Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante

UNIVERSIDAD POLITECNICA DE VALENCIA ESCUELA POLITECNICA SUPERIOR DE GANDIA LICENCIATURA EN CIENCIAS AMBIENTALES “Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante” TRABAJO FINAL DE CARRERA Autora: Lorena Parra Boronat Tutores: D. Josep Vicent Llinares Palacios Dª. Mónica T. Boscaiu Neagu GANDIA, Septiembre 2012 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 2 UNIVERSITAT POLITÈCNICA DE VALÈNCIA ESCUELA POLITÉCNICA SUPERIOR DE GANDÍA Licenciatura en Ciencias Ambientales “Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante” EJERCICIO FINAL DEL ALUMNO: LORENA PARRA BORONAT Gandía, Septiembre de 2.012 EL ALUMNO: LOS TUTORES: Fdo. Lorena Parra Boronat Fdo. Josep Vicent Llinares Palacios Fdo. Mónica T. Boscaiu Neagu Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 3 UNIVERSITAT POLITÈCNICA DE VALÈNCIA ESCUELA POLITÉCNICA SUPERIOR DE GANDÍA Licenciatura en Ciencias Ambientales “Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante” EJERCICIO FINAL DEL ALUMNO: LORENA PARRA BORONAT Gandía, Septiembre de 2.012 NOTA: TRIBUNAL: SECRETARIO: PRESIDENTE: VOCAL: Fdo. Fdo. Fdo. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 4 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 5 Agradecimientos: “A mis tutores, Monica Boscaiu y Josep Llinares por su apoyo y dedicación. A mi familia, amigos y toda esa gente que siempre me ha ayudado. A todos vosotros, gracias” Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 6 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 7 1. INTRODUCCIÓN…………………………………………………………………………………………..13 1.1. Estrés en la vegetación mediterránea………………………………………………………………14 1.2. Estrés medioambiental. Estrés abiótico/biótico……………………………………………….16 1.3. Estrés salino e hídrico……………………………………………………………………………….……..16 1.4. Respuestas de las plantas frente al estrés………………………………………………………..21 1.4.1. Plantas halófitas y glicófitas………………………………………………………………22 1.4.2. Mecanismos de respuesta..……………………………………………….………………23 1.5. Osmorregulación y osmolitos…………………………………………………………………………..26 1.5.1. Glicinabetaina……………………………………………………………………………………26 1.5.2. Prolina……………………………………………………………………………………………….26 1.6. Relación de los iones analizados con la vegetación…………………………………………27 2. OBJETIVOS…………………………………………………………………………………………………..30 3. MATERÍAL Y MÉTODOS……………………………………………………………………………….32 3.1. Especies estudiadas………………………………………………………………………………………….33 3.2. Trabajo de campo…………………………………………………………………………………………….38 3.2.1. Diseño experimental…………………………………………………………………………38 3.2.2. Muestreo o toma de muestras………………………………………………………….39 3.3. Trabajo de laboratorio……………………………………………………………………………………..40 3.3.1. Pretatamiento para el almacenamiento…………………………………………….40 3.3.1.1. Material vegetal………………………………………………………………………40 3.3.1.2. Muestras de suelo…………………………………………………………………..40 3.3.2. Obtención del extracto………………………………………………………………………41 3.3.2.1. Material vegetal………………………………………………………………………41 3.3.2.2. Muestras de suelo…………………………………………………………………..42 3.3.3. Análisis de los osmolitos……………………………………………………………………43 3.3.3.1. Glicina betaína…………………………………………………………………………43 3.3.3.2. Prolina…………………………………………………………………………………….46 3.3.4. Análisis iones…………………………………………………………………………………….49 3.3.4.1. Sodio y Potasio……………………………………………………………………….49 3.3.4.2. Calcio y Magnesio…………………………………………………………………..51 3.3.4.3. Cloruros………………………………………………………………………………….52 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 8 4. RESULTADO Y DISCRUSIÓN………………………………………………………………………….55 4.1. Tratamientos estadístico de las mediciones……………………………………………………..56 4.2. Resultados y discusión……………………………………………………………………………………..58 5. CONCLUSIONES……………………………………………………………………………………………86 6. BIBLIOGRAFÍA……………………………………………………………………………………………..89 ANEXOS……………………………………………………………………………………..92 ANEXO I: Resultados Completos…………………………………………………………………………………………93 ANEXO II: Fotografías de la zona de estudio………………………………………………………………………106 ANEXO III: Cartografía………………………………………………………………………………………………………109 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 9 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 16 1.2. Estrés medioambiental. Estrés abiótico/biótico Anteriormente hemos hablado del estrés al que están sometidas las plantas, pues bien, este es el momento de definir claramente que es el estrés en la ecofisiología vegetal. El estrés medioambiental tiene un significado muy amplio, puesto que incluye cualquier tipo de situación desfavorable para las plantas. Dentro de este concepto se puede realizar una primera clasificación diferenciando entre estrés biótico y estrés abiótico (Garcia-Ortolá, 2002). El estrés biótico, más conocido como estrés biológico, es el causado por la acción de otros seres vivos (virus, bacterias, insectos, herbívoros, etc.). El estrés abiótico, el cual a su vez se divide en: o El estrés físico, puede estar producido por el déficit hídrico, la salinidad en su componente osmótico, el calor, estreses mecánicos como el viento, las heridas u otros, etc. o El estrés químico, que es el producido por herbicidas, carencias de determinados componentes químicos, salinidad en su componente químico, etc. 1.3. Estrés salino e hídrico Como más adelante veremos, nuestra zona de estudio está afectada por el estrés hídrico y salino. Si bien los factores estudiados están relacionados solamente con la salinidad, también es cierto que la zona sufre de estrés hídrico. Por ello desarrollaremos brevemente los conceptos de estrés hídrico y salino, su importancia, efectos sobre las plantas y los mecanismos de adaptación fundamentales. El estrés hídrico se produce en la planta cuando la absorción de agua del sistema radicular es insuficiente para satisfacer la demanda evaporativa atmosférica. Esto afecta a procesos fisiológicos y reproductivos, pudiendo causar disminución de la producción (Lin, y Kao, 2001). Se definen como zonas áridas o semiáridas aquellas áreas en las cuales una planta transpira un total del 50% o menos de lo que transpiraría en condiciones de agua ilimitada (Garcia-Ortolá, 2002). El agua es el componente mayoritario en la planta y afecta, directa o indirectamente, a la mayoría de los procesos fisiológicos (permite la difusión y el flujo masivo de solutos, mantiene la turgencia, etc.). El estrés hídrico está muy relacionado con el déficit hídrico, este a su vez depende de dos factores, el imput hídrico y las necesidades hídricas específicas de cada especie. Es decir que Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 17 en las mismas condiciones de aportes hídricos dos especies con diferentes requerimientos puede darse el caso que solo una de las dos esté sufriendo estrés. El estrés hídrico es el más importante que pueden sufrir las plantas, especialmente los cultivos. Se han publicado estudios que indican que las pérdidas agrícolas ocasionadas por el estrés hídrico son superiores al conjunto de las pérdidas producidas por los restantes tipos de estrés (Turner y Kramer, 1980). La disminución del contenido hídrico en las plantas provoca principalmente, un descenso en la presión hidrostática o turgencia con su consecuente descenso en la tasa de crecimiento. Los efectos del estrés hídrico están causados por la disminución del agua disponible para las plantas, pero no siempre está causado por la inexistencia de agua, como ocurre en zonas desérticas y áridas. Podemos hallarnos ante el estrés hídrico aun cuando haya agua, incluso más de la que pueda necesitar la planta, pero por varias razones dicha agua no puede llegar a la planta, ya sea por bajas temperaturas (pese a tener agua disponible esta se encuentra congelada) o se deba a los efectos del potencial hídrico. El agua circula entre dos puntos siempre que su potencial hídrico no sea idéntico entre dichos puntos. El potencial hídrico (Ψ) constituye una fuerza de orígenes diversos (osmótica, capilar, etc.) que liga el agua al suelo o a los diferentes tejidos vegetales. Los especialistas en fisiología vegetal han discutido durante mucho tiempo en términos de presión los movimientos del agua, incluyendo los difusivos. En un sistema particular, el potencial hídrico es la suma algebraica de varios componentes (Taylor y Slatyer, 1961): Ψ = Ψp + Ψs + Ψm + Ψg Siendo Ψp, Ψs, Ψm y Ψg, respectivamente, componentes debidos a fuerzas de presión, osmótica, mátrica y gravitacional. Dichos potenciales definirán el potencial hídrico resultante, y este, a su vez, determinara el movimiento del agua a través del sistema suelo-plantaatmosfera desde las zonas con mayor potencial hídrico hacia zonas con menor potencial hídrico, tanto entre sistemas como en el interior de la planta. En condiciones normales el potencial hídrico es menor en la planta que en el suelo y por tanto el agua entrará de forma pasiva al interior de la planta a través de las raíces. Sin embargo, en situaciones de estrés es posible que el potencial hídrico sea menor en el suelo que en la planta y el agua no entrará de forma pasiva a la planta sino que el agua Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 18 saldrá de la planta hacia el suelo., causando así perdidas de agua y deshidratación. Posteriormente veremos los mecanismos de respuesta de las plantas frente al estrés hídrico. Uno de los motivos por el que el potencial hídrico del suelo sea menor que el de la planta es la acumulación de sales en el suelo, o salinización, el segundo de los factores estresantes que vamos a tratar. Desarrollaremos el concepto de estrés salino, los tres componentes del estrés salino, los distintos orígenes de las sales, las zonas del mundo más afectadas y destacaremos la importancia de los hábitats relacionados con las áreas salinas. El estrés salino es el causado por la presencia en el suelo de una elevada concentración de sales que perjudican a la planta. Es uno de los frecuentes estreses abióticos, causa una reducción considerable en el crecimiento y el rendimiento de especies de plantas. En este caso el estrés salino causa tres principales problemas en la planta (Basra y Basra, 1997):  La presión osmótica en el suelo es menor que la presión osmótica en la planta, lo que causa una salida del agua de la planta hacia el suelo, causando deshidratación como hemos visto anteriormente. Este efecto es idéntico al causado por la sequía.  El exceso de sodio dificulta o interrumpe la absorción y movimiento de calcio y potasio en el interior de la planta. Esto causara alteraciones metabólicas.  El sodio y el cloro pueden tener efectos tóxicos directos en las membranas y los sistemas enzimáticos Otro efecto secundario del estés salino es la producción de especies reactivas del oxígeno (ROS), que resultan especialmente destructivas para los lípidos, ácidos nucleicos y proteínas de la planta (Geissler et al., 2010; Kant et al.,2006; Türkan y Demiral,2009). Además el sodio también tiene efectos negativos en el suelo ya que degrada su estructura y disminuye la porosidad y permeabilidad. Hemos visto que el estrés hídrico se debe a la carencia de agua disponible para la planta causada a su vez por, ausencia de precipitaciones, exceso de sales, bajas temperaturas…En este caso el estrés salino se debe a la acumulación de sales, pero de dónde provienen las sales y qué sales tenemos son muchas veces preguntas claves. Por ello vamos a ver el diferente origen de la salinidad y los distintos tipos de sales que se pueden acumular (Tabla 1). Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 19 Tabla 1. Distintos orígenes de la salinidad Origen de la salinidad Características Continentales Movilización, redistribución y acumulación de cloruros, sulfatos, bicarbonatos y carbonato sódico en áreas con clima árido o semiárido. Marinos Zonas de costa, NaCl de capas freáticas salinas poco profundas, inundaciones o trasporte por el viento. Deltaicos Mezcla de aguas de múltiples orígenes Artesianos Surgencias de aguas freáticas profundas Antropicos Uso inadecuado de las aguas de riego Fuente: Alcaraz Ariza, 2012 De forma natural encontramos salinización por distintos orígenes dando cada uno de ellos un tipo de hábitat único, como veremos más adelante. Sin embargo, debido a la acción humana y la mala gestión de las aguas de riego se está provocando la llamada salinización secundaria. Y que nos está haciendo perder cultivos. En los casos de origen natural el resultado son hábitats de gran interés que en la mayoría de los casos están protegidos. La salinización secundaría, la causada por la mala gestión de las aguas de riego está afectando a suelos que no eran salinos, suelos que no tenían sales, así pues, ¿cómo aparecen pues las sales en esos suelos? Cuando se riegan los cultivos con agua de no muy buena calidad, es decir agua que porta pequeñas cantidades de sales, que por sí mismas no van a causar daños inmediatos, ocurre lo siguiente. El agua con las pequeñas concentraciones de sales se infiltra en el suelo pero cuando dicha agua empieza a evaporarse solo se evapora el agua pura, quedando las pequeñas cantidades de sales retenidas en el suelo. En zonas con temperaturas elevadas esta evaporación sucede rápidamente, por lo que hay que volver a regar. Tras muchos riegos y al evaporarse el agua, esas pequeñas cantidades de sal, que estaban en bajas concentraciones en el agua de riego, se han acumulado en el suelo, aumentando su cantidad con cada riego hasta estar en concentraciones tan elevadas en el suelo que empiezan a generar problemas de salinidad. A continuación se muestra en la Tabla 2 la distribución de suelo salino en el mundo, dividiendo según el origen antrópico (salinización secundaria) del natural: Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 20 Tabla 2. Superficie afectada por la salinidad en distintas regiones de mundo. Regiones Área total Área afectada por la sal Mha Mha % África 1.899 73 3,4 Asia y Australia 3.107 444 14,3 Europa 2.011 112 3,9 Latinoamérica 2.039 112 5,5 Cercano Este 1.802 106 5,9 Norte América 1.924 20 1,0 Total 12.781 831 6,5 Salinización secundaria mundial por irrigación de cultivos 45,4 20 Fuente: Madhava Rao et al., 2006) En cuanto a que tipo se sales se acumulan podemos encontrar 4 tipos de acumulaciones (Alcaraz Ariza, 2012): Salinizacion Alcalinizacion Solodizacion Sulfato-reduccion Anteriormente hemos hablado de que en las zonas salinas de origen natural se desarrollan hábitats únicos que pese a tener una baja diversidad florística son muy importantes ya que muchos actúan como zonas húmedas. Dunas, marismas, estuarios, acantilados, marjales, saladares interiores, manglares…estos son algunos de los hábitats que se desarrollan en zonas afectadas por el estrés salino. En su mayoría estos enclaves se hallan bajo el amparo de diversas figuras de protección tanto dentro de España: Parques nacionales como el de Doñana, Parques Naturales como l’Albufera, Paraje Natural Municipal como el Clot de Galvany (nuestra zona de estudio); así como fuera de España, el Delta del Danubio, declarado Patrimonio de la Humanidad por la UNESCO. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 21 1.4. Respuestas de las plantas frente al estrés Las plantas, al tratarse de seres vivos sésiles no tienen la capacidad de huir ante la presencia del estrés, de modo que ante la incapacidad de huir y evitar espacialmente el estrés solo les quedan dos opciones. La primera evitar temporalmente el estrés, es decir, pasar la época del año en la que el estrés está presente en forma de semilla. Pero no todas las plantas pueden hacer esto, solo se puede hacer si la aparición del estrés es cíclica, es decir que siempre llega en el mismo momento, con lo que la planta puede ajustar su ciclo vital a la aparición y desaparición del estrés. Tampoco lo pueden hacer aquellas especies que sean árboles o arbustos, ya que estos no son anuales y pese a que pueden pasar una época ligeramente aletargados no pueden evitar totalmente el estrés. Por tanto ante la imposibilidad de escapar temporalmente al estés la única opción que le queda a la vegetación es modificarse para vivir en las condiciones de estrés. Sin embargo y aunque comúnmente hablemos de plantas adaptadas hay que definir y diferenciar tres términos relacionados entre sí, respuesta, adaptación y acomodación (Garcia-Ortolá, 2002): El termino respuesta tiene un significado amplio que incluye a los otros dos conceptos, y se define como cualquier alteración, tanto estructural como funcional, que se produce en las plantas como consecuencia de un estrés. El concepto de adaptación hace referencia a aquellas modificaciones que, siendo heredables, aumentan la probabilidad de que una planta sobreviva y se reproduzca en un ambiente particular. Por último, se define como acomodación al conjunto de modificaciones transitorias, no heredables, que se producen por exposición a un cambio del medio y resultan positivas para la supervivencia. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 22 1.4.1. Plantas halófitas y glicófitas Como hemos dicho antes, las plantas pueden adaptarse a las situaciones de estrés para poder sobrevivir y reproducirse en dichos ambientes, de forma que para cada tipo de estrés encontramos unas u otras adaptaciones. En nuestro caso hablaremos de las adaptaciones a los ambientes salinos. Las plantas adaptadas al estrés salino se llaman plantas halófilas, mientras que se denominan glicófitas a las demás plantas que no están adaptadas a vivir en ambientes salinos. Las glicofitas por el contrario no son capaces de resistir las sales del suelo en el grado en que lo hacen las halófitas. Normalmente hay una concentración umbral de sal por arriba de la cual las glicófitas empiezan a mostrar signos de inhibición del crecimiento, decoloración de sus hojas y pérdida de materia seca. Las halófitas son plantas nativas de suelos salinos y completan su ciclo vital en estos ambientes. Entre las halófitas predominantes en los ecosistemas del litoral ibérico se encuentran principalmente géneros pertenecientes a dos familias: las Plumbagináceas y las Quenopodiáceas (García-Ortola, 2002). Son plantas que toleran una notable concentración de sales que matarían al 99% de otras especies Y tienen la capacidad de completar su ciclo de vida en una concentración del sal de al menos 200 mM de NaCl en condiciones similares a las que se podrían encontrar en el medio natural (Flowers et al., 1986) Pero no todas las plantas halófitas se comportan de la misma forma ante la salinidad. Algunas de ellas son capaces de tolerarla, mientras que otras la necesitan para su correcto funcionamiento. Las plantas halófitas se pueden clasificar en varios grupos (Braun-Blanquet, 1979): o Halófilas obligatorias: necesitan sal. Ejemplos: Plantas de los géneros Salicornia, Suaeda, Limonium, Atriplex, Arthrocnemum. o Halófilas preferenciales: prefieren la sal. Ejemplo: Scirpus maritimus. o Halófilas de subsistencia: soportan la sal. Ejemplo: Phragmites. También podemos dividirlas según sean exclusivas o inclusivas, es decir si permiten o no la entrada de sales (Garcia-Ortolà, 2002). o Plantas inclusivas, absorben la sal en grandes cantidades y se almacena en el tallo y las hojas. o Plantas exclusivas, son aquellas en las que la sal sólo llega a las partes aéreas en pequeñas cantidades. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 23 1.4.2. Mecanismos de respuesta Dividiremos los mecanismos de respuesta según sean empleados por especies exclusivas o inclusivas (Gracia-Ortolà, 2002).: Plantas exclusivas los mecanismos utilizados son: Selectividad: Todas las halófitas y algunas glicófitas son capaces de excluir los iones sodio y cloro de su corriente de nutrientes absorbidos. La exclusión de las sales por parte de las raíces se describe habitualmente en términos de sustitución elemental o de selección iónica preferente por el potasio sobre el sodio. Además, las halófitas verdaderas son conocidas por tener raíces con una capa protectora externa y una membrana interna con ceras que filtra las sales efectivamente mientras permite pasar las sales. Compartimentación: La acumulación o compartimentación del exceso de sales en ciertos órganos de la planta es otro método de exclusión que predomina en el nivel radicular. Como resultado del cierre de los estomas y tasas de transpiración reducidas, muchas halófitas son capaces de confinar el exceso de sales en su extenso sistema radicular y en las partes más bajas del brote con el objetivo de restringir el transporte hacia el resto de la planta. Plantas inclusivas cuyas principales adaptaciones se basan en la eliminación de sal del citosol bien a través de la: Excreción: Se basa en la secreción de sales a través de poros epidérmicos, glándulas en brotes y hojas de las plantas. Los mecanismos de transporte intercelular movilizan el exceso de iones salinos desde las células de la superficie hacia el exterior de la hoja o tallo dejando unos depósitos de cristales visibles una vez se ha evaporado el agua. Las halófitas más evolucionadas utilizan este mecanismo a menudo para desalinizar sus fluidos internos excretando iones de sodio y cloro en los periodos más críticos de su desarrollo. Dilución: La sal es almacenada en estructuras suculentas. Los órganos suculentos en los halófitas son las hojas, las cuales siguen teniendo la capacidad fotosintética. La sal penetra en la planta pero, como las hojas se hinchan absorbiendo agua, las concentraciones no aumentan mucho, permitiendo una mayor acumulación de iones tóxicos. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 24 Además de las anteriores adaptaciones para resistir los efectos tóxicos que pueden generar elevadas concentraciones de iones (componente iónico del estrés salino), las plantas tienen que ajustar su potencial hídrico en respuesta a las altas concentraciones de sal (componente osmótico del estrés salino). Este ajuste del potencial hídrico se consigue provocando un descenso en el potencial osmótico intracelular. Dos procesos contribuyen a este descenso: la acumulación de iones en la vacuola y la síntesis de solutos compatibles en el citosol (Flowers y Hall, 1978; Flowers et al., 2008). Este mecanismo es conocido como osmorregulación. Los mecanismos que pueden usar las plantas para protegerse de los efectos de la salinidad son muchísimos en la siguiente tabla se muestra la gran variedad de mecanismos encontrados tanto en especies típicas de ambientes salinos como en especies cultivadas. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 25 Tabla 3. Variedad de mecanismos de tolerancia a la salinidad (Basra y Basra, 1997): Planta Nivel de tolerancia (mM de NaCl) Mecanismo empleado Judía 40 Exclusión de Na+ Retransporte de Na+ de las hojas a la raíz Arroz 40 Exclusión de Na+ y almacenamiento de Na+ en las hojas viejas Maíz 60 Exclusión de Na+ Trigo 140 Exclusión parcial de Na+ y almacena miento en las vacuolas de las hojas Cebada 200 Absorción controlada de Na+ y almacenamiento en las vacuolas de las hojas Diplanchne fusca 313 Absorción controlada de Na+ y almacenamiento en las vacuolas de las hojas Más glándulas salinas Atriplex canescens subsp. canescens 350 Absorción controlada de Na+ y almacenamiento en las vacuolas de las hojas Más vesículas salinas Distichlis palmeri 600 Absorción controlada de Na y almacenamiento en las vacuolas de las hojas Más glándulas salinas Atriplex. canescens subsp. linearis 700 Mayor absorción de Na+ que en subsp. canescens Salicornia bigelovii >720 Elevada absorción de Na+ y suculencia Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 32 2. 3. MATERÍAL Y MÉTODOS Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 33 3.1. Especies estudiadas Arthrocnemum macrostachyum (Moric.) Moris Imágenes 1 y 2. Detalle de un tallo y arbusto de Arthrocnemum macrostachyum Clasificación taxonómica: Reino: Plantae División: Magnoliophyta Clase: Magnoliopsida Orden: Caryophyllales Familia: Amaranthaceae Género: Arthrocnemum Especie: Arthocnemum macrostachyum Nombre común: Alacranera. Almajo. Garbancillo. Sapina. Solicuernos. Distribución general: Mediterránea Descripción: Tiene los tallos carnosos y articulados, y las hojas reducidas a pequeñas escamas. Se puede confundir muy fácilmente con Sarcocornia fruticosa con la que convive en muchas zonas húmedas de las islas, la reconoceremos porque hace las inflorescencias sobre las ramas de dos años, quedando escondidas dentro de la mata, al contrario Arthrocnemum macrostachyum hace las inflorescencias sobre ramas jóvenes y quedan expuestas en la parte superior de la mata. Hábitat: Suelos salinos arcillosos y húmedos. Costas rocosas. Este arbusto puede resistir inundaciones esporádicas Categoría UICN: Poco preocupante Forma de vida: Nanofanerófito Aparece en las parcelas: 2, 3 y 4 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 34 Inula crithmoides L. Imágenes 3 y 4. Arbusto y detalle de la inflorescencia de Inula crithmoides Clasificación taxonómica: Reino: Plantae División: Magnoliophyta Clase: Magnoliopsida Orden: Asterales Familia: Asteraceae Género: Inula Especie: Inula crithmoides Nombre común: Salsona. Distribución general: Pluriregional. Descripción: Hojas carnosas, de contorno lineal, a menudo con el ápice con dos o tres dientes. Forma capítulos amarillos durante el verano y otoño, cuando está en flor es inconfundible. Sin estar en flor también es fácil de identificar por la forma de las hojas, no hay ningún otro arbusto parecido en las zonas húmedas. Hábitat: Zonas litorales de suelos salinos. Arbusto propio de las marismas y costas rocosas. Categoría UICN: Poco preocupante Forma de vida: Caméfito Aparece en las parcelas: 3 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 35 Juncus acutus L. Imágenes 5 y 6. Detalle de las inflorescencias y arbustos de Juncus acutus Clasificación taxonómica: Reino: Plantae División: Magnoliophyta Clase: Magnoliopsida Orden: Poales Familia: Juncaceae Género: Juncus Especie: Juncus acutus Nombre común: Junco redondo. Distribución general: Pluriregional. Descripción: es el clásico junco de albufera que forma grandes matas densas con las hojas y tallos punzantes. Lo diferenciamos de Juncus maritimus por su inflorescencia compacta con frutos capsulares claramente más grandes que los sépalos (alerta con la subsp. tommasinii que tiene las cápsulas pequeñas). Además Juncus maritimus es rizomatoso y normalmente forma céspedes, y su inflorescencia es muy laxa. Hábitat: Zonas húmedas y pantanosas. Categoría UICN: Poco preocupante Forma de vida: Caméfito Aparece en las parcelas: 1 y 4 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 36 Juncus maritimus Lam. Imágenes 7 y 8. Detalle de las inflorescencias y arbustos de Juncus maritimus Clasificación taxonómica: Reino: Plantae División: Magnoliophyta Clase: Magnoliopsida Orden: Poales Familia: Juncaceae Género: Juncus Especie: Juncus maritimus Nombre común: Junco marino. Distribución general: Pluriregional. Descripción: Es rizomatoso por lo que puede formar céspedes bastante extensos, aunque también lo podemos encontrar aislado. Se puede confundir con Juncus acutus, porque las hojas son largas y están endurecidas, por lo que pueden pinchar; pero se diferencia por su estructura rizomatosa y porque la inflorescencia es muy laxa, en lugar de ser densamente compacta como en la otra especie. Florece durante la primavera y el verano. Hábitat: Zonas húmedas, pantanosas y marismas. Categoría UICN: Poco preocupante. Forma de vida: Geófito. Aparece en las parcelas: 1, 2 y 3 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 37 Sarcocornia fruticosa (L.) A. J. Scott Imágenes 9 y 10. Detalle de las inflorescencias y arbustos de Sarcocornia fruticosa Clasificación taxonómica: Reino: Plantae División: Magnoliophyta Clase: Magnoliopsida Orden: .Caryophyllales Familia: Amaranthaceae Género: Sarcocornia Especie: Sarcocornia fruticosa Nombre común: Sosa alacranera. Distribución general: Pluriregional. Descripción: Arbusto muy ramificado, los tallos jóvenes son carnosos y están articulados en nudos y entrenudos, estos tallos son verdes o adquieren coloraciones rojizas. Por otro lado las hojas están reunidas en pequeñas escamas poco visibles. Las flores se agrupan de tres en tres a cada lado de los nudos de las ramas fértiles, que son las más superiores y por tanto sobresalen por encima del perfil general de la planta. Estas flores son muy pequeñas y poco aparentes, de hecho ocupan, cada una de ellas, una cavidad de los tallos. Esta especie se confunde con Arthrocnemum macrostachys, que tiene una morfología extremadamente parecida y que vive en los mismos ambientes; esta especie desarrolla las ramas fértiles sin que sobresalgan del perfil general de la planta. Hábitat: Saladares abundantes en agua. Costa rocosa. Categoría UICN: Poco preocupante. Forma de vida: Nanofanerófito. Aparece en las parcelas: 1, 2 y 3 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 38 3.2. Trabajo de campo 3.2.1. Diseño experimental Como ya se ha mencionado anteriormente, la zona de estudio es un saladar y el objetivo del presente trabajo es la comparación de los efectos de distintos niveles de salinidad. Por tanto las parcelas experimentales corresponden a zonas con distintos niveles de sales en el suelo, siendo las parcelas 1 y 4 menos salinas que la 2 y 3. Las parcelas se establecen con coordenadas UTM y tienen una dimensión de 30m2. La localización de las parcelas se puede ver en la Plano 1 (Anexo Cartográfico). En cada una de las parcelas se tomarán muestras de suelo y muestras de material vegetal. Se intentará tomar siempre las muestras de suelo del mismo sitio y que sean siempre las mismas plantas muestreadas. Para ellos se marcan los individuos muestreados con material plástico y se realiza un esbozo de donde se toman las muestras de suelo. En cada parcela de muestreo se tomaran tres muestras compuestas de suelo entre 0 y 15 cm de profundidad. En cuanto al material vegetal, en cada parcela se toman muestras de 3 a 5 individuos para cada especie. La relación de especies por parcela es la siguiente: Tabla 4. Especies muestreadas por parcela. Parcela 1 Parcela 2 Parcela 3 Parcela 4 Arthrocnemum macrostachyum x x Inula crithmoides x Juncus acutus x x Juncus maritimus x x x x Sarcocornia fruticosa x x x x Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 39 3.2.2. Muestreo del material La toma de muestras se realiza de forma estacional, es decir, una muestra por estación. Sin embargo no se muestrea en invierno ya que en dicha época se esperan resultados muy similares al muestreo de otoño. Como la duración del estudio dura un año, se toman 3 muestreos que corresponden a las siguientes fechas: Muestreo de primavera: 6/4/2011 Muestreo de verano: 26/7/2011 Muestreo de otoño: 24/10/2011 La identificación de las especies vegetales en campo se realiza siguiendo la clave de especies de Mateo y Crespo (2001). Las muestras de material vegetal se toman con unos alicates de poda y se introducen en bolsas de plástico correctamente rotuladas, ej.: Localización y fecha El Clot 6/4/2011 Zona (Parcela) Parcela 1 Especie y nº de individuo Sf1 Las bolsas se introducen en las mochilas aislantes con con refrigerantes rígidos que permiten conservar el material fresco hasta la llegada al laboratorio. Por otro lado las muestras de suelo se toman con una pala pequeña y usando un pequeño pico en los casos en los que la tierra está muy dura. Las muestras se almacenan en bolsas resistentes ya que suelen contener raíces y en algún caso piedras que pueden romper las bolsas usadas para el material vegetal. Dichas bolsas se rotulan al igual que en material vegetal de forma clara indicando la procedencia, ej.: Localización y fecha El Clot 6/4/2011 Zona (Parcela) y replica Parcela 1Muestra 2 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 40 3.3. Trabajo de laboratorio 3.3.1. Pretatamiento para el almacenamiento Una vez tomadas las muestras y trasladadas al laboratorio estas han sido correctamente almacenadas hasta el momento en que se han utilizado. Dicho pretatamiento se realiza inmediatamente después de que las muestras lleguen al laboratorio de forma que estas se alteren lo menos posible. Al tener dos tipos distintos de muestras, material vegetal y muestras de suelo cada recibe un tratamiento diferente, que se detalla a continuación. 3.3.1.1. Material vegetal Las muestras llegan al laboratorio en bolsas de plástico correctamente identificadas. Para los distintos análisis que se van a realizar solo se utiliza hojas y tallos verdes, por tanto deben separarse del resto de material vegetal que se ha recogido en el campo. El material seleccionado se pesa en una balanza de precisión y se divide en dos lotes diferentes, material fresco y material seco (tomando nota del peso de cada uno): Material fresco, el cual debidamente etiquetado se deposita en el congelador a -80ºC donde permanece conservado hasta el momento en que se realizan los análisis de los marcadores bioquímicos (prolina y glicina betaina). Material seco, el cual es depositado en estufa a 65ºC durante un mínimo de 72 horas, hasta observar que su peso es constante, cuando se tomará nota de dicho peso (peso seco), ya que servirá para la obtención del porcentaje de materia seca. Una vez observado un peso constante dicho material será triturado y almacenado en botes correctamente etiquetados a temperatura ambiente, hasta que se realicen los análisis del contenido iónico. 3.3.1.2. Muestras de suelo Por otro lado las muestras de suelo llegan al laboratorio en bolsas identificadas, dichas muestras se depositan en bandejas grandes con papel de filtro y se dejan secar. De esta forma se eliminará parte del contenido de agua de las muestras. Posteriormente y una vez hayan perdido toda el agua se almacenarán en fiambreras correctamente rotuladas. Para poder efectuar los análisis se deberá triturar el suelo porque al tratarse de una zona tan arcillosa el suelo que se ha dejado secar ha formado conglomerados duros. Para poder almacenarse primero se deben romper con la ayuda de un martillo de goma y un rodillo. Una Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 41 vez el suelo está fino se pasara por un tamiz de 2mm con el fin de separar las raíces que pueden haber sido incluidas en la muestra de suelo durante la toma de muestras. La parte que pasa el tamiz se almacena en las fiambreras. 3.3.2. Obtención del extracto Para poder realizar los análisis del contenido iónico se debe obtener un extracto de la muestra, ya que los iones se van a medir en un líquido. De nuevo y como ya hemos visto antes, al tener muestras de dos tipos la obtención del extracto va a ser diferente. Por tanto veremos por separado la metodología empleada para cada tipo de muestra. 3.3.2.1. Material vegetal El método empleado para la obtención del extracto en el material vegetal ha sido el mismo empleado por Weimberg (1987), Material utilizado: Material vegetal seco Balanza analítica Baño de agua Micropipeta de 5mL Bote para muestras Gradilla de plástico Agua MiliQ Embudos Papel de filtro Procedimiento: 1º Se enciende el baño de agua y se programa a 99ºC. 2º Se rotulan los botes de muestras que se empleen y se introducen en la gradilla. 3º Se pesa en la balanza analítica en un bote para muestras 30mg del triturado homogenizado de cada uno de los individuos de la especie a analizar, hasta alcanzar 150mg. 4º Se añade 5mL de agua MiliQ a cada bote de muestras en la gradilla y se introducen al baño de agua durante 10 minutos. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 48 2º Se Añaden a cada tubo 1 mLde ácido de ninhidrina y 1 mL de ácido acético glacial. 3º Se tapan los tubos con su correspondiente tapón, se agitan unos segundos en el vortex y se dejam reposar hasta que vayamos a introducirlos en el baño a 100ºC durante 1 hora junto con los extractos. Extracción de prolina en las muestras: 1º Se pesan en la balanza de precisión 0,25 gramos de muestra fresca y se anota el peso hasta el tercer decimal. 2º Se ritura el material vegetal en el mortero usando nitrógeno líquido como abrasivo hasta pulverizar. 3º Se añaden 2mL de ácido sulfosalicilico 3%, se homogenizan y se vierten en el eppendorf. 4º Se centrifuga20 minutos. 5º Se fltra el extracto con lana de vidrio en un embudo que se vierte directamente a un tubo de ensayo. 6º Se ipetea 1mL del extracto y se vierte en un nuevo tubo de ensayo junto con 1mL de ninhidrina y ácido acético glacial. Cuantificación de prolina en el espectrofotómetro: 1º Se introducen los tubos de ensayo con las muestras y los de la curva patrón al baño a 100ºC durante 1 hora. 2º Se sacan los tubos del baño y se detiene la reacción depositando los tubos en hielo durante 10 minutos. 3º Sevierte a cada tubo 2mL de tolueno y se agitar en un vortex durante 20 segundos. 4º Se aspirar 1mL de la fase superior (tolueno) y se mide la absorbancia en el espectrofotómetro a 520nm. Se usa para el calibrado el cero de prolina (tubo numero 1). Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 49 3.3.4. Análisis de contenido en iones Las mediciones se van a realizar tanto en los extractos del material vegetal como de las muestras de suelo. Se miden distintos tipos de iones y para cada uno de ellos se emplea una metodología. Sodio y Potasio: Fotometría de llama Calcio y Magnesio: Absorción atómica Cloruros: Valoración de Morh 3.3.4.1. Sodio y Potasio Material: Espectrofotómetro de llama (Flame photometer PFP 7 JENWAY) Vaso de precipitados de 100mL Agua destilada Extracto de las muestras de suelo Extracto del material vegetal Matraces de 25mL Pipeta de 5mL Patrones de sodio (1ppm, 5ppm, 10ppm, 20ppm, 25ppm, 100ppm) Procedimiento: Antes de comenzar a medir las muestras, hay que calibrar el fotómetro.Para ello se pone en marcha el fotómetro, o espectrofotómetro de llama, siguiendo minuciosamente las instrucciones del aparato y acoplando al fotómetro el filtro correspondiente al potasio, que debe tener una transmisión máxima a 589nm, o ajustando el monocromador del espectrofotómetro para realizar lecturas a 589nm. 1º Se introduce el capilar del fotómetro de llama en la cubeta que contiene agua destilada. 2º Se saca el capilar del fotómetro de llama del agua destilada y se introduce en el patrón de sodio de 100ppm. 3º Se ajusta el aparato para que la lectura de la escala corresponda a 150 4º Se saca el capilar de la solución patrón y se introduce en agua destilada. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 50 5º Se anota la lectura de la escala correspondiente al agua destilada. 6º Se vuelve a pasar por el aparato la solución de 100ppm de sodio y se observa si vuelve a marcar 150. En caso contrario se vuelve a ajustar. 7º Se pasa agua destilada y se observa si el aparato señala la misma lectura que al pasar agua destilada anteriormente. 8º Una vez calibrado se pasan las soluciones de 1, 5,10, 20 y 25ppm de sodio, en este orden, y se anotan los valores correspondientes de la escala. Una vez obtenida la recta de calibrado, pasamos a medir las muestras, anotando sus valores. En los casos en que los valores estaban fuera de la recta de calibrado las muestras se diluyen. Con los valores de las lecturas de los patrones se realiza una recta de calibrado obteniendo así la relación entre el valor de la lectura y la concentración de sodio en la muestra. Aplicando esta ecuación a las lecturas de las muestras se obtienen las concentraciones de las muestras. Una vez conocida la concentración en la muestra se ha tenido en cuenta si dicha muestra se ha diluido o no y según fuera la procedencia (suelo o material vegetal) se han realizado las siguientes operaciones: Para material vegetal: El valor esta en ppm (mg de sodio/L de extracto) Para material vegetal: El valor esta como ya hemos dicho e ppm, y las unidades en las que se trabajará es en mmoles sodio/mg material vegetal seco. Ponemos un ejemplo de cómo se realizaría el paso de unidades: Arthrocnemum macrostachyum individuo 1º parcela 3 primavera 2011 Lectura en fotómetro de llama: 300 Recta de calibrado: y(señal)= 1,5386x(concentración) + 20,382 Como en nuestro casi tenemos 20mL de extracto la cantidad de sodio que tenemos es de 3.63mg de sodio. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 51 Si tenemos en cuenta la masa molar del sodio (22,98977g/mol), la cantidad de sodio expresada en moles es de 0.158mmoles de sodio/ml de extracto. Por último, teniendo en cuenta la cantidad exacta pesada en la fase de extracción del extracto (Tabla 37) en este caso: 0.151g de material seco, podemos calcular la cantidad de sodio en la muestra analizada, en este caso de 1.05mmoles de sodio/mg de peso seco. Este es el procedimiento de cálculo efectuado en Excel para todos los análisis, en cada caso tomando su correspondiente recta de regresión, masa molar y la cantidad exacta pesada en la obtención del extracto. En cuanto al analítica del potasio se seguirá el mismo proceso cambiando la longitud de onda de a 589nm a 768nm. 3.3.4.2. Calcio y Magnesio Fotómetro de absorción atómica (Varian SpectrAA 220) Vaso de precipitados de 100mL Agua destilada Extracto de las muestras de suelo Extracto del material vegetal Patrones de Sodio (1ppm, 5ppm, 10ppm, 20ppm, 25ppm, 100ppm) Micropipetas de 5mL y 1mL Antes de comenzar a medir las muestras se calibra, el fotómetro de absorción atómica, siguiendo minuciosamente las instrucciones del aparato y seleccionando el elemento que se va a medir (en este caso el calcio). 1º Se introduce el capilar del fotómetro de llama en la cubeta que contiene agua destilada. 2º Se saca el capilar del fotómetro de llama del agua destilada y se introduce en el patrón de calcio de 10ppm y se anota el valor. 3º Se deja pasar el agua destilada unos segundos y se introduce el capilar en el siguiente patrón, 20ppm y de nuevo se anota el valor. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 52 4º Seguimos este procedimiento con los patrones restantes (25ppm). Con estos valores crearemos la recta de calibrado posteriormente. 5º Pasamos las muestras dejando absorber agua destilada para limpiar las impurezas entre una muestra y otra. En caso de que las muestras estén fuera de los valores de la recta de calibrado se deberán diluir. Con los valores de las lecturas de los patrones se realiza una recta de calibrado obteniendo así la relación entre el valor de la lectura y la concentración de sodio en la muestra. Aplicando esta ecuación a las lecturas de las muestras se obtienen las concentraciones de las muestras. Una vez conocida la concentración en la muestra se ha tenido en cuenta si dicha muestra se ha diluido o no y según fuera la procedencia (suelo o material vegetal) y para llegar a obtener el resultado en las unidades deseadas (mmoles del elemento /mg de planta seca o mg del elemento/L de extracto) se siguen las mismas operaciones que hemos visto anteriormente. En cuanto a la medición del magnesio los patrones que se han utilizado han sido los de 1, 5, 10 y 20ppm. En este caso y debido al gran número de disoluciones que se prepararón se diluyeron 5mL de muestra en 5 mL de agua destilada (para el suelo) o MiliQ (para las muestras de material vegetal), midiéndose estos 5mL con micropipetas para reducir el posible error. 3.3.4.3. Cloruros Material: Agua destilada Balanza analítica Bureta de 50mL Cuentagotas 3 Erlenmeyers de 250mL Guantes Matraz aforado de 250mL Pipeta de 1mL Vasos de precipitados de 100mL Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 53 Reactivos: Disolución 0,04M de AgNO3. Se prepararán 250mL de dicha disolución pesando en la balanza analítica 1,708g de AgNO3 sólido y disolviéndolo en agua en un matraz aforado de 250mL. Disolución de K2CrO4 al 5% Procedimiento: Se utilizarán guantes durante el procedimiento ya que el reactivo AgNO3 puede dejar manchas oscuras en la piel. 1º Vertemos la disolución de AgNO3 en la bureta y enrasamos a 0mL. 2º Tomamos una cantidad de la muestra y la vertemos en el Erlenmeyer. Esta cantidad varía entre una muestra y otra ya que se pretende minimizar la cantidad de reactivo de AgNO3 empleado. Las cantidades varían entre 2mL de extracto y 1mL de extracto diluido 1:30, es decir 0.033mL de extracto. Se utilizaron los valores del contenido en sodio para estimar la cantidad a añadir de extracto. 3º Añadimos dos gotas de K2CrO4 al 5% al erlenmeyer y 2 o 3mL de agua destilada para aumentar el volumen y facilitar la mezcla cuando caigan las gotas del AgNO3. 4º Dejamos caer AgNO3 poco a poco hasta observar el cambio de tonalidad del amarillo (debido al K2CrO4 ) al rojo (debido a la formación del Ag2CrO4) Esto nos indicará que ya se ha consumido todos los cloruros ya que las reacciones que se dan son las siguientes: Cl- + Ag+AgCl(s) Precipitado blanco Cuando se agoten los cloruros se da la siguiente reacción y de ahí el cambio de coloración: CrO42- + 2Ag+  Ag2CrO4 (s) Precipitado rojo 5º Anotamos la cantidad de AgNO3 empleado hasta el cambio de color. En ese punto la cantidad de AgNO3 en moles es la misma que al de cloruros en la muestra. Por tanto para los cálculos realizaremos esta operación: Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 54 De esta forma obtenemos los mg/L en el extracto y siguiendo los pasos que ya hemos visto obtendremos los resultados en las unidades deseadas. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 55 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. RESULTADO Y DISCURSIÓN Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 56 4.1. Tratamientos estadístico Tras realizar todos los cálculos para obtener las concentraciones de cada sustancia analizada tanto en las muestras vegetales como en las muestras de suelo, se analizan estadísticamente mediante programa Stargraphics Centurion (XVI.I). Con el análisis estadístico pretendemos saber si las diferencias en los valores observados de las distintas parcelas se deben a la aleatoriedad o si realmente estamos observando variaciones estadísticamente significativas, es decir, que las muestras son diferentes. Es tan importante saber si las diferencias observadas son significativas tanto como las agrupaciones que se puedan hacer. Con este fin realizaremos dos pruebas estadísticas, la primero de ellas un análisis de varianza (ANOVA de un factor) y la segunda, la prueba post-hoc de múltiples rangos de Tukey HSD. Como hemos hecho en varias ocasiones, dividiremos este apartado en dos, un apartado para el análisis estadístico de los resultados del suelo y otro para los resultados del material vegetal. Antes de empezar con los análisis presentaremos las hipótesis de trabajo en este punto: Para el suelo: Como suponemos que cada ion se va acumular de forma distinta en el suelo, nuestro objetivo en este punto es ver si hay diferencias entre las concentraciones de iones, pH y conductividad entre las parcelas y entre las estaciones. Es decir nos hacemos las siguientes preguntas: ¿Hay diferencias estadísticamente significativas entre parcelas en una misma estación? ¿Hay diferencies estadísticamente significativas entre estaciones para una parcelas? Para responder a estas preguntas se realizan dos baterías de pruebas estadísticas, para la primera cuestión compararemos las 4 parcelas entre sí en cada estación, es decir, parcelas 1, 2, 3 y 4 en primavera; parcelas 1, 2, 3 y 4 en verano y parcelas 1, 2, 3 y 4 en otoño. s. De esta forma podremos establecer si existan diferencias significativas entre las parcelas. Para la segunda cuestión compararemos los valores de cada parcelas en las distintas estaciones, es decir, primavera, verano y otoño de la parcela 1; verano y otoño de la parcela 2; verano y otoño de la parcela 3 y verano y otoño de la parcela 4. De esa forma comprobaremos las variaciones estacionales de cada parcela y su significado estadístico Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 57 Para las muestra vegetales: Suponemos que cada planta se comportará de forma distinta a las demás, sin embargo y debido a que tenemos dos casos de especies de la misma familia (Juncus acutus-Juncus maritimus y Arthrocnemum macrostachyum - Sarcocornia fruticosa) las compararemos entre sí para ver si existen o no similitudes en cuanto a la acumulación de iones entre estas especies. Otro de nuestros objetivos es ver si hay variaciones en la acumulación de iones y osmolítos entre parcelas y entre estaciones. Es decir trataremos de responder a las siguientes preguntas: ¿Hay diferencias estadísticamente significativas entre individuos de la misma especie situados en distintas parcelas en una misma estación? ¿Hay diferencies estadísticamente significativas entre individuos de la misma especie situados en la misma parcela a lo largo del año? Seguiremos el mismo tipo de baterías de pruebas que hemos realizado en las muestras de suelo: una batería de pruebas de las cuatro parcelas en cada estación y otra de las tres estaciones en cada parcela. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 64 Resultados de los análisis del material vegetal: El análisis estadístico en el material vegetal se vuelve más complejo debido a dos motivos: Para los análisis de suelo teníamos para cada factor de estudio tres estaciones y cuatro parcelas, ahora tenemos para cada factor de estudio tres estaciones cuatro parcelas y cinco especies. De forma que el análisis se realizará por especies. Por otro lado tenemos diferente números de repeticiones o individuos: en los análisis químicos (Sodio, Potasio, Calcio, Magnesio y Cloro) tres repeticiones para cada especie mientras que en los bioquímicos (prolina y glicina betaina) un mayor número de repeticiones para cada especie y además ese número es variable. Por tanto los análisis estadísticos se realizarán de forma independiente. Tal como ya hemos visto antes, se presentan primero los resultados completos (Tabla 11) para posteriormente analizar los resultados del análisis estadístico. Tabla 11. Promedios y desviaciones estándar de iones de las muestras de plantas Especie Época Parcela Cl (mmo/g m.s.) Na (mmo/g m.s.) K (mmo/g m.s.) Ca (mmo/g m.s.) Mg (mmo/g m.s.) Arthrocnemum macrostachyum 1 2 1,614 0,209 0,840 0,038 0,362 0,004 0,063 0,026 0,035 0,005 1 3 3,224 0,297 1,045 0,041 0,295 0,008 0,033 0,008 0,049 0,003 1 4 2,149 0,199 1,054 0,007 0,510 0,011 0,025 0,011 0,053 0,004 2 2 4,888 0,113 1,506 0,007 0,386 0,009 0,122 0,002 0,061 0,009 2 3 6,538 0,145 1,482 0,098 0,284 0,010 0,304 0,004 0,061 0,003 2 4 3,720 0,089 1,439 0,460 0,443 0,017 0,284 0,005 0,049 0,001 3 2 3,656 0,197 1,229 0,210 0,390 0,003 0,063 0,005 0,059 0,002 3 3 4,780 0,189 1,294 0,011 0,570 0,312 0,260 0,003 0,091 0,002 3 4 4,304 0,053 1,254 0,049 0,441 0,004 0,131 0,004 0,069 0,003 Inula crithmoides 1 3 8,555 0,308 0,725 0,040 0,363 0,009 0,217 0,007 0,451 0,012 2 3 5,258 0,222 0,637 0,012 0,303 0,006 0,512 0,004 0,562 0,003 3 3 8,686 0,177 0,888 0,014 0,276 0,009 0,419 0,003 0,402 0,004 Juncus acutus 1 1 0,896 0,325 0,048 0,010 0,364 0,108 0,045 0,005 0,013 0,006 1 4 0,827 0,187 0,029 0,022 0,296 0,014 0,074 0,014 0,018 0,003 2 1 0,552 0,046 0,048 0,040 0,451 0,007 0,371 0,006 0,010 0,005 2 4 0,281 0,027 0,072 0,008 0,354 0,007 0,252 0,011 0,023 0,002 3 1 0,522 0,004 0,052 0,008 0,415 0,009 0,317 0,002 0,015 0,002 3 4 0,524 0,023 0,055 0,013 0,376 0,009 0,152 0,008 0,017 0,002 Juncus maritimus 1 1 0,531 0,035 0,003 0,005 0,331 0,038 0,032 0,007 0,030 0,006 1 2 0,872 0,111 0,398 0,544 0,288 0,007 0,063 0,009 0,022 0,009 1 3 0,808 0,005 0,060 0,004 0,315 0,015 0,055 0,013 0,008 0,007 2 1 0,813 0,033 0,394 0,318 0,561 0,276 0,182 0,004 0,027 0,005 2 2 0,807 0,005 0,447 0,587 0,367 0,003 0,147 0,001 0,028 0,003 2 3 0,570 0,065 0,127 0,011 0,374 0,009 0,231 0,004 0,015 0,003 3 1 0,543 0,006 0,002 0,003 0,372 0,009 0,019 0,002 0,026 0,003 3 2 0,554 0,078 0,091 0,007 0,303 0,005 0,085 0,004 0,015 0,003 3 3 0,551 0,020 0,145 0,085 0,356 0,008 0,289 0,004 0,015 0,002 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 66 Continuación de la tabla 27 Especie Época Parcela Cl (mmo/g m.s.) Na (mmo/g m.s.) K (mmo/g m.s.) Ca (mmo/g m.s.) Mg (mmo/g m.s.) Sarcocornia fruticosa 1 1 4,323 0,034 0,786 0,042 0,744 0,011 0,214 0,009 0,135 0,011 1 2 4,843 0,131 1,154 0,116 0,424 0,013 0,112 0,009 0,176 0,008 1 3 3,266 0,247 1,022 0,019 0,447 0,016 0,042 0,007 0,148 0,003 1 4 5,548 0,485 1,148 0,005 0,682 0,023 0,051 0,004 0,285 0,010 2 1 3,209 0,311 1,008 0,195 0,466 0,006 0,071 0,003 0,147 0,006 2 2 4,291 0,281 1,149 0,045 0,376 0,005 0,076 0,003 0,143 0,004 2 3 5,206 0,072 1,137 0,157 0,266 0,012 0,016 0,002 0,151 0,003 2 4 4,219 0,073 1,329 0,014 0,423 0,004 0,045 0,003 0,112 0,007 3 1 3,209 0,311 1,008 0,195 0,466 0,006 0,071 0,003 0,147 0,006 3 2 4,277 0,069 1,454 0,486 0,355 0,007 0,241 0,006 0,157 0,004 3 3 4,229 0,189 1,241 0,102 0,401 0,003 0,153 0,004 0,148 0,002 3 4 4,875 0,139 1,064 0,017 0,511 0,007 0,003 0,004 0,217 0,003 De los elementos estudiados el que se acumula en mayor medida en las especies es el Cloro, seguido del Sodio, Potasio, Calcio y Magnesio. Esto se corresponde con la misma relación en el suelo, es decir, que los elementos que en mayor concentración estan en la planta también lo están en el suelo. Analizando cada elemento por separado podemos observar las siguientes pautas: Sodio: o Las mayores acumulaciones se dan en Arthrocnemum macrostachyum (verano y otoño) seguido de Sarcocornia fruticosa (verano y otoño) en las parcelas 2, 3 y 4. La diferencia de sodio entre las parcelas 2-3 y 4 era mucho mayor en las muestras de suelo que la observada en las plantas. De forma que parece ser que las plantas que acumulan sal acumules siempre la misma cantidad de sodio, aunque haya diferentes cantidades de sodio en el suelo. o Los valores más bajos los encontramos en las dos especies del género Juncus. o Por último Inula crithmoides presenta valores intermedios. Potasio: No se observa ninguna tendencia clara. Calcio: o Hay una mayor acumulación de calcio en primavera. o IC acumula mucho más calcio que las otras especies, presentando un máximo en verano. Magnesio: o Hay una clarísima tendencia a acumular calcio en la especia Inula crithmoides. o Por el contrario las dos especies del genero Juncus acumulan muy pocas cantidades de Mg, sin embargo y como ya hemos visto anteriormente el Juncus maritimus acumulan cantidades de calcio significativamente superiores a Juncus acutus. Cloro: o Valores muy elevados en Inula crithmoides (sobre todo en primavera y otoño). o Valores bajos en ambas especies del genero Juncus. A continuación se presentan los resultados pertenecientes al análisis estadístico. Se recuerda que al igual que en el suelo se realizan dos bloques de análisis: el primero para observar las diferencias entre parcelas para cada estación y el segundo para observar las variaciones estacionales de cada parcela. A diferencia de los suelos en que estos análisis los realizábamos para cada uno de los elemento, ahora se han efectuado para cada una de las especies. Por esta razón tendremos dos tablas resumen para cada elemento (Sodio, Potasio, Calcio, Magnesio y Cloro, además de las dos para la prolina y la glicina betaina) en la cual observaremos las diferencias entre las especies, en una tabla para las diferencias estacionales y en otra para las diferencias entre parcelas. Por último realizaremos dos análisis estadísticos en el cual compararemos dos especies en cada uno. En el primero compararemos las especies Juncus acutus y Juncus maritimus y en el segundo Arthrocnemum macrostachyum y Sarcocornia fruticosa., yaa que son dos grupos de especies que se espera que su comportamiento sea similar ya que cada pareja de especies pertenecen a la misma familia. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 69 Análisis estadístico para el material vegetal, componentes bioquímicos: Empezaremos con los análisis estadísticos de los componentes bioquímicos, en concreto con la prolina. Veremos primero las diferencias en los niveles de prolina de cada especie en cada una de las parcelas para cada estación (Tabla 12). Hay que destacar que la especie Inula crithmoides no aparece en este análisis ya que dicha especie solo está presente en una parcela por lo tanto no se puede realizar este tipo de comparaciones. Posteriormente veremos los resultados del análisis estadístico para las variaciones estacionales de los niveles de prolina para cada especie (Tabla 13) Tabla 12. Resultado del análisis estadístico de la variación de niveles de prolina entre las parcelas para cada estación Primavera Verano Otoño Arthrocnemum macrostachyum Diferencia estadísticamente significativa: no no si Agrupaciones Parcela 1 - - - Parcela 2 a a a Parcela 3 a a a Parcela 4 a a b Juncus acutus Diferencia estadísticamente significativa: no no no Agrupaciones Parcela 1 a a a Parcela 2 - - - Parcela 3 - - - Parcela 4 a a a Juncus maritimus Diferencia estadísticamente significativa: si si si Agrupaciones Parcela 1 b b b Parcela 2 ab a a Parcela 3 a ab a Parcela 4 - - - Sarcocornia fruticosa Diferencia estadísticamente significativa: no si no Agrupaciones Parcela 1 a b a Parcela 2 a a a Parcela 3 a ab a Parcela 4 a a a Vemos que en general los cambios en los niveles de prolina entre parcelas no son significativos, excepto para la especie Juncus maritimus. Y de dos casos aislados, Arthrocnemum macrostachyum en otoño y Sarcocornia fruticosa en verano, cuando las variaciones de los niveles de prolina si son significativos. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 70 Tabla 13. Resultado del análisis estadístico de las variaciones estacionales en cada parcela de los niveles de prolina para cada especie. Parcela 1 2 3 4 Arthrocnemum macrostachyum Diferencia estadísticamente significativa: - si si si Agrupaciones Primavera - a b b Verano - c ab a Otoño - a a a Inula crithmoides Diferencia estadísticamente significativa: - - si - Agrupaciones Primavera - - b - Verano - - ab - Otoño - - a - Juncus acutus Diferencia estadísticamente significativa: no - - no Agrupaciones Primavera a - - a Verano a - - a Otoño a - - a Juncus martimus Diferencia estadísticamente significativa: si si no - Agrupaciones Primavera ab a a - Verano a a a - Otoño b a a - Sarcocornia fruticosa Diferencia estadísticamente significativa: si no no no Agrupaciones Primavera b a a a Verano b a a a Otoño a a a a En el caso de Arthrocnemum macrostachyum y de Inula crithmoides las variaciones estacionales de prolina son significativas, es decir los niveles de prolina de las distintas parcelas son diferentes según la estación. En el caso de Juncus acutus las variaciones estacionales no son significativas en ninguna de las parcelas, mientras que en Sarcocornia fruticosa y Juncus maritimus estas variaciones son significativas solo en alguna de las parcelas. A continuación pasamos al segundo componente bioquímico, la glicina betaina, al igual que antes primero veremos las variaciones entre parcelas para cada estación (Tabla 14) y posteriormente las variaciones estacionales (Tabla 15). Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 71 Tabla 14. Resultado del análisis estadístico de la variación de niveles de glicina betaina entre las parcelas para cada estación. Primavera Verano Otoño Arthrocnemum macrostachyum Diferencia estadísticamente significativa: no si si Agrupaciones Parcela 1 - - - Parcela 2 a a a Parcela 3 a a a Parcela 4 a b b Juncus acutus Diferencia estadísticamente significativa: no no no Agrupaciones Parcela 1 a a a Parcela 2 - - - Parcela 3 - - - Parcela 4 a a a Juncus maritimus Diferencia estadísticamente significativa: no si si Agrupaciones Parcela 1 a b b Parcela 2 a ab Parcela 3 a a a Parcela 4 a - - Sarcocornia fruticosa Diferencia estadísticamente significativa: si si si Agrupaciones Parcela 1 ab a a Parcela 2 a b a Parcela 3 ab b a Parcela 4 b b a Podemos ver como en el caso de Juncus acutus no existen diferencias significativas en los niveles de glicina betaina entre parcelas en ninguna de las estaciones, mientras que el caso de Sarcocornia fruticosa todas las diferencias observadas son significativas, es decir, que los niveles de glicina betaina si son distintos en cada una de las parcelas. En el caso de Arthrocnemum macrostachyum y de Juncus maritimus las variaciones en primavera no son significativas mientras que las variaciones en verano y otoño si lo son. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 72 Tabla 15. Resultado del análisis estadístico de las variaciones estacionales en cada parcela de los niveles de glicina betaina para cada especie. Parcela 1 2 3 4 Arthrocnemum macrostachyum Diferencia estadísticamente significativa: - si si si Agrupaciones Primavera - b b b Verano - a a a Otoño - a a a Inula crithmoide Diferencia estadísticamente significativa: - - no - Agrupaciones Primavera - - a - Verano - - a - Otoño - - a - Juncus acutus Diferencia estadísticamente significativa: si - - no Agrupaciones Primavera b - - a Verano ab - - a Otoño a - - a Juncus martimus Diferencia estadísticamente significativa: si - si - Agrupaciones Primavera ab - b - Verano b - a - Otoño a - a - Sarcocornia fruticosa Diferencia estadísticamente significativa: si si si si Agrupaciones Primavera b ab b b Verano a b a a Otoño ab a a a Se observa que en este caso la mayoría de las variaciones observadas son significativas, excepto en el caso de Inula crithmoides y de Juncus acutus en la parcela 4. El resto de variaciones entre parcelas para cada estación son significativas para todas las especies. Concluimos el análisis estadístico de los componentes bioquímicos habiendo observado que los cambios estacionales afectan mucho más el contenido de osmolitos en plantas que la variación entre parcelas. En la mayoría de las especies encontramos los máximos niveles de glicina betaina en primavera, tendencia que no se observa tan claramente en la prolina. En la Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 73 variación entre parcelas no se observa una tendencia tan clara en ninguno de los dos osmolitos. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 80 El Magnesio (Tablas 22 y 23) Tabla 22. Resultado del análisis estadístico de la variación de niveles de magnesio entre las parcelas para cada estación. Primavera Verano Otoño Arthrocnemum macrostachyum Diferencia estadísticamente significativa: si si si Agrupaciones Parcela 1 - - - Parcela 2 a b a Parcela 3 b b c Parcela 4 b a b Juncus acutus Diferencia estadísticamente significativa: no si no Agrupaciones Parcela 1 a a a Parcela 2 - - - Parcela 3 - - - Parcela 4 a b a Juncus maritimus Diferencia estadísticamente significativa: si si si Agrupaciones Parcela 1 b b b Parcela 2 ab b a Parcela 3 a a a Parcela 4 - - - Sarcocornia fruticosa Diferencia estadísticamente significativa: si si si Agrupaciones Parcela 1 a b c Parcela 2 b b b Parcela 3 a b a Parcela 4 c a d Se puede observar que en la mayoría de los casos las variaciones de los niveles de magnesio de unas especies entre las parcelas son significativas, excepto en la especie Juncus acutus. En general en las demás especies las variaciones son todas significativas Sin embargo no se observa una clara tendencia de valores máximos y mínimos. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 81 Tabla 23. Resultado del análisis estadístico de las variaciones estacionales en cada parcela de los niveles de magnesio para cada especie. Parcela 1 2 3 4 Arthrocnemum macrostachyum Diferencia estadísticamente significativa: - si si si Agrupaciones Primavera - a a a Verano - b b a Otoño - b c b Inula crithmoide Diferencia estadísticamente significativa: - - si - Agrupaciones Primavera - - b - Verano - - c - Otoño - - a - Juncus acutus Diferencia estadísticamente significativa: no - - si Agrupaciones Primavera a - - ab Verano a - - b Otoño a - - a Juncus martimus Diferencia estadísticamente significativa: no no no - Agrupaciones Primavera a a a - Verano a a a - Otoño a a a - Sarcocornia fruticosa Diferencia estadísticamente significativa: si si no si Agrupaciones Primavera a c a c Verano a a a a Otoño b b a b Se puede observar que en las especies Arthrocnemum macrostachyum y Inula crithmoides las variaciones de los niveles de potasio estacionales son significativas, sin embargo no se observa ninguna tendencia de valores máximos. Mientras que en los dos Juncus no se encuentran variaciones significativas (excepto Juncus acutus en la parcela 4). En cuanto a Sarcocornia fruticosa en las parcelas 1, 2 y 4 las diferencias estacionales son significativas y en todos los casos presenta un mínimo en verano. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 82 El Cloro (Tabla 24 y 25) Tabla 24. Resultado del análisis estadístico de la variación de niveles de cloro entre las parcelas para cada estación. Primavera Verano Otoño Arthrocnemum macrostachyum Diferencia estadísticamente significativa: si si si Agrupaciones Parcela 1 - - - Parcela 2 a b a Parcela 3 c c c Parcela 4 b a b Juncus acutus Diferencia estadísticamente significativa: no si no Agrupaciones Parcela 1 a b a Parcela 2 - - - Parcela 3 - - - Parcela 4 a a a Juncus maritimus Diferencia estadísticamente significativa: si si no Agrupaciones Parcela 1 b b a Parcela 2 a b a Parcela 3 a a a Parcela 4 - - - Sarcocornia fruticosa Diferencia estadísticamente significativa: si si si Agrupaciones Parcela 1 b a a Parcela 2 bc b b Parcela 3 a c b Parcela 4 c b c Se puede observar que en la mayoría de los casos las variaciones de los niveles de cloro de las especie entre las parcelas son significativas, excepto en algunos casos en la especie Juncus acutus y en Juncus maritimus. En general en las demás especies las variaciones son todas significativas. Sin embargo excepto en la especie Arthrocnemum macrostachyum que presenta un máximo claro en verano en todas las parcelas, no se observa una clara tendencia de valores máximos y mínimos. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 83 Tabla 25. Resultado del análisis estadístico de las variaciones estacionales en cada parcela de los niveles de cloro para cada especie. Parcela 1 2 3 4 Arthrocnemum macrostachyum Diferencia estadísticamente significativa: - si si si Agrupaciones Primavera - a a a Verano - c c b Otoño - b b c Inula crithmoides Diferencia estadísticamente significativa: - - si - Agrupaciones Primavera - - b - Verano - - a - Otoño - - b - Juncus acutus Diferencia estadísticamente significativa: no - - si Agrupaciones Primavera a - - b Verano a - - a Otoño a - - a Juncus martimus Diferencia estadísticamente significativa: si si si - Agrupaciones Primavera a b a - Verano b b a - Otoño a a b - Sarcocornia fruticosa Diferencia estadísticamente significativa: si si si si Agrupaciones Primavera c b a b Verano a a c a Otoño b a b ab En todos los casos (excepto Juncus acutus en la parcela 1) todas las variaciones estacionales observadas son significativas. Sin embargo en ninguna de las especies se detecta una clara tendencia de máximos y mínimos. Concluimos este apartado resumiendo que cada uno de los iones se comporta de forma distinta, aunque en general los resultados más significativos se dan en el caso del análisis estacional (72% de los resultados de las ANOVA significativos, frente al 68% en los estudios por parcelas). No se puede encontrar ninguna tendencia clara en muchos casos que muestre que en todas las especies se produce un máximo de acumulación de iones en una de las estaciones o en una parcela en concreto. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 84 Análisis estadístico para el material vegetal, comparacion entre Juncus acutus - Juncus maritimus y Arthrocnemum macrostachyum - Sarcocornia fruticosa Al tratarse de dos especies del mismo género y sabiendo previamente que Juncus maritimus tolera mejor la salinidad que Juncus acutus comprobamos si los resultados concuerdan con la ecología de las dos especies. Como se ha visto antes los resultados más significativos se han registrado en relación a la variación estacional. Como las dos especies solo coinciden en la parcela 1, se efectúa un análisis comparativo de las variaciones del contenido iónico en dicha parcela. Tabla 26. Análisis comparativo de acumulación de iones entre las dos especies de Juncus en la parcela 1. Diferencia estadisticamente significativa: Agrupaciones Juncus acutus Juncus maritimus Primavera Cl no a a Na si b a K no a a Ca no a a Mg si a b Verano Cl si a b Na no a a K no a a Ca si b a Mg si a b Otoño Cl si a b Na si b a K si b a Ca si b a Mg si a b Se observa que para toas las estaciones hay una mayor acumulación de magnesio en la especie Juncus maritimus. Por otra parte, la acumulación de sodio es mayor en Juncus acutus (excepto en verano donde la diferencia no es significativa). Sin embargo aparte de esto no se ve una tendencia clara que indique que una de las dos especies acumule mayores cantidades de iones. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 85 A continuación vemos los resultados de ese mismo análisis realizado para las especies Arthrocnemum macrostachyum y Sarcocornia fruticosa. En este caso ambas especies coinciden en las parcelas 2, 3 y 4, por tanto realizamos la comparación estacional para cada una de las parcelas y cada uno de los iones. Tabla 27. Análisis comparativo de acumulación de iones entre las especies Arthrocnemum macrostachyum y Sarcocornia fruticosa en las parcelas 2, 3 y 4. Dif. Estad. Sign.: Parcela 2 Dif. Estad. Sign.: Parcela 3 Dif. Estad. Sign.: Parcela 4 Arthrocnemum macrostachyum Sarcocornia fruticosa Arthrocnemum macrostachyum Sarcocornia fruticosa Arthrocnemum macrostachyum Sarcocornia fruticosa Primavera Cl si a b no a a si a b Na si a b no a a si a b K si a b si a b si a b Ca si a b no a a si a b Mg si a b si a b si a b Verano Cl si b a si b a si a b Na si b a si b a no a a K no a a no a a no a a Ca si b a si b a si b a Mg si a b si a b si a b Otoño Cl si a b si b a si a b Na no a a no a a si b a K si b a no a a si a b Ca si a b si b a si b a Mg si a b si a b si a b Comparando ambas especies podemos observar que hay una tendencia idéntica en las parcelas 2 y 3 en verano donde Arthrocnemum macrostachyum acumula mayores cantidades de sodio, cloro y calcio que Sarcocornia fruticosa. Por otro lado en todas las parcelas y todas las estaciones Sarcocornia fruticosa acumula mayores cantidades de magnesio en comparación con Arthrocnemum macrostachyum. Como tendencia general en todas las estaciones Sarcocornia fruticosa acumula mayores cantidades de iones en comparación con Arthrocnemum macrostachyum. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 86 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. CONCLUSIONES Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 87 Tras el análisis de los resultados, hemos llegado a las siguientes conclusiones: Retomando los resultados del análisis estadístico del suelo, vemos que las diferencias estacionales son mínimas comparadas con las diferencias entre parcelas. Si analizamos estas últimas vemos que claramente tenemos dos tipos de parcelas: las parcelas 1 y 4 presentan concentraciones de sales menores a las 2 y 3. Esto se ve reflejado también en la conductividad, muchísimo mayor en las parcelas 2 y 3 que en las parcelas 1 y 4. Por tanto, podemos decir que uno de los objetivos que era caracterizar las diferencias entre las parcelas se ha cumplido, pues hemos visto diferencias espaciales muy claras entre los dos grupos de parcelas, relacionadas con su localización en el saladar. La parcelas más salinas son las que se ubican en la zona centrales del saldar, más deprimida y por esto más salina. Las concentraciones de iones en las plantas no incrementan al aumentar las concentraciones de sales en el suelo, al menos no dentro de las variaciones de concentraciones registrados en este estudio. Por tanto, no se ha encontrado una correlación entre las variaciones de iones en el suelo y las concentraciones de sales en el material vegetal. Esto nos lleva a pensar que más bien cada una de las plantas tiene unos valores de sales que acumula en condiciones de salinidad y por mucho que aumente la concentración de sales en el suelo la planta no continuará absorbiendo sales., incluso en el caso de las especies típicamente acumuladoras En cuanto a los niveles de prolina no se ha visto un patrón claro de acumulación. Esto recalca lo que ya se ha visto en otros estudios, que el papel de la prolina es muy complejo y puede estar relacionado con otros factores ambientales. Por tanto diferentes condiciones climáticas, especialmente relacionadas con el estrés hídrico (aquí no analizado) pueden afectar a los niveles de prolina dando resultados no esperados. De forma que en este estudio no se ha podido observar una tendencia clara de acumulación de prolina, por lo que consideramos que el papel de este osmolito sigue siendo complejo y difícil de explicar. Por último en los niveles de glicina betaina las variaciones estacionales son mucho más importantes que las variaciones entre parcelas. Se observan los máximos niveles de glicina betaina en primavera. Curiosamente, esa no es la época en la que mayor es el estrés salino, sino que es en verano cuando menor es el potencial osmótico. Se esperaba que fuese en esa época cuando fuesen mayores las concentraciones de osmolitos. El que las mayores acumulaciones sean en primavera nos lleva a pensar que es en esa época en la que mayor cantidad de agua necesita la planta, ya que en esos meses debe realizar la floración y fructificación y para eso necesita grandes aportaciones de agua. Mientras que en verano Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 88 puede quedar aletargada necesitando menor cantidad de agua y por tanto no requiere valores tan elevados de osmolitos. Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 89 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. BIBLIOGRAFÍA Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 96 Tabla 31. Peso exacto y agua añadida para la obtención de los extractos de pasta saturada: Fecha Parcela Muestra Peso (g) Agua añadida (mL) Primavera 2011 1 1 300,18 150 Primavera 2011 1 2 399,98 150 Primavera 2011 1 3 400,4 150 Primavera 2011 2 1 400 165 Primavera 2011 2 2 300,09 150 Primavera 2011 2 3 400,08 165 Primavera 2011 3 1 300,19 140 Primavera 2011 3 2 300,06 125 Primavera 2011 3 3 400,05 190 Primavera 2011 4 1 399,98 150 Primavera 2011 4 2 400,02 140 Primavera 2011 4 3 400,06 140 Verano 2011 1 1 299,97 175 Verano 2011 1 2 300,22 150 Verano 2011 1 3 400,03 175 Verano 2011 2 1 250,13 120 Verano 2011 2 2 400 180 Verano 2011 2 3 400,16 170 Verano 2011 3 1 400,06 170 Verano 2011 3 2 400,04 185 Verano 2011 3 3 300,3 170 Verano 2011 4 1 400,15 150 Verano 2011 4 2 300 125 Verano 2011 4 3 400,03 150 Otoño 2011 1 1 350,01 170 Otoño 2011 1 2 300,03 160 Otoño 2011 1 3 299,99 135 Otoño 2011 2 1 299,95 120 Otoño 2011 2 2 299,99 150 Otoño 2011 2 3 399,98 170 Otoño 2011 3 1 300,01 140 Otoño 2011 3 2 299,91 125 Otoño 2011 3 3 299,99 135 Otoño 2011 4 1 400,06 150 Otoño 2011 4 2 300,15 110 Otoño 2011 4 3 300,03 100 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 97 Tabla 32. Resultados completos de las muestras de suelo Época Parcela Na (mg/L) K (mg/L) Ca (mg/L) Cl (mg/L) ph Cond. (mS/cm) 1 1 79,69 26,4 3,82 70,906 7,84 1,66 1 1 64,75 19 0,73 70,906 8,07 1,11 1 1 86,19 18,19 1,02 141,812 8,04 1,59 1 2 7988,07 121,9 28,55 56724,8 7,3 156,1 1 2 7906,83 111,59 26,47 60270,1 7,01 152,4 1 2 7679,35 123,83 32,6 67360,7 6,77 165 1 3 1007,16 97,74 21,3 12763,08 7,71 35,4 1 3 598,35 67,47 13,08 8508,72 6,65 39,8 1 3 602,25 60,54 12,3 8508,72 7,49 37,2 1 4 265,58 33,97 31,53 1418,12 7,52 11,69 1 4 145,34 33,97 11,23 2836,24 7,64 5,31 1 4 144,04 23,02 7,58 567,248 7,74 3,35 2 1 119,99 27,21 2,38 212,718 8,19 3,24 2 1 96,59 40,25 1,52 141,812 8,17 2,67 2 1 79,04 35,9 2,18 141,812 7,86 2,22 2 2 1000,66 72,3 18,15 12763,08 7,26 109,9 2 2 961,67 95,33 20,8 17017,44 7,41 118,8 2 2 1047,46 81,96 23,1 25526,16 7,26 105,9 2 3 880,42 84,54 16,07 12763,08 7,53 80,04 2 3 905,12 97,1 16,85 12763,08 7,42 85,1 2 3 1001,31 111,43 18,6 12763,08 7,41 101,4 2 4 317,57 46,69 90,6 12479,456 7,33 27,9 2 4 208,38 41,38 30,47 2268,992 7,85 12,42 2 4 543,1 62,8 127,53 13046,704 7,13 62,2 3 1 64,75 23,34 3,62 141,812 7,94 1,78 3 1 45,9 24,47 3,37 141,812 8,1 1,44 3 1 60,2 24,15 1,77 212,718 7,8 1,53 3 2 1079,95 82,44 17,3 12763,08 7,2 98,7 3 2 1180,7 92,91 21,07 21271,8 7,16 118 3 2 1072,16 82,93 19,6 17017,44 7,13 106,6 3 3 7744,35 122,54 21,75 53179,5 7,18 137,1 3 3 1254,14 122,38 20,48 12763,08 7,21 121,1 3 3 6883,17 123,83 17,98 46088,9 7,35 124,1 3 4 263,63 33,81 39,98 2836,24 7,51 14,86 3 4 175,24 37,03 14,72 1134,496 7,66 8,48 3 4 508,01 55,55 97,23 10777,712 7,38 46,1 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 98 Tabla 33. Resultado de las mediciones de glicina betaina y prolina para la especie Arthrocnemum macrostachyum (1) Época Parcela Especie Prolina (µmol/g m.s.) Época Parcela Especie Glicina betaina (µmol/g m.s.) 1 2 1 2,102 1 2 1 558,556 1 2 1 3,284 1 2 1 732,988 1 2 1 1,078 1 2 1 562,267 1 2 1 1,238 1 2 1 671,133 1 2 1 0,811 1 2 1 505,360 1 3 1 0,719 1 3 1 442,774 1 3 1 1,630 1 3 1 658,929 1 3 1 1,357 1 3 1 668,567 1 3 1 0,520 1 3 1 588,713 1 3 1 0,896 1 4 1 532,265 1 4 1 1,888 1 4 1 473,063 1 4 1 1,255 1 4 1 832,404 1 4 1 1,849 1 4 1 693,349 1 4 1 0,713 1 4 1 811,752 1 4 1 1,464 2 2 1 145,051 2 2 1 0,288 2 2 1 149,195 2 2 1 0,216 2 2 1 196,847 2 2 1 0,772 2 2 1 169,913 2 2 1 0,510 2 3 1 208,370 2 3 1 0,682 2 3 1 374,598 2 3 1 1,418 2 3 1 131,995 2 3 1 0,852 2 3 1 145,473 2 3 1 0,471 2 3 1 91,561 2 3 1 0,607 2 3 1 154,458 2 4 1 0,831 2 4 1 411,908 2 4 1 0,717 2 4 1 305,207 2 4 1 0,564 2 4 1 305,207 2 4 1 0,430 2 4 1 283,867 2 4 1 1,203 2 4 1 386,300 3 2 1 0,326 3 2 1 202,534 3 2 1 0,529 3 2 1 132,133 3 2 1 0,445 3 2 1 66,133 3 2 1 0,397 3 2 1 211,334 3 2 1 0,250 3 2 1 206,934 3 2 1 0,225 3 2 1 176,133 3 3 1 0,263 3 3 1 98,813 3 3 1 0,406 3 3 1 186,460 3 3 1 0,256 3 3 1 140,731 3 3 1 0,316 3 3 1 125,488 3 3 1 0,330 3 3 1 144,541 3 4 1 0,371 3 4 1 277,918 3 4 1 0,559 3 4 1 144,541 3 4 1 1,340 3 4 1 319,836 3 4 1 0,566 3 4 1 201,703 3 4 1 0,766 3 4 1 262,675 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 99 Tabla 34. Resultado de las mediciones de glicina betaina y prolina para la especie Inula crithmoides (2) y Juncus acutus(3) Época Parcela Especie Prolina (µmol/g m.s.) Época Parcela Especie Glicina betaina (µmol/g m.s.) 1 3 2 2,238 1 3 2 123,635 1 3 2 2,170 1 3 2 185,591 1 3 2 1,488 1 3 2 96,100 2 3 2 1,128 2 3 2 86,601 2 3 2 0,889 2 3 2 86,601 2 3 2 1,520 2 3 2 84,804 3 3 2 0,316 3 3 2 96,867 3 3 2 0,324 3 3 2 143,067 3 3 2 1,064 3 3 2 147,467 1 1 3 0,652 1 1 3 16,979 1 1 3 0,957 1 1 3 4,361 1 1 3 1,902 1 1 3 15,433 1 1 3 3,528 1 1 3 15,247 1 1 3 0,850 1 1 3 16,423 1 1 3 1,572 1 4 3 13,534 1 4 3 0,506 1 4 3 8,302 1 4 3 1,646 1 4 3 8,784 1 4 3 2,135 1 4 3 8,784 1 4 3 1,318 2 1 3 7,467 1 4 3 1,713 2 1 3 9,124 1 4 3 1,662 2 1 3 5,809 1 4 3 1,250 2 1 3 14,097 2 1 3 0,596 2 4 3 2,275 2 1 3 0,834 2 4 3 3,352 2 1 3 0,820 2 4 3 7,082 2 1 3 1,128 2 4 3 7,496 2 4 3 0,893 2 4 3 10,397 2 4 3 0,953 3 1 3 8,238 2 4 3 1,270 3 1 3 9,710 2 4 3 1,099 3 1 3 4,191 2 4 3 1,148 3 1 3 5,295 3 1 3 0,499 3 1 3 5,663 3 1 3 0,521 3 4 3 3,733 3 1 3 0,542 3 4 3 10,778 3 1 3 0,580 3 4 3 11,192 3 1 3 0,688 3 4 3 16,579 3 4 3 0,462 3 4 3 0,591 3 4 3 1,914 3 4 3 0,825 3 4 3 0,690 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 100 Tabla 35. Resultado de las mediciones de glicina betaina y prolina para la especie Juncus maritimus (4) Época Parcela Especie Prolina (µmol/g m.s.) Época Parcela Especie Glicina betaina (µmol/g m.s.) 1 1 4 2,959 1 1 4 11,969 1 1 4 2,924 1 1 4 15,928 1 1 4 3,573 1 1 4 12,959 1 1 4 2,072 1 1 4 7,701 1 1 4 1,025 1 1 4 16,732 1 2 4 2,724 1 2 4 9,309 1 2 4 0,368 1 2 4 20,938 1 2 4 1,067 1 2 4 7,454 1 2 4 2,178 1 2 4 9,557 1 2 4 0,338 1 2 4 2,814 1 3 4 0,226 1 3 4 14,911 1 3 4 1,092 1 3 4 9,748 1 3 4 1,882 1 3 4 18,628 1 3 4 0,652 1 3 4 12,570 1 3 4 0,504 1 3 4 14,153 2 1 4 0,989 1 4 4 13,534 2 1 4 0,930 1 4 4 8,302 2 1 4 1,806 1 4 4 8,784 2 1 4 1,473 1 4 4 8,784 2 1 4 2,176 1 4 4 13,947 2 2 4 0,295 2 1 4 12,712 2 2 4 0,615 2 1 4 21,171 2 2 4 0,425 2 1 4 21,940 2 2 4 0,385 2 1 4 11,174 2 2 4 0,287 2 1 4 15,019 2 3 4 1,412 2 3 4 5,048 2 3 4 0,956 2 3 4 6,342 2 3 4 0,394 2 3 4 7,204 2 3 4 0,598 3 1 4 6,766 2 3 4 1,185 3 1 4 5,295 3 1 4 5,098 3 1 4 8,238 3 1 4 4,057 3 1 4 12,285 3 1 4 2,695 3 2 4 6,398 3 1 4 2,710 3 2 4 7,870 3 1 4 4,196 3 2 4 5,663 3 2 4 0,388 3 2 4 4,927 3 2 4 0,262 3 3 4 4,853 3 2 4 0,293 3 3 4 5,293 3 2 4 0,352 3 3 4 3,049 3 2 4 0,293 3 3 4 4,413 3 3 4 0,289 3 3 4 4,853 3 3 4 0,311 3 3 4 0,318 3 3 4 0,277 3 3 4 0,323 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 101 Tabla 36. Resultado de las mediciones de glicina betaina y prolina para la especie Sarcocornia fruticosa (5) Época Parcela Especie Prolina (µmol/g m.s.) Época Parcela Especie Glicina betaina (µmol/g m.s.) 1 1 5 0,876 1 1 5 319,793 1 1 5 1,208 1 1 5 751,545 1 1 5 0,850 1 1 5 297,525 1 2 5 0,564 1 1 5 283,917 1 2 5 0,634 1 2 5 382,886 1 2 5 0,871 1 2 5 270,309 1 2 5 0,523 1 2 5 220,824 1 3 5 1,335 1 3 5 390,456 1 3 5 0,539 1 3 5 416,615 1 3 5 0,642 1 3 5 540,526 1 3 5 0,949 1 3 5 434,513 1 3 5 0,567 1 3 5 376,688 1 4 5 1,068 1 4 5 604,121 1 4 5 1,131 1 4 5 630,311 1 4 5 0,479 1 4 5 636,131 1 4 5 0,501 1 4 5 614,791 1 4 5 0,565 1 4 5 679,781 2 1 5 0,777 2 1 5 33,890 2 1 5 1,275 2 1 5 39,494 2 1 5 0,811 2 1 5 42,081 2 2 5 0,637 2 2 5 244,278 2 2 5 0,820 2 2 5 251,968 2 2 5 0,461 2 2 5 367,320 2 2 5 0,427 2 2 5 313,489 2 2 5 0,695 2 2 5 382,700 2 3 5 0,802 2 3 5 221,848 2 3 5 0,715 2 3 5 352,135 2 3 5 0,652 2 3 5 158,951 2 3 5 0,675 2 3 5 235,326 2 3 5 0,651 2 3 5 158,951 2 4 5 0,610 2 4 5 356,423 2 4 5 0,683 2 4 5 296,671 2 4 5 0,591 2 4 5 407,640 2 4 5 0,565 2 4 5 411,908 2 4 5 0,583 2 4 5 253,991 3 1 5 0,344 3 1 5 180,872 3 1 5 0,276 3 1 5 161,647 3 1 5 0,579 3 1 5 142,422 3 1 5 0,289 3 1 5 134,731 3 2 5 0,746 3 2 5 101,333 3 2 5 0,501 3 2 5 154,133 3 2 5 0,406 3 2 5 114,533 3 2 5 0,457 3 2 5 224,534 3 2 5 0,418 3 2 5 136,533 3 2 5 0,544 3 2 5 303,734 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 102 Continuación tabla 36. Época Parcela Especie Prolina (µmol/g m.s.) Época Parcela Especie Glicina betaina (µmol/g m.s.) 3 3 5 0,707 3 2 5 206,934 3 3 5 0,584 3 3 5 114,056 3 3 5 4,726 3 3 5 209,324 3 3 5 0,541 3 3 5 159,784 3 3 5 0,412 3 3 5 220,756 3 4 5 0,353 3 3 5 140,731 3 4 5 0,464 3 3 5 182,649 3 4 5 0,400 3 4 5 178,838 3 4 5 0,406 3 4 5 228,378 3 4 5 0,681 3 4 5 163,595 3 4 5 258,864 3 4 5 384,618 3 4 5 262,675 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 103 Tabla 37. Resultados de los análisis de contenido iónico en las especies Arthrocnemum macrostachyum (1) y Inula crithmoides (2) Época Parcela Especie Cl (mmol/g m.s.) Na (mmol/g m.s.) K (mmol/g m.s.) Ca (mmol/g m.s.) Mg (mmol/g m.s.) 1 2 1 1,830 0,797 0,365 0,066 0,038 1 2 1 1,600 0,869 0,358 0,035 0,037 1 2 1 1,412 0,854 0,363 0,087 0,029 1 3 1 3,179 1,047 0,303 0,033 0,050 1 3 1 3,541 1,003 0,287 0,041 0,051 1 3 1 2,953 1,084 0,296 0,025 0,045 1 4 1 2,133 1,046 0,498 0,029 0,057 1 4 1 2,356 1,060 0,512 0,012 0,049 1 4 1 1,958 1,055 0,520 0,033 0,054 2 2 1 4,865 1,508 0,385 0,120 0,063 2 2 1 4,789 1,498 0,378 0,124 0,069 2 2 1 5,011 1,512 0,395 0,121 0,052 2 3 1 6,486 1,523 0,283 0,300 0,063 2 3 1 6,426 1,554 0,294 0,305 0,058 2 3 1 6,702 1,370 0,275 0,307 0,062 2 4 1 3,733 1,182 0,456 0,288 0,050 2 4 1 3,625 1,164 0,423 0,279 0,047 2 4 1 3,802 1,970 0,449 0,284 0,049 3 2 1 3,784 1,263 0,387 0,064 0,057 3 2 1 3,756 1,005 0,390 0,058 0,061 3 2 1 3,429 1,420 0,392 0,068 0,058 3 3 1 4,912 1,290 0,388 0,259 0,089 3 3 1 4,865 1,307 0,392 0,264 0,094 3 3 1 4,563 1,286 0,930 0,258 0,091 3 4 1 4,295 1,224 0,441 0,130 0,066 3 4 1 4,361 1,227 0,445 0,127 0,072 3 4 1 4,256 1,310 0,437 0,135 0,069 1 3 2 8,591 0,739 0,363 0,211 0,438 1 3 2 8,230 0,680 0,354 0,225 0,463 1 3 2 8,843 0,756 0,371 0,214 0,452 2 3 2 5,405 0,648 0,296 0,510 0,563 2 3 2 5,003 0,640 0,304 0,517 0,558 2 3 2 5,365 0,624 0,309 0,510 0,564 3 3 2 8,649 0,885 0,276 0,416 0,401 3 3 2 8,879 0,875 0,284 0,419 0,406 3 3 2 8,531 0,903 0,267 0,421 0,398 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 104 Tabla 38. Resultados de los análisis de contenido iónico en las especies Juncus acutus (3) y Juncus maritimus (4) Época Parcela Especie Cl (mmol/g m.s.) Na (mmol/g m.s.) K (mmol/g m.s.) Ca (mmol/g m.s.) Mg (mmol/g m.s.) 1 1 3 0,811 0,044 0,359 0,043 0,012 1 1 3 1,255 0,059 0,475 0,050 0,008 1 1 3 0,623 0,041 0,259 0,041 0,019 1 4 3 0,805 0,029 0,310 0,077 0,017 1 4 3 0,652 0,007 0,281 0,059 0,021 1 4 3 1,025 0,050 0,296 0,087 0,016 2 1 3 0,541 0,044 0,452 0,367 0,014 2 1 3 0,602 0,090 0,457 0,378 0,004 2 1 3 0,512 0,010 0,443 0,369 0,012 2 4 3 0,263 0,073 0,353 0,252 0,022 2 4 3 0,312 0,064 0,348 0,263 0,025 2 4 3 0,268 0,080 0,362 0,241 0,022 3 1 3 0,526 0,051 0,415 0,317 0,016 3 1 3 0,523 0,060 0,406 0,319 0,017 3 1 3 0,518 0,045 0,424 0,316 0,013 3 4 3 0,533 0,055 0,378 0,155 0,016 3 4 3 0,541 0,067 0,384 0,158 0,017 3 4 3 0,498 0,042 0,367 0,143 0,019 1 1 4 0,565 0,000 0,343 0,031 0,030 1 1 4 0,496 0,009 0,362 0,025 0,024 1 1 4 0,533 0,000 0,289 0,039 0,035 1 2 4 0,811 0,098 0,282 0,054 0,028 1 2 4 1,000 0,070 0,296 0,072 0,025 1 2 4 0,805 1,026 0,286 0,064 0,012 1 3 4 0,805 0,055 0,324 0,066 0,016 1 3 4 0,806 0,060 0,298 0,041 0,005 1 3 4 0,814 0,064 0,324 0,058 0,002 2 1 4 0,805 0,052 0,397 0,182 0,027 2 1 4 0,785 0,680 0,406 0,186 0,031 2 1 4 0,850 0,450 0,879 0,179 0,022 2 2 4 0,805 0,139 0,370 0,149 0,029 2 2 4 0,803 0,079 0,364 0,146 0,031 2 2 4 0,812 1,124 0,367 0,147 0,025 2 3 4 0,645 0,128 0,371 0,231 0,017 2 3 4 0,537 0,115 0,384 0,235 0,012 2 3 4 0,528 0,137 0,367 0,228 0,015 3 1 4 0,541 0,002 0,370 0,019 0,026 3 1 4 0,539 0,000 0,381 0,017 0,024 3 1 4 0,550 0,005 0,364 0,021 0,029 3 2 4 0,533 0,093 0,303 0,089 0,017 3 2 4 0,640 0,084 0,298 0,081 0,015 3 2 4 0,489 0,097 0,307 0,086 0,012 3 3 4 0,571 0,116 0,357 0,289 0,016 3 3 4 0,532 0,241 0,364 0,293 0,016 3 3 4 0,549 0,078 0,348 0,285 0,012 Efectos de distintos niveles de salinidad en especies halófilas en un saladar del Sud de Alicante Lorena Parra 105 Tabla 39. Resultados de los análisis de contenido iónico en las especies Sarcocornia fruticosa (5) Época Parcela Especie Cl (mmol/g m.s.) Na (mmol/g m.s.) K (mmol/g m.s.) Ca (mmol/g m.s.) Mg (mmol/g m.s.) 1 1 5 4,324 0,793 0,734 0,212 0,137 1 1 5 4,356 0,823 0,756 0,224 0,124 1 1 5 4,289 0,741 0,741 0,207 0,145 1 2 5 4,962 1,179 0,423 0,112 0,175 1 2 5 4,703 1,256 0,438 0,103 0,169 1 2 5 4,865 1,028 0,412 0,121 0,184 1 3 5 3,243 1,042 0,445 0,041 0,145 1 3 5 3,031 1,003 0,432 0,035 0,152 1 3 5 3,524 1,021 0,464 0,049 0,148 1 4 5 5,695 1,152 0,687 0,053 0,288 1 4 5 5,006 1,143 0,657 0,046 0,294 1 4 5 5,943 1,149 0,702 0,054 0,274 2 1 5 3,221 0,993 0,471 0,074 0,148 2 1 5 2,892 0,820 0,459 0,068 0,140 2 1 5 3,514 1,210 0,468 0,071 0,152 2 2 5 4,267 1,103 0,371 0,074 0,144 2 2 5 4,023 1,152 0,376 0,079 0,147 2 2 5 4,584 1,193 0,382 0,075 0,139 2 3 5 5,263 1,208 0,267 0,018 0,148 2 3 5 5,230 1,245 0,254 0,014 0,154 2 3 5 5,125 0,957 0,278 0,015 0,152 2 4 5 4,267 1,318 0,424 0,048 0,113 2 4 5 4,135 1,324 0,426 0,043 0,119 2 4 5 4,256 1,345 0,418 0,045 0,105 3 1 5 3,810 1,056 0,412 0,245 0,183 3 1 5 3,905 1,235 0,416 0,253 0,186 3 1 5 3,798 0,845 0,409 0,024 0,179 3 2 5 4,213 1,197 0,356 0,240 0,157 3 2 5 4,350 1,150 0,362 0,247 0,161 3 2 5 4,267 2,014 0,348 0,236 0,154 3 3 5 4,295 1,224 0,397 0,156 0,145 3 3 5 4,015 1,350 0,403 0,148 0,150 3 3 5 4,376 1,148 0,402 0,155 0,148 3 4 5 4,865 1,072 0,513 0,000 0,219 3 4 5 4,741 1,076 0,504 0,007 0,213 3 4 5 5,019 1,045 0,517 0,002 0,218