-Estrecha 15 - 24.2 3-Media 24.2 - 33.4 4 - Ancha 33.4 - 42.5 5Muy ancha 42.5 - 51.7 Profundidad ojo UPOV (U-50) 1 - Poco profunda <5.1 2Media 5.1-10.6 3Profunda 10.6-16.1 4 - Muy profunda 16.1 - 21.6 5-Extr. Profunda >21.6 Anchura cavidad ojo UPOV (U-51) 1 - Muy estrecha <13.5 2-Estrecha 13.5-21.4 3-Media 21.4-29.2 4 - Ancha 29. 2 - 37.1 5Muy ancha 37.1-45 6Extr. Ancha >45 Firmeza de la pulpa UPOV (U - 52) 1 - Blanda <6 3 - Media 6 - 8 5 - Firme >8 Época de cosecha UPOV (U-56) 1 - Extremadamente temprano <55 2Muy temprano 55-40 3Temprana 40-25 4Medianamente temprano 25-10 5 - Media + - 10 6Media tardía 10-25 7Tardía 25-40 8Muy tardía 40-55 9Extremadamente tardía >55 Madurez de consumo UPOV(U-57) 1 - Muy precoz <240 7 - Tardía 320 - 340 3Precoz 240-280 9Muy tardía >347 5Media 280-320 Conservación 1 - Mala ( - 50 días) 3 - Excelente(+100 días) 2-Buena (+50 días) Las medidas para los descriptores cuantitativos fueron tomadas con un calibre digital (figura 11 A). A excepción de la firmeza de la pulpa UPOV (U-52), donde se utilizó un dinamómetro (figura 11 B) denominado penetrómetro Effeggi, que determina la resistencia de Objetivos 38 la pulpa del fruto a la penetración de un émbolo de 11 mm de diámetro. Este valor se toma eliminando la parte superficial de la epidermis de la manzana e introduciendo el émbolo hasta la muesca indicada. Los resultados obtenidos en este proyecto para los valores cuantitativos y cualitativos, se adjuntan en los siguientes anexos: Datos cualitativos: Anexo II (datos cualitativos de variedades locales) y Anexo III (datos cualitativos de variedades de referencia). Datos cuantitativos: Anexo IV (datos cualitativos de variedades locales) y Anexo V (datos cualitativos de variedades de referencia). 3.3.3. Método estadístico Los resultados obtenidos para los caracteres cualitativos y cuantitativos se analizaron primero de forma individual. Se calculó para cada accesión: la moda, el número de accesiones que pertenecían a cada nivel, así como el porcentaje respecto al total de accesiones analizadas. Se compararon los valores de las accesiones locales con los de las variedades de referencia. El número de clases, para estudiar el rango de variabilidad de un carácter dentro de una misma accesión, se calculó para cada carácter en el conjunto de accesiones locales y las variedades comerciales a partir de los datos obtenidos en los descriptores cuantitativos. De este análisis se excluyeron los descriptores relacionados con la conservación, la época de cosecha UPOV (U-56) y la madurez de consumo UPOV (U-57). Se calculó la media y la desviación típica dentro de cada carácter para cada accesión y se eliminaron los valores extremos, de esta forma, sólo se tuvieron en cuenta los comprendidos entre el valor medio más menos 1.15 veces la desviación típica (75% de los valores de la población). La fórmula empleada para establecer el número de clases (CN) en las que se clasificó cada carácter cuantitativo es la siguiente:             +             = ∑∑ == n SD n R R CN n i Ai n i Ai B 11 15.1 En esta fórmula, n es el número de accesiones caracterizadas, RB es la diferencia entre el mayor y el menor valor medio del carácter observado en el conjunto de accesiones evaluadas en todos los bancos, RA es la diferencia entre el mayor y el menor valor observado del carácter dentro de cada accesión y SDA es la desviación típica de los valores del carácter observados dentro de cada accesión. El número de clases obtenido con la expresión anterior se redondeó al entero más cercano. Material y métodos 39 3.4. Evaluación de parámetros fisicoquímicos relacionados con la calidad del fruto. 3.4.1. Estudio de los sólidos solubles, acidez y pH de las variedades de manzano estudiadas Sólidos solubles. Se tomaron las diez muestras que habían sido analizadas en cada lote y se licuaron, para posteriormente filtrarlas por un embudo de papel. Una vez que se obtuvo el jugo, se determinó el contenido en sólidos solubles (°Brix) con un refractómetro digital (Atago CO, LTD). Los °Brix representan el % de azúcar de caña disuelto en agua. Acidez y pH. Para calcular el pH y la acidez, se tomó el zumo obtenido anteriormente y se colocaron 25 ml de jugo en un vaso de precipitados. Se llevó la muestra al valorímetro (figura 11 C) y se valoró el zumo con NaOH 0.1 N. Los resultados obtenidos fueron: pH, acidez total, contenido en ácido málico, ácido tartárico y ácido cítrico expresado en g/l. A) B) C) Figura 11: Aparatos del CITA para evaluar diferenctes parámetros A)Calibre digital, B)Penetrómetro C)Valorador. Los resultados obtenidos por el valorímetro para este proyecto son los valores de sólidos solubles, pH y acidez y se adjuntan en los siguientes anexos: Variedades locales: Anexo VI. Variedades de referencia: Anexo VII. Resultados y discusión 47 4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN La importancia que hoy en día tiene la conservación, caracterización y evaluación de los recursos genéticos ha sido puesta de manifiesto por organismos tanto a nivel nacional como internacional, que señalan que “estos recursos genéticos para la agricultura y la alimentación constituyen la base de la seguridad alimentaria y del desarrollo sostenible, y por tanto, es fundamental su conservación para evitar la pérdida de diversidad genética de las especies, razas, variedades y ecotipos autóctonos, y para garantizar la disponibilidad de los genotipos necesarios para la mejora genética”. Las variedades locales constituyen un claro patrimonio genético que han demostrado con el paso del tiempo una resistencia y una adaptación a unas condiciones extremas que se han mantenido durante muchas décadas. Hay caracteres que se mantienen constantes como son la resistencia a enfermedades, a la manipulación, etc. Pero los gustos del mercado son cambiantes y exigen nuevos caracteres a la manzana relacionados con cualidades organolépticas, la coloración de la piel, el tamaño, forma etc. Para conseguir los frutos exigidos por el mercado y teniendo en cuenta que cada vez se tiende más a la utilización de sistemas sostenibles, es necesario evitar la pérdida de las variedades locales, las cuales aportan a las colecciones actualmente existentes una gran variabilidad genética. En el presente estudio, se han analizado 71 variedades de manzano del Banco de germoplasma del CITA. Cabe destacar que 56 variedades son locales, que han sido recuperadas en zonas de alta montaña de Aragón y las 15 variedades restantes son comerciales. Estas accesiones han sido estudiadas durante un año dentro del marco del proyecto INIA (RF 201100017-C005), en el que se ha propuesto una metodología con la que establecer criterios comunes para realizar las caracterizaciones morfológicas, agronómicas y tecnológicas de las colecciones de manzano, empleando 57 caracteres recogidos en la última revisión de la UPOV TG/14/9 del 6 de abril de 200 5. Los resultados se muestran a continuación: 4.1 CARACTERÍSTICAS POMOLÓGICAS CUALITATIVAS DEL FRUTO. En el aspecto morfológico los avances en las características del fruto han sido más importantes por ser la parte comestible y por tanto, el propósito prioritario de la mejora. Los objetivos de la mejora se han dirigido principalmente a la presentación (color, calibre, forma), a la calidad gustativa y a la mejor aptitud a las manipulaciones. Resultados y discusión 48 4.1.1. Forma general del fruto UPOV (U-28) El descriptor de la UPOV se divide en 15 grupos diferentes para la forma del fruto, pero para la clasificación de la colección se han catalogado en 5 grupos (figura 16), siguiendo la propuesta de método armonizado para la caracterización pomológica de variedades cultivadas de manzano (Malus x domestica, Borkh) establecida en el marco del proyecto INIA (RF 201100017-C005). La mayoría se encuentra en dos grupos. Se observa que el 40% de los frutos tienen forma “globulosa” y un 39% posee forma “aplanada globulosa”. Según últimas revisiones, (Iglesias, 2012) este resultado es lógico, ya que la mayor parte de los frutos se han obtenido de la parcela que está situada en Ligüerre, a mayor altitud que las de Zaragoza, por lo tanto los frutos tienden a ser globulosos. También influye en la forma de los frutos la radiación solar. Figura 16: Porcentaje (%) de accesiones que determinan la forma general de los frutos de manzano analizados respecto al descriptor UPOV (U-28). 4.1.2. Descriptores de caracteres externos La mayoría de las variedades poseen un contenido medio tanto del acostillado, como del coronado del extremo calicino y la cera de la epidermis es entre moderada y fuerte (tabla 9). Variedades comerciales como ‘Granny Smith’, ‘Idared’ y ‘Mack Intosh’ poseen un fuerte contenido en cera, lo que las hace ser más atractivas hacia el consumidor. En las accesiones locales se han encontrado gran número de variedades que reúnen esta condición, como ‘MA-115’, ‘MA-143’, ‘MA-239’ y ‘MA-247’ entre otras (figura 17). Los datos de pruina de la epidermis sólo son moderados en un 20% de las accesiones, excepto en las variedades locales ‘MA-145’ y ‘MA-239’ y las variedades comerciales ‘Mack Intosh’ y ‘Fuji 4165’, que presentaron una pruina fuerte. Resultados y discusión 49 Tabla 9: Porcentaje (%) de accesiones resultantes del estudio de los descriptores relacionados con el acostillado (U-29), coronado del extremo calicino (U-30), pruina de la epidermis (U-33) y cera de la epidermis (U-34). Descriptores 0 1 2 3 Débil Moderado Fuerte Acostillado UPOV(U - 29) 21,13 45,07 33,80 Débil Moderado Fuerte Coronado UPOV(U - 30) 16,90 49,30 33,80 Ausente Débil Moderado Fuerte Pruin a de la dermis UPOV(U - 33) 5,63 60,56 28,17 5,63 Ausente Débil Moderado Fuerte Cera UPOV(U - 34) 2,82 18,31 42,25 36,62 Figura 17: Accesiones con alto contenido en cera. 4.1.3. Color de fondo. UPOV (U-35) Uno de los parámetros que mayor influencia tiene en la calidad comercial es el color de los frutos. Cada variedad de manzana tiene un color característico influyendo también la zona de cultivo (Silveria et al., 2007). El método para estudiarlo es el visual, que según el descriptor de la UPOV se divide en 6 grupos para los manzanos. El color del fruto se debe principalmente al conjunto de tres pigmentos: los antocianos, los carotenoides y las clorofilas (Saure, 1990). El color de fondo verde a amarillo lo Resultados y discusión 50 determinan la clorofila y los carotenoides localizados en los plástidos y la coloración roja la determinan los antocianos y los pigmentos fenólicos localizados en la vacuola (Dapena, 1996). Se puede observar en la figura 18 que el 47% de las variedades poseen un color de fondo verde amarillento y un 13% son amarillas. Cabe destacar que en un 21% de las variedades no se pudo observar el color de fondo, ya que estaban cubiertas en su totalidad por la chapa ‘MA-239’ o por el russeting ‘MA-109’. Figura 18: Porcentaje (%) de colores de fondo de los frutos de manzano analizados respecto al descriptor UPOV (U-35). A parte del método visual para establecer el color de fondo de la epidermis, también se puede medir por diferencia de la densidad óptica en función del contenido en clorofilas. Este método resulta un buen indicador para algunas variedades como ‘Golden Delicious’ o bicolores como ‘Gala’, pero no se adecua a variedades como ‘Granny Smith’, cuyo color de fondo es casi invariable y tampoco se adapta bien a las variedades de color rojo (Trillot et al., 1993). 4.1.4. Descriptores relacionados con la chapa La chapa en los frutos es una característica típica de cada variedad, que puede ayudar a la diferenciación de variedades. En los frutos con chapa roja, los antocianos son el pigmento fundamental y su formación depende de varios factores como los carbohidratos presentes en el árbol, la nutrición mineral, los reguladores del crecimiento, la radiación solar y la diferencia de temperatura entre el día y la noche (Saure, 1990). Los lugares donde están situadas las parcelas de la colección se encuentran en el CITA (Valle del Ebro) y en Ligüerre (Valle de la Fueva). El primero, presenta veranos muy cálidos y de baja altitud, por lo que no es la más apropiada para la formación de chapa de fruto en Resultados y discusión 51 variedades rojas y bicolores (Iglesias, 1998). Mientras que Ligüerre al ser una zona de mayor altitud y presentar clima de montaña, favorece a que se manifieste la formación de la chapa en las variedades (Iglesias, 2012); ya que los frutos están expuestos a una mayor radiación, a temperaturas extremas y a mayores diferencias entre el día y la noche. En la tabla 10 se muestra el porcentaje de accesiones que presentan chapa y estrías. Tabla 10: Porcentaje (%) de accesiones resultantes del estudio de los descriptores relacionados con la chapa y la anchura de las estrías. Descriptores 0 1 2 3 4 5 7 Ausente Muy pequeña 2 colores Mayor 80% Color de superficie (U-36) 33,80 4,22 19,72 42,25 - - - No hay Rojo Rosa Naranja Púrpura M rojizo Tono de color de superficie (U-37) 35,21 12,68 19,72 11,27 1,41 19,72 - No hay Clara Media Oscura Intensidad de color de superficie (U-38) 38,03 - - 11,27 - 22,54 28,17 Ausencia P. continuas P. estriadas En estrías Difundido Distribución de color superficial (U-39) 36,62 9,86 38,03 4,23 11,27 - - No hay Estrechas Medias Anchas Anchura de las estrías (U-40) 35.21 - - 26.76 - 36,62 1,41 En este estudio se ha asignado valor 0 a aquellas variedades que carecían de la presencia del descriptor. En resumen, respecto al color de la superficie, el 42% de las variedades estudiadas poseían más del 80% de su superficie cubierta, y un 34% no presenta chapa, es decir, ninguna zona coloreada. Los tonos de superficie mayoritarios son dos, el rosa y el m.rojizo, con un 20% cada uno. Mientras que al grupo rojo pertenecen el 13%, y al naranja el 11%. La variedad ‘Mack Intosh’ fue la única púrpura. La intensidad de color de la superficie en el 28% de las accesiones fue oscura, y en el 23% fue de media. La distribución de color superficial es muy variada, aunque la mayor parte de las variedades se reparten en placas estriadas (38%), en forma de difuminado (11%) y en placas continuas (10%). Las accesiones que muestran estrías su anchura es media (37%), excepto ‘MA-105’ que mostró estrías anchas muy marcadas. Se observó en ‘MA-108’, ‘MA-115’ y ‘MA-144’ que la chapa también puede ser un indicador de la madurez del fruto, ya que estas variedades desarrollaron la chapa en el momento adecuado para su recolección. Mientras tanto no habían presentado ningún indicador de la presencia de color superficial. Resultados y discusión 52 4.1.5. Aspectos relacionados con el Russeting. El russeting es un fenómeno natural que afecta a algunas variedades de manzano debido al deterioro de la epidermis por un agente exterior (Iglesias, 1993). Otros estudios afirman que es un carácter hereditario, pero también está afectado por otros factores como son: las heladas primaverales, el sombreamiento, la humedad relativa alta o la aplicación de productos fitosanitarios (Jackson, 2003). El porcentaje de accesiones que manifiesta la presencia de russeting en la base peduncular, en las caras y en la cavidad ocular se exponen en la tabla 11. Tabla 11: Porcentaje (%) de accesiones resultantes del estudio de los descriptores relacionados con el russeting. Descriptores 0 1 2 3 No hay <30% 30 - 70% >70% Russetin g en base peduncular (U - 41) 8,45 26,76 14,08 50,70 No hay <30% 30 - 70% >70% Russeting caras (U - 42) 78,87 9,86 4,23 7,04 No hay < 30% 30 - 70% >70% Russeting cavidad ocular (U - 43) 76,06 12,68 4,23 7,04 El 51% de las accesiones estudiadas presentaba el 70% de su base peduncular cubierta por russeting, lo que puede ser debido a que la mayoría de las accesiones han sido recolectadas en la parcela de Ligüerre, la cual se encuentra en un clima de montaña. La presencia de russeting en las caras (10%) y en la cavidad ocular (13%) fue menor, con la excepción de las variedades comerciales ‘Reineta’, ‘Reineta Gris’ y ‘Elstar’ y las accesiones autóctonas ‘MA-109’ y ‘MA-147’, que presentaron un alto contenido de russeting en las caras. Sólo una variedad ‘MA-109’ presentó 100% russeting en toda su superficie. La presencia de russeting afecta al valor comercial y actualmente se seleccionan aquellas variedades con menor sensibilidad al russeting (Iglesias et al. 2007). 4.1.6. Descriptores relacionados con las lenticelas. Tabla 12: Porcentaje (%) de accesiones que presentan descriptores relacionados con las lenticelas Descriptores 0 1 2 3 5 7 Bajo Medio Alto Número lenticelas (U - 44) - - - 35.21 46.48 18.31 Pequeña Media Grande Tamaño de lenticelas (U - 45) - - - 49.30 28.17 22.54 Blanco Marrón Negro Color del núcleo de la lenticela 9.86 21.13 69.10 - - - Si No Aureola - 80 ,28 19,72 - - - Resultados y discusión 53 Las lenticelas aparecieron en un número medio en el 47% de las accesiones analizadas, siendo su tamaño mayoritario pequeño (49%), de color negro en el 69% de las accesiones y el 80% presentó aureola (tabla 12). La mayoría de las variedades comerciales analizadas presentaron un bajo contenido en el número y tamaño de lenticelas, excepto ‘Granny Smith’ y ‘Melrose’. 4.1.7. Descriptores relacionados con de la parte interna del fruto. Los descriptores relacionados con la parte interna son aquellos que podemos apreciar al seccionar la manzana verticalmente (apertura del ojo, posición del diámetro máximo y longitud del sépalo U-32) y horizontalmente (apertura de lóculos U-54). En algunas variedades, el color de la pulpa está relacionado con el grado de madurez. En este estudio (figura 19) el 44% de los frutos presentó la pulpa de color crema frente al resto de las variedades que poseen una pulpa de color blanco (34%), amarillento (15%) o verdoso (6%). Ninguna variedad presentó color rojizo. En la accesión ‘MA-279’ el color de la pulpa es rosáceo. Figura 19: Porcentaje (%) de accesiones clasificadas en función del color de la pulpa. Tabla 13: Porcentaje (%) de accesiones resultantes del estudio de los descriptores relacionados con la apertura del ojo, apertura de lóculos (U-54), posición del diámetro máximo y longitud del sépalo (U-32). Descriptores 1 2 3 Cerrado Algo abierto Abierto Apertura del ojo 39,44 33,80 26,76 Cerrado P. abierto Abierto Apertura de lóculos (U - 54) 40,85 12,68 46,48 Pedúnculo Medio Cáliz Posición del diámetro máximo 12,68 78,87 8,45 Corto Medio Largo Longitud del sépalo (U - 32) 22.54 39.44 38.03 Resultados y discusión 54 En las variedades de manzano del Banco de Germoplasma del CITA se ha encontrado que en la mayoría de las accesiones la apertura del ojo (tabla 13) es entre cerrada (39.5%) y algo abierta (34%) (figura 20 A), presentando una longitud del sépalo entre media y larga. La apertura de los lóculos es entre abiertos 46% y cerrados 41%. (figura 20 B). La mayoría de las variedades comerciales estudiadas tienen los lóculos abiertos y algo abiertos. Son las accesiones recuperadas las que manifiestan mayor porcentaje en tener sus lóculos cerrados. A) B) Figura 20: A) Clasificación de la apertura del ojo en: cerrado, algo abierto y abierto B) clasificación de la apertura de los lóculos: Cerrados, parcialmente abiertos y abiertos En cuanto a la posición del diámetro máximo, excepto 6 variedades locales con el diámetro máximo orientado hacia el pedúnculo, la mayoría lo tienen en el medio y un 12% orientado hacia el pedúnculo (figura 21). Figura 21: Clasificación de la posición del diámetro máximo: Hacia el cáliz, en el medio y hacia el pedúnculo. Resultados y discusión 55 4.2. CARACTERÍSTICAS POMOLÓGICAS CUANTITATIVAS DEL FRUTO. 4.2.1. Descriptores relacionados con las dimensiones externas del fruto. Tabla 14: Porcentaje (%) de accesiones para los descriptores: Tamaño (U-24), altura (U-25), diámetro (U26) y relación altura / diámetro (U-27). Descriptores 1 2 3 4 5 6 7 Muy pequeño Pequeño Medio Grande Muy grande Extr. grande Muy pequeño Tamaño UPOV(U-24) 12,67 47,88 29,57 8,45 1,4 Corta Media Larga Muy larga Extr. larga Altura UPOV(U - 25) 7,04 42,25 49,29 1,4 Muy pequeño Pequeño Medio Grande Muy grande Extr. grande Diámetro UPOV(U-26) 9,86 49,29 36,62 4,22 Extr. Pequeño Muy pequeño Pequeño Mediano Grande Muy grande Extr. grande Relación altura/diámetro UPOV(U-27) 1,4 67,05 26,76 2,81 Para el tamaño de los frutos (tabla 14) las accesiones se dividieron en 7 grupos diferentes. La mayoría de los frutos (48%) tienden a ser pequeños, con valores entre 83 y 180 gramos. La variedad local ‘MA-232’ fue la única que se clasificó en el grupo de muy grandes, con valores comprendidos entre 374.4 y 471.15 gramos. La variedad local ‘MA-108’ fue la que mayor altura presentó, clasificándose el 49% de las accesiones como largas y con un diámetro medio. Tres variedades locales ‘MA-171’, ‘MA232’ y ‘MA-246’ pertenecen al grupo de diámetro muy grande, el resto están clasificadas entre medio y grande. La relación entre la altura y el diámetro da lugar a 7 grupos diferentes, desde extremadamente pequeño a extremadamente grande. Esta relación se emplea como medida de la forma del fruto. Si se obtienen valores bajos el fruto tiende a ser achatado y si es un valor alto el fruto tiende a ser alargado. Los resultados obtenidos nos indican que hay una gran variabilidad de frutos, aunque se concentran más variedades en los tipos mediano (67%) y grande (26.76%). Las variedades locales ‘MA-140’ y ‘MA-149’ pertenecen al grupo muy grande, con valores comprendidos entre 1.01 y 1.14 mm. Excepcionalmente sólo la variedad local ‘MA239’ fue clasificada en el grupo de las pequeñas. Resultados y discusión 62 Tabla 18: Calendario de madurez de consumo (U-57) y tiempo de conservación de las variedades estudiadas del Banco de Germoplasma del CITA, en el interior de cada rectángulo se indica el tiempo de conservación (1: mala, 2: buena, 3: excelente). Accesión 1ª quincena 2ª quincena 1ª quincena 2ª quincena 1ª quincena 2ª quincena 1ª quincena 2ª quincena 1ª quincena 2ª quincena MA 281 3 MA 245 1 AKANE 3 MA 280 1 MA 110 3 MA 199 2 MA 166 2 MA 247 GALA 2 Mc INTOSH 2 MA 198 1 MELROSE 2 MA 107 3 ELSTAR MA 256 1 MA 246 MA 267 MA 279 COX´S 2 MA 253 2 MA 249 2 Reinta Gris MA 232 MA 130 MA 156 IDARED 2 MA 147 2 MA 231 2 MA 233 1 MA 257 MA 105 2 MA 242 1 REINETA 2 Verde Doncella MA 100 1 Golden Delicius MA 163 3 MA 239 MA 255 MA 248 MA 295 2 MA 143 3 MA 146 3 MA 148 MA 238 2 MA 251 MA 144 3 MA 221 MA 182 MA 193 3 MA 195 3 MA 224 1 MA 192 1 MA 145 FUJI 4113 3 FUJI 4165 3 MA 058 1 Pink Lady MA 200 3 MA 171 1 MA 115 3 MA 149 MA 108 2 MA 141 MA 144 3 Gran Smith MA 140 MA 215 MA 225 2 MA 109 MA 142 Agosto Septiembre Octubre Noviembre Diciembre Resultados y discusión 63 4.3. PARÁMETROS DE CALIDAD DEL FRUTO. 4.3.1. Estudio de los sólidos solubles, acidez y pH de las variedades de manzano estudiadas El método para hallar los °Brix, pH y la acidez total se ha realizado mediante la mezcla del zumo de 10 manzanas de muestra. Esta técnica no permite estudiar la variabilidad de la acidez ni la de los sólidos solubles de forma separada en la pulpa y en la piel de cada fruto. Diversos estudios han comprobado que los sólidos solubles son más representativos en la pulpa que en la piel (Ramos et al., 2007). Algunos compuestos manifiestan diferencias entre la pulpa y la piel ya que la actividad antioxidante es mucho más alta en la piel de la manzana, seguida por la fruta entera y por último la pulpa (Kunradi et al., 2009). En la tabla 19, se presentan los valores medios, máximo y mínimo del contenido en ácido málico, sólidos solubles y pH de las variedades analizadas en el banco de germoplasma del CITA. En el caso de los sólidos solubles, se obtuvo un valor medio de 14.68 °Brix Los cultivares comerciales más importantes, producen manzanas con un índice de °Brix superior a 11 (Iglesias et al, 2000). Las variedades locales y comerciales de la colección mostraron valores superiores, siendo el valor máximo 19.7 °Brix ‘MA-198’ y el valor mínimo 11.3 °Brix ‘MA-215’. Los resultados obtenidos para la acidez (figura 26) se clasificaron en 3 grupos acorde con su contenido en ácido málico. Se clasificó como “semiácida” el 41% de las accesiones estudiadas, cuyo contenido en ácido málico era menor a 5.35 g/l. En este grupo destacaron la variedad local ‘MA-163’ 2.03 g/L y la variedad comercial ‘Verde Doncella’ con 2.68g/L. El 26% de las variedades presentan una acidez “ácida” y un 33% son de acidez “amarga”. A este último grupo pertenecen las accesiones con un contenido en ácido málico mayor a 8.707 g/L. La variedad local ‘MA-130’ presenta el máximo contenido en ácido málico 15.33 g/L En las variedades comerciales el máximo es 13.07 g/L ‘Reineta’. En el grupo de acidez “amarga”, se incluyen la mayoría de las variedades comerciales ya que presentan una media de 8.60g/L. Los valores obtenidos nos dan una idea del valor del germoplasma para clasificar las variedades para sidra, zumo o manzana de mesa. 41% 26% 33% Acidez (ácido málico) 1 Semiácida 2 Ácida 3 Amarga Figura 26 : Porcentaje (%) de accesiones clasificadas en función del contenido en ácido málico (g/l). Resultados y discusión 64 Estudios llevados a cabo por Dapena (1996), indican que la sidra asturiana de tipo natural podría estar constituida por un 40% de manzana ácida, 25% semiácida, 10% dulce y 25% de los grupos dulce–amargo, semiácido-amargos y ácido-amargos. Por el contrario, para la elaboración de zumo se requieren variedades de los grupos semiácido, ácido y dulce. Otro de los requisitos es que el mosto obtenido tenga una relación azúcar/acidez acorde a las exigencias del consumidor; por lo tanto las variedades que mejor se adaptan a dichas exigencias son las del grupo semiácido, si bien se podría utilizar un cierto porcentaje de manzana ácida y dulce. En lo que se refiere al pH, existe una elevada variabilidad entre los cultivares estudiados, con un rango comprendido entre los máximos, 4.89 para la variedad local ‘MA141’ y de 4.61 para la comercial ‘Verde Doncella’ y los mínimos, 2.38 ‘MA-238’ y ‘Idared’. El valor medio del conjunto de las variedades es de 3.63 para las accesiones locales y 3.43 para las comerciales. Tabla 19: Valores medios extremos de parámetros de calidad observados en las accesiones de montaña y variedades comerciales evaluadas. Intervalo accesiones CITA Intervalo variedades comerciales Carácter Máximo Mínimo Media Máximo Mínimo Media Solidos solubles 19.7 ° Brix MA-198 11.3 °Brix MA-215 14.68 °Brix 18.3 °Brix Fuji 4113 12 .7 °Brix Idared 15.04 °Brix Ácido málico 15.33 g/L MA-130 2.03 g/Ll MA-163 6.35 g/L 13.07 g/L Reineta 2.68 g/L Verde Doncella 8.60 g/L pH 4.89 MA-141 2.54 MA-238 3.63 4.61 Verde Doncella 3.12 Idared 3.43 4.3.2. Estudio del contenido en azúcares, proteínas y oligoelementos (Calcio, Magnesio, Fósforo, Potasio y Sodio) de las variedades analizadas. Los compuestos analizados están directamente relacionados con las características del alimento como son la madurez, la palatabilidad y el valor nutricional e incluyen un numeroso grupo de compuestos que han sido sujeto de una extensa investigación como agentes preventivos de enfermedades. En la tabla 20 se presentan los valores máximo y mínimo de fructosa (g/l), sacarosa (g/l), glucosa (g/l) y xilosa (g/l). Así como el coeficiente de variación intervarietal de manera porcentual (CV), que nos indica la variabilidad entre las accesiones de montaña y las variedades comerciales. Los valores máximos y mínimos observados para cada uno de los caracteres de la tabla 20, nos indican que la colección de accesiones de montaña en conjunto muestra un intervalo de variabilidad muy amplio y casi del mismo orden que el que se observa en la colección de Resultados y discusión 65 comerciales. Destacando que la manzana es rica en azúcares, fructosa y sacarosa y en menor proporción en glucosa y xilosa. Tabla 20: Valores extremos de parámetros de calidad y coeficiente de variación intervarietal (%) observados en las accesiones de montaña y variedades comerciales evaluadas. Intervalo accesiones de montaña Intervalo variedades comerciales Carácter Máximo Mínimo Coeficiente variación intervarietal (%) Máximo Mínimo Coeficiente variación intervarietal (%) Fructosa (g/100ml) 11.53 MA-107 4.50 MA-156 6.16% 11.19 Melrose 4.43 Granny Smith 5.16% Sacarosa (g/100ml) 8.43 MA-109 1.06 MA-280 2.88% 7.24 Gala 0.68 Akane 2.75% Glucosa (g/100ml) 4.26 MA-221 0.99 MA-199 4.60% 5.10 Fuji 4113 0.76 Mack Intosh 5.52% Xilosa (g/100ml) 1.17 MA-231 <0.01 VARIAS 24.40% 0.15 Akane <0.01 Mack Intosh Granny Smith 37.78% Proteí nas (g/100g) 0.60 MA-279 0.12 MA-224 34.08% 0.43 Gala 0.21 Idared 34.48% Calcio (mg/100g) 9.64 MA-156 0.98 MA-105 6.17% 12.65 Granny Smith 1.89 Melrose 4.94% Magnesio (mg/100g) 11.02 MA-156 3.01 MA-249 2.90% 10.88 Granny Smith 3.71 Elstar 2.36% Fósforo (mg/100g) 22.34 MA-109 6.29 MA-281 3.30% 18.49 Mack Intosh 7.21 Fujin4165 2.14% Potasio (mg/100g) 177.40 MA-200 25.15 MA-249 21.47% 43.20 Cox´s 3.96 Reineta Gris 10.80% Sodio (mg/100g) 51.45 MA-279 3.63 MA-149 7.73% 43.20 Cox´s 7.69 Fuji 4113 5.03% El contenido de azúcares es un atributo importante que determina tanto el sabor dulce de las variedades de mesa como la aptitud industrial para los procesos fermentativos (Silveria et al., 2007). Se obtuvieron unas variaciones relativamente importantes entre los cultivares analizados (tabla 20). En lo que se refiere a el contenido en sacarosa varía entre 8.43 (g/100ml) ‘MA-109’ y 1.06 (g/100ml) ‘MA-280’ para las accesiones locales y 7.24 (g/100ml) ‘Gala’ y 0.68 (g/100ml) ‘Akane’ para las accesiones comerciales. El coeficiente de variación intervarietal (%) para los dos grupos de accesiones fue muy similar para ambas. Resultados y discusión 66 En comparación con los estudios tecnológicos llevados a cabo en las variedades de manzano de sidra francesa, se puede decir que en Francia están interesados en la obtención de sidras parcialmente fermentadas, por lo tanto seleccionan variedades con un alto contenido en azúcares, de tal modo que la sidra obtenida a partir de un mosto con un bajo contenido de nitrógeno pueda quedar suficientemente estabilizada en presencia de azúcares residuales potencialmente fermentables (Drilleau, 1989). En lo que respecta al contenido en glucosa el valor más bajo lo contienen las variedades ‘MA-199’ y ‘Mack Intosh’ y el valor más alto las variedades ‘MA-221’ y ‘Fuji 4113’ con 4.26 (g/100ml) y 5.10 (g/100ml). El coeficiente de variación intervarietal es mayor en las accesiones locales 4.60% que en las variedades comerciales 5.52%. El contenido en nitrógeno relacionado con la cantidad de proteína aumenta en la fase final de la maduración del fruto. Por un lado, los polifenoles contribuyen significativamente al sabor, aroma de la manzana y por otro lado, los compuestos nitrogenados en relación con el contenido de proteínas intervienen activamente en la formación del aroma de los productos fermentados, así como en la velocidad del proceso fermentativo (Dapena, 1996). Los resultados analíticos obtenidos para el contenido de proteínas muestran valores altos. Los máximos son 0.60 (g/100g) para ‘MA-279’ y 0.43 (g/100g) para la variedad comercial ‘Gala’ y los mínimos son de 0.12 (g/100g) ‘MA-224’ y 0.21 (g/100g) ‘Idared’. Hay que tener en cuenta que la fertilización nitrogenada ha sido muy escasa en las parcelas. El coeficiente de variación intervarietal (%) fue muy similar para ambas. El calcio tiene también una repercusión tecnológica importante, dado que participa en los procesos de clarificación prefermentativa del mosto de manzano destinado a la elaboración de la sidra. Los resultados del contenido de calcio en las variedades analizadas muestran que las variedades comerciales tienen mayor contenido en calcio que las locales, por eso el coeficiente de variación intervarietal es diferente, 6.17% para las accesiones locales y 4.94% para las variedades comerciales. El máximo contenido en calcio dentro de la colección es de 12.65 (mg/100g) en ‘Granny Smith’ y el mínimo es de 0.98 (g/100mg) en ‘MA-105’. La manzana es rica también en otros elementos minerales como el Magnesio, Fósforo, Sodio, Potasio, Hierro y Boro (Marcelle, 1995). El potasio tiene que ver con la transmisión de los nervios y la contracción de todos los músculos, incluido el corazón. Es uno de los minerales esenciales para el mantenimiento normal de la tensión arterial y la función del corazón. Los resultados del análisis muestran que las accesiones locales poseen mayor contenido en potasio que las variedades comerciales. Los resultados de esta heterogeneidad se observan en el coeficiente de variación intervarietal, que es de 21.47% para las accesiones locales y de un 10.80% para las variedades comerciales. La accesión local ‘MA-200’ es la que mayor contenido en potasio presenta 177.40 (mg/100 g). El magnesio es un elemento importante en nuestro organismo. Cuando los niveles de magnesio son altos, las venas y arterias se relajan, reduciendo la resistencia y permitiendo un flujo mayor de oxígeno y sangre rica en nutrientes. Los resultados de los análisis de Magnesio dieron coeficientes de variación intervarietal muy similares, siendo el de las accesiones locales un poco superior 2.90% frente a 2.36% de las comerciales. Resultados y discusión 67 Además de combatir la hipertensión consumiendo alimentos ricos en calcio y magnesio, es recomendable el consumo de alimentos ricos en fósforo. El contenido en fósforo varía entre 22.34 (mg/100g) ‘MA-109’ y 6.29 (mg/100g) ‘MA-281’, perteneciendo los valores máximo y mínimo a las accesiones locales. Los coeficientes de variación intervarietal son heterogéneos siendo 3.30% para las accesiones locales y 2.14% para las variedades comerciales. El sodio juega un papel importante en el control del agua dentro de las células y en la función de los impulsos nerviosos y de los músculos. Los análisis mostraron que las variedades locales presentan mayor cantidad en sodio con valores máximos de 51.45 (mg/100g) ‘MA-279’ frente a 43.20 (mg/100g) de ‘Cox´s’. El coeficiente de variación intervarietal fue heterogéneo 7.73% para las accesiones locales y 5.03% para las variedades comerciales. 4.3.3. Número de clases (NC) de cada carácter para las accesiones locales y las variedades comerciales de referencia. Para establecer los niveles de una serie de caracteres, el IPGRI y la UPOV utilizan variedades concretas de referencia que no se suelen disponer en todos los bancos de germoplasma. Este es el caso en el que se haya el banco de germoplasma del CITA, y para solventar el problema, se ha procedido como Santesteban et al., (2009). Se determinaron los niveles de cada carácter de tipo cuantitativos en función de la variabilidad intraclonal y el rango de valores observados entre el conjunto de las accesiones. De tal manera que cuanto mayor sea la variabilidad, y menor la desviación típica de cada accesión para un mismo carácter, mayor será el número de clases a definir en los dos grupos de accesiones (las accesiones locales y las de referencia). Según los datos obtenidos para cada descriptor, es mayor el número de clases en el conjunto de las accesiones locales que en el conjunto de variedades de referencia. Como puede observarse (tabla 21), las accesiones prospectadas en zonas de montaña presentan igual o mayor número de clases que las previstas en la UPOV, excepto para los descriptores del tamaño UPOV peso del fruto (U-24), profundidad del ojo (U-48) y la profundidad del ojo UPOV (U-50). Los descriptores relacionados con la altura y el diámetro del fruto muestran mayor número de clases que los descriptores UPOV, obteniendo mayor número de formas, ya que si se obtienen valores bajos el fruto tiende a ser achatado y si es un valor alto el fruto tiende a ser alargado. Es importante conocer la longitud y el grosor del pedúnculo y la profundidad de la cavidad peduncular. Los pedúnculos pequeños y gruesos tienen menor flexibilidad y es más fácil que se caigan al suelo por el peso del fruto. Lo que provoca graves pérdidas económicas y la caída prematura de los frutos, sobre todo en zonas con fuertes vientos. Los resultados del número de clases para estos descriptores fueron iguales entre las variedades locales y las de la UPOV (tabla 21). Resultados y discusión 68 Para evitar la pérdida de calidad de la manzana es necesario que los frutos presenten una adecuada resistencia, con el fin de que se produzcan los mínimos daños posibles en los procesos de manipulación y conservación. El número de clases establecido para la firmeza de las accesiones locales fue mayor que el que se presenta en los descriptores de la UPOV, lo que nos indica la variabilidad de la colección. En la tabla 21, se muestra el número de clases de las accesiones locales, las variedades comerciales y los descriptores UPOV. Además dentro de cada descriptor se muestra el valor máximo y mínimo, el RB, la media RA, la media SDA y el número de clases que se ha obtenido. Resultados y discusión 69 Tabla 21: Cálculo del número de clases (CN), para algunos descriptores cuantitativos de las accesiones (locales, y comerciales) y los descriptores UPOV estudiados. Descriptor Intervalo accesiones locales CITA Intervalo variedades comerciales UPOV Máximo Mínimo R B Media R A Media SD A CN Máximo Mínimo R B Media R A Media SD A CN CN Tamaño UPOV(U-24) 421.3 40.55 380.75 50.20 18.75 5 268.92 86.3 182.62 46.05 18.42 3 6 Altura UPOV(U-25) 8.602 4.041 8.602 1.01 0.37 6 7.55 5.16 2.397 0.73 0.28 2 5 Diámetro UPOV(U-26) 10.892 5.15 10.892 1.08 0.41 7 9.30 6.21 3.09 0.79 0.31 3 6 Relación altura/diámetro UPOV(U-27) 1.16 0.7 1.16 0.15 0.03 8 0.097 0.074 0.023 0.006 0.002 2 7 Tamaño ojo UPOV(U-31) 1.502 0.398 1.50 0.21 0.08 5 0.99 0.20 0.79 0.19 0.07 3 3 Longitud pedúnculo UPOV(U-46) 3.38 0.349 3.38 0.61 0.20 4 3.38 1.006 2.38 0.57 0.22 3 4 Grosor pedúnculo UPOV(U-47) 0.62 0.159 0.62 0.11 0.04 4 0.53 0.17 0.36 0.08 0.03 3 4 Prof. cav. peduncular UPOV(U-48) 2.59 1.03 2.58 0.45 0.15 4 2.32 1.08 1.24 0.39 0.15 2 5 Anchura cav. peduncular UPOV(U-49) 5.10 1.93 5.01 0.65 0.21 6 4.64 2.64 2.00 0.48 0.19 3 5 Profundidad ojo UPOV(U-50) 1.40 0.3196 1.4 0.27 0.09 4 1.14 0.48 0.65 0.18 0.07 2 5 Anchura cav ojo UPOV(U-51) 4.3 1.53 4.3 0.50 0.17 6 3.67 2.05 1.62 0.40 0.15 3 6 Firmeza UPOV(U-52) 10.3 4.2 6.1 1.1 0.36 4 10.3 5.7 4.6 1.27 0.51 2 3 Resultados y discusión 71 4.4. ACCESIONES DESTACABLES En el conjunto de accesiones algunas destacan del resto en uno o más parámetros de los estudiados en este apartado por el hecho de que muestran valores extremos y es posible que, por ello, sean los más diferentes desde el punto de vista genético. Visualmente algunas accesiones destacaron por: • Sus estrías: ‘MA-105’, ‘MA-192’, ‘MA-233’ y ‘MA-239’. • Cambios muy vistosos de coloración en la chapa: ‘MA-107’, ‘MA-108’, ‘MA-115’, ‘MA143’, ‘MA-221’ y ‘MA-245’. • Alto contenido en cera ‘MA-267’. • Forma llamativa: ‘MA-251’ tiene forma de tomate. • Apariencia diferente por ser muy densas en la boca pero con muy buenas cualidades organolépticas: ‘MA-200’ y ‘MA-242’. • Gran calibre: ‘MA-145’, ‘MA-146’, ‘MA-147’ y ‘MA-171’. En la Tabla 22, se indican dichas accesiones destacando: ‘MA-140’, ‘MA-141’, ‘MA-115’ y ‘MA-058’, que muestran valores muy extremos en los diferentes caracteres estudiados por lo que es previsible que sean las más diferentes desde el punto de vista genético. Tabla 22: Accesiones que destacan por valores extremos en uno o varios caracteres cuantitativos de fruto. Carácter Accesión máximo valor Accesión mínimo valor Tamaño UPOV(U-24) MA-115 MA-058 Relación altura/diámetro UPOV(U-27) MA-140 MA-141 Longitud pedúnculo UPOV(U-46) MA-110 MA-140 Grosor pedúnculo UPOV(U-47) MA-143 MA-141 Prof. cav peduncular UPOV(U-48) MA-115 MA-058 Firmeza UPOV(U-52) MA-109 MA-140 °Brix MA-198 MA-267 Acidez total MA-130 MA-163 Recolección MA-281 Recolección temprana a primeros de Agosto MA-142 Recolección tardía a primeros de Diciembre. Conservación MA-107 Se conservó en cámara 205 días Variedades tempranas. De todos los resultados anteriores se deduce que al menos algunas de las accesiones prospectadas en zonas de montaña van a contribuir a ampliar la variabilidad conservada en Banco del CITA. Conclusiones 78 8. Las variedades locales que más destacan son: ‘MA-140’, ‘MA-141’, ‘MA-115’ y’ MA058’, que muestran valores muy extremos en los diferentes caracteres estudiados por lo que es previsible que sean las más diferentes desde el punto de vista genético. 9. Este trabajo pone de manifiesto diferencias fenotípicas entre accesiones que presentan los mismos perfiles alélicos. Estas diferencias evidencian el interés de la caracterización fenotípica como fuente de información adicional a la caracterización molecular. 79 6. BIBLIOGRAFÍA Bibliografía 81 6. BIBLIOGRAFÍA ALSTON, F.H. 1989. Breeding pome fruits with stable resistance to diseases: 2. Selection techniques and breeding strategy. In: C. Gesler, & D.J. Butt (Eds.). Proceedings Working group “Integrated plant protection in orchards”. 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ANEXOS Anexo II Datos cualitativos de variedades locales 95 Código Forma general Acostillado Coronado Pruina de la dermis Cera Color de fondo Accesión UPOV (U-28) UPOV (U29) UPOV (U-30) UPOV (U-33) UPOV (U-34) UPOV (U-35) moda moda moda moda moda moda MA 058 2 2 2 1 2 3 MA 100 4 2 3 1 1 5 MA 105 3 2 2 1 2 5 MA 107 4 2 2 1 2 5 MA 108 2 3 3 2 3 3 MA 109 3 1 1 1 0 1 MA 110 4 2 3 1 3 5 MA 115 3 1 1 2 3 1 MA 130 5 3 3 0 0 1 MA 140 1 3 3 1 3 1 MA 141 4 3 3 1 3 3 MA 142 4 2 2 2 1 5 MA 143 4 3 3 2 3 5 MA 144 4 3 2 2 3 5 MA 144 3 2 2 2 3 3 MA 145 4 2 2 3 3 5 MA 146 3 3 3 2 3 5 MA 147 5 2 2 1 2 6 MA 148 3 3 3 2 3 5 MA 149 1 3 3 1 2 3 MA 156 5 2 2 0 1 5 MA 163 4 2 2 2 3 5 MA 166 3 1 2 2 2 5 MA 171 5 2 2 1 1 5 MA 182 4 1 1 1 3 1 MA 192 3 1 1 1 2 1 MA 193 4 2 2 2 3 4 MA 195 4 3 2 2 3 6 MA 198 3 1 2 1 2 5 MA 199 3 2 3 0 2 5 MA 200 3 1 1 2 2 2 MA 215 3 2 2 1 2 5 MA 221 4 2 2 1 2 5 MA 224 4 3 3 0 1 5 MA 225 3 2 2 2 3 5 MA 231 4 3 3 1 1 4 MA 232 4 3 3 1 1 5 MA 233 1 3 3 1 3 3 MA 238 5 3 2 1 1 5 MA 239 5 2 2 3 3 1 MA 242 3 2 2 1 2 2 MA 245 3 3 2 1 2 5 MA 246 4 3 3 1 3 6 MA 247 3 2 2 2 3 2 MA 248 3 1 1 1 1 2 MA 249 4 1 2 1 2 2 MA 251 4 3 3 1 3 5 MA 253 4 2 2 1 2 5 MA 255 3 3 3 1 1 1 MA 256 3 3 3 1 1 6 MA 257 3 3 3 2 2 5 MA 267 5 2 3 1 3 6 MA 279 4 1 2 2 2 5 MA 280 3 2 2 2 2 5 MA 281 3 2 2 2 2 5 MA 295 4 2 2 1 2 5 Anexo II Datos cualitativos de variedades locales 96 Código Zona color de superficie Tono color de supercie Inten. color superficie Distribución color superf. Anchura de las estrías Russeting base peduncular Accesión UPOV (U-36) UPOV(U37) UPOV (U-38) UPOV (U-39) UPOV (U-40) UPOV (U-41) moda moda moda moda moda moda MA 058 2 3 3 1 3 3 MA 100 1 3 3 4 0 3 MA 105 2 5 5 2 7 0 MA 107 3 1 5 2 5 1 MA 108 3 1 0 2 5 1 MA 109 3 0 0 0 0 3 MA 110 2 2 7 4 5 2 MA 115 3 3 5 2 5 1 MA 130 1 0 0 0 0 3 MA 140 0 0 0 0 0 2 MA 141 0 0 0 0 0 1 MA 142 0 0 0 0 0 1 MA 143 3 5 5 1 3 3 MA 144 3 5 5 2 3 3 MA 144 3 1 5 2 3 3 MA 145 0 0 0 0 0 3 MA 146 0 0 0 0 0 0 MA 147 0 0 0 0 5 3 MA 148 0 0 0 0 0 2 MA 149 3 5 7 2 3 1 MA 156 0 0 0 0 3 3 MA 163 2 2 7 4 5 3 MA 166 1 3 3 4 3 3 MA 171 0 0 0 0 0 3 MA 182 0 0 0 0 0 2 MA 192 3 2 5 2 5 3 MA 193 2 2 3 4 3 3 MA 195 2 5 3 4 3 2 MA 198 2 5 3 4 3 1 MA 199 3 5 5 2 3 1 MA 200 3 1 3 2 5 1 MA 215 0 0 0 0 0 1 MA 221 3 5 5 2 5 3 MA 224 0 0 0 0 0 1 MA 225 3 2 7 2 3 1 MA 231 0 0 0 0 0 3 MA 232 0 0 0 0 0 3 MA 233 3 2 7 2 5 2 MA 238 0 0 0 0 0 3 MA 239 3 1 7 2 5 3 MA 242 3 1 7 2 5 0 MA 245 2 5 7 2 3 1 MA 246 3 2 7 3 5 3 MA 247 3 2 7 2 3 1 MA 248 0 0 0 0 0 3 MA 249 2 2 5 2 5 3 MA 251 3 1 7 1 5 0 MA 253 3 5 5 2 5 2 MA 255 0 0 0 0 0 3 MA 256 0 0 0 0 3 3 MA 257 0 2 0 0 0 1 MA 267 2 5 7 2 5 3 MA 279 3 3 5 2 5 3 MA 280 2 3 3 4 5 1 MA 281 2 3 7 2 3 3 MA 295 0 0 0 0 0 3 Anexo II Datos cualitativos de variedades locales 97 Código Russeting caras Russeting cavidad ocular Número lenticelas Tamaño de lenticelas Color del núcleo de la lenticela Aureola Accesión UPOV (U-42) UPOV (U43) UPOV (U-44) UPOV (U-45) moda moda moda moda moda moda MA 058 3 0 3 3 1 1 MA 100 1 1 5 7 2 2 MA 105 0 0 3 5 2 1 MA 107 0 1 3 3 1 1 MA 108 0 0 5 3 2 1 MA 109 3 3 5 3 1 1 MA 110 0 0 5 3 0 1 MA 115 0 0 5 3 2 1 MA 130 0 0 3 3 0 1 MA 140 0 0 3 3 2 1 MA 141 0 0 3 5 2 2 MA 142 2 0 5 3 1 1 MA 143 0 0 5 5 2 1 MA 144 0 0 3 3 2 1 MA 144 0 0 3 3 2 1 MA 145 0 0 7 3 2 1 MA 146 0 0 5 3 2 1 MA 147 2 3 5 5 0 1 MA 148 0 0 5 3 2 1 MA 149 0 0 3 3 2 1 MA 156 0 1 3 3 0 1 MA 163 0 0 3 7 1 2 MA 166 1 0 5 7 0 1 MA 171 1 2 7 7 2 2 MA 182 0 0 5 3 1 1 MA 192 0 0 5 7 2 1 MA 193 0 0 5 3 1 1 MA 195 0 0 7 3 1 1 MA 198 0 0 5 5 0 1 MA 199 0 0 3 3 0 1 MA 200 0 0 7 7 2 1 MA 215 0 2 7 5 2 1 MA 221 0 0 3 7 2 1 MA 224 0 1 7 7 2 2 MA 225 0 0 5 3 2 1 MA 231 1 2 7 7 2 2 MA 232 2 1 7 7 2 2 MA 233 0 0 7 3 2 1 MA 238 0 1 5 7 2 2 MA 239 0 0 5 3 2 1 MA 242 0 0 7 5 2 1 MA 245 1 0 3 3 2 1 MA 246 0 0 3 3 2 1 MA 247 0 0 3 3 1 1 MA 248 3 0 3 7 2 2 MA 249 0 1 5 5 2 1 MA 251 0 0 5 5 1 1 MA 253 0 0 7 3 2 1 MA 255 0 0 3 5 2 2 MA 256 1 0 5 3 1 1 MA 257 0 0 5 3 2 1 MA 267 0 0 7 5 1 1 MA 279 0 0 5 5 2 1 MA 280 0 0 5 5 2 1 MA 281 1 0 3 5 2 1 MA 295 0 1 5 5 2 1 Anexo II Datos cualitativos de variedades locales 98 Código Color de la pulpa Apertura del ojo Longitud del sépalo Apertura lóculos Posición diámetro máximo Accesión UPOV (U53) UPOV (U-32) UPOV (U-54) moda moda moda moda moda MA 058 2 2 7 3 2 MA 100 1 2 7 3 2 MA 105 1 1 5 1 2 MA 107 1 2 5 2 2 MA 108 1 3 3 1 2 MA 109 3 3 5 3 1 MA 110 2 2 7 2 1 MA 115 1 3 3 3 1 MA 130 2 2 3 3 2 MA 140 3 1 7 1 2 MA 141 3 3 3 1 2 MA 142 2 1 3 2 2 MA 143 2 3 7 1 2 MA 144 1 2 7 1 3 MA 144 1 3 5 1 2 MA 145 1 2 3 1 2 MA 146 1 1 3 3 2 MA 147 2 2 7 2 1 MA 148 2 1 5 1 3 MA 149 1 3 7 1 2 MA 156 2 2 3 2 1 MA 163 1 1 3 3 2 MA 166 2 2 7 1 2 MA 171 2 3 5 3 3 MA 182 3 2 5 1 2 MA 192 2 1 3 3 2 MA 193 2 1 5 1 2 MA 195 1 1 3 3 3 MA 198 2 2 7 1 2 MA 199 4 2 7 3 1 MA 200 1 3 3 3 2 MA 215 2 1 5 3 2 MA 221 2 1 5 3 2 MA 224 1 2 7 3 3 MA 225 1 3 3 3 2 MA 231 2 1 5 3 2 MA 232 2 3 7 3 2 MA 233 1 1 7 3 2 MA 238 2 3 5 1 2 MA 239 1 3 5 1 2 MA 242 3 2 5 3 2 MA 245 2 2 7 3 2 MA 246 1 3 7 3 2 MA 247 2 3 5 3 3 MA 248 2 1 5 1 2 MA 249 3 2 5 1 2 MA 251 4 1 7 1 2 MA 253 4 3 7 1 2 MA 255 3 1 7 1 2 MA 256 1 2 7 3 2 MA 257 1 1 5 2 1 MA 267 2 3 7 3 2 MA 279 5 1 5 3 2 MA 280 2 1 7 3 2 MA 281 2 1 5 1 2 MA 295 2 1 7 3 2 99 7.3. ANEXO III DATOS CUALITATIVOS DE VARIEDADES DE REFERENCIA Anexo III Datos cualitativos de variedades de referencia 101 Código Forma general Acostillado Coronado Pruina de la dermis Cera Color de fondo Accesión UPOV (U-28) UPOV (U29) UPOV (U-30) UPOV (U-33) UPOV (U-34) UPOV (U-35) moda moda moda moda moda moda Akane 4 1 2 1 2 5 Cox´s 3 1 1 1 2 3 Elstar 5 2 2 1 2 3 Fuji 4113 4 2 2 1 2 1 Fuji 4165 3 2 1 3 3 1 Gala 3 2 1 1 2 3 Golden Delicius 2 3 3 1 2 1 Granny Smith 3 3 3 1 3 6 Idared 5 1 1 1 3 1 Mack Intosh 4 1 3 3 3 1 Melrose 4 3 2 1 2 5 Pink Lady 3 2 1 1 2 1 Reineta 4 1 2 1 1 5 Reinta Gris 4 2 1 1 1 1 Verde Doncella 3 2 2 2 2 4 Código Zona color de superficie Tono color de supercie Inten. color superficie Distribución color superf. Anchura de las estrías Russeting base peduncular Accesión UPOV (U-36) UPOV(U37) UPOV (U-38) UPOV (U-39) UPOV (U-40) UPOV (U-41) moda moda moda moda moda moda Akane 2 3 5 2 5 2 Cox´s 3 5 7 3 5 3 Elstar 3 2 5 2 5 2 Fuji 4113 3 5 5 2 5 0 Fuji 4165 3 1 7 1 0 0 Gala 3 1 7 3 7 3 Golden Delicius 0 0 0 0 0 1 Granny Smith 0 0 0 0 0 3 Idared 3 2 7 2 5 3 Mack Intosh 3 4 7 1 3 3 Melrose 3 5 7 2 5 2 Pink Lady 3 2 7 1 3 1 Reineta 0 0 0 0 3 3 Reinta Gris 0 0 0 0 0 3 Verde Doncella 2 2 5 1 3 1 Anexo III Datos cualitativos de variedades de referencia 102 Código Russeting caras Russeting cavidad ocular Número lenticelas Tamaño de lenticelas Color del núcleo de la lenticela Aureola Accesión UPOV (U-42) UPOV (U43) UPOV (U-44) UPOV (U-45) moda moda moda moda moda moda Akane 0 0 5 5 2 2 Cox´s 0 0 3 3 2 1 Elstar 0 3 5 5 2 2 Fuji 4113 0 0 5 3 2 1 Fuji 4165 0 0 3 3 2 1 Gala 0 1 5 5 2 1 Golden Delicius 0 0 5 7 1 2 Granny Smith 0 0 7 5 2 1 Idared 0 0 3 3 1 1 Mack Intosh 0 0 5 5 1 1 Melrose 0 0 5 7 2 1 Pink lady 0 0 5 3 2 1 Reineta 3 3 3 7 2 2 Reinta Gris 3 3 3 3 2 1 Verde Doncella 0 0 3 7 2 1 Código Color de la pulpa Apertura del ojo Longitud del sépalo Apertura loculos Posición diámetro máximo Accesión UPOV (U-53) UPOV (U-32) UPOV (U-54) moda moda moda moda moda Akane 1 1 5 1 2 Cox´s 2 1 7 1 2 Elstar 2 3 7 2 2 Fuji 4113 3 2 5 3 2 Fuji 4165 3 3 3 1 2 Gala 2 2 5 3 1 Golden Delicius 3 2 7 1 2 Granny Smith 1 1 5 2 2 Idared 2 2 5 1 2 Mack Intosh 3 1 3 2 2 Melrose 2 1 7 1 1 Pink Lady 1 1 5 1 2 Reineta 4 1 5 3 2 Reinta Gris 2 2 5 3 2 Verde Doncella 1 2 3 3 2 103 7.4 ANEXO IV DATOS CUANTITATIVOS DE VARIEDADES LOCALES Anexo V Datos cuantitativos de variedades de referencia 111 Código Tamaño Altura Diámetro Relación altura/diámetro Tamaño del ojo Longitud pedúnculo Accesión UPOV(U-24) UPOV(U-25) UPOV(U-26) UPOV(U-27) UPOV (U-31) UPOV(U-46) Moda Moda Moda Moda moda Moda Akane 2 2 3 4 1 2 Cox´s 3 3 4 4 1 2 Elstar 2 2 3 4 1 2 Fuji 4113 2 3 3 4 2 3 Fuji 4165 2 2 3 4 2 3 Gala 2 2 3 4 1 2 Golden Delicius 2 2 3 5 2 3 Granny Smith 2 3 3 5 1 3 Idared 2 3 3 4 1 2 Mack Intosh 2 2 3 4 1 2 Melrose 3 2 4 4 2 2 Pink lady 3 3 3 5 2 3 Reineta 2 2 4 4 1 2 Reinta Gris 3 3 4 4 2 2 Verde Doncella 2 2 3 4 2 2 Código Grosor pedúnculo Prof Cav. Peduncular Anchura Cavidad Peduncular Prof Ojo Anchura Cavidad ojo Firmeza en la pulpa Accesión UPOV(U-47) UPOV(U-48) UPOV(U-49) UPOV(U-50) UPOV(U-51) UPOV(U-52) Moda Moda Moda Moda Moda Moda Akane 3 2 3 2 3 5 Cox´s 2 3 4 2 4 5 Elstar 2 2 4 2 4 3 Fuji 4113 2 2 3 2 3 5 Fuji 4165 2 2 3 2 3 5 Gala 2 2 4 2 4 5 Golden Delicius 2 2 3 2 3 3 Granny Smith 2 2 3 2 3 3 Idared 2 3 4 2 4 3 Mack Intosh 2 2 3 2 3 3 Melrose 2 3 4 2 4 5 Pink lady 2 3 4 3 4 3 Reineta 2 2 4 2 4 5 Reinta Gris 3 3 4 2 4 5 Verde Doncella 3 3 4 2 4 5 Anexo V Datos cuantitativos de variedades de referencia 112 Código Época de cosecha Madurez de consumo Conservación Acidez Accesión UPOV (U - 56) UPOV (U - 57) moda moda moda Moda Akane 2 1 3 2 Cox´s 4 3 2 1 Elstar 4 3 1 Fuji 4113 7 7 3 1 Fuji 4165 7 7 3 1 Gala 4 3 2 2 Golden Delicius 5 5 1 Granny Smith 9 9 1 Idared 5 5 2 1 Mack Intosh 4 3 2 3 Melrose 4 3 2 2 Pink Lady 7 7 3 Reineta 5 5 2 3 Reinta Gris 5 5 Verde Doncella 5 5 1 113 7.6 ANEXO VI DATOS DEL VALORÍMETRO CORRESPONDIENTES A VARIEDADES LOCALES Anexo VI Datos del valorímetro correspondientes a variedades locales 115 PH AC.TOTAL A. Málico A. Tartárico A. Cítrico NaOH 0.5N °Brix meq/L g/l g/l g/l ml MA 058 3,31 66,78 4,47 5,009 4,274 6,678 14,6 MA 100 3,22 133,76 8,96 10,032 8,561 13,376 14,6 MA 105 3,1 120,04 8,04 9,003 7,683 12,004 14,3 MA 107 3,26 200,04 13,4 15,003 12,803 20,004 15,6 MA 108 3,32 73,34 4,91 5,5 4,694 7,334 15,1 MA 109 3,27 133,06 8,92 9,979 8,516 13,306 18,9 MA 110 3,1 100,04 6,7 7,503 6,403 10,004 13,4 MA 115 3,6 70,56 4,73 5,292 4,516 7,056 15,1 MA 130 3,12 228,82 15,33 17,161 14,644 22,882 15,7 MA 140 3,97 75,4 5,05 5,655 4,826 7,54 15,8 MA 141 4,89 47,44 3,18 3,558 3,036 4,744 17,4 MA 142 3,71 104,68 7,01 7,851 6,7 10,468 14,5 MA 143 4,31 54,06 3,62 4,055 3,46 5,406 15,1 MA 144 4,84 35,16 2,36 2,637 2,25 3,516 14,6 MA 144 4,83 34,1 2,28 2,557 2,182 3,41 16,3 MA 145 4,37 61,32 4,11 4,599 3,924 6,132 14,6 MA 146 3,68 77,28 5,18 5,796 4,946 7,728 13,1 MA 147 2,93 185,17 12,41 13,888 11,851 18,517 13,6 MA 148 3,51 110,66 7,41 8,299 7,082 11,066 11,4 MA 149 3,8 53,12 3,56 3,984 3,4 5,312 13,5 MA 156 3,87 66,18 4,43 4,964 4,236 6,618 14,1 MA 163 4,62 30,28 2,03 2,271 1,938 3,028 15,8 MA 166 3,68 59,45 3,98 4,459 3,805 5,945 16,8 MA 171 3,45 170,46 11,42 12,784 10,909 17,046 16,7 MA 182 4,2 35,08 2,35 2,631 2,245 3,508 15 MA 192 3,16 105,24 7,05 7,893 6,735 10,524 14,5 MA 193 4,59 34,98 2,34 2,623 2,239 3,498 16,1 MA 195 4,59 30,5 2,04 2,287 1,952 3,05 14,5 MA 198 3,42 93,32 6,25 6,999 5,972 9,332 19,7 MA 199 2,75 100,34 6,72 7,526 6,422 10,034 13,5 MA 200 4,23 54,26 3,64 4,069 3,473 5,426 14,4 MA 215 3,51 116,22 7,79 8,716 7,438 11,622 11,3 MA 221 3,6 100,48 6,73 7,536 6,431 10,048 12,7 MA 224 2,93 153,52 10,29 11,514 9,825 15,352 14,6 MA 225 3,39 70,56 4,73 5,292 4,516 7,056 15 MA 231 3,08 149,44 10,01 11,208 9,564 14,944 15,1 MA 232 3,36 180,56 12,1 13,542 11,556 18,056 13,8 MA 233 3,46 75,9 5,09 5,693 4,858 7,59 15,9 MA 238 2,54 167,94 11,25 12,596 10,748 16,794 14,7 MA 239 3,08 104,54 7 7,841 6,691 10,454 15,8 MA 242 4,1 45,46 3,05 3,41 2,909 4,546 16 MA 245 4,04 34,99 2,34 2,624 2,239 3,499 14,5 MA 246 3,25 173,74 11,64 13,031 11,119 17,374 12,9 MA 247 3,02 172,34 11,55 12,925 11,03 17,234 12,3 MA 248 3,17 88,82 5,95 6,661 5,684 8,882 16,1 MA 249 3,85 44,45 2,98 3,334 2,845 4,445 14,1 MA 251 3,54 71,36 4,78 5,352 4,567 7,136 12,6 MA 253 2,94 100,05 6,7 7,504 6,403 10,005 13,4 MA 255 3,3 99,58 6,67 7,469 6,373 9,958 16,2 MA 256 3,73 71,7 4,8 5,377 4,589 7,17 12,6 MA 257 4,47 55,5 3,72 4,162 3,552 5,55 12,7 MA 267 3,03 163,2 10,93 12,24 10,445 16,32 14,1 MA 279 3,76 56,4 3,78 4,23 3,61 5,64 16,3 MA 280 4,1 60,9 4,08 4,568 3,898 6,09 13 MA 281 3,94 54,47 3,65 4,085 3,486 5,447 13,9 MA 295 3,21 149,72 10,03 11,229 9,582 14,972 14,5 117 7.7 ANEXO VII DATOS DEL VALORÍMETRO CORRESPONDIENTES A VARIEDADES DE REFERENCIA Anexo VII Datos del varlorímetro correspondientes a variedades de referencia 119 Código PH AC.TOTAL A. Málico A. Tartárico A. Cítrico NaOH 0.5N °Brix Accesión meq/L g/l g/l g/l ml Akane 3,23 146,63 9,82 10,997 9,384 14,663 13 Cox´s 3,21 156,97 10,52 11,773 10,046 15,697 14,5 Elstar 3,19 17 4,97 11,72 13,123 11,198 17,497 16,4 Fuji 4113 4,06 87,76 5,88 6,582 5,617 8,776 18,3 Fuji 4165 3,89 80,76 5,41 6,057 5,169 8,076 17,9 Gala 3,19 169,69 11,37 12,727 10,86 16,969 13,2 Golden Delicius 3,27 116,78 7,82 8,759 7,474 11,678 16,9 Granny Smith 3,37 112,14 7,51 8,41 7,177 11,214 15,3 Idared 3,12 130,36 8,73 9,777 8,343 13,036 12,7 Mack Intosh 3,17 142,52 9,55 10,689 9,121 14,252 16,1 Melrose 3,22 100,21 6,71 7,516 6,413 10,021 14,7 Pink Lady 3,33 144,5 9,68 10,838 9,248 14,45 14 Reineta 3, 16 195,02 13,07 14,627 12,481 19,502 14,2 Reinta Gris Verde Doncella 4,61 40,06 2,68 3,004 2,564 4,006 13,4 Anexo VIII Datos de los análisis fisicoquímicos de variedades locales 126 MAGNESIO FÓSFORO Accesión Media (mg/100g) Desviación (mg/100g) CV (%) Media (mg/100g) Desviación (mg/100g) CV (%) MA 058 4,53 0,00 0,09 13,75 0,24 1 ,75 MA 100 3,67 0,20 5,58 10,26 0,15 1,45 MA 105 3,65 0,23 6,24 11,28 0,03 0,25 MA 107 4,64 0,08 1,73 10,96 0,19 1,75 MA 108 4,54 0,00 0,05 13,36 0,12 0,90 MA 109 7,25 0,03 0,42 22,34 0,36 1,59 MA 110 5,22 0,05 0,99 11,14 0,05 0,48 MA 115 4,99 0,05 0,96 13,44 0,23 1,72 MA 140 9,30 0,21 2,29 17,70 0,40 2,29 MA 141 7,03 0,01 0,11 19,53 1,12 5,72 MA 143 6,10 0,48 7,86 14,04 0,77 5,48 MA 144 6,65 0,39 5,93 13,05 0,51 3,90 MA 144 3,36 0,38 11,45 9,04 0,28 3,15 MA 145 7,59 0,35 4,61 14,87 0,54 3,64 MA 146 6,47 0,08 1,23 15,56 0,21 1,33 MA 147 7,78 0,47 6,05 15,71 0,40 2,57 MA 149 5,30 0,26 4,94 9,34 0,04 0,41 MA 156 11,02 0,09 0,79 10,74 0,10 0,95 MA 163 3,97 0,05 1,26 8,82 0,23 2,55 MA 166 7,59 0,22 2,90 19,53 0,42 2,17 MA 171 6,10 0,05 0,87 1 2,09 0,30 2,48 MA 182 5,06 0,14 2,86 9,83 0,13 1,28 MA 192 5,40 0,03 0,58 14,65 0,20 1,35 MA 193 5,55 0,26 4,67 10,59 0,26 2,49 MA 195 4,70 0,02 0,45 11,56 0,42 3,64 MA 199 4,86 0,04 0,75 12,62 2,71 21,51 MA 200 4,32 0,09 2,07 11,47 0,70 6,13 MA 215 6,33 0,10 1,64 10,74 0,41 3,83 MA 221 5,60 0,21 3,71 14,38 0,17 1,15 MA 224 3,48 0,40 11,36 8,34 0,57 6,85 MA 225 3,53 0,28 7,80 9,17 0,74 8,07 MA 231 4,09 0,19 4,54 9,74 0,41 4,17 MA 232 5,59 0,06 1,06 17,99 0,39 2,14 MA 233 5,00 0,01 0,23 11,68 0, 19 1,59 MA 239 5,17 0,01 0,11 12,45 0,24 1,94 MA 242 6,66 0,43 6,47 16,63 0,90 5,44 MA 245 8,86 0,00 0,04 11,76 0,06 0,53 MA 247 7,59 0,48 6,35 8,95 0,31 3,51 MA 248 3,08 0,22 7,04 11,13 0,26 2,31 MA 249 3,01 0,24 8,04 6,44 0,30 4,70 MA 251 4,36 0,0 6 1,35 7,70 0,31 3,98 MA 253 3,75 0,20 5,33 9,24 0,09 0,92 MA 255 3,33 0,00 0,09 9,04 0,06 0,63 MA 256 4,54 0,07 1,44 14,70 0,13 0,86 MA 257 5,90 0,24 4,06 14,96 0,69 4,60 MA 267 10,63 0,18 1,74 12,07 1,26 10,40 MA 279 9,60 0,27 2,78 11,52 0,41 3,52 MA 280 9,10 0,19 2,13 14,46 1,10 7,61 MA 281 5,50 0,16 2,82 6,29 0,15 2,41 MA 295 3,54 0,02 0,63 8,86 0,02 0,28 Anexo VIII Datos de los análisis fisicoquímicos de variedades locales 127 SODIO POTASIO Accesión Media (mg/100g) Desviación (mg/100g) CV (%) Media (mg/100g) Desviación (mg/100g) CV (%) MA 058 19,48 0,48 2,49 5 4,86 0,86 1,57 MA 100 19,83 2,95 14,90 43,92 4,97 11,31 MA 105 10,29 5,26 51,16 82,27 6,98 8,49 MA 107 14,92 3,27 21,88 87,47 0,33 0,38 MA 108 14,69 0,97 6,61 80,44 0,81 1,01 MA 109 19,28 4,75 24,62 131,27 7,51 5,72 MA 110 14,39 1,31 9,12 70,54 0,49 0,69 MA 115 13,95 3,16 22,62 99,34 7,49 7,54 MA 140 17,08 2,18 12,75 166,94 20,29 12,16 MA 141 30,92 12,20 39,47 121,21 37,61 31,03 MA 143 24,82 0,49 1,99 119,91 6,75 5,63 MA 144 28,05 4,88 17,38 112,00 19,29 17,22 MA 144 21,35 1,38 6,46 45,24 4,83 1 0,68 MA 145 5,56 0,04 0,81 174,89 6,19 3,54 MA 146 11,83 8,06 68,15 127,87 15,47 12,10 MA 147 22,89 2,22 9,70 146,61 5,61 3,83 MA 149 3,63 0,15 4,04 79,75 3,96 4,96 MA 156 21,36 12,37 57,89 100,57 16,62 16,53 MA 163 14,17 2,64 18,63 44,98 3,62 8,04 MA 166 31,27 7,88 25,20 38,84 20,37 52,45 MA 171 4,95 0,70 14,08 177,40 1,41 0,79 MA 182 9,32 0,36 3,85 59,79 3,07 5,14 MA 192 25,84 1,74 6,75 80,99 7,46 9,21 MA 193 19,73 3,29 16,70 70,08 5,60 7,99 MA 195 4,74 1,43 30,11 85,57 4,86 5,68 MA 199 27,03 0,25 0,93 67,55 0,88 1,31 MA 200 9,70 0,15 1,54 177,40 7,05 3,97 MA 215 6,81 0,85 12,41 116,97 6,09 5,20 MA 221 6,92 2,47 35,66 159,53 0,87 0,55 MA 224 13,41 7,39 55,11 53,02 16,44 31,01 MA 225 6,13 3,76 61,32 66,81 6,90 10,32 MA 231 8,26 1,20 14,51 62,07 0,90 1,44 MA 232 23,87 2,40 10,07 162,67 3,94 2,42 MA 233 21,69 5,11 23,54 57,13 9,78 17,12 MA 239 24,70 3,99 16,14 67,63 8,11 12,00 MA 242 29,91 2,15 7,20 72,01 3,23 4,49 MA 245 20,65 0,65 3,15 113,89 0,09 0,08 MA 247 21,80 1,32 6,04 42,19 25 ,10 59,50 MA 248 21,35 1,98 9,28 43,63 1,77 4,05 MA 249 19,55 1,01 5,14 25,15 12,32 48,99 MA 251 12,74 2,44 19,15 97,31 1,94 1,99 MA 253 25,37 0,65 2,54 27,23 1,80 6,63 MA 255 13,84 2,73 19,75 64,92 6,27 9,65 MA 256 6,17 1,82 29,54 140,37 3,94 2,81 MA 257 7,24 0,88 12,21 96,73 0,62 0,64 MA 267 13,92 10,68 76,75 86,93 6,06 6,98 MA 279 51,45 33,63 65,37 114,32 2,73 2,39 MA 280 17,18 8,34 48,53 137,67 16,23 11,79 MA 281 10,05 1,72 17,06 110,95 1,04 0,94 MA 295 11,28 1,41 12,51 61,29 4,06 6,63 129 7.9 ANEXO IX DATOS DE LOS ANÁLISIS FISICOQUÍMICOS DE VARIEDADES DE REFERENCIA Anexo IX Datos de los análisis fisicoquímicos de variedades de referencia 131 PROTEINA SACAROSA Accesión Media (g/100g) Desviación (g/100g) CV (%) Media (g/100ml) Desviación (g/100ml) CV (%) Akane 0,28 0,04 13,31 0,68 0,18 26,40 Cox´s 0,22 0 ,05 21,24 6,67 0,03 0,40 Elstar 0,27 0,12 43,53 5,61 0,06 1,09 Fuji 4113 0,42 0,11 24,77 1,46 0,01 0,44 Fuji 4165 0,35 0,21 58,08 3,96 0,86 21,72 Gala 0,43 0,04 8,38 7,32 0,04 0,59 Golden delicius 0,33 0,18 52,83 6,88 0,09 1,27 Granny smith 0,34 0,10 29,38 2,84 0,20 7,12 Idared 0,21 0,08 39,09 3,70 0,01 0,30 Mack INTOSH 0,41 0,35 85,23 6,64 0,07 1,06 Melrose 0,24 0,11 44,73 3,09 0,04 1,19 Pink lady 0,30 0,02 6,25 5,49 0,06 1,11 Reineta 0,34 0,08 22,46 7,24 0,10 1,36 Reinta gris 0,33 0,09 26,54 3 ,65 0,05 1,38 Verde doncella 0,28 0,04 13,31 0,68 0,18 26,40 GLUCOSA XILOSA Accesión Media (g/100ml) Desviación (g/100ml) CV (%) Media (g/100ml) Desviación (g/100ml) CV (%) Akane 1,82 0,51 28,27 0,15 0,13 81,10 Cox´s 1,13 0,11 9,86 0,01 0,00 Elstar 1,82 0,00 0,07 0,02 30,09 Fuji 4113 5,10 0,01 0,16 0,08 0,00 4,74 Fuji 4165 3,90 0,06 1,44 0,03 0,00 3,76 Gala 1,16 0,06 4,98 0,13 0,08 59,65 Golden Delicius 1,79 0,01 0,71 0,09 0,01 16,54 Granny Smith 3,06 0,25 8,29 < 0,01 Idared 2,11 0,38 18, 18 0,03 0,00 0,00 Mack Intosh 0,76 0,09 11,53 < 0,01 Melrose 2,80 0,05 1,86 0,05 0,01 28,96 Pink Lady 2,81 0,04 1,36 0,06 0,04 69,04 Reineta 1,94 0,08 4,19 0,10 0,01 10,82 Reinta Gris 2,98 0,04 1,47 0,09 0,00 2,65 Verde Doncella 1,82 0,51 28,27 0,15 0,13 81,10 Anexo IX Datos de los análisis fisicoquímicos de variedades de referencia 132 FRUCTOSA CALCIO Accesión Media (g/100ml) Desviación (g/100ml) CV (%) Media (mg/100g) Desviación (mg100/g) CV (%) Akane 9,67 0,04 0,40 3,51 0,36 10,24 Cox´s 6,44 0,31 4,76 3,17 0,07 2,21 Elstar 8,09 0,50 6,15 4,12 0,05 1,30 Fuji 4113 9,89 0,21 2,08 5,20 0,12 2,31 Fuji 4165 7,90 0,25 3,15 4,76 0,01 0,29 Gala 7,24 0,07 0,95 4,62 0,28 6,14 Golden delicius 11,16 0,06 0,54 3,67 0,11 2,92 Granny smith 4,43 2,05 46,23 12,65 0,14 1,09 Idared 6,98 0,12 1,69 3,25 0,02 0,76 Mack INTOSH 6,09 0,46 7,54 2,43 0,32 13,34 Melrose 11,19 1,12 9,99 1,89 1,21 64,20 Pink lady 7,96 0,12 1,52 4,82 0,05 1,14 Reineta 7,93 0,32 3,98 2,41 0,17 7,18 Reinta gris 7,65 0,20 2,65 5,41 0,12 2,25 Verde doncella 9,67 0,04 0,40 3,51 0,36 10,24 MAGNESIO FÓSFORO Accesión Media (mg/100g) Desviación (mg/100g) CV (%) Media (mg/100g) Desviación (mg/100g) CV (%) Akane 4,75 0,33 6,94 8,12 0,64 7,90 Cox´s 6,08 0,16 2,63 14,05 0,14 0,98 Elstar 3,71 0,12 3,11 8,20 0,26 3,22 Fuji 4113 5,10 0,20 3,85 12,45 0,16 1 ,27 Fuji 4165 5,34 0,05 0,94 7,21 0,12 1,63 Gala 7,24 0,19 2,64 18,05 0,31 1,70 Golden Delicius 4,77 0,22 4,64 14,41 0,18 1,27 Granny Smith 10,88 0,06 0,52 16,93 0,69 4,06 Idared 5,12 0,14 2,76 9,87 0,32 3,21 Mack Intosh 6,15 0,09 1,43 18,49 0,20 1,09 Melrose 4,14 0,02 0,54 10,93 0,49 4,46 Pink Lady 6,29 0,19 3,05 12,07 0,11 0,90 Reineta 5,81 0,00 0,01 11,85 0,16 1,34 Reinta Gris 6,28 0,16 2,60 14,49 0,02 0,11 Verde Doncella 4,75 0,33 6,94 8,12 0,64 7,90 Anexo IX Datos de los análisis fisicoquímicos de variedades de referencia 133 SODIO POTASIO Accesión Media (mg/100g) Desviación (mg/100g) CV (%) Media (mg/100g) Desviación (mg/100g) CV (%) Akane 29,80 3,33 11,18 111,14 13,66 12,29 Cox´s 43,20 1,56 3,62 100,70 4,77 4,74 Elstar 31,74 0,78 2,45 63,92 11,40 17,84 Fuji 4113 7,69 2,63 34,16 136,92 6,33 4,62 Fuji 4165 11,62 1,75 15,03 142,40 8,05 5,65 Gala 11,65 3,65 31,38 172,94 6,97 4,03 Golden Delicius 11,84 1,88 15,90 150,99 1,16 0,77 Granny Smith 16,00 0,24 1,48 154,01 0,84 0,55 Idared 18,78 2,90 15,45 96,73 0,62 0,64 Mack Intosh 38,30 3,15 8,21 123,70 7,13 5,76 Melrose 35,28 3,74 10,60 56,32 1,98 3,51 Pink Lady 36,58 1,15 3,14 77,38 6,05 7,81 Reineta 3,96 1,68 42,52 162,28 5,52 3,40 Reinta Gris 13,35 5,02 37,62 119,54 9,46 7,91 Verde Doncella 29,80 3,33 11,18 111,14 13,66 12,29